Набор реагентов для определения содержания общего тироксина в сыворотке или плазме крови человека методом радиоиммунологического анализа (РИА-Т4 общий-НБ) по ТУ 9398-011-40310348-2011 в составе (см.приложение на 1 листе): — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 --- УТВЕРЖДЕНА Приказом Росздравнадзора о т « » 2011 г.№ УТВЕРЖДАЮ . А.В; Курдюков 1 2 >к(Р^Гм/0>л * 20^1 г. \ ^ - У ' ■ I ИНСТРУКЦИЯ п о ПРИМЕНЕНИЮ НАБОРА РЕАГЕНТОВ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ ОБЩЕГО ТИРОКСИНА В СЫВОРОТКЕ ИЛИ ПЛАЗМЕ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА МЕТОДОМ РАДИОИММУНОЛОГИЧЕСКОГО АНАЛИЗА (РИА-Т4 общий -НБ) i i - j ' 2011 г. --- стр. 2 --- 1.1. Набор реагентов РИА-Т 4 общий-НБ предназначен для определения общего ти роксина (Т4) в сыворотке или плазме крови человека методом радиоиммунологического ана лиза (РИА). Набор предназначен для применения только in vitro. 1.2. Количественное определение общего тироксина необходимо для диагностики и контроля за функцией щитовидной железы. 1.3. Набор рассчитан на проведение анализа в дубликатах 42 неизвестных образцов, 6 калибровочных проб, 1 пробы контрольной сыворотки, а также одной пробы общей актив ности Т4, меченного '^ ^ 1 , всего 100 определений. 1.4. Продолжительность анализа составляет 1,5 ч. 1.5. Диапазон определяемых концентраций общего Т 4 в образцах сыворотки или плазмы крови человека - 14-400 нмоль/л. 2. ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА 2.1. Принцип действия. Принцип работы набора состоит в следующем. В аналитической пробирке, содержа щей компоненты набора и образец сыворотки или плазмы крови, во время инкубации уста навливается равновесие между Т 4, меченным и эндогенным гормоном анализируемого образца сыворотки или плазмы крови с антителами, иммобилизованными на стенках про бирки. Количество связанного антителами Т 4, меченного '^ ^ 1 , находится в обратной зависи мости от концентрации общего Т 4 в крови. Разделение свободного и связанного антителами Т4 осуществляют удалением инкубационной среды из пробирок с помощью водоструйного насоса. Концентрацию общего Т 4 в неизвестных образцах находят по калибровочному гра фику зависимости связанного Т 4, меченного от концентрации общего Т 4 в калибровоч ных пробах. 2.2. Состав набора. 2.2.1. В состав набора РИА - Т 4 общий-НБ входят следующие компоненты; тироксин , меченный '^ ^ 1 , готовый к использованию - 1 флакон (55 мл), общая ак тивность менее 110 кБк; - пробирки полистирольные с иммобилизованными моноклональными антителами к Т4 , готовые к использованию - 100 шт.; - калибровочные пробы на основе сыворотки крови человека с азидом натрия (< 0,01%), содержащие известные количества общего Т 4 : О нмоль/л; 25 нмоль/л; 50 нмоль/л; 100 нмоль/л; 200 нмоль/л; 400 нмоль/л, концентрациии общего Т 4 в калибровочных пробах 1. Н А ЗН А Ч Е Н И Е --- стр. 3 --- могут несколько отличаться от указанных величин, точные значения указаны на этикетках флаконов, готовые к использованию - 6 флаконов (по 0,5 мл); контрольная сыворотка с известным содержанием общего Т 4 на основе сыворотки крови человека с азидом натрия (< 0,0 1%), лиофилизат - 1 флакон. 3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ 3.1. Специфичность Перекрестная реакция моноклональных антител к Т 4 со структурными аналогами Т 4 приведена в таблице 1. Таблица 1. Исследуемые вещества Перекрестная реакция, % L -тироксин (L-T 4) 100 D -тироксин (L-T 4) 33 3,3,5- трийодо - L - тиронин (L-T 3) 0,8 3,3,5-трийодо - D - тиронин (D-T 3) 10,2 3,3,5-трийодтироуксусная кислота 6,6 3,5-трийодтиропропионовая кислота 2,8 3.2. Чувствительность Минимальная концентрация общего Т 4, определяемая с помощью набора, составляет не более 14 нмоль/л. 3.3 Воспроизводимость Коэффициент вариации результатов определений концентрации общего Т 4 в образцах сыворотки или плазмы крови не превышает 8 % . 3.4. Тест на «линейность» Отклонение от рассчетной величины концентрации общего Т 4 в диапазоне концентра ций 25-400 нмоль/л составляет ± 10%. 3.5. Тест на «открытие» Процент «открытия» Т 4 в пробе, полученной при смешивании одинаковых количеств контрольной сыворотки и калибровочной пробы с содержанием 50 нмоль/л общего Т 4, со ставляет 90-110%. 