Набор реагентов для иммуноферментного определения антигена СА15.3 в сыворотке (плазме) крови "СА15.3(М12)-ИФА" по ТУ 21.20.23-226-18619450-2020 — инструкция и характеристики

РУ: РЗН 2020/12082 от 29.09.2020 · класс риска 2б

Производитель: ООО "ХЕМА" (Россия)

Вид изделия: Раковый антиген 15-3 (СА15-3) ИВД, набор, иммуноферментный анализ (ИФА)

В госконтрактах 44-ФЗ: 181 контракт, медианная цена за единицу 11 313 ₽.

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

--- стр. 1 ---
«УТВЕРЖДАЮ»
Генералы1ыи^вш«тор ООО «ХЕМА»
.С. Лебедин 
2020 г.
ИНСТРУКЦИЯ
по применению Набора реагентов для иммунофсрментного определения 
антигена СА15.3 в сыворотке (плазме) крови 
«СА15.3(М12)-ИФА»
1. ОБЩАЯ ИНФОРМАЦИЯ.
1.1. Назначение.
Набор реагентов для иммунофсрментного определения антигена СА15.3 в сыворотке 
(плазме) крови «СА15.3(М12)-ИФА» предназначен для количественного определения 
концентрации антигена СА15.3 в сыворотке (плазме) крови методом твердофазного 
иммуноферментного анализа.
1.2. Введение.
СА 15-3 - белок человека, опухолевый маркёр относится к высокомолекулярным 
гликопротеинам муцинового типа. Кодируется геном MUC1. В здоровом организме находится на 
поверхности эпителиальных клеток, особенно в органах дыхания, молочной железе и матке. Также 
экспрессируется активированными и неактивированными Т-лимфоцитами. В больших количествах 
выделяется клетками эпителиальных (рак груди, яичников) и неэпителиальных опухолей.
Антиген MUC1 представляет собой гликопротеин гетерогенного состава с молекулярной 
массой 300-450 кДа. Уровень антигена СА15.3 в крови повышается при раке молочной железы 
(РМЖ). Кроме РМЖ, повышение уровня антигена СА15.3 в крови может наблюдаться при раке 
легких, яичников, предстательной железы, шейки матки и желудочно-кишечного тракта. 
Повышение содержания антигена СА15.3 может развиваться и при некоторых доброкачественных 
процессах: доброкачественных опухолях молочной железы и яичников, эндометриозе, гепатите, 
циррозе печени, фиброзе легких. Беременность и лактация также могут приводить к повышению 
уровня MUC1.
1.3. Функциональное назначение.
Определение концентрации антигена СА15.3 в сыворотке (плаз.ме) крови используется в 
качестве вспомогательного метода ранней диагностики, мониторинга и эффективности терапии 
рака молочной железы, для всех групп населения.
1.4. Набор предназначен для диагностики ин витро.
1.5. Область применения -  клиническая лабораторная диагностика.


--- стр. 2 ---
f
I
2. ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА
2.1. Набор реагентов «СА15.3(М12)-ИФА» рассчитан на 96 определений, включая контроли.
2.2. КОМПЛЕКТНОТЬ:
Символ Состав Описание Количество
компонентов
SORB МТР Планшет 96-луночный
полистироловый, стрипированный, на внутренней 
поверхности лунок планшета иммобилизованы 
мышиные моноклональные антитела к СА15.3 
человека, готов к использованию.
1  ш т.
CAL1-5
Калибровочные пробы
на основе фосфатного буфера, содержащие 
известные количества антигена СА15.3 - С1; 
С2; СЗ; С4; С5 Ед/мл, концентрация антигена 
СА15.3 в калибровочных пробах указана в 
аналитическом паспорте и на этикетках 
флаконов, калибровочные пробы С2-С5 - 
прозрачные окрашенные жидкости (цвет 
компонента указан в аналитическом паспорте), 
калибровочная проба С 1 —  прозрачная 
бесцветная жидкость, готовы к использованию
5  флаконов 
(по 0,8 мл)
CONTROL Контрольная сыворотка
инактивирована, на основе сыворотки крови 
человека с известным содержанием антигена 
СА15.3, прозрачная бесцветная жидкость 
готова к использованию
1  флакон 
(0,8 мл)
CONJ HRP Конъюгат
прозрачная окрашенная жидкость (цвет 
компонента указан в аналитическом паспорте), 
готов к использованию.
1  флакон 
(14 мл)
DIL ИФА-Буфер
прозрачная окрашенная жидкость (цвет 
компонента указан в аналитическом паспорте), 
готов к использованию.
1  флакон 
(14 мл)
SUBSTMB Субстратный раствор 
тетраметилбензидина (ТМБ)
прозрачная бесцветная жидкость, 
готов к использованию.
1  флакон 
(14 мл)
BUF WASH 
26Х
Концентрат отмывочного 
раствора
прозрачная бесцветная жидкость, 
26-кратный концентрат
1  флакон 
(22 мл)
STOP Стоп-реагент прозрачная бесцветная жидкость, 
готов к использованию.
1  флакон 
(14 мл)
N003 Бумага для заклеивания 
планшета - 2 шт.
K226I Инструкция по применению - 1  ш т.
K226Q Паспорт контроля качества 
(аналитический паспорт) - 1  шт.
2.3. Принцип работы Набора.
Определение антигена СА15.3 основано на использовании «сэндвич »-варианта 
твердофазного иммуноферментного анализа. На внутренней поверхности лунок планшета 
иммобилизованы мышиные моноклональные антитела к СА15.3 человека. В лунках планшета, 
при добавлении исследуемого образца, происходит связывание СА15.3, содержащегося в 
исследуемом образце, с антителами на твердой фазе. Образовавшийся комплекс выявляют с 
помощью конъюгата мыщиных моноклональных антител к СА15.3 человека с пероксидазой 
хрена. В результате образуется связанный с пластиком «сэндвич», содержащий пероксидазу. Во 
время инкубации с субстратным раствором тетраметилбензидина (ТМБ) происходит окрашивание 
растворов в лунках. Интенсивность окраски прямо пропорциональна концентрации антигена


