Набор реагентов для определения содержания тиреотропного гормона в сыворотке или плазме крови человека методом иммунорадиометрического анализа (ИРМА-ТТГ-НБ) по ТУ 9398-008-40310348-2011 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 --- У Т В Е Р Ж Д Е Н А П риказом Росздравнадзора о т « » 2011 г .№ У Т В Е Р Ж Д А Ю Г^вдрал ,3 ^ 'о ректог ;» А.В. Кодю ков 2011 г. И Н С Т Р У К Ц И Я по П Р И М Е Н Е Н И Ю НА БО РА РЕА ГЕН ТО В Д Л Я О П РЕ Д Е Л Е Н И Я С О Д Е РЖ А Н И Я ТИ РЕО ТРО П Н О ГО ГО РМ О Н А В СЫ В О РО ТК Е И Л И П Л А ЗМ Е К РО В И ЧЕЛО ВЕКА М ЕТО ДО М И М М У Н О РА Д И О М Е Т РИ Ч Е С К О ГО А Н А Л И ЗА (И РМ А -ТТГ-Н Б) V . я * . г 2 0 1 1 г. Ф --- стр. 2 --- 1.1. Н абор реагентов И РМ А -Т Т Г-Н Б предназначен для определения содерж ания ти- реотропного горм она (Т Т Г) в сы воротке или плазме крови человека методом иммунорадио- метрического анализа (И РМ А ). Н абор предназначен для прим енения только in vitro. 1.2. Т иреотропны й гормон секретируется передней долей гипоф иза, является глико протеином с м олекулярной м ассой около 20 кДа. ТТГ состоит из двух различны х некова лентно связанны х субъединиц - альф а и бета. А льф а-субъединица является общ ей для таких гликопротеидны х горм онов, как ф олликулостим улирую щ ий горм он (Ф СГ), лю теинизирую - щий гормон (ЛГ) и хорионический гонадотропин (ХГ). Бета-субъединица определяет биоло гическую и им м унологическую специф ичность, что позволяет распознавать и отличать ТТГ от других гликопротеидны х горм онов с пом ощ ью антител. Т Т Г стим улирует активность щ и товидной ж елезы , усиливая как иодирование, так и вьщ еление тиреоидны х гормонов - ти роксина (Т 4) и трийодтионина (Тз). В свою очередь связы вание Тз - рецепторами ТТГ - сек- ретирую щ их клеток гипоф иза зам ы кает цепь отрицательной обратной связи, которая под держ ивает концентрацию тиреоидны х гормонов на постоянном уровне. В связи с клю чевой ролью ТТГ в регуляции синтеза и секреции тиреоидны х горм онов изм ерение его концентра ции в крови им еет важ ное значение для диагностики и м ониторинга наруш ений в системе «гипофиз - щ итовидная железа». 1.3. Н абор рассчитан на проведение анализа в дубликатах 41 неизвестны х образцов, 7 калибровочных проб и 2 проб контрольны х сы вороток, всего 100 определений. 1.4. П родолж ительность анализа составляет 2 ч. 1.5. Д иапазон определяем ы х концентраций ТТГ в образцах сы воротки или плазмы крови человека - 0,02-50 мМ Е/л. 2. Х А Р А К Т Е Р И С Т И К И Н А Б О Р А 2.1. П р и н ц и п д е й с т в и я . В основе определения ТТГ леж ит им м унорадиом етрический метод. В наборе исполь зуются м оноклональны е антитела, специф ичны е к двум различны м эпитопам молекулы ТТГ и не проявляю щ ие м еж ду собой конкуренции. К алибровочны е или исследуемы е образцы ин кубируют в пробирках с им м обилизованны м первы м м оноклональны м антителом в присут ствии второго м оноклонального антитела, м еченного ’^^1. П осле инкубации содерж имое про бирок удаляю т и изм еряю т связанную активность '^^1 на гам м а - счетчике. Концентрацию ТТГ, прямо пропорциональную изм еренной скорости счета , определяю т по калибровочному графику. 