3.6. Рекомендуется в каждой лаборатории при использовании набора уточнить диапа зон нормальных величин для обследуемого контингента людей. 4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ 4.1. Потенциальный риск применения набора - класс 2а. 1 ( D --- стр. 4 --- 4.2. Тироксин, меченный '^ ^ 1 , является источником мягкого гамма-излучения. Пери од полураспада изотопа ['^ ^ 1] составляет 60,04 суток. При работе с набором следует со блюдать правила работы с радиоактивными веществами по 3-му классу, изложенные в «Нор мах радиационной безопасности НРБ-99/2009» и в «Основных санитарных правилах обеспе чения радиационной безопасности ОСПОРБ-99/2010». 4.3. Некоторые реагенты набора (калибровочные пробы, контрольная сыворотка) со держат азид натрия в качестве консерванта. Азид натрия может вступать в реакцию со свин цом, медью, латунью, образуя взрывоопасные азиды металлов. Отработанные реагенты перед удалением следует разбавлять большим количеством воды. 4.4. При работе с набором следует соблюдать «Правила устройства, техники безопас ности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения СССР» (Москва, 1981 г.). 4.5. При работе с набором следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, так как образцы крови человека следует рассматривать как потенциально инфици рованные, способные длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вирус гепатита или любой другой возбудитель вирусных инфекций. Перчатки следует сдавать вместе с другими радиоактивными отходами. 4.6. Рабочие места должны быть обеспечены приточно-вытяжной вентиляцией. 4.7. Химическая посуда и оборудование, которые используются в работе с набором, должны быть соответствующим образом промаркированы и храниться отдельно. 4.8. Запрещается приём пищи, использование косметических средств и курение в по мещениях, предназначенных для работы с набором. 5. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ 5.1. Гамма-счетчик колодезного типа; - прибор для встряхивания пробирок ( не менее 350 встряхиваний в мин); - насос водоструйный; - холодильник бытовой , поддерживающий температуру (2-8) °С; - пипетки полуавтоматические одноканальные с переменным или фиксированным объёмом со сменными наконечниками, позволяющие отбирать объёмы жидкостей 0,05 и 0,5 мл, аттестованные по значению средней дозы и сходимости результатов пипетирования (по грешность не более 3 %); - пробирки пластмассовые вместимостью 3,0 - 5,0 мл с пробками - 2 шт.; - перчатки резиновые или пластиковые; --- стр. 5 --- - бумага фильтровальная лабораторная; - вода дистиллированная. 6 . АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ 6.1. Негемолизированная сыворотка или плазма крови человека. Плазму крови полу чают с использованием в качестве антикоагулянта ЭДТА. 7. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА 7.1. Подготовка реагентов для анализа 7.1.1 Компоненты набора и исследуемые образцы сыворотки или плазмы крови следу ет вьщержать при температуре (18-25)°С в течение времени не менее 30 мин. 7.1.2. Во флакон, содержащий контрольную сыворотку, внести 0,5 мл дистиллирован ной воды и вьщержать при комнатной температуре в течение 10 мин, после чего осторожно перемешать содержимое флакона, избегая образования пены. При вскрытии и растворении необходимо следить, чтобы на пробках не осталось сухого вещества. Контрольную сыворотку, подготовленную к работе, можно хранить при температуре (2-8)°С в течение 24 ч; при необходимости более длительного хранения (до 3 мес) кон трольную сыворотку следует разделить на аликвоты и хранить при температуре не выше М И Н У С 20 °С . Повторное замораживание исключить. 7.1.3. Пробирки с иммобилизованными моноклональными антителами к Т 4 маркиро вать следующим образом ( в дубликатах): Т - для определения общей активности тироксина, меченного , В 0-В5 - калибровочные пробы общего Т 4; В кс - контрольная сыворотка; Вх - исследуемые образцы сыворотки или плазмы крови. 7.2. Проведение анализа. 7.2.1. В пробирки В 0-В 5 внести по 0,02 мл соответствующих калибровочных проб. В пробирки В кс внести по 0,02 мл контрольной сыворотки. В пробирки Вх внести по 0,02 мл исследуемых образцов сывороток или плазм крови человека. 7.2.2. Во все пробирки внести по 0,5 мл моноклональных антител к Т 4 , меченных ’^ ^ 1 . 