--- стр. 3 ---
Щ м
7 lA \ 5 3 в  исследуемом образце. Концентрацию антигена СА15.3 в исследуемых образцах 
определяют по калибровочному графику зависимости оптической плотности от содержания 
антигена СА15.3 в калибровочных пробах.
3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
3.1. Аналитическая специфичность.
При тестировании тестового пула сывороток с известной концентрацией СА15.3 путём 
добавления пула с известным содержанием предполагаемых интерферирующих веществ с 
помощью Набора «СА15.3(М12)-ИФА» ни одна из испытанных проб не показала наличие 
перекрёстной реактивности.
Аналит П е р е к р е с т н а я  р е а к ц и я , %
КЭА <0,1
СА125 <0,1
СА19-9 <0,1
3.2. Воспроизводимость.
Коэффициент вариации результатов определения содержания СА15.3 в одном и том же 
образце сыворотки (плазмы) крови с использованием Набора «СА15.3(М12)-ИФА» не превышает
8,0 %.
3.3. Линейность.
Зависимость концентрации СА15.3 в образцах сыворотки (плазмы) крови при разведении их 
сывороткой (плазмой) крови, не содержащей СА15.3, имеет линейный характер в диапазоне 
концентраций С2-С5 и составляет 90-110%.
3.4. Точность.
Данный аналитический параметр проверяется тестом на «открытие» —  соответствие 
измеренной концентрации СА15.3 предписанной, полученной путем смешивания равных объемов 
контрольной сыворотки и калибровочной пробы СЗ. Процент «открытия» составляет 90-110%.
3.5. Чувствительность.
Минимальная достоверно определяемая Набором «СА15.3(М12)-ИФА» концентрация 
СА15.3 в сыворотке (плазме) крови не превышает 0,75 Ед/мл.
3.6. Интерсепт -  значения концентраций СА15.3 (Ед/мл), при которых соотношение В/Вс 5 
соответствует 20%, 50% и 75%. Пределы указаны в аналитическом паспорте.
3.7. Интерференция.
На результаты анализа не оказывало влияния использование антикоагулянтов ЭДТА, 
гепарина и цитрата натрия, а также присутствие гемоглобина, триглицеридов, холестерина, 
билирубина и общего белка в концентрациях, не превышающих нормальные клинические 
значения.


