Набор реагентов "АГАТ-ВИЧ-1,2" тест-система иммуноферментная для одновременного выявления антител к вирусу иммунодефицита человека типов 1 и 2 (ВИЧ-1, ВИЧ-2) и антигена p24 ВИЧ-1 по ТУ 9388-080-70423725-2007 в составе (см.приложение на 1 листе): — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 ---
УТВЕРЖ ДЕН А
Приказом Росздравнадзора
от 200 г. №
"УТВЕРЖДАЮ^
Президент ЗА
И Н С Т Р У К Ц И Я
по применению набора реагентов
"А Г А Т -В И Ч -1 ,2 "
Тест-система иммуноферментная для одновременного выявления антител к вирусу
иммунодефицита человека типов 1 и 2 (ВИЧ-1 и ВИЧ-2) и антигена р24 ВИЧ-1.
Регистрационное удостоверение № ........................................от "..."....................200_ г.
Н А З Н А Ч Е Н И Е
Одновременное выявление антител к вирусу иммунодефицита человека первого и
второго типов (ВИЧ-1 и ВИЧ-2) и антигена р24 ВИЧ-1 в сыворотке (плазме) крови
человека.
С О С Т А В Н А Б О Р А
Иммуносорбент - смесь рекомбинантных антигенов ВИЧ-1 и ВИЧ-2 и
моноклональных антител к антигену р24 ВИЧ-1, сорбированная в лунках полистироловых
разборных планшетов.
К^АТ - контрольный положительный образец-АТ - сыворотка крови человека,
содержащая антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2, не содержащая антитела к ВГС, антиген р24 ВИЧ-1
и HBs-антиген, инактивированная прогреванием в течение 3 ч при температуре 56° С;
прозрачная красного цвета жидкость.
К^АГ - контрольный положительный образец-АГ - сыворотка крови человека,
содержащая рекомбинантный антиген р24 ВИЧ-1, не содержащая антитела к ВИЧ-1, ВИЧ-2,
ВГС и HBs-антиген, инактивированная прогреванием в течение 3 ч при температуре 56°С;
прозрачная зеленого цвета жидкость.
К - контрольный отрицательный образец - сыворотка крови человека, не
содержащая антитела к ВИЧ-1, ВИЧ-2, ВГС, антиген р24 ВИЧ-1 и HBs-антиген,
инактивированная прогреванием в течение 3 ч при температуре 56°С; прозрачная светло-
желтого цвета жидкость.
Конъюгат 1 - смесь меченых биотином моноклональных человеческих антител
против антигена р24 ВИЧ-1 и меченых биотином рекомбинантных белков ВИЧ-1 и ВИЧ-2;
прозрачная синего цвета жидкость.
РРК-1 - раствор для разведения конъюгата-1; прозрачная или слегка
опалесцирующая, бесцветная жидкость, допускается образование осадка, разбивающегося
--- стр. 2 ---
при встряхивании.
Конъюгат 2 - смесь стрептавидина, конъюгированного с пероксидазой хрена, и
рекомбинантных белков ВИЧ-1 и ВИЧ-2, меченых пероксидазой хрена; прозрачная или
слегка опалесциру^ощая, бесцветная жидкость.
РРК-2 раствор для разведения конъюгата-2; прозрачная или слегка
опалесцирующая, красного цвета жидкость.
СБР -субстратный буферный раствор; прозрачная бесцветная жидкость.
ТМ Б - хромоген; прозрачна'я бесцветная или светло-желтого цвета жидкость.
ФСБ-Т(ксйцентрат х25) - 25-кратный концентрат фосфатно-солевого буферного
раствора с тайном; прозрачная или слегка опалесцирующая, бесцветная жидкость,
допускается выпадение кристаллического осадка, растворяющегося при температуре 37 °С
в течение 30 мин, допускается расслаивание компонентов.
Стоп-реагент - 0,5 моль/л водный раствор серной кислоты; прозрачная
бесцветная жидкость.
Набор вь1[пускается в двух вариантах комплекта 1 1ии - комплект № 1 (на 192
определения, включая контрольные) и комплект № 2 (на 96 определений, включая
контрольные).
Вместо СБР и ТМ Б в обоих комплектах может быть использован готовая смесь
СБР-ТМ Б - субстратный раствор с тетраметилбензидином; прозрачная бесцветная
жидкость. ''
АН АЛ И (ТИ ЧЕСКИ Е И Д И А 1]Н О С ТИ Ч ЕС К И Е Х А Р А К Т Е Р И С Т И К И
Чувствительность на сыворотках стандартных панелей, содержащих антитела к
ВИЧ-1 (ОСО 42-28-212-02П) и к ВИЧ-2 (ОСО 42-28-216-02), - 100%. Специфичность на
сыворотках стандартной панели, не содержащих антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2, антигена р24
ВИЧ-1 (ОСО 42-2J|-214-02П), - 100 %.