1. Н А З Н А Ч Е Н И Е --- стр. 3 --- 2.2.1 В состав набора И РМ А -Т Т Г-Н Б входят следую щ ие ком поненты : - м оноклональны е антитела к ТТГ, м еченны е '^^1, готовы е к использованию - 1 ф ла кон (11 мл), общ ая активность менее 570 кБк; - пробирки полистирольны е с им м обилизованны м и м оноклональны м и антителами к ТТГ, готовые к использованию , -1 0 0 шт.; - калибровочны е пробы на основе сы воротки крови крупного рогатого скота с азидом натрия (< 0,01% ), аттестованны е относительно м еж дународного стандарта IPR 80/558, со держ ащ ие известны е количества ТТГ О м М Е /л, 0,15 м М Е /л, 0,5 мМ Е /л, 1,5 мМ Е/л, 5,0 мМ Е/л, 15 м М Е /л и 50 м М Е /л; концентрации ТТГ в калибровочны х пробах могут несколько отличаться от указанны х величин, точны е значения указаны на этикетках флаконов, готовые к использованию - 7 ф лаконов (по 1,0 мл); - пром ы вочны й раствор, концентрат, содерж ит натрий хлористы й, твин-20, азид на- трия (< 0,01% ) - 1 ф лакон (25 мл); контрольны е сы воротки (КС-1 и КС -2) на основе сы воротки крови крупного рогато го скота с известны м содерж анием ТТГ и азидом натрия (< 0,01% ), лиоф илизаты - 2 флакона. 2 .2 . С о с т а в н а б о р а . 3. А Н А Л И Т И Ч Е С К И Е Х А Р А К Т Е Р И С Т И К И Н А Б О Р А 3.1. С пециф ичность В наборе И Р М А -Т Т Г-Н Б использую тся вы сокоспециф ичны е моноклональны е анти тела к ТТГ для им м обилизации на твердоф азном носителе и для м ечения ‘^^1. 3.2. Ч увствительность М иним альная концентрация ТТГ, определяемая с пом ощ ью набора, составляет не более 0,02 мМ Е /л. 3.3. В оспроизводим ость К оэф ф ици ент вариации результатов определений концентрации ТТГ в образцах сы воротки или плазм ы крови с низким, средним и вы соким содерж анием ТТГ не превыш ает 8 % . 3.4. Т ест н а «линейность» О тклонение о т рассчетной величины концентрации Т Т Г в диапазоне концентраций- 0 ,1 5 - 5 0 м М Е /л составляет ±10% . --- стр. 4 --- 3.5. Т ест на «откры тие» П роцент откры тия Т Т Г в пробе, полученной при см еш ивании одинаковы х количеств контрольной сы воротки КС-1 и калибровочной пробы с содерж анием 0,5 мМ Е/л, составляет 90-110% . 3.6. Реком ендуется в каж дой лаборатории при использовании набора уточнить диапа зон норм альны х величин для обследуемого контингента лю дей. 4. М Е Р Ы П Р Е Д О С Т О Р О Ж Н О С Т И 4.1 П отенциальны й риск прим енения набора - класс 2а. 4.2. М оноклональны е антитела к ТТГ, м еченны е ’^^1, являю тся источником мягкого гамма-излучения. П ериод полураспада изотопа [’^^1] составляет 60,04 суток. При работе с набором следует соблю дать правила работы с радиоактивны м и вещ ествам и по 3-му классу, ^ излож енные в «Н орм ах радиационной безопасности Н Р Б-99/2009» и в «Основных санитар ных правилах обеспечения радиационной безопасности О С П О РБ-99/2010». 4.3. К ом поненты набора (калибровочны е пробы , контрольны е сы воротки, промывоч ный раствор) содерж ат азид натрия в качестве консерванта. А зид натрия м ож ет вступать в реакцию со свинцом , м едью , латунью , образуя взры воопасны е азиды металлов. Отработан ные реагенты перед удалением следует разбавлять больш им количеством воды. 4.4. П ри работе с набором следует соблю дать «П равила устройства, техники безопас ности, производственной санитарии, противоэпидем ического реж им а и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидем иологических учреж дений системы М инистерства здравоохранения СССР» (М осква, 1981 г.). 4.5. П ри работе с набором следует надевать одноразовы е резиновы е или пластиковые перчатки, так как образцы крови человека следует рассм атривать как потенциально инф ици рованные, способны е длительное время сохранять и передавать ВИ Ч, вирус гепатита или лю бой другой возбудитель вирусны х инфекций. П ерчатки следует сдавать вместе с другими радиоактивны ми отходам и. 4.6. Рабочие м еста долж ны бы ть обеспечены приточно-вы тяж ной вентиляцией. 4.7. Х им ическая посуда и оборудование, которы е использую тся в работе с набором, долж ны быть соответствую щ им образом пром аркированы и храниться отдельно. 4.8. Запрещ ается приём пищ и, использование косм етических средств и курение в по мещ ениях, предназначенны х для работы с набором. (D --- стр. 5 --- 5. О Б О Р У Д О В А Н И Е И М А Т Е РИ А Л Ы 5.1. Гам м а-счетчик колодезного типа; - прибор для встряхивания пробирок вибрационного ти п а ( не м енее 350 встряхива ний в мин); - м еш алка м агнитная; - насос водоструйны й; - холодильник бы товой, поддерж иваю щ ий тем пературу (2-8) °С; - пипетки полуавтом атические одноканальны е с перем енны м или ф иксированным объёмом со см енны м и наконечникам и, позволяю щ ие отбирать объём ы ж идкостей 0,1 и 2,0 мл, аттестованны е по значению средней дозы и сходим ости результатов пипетирования (по греш ность не более 3% ); - пробирки пластм ассовы е вм естим остью 3,0 - 5,0 мл с пробкам и - 2 ш т.; - цилиндр м ерны й вм естим остью 500 мл; - ш татив для пробирок; - стакан хим ический м ерны й или колба плоскодонная вм естим остью 500 мл; - перчатки резиновы е или пластиковы е; - бумага ф ильтровальная лабораторная; - вода дистиллированная. 6. А Н А Л И ЗИ РУ Е М Ы Е О Б Р А ЗЦ Ы 6.1. Н егем олизированная сы воротка или плазм а крови человека. П лазм у крови получаю т с использованием Э Д Т А в качестве антикоагулянта. 7. П РО В Е Д Е Н И Е А Н А Л И ЗА 7.1. П одготовка реагентов для анализа. 7.1.1. К ом поненты набора и исследуемы е образцы сы воротки или плазмы крови следует вьщ ержать при ком натной тем пературе (18-25) °С в течение врем ени не менее 30 мин. 7.1.2. В нести в колбу вм естимостью 500 мл с пом ощ ью м ерного цилиндра 475 мл ди с тиллированной воды , добавить содерж имое ф лакона с концентратом пром ы вочного раство ра и тщ ательно перем еш ать на магнитной меш алке. П риготовленны й рабочий пром ы вочны й раствор м ож но хранить при температуре (2 -8 ) °С в течение всего срока годности набора. 5 --- стр. 6 --- 7.1.3. Во ф лаконы , содерж ащ ие контрольны е сы воротки (КС-1 и КС -2), внести по 1,0 мл дистиллированной воды и вы держ ать при ком натной тем пературе (18-25) °С в течение 30 мин, после чего осторож но перем еш ать содерж имое ф лакона, избегая образования пены. При вскрытии и растворении необходим о следить, чтобы на пробках не осталось сухого вещ ест ва. К онтрольную сы воротку, подготовленную к работе, м ож но хранить при температуре (2-8)°С в течение 24 ч; при необходим ости более длительного хранения (до 3 мес) кон трольную сы воротку следует разделить на аликвоты и хранить при температуре не выще минус 20 °С . П овторное замораж ивание исклю чить. 7.1.4. П робирки с им м обилизованны м и м оноклональны м и антителам и к ТТГ марки ровать следую щ им образом ( в дубликатах): Во-Вб - калибровочны е пробы ТТГ; Вкс-i З кс -2 - контрольны е сы воротки; Вх - исследуемы е сы воротки или плазм ы крови. 7.2. П р о в ед ен и е а н а л и з а 7.2.1. В пробирки Во-Вб внести по 0,1 мл соответствую щ их калибровочны х проб. В пробирки Вкс -1 и Вкс -2 внести по 0,1 мл контрольны х сы вороток (см п. 7.1.3). В пробирки Вх внести по 0,1 мл исследуем ы х образцов сы вороток или плазм крови. 7.2.2. Во все пробирки внести по 0,1 мл м оноклональны х антител к ТТГ, меченных ■ 2 ^ 1 . 7.2.3. И нкубировать все пробирки в течение 1 ч при постоянном встряхивании на приборе для встряхивания пробирок (не менее 350 встряхиваний в м ин) и комнатной тем пе ратуре. 7.2.4. П осле окончания инкубации тщ ательно удалить из всех пробирок ж идкость с помощ ью водоструйного насоса. Во все пробирки внести по 2,0 мл рабочего промывочного раствора (см п. 7.1.2). Сразу после внесения удалить пром ы вочны й раствор из всех пробирок с помощ ью водоструйного насоса. П овторить стадию пром ы вки. П осле промы вки в пробир ках не долж но оставаться следов окращ енной ж идкости. 7.2.5. Все пробирки пом естить в гамм а-счетчик и изм ерить скорость счета '^^1 в каж дой пробирке в течение 1 мин. 7.2.6. П оследовательность внесения реагентов в пробирки и проведение других опе раций анализа приведены в таблице . Данную последовательность не наруш ать! --- стр. 7 --- Т а б л и ц а . П робирки (в дубликатах) В 0-В 5 Вкс-1 и Вкс-2 В . П оследовательность операций К алибровочны е пробы , контроль ные сы воротки, исследуемы е сы воротки или плазм ы , мл 0,1 0,1 0,1 М оноклональны е антитела к ТТГ, м еченны е '^^ 1, мл 0,1 0,1 0,1 И нкубировать в течение 1 ч при постоянном встряхивании и ком натной тем п е ратуре (1 8 -2 5 )°С После инкуба ции тщ ательно удалить из всех пробирок ж ид кость с помо щ ью водоструй ного насоса П робирки (в дз’ бликатах) П оследовательность операций Рабочий вочны й раствор, мл промы- В 0-В 5 2,0 Вкс-1 и Вкс-2 2,0 Вх 2,0 Сразу удалить ж идкость с пом о щ ью водоструй ного насоса П овторить стадию пром ы вки. Сразу удалить ж идкость с пом ощ ью водо струйного насоса. И змерить скорость счета ‘^^1 в каж дой пробирке в течение 1 мин. 8. Р Е Г И С Т Р А Ц И Я Р Е З У Л Ь Т А Т О В 8.1 Н айти среднее ариф м етическое значение скорости счета (имп/мин) для каждой пары пробирок, из полученны х значений скорости счета вы честь среднее арифметическое значение скорости счета в пробирках Во и рассчитать величину отнош ения (Bj-Bo)/(B 6-Bo) (%) для каждой калибровочной пробы, контрольны х сы вороток и исследуемы х сывороток или плазм, где Bj - среднее ариф м етическое значение скорости счета в пробирках Во - Вб , Вкс-1, Вкс-2 и Вх. 8.2 П остроить калибровочны й график в полулогариф м ических координатах, отклады вая на оси ординат (линейная) отнош ение (ВгВо)/(Вб-Во) (% ), а по оси абсцисс (логариф ми ческая) - значения концентраций ТТГ (мМ Е/л) в соответствую щ их калибровочны х пробах. 8.3 О пределить по калибровочному графику содерж ание Т Т Г в контрольны х сы во ротках и исследуем ы х образцах сы вороток или плазм крови. --- стр. 8 --- 9.1. П ри использовании набора И РМ А -ТТГ-Н Б получены следую щ ие диапазоны кон центраций ТТГ в сы воротке или плазме крови: - э у т и р е о з - 0 Д 7 - 4 ,0 4 м М Е /м л ; - гипертиреоз - м енее 0,15 м М Е/л; - гипотиреоз - более 5 мМ Е/л. 9 . У Ч Е Т Р Е З У Л Ь Т А Т О В А Н А Л И З А 10. У С Л О В И Я Х Р А Н Е Н И Я И П Р И М Е Н Е Н И Я Н А Б О Р А 10.1. Н абор реагентов И РМ А -ТТГ-Н Б долж ен храниться в упаковке предприятия- изготовителя при тем пературе (2-8) °С в течение всего срока годности набора. Допускается хранение набора при тем пературе до 25 °С не более 3 сут. 10.2. Ф лаконы с калибровочны м и пробами, концентратом пром ы вочного раствора и раствором м оноклональны х антител к ТТГ, м еченны х '^^1, после вскры тия мож но хранить в плотно закры том виде при тем пературе (2-8) °С в течение всего срока годности набора. Вскры тую коробку с пробиркам и м ож но хранить при тем пературе (2-8) °С в течение всего срока годности набора. Реком ендуется не наруш ать после вскры тия коробки с пробир ками целостность упаковки для неиспользованны х пробирок. 10.3. Д ля проведения анализа не следует использовать гемолизированную , мутную и с гиперлипидем ическую сы воротку или плазму крови человека. 10.4. О бразцы сы воротки или плазмы крови м ож но хранить при температуре (2-8) °С, если анализ проводят в течение 24 ч после взятия крови. О бразцы сы воротки или плазмы крови мож но хранить при тем пературе минус 20 °С в течение более длительного времени - до 3 мес (допускается только одноразовое замораж ивание и разм ораж ивание образцов). Раз мораж ивание образцов проводят при ком натной тем пературе (18-25 °С). 10.5. И сследуем ы е образцы сы воротки или плазм ы крови следует проверять на оста точную активность радионуклидов, если обследуемому лицу до отбора крови вводили радио активные препараты. 10.6. Запрещ ается использовать реагенты из наборов других фирм-производителей. 10.7. Д ля получения надёж ны х результатов необходим о строгое соблю дение инструк ции по прим енению набора. --- стр. 9 --- По вопросам , касаю щ им ся качества набора И Р М А -Т Т Г-Н Б, следует обращ аться в ЗАО «Н уклидбиомед» по адресу: 115478, М осква, К аш ирское ш оссе, д. 24, строение 23, тел. (8-495) 781-45-97, 781-45-98, или в Ф ГУ «Н И И ф изико-хим ической медицины » Ф М БА России по адресу: 119435, М осква, ул. М алая П ироговская, д. 1а, тел (499) 246-43-32. Г енеральны й директор ЗАО «Н уклидбиомед» Руководитель лаборатории ‘ иммунологии и регуляторны х механизмов в хирургии РН Ц Х им. акад. Б.В .П етровского РАМ Н, дмн., проф ессор П одпись Л. И. В инницкого заверяю ученый секретарь РН Ц Х им. акад. Б.В .П етровского РА М Н к.м.н. А.В. Кодю ков Л.\И . Винницкий М. И. Секачева