--- стр. 4 ---
3.8. Референтное значение.
Исследуемая группа Единицы, Ед/ш
Нижний предел Верхний предел
Мужчины - 30
Женщины - 30
Беременные:
1-й триместр - 55
2-й триместр 5,0 65
3-й триместр 5,0 185
В период лактации - 120
В соответствии с правилами GLP (Good Laboratory Practice, надлежащая Лабораторная  
практика), рекомендуется каждой лаборатории уточнить параметры референтного интервала,  
характерные для обследуемой популяции.
Примечание.  Значения концентраций СА15.3 в исследуемых образцах, находящиеся ниже 
границы чувствительности Набора (0,75 Ед/мл), а также превышающие значение верхней 
калибровочной пробы (С5 Ед/мл) следует приводить в следующей форме: в исследуемом образце 
X концентрация СА15.3 ниже 0,75 Ezi/мл или выше С5 Ед/мл.
3.9. Хук-эффект.
Вероятность Хук-эффекта исследовалась путем тестирования образцов с высокой 
концентрацией СА15.3 и их разведение. Не наблюдались отрицательные результаты на 
неразведенных образцах по сравнению с более разведенны.ми образцами. Идентичность 
результатов, неразведенных и разведенных образцов указывает на отсутствие Хук-эффекта до 
концентрации 2500 Ед/мл.
3.10. Метрологическая прослеживаемость осуществлялась, согласно ГОСТ ISO 17511-2011 
с использованием референтных методик. При использовании в лабораторных условиях 
рекомендуется провести валидацию с использованием количественно охарактеризованных 
образцов.
4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ.
4.1. Потенциальный риск применения Набора-класс 26.
4.2. Образцы сыворотки крови человека, используемые при приготовлении контрольной 
сыворотки, инактивированы и не содержат антитела к вирусу гепатита С, антитела к ВИЧ 1, 2 и 
антигена р24 ВИЧ-1, а также антиген вируса гепатита В (HBsAg).
4.3. Набор предназначен только для профессионального использования.
4.4. Все компоненты Набора в используемых концентрациях являются нетоксичными.
4.5. При работе с Набором необходимо использовать индивидуальные средства защиты: 
халат, головной убор, резиновые или пластиковые перчатки, специальную обувь, защитные очки 
или щиток), так как образцы сыворотки или плазмы крови следует рассматривать как 
потенциально инфицированный биоматериал.


--- стр. 5 ---
4.6. Все отмывочные растворы следует собирать в специальный контейнер и обрабатывать 
дезинфицирующими средствами, разрешенными для применения на территории РФ в 
установленном порядке.
4.7. Лабораторную посуду многоразового использования и расходные материалы, 
контактирующие с исследуемыми и контрольными образцами, следует обеззараживать с 
использованием дезинфицирующих средств, не содержащих активный кислород и хлор, 
оказывающих негативное воздействие на качество ИФА.
4.8. При работе следует соблюдать требования ГОСТ Р 52905 (ISO 15190:2003) 
«Лаборатории медицинские Требования безопасности».
4.9. Инструменты, оборудование, а также рабочие поверхности столов необходимо 
протирать 70% раствором этилового спирта.
4.10. При использовании согласно инструкции по применению изделие является 
безопасным (не несет физических, экологических и иных рисков).
4.12. Набор «СА15.3(М12)-ИФА» не содержит лекарственных средств для медицинского 
применения.
4.13. Показания к применению медицинского изделия; применять в соответствии с 
назначением.
4.14. Противопоказания к применению медицинского изделия: противопоказаний в рамках 
установленного назначения не имеет. Не применять не по назначению.
5. ОБОРУДОВАНИЕ, МАТЕРИАЛЫ И РЕАГЕНТЫ,
НЕОБХОДИМЫЕ ПРИ РАБОТЕ С НАБОРОМ:
-  фотометр вертикального сканирования, позволяющий измерять оптическую плотность 
содержимого лунок планшета при длине волны 450 нм;
-орбитальный шейкер (встряхиватель) для микропланшет, скорость 600-800 об ./мин.
-  дозаторы со сменными наконечниками, позволяющие дозировать объемы в диапазоне 25-250
мкл;
-  цилиндр мерный вместимостью 1000 мл;
-  вода дистиллированная;
-  перчатки резиновые или пластиковые;
-  бумага фильтровальная.
6. АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ.
В качестве анализируемого образца используется сыворотка (плазма) крови.
6.1. Процедура получения анализируемого материала.
Сбор образцов крови человека проводить в соответствии с текущей практикой методом 
венепункции, соблюдая стандартные лабораторные процедуры. Для анализа использовать 
неразведённую сыворотку (плазму) крови.


--- стр. 7 ---
Унцентрата отмывочного раствора и развести дистиллированной водой в 26 раз (1 мл концентрата 
, -Отмывочного раствора + 25 мл дистиллированной воды).
7.4. Если предполагаемая концентрация СА15.3 в исследуемом образце превышает С5 Ед/мл, 
его следует дополнительно развести, используя ИФА-Буфер. Использование других буферов и 
реагентов для разбавления образцов может искажать результаты определения!
Примечание.  Для получения надежных результатов рекомендуется использовать несколько 
последовательных разведений исследуемого образца сыворотки (плазмы) крови.
8. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА.
8.1. Поместите в рамку необходимое количество стрипов для 5 калибровочных проб, 1  пробы 
контрольной сыворотки и лунки для исследуемых образцов.
8.2. Внесите во все лунки планшета по 50 мкл ИФА-Буфера.
8.3. Внесите