Тест-система выявляет антиген р24 ВИЧ-1 (ОСО 42-28-375-05) в концентрации -
25 пг/мл.
М ЕРЫ П РЕ Д О С Т О Р О Ж Н О С Т И
Набор биологически безопасен, однако исследуемые образцы следует считать
потенциально инфицированными, в связи с чем обращение с ними требует соблюдения
требований безойасности при иммун(|)логических (серологических) исследованиях по
обнаружению в крови людей антигенов микроорганизмо^-й^детжт патогенности (без
накопления возбудителя) и/или антител к ним (СШ Ж2^3^!-^^^|^тарные правила
"Безопасность работы с микроорганизмами III - IV rpynwM&reHHOCTir^g^MHHTaMH'').
--- стр. 3 ---
^ С П О С О Б П Р И М Е Н Е Н И Я
Достоверность результатов зависит от строгого выполнения следующих правил:
• При проведении анализа нельзя использовать реагенты из наборов разных
серий или смешивать их в процессе приготовления растворов.
• Для приготовления растворов следует использовать чистую посуду.
• Для приготовления исследуемых проб и реагентов использовать автоматические
пипетки с погрешностью измерения не более 3 % .
• В процессе промывки необходимо полностью заполнять лунки планш ета
раствором Ф С Б -Т .'-
• Время между заполнением и опорожнением лунок планшета растворами и
реагентами долщно быть не менее 30 с. Не допускать высыхания лунок планшета между
отдельными опер^иями.
• При внесении в лунки РРК-1 нельзя касаться наконечником пипетки
V '
поверхности планшета и раствора, находящегося в лунках.
• Для работы с исследуемыми сыворотками и контрольными образами
' ( рекомендуется использовать одноразовые наконечники для пипеток.
• Для работы с субстратом и ТМ Б необходимо использовать отдельные емкости для
растворов, наконечники для пипеток, посуду.
• Пипетки и рабочие поверхности обрабатывать раствором спирта этилового с
объемной долей io %. Не использовать хлорамин и другие<хлорсодержащие вещ ества.
Оборудование и материалы
Дозаторы (пипетки полуавтоматические одноканальные и многоканальные
переменного объема) для внесения реагентов в лунки планшета с погрешностью дозирования
I * I.
не более 5 % .
Автоматические промыватели или восьми- и двенадцатиканальные пипеточные
дозаторы для промывания лунок планшета.
Термоста/на 37 “ С . (
Спектрофотометр.
Вода очищенная (дистиллированная или деионизированная).
Исследуемые образцы
Для проведения анализа использовать образцы сыворотки (плазмы) крови
человека объем ом " не менее 100 м кл. '
Для анализа можно использовать сыворотку (плазму) крови человека как
свежеприготовленную, так и хранившуюся не более 5 сут при температуре от 2 °С до 8 °С
или не более одного года при температуре минус 20 °С .
I , -
Исследуемые сыворотки готовить и хранить исключающих
возможность бактериального пророста.
Не использовать сыворотки с признаками бактериаль
гиперлипидные и Л и подвергавшиеся мноркратному заморажив;
3
--- стр. 4 ---
C biB opoT i^li, содержащие взвешенные частицы, 'реред использованием следует
центрифугировать в течение 15 мин при скорости вращения 3000 об/мин.
Каждый образец сыворотки отбирать новым наконечником.
Приготовление рабочих растворов реагентов для И Ф А
If
Перед проведением анализа набор выдержать в течение 30 мин при температуре от
18° С до 25° С .
Объёмы реагентов для проведения анализа на необходимом количестве стрипов или
на целом планш етЬ приведены в таблице. (
Расход реагентов для приготовления рабочих растворов
Кол-во
стрипов
Ф С Б-Т Рабочий раствор
конъю гата 1
Р абочий раствор
конъю гата 2
Рабочий
субстратны й
буф ерны й раствор
ФСБ[-
Т(концем трат
х 2 5 )(м л )
В ода
очищ .
(м л)
К о н ъ ю га т -1
(м кл)
РРК-1
(м л)
(онък)гат-2
(м кл)
РРК -2
(м л)
СБР
(м л)
ТМ Б
(мкл)
1 5 , д о 125 1ха 0.5 ]хЬ 1 1 80
2 1 0 д о 250 2ха 1.0 2 хЬ 2 2 160
3 15Г д о 375 1 З ха 1.5 ЗхЬ 3 3 240
4 20 д о 500 4 х а 2.0 4хЬ 4 4 320
5 25 д о 625 5х а 2.5 5хЬ 5 5 400
6 30 д о 750 б х а 3.0 бхЬ 6 6 480
7 35 д о 875 7 х а 3.5 7хЬ 7 7 560
8 4 0 ' д о 1000 8x i 4.0 8хЬ 8 8 640
9 45 д о 1125 9 х а 4.5 9хЬ 9 9 720
1 0 50 д о 1250 Ю ха 5.0 ЮхЬ 1 0 1 0 800
1 1 55 д о 1375 П х а 5.5 П х Ь 1 1 1 1 880
1 2 60 до 1500 1 2ха 6.0 12 хЬ 1 2 1 2 960
а = ... мкл (объем конъюгата-1 , вносимый в РРК-1 из расчета на 1 стрип;
указы вается для кфкдой серии набора и приводится на этикетке флакона),
Ь = ... мкл ( объем конъюгата-2, вносимый в РРК-2 из расчета на 1 стрип;
указывается для каждой серии набора и приводится на этикетке флакона).
Приготоеление рабочего промывочного раствора
Готовить 1 $ а 15 мин до проведения анализа. '
П ри нали(1ии во флаконе с ФСБ-Т(концентрат х25) осадка флакон с концентратом
выдержать при температуре 37 °С до полного растворения солей.
Содерж ирЛ ое одного флакона р ФСБ-Т(концентрат х25) перенести в мерный
цилиндр и довести объем раствора до 1500 мл водой очищенной.
П ри дробной постановке ИФА в мерный цилиндр отобрать необходимые объемы
ФСБ-Т(концентрат х25) и воды очищенной в соответствии с таблицей расхода реагентов.
Приготоё^енив рабочего раствора конъюгата- 1 ,
Готовить перед использованием.
В соответствии с таблицей расхода реагентов из
необходимый объем раствора и добавить к нему необходим
Ь ■
отобрать
:рнъюгата-1 .
--- стр. 5 ---
I ^ 5
Раствор тщательно перемешать, не допуская образования пены.
Рабочий раствор конъюгата -1 хранить перед употреблением не более 30 мин при
температуре от 18 ° С до 25 ° С
П ригот о^еиие рабочего раствора конъюгата- 2
Готовить перед использованием.
В соответствии с таблицей расхода реагентов из флакона с РРК-2 отобрать
необходимый об^ем раствора и добавить к нему необходимый объём Конъюгата-2.
Раствор тщательно перемешать, не допуская образования пены.
Рабочий раствор конъюгата-2 хранить перед употреблением не более 90 мин при
температуре от 18 ^ °С до 25 °С
Приготовление рабочего субстратного буферного раствора
Готовить непосредственно перед использованием в защищенном от света месте.
Из флакона с СБР отобрать необходимое количество раствора и добавить на
отобранный объё|л ТМБ в соответствии с таблицей. Раствор тщательно перемешать.
Рабочий субстратный буферный раствор хранить не более 15 мин при температуре
от 18 °С до 25 °С
Подготовка остальных реагентов
К , К ^ А т , f^ ^ A F , стоп-реагент тотовы к использованию.
Неиспользованные реагенты могут храниться в герметично закрытых флаконах при
температуре от 2 " С до 8 °С до конца срока годности набора.
2. Проведение И Ф А (
Перед началом работы освободить от упаковки необходимое число стрипов и
закрепить их на рам ке. Неиспользованные стрипы можно хранить в плотно закрытом пакете
с влагопоглотителем при температуре от 2 °С до 8 ° С не более 1 мес.
Планшет lip oM b iT b один раз рабочим промы вочны й! раствором, при этом в каждую
лунку планшета вносить не менее 300-400 мкл раствора. По окончании промывки остатки
жидкости удалить, активно постукивая планшетом по сложенной в несколько раз
фильтровальной % маге.
В одну лурку внести 100 мкл K ” ^a t, в одну лунки - 100 мкл К ^а г, в две лунки - по 100
м кл К . В остальные лунки планшета внести по 100 мкл исследуемых сывороток.
Сразу поале внесения контрольных образцов и образцов исследуемых сывороток
внести во все лунки планшета по 50 мкл рабочего раствора конъюгата -1. Содержимое лунок
перемешать осторожным постукиванием по краям планшета.
Планшет накры ть крыш кой или заклеить клейкой пленкой и инкубпровать в
60 мин при тем пер^атуре 37 °С. ^ { ^ ЭКОгзе
--- стр. 6 ---
M o окончании инкубации удалить содержимое лунок и промыть планшет шесть раз
рабочим промывочным раствором. Для этого внести в каждую лунку планшета раствор до
полного заполнения, а затем удалить co^ j^ ep ж и м oe лунок в емкость с дезраствором. О статки
раствора из лунок удалить, активно постукивая перевернутым планшетом (лунками вниз) по
сложенной в несколько раз фильтровальной бумаге.
Внести в каждую лунку планшета по 100 м кл рабочего раствора конъюгата -2.
Планшет jj^ a K p b iT b крыш кой или заклеить клейкой пленкой и инкубировать в течение
30 мин при температуре 37 °С.
По окончании инкубации удалить содержимое лунок и промыть планшет шесть раз
рабочим промывочным раствором.
Внести каждую лунку планшета по 100 мкл рабочего субстратного буферного
раствора.
Планшет накры ть крыш кой или заклеить клейкой пленкой и инкубировать в
защищенном от света месте в течение 20 М и н при температуре 37 °С.
Остановить реакцию внесением в каждую лунку планшета по 100 мкл стоп-реагента.
Через 5 мин, но не позднее чем через 20 мин, провести учет результатов анализа.
УЧЕТ И ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
П ри ручной постановке ИФА измерить величину оптической плотности (ОП)
растворов в лунках планшета на спектрофотометре при длине волны 450 нм. Нулевой
уровень ("бланк"), установить по воздуху.
Время м ец ^ду остановкой реакции и измерецием ОП не должно превыш ать 5 мин.
Результаты учитывать только при соблюдении следующих условий:
среднее значение ОП в лунках с К” (О П к -ср ) не более 0,2;
значения рП в лунках с К " ^а т (ОГ|к+а т) и К’ ^а г (ОПк+а г) не менее 1,0.
Рассчитать О П к р и т по формуле
О П к р и т = О П к -ср + А, где А =..........(указывается для каждой серии набора).
Исследуемую сыворотку расценивать как положительную, т.е. содержащую
антитела к ВИЧ|1, и/или к ВИЧ-2, и/или антиген р24 ВИЧ-1, если ОП исследуемой
л
сыворотки равна или превышает О П к р и т -
Исследуемую сыворотку расценивать к ак отрицательную, если значение О П
сыворотки ниже бПкрт.
Ь
V
у в . М ж
--- стр. 7 ---
ФОРМА ВЫПУСКА
Выпускается в двух вариантах комплектации:
РеагентV Комплект № 1 (на 192
определений):
Комплект № 2 (на 96
определения):
Иммуносорбент ^ 2 ш т. * 1 ш т.
К + А Т 1 флакон (2,0 мл). 1 флакон (2,0 мл).
К + А Г 1 флакон (2,0 мл). 1 флакон (2,0 мл).
К 1 1 флакон (4,0 мл). 1 флакон (4,0 мл).
Конъюгат-1 1 флакон (1,(| мл). 1 флакон (0,5 мл).
РРК -1 1 флакон (13 мл). 1 флакон (7 мл).
Конъюгат-2 1 флакон (1,0 мл). 1 флакон (0,5 мл).
РРК-2 2 флакона (13,0 мл). 1 флакон (13,0 мл).
С В Р j f 2 флакона (12,0 мл). 1 флакон (12,0 мл).
1'М Б ) 1 флакон (2,5 мл). ^ > 1 флакон (1,25 мл).
ФСБ-Т(концентрат х25) 2 флакона (по 60,0 мл). 1 флакон (60,0 мл).
Стоп-реагент 1 флакон (25,0 мл). 1 флакон (12,5 мл).
СБР-ТМБ (вместо СБР и
ТМБ) I f .
1 флакон (25,0 мл). 1 флакон (12,5 мл).
' СРОК г о д н о с т и
Срок годности набора - 1 год. Набор с истекшим сроком годности применению не
подлежит. I
ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ И ХРАНЕНИЕ
Т ранспортирование
П ри температуре от 2 °С до 8 °С . Замораживание не допускается. Допускается
тран сп ор ти р ован !^ ^ ^ при температуре от 9 °С до 25 °С в течение 72 ч. На дальние расстояния
- только авиатранспортом.
Хранение
В упаковке предприятия-изготовителя в сухом, защищенном от света месте при
температуре от 2 до 8 °С. Замораживание не допускается.
, УСЛОВИЯ ОТПУСКА
Для лечебно-профилактических и санитарно-профилактических учреждений.
По вопросам, касающимся качества набора, следует обращаться по адресу 142530,
М осковская обл., г. Электрогорск, ул. Буденного, д.1,ЗА0 «ЭКОлаб» тел: (49643)3-1374, 3-
2311, факс 3-3143, и в ФГУН Государственный 1Ш И=:Хтандартизации и контроля
медицинских биологических препаратов им. JI.A.Ta^i^^i^:;4^^;^ecy: 119002, г. М осква,
пер. Сивцев Вражек, 41, тел./. (495) 241-39-22, факс.
JП резидент' ЗАО “ЭКОлаб
Руководитель Гос.испытаний заведуют!;
арбовирусных инфекций, риккетсиозов и СПИД
Роспотребнадзора^' профессор
.М арданлы
СиК М ИБП против
им. Л.А.Тарасевича
М. С. Воробьева
• f ' i
--- стр. 8 ---
! s„..