7.2.3. Инкубировать все пробирки в течение 1 ч при постоянном встряхивании на приборе для встряхивания пробирок (300 - 400 встряхиваний в мин) и комнатной температу ре (18-25) °С. 7.2.4. После окончания инкубации тщательно удалить из всех пробирок, кроме Т, --- стр. 6 --- жидкость с помощью водоструйного насоса. 7.2.5. Все пробирки поместить в гамма-счетчик и измерить скорость счета в каж дой пробирке в течение 1 мин. 7.2.6. Последовательность внесения реагентов в пробирки и проведение других опе раций анализа приведены в таблице 2. Данную последовательность не нарушать! Таблица 2 Пробир ки (в дубли катах) Последовательность операций Калибро вочные пробы, мл Контроль ная сыво ротка, ис следуемые сыворотки или плаз мы корви, мл Тироксин, меченный ’^ ^1, мл Инкубировать в течение 1 ч при постоян ном встряхива нии После инкуба ции тщательно удалить из всех пробирок, кроме Т, жидкость с помощью водо струйного насоса Т - - 0,5 Во 0,02 - 0,5 В,-В5 0,02 - 0,5 В к с - 0,02 0,5 Вх - 0,02 0,5 Измерить скорость счета в каждой пробирке в течение 1 мин. 8. РЕГИСТРАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ 8.1. Найти среднее арифметическое значение скорости счета (имп/мин) для каждой пары пробирок и в соответствии с маркировкой получить значения величин В 0-В5 ,Вкс и Вх. 8.2. Рассчитать величину отношения Во/Т (%), где: Во - средняя скорость счета в пробирках с калибровочной пробой, содержащей О нмо.ть/л общего Т4, Т - общая активность тироксина, меченного '^^1, измеряемая средней скоростью счета в пробах Т. Значение Во/Т должно быть не менее 60%. 8.3. Рассчитать величину отклонения В/Во (%) для каждой калибровочной пробы, контрольной сыворотки и исследуемых образцов, где; Bj - среднее арифметическое значение скорости счета '^ ^ 1 в пробирках В0-В5 ,Вкс и Вх. 8.4. Построить калибровочный график в полулогарифмических координатах, откла дывая на оси ординат (линейная) отношение В/Во (%), а на оси абсцисс (логарифмическая) - значения концентраций общего Т 4 (нмоль/л) в соответствующих калибровочных пробах. --- стр. 7 --- 8.5. Определить по калибровочному графику содержание общего Т 4 в исследуемых образцах сыворотки или плазмы крови человека. Для перевода молярной концентрации в массовую следует пользоваться соотношени ем: нмоль/л X 0,777 = нг/мл. 9. УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ АНАЛИЗА 9.1. При использовании набора РИА-Т 4 общий-НБ концентрация общего тироксина (Т4) в сыворотке крови здоровых лиц в возрасте от 20 до 45 лет составляет 60-160 нмоль/л. 10. УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЯ НАБОРА 10.1. Набор реагентов РИА-Т 4 общий -НБ должен храниться в упаковке предприятия- изготовителя при температуре (2-8) °С в течение всего срока годности набора. Допускается хранение набора при температуре до 25 °С не более 3 сут. 10.2. Флаконы с калибровочными пробами и раствором тироксина, меченного ’^ ^ 1 , после вскрытия можно хранить в плотно закрытом виде при температуре (2-8) °С в течение всего срока годности набора. Вскрытую коробку с пробирками можно хранить при температуре (2-8) °С в течение всего срока годности набора. Рекомендуется не нарушать после вскрытия коробки с пробир ками целостность упаковки для неиспользованных пробирок. 10.3. Для проведения анализа не следует использовать гемолизированную, мутную и гиперлипидимическую сыворотку или плазму крови человека. 10.4. Образцы сыворотки крови можно хранить при температуре (2-8) °С в том случае, когда анализ проводят в течение 24 ч после взятия крови. Образцы сыворотки или плазмы крови можно хранить при температуре минус 20 °С в течение более длительного времени - до 3 мес (допускается только однократное замораживание и размораживание образцов). Раз мораживание образцов проводят при комнатной температуре (18-25) °С. 10.5. Исследуемые образцы сыворотки или плазмы крови следует проверять на оста точную активность радионуклидов, если обследуемому лицу до отбора крови вводили радио активные препараты. 10.6. Запрещается использовать реагенты из наборов других фирм-производителей. 10.7. Для получения надёжных результатов необходимо строгое соблюдение инст рукции по применению набора. По вопросам, касающимся качества набора РИА-Т 4 общий-НБ, следует обращаться в ЗАО «Нуклидбиомед» по адресу: