Тест-система для определения 28 мутаций в гене CFTR методом гибридизации на ДНК-микрочипе in vitro "Муковисцидоз-28-Микрочип" по ТУ 21.20.23-261-98539446-2016 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 3 ---
Муковисцидоз-28-Микрочип В-05.2018-07
1.5. Популяционные аспекты применения: тест-система позволяет
единовременно детектировать 28 наиболее часто встречающихся на территории
Российской Федерации мутаций в гене CFTR (Таблица 1). Частота мутаций в гене
CFTR, анализируемых с помощью тест-системы «Муковисцидоз-28-Микрочип»,
может варьировать в разных популяциях.
Таблица 1
Мутации в гене CFTR^ детектируемые тест-системой
«Муковисцидоз-28-Микрочип»
№ Традиционное
название
Название no кДНК
последовательности Белковое название^ Положение
1 CFr7?dele2,3 c.54-5940_273
+10250del21kb p.Serl8ArgfsX16 Интрон 1-3
2 G85E c.254G>A p.Gly85GIu Экзон 3
3 394delTT c.262_263delTT p.Leu88ilefsX22 Экзон 3
4 Е92К c.274G>A p.Glu92Lys Экзон 4
5 L138ins c.412_413insACT p.Leul37_Leul38insIhr Экзон 4
6 621+1G>T c.489+lG>T отсутствует Интрон 4
7 1078delT c.948delT p.Phe316LeufsX12 Экзон 7
8 R334W c.lOOOOT p.Arg334Trp Экзон 7
9 R347P c.l040G>C p.Arg347Pro Экзон 7
10 R347H c.l040G>A p.Arg347His Экзон 7
11 I507del c.l519_1521delATC p.IIe507del Экзон 10
12 F508del c.l521_1523delCTT p.Phe508del Экзон 10
13 1677delTA c.l545_1546delTA p.Tyr515X Экзон 10
14 1717-1G>A C.1585-1G>A отсутствует Экзон 11
15 G542X c.l624G>T p.Gly542X Экзон 11
16 G551D c.l652G>A p.Gly551Asp Экзон 11
17 R553X c.l657C>T p.Arg553X Экзон 11
18 2143delT c.2012delT p.Leu671X Экзон 13
19 2183AA>G c2051_2052delAAinsG p.Lys684SerfsX38 Экзон 13
20 2184insA c.2052_2053insA p.Gln685ThrfsX4 Экзон 13
21 2789+5G>A c.2657+5G>A отсутствует Интрон 14Ь
22 R1162X c.3484C>T p.Argll62X Экзон 19
23 S1196X c.3587C>G p.Serll96X Экзон 19
24 3732delA c.3600A>G p.Aspl201MetfsX10 Экзон 19
25 3821delT c.3691delT p.Serl231ProfsX4 Экзон 19
^ в соответствии с Базой мутаций в гене CFTR, поддерживаемой Центром Муковисцидоза, Торонто
www.genet.sickkids.on.ca
--- стр. 4 ---
№ Традиционное
название
Название по кДНК
последовательности Белковое название^ Положение
26 384^10кЬОТ с.3717+12191С>Т отсутствует Интрон 19
27 W1282X С.38460А р.Тгр1282Х Экзон 20
28 N1303K c.3909C>G p.Asnl303Lys Экзон 21
Демографические аспекты применения: тест-система может быть использована
при обследовании людей любого пола и возраста.
1.6. Показания к применению: уточнение результатов скрининга
новорожденных, обследование родственников, репродуктивных партнеров
больного и доноров половых клеток.
Противопоказания к применению: тест-система не имеет противопоказаний к
применению.
1.7. Тест-система рассчитана на проведение анализа 5 образцов ДНК.
2. ХАРАКТЕРИСТИКА ТЕСТ-СИСТЕМЫ
2.1, Принцип действия тест-системы
В тест-системе Муковисцидоз-28-Микрочип использован метод обратной
гибридизации на Микрочипе. Микрочип - альдегидное стекло, на поверхность
которого упорядоченно прикреплены мишени, комплементарные
последовательностям участков гена CFTR в состоянии дикого типа или с
мутациями. С анализируемой ДНК проводится мультиплексная ПЦР, которая
представляет собой многократно повторяющиеся циклы умножения целевых
областей ДНК в присутствии фермента полимеразы, дезоксинуклеозидтрифосфатов
(дНТФ), солевого Амплификационного буфера и праймеров, определяющих
границы умножаемых участков. В ходе двухэтапной ПЦР нарабатываются
флуоресцентно-меченные фрагменты гена CFTR, в которых могут находиться
исследуемые мутации. Далее проводится гибридизация полученных
флуоресцентно-меченных фрагментов (меченых зондов) с мишенями на Микрочипе
по принципу комплементарности (Рис. 1). Флуоресценция продуктов ПЦР
обеспечена флуорофором цианин-5 (Су5). Детекция флуоресценции проводится с
помощью сканера с каналом детекции флуоресцентного сигнала Су5.
--- стр. 5 ---
Меченый зонд
Мишень
Меченый дуплекс
Твёрдая фаза
Рис. 1. Принцип метода обратной гибридизации на Микрочипе
Анализ данных осуществляется путем сравнения средних значений
интенсивности флуоресценции топографически сходных мишеней в полях Дикого
типа и Мутаций. Топографически сходные мишени - мишени, относящиеся к
одному участку гена, одна из которых соответствует дикому типу, вторая - одной из
анализируемых мутаций. Мишени дикого типа и мутаций располагаются на
Микрочипе в поле Дикого типа или поле Мутаций, соответственно (Рис.2).
--- стр. 6 ---
Схематическое изображение микрочипа представлено на Рис. 2. Область анализа
представлена на Микрочипе в четырёх повторах (1, 2, 3 и 4). Каждая мишень на
Микрочипе нанесена в дублях по вертикали. Таким образом, для получения
достоверного результата каждая мишень на Микрочипе представлена в восьми
повторах. Поле А-Е (1-6) содержит мишени, соответствующие дикому типу гена по
исследуемым мутациям; поле F-J (1-6) соответствует мутантным аллелям;
контрольная полоса К (1-6) является контролем прохождения гибридизации.
Интерпретация результатов основана на сравнении среднего значения
интенсивностей сигналов топографически сходных мишеней в полях А-Е (1-6) -
поле Дикого типа, и F-J (1-6) - поле Мутаций. Например, А1 и F1, А2 и F2 и т.п.
ABCDEFGH I J
Й 'Ц i Ш
i 1
ь
й
Ь.
Qi 0
ь
й
О
ё п
а щ
о оQйо Щ
■ йО
й
дикий тип МУТАЦИИ
Рис. 2. Схематическое изображение области анализа Микрочипа
Сравнение значений интенсивности флуоресценции проводится путем
определения коэффициента Ктио^ представляющего собой отношение средних
значений интенсивностей всех сигналов для топографически сходных мишеней в
поле Дикого типа и в поле Мутаций.
Алгоритм проведения анализа:
1. Амплификация целевых участков ДНК в ходе двухстадийной
полимеразной цепной реакции (ПЦР);
2. Гибридизация полученных продуктов ПЦР на микрочипе;
3. Сканирование флуоресценции микрочипа;
4. Анализ результатов.
--- стр. 7 ---
Компонент Тип фасовки Кол-во,
шт.
Объём в
пробирке/
флаконе
Условия
хранения
Амплификационный буфер Пробирка 1 740 мкл -30...-18°С
Taq-ДНК-полимераза (Taq) Пробирка 1 ПО мкл -30...-18 “С
Смесь праймеров для ПЦР1
А1 Пробирка 1 30 мкл -30...-18°С
Смесь праймеров для ПЦР1
А2 Пробирка 1 30 мкл -30...-18°С
Смесь праймеров для ПЦР1
АЗ Пробирка 1 30 мкл -30...-18°С
Смесь праймеров для ПЦР2
В1 Пробирка 1 30 мкл -30...-18 “С
Смесь праймеров для ПЦР2
В2 Пробирка 1 30 мкл -30...-18°С
Смесь праймеров для ПЦР2
ВЗ Пробирка 1 30 мкл -30...-18°С
Контрольный образец (К) Пробирка 1 18 мкл -30...-18®С
Деионизованная вода Флакон 1 10 мл -30...-18°С
Гибридизационный буфер* Флакон 1 10 мл +18...+25 °С
Микрочип в
гибридизационной камере**
(ширина 25,0+0,4 мм;
длина 75+1,0 мм;
толщина 1,01+0,05 мм)
Г ерметичный
фольгированный пакет 5 - -30...-18'’С
* - после первого использования Гибридизационный буфер хранить при
комнатной температуре +18...+25 °С в течение всего срока годности.
** - набор укомплектован дополнительным поролоновым вкладышем с пятью
прорезями, который служит штативом, удерживающим гибридизационные камеры
в вертикальном положении.
В состав тест-системы входит Контрольный образец (К) - образец геномной
ДНК человека с концентрацией 1,0-5,0 нг/мкл, соответствующий генотипу дикого
типа по всем мутациям, определяемым тест-системой. При валидации тест-системы
и проверке аналитической специфичности в постановке анализа вместо
тестируемой ДНК используется Контрольный образец (К). Критерии прохождения
--- стр. 8 ---
постановки соответствуют критериям Положительного
гибридизации и Отрицательного контроля ПЦР и гибридизации (пункт 3.2).
В-05.2018-07
контроля ПЦР и
--- стр. 9 ---
3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
3.1. Аналитическая чувствительность
Минимальная допустимая концентрация ДНК в исследуемом образце - 0,5
нг/мкл.
3.2. Аналитическая специфичность
Положительный контроль ПЦР и гибридизации: при постановке ПЦР и
гибридизации с контрольным образом К все сигналы от всех мишеней в поле
Дикого типа значимые, для всех значимых сигналов в поле Мутаций Кгано>Ъ\ все
сигналы контрольной полосы в четырех областях анализа значимые. При
постановке ПЦР и гибридизации с контрольным образцом К сигналы в поле Дикого
типа свидетельствуют о наличии одноцепочечных фрагментов ДНК, полученных в
результате специфичного отжига праймеров на анализируемые участки гена CFTR
в ходе ПЦР1 и ПЦР2, и о комплементарности этих фрагментов мишеням на
Микрочипе, подтверждающейся специфической гибридизацией.
Отрицательный контроль ПЦР и гибридизации по мутациям: при постановке
ПЦР и гибридизации с контрольным образом К все сигналы от всех мишеней в
поле Дикого типа значимые, для всех значимых сигналов в поле Мутаций /С-аг/о>3;
все сигналы контрольной полосы в четырех областях анализа значимые. Мутации
не найдены. При постановке ПЦР и гибридизации с контрольным образцом К
ожидаемый генотип, соответствующий дикому типу, свидетельствует об
отсутствии ложноположительных результатов неспецифичного связывания между
мишенями, соответствующими мутациям, и фрагментами ДЬЖ, полученными в
ходе ПЦР 1 иПЦР2.
3.3. Диагностические характеристики
В ходе клинических испытаний было проведено исследование 180 образцов
ДНК, выделенных из клинического материала и 6 образцов ДНК с эквимолярным
внесением синтетического фрагмента ДНК с мутациями 621+1G>T и 3732delA.
Всего в процессе испытаний проведено 10416 определений из расчета 28 мутаций в
372 аллелях 186 образцов.
Показатели диагностических характеристик^, определенных с доверительной
вероятностью 95% соответствуют значениям, приведенным в Таблицах 3 и 4 .
^ Расчет диагностической чувствительности и специфичности произведен, согласно «Методическим рекомендациям
по порядку проведения экспертизы качества, эффективности и безопасности медицинских изделий для
государственной регистрации» и рекомендациям, данным в презентации заместителя генерального директора ФГБУ
«ЦМИКЭЭ» Росздравнадзора Антонова В.С. -«Вопросы статистической оценки результатов клинических испытаний
медицинских изделий для in vitro диагностики»
--- стр. 10 ---
Заключение
Количество
исследуемых
аллелей
при
проведении
клинических
испытаний
Количество
обнаруженных
мутантных
аллелей гена
CFTR
Количество
ложноположительных
результатов
определения
Диагностическая
чувствительность
Положительных по
искомым мутациям в
гене CFTR
210 210 0 98,5-100%
Таблица 4
Заключение
Количество
исследуемых
аллелей
при проведении
клинических
испытаний
Количество
ложноотрицательных
результатов
определения
Количество
обнаруженных
аллелей
«дикого типа»
гена CFTR
Диагностическая
чувствительность
Отрицательных
по искомым
мутациям в
гене CFTR
162 0 162 98,1-100%
4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ И РЕКОМЕНДАЦИИ
4.1. Потенциальный риск применения тест-системы - класс 2а (согласно
Приказу Министерства здравоохранения РФ №4н от 06.06.2012 г.).
4.2. При работе с набором следует соблюдать ГОСТ Р 52905-2007 «Лаборатории
медицинские. Требования безопасности».
4.3. При работе с потенциально опасными образцами биоматериала необходимо
руководствоваться МУ 1.3.2569-09 «Организация работы лабораторий,
использующих методы амплификации нуклеиновых кислот, при работе с
материалом, содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности».
4.4. Персонал, проводящий исследования с использованием данного набора
реагентов, должен владеть навыками постановки ПЦР и работы на
соответствующем оборудовании.
--- стр. 11 ---
4.5. Все работы должны выполняться только с использованием одноразовых
наконечников с аэрозольным барьером для полуавтоматических пипеток.
4.6. Во избежание контаминации ДНК необходимо пространственное разделение
этапов постановки анализа: пробоподготовки, пре- и постамплификационных
этапов, этапов объединения ПЦР-продуктов и гибридизации: отдельные
помещения, отдельные боксы, отдельные халаты, отдельные пипетки и другие
лабораторные материалы. При отсутствии возможности пространственного
разнесения, необходимо обрабатывать бокс УФ-излучением после постановки
каждого анализа.
4.7. Смеси праймеров для ПЦР2 (В1, В2 и ВЗ) и Гибридизационный буфер
чувствительны к действию света и озона, появляющегося в воздухе после
обработки УФ-излучением. Не допускается использование УФ-рециркулятора!
4.8. Все работы с Микрочипами должны проводиться в защищённом от пыли
помещении. Микрочип необходимо брать в перчатках и держать за край в области
этикетки. Нельзя касаться рабочей области Микрочипа, так как это может привести
к повреждению поверхности.
4.9. При работе с Микрочипами необходимо соблюдать меры предосторожности
при работе со стеклянными предметами во избежание ранения.
4.10. Все использованные одноразовые материалы, остатки образцов и реагентов
должны быть подвергнуты обработке дезинфицирующими средствами с
последующей утилизацией в соответствии с требованиями СанПиН 2.1.7.2790-10
«Санитарно-эпидемиологические требования к обращению с медицинскими
отходами».
4.11. Перед началом работы необходимо ознакомиться с инструкцией и
применять набор строго по назначению.
4.12. Набор реагентов с истекшим сроком годности применению не подлежит.
4.13. Все компоненты набора в используемых концентрациях являются
нетоксичными.
4.14. Внимание! В состав Taq входит азид натрия в концентрации 0,02 %. При
попадании компонентов с ним на кожу: смыть большим количеством воды с
мылом. При попадании в глаза: промыть глаза водой. При попадании в желудок:
прополоскать рот водой. Получить консультацию у врача.
--- стр. 12 ---
5. ТРЕБОВАНИЯ К ПЕРСОНАЛУ, УЧАСТВУЮЩЕМУ В
ВЫПОЛНЕНИИ ИССЛЕДОВАНИЙ
Исследования с использованием данной тест-системы могут выполнять
специалисты не моложе 18 лет с высшим и средним медицинским, биологическим
или иным образованием: врач КДЛ, биолог, медицинский лабораторный техник,
медицинский технолог. Персонал, проводящий исследования с использованием
данного набора реагентов, должен владеть навыками проведения молекулярно
биологических исследований и работы на соответствующем оборудовании.
6. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ
6.1. Этап проведения амплификации (ПЦР)
- ПЦР-бокс или ламинарный бокс 2 класса биобезопасности;
- амплификатор с нагреваемой крышкой (методика анализа отработана на
амплификаторах ДТ96 (ДНК-технология); StepOnePlus, 7500 Real-time PCR System,
2720 Thermal Cycler {Applied Biosystems)’ , MyCycler, CFX96, CIOOO Touch, DNA
Engine Dyad {Bio-Rad)\ Rotor-Gene Q {QIAGEN)\ LightCycler96 {Roche))\
- центрифуга c модулем вортекса со скоростью вращения 2400 об/мин
(Microspin FV-2400 {BioSan), или с аналогичными характеристиками);
- пипетки полуавтоматические одноканальные со сменными наконечниками с
изменяемым объёмом отбора жидкостей: 0,5-10 мкл, 10-100 мкл и 100-1000 мкл;
пробирки для ПЦР, подходящие к используемому амплификатору;
- пробирки типа «Эппендорф» на 0,5 и 1,5 мл;
- штатив для пробирок;
- наконечники к пипеткам полуавтоматическим с аэрозольным барьером,
сертифицированные на отсутствие ДЬЖаз;
- холодильник фармацевтический (диапазон температур +2.. .+8 °С)
- холодильник фармацевтический (диапазон температур -3 0... -18 °С)
- перчатки медицинские диагностические одноразовые неопудренные.
6.2. Этап гибридизации
- пипетки полуавтоматические одноканальные со сменными наконечниками с
изменяемым объёмом отбора жидкостей: 10-100 мкл и 100-1000 мкл;
пробирки типа «Эппендорф» на 1,5 мл;
- центрифуга с модулем вортекса со скоростью вращения 2400 об/мин
(Microspin FV-2400, {BioSan\ или с аналогичными характеристиками);
водяная баня-термостат с перемешиванием (WB-4MS, {BioSan), или с
аналогичными характеристиками) или гибридизационная станция (HS400Pro
{Тесап))
--- стр. 13 ---
стеклянный стакан объёмом 100 мл - 2 шт.;
” вода деионизованная или дистиллированная;
- штатив для пробирок;
- штатив-рамка для предметных стёкол;
- перчатки медицинские диагностические неопудренные.
6,3. Регистрация и анализ результатов
- сканер для микрочипов с длиной волны лазера, соответствующей диапазону
поглощения флуоресцентного красителя Су5 (этап сканирования отработан на
сканерах ScanArray Gx {PerkinElmer\ MArS {Ditabis), PowerScanner {Tecan),
InnoScann 710-IR {Innopsys), LuxScan lOK MicroArray scanner {CapitalBio
Corporation));
- компьютер c предустановленным программным обеспечением для работы со
сканером.
7. АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ
Тип анализируемого образца - геномная ДНК человека, полученная из цельной
крови, сухих пятен крови, буккального эпителия. Выделение ДНК проводят с
помощью наборов, зарегистрированных на территории РФ, предназначенных для
выделения нуклеиновых кислот из указанных типов биоматериала. Минимально
допустимая концентрация геномной ДНК в образце - 0,5 нг/мкл.
Образцы ДНК, выделенные с помощью наборов производства ООО «Компания
Алкор Био», допускается хранить при температуре +2...+8 °С в течение одной
недели или при температуре -30...-18 °С в течение одного месяца.
7.1. Взятие и хранение клинических образцов"^
Взятие материала осуществлять стерильными одноразовыми инструментами в
стерильные одноразовые флаконы, пробирки, контейнеры.
Предобработку материала производить согласно пользовательской инструкции
к набору для выделения нуклеиновых кислот.
7.1.1. Цельная кровь
Забор цельной крови проводится в стерильные пластиковые пробирки с
добавлением в качестве антикоагулянта этилендиаминтетраацетата (ЭДТА) в
конечной концентрации 2,0 мг/мл или цитрата натрия. Для перемешивания крови с
антикоагулянтом после взятия материала необходимо перевернуть пробирку 2-3
раза. *
* Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с
материалом, содержащим микроорганизмы I—IV групп патогенности: Методические указания.—М.: Федеральный
центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, 2010.—51
13
--- стр. 14 ---
Муковисцидоз-28-Микрочип В-05.2018-07
Внимание! Не допускается использование гепарина в качестве антикоагулянта.
Образцы цельной крови хранить при температуре +2...+8°С в течение 12
часов. Не рекомендуется замораживать образцы цельной крови.
7.1.2. Сухие пятна крови
Пропитать фильтровальную бумагу кровью насквозь, чтобы получилось пятно
диаметром не менее 1 см. Образец высушить в горизонтальном положении на
чистой обезжиренной поверхности не менее 2 часов без применения
дополнительной тепловой обработки и попадания прямых солнечных лучей. Во
избежание получения неверных результатов нельзя допускать, чтобы кто-либо
помимо исследуемого пациента прикасался без перчаток к карте для сбора крови.
При работе с пятнами крови рекомендуется использовать карту для сбора
образцов биоматериала («ДНК-карта») производства ООО «Компания Алкор Био».
ДНК-карта с нанесенной кровью хранится в герметичной упаковке с
осушителем при комнатной температуре и относительной влажности не более 90%
в течение 24 месяцев со дня нанесения биоматериала.
Забор крови у новорожденных необходимо осуществлять согласно Приказу
Минздравсоцразвития РФ от 22.03.2006 N 185 О массовом обследовании
новорожденных детей на наследственные заболевания (вместе с Положением об
организации проведения массового обследования новорожденных детей на
наследственные заболевания, Рекомендациями по забору образцов крови при
проведении массового обследования новорожденных детей на наследственные
заболевания)
7.1.3. Буккальный эпителий
Забор буккального эпителия проводится не ранее чем через час после еды,
питья, курения. Мазки взять стерильным одноразовым зондом вращательными
движениями с внутренней поверхности щеки. После забора материала рабочую
часть зонда поместить в стерильную одноразовую пробирку с транспортной средой,
рекомендованной производителем используемого набора для выделения
нуклеиновых кислот. Погрузив рабочую часть зонда в транспортную среду,
вращать зонд в течение 10-15 с. Вынуть зонд из раствора, отжать избыток
жидкости, прижимая зонд к стенке пробирки.
Образцы буккального эпителия хранить при температуре +2...+8°С в течение 1
недели.
7.2. Интерферирующие вещества и ограничения, связанные с образцом
Использование биоматериала, содержащего избыточное количество примесей
в виде слизи, крови, гноя и др. может приводить к ингибированию реакции
14
--- стр. 15 ---
Муковисцидоз-28-Микрочип В-05.2018-07
амплификации. Выделение ДЬЖ проводят в соответствии с используемым
комплектом реагентов, который гарантирует отсутствие интерферирующих
веществ в образце геномной ДНК. При неправильном хранении биологического
материала происходит фрагментация ДНК, что приводит к ложноотрицательным
результатам анализа. Примеси белков крови в образце ДНК ингибируют активность
полимеразы и препятствуют прохождению ПЦР.
7.3. Рекомендации определения качества ДНК:
Концентрация ДНК определяется методом количественной ПЦР «в реальном
времени» или любым другим методом, верифицированным в лаборатории.
Степень очистки ДНК от белковых примесей определяется
спектрофотометрически отношением поглощения на длинах волн 260 нм и 280 нм
(А260/280). Образец ДНК, пригодный для анализа, имеет отношение А260/280 >
1,8.
Фрагментация ДНК определяется методом электрофоретического разделения в
1% агарозном геле с окраской бромистым этидием (0,1 нг/мкл). Минимальное
количество ДНК, определяемое в геле: 3-5 нг в узкой зоне или 10-15 нг в
диффузной зоне. ДНК без признаков деградации определяется в геле как продукт
одной длины, при наличии деградации на дорожке геля определяется несколько
фрагментов разной длины.
8. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
Анализ состоит из 4-х этапов:
• ПЦР1 и объединение продуктов, полученных в ходе
амплификации;
• ПЦР2;
• Гибридизация;
• Регистрация и анализ результатов.
Пр14мечание: Допускается делать паузы (до 24 часов) после этапов ПЦР!
или ПЦР2. ПЦР-продукты допускается хранить при температуре +2..Л8 °С в
защищенном от света месте не более 24 часов.
Примечание: Перед проведением гибридизации необходимо прогреть
водяную баню до +49 °С.
8.1, Полимеразная цепная реакция
8.1.1, ГПТР1 и объединение продуктов амплификации
--- стр. 16 ---
Муковисцидоз-28-Микрочип В-05.2018-07
ПЦР1 состоит из трёх мультиплексных реакций (А1-АЗ).
1) Разморозить Смеси праймеров для ПЦР1 (А1, А2, АЗ) и Амплификационный
буфер.
2) Перед использованием все реагенты (А1, А2, АЗ, Амплификационный буфер и
Taq) перемешать на вортексе и сбросить капли коротким центрифугированием в
течение 2-3 секунд при 1,5-2,4 тыс. об/мин.
3) А1, А2, АЗ, Амплификационный буфер и Taq готовы к использованию.
4) Подготовить пробирку типа «Эппендорф» объёмом 0,5 мл, промаркировать
РС1 и расположить в штативе.
5) Приготовить рабочую смесь согласно протоколу:
Амплификационный буфер 49 мкл
Taq 7 мкл
Тестируемая ДНК_________________________17,5 мкл
Общий объём: 73,5 мкл
Перемешать на вортексе и сбросить капли коротким
центрифугированием в течение 2-3 секунд при 1,5-2,4 тыс. об/мин.
6) Подготовить три пробирки для ПЦР, подходящих для используемого
амплификатора, и промаркировать их от 1 до 3.
7) Добавить по 4 мкл каждой Смеси праймеров для ПЦР1 (А1, А2, АЗ) в
пробирки для ПЦР: А1 - в пробирку 1, А2 - в пробирку 2, АЗ - в пробирку 3.
8) Аликвотировать рабочую смесь по 21 мкл в пробирки с внесенными Смесями
праймеров для ПЦР 1 (пробирки 1-3).
9) Перемешать на вортексе и сбросить капли коротким центрифугированием в
течение 2-3 секунд при 1,5-2,4 тыс. об/мин.
Примечание: После приготовления смесей убрать компоненты набора в
морозильную камеру с температурой -30...~18 °С. Компоненты набора
допускается хранить при температуре +2..Л 8 °С в течение рабочего дня (8
часов).
10) Поместить пробирки в амплификатор и провести реакцию по следующей
программе:
--- стр. 18 ---
Объединить продукты ПЦР1:
11) Разморозить Деионизованную воду.
12) Подготовить пробирку типа «Эппендорф» объёмом 1,5 мл, промаркировать и
поместить в штатив.
13) В промаркированную пробирку внести 600 мкл Деионизованной воды.
14) В пробирку с внесённой Деионизованной водой добавить по 4 мкл продуктов
ПЦР1 из пробирок 1-3.
15) Перемешать на вортексе и сбросить капли коротким центрифугированием в
течение 2-3 секунд при 1,5-2,4 тыс. об/мин.
Примечание: Объединенные и разбавленные в воде продукты ПЦР1
допускается хранить при температуре +2...+5 °С в течение 24 часов или при -
30...-18 °С в течение 1 года.
8.1.2. ППР2
ПЦР2 состоит из трёх мультиплексных реакций (В1-ВЗ).
Примечание: Смеси праймеров для ПЦР2 (В1, В2, ВЗ) беречь от воздействия
света и ультрафиолетового излучения. Не допускается использование
УФ-рециркулятора!
1) Разморозить Смеси праймеров для ПЦР2 (В1, В2, ВЗ) и Амплификационный
буфер.
2) Перед использованием все реагенты (В1, В2, ВЗ, Амплификационный буфер и
Taq) перемешать на вортексе и сбросить капли коротким центрифугированием в
течение
2-3 секунд при 1,5-2,4 тыс. об/мин.
3) В1, В2, ВЗ, Амплификационный буфер и Taq готовы к использованию.
4) Подготовить пробирку типа «Эппендорф» объемом 0,5 мл, промаркировать РС2
и расположить в штативе.
5) Приготовить рабочую смесь согласно протоколу:
Амплификационный буфер 49 мкл
Taq 7 мкл
Объединенные продукты ПЦР1 ______17,5 мкл
Общий объём: 73,5 мкл
Перемешать на вортексе и сбросить капли коротким
центрифугированием в течение 2-3 секунд при 1,5-2,4 тыс. об/мин.
--- стр. 19 ---
6) Подготовить три пробирки для ПЦР, подходящих для используемого
амплификатора, и промаркировать их от 1 до 3.
7) Добавить по 4 мкл каждой Смеси праймеров для ПЦР2 (В1, В2, ВЗ) в
промаркированные пробирки для ПЦР: В1 - в пробирку 1, В2 - в пробирку 2, ВЗ - в
пробирку 3.
8) Аликвотировать рабочую смесь по 21 мкл в пробирки с внесёнными Смесями
праймеров для ПЦР2 (пробирки 1-3).
9) Перемешать на вортексе и сбросить капли коротким центрифугированием в
течение 2-3 секунд при 1,5-2,4 тыс. об/мин.
Примечание: После приготовления смесей убрать компоненты набора в
морозильную камеру с температурой -30...-18 °С.
10) Поместить пробирки в амплификатор и провести реакцию по следующей
программе:
Денатурация +96 °С - 15 мин
' +96 °С - 2 с
40 циклов +55°С- Юс
. +68 °С - 5 с
Примечание: Продукты ПЦР2 допускается хранить при температуре +2...+5 °С
в течение 24 часов или при -30...-18 в течение 1 года в защищённом от света
месте.
8.2. Гибридизация
1) Перед проведением гибридизации прогреть водяную баню до +49 °С.
2) Поставить в баню стакан объёмом 100 мл, содержащий 50 мл
дистиллированной или деионизованной воды. Стакан должен быть погружен в воду
не менее чем на 5 см.
3) Разморозить Гибридизационный буфер.
4) Выдержать Микрочип в фольгированном пакете не менее 15 минут при
комнатной температуре +18...+25 °С.
5) Поместить флакон с Гибридизационным буфером в водяную баню,
инкубировать 10 минут при +49 °С до полного растворения осадка.
6) Извлечь Микрочип из пакета. Нанести маркировку на гибридизационную
камеру и этикетку Микрочипа водостойким маркером. Поместить Микрочип в
штатив для предметных стёкол, гибридизационную камеру - в поролоновый
штатив, входящий в набор.
--- стр. 20 ---
Примечание: Микрочип брать в перчатках и держать за край в области
этикетки. Не касаться рабочей области Микрочипа, так как это может
привести к повреждению поверхности.
Примечание: Фольгированный пакет может быть использован для хранения
Микрочипа после этапа гибридизации (п.9.2.).
I) Подготовить пробирку типа «Эппендорф» объемом 1,5 мл, промаркировать и
расположить в штативе.
8) В промаркированную пробирку внести 1000 мкл Гибридизационного буфера.
Примечание: После первого использования Гибридизационный буфер хранить при
комнатной температуре +18...+25 в течение всего срока годности.
9) В пробирку с внесенным Гибридизационным буфером добавить по 22 мкл
продуктов ПЦР2 из пробирок 1-3.
10) Перемешать на вортексе и сбросить капли коротким центрифугированием в
течение 2-3 секунд при 1,5-2,4 тыс. об/мин.
II) Полученную гибридизационную смесь перенести в гибридизационную камеру.
Прогреть камеру со смесью в водяной бане в течение 1-2 минут.
Примечание: Не помещать Микрочип в камеру с непрогретой
гибридизационной смесью.
12) Поместить Микрочип в гибридизационную камеру так, чтобы маркировка
находилась наверху и лицевой стороной к расширению камеры (Рис.З). Не
допускать образования воздушных пузырей в гибридизационной камере. Поместить
камеру с Микрочипом в стеклянный стакан в водяной бане и инкубировать при
+49 °С в течение 1 часа. Камера с Микрочипом должна быть расположена
вертикально и на 2/3 находиться в воде.
Примечание: Не допускать остывания гибридизагщонной смеси, пока Микрочип
находится в камере.
--- стр. 21 ---
J J J
s y
22 МКЛ 22 МКЛ 22 мкл
Продукты ПЦР2
V
Гибридизационный буфер
1000 мкл
Гибридиэационная
камера
Микрочип в
гибридизационной камере с
гибридизациоиной смесью
Рис. 3. Гибридизация
13) Подготовить стакан объёмом 100 мл, содержащий 100 мл дистиллированной
или деионизованной воды комнатной температуры (+18...+25 °С).
14) После окончания гибридизации извлечь Микрочип из гибридизационной
камеры и немедленно промыть в стакане с дистиллированной или деионизованной
водой в течение 10-20 секунд.
Примечание: Не допускать высыхания гибридгаационной смеси на Микрочипе до
промывания в дистиллированной или деионизованной воде.
15) Просушить Микрочип на воздухе или удалить капли воды с поверхности
Микрочипа направленной струёй воздуха.
Примечание: В случае использования гибридизационной станции HS400Pro (Тесап)
следовать инструкции производителя.
9. РЕГИСТРАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
9.1. Регистрацию результатов проводить не позднее 1 часа после окончания
гибридизации.
9.2. При необходимости длительного хранения Микрочипа до регистрации
результатов использовать фольгированный пакет. Флуоресценция на Микрочипе
сохраняется в течение 7 дней при температуре +2...+8 °С.
9.3. Сканирование
«Муковисцидоз-28-Микрочип» совместим со сканерами с длиной волны лазера,
соответствующей диапазону поглощения флуоресцентного красителя Су5:
--- стр. 22 ---
ScanArray Gx {PerkinElmer\ MArS {Ditabis), PowerScanner (Tecan), InnoScann 710-IR
(Irmopsys), LuxScan lOK MicroArray scanner {CapitalBio Corporation). Настройки
сканера (мощность лазера, коэффициент усиления, разрешение) устанавливаются
индивидуально, Микрочип вставляют в сканер в соответствии с инструкцией по
эксплуатации оборудования.
Примечание: рекомендуется избегать сканирования Микрочипа при высоких
значениях параметра PMT/Gain. Интенсивность сигнала должна быть в
диапазоне от 300 до 40 000— 50 000 единиц. Интенсивность сигналов близкая к
максимальным значениям (65 535 единиц в 16-битном диапазоне) может
приводить к появлению ложноположительных результатов.
9.4. Результат сканирования сохраняют в формате TIF и JPEG.
--- стр. 23 ---
1
Муковисцидоз-28-Микрочип В-05.2018-07
Ю.АНАЛИЗ РЕЗУЛЬТАТОВ
Значимый сигнал флуоресценции - сигнал, который обнаруживается
визуально на Микрочипе и находится в координатных позициях мишеней.
Координаты мутаций на Микрочипе:
A1,F1 -CFTRdele2,3 C3,H3-G551D
А2, F2-G85E C4, H4-R553X
A3,F3 -394delTT C5,H5-2143delT
А4, F4 - Е92К C6, H6-2183AA>G
A5,F5-L138ins D1,I1 -2184insA
A6, F6-621+1G>T D2,12-2789+5G>A
B1,G1 - 1078delT D3,I3-R1162X
B2, G2-R334W D4,14-S1196X
B3,G3-R347P/H D5,I5-3732delA
B4, G4-I507del D6,16-3821delT
B5,G5-F508del El,Jl-3849+10kbC>T
B6, G6- 1677delTA E2, J2-W1282X
C1,H1-1717-1G>A E3, J3-N1303K
C2, H2-G542X
10.1. Все значимые сигналы в поле Мутаций F-J (1-6) должны быть обработаны
согласно пунктам 10.2. - 10.7. (на примере сигналов А2 и F2).
10.2. Определить интенсивность сигналов трех пикселей для каждой мишени
дикого типа в 4-х полях (а21, а22... а224) (Рис.4).
--- стр. 28 ---
№ Исключение Результат сканирования
Микрочипа (одна область анализа)
7 отсутствие значимых сигналов С6, Н6
при Kratio(Diii) < 0,3 - гомозигота
2184insA
IR R H R R IIH IR
ДИКИИ ТИП МУТАЦИИ к
при одновременном результате
Kratio(B4G4) < 0,3 И Kraiio(B5G 5)^^i'^ ~
гетерозигота по двум мутациям I507del
и F508del
ABCDEFGH I J
При одновременном результате
Kralio(C6H6) < 0,3 и Kratio(D}ll) < 0,3 -
гетерозигота по двум мутациям
2183AA>GH2184insA
Д И К И И т и п М У Т А Ц И И к
--- стр. 29 ---
11.УСТРАНЕНИЕ ПРОБЛЕМ
Таблица 6
Проблема Возможные причины Пути решения
Отсутствие всех
значимых
сигналов на
Микрочипе
Неправильно выбран
канал считывания
флуоресценции при
сканировании
Микрочипа
Использовать сканер для
микрочипов с длиной волны
лазера, соответствующей
диапазону поглощения
флуоресцентного красителя Су5
(п.6.4.)
Неправильное
размещение Микрочипа
в сканере
Микрочип помещать в сканер в
соответствии с инструкцией по
эксплуатации оборудования.
Мишени расположены в
верхней части Микрочипа, на
маркированной стороне (Рис.2)
Выбраны не
оптимальные параметры
сканирования: занижены
значения параметров
PMT/Gain
При сканировании Микрочипа
увеличить значение параметра
PMT/Gain. Интенсивность
сигналов должна быть в
диапазоне от 300 до 40 000-
50 000 единиц (п.9.3.)
Неправильное хранение
Микрочипа до
регистрации результата
Хранить Микрочип до
регистрации результатов строго
в соответствии с инструкцией
(п.9.)
Микрочип неправильно
помещен в
гибридизационную
камеру
Помещать Микрочип в
гибридизационную камеру так,
чтобы маркировка находилась
наверху и лицевой стороной к
расширению камеры (Рис.З,
п.8.2.)
Приготовление
гибридизационной смеси
выполнено неверно
Выполнять анализ строго в
соответствии с инструкцией
(п.8.2.)
На Микрочипе
присутствуют
только значимые
сигналы
контрольной
Образец ДНК
неудовлетворительного
качества
Забор биоматериала, выделение
ДНК, оценку концентрации и
чистоты ДНК проводить в
соответствии с рекомендациями,
указанными в инструкции (п.7.)
полосы К Рабочие смеси для ПЦР
приготовлены неверно
Выполнять приготовление
рабочих смесей строго в
соответствии с инструкцией
(п.8.1.1., п.8.1.2.)
--- стр. 30 ---
Проблема Возможные причины Пути решения
Неправильно настроена
программа
амплификации
Реакцию амплификации
проводить строго в
соответствии с инструкцией
(п.8.1.1., п.8.1.2,)
Приготовление
гибридизационной смеси
выполнено неверно (не
внесены продукты
ПЦР2)
Выполнять анализ строго в
соответствии с инструкцией
(п.8.2.)
Образец ДЬЖ
неудовлетворительного
качества
Забор биоматериала, выделение
ДНК, оценку концентрации и
чистоты ДЬЖ проводить в
соответствии с рекомендациями,
указанными в инструкции (п.7.)
Компоненты набора не
перемешаны перед
постановкой анализа
Выполнять анализ строго в
соответствии с инструкцией
Рабочие смеси для ПЦР
приготовлены неверно
Выполнять приготовление
Рабочих смесей строго в
соответствии с инструкцией
(п.8.1.1., п.8.1.2.)
Ошибки при внесении
Смесей праймеров для
ПЦР1 (А1,А2, АЗ) и
ПЦР2 (В1,В2, В3)в
пробирки для ПЦР
Выполнять анализ строго в
соответствии с инструкцией
(п.8.1.1., п.8.1.2.)
Объединение продуктов
ПЦР1 выполнено
неверно
Выполнять анализ строго в
соответствии с инструкцией
(п.8.1.1.)
Приготовление
гибридизационной смеси
выполнено неверно (не
внесены продукты
ПЦР2)
Выполнять анализ строго в
соответствии с инструкцией
(п.8.2.)
Повреждение
поверхности Микрочипа
вследствие
неправильного
обращения
Микрочип брать в перчатках и
держать за край в области
этикетки. Не касаться рабочей
области Микрочипа (п.8.2)
Образование воздушных
пузырей в
гибридизационной
камере
Не допускать образования
воздушных пузырей в
гибридизационной камере
(п.8.2.)
Для отдельных
топографически
сходных
мишеней
отсутствуют
значимые
сигналы в поле
Дикого типа и
Мутаций (за
исключением
ситуаций,
указанных в
Таблице 5)
--- стр. 31 ---
Проблема Возможные причины Пути решения
Неправильное хранение
Микрочипа до
регистрации результата
Хранить Микрочип до
регистрации результатов строго
в соответствии с инструкцией
(п.9.)
Выбраны не
оптимальные параметры
сканирования: занижены
значения параметров
PMT/Gain
При сканировании Микрочипа
увеличить значение параметра
PMT/Gain. Интенсивность
сигналов должна быть в
диапазоне от 300 до 40 000-
50 000 единиц (п.9.3.)
Температура водяной
бани не соответствует
49 °С
Перед проведением
гибридизации прогревать
водяную баню до +49 °С. (п.8.2.)
Микрочип находился в
гибридизационной
камере с
непрогретой/остывшей
гибридизационной
смесью
Не помещать Микрочип в
камеру с непрогретой
гибридизационной смесью. Не
допускать остывания
гибридизационной смеси, пока
Микрочип находится в камере.
(п.8.2.)
Выбраны не
оптимальные параметры
сканирования: завышены
значения параметров
PMT/Gain
При сканировании Микрочипа
уменьшить значение параметра
PMT/Gain. Интенсивность
сигнала должна быть в
диапазоне от 300 до 40 000-
50 000 единиц. Интенсивность
сигналов близкая к
максимальным значениям
(65 535 единиц в 16-битном
диапазоне) может приводить к
появлению
ложноположительных
результатов (п.9.3.)
В ходе работы с
реагентами набора
«Муковисцидоз-28-
Микрочип» произошла
контаминация рабочих
смесей фрагментами
ДНК других образцов
Следовать рекомендациям по
организации работы в
лаборатории (п.4.6,
МУ 1.3.2569-09)
Определение
более двух
мутаций на
Микрочипе
--- стр. 32 ---
Проблема Возможные причины Пути решения
Не удается
поместить
Микрочип в
сканер
Размеры Микрочипа не
позволяют поместить его
в используемый сканер
Убедиться, что оборудование
предназначено для работы с
Микрочипами с размерами,
указанными в инструкции (п.2.2.
Таблица 2). Использовать
сканеры, валидированные для
проведения анализа (п.6.3)
--- стр. 33 ---
12. УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ
12.1. Компоненты набора «Муковисцидоз-28-Микрочип» должны храниться в
упаковке предприятия-изготовителя при температуре -30...-18°С в течение всего
срока годности набора.
12.2. После первого использования Гибридизационный буфер должен храниться
при комнатной температуре +18.. .+25 °С в течение всего срока годности.
12.3. В ходе постановки анализа допускается хранение компонентов набора при
температуре +2...+8 °С в течение рабочего дня (8 часов).
12.4. После вскрытия компоненты набора хранятся в течение всего срока
годности. Не рекомендуется размораживать и замораживать компоненты набора
более пяти раз.
12.5. Смеси праймеров для ПЦР2 (В1, В2 и ВЗ) и Гибридизационный буфер
беречь от воздействия света и ультрафиолетового излучения.
12.6. Предприятие-изготовитель гарантирует соответствие набора требованиям
ТУ при соблюдении условий транспортировки, хранения и применения,
установленных ТУ.
12.7. Для получения надёжных результатов необходимо строгое соблюдение
инструкции.
12.8. Не допускается смешивание или одновременное использование
компонентов из разных серий набора.
12.9. Набор не подлежит ремонту и обслуживанию.
12.10. Микрочипы предназначены для одноразового применения.
12.11. Срок годности набора - 12 месяцев.
13. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ
13.1. Транспортировку набора производить крытыми видами транспорта при
температуре -30...-18 °С в морозильных камерах с автоматически поддерживаемой
температурой с использованием термоиндикаторов.
Допускается транспортировка с использованием термоконтейнера и
хладоэлементов, поддерживающих температуру ниже 0 °С в течение не более 5
суток.
13.2. Наборы, транспортированные с нарушением температурного режима,
применению не подлежат.
--- стр. 34 ---
Муковисцидоз-28-Микрочип В-05.2018-07
14. БЕЗОПАСНАЯ УТИЛИЗАЦИЯ
14.1. Изделия, пришедшие в негодность, в том числе в связи с истечением срока
годности, подлежат утилизации.
14.2. При утилизации отходов необходимо руководствоваться требованиями
СанПиН 2.1.7.2790-10 «Санитарно-эпидемиологические требования к обращению с
медицинскими отходами».
14.3. Класс опасности отходов при применении набора - Б (эпидемиологически
опасные). Отходы класса Б собираются в твёрдую (непрокалываемую) упаковку
(контейнеры) жёлтого цвета или имеющие жёлтую маркировку с надписью:
«Отходы. Класс Б». Отходы класса Б подлежат обязательному обеззараживанию.
Выбор метода обеззараживания определяется возможностями организации,
осуществляющей исследования с применением данного набора в соответствии с
СанПиН 2.1.7.2790-10 «Санитарно-эпидемиологические требования к обращению с
медицинскими отходами».
14.4. После истечения срока годности пробирки с А1, А2, АЗ, В1, В2, ВЗ, Taq,
Амплификационным буфером, Контрольным образцом (К), флаконы с
Гибридизационным буфером. Деионизованной водой. Микрочипы и пачки
утилизируются как отходы класса А (эпидемиологически безопасные).
14.5. Жидкие компоненты (реагенты, реактивы) уничтожаются раздавливанием
внутренней упаковки с последующим разведением водой 1:100, сливом раствора в
канализацию и вывозом остатка упаковок как производственного или бытового
мусора. Компоненты изделий, нерастворимые в воде (пробирки, флаконы,
гибридизационные камеры, пачки), уничтожаются путем сжигания. Микрочипы
подлежат механическому разрушению с вывозом остатков как производственного
или бытового мусора.
14.6. Персонал, осуществляющий уничтожение изделий, должен соблюдать
правила безопасности при проведении того или иного способа уничтожения.
15. СПИСОК НОРМАТИВНЫХ ДОКУМЕНТОВ
15.1. Клинические рекомендации «Кистозный фиброз (муковисцидоз) у детей»,
Союз педиатров России, 2016, МКБ 10: Е84 Год утверждения (частота
пересмотра): 2016 (пересмотр каждые 3 года).
15.2. «Об утверждении номенклатурной классификации медицинских изделий».
Приказ Министерства здравоохранения РФ от 06.06.2012 г. № 4н // «Российская
газета». -N 245. -24.10.2012.
15.3. ГОСТ Р 52905-2007 «Лаборатории медицинские. Требования
безопасности», Москва: Стандартинформ, 2008.
--- стр. 35 ---
15.4. МУ 1.3.2569-09 «Организация работы лабораторий, использующих методы
амплификации нуклеиновых кислот, при работе с материалом, содержащим
микроорганизмы I-1V групп патогенности». Москва, Федеральный центр гигиены и
эпидемиологии Роспотребнадзора, 2010.
15.5. СанПиН 2.1.7.2790-10 «Санитарно-эпидемиологические требования к
обращению с медицинскими отходами»// Бюллетень нормативных актов
федеральных органов исполнительной власти. - N 13. - 28.03.2011.
15.6. ГОСТ Р 51088-2013 «Медицинские изделия для диагностики ин витро.
Реагенты, наборы реагентов, тест-системы, контрольные материалы, питательные
среды. Требования к изделиям и поддерживающей документации», Москва:
Стандартинформ, 2016.
15.7. ГОСТ Р ИСО 18113-1-2015 Информация, предоставляемая изготовителем
(маркировка). Часть 1. Термины, определения и общие требования, Москва:
Стандартинформ, 2016.
15.8. ГОСТ Р ИСО 18113-2-2015 Медицинские изделия для диагностики in vitro.
Информация, предоставляемая изготовителем(маркировка). Часть 2. Реагенты для
диагностики in vitro для профессионального применения, Москва:
Стандартинформ, 2016.
15.9. «Об утверждении требований к содержанию технической и
эксплуатационной документации производителя (изготовителя) медицинского
изделия». Приказ Минздрава России от 19.01.2017 г. № Пн // Официальный
интернет-портал правовой информации http://www.pravo.gov.ru. 13.03.2017.
15.10. ГОСТ Р ИСО 15223-1-2014 Изделия Медицинские. Символы,
применяемые при маркировании на медицинских изделиях, этикетках и в
сопроводительной документации. Часть 1. Основные требования, Москва:
Стандартинформ, 2014.
--- стр. 36 ---
16. ИНФОРМАЦИЯ О ПРОИЗВОДИТЕЛЕ
По вопросам качества набора «Муковисцидоз-28-Микрочип» обращаться в
ООО «Компания Алкор Био» по адресу: 192148, г. Санкт-Петербург,
Железнодорожный проспект, д. 40, лит. А, тел/факс: (812) 677-8779.
17. СИМВОЛЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ НА ЭТИКЕТКАХ
Обратитесь к инструкции по
применениюIVD Медицинское изделие для
диагностики in vitro □3
REF Номер по каталогу
LOT Номер серии t
Дата изготовления
Количество тестов
ж
f
Беречь от влаги
Срок годности
Температурный диапазон
хранения
Не допускать воздействия
солнечного света
Осторожно! Обратитесь к
инструкции по применению
18.ДОПОЛНИТЕЛЬНАЯ ИНФОРМАЦИЯ
Инструкция по применению разработана
ТУ 21.20.23-261-98539446-2016.
в соответствии
Инструкция по применению для ознакомления размещена на сайте
www.alkorbio.ru
--- стр. 38 ---
ООО «Компания Алкор Био»
г. Санкт-Петербург, Железнодорожный пр., дом 40, лит.А
Телефон/факс: (812) 677-87-79
ПАСПОРТ№6
Тест-система для определения 28 мутации в гене
C F T R методом гибридизации на ДНК-микрочипе in vitro
«Муковисцидоз-28-Микрочип»
Кат.№ 600-03
Серия № Е006 Формирование № 1 Количество 10 шт.
Пункт
ТУ
Наименование
показателя Требования ТУ Результаты контроля
Амплификационный буфер -
прозрачная бесцветная жидкость
Соответствует
прозрачная бесцветная жидкость
Taq - прозрачная бесцветная вязкая
жидкость
Соответствует
прозрачная бесцветная вязкая
жидкость
Смесь праймеров для ПЦР1 А1 -
прозрачная бесцветная жидкость
Соответствует
прозрачная бесцветная жидкость
Смесь праймеров для ПЦР1 А2 -
прозрачная бесцветная жидкость
Соответствует
прозрачная бесцветная жидкость
Смесь праймеров для ПЦР1 АЗ -
прозрачная бесцветная жидкость
Соответствует
прозрачная бесцветная жидкость
Смеси праймеров для ПЦР2 В1 -
прозрачная бесцветная или светло-
голубого цвета жидкость
Соответствует
прозрачная светло-голубого
цвета жидкость
Смеси праймеров для ПЦР2 В2 -
прозрачная бесцветная или светло-
голубого цвета жидкость
Соответствует
прозрачная светло-голубого
цвета жидкость
Смеси праймеров для ПЦР2 ВЗ -
прозрачная бесцветная или светло-
голубого цвета жидкость
Соответствует
прозрачная светло-голубого
цвета жидкость
Контрольный образец (К) Соответствует
прозрачная бесцветная жидкость
Деионизованная вода - прозрачная
бесцветная жидкость
Соответствует прозрачная
бесцветная жидкость
Гибридизационный буфер - бесцветная
жидкость (допускается осадок белого
цвета)
Соответствует
бесцветная жидкость с осадком
белого цвета
Микрочип в гибридизационной камере -
прозрачное стекло в прозрачном
пластиковом футляре, герметично
упакованном в фольгированный пакет
Соответствует прозрачное
стекло в прозрачном
пластиковом футляре,
герметично упакованном в
фольгированный пакет
п.1.2 Внешний вид
--- стр. 39 ---
Г£Н£Рл
/"TlyHKT
1 ТУ
Наименование
показателя Требования ТУ
Аналитическая чувствительность:
0,5 нг/мкл
Соответствует ^ с
0,5 нг/мкл
Аналитическая специфичность:
Положительный контроль:
при постановке анализа с контрольным
образом К все сигналы от всех мишеней
в поле Дикого типа значимые, для всех
значимых сигналов в поле Мутаций
Кгачо>Ъ\ все сигналы контрольной
полосы в четырех областях анализа
значимые
Соответствует
при постановке анализа с.
контрольным образом К все
сигналы от всех мишеней в поле
Дикого типа значимые, для всех
значимых сигналов в поле
Мутаций Kraiio>2; все сигналы
контрольной полосы в четырех
областях анализа значимые
п.1.2 Технические
характеристики
Аналитическая специфичность:
Отрицательный контроль:
при постановке анализа с контрольным
образом К все сигналы от всех мишеней
в поле Дикого типа значимые, для всех
значимых сигналов в поле Мутаций
Кгачо >3; все сигналы контрольной
полосы в четырех областях анализа
значимые
Соответствует
при постановке анализа с
контрольным образом К все
сигналы от всех мишеней в поле
Дикого типа значимые, для всех
значимых сигналов в поле
Мутаций Kraiio >3; все сигналы
контрольной полосы в четырех
областях анализа значимые
Контроль контаминации:
при гибридизации с использованием
продуктов ПЦР2, проведенной без
добавления ДНК-матрицы (с
деионизованной водой), - отсутствуют
значимые сигналы в поле Дикого типа и
в поле Мутаций; все сигналы
контрольной полосы в четырех
областях анализа значимые
Соответствует
при гибридизации с
использованием продуктов
ПЦР2, проведенной без
добавления ДНК-матрицы (с
деионизованной водой), -
отсутствуют значимые сигналы в
поле Дикого типа и в поле
Мутаций; все сигналы
контрольной полосы в четырех
областях анализа значимые
Амплификационный буфер
(с. Е0060218): 1 пр. (740 мкл)
Соответствует
I пр. (740 мкл)
Taq (С.Е0061216): 1 пр. (110 мкл) Соответствует
1 пр. (110 мкл)
А1 (с. Е0060218): 1 пр. (30 мкл) Соответствует
1 пр. (30 мкл)
А2 (с. Е0060218 ): 1 пр. (30 мкл) Соответствует
1 пр. (30 мкл)
АЗ (с. Е0060218 ): 1 пр. (30 мкл) Соответствует
1 пр. (30 мкл)
В1 (с. Е0060218): 1 пр. (30 мкл) Соответствует
1 пр. (30 мкл)
п.1.3 Комплектность В2(с. Е0060218): 1 пр. (30 мкл) Соответствует
1 пр. (30 мкл)
ВЗ (с. Е0060218): 1 пр. (30 мкл) Соответствует
1 пр. (30 мкл)
К (с. Е0060218 ): 1 пр. (20 мкл) Соответствует
1 пр. (18 мкл)
Деионизованная вода
(с. Е0060218): 1 фл.(Юмл)
Соответствует
1 фл. (10 мл)
Гибридизационный буфер
(с. Е0060218): 1 фл.(Юмл)
Соответствует
1 фл. (10 мл)
Микрочип в гибридизационной камере
в фольгированном пакете
(с.°Е0060218):5 шт.
Соответствует
5 шт.
Стр. 2 из 3
--- стр. 40 ---
---------1/ Т1ункт
/1 ТУ
Наименование
показателя Требования ТУ Результаты контроля
1
Паспорт на набор реагентов - 1 шт. Соответствует
1 шт.
Инструкция по применению -1 шт. Соответствует
1 шт.
п.1.4 Упаковка
Компоненты набора, паспорт и
инструкция по применению должны
быть помещены в пачку (размер
155x110x90 мм) из картона
Соответствует
Компоненты набора, паспорт и
инструкция по применению
помещены в пачку
(размер 155x110x90 мм) из ^
картона "N
Паспорт выдан 12.02.2018
Срок годности набора до 01.02.2019
Условия хранения -30 ...-18 °С
Условия транспортирования -30..
транспортировка с использованием
хладоэлементов не более пяти суток.
«Опия
ооо.,п..„,.
18 °С. Допускается
термоконтейнера и
. ' д-/
ПРИМЕНЕНИЕ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ IN VITRO
Набор соответствует ТУ 21.20.23-261-98539446-2016
Менед
прое енцева Е.А.
--- стр. 41 ---
ООО «Компания Алкор Био»
г. Санкт-Петербург, Железнодорожный пр., дом 40, лит.А
Телефон/факс: (812)677-87-79 «ОИЯЯ
Ге н е р а л ь н ы й
ПАСПОРТ № 7 000«КомлА ния Алш
Тест-система для определения 28 мутаций в гене
C F T R методом гибридизации на ДНК-микрочипе ш vitro
«Муковисцидоз-28-Микрочип»
Кат.№ 600-03
Серия № Е007 Формирование № 1 Количество 10 шт.
Пункт
ТУ
Наименование
показателя требования ТУ Результаты контроля
Амплификационный буфер -
прозрачная бесцветная жидкость
Соответствует
прозрачная бесцветная жидкость
Taq - прозрачная бесцветная вязкая
жидкость
Соответствует
прозрачная бесцветная вязкая
жидкость
Смесь праймеров для ПЦР1 А1 -
прозрачная бесцветная жидкость
Соответствует
прозрачная бесцветная жидкость
Смесь праймеров для ПЦР1 А2 -
прозрачная бесцветная жидкость
Соответствует
прозрачная бесцветная жидкость
Смесь праймеров для ПЦР1 АЗ -
прозрачная бесцветная жидкость
Соответствует
прозрачная бесцветная жидкость
Смеси праймеров для ПЦР2 В1 -
прозрачная бесцветная или светло-
голубого цвета жидкость
Соответствует
прозрачная светло-голубого
цвета жидкость
Смеси праймеров для ПЦР2 В2 -
прозрачная бесцветная или светло-
голубого цвета жидкость
Соответствует
прозрачная светло-голубого
цвета жидкость
Смеси праймеров для ПЦР2 ВЗ -
прозрачная бесцветная или светло-
голубого цвета жидкость
Соответствует
прозрачная светло-голубого
цвета жидкость
Контрольный образец (К) Соответствует
прозрачная бесцветная жидкость
Деионизованная вода - прозрачная
бесцветная жидкость
Соответствует прозрачная
бесцветная жидкость
Гибридизационный буфер - бесцветная
жидкость (догтускается осадок белого
цвета)
Соответствует
бесцветная жидкость с осадком
белого цвета
Микрочип в гибридизационной камере -
прозрачное стекло в прозрачном
пластиковом футляре, герметично
упакованном в фольгированный пакет
Соответствует прозрачное
стекло в прозрачном
пластиковом футляре,
герметично упакованном в
фольгированный пакет
п.1.2 Внешний вид
--- стр. 42 ---
Ч—Пункт
ТУf
Наименование
показателя Требования ТУ
Аналитическая чувствительность:
0,5 нг/мкл
CooTBeMfiyeT5ifo^, g.
0,5 нг/мкл
Аналитическая специфичность:
Положительный контроль:
при постановке анализа с
контрольным образом К все сигналы
от всех мишеней в поле Дикого типа
значимые, для всех значимых
сигналов в поле Мутаций Кгаио>3;
все сигналы контрольной полосы в
четырех областях анализа значимые
Соответствует 7
при постановке анализа с
контрольным образом К все
сигналы от всех мишеней в
поле Дикого типа значимые,
для всех значимых сигналов в
поле Мутаций Кгапо>3', все
сигналы контрольной полосы
в четырех областях анализа
значимые
Аналитическая специфичность:
Отрицательный контроль:
при постановке анализа с
контрольным образом К все сигналы
от всех мишеней в поле Дикого типа
значимые, для всех значимых
сигналов в поле Мутаций Кгаио >3;
все сигналы контрольной полосы в
четырех областях анализа значимые
Соответствует
при постановке анализа с
контрольным образом К все
сигналы от всех мишеней в
поле Дикого типа значимые,
для всех значимых сигналов в
поле Мутаций Юано >3; все
сигналы контрольной полосы
в четырех областях анализа
значимые
Контроль контаминацни:
при гибридизации с использованием
продуктов ПЦР2, проведенной без
добавления ДНК-матрицы (с
деионизованной водой), - отсутствуют
значимые сигналы в поле Дикого типа и
в поле Мутаций; все сигналы
контрольной полосы в четырех
областях анализа значимые
Соответствует
при гибридизации с
использованием продуктов
ПЦР2, проведенной без
добавления ДНК-матрицы (с
деионизованной водой), -
отсутствуют значимые сигналы в
поле Дикого типа и в поле
Мутаций; все сигналы
контрольной полосы в четырех
областях анализа значимые
Амплификационный буфер
(с. Е0070218): 1 пр. (740 мкл)
Соответствует
1 пр. (740 мкл)
Taq (с. Е0071216): 1 пр.(ПОмкл) Соответствует
1 пр. (110 мкл)
А1 (с. Е0070218): 1 пр. (30 мкл) Соответствует
1 пр. (30 мкл)
А2(с. Е0070218): 1 пр. (30 мкл) Соответствует
1 пр. (30 мкл)
АЗ (с. Е0070218): 1 пр.(ЗО.мкл) Соответствует
1 пр. (30 мкл)
В1 (с. Е0070218): 1 пр. (30 мкл) Соответствует
1 пр. (30 мкл)
В2 (с. Е0070218 ): 1 пр. (30 мкл) Соответствует
1 пр. (30 мкл)
ВЗ (с. Е0070218): 1 пр. (30 мкл) Соответствует
1 пр. (30 мкл)
К (с. Е0070218 ): 1 пр. (20 мкл) Соответствует
1 пр. (18 мкл)
Деионизованная вода
(с. Е0070218 ): 1 фл.(Юмл)
Соответствует
1 фл. (10 мл)
Гибридизационный буфер
(с. Е0070218): 1 фл.(Юмл)
Соответствует
1 фл. (10 мл)
п.1.2 Технические
характеристики
п.1.3 Комплектность
--- стр. 43 ---
к/ Гс.. .
/Пункт
/ ТУ
Наименование
показателя Требования ТУ 0(>^р«штаты I
Микрочип в гибридизационной камере
в фольгированном пакете
(с. Е0070218 ):5 шт.
Соответствует „ - -
' '.^рапр'' '
Паспорт на набор реагентов -1 шт. Соответствует----
1 шт. "
Инструкция по применению -1 шт. Соответствует
1 шт.
1.1.4 Упаковка
Компоненты набора, паспорт и
инструкция по применению должны
быть помещены в пачку (размер
155x110x90 мм) из картона
Соответствует
Компоненты набора, паспорт и
инструкция по применению
помещены в пачку
(размер 155x110x90 мм) из
картона
Паспорт выдан 15.02.2018
Срок годности набора до 05.02.2019
Условия хранения -30 ...-18 °С
Условия транспортирования -30..
транспортировка с использованием
хладоэлементов не более пяти суток.
. -18 °С. Допускается
термоконтейнера и
ПРИМЕНЕНИЕ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ IN VITRO
Набор соответствует ТУ 21.20.23-261-98539446-2016
--- стр. 44 ---
i ООО «Компания Алкор Био»
г. Санкт-Петербург, Железнодорожный пр., дом 40, лит.'
Телефон/факс: (812) 677-87-79
ПАСПОРТ№8
/ ‘“ " " ‘““''m i n '
-•У/
Тест-система для определения 28 мутаций в гене
C F T R методом гибридизации на ДНК-микрочипе in vitro
«Муковисцидоз-28-Микрочип»
Кат.№ 600-03
Серия № Е008 Формирование № 1 Количество 20 шт.
Пункт
ТУ
Наименование
показателя Требования ТУ Результаты контроля
Амплификационный буфер -
прозрачная бесцветная жидкость
Соответствует
прозрачная бесцветная жидкость
Taq - прозрачная бесцветная вязкая
жидкость
Соответствует
прозрачная бесцветная вязкая
жидкость
Смесь праймеров для ПЦР1 А1 -
прозрачная бесцветная жидкость
Соответствует
прозрачная бесцветная жидкость
Смесь праймеров для ПЦР1 А2 -
прозрачная бесцветная жидкость
Соответствует
прозрачная бесцветная жидкость
Смесь праймеров для ПЦР1 АЗ -
прозрачная бесцветная жидкость
Соответствует
прозрачная бесцветная жидкость
Смеси праймеров для ПЦР2 В1 -
прозрачная бесцветная или светло-
голубого цвета жидкость
Соответствует
прозрачная светло-голубого
цвета жидкость
Смеси праймеров для ПЦР2 В2 -
прозрачная бесцветная или светло-
голубого цвета жидкость
Соответствует
прозрачная светло-голубого
цвета жидкость
Смеси праймеров для ПЦР2 ВЗ -
прозрачная бесцветная или светло-
голубого цвета жидкость
Соответствует
прозрачная светло-голубого
цвета жидкость
Контрольный образец (К) Соответствует
прозрачная бесцветная жидкость
Деионизованная вода - прозрачная
бесцветная жидкость
Соответствует прозрачная
бесцветная жидкость
Гибридизационный буфер - бесцветная
жидкость (допускается осадок белого
цвета)
Соответствует
бесцветная жидкость с осадком
белого цвета
Микрочип в гибридизационной камере -
прозрачное стекло в прозрачном
пластиковом футляре, герметично
упакованном в фольгированный пакет
Соответствует прозрачное
стекло в прозрачном
пластиковом футляре,
герметично упакованном в
фольгированный пакет
п.1.2 Внешний вид
--- стр. 45 ---
Наименование
показателя Требования ТУ
в е р н а'т щ г
Аналитическая чувствительность:
0,5 нг/мкл
Соответствует .
0,5 нг/мкд - У^'-^Ра/:
Аналитическая специфичность:
Положительный контроль:
при постановке анализа с
контрольным образом К все сигналы
от всех мишеней в поле Дикого типа
значимые, для всех значимых
сигналов в поле Мутаций Кгачо>Ъ\
все сигналы контрольной полосы в
четырех областях анализа значимые
Соответствует-','
при постановке анализа с .
контрольным образом К все
сигналы от всех мишеней в
поле Дикого типа значимые,
для всех значимых сигналов в
поле Мутаций Кгаио>Уу все
сигналы контрольной полосы
в четырех областях анализа
значимые
п.1.2 Технические
характеристики
Аналитическая специфичность:
Отрицательный контроль:
при постановке анализа с
контрольным образом К все сигналы
от всех мишеней в поле Дикого типа
значимые, для всех значимых
сигналов в поле Мутаций Кгачо >3;
все сигналы контрольной полосы в
четырех областях анализа значимые
Соответствует
при постановке анализа с
контрольным образом К все
сигналы от всех мишеней в
поле Дикого типа значимые,
для всех значимых сигналов в
поле Мутаций Кгачо >3; все
сигналы контрольной полосы
в четырех областях анализа
значимые
Контроль контаминации:
при гибридизации с использованием
продуктов ПЦР2, проведенной без
добавления ДНК-матрицы (с
деионизованной водой), - отсутствуют
значимые сигналы в поле Дикого типа и
в поле Мутаций; все сигналы
контрольной полосы в четырех
областях анализа значимые
Соответствует
при гибридизации с
использованием продуктов
ПЦР2, проведенной без
добавления ДНК-матрицы (с
деионизованной водой), ~
отсутствуют значимые сигналы в
поле Дикого типа и в поле
Мутаций; все сигналы
контрольной полосы в четырех
областях анализа значимые
Амплификационный буфер
(с. Е0070218): 1 пр. (740 мкл)
Соответствует
1 пр. (740 мкл)
Taq (с. Е0071216): 1 пр. (110 мкл) Соответствует
1 пр. (110 мкл)
А1 (с. Е0070218): 1 пр. (30 мкл) Соответствует
1 пр. (30 мкл)
А2 (с. Е0070218 ): 1 пр. (30 мкл) Соответствует
1 пр. (30 мкл)
АЗ (с. Е0070218): 1 пр. (30 мкл) Соответствует
1 пр. (30 мкл)
п.1.3 Комплектность В1 (с. Е0070218): 1 пр. (30 мкл) Соответствует
1 пр. (30 мкл)
В2 (с. Е0070218 ): 1 пр. (30 мкл) Соответствует
1 пр. (30 мкл)
ВЗ (с. Е0070218): 1 пр. (30 мкл) Соответствует
1 пр. (30 мкл)
К (с. Е0070218 ): 1 пр. (20 мкл) Соответствует
1 пр. (18 мкл)
Деионизованная вода
(с. Е0070218): 1 фл.(Юмл)
Соответствует
1 фл. (10 мл)
Гибридизационный буфер
(с. Е0070218): 1 фл.(Юмл)
Соответствует
1 фл. (10 мл)
--- стр. 46 ---
d
^Цункт
' ТУ
Наименование
показателя Требования ТУ Результаты контроля
/
Микрочип в гибридизационной камере
в фольгированном пакете
(с. Е0070218):5шт.
Соответствует
5 шт.
Паспорт на набор реагентов - 1 шт. Соответствует
1 шт.
Инструкция по применению -1 шт. Соответствует
1 шт.
п.1.4 Упаковка
Компоненты набора, паспорт и
инструкция по применению должны
быть помещены в пачку (размер
155x110x90 мм) из картона
Соответствует
Компоненты набора, паспорт и
инструкция по применению
помещены в пачку
(размер 155x110x90 м^ из
картона —
о / ‘Ч
Паспорт выдан 02.08.2019
Срок годности набора до 01.08.2020
Условия хранения -30 ...-18 °С
Условия транспортирования -30..
транспортировка с использованием
хладоэлементов не более пяти суток.
18 °С. Допускается
термоконтейнера и
ПРИМЕНЕНИЕ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ 1N VITRO
Набор соответствует ТУ 21.20.23-261-98539446-2016
Менед
прое енцева Е.А.
--- стр. 47 ---
ООО «Компания Алкор Био»
г. Санкт-Петербург, Железнодорожный пр., дом 40,
Телефон/факс: (812) 677-87-79 Ш а
ПАСПОРТ №9 ^ ^ О О .К ш пт я а п ш
а.!
Тест-система для определения 28 мутаций в гене
C F T R методом гибридизации на ДНК-микрочипе in vitro
«Муковисцидоз-28-Микрочип»
Кат.№ 600-03
Серия № Е009 Формирование № 1 Количество 20 шт.
Пункт
ТУ
Наименование
показателя Требования ТУ Результаты контроля
Амплификационный буфер -
прозрачная бесцветная жидкость
Соответствует
прозрачная бесцветная жидкость
Taq - прозрачная бесцветная вязкая
жидкость
Соответствует
прозрачная бесцветная вязкая
жидкость
Смесь праймеров для ПЦР1 А1 -
прозрачная бесцветная жидкость
Соответствует
прозрачная бесцветная жидкость
Смесь праймеров для ПЦР1 А2 -
прозрачная бесцветная жидкость
Соответствует
прозрачная бесцветная жидкость
Смесь праймеров для ПЦР1 АЗ -
прозрачная бесцветная жидкость
Соответствует
прозрачная бесцветная жидкость
Смеси праймеров для ПЦР2 В1 -
прозрачная бесцветная или светло-
голубого цвета жидкость
Соответствует
прозрачная светло-голубого
цвета жидкость
Смеси праймеров для ПЦР2 В2 -
прозрачная бесцветная или светло-
голубого цвета жидкость
Соответствует
прозрачная светло-голубого
цвета жидкость
Смеси праймеров для ПЦР2 ВЗ -
прозрачная бесцветная или светло-
голубого цвета жидкость
Соответствует
прозрачная светло-голубого
цвета жидкость
Контрольный образец (К) Соответствует
прозрачная бесцветная жидкость
Деионизованная вода - прозрачная
бесцветная жидкость
Соответствует прозрачная
бесцветная жидкость
Гибридизационный буфер - бесцветная
жидкость (допускается осадок белого
цвета)
Соответствует
бесцветная жидкость с осадком
белого цвета
Микрочип в гибридизационной камере -
прозрачное стекло в прозрачном
пластиковом футляре, герметично
упакованном в фольгированный пакет
Соответствует прозрачное
стекло в прозрачном
пластиковом футляре,
герметично упакованном в
фольгированный пакет
п.1.2 Внешний вид
--- стр. 48 ---
ffWfp
1ункт
ТУ
Наименование
показателя Требования ТУ
Аналитическая чувствительность:
0,5 нг/мкл
Аналитическая специфичность:
Положительный контроль:
при постановке анализа с
контрольным образом К все сигналы
от всех мишеней в поле Дикого типа
значимые, для всех значимых
сигналов в поле Мутаций Кгаио>3;
все сигналы контрольной полосы в
четырех областях анализа значимые
Соответствует
при постановке анализа с
контрольным образом К все
сигналы от всех мишеней в
поле Дикого типа значимые,
для всех значимых сигналов в
поле Мутаций Krano>3‘ , все
сигналы контрольной полосы
в четырех областях анализа
значимые
п.1.2 Технические
характеристики
Аналитическая специфичность:
Отрицательный контроль:
при постановке анализа с
контрольным образом К все сигналы
от всех мишеней в поле Дикого типа
значимые, для всех значимых
сигналов в поле Мутаций Кгано >3;
все сигналы контрольной полосы в
четырех областях анализа значимые
Соответствует
при постановке анализа с
контрольным образом К все
сигналы от всех мишеней в
поле Дикого типа значимые,
для всех значимых сигналов в
поле Мутаций Кгаио >3; все
сигналы контрольной полосы
в четырех областях анализа
значимые
Контроль контаминации:
при гибридизации с использованием
продуктов ПЦР2, проведенной без
добавления ДНК-матрицы (с
деионизованной водой), - отсутствуют
значимые сигналы в поле Дикого типа и
в поле Мутаций; все сигналы
контрольной полосы в четырех
областях анализа значимые
Соответствует
при гибридизации с
использованием продуктов
ПЦР2, проведенной без
добавления ДНК-матрицы (с
деионизованной водой), -
отсутствуют значимые сигналы в
поле Дикого типа и в поле
Мутаций; все сигналы
контрольной полосы в четырех
областях анализа значимые
Амплификационный буфер
(C.E0070218): I пр. (740 мкл)
Соответствует
1 пр. (740 мкл)
Taq (С.Е0071216): 1 пр.(110мкл) Соответствует
1 пр. (110 мкл)
А1 (с. Е0070218): 1 пр. (30 мкл) Соответствует
1 пр. (30 мкл)
А2 (с. Е0070218 ): 1 пр. (30 мкл) Соответствует
1 пр. (30 мкл)
АЗ (с. Е0070218 ): 1 пр. (30 мкл) Соответствует
1 пр. (30 мкл)
п.1.3 Комплектность В1 (с. Е0070218): 1 пр. (30 мкл) Соответствует
1 пр. (30 мкл)
В2 (с. Е0070218 ): 1 пр. (30 мкл) Соответствует
1 пр. (30 мкл)
ВЗ (с. Е0070218): 1 пр. (30 мкл) Соответствует
1 пр. (30 мкл)
К (с. Е0070218 ): 1 пр. (20 мкл) Соответствует
1 пр, (18 мкл)
Деионизованная вода
(с. Е0070218): I фл. (10 мл)
Соответствует
1 фл. (10 мл)
Гибридизационный буфер
(с. Е0070218): 1 фл.(Юмл)
Соответствует
1 фл. (10 мл)
--- стр. 49 ---
llyHKT
' ТУ
Наименование
показателя Требования ТУ Результаты контроля
' Микрочип в гибридизационной камере
в фольгированном пакете
(с. Е0070218):5 шт.
Соответствует
5 шт.
Паспорт на набор реагентов -1 шт. Соответствует
1 шт.
Инструкция по применению - 1 шт. Соответствует
1 шт.
п.1.4 Упаковка
Компоненты набора, паспорт и
инструкция по применению должны
быть помещены в пачку (размер
155x110x90 мм) из картона
Соответствует
Компоненты набора, паспорт и
инструкция по применению
помещены в пачку
(размер 155x110x90 мм) из
картона _ — _
Паспорт выдан 02.09.2019
Срок годности набора до 01.09.2020
Условия хранения -30 ...-18 °С
Условия транспортирования -30..
транспортировка с использованием
хладоэлементов не более пяти суток.
^^О П И Я ВЕР.
ооГГ“ “ "Ь
18 °С. Допускается
термоконтейнера и
ПРИМЕНЕНИЕ ДЛЯ ДИАЕНОСТИКИ 1N VITRO
Набор соответствует ТУ 21.20.23-261-98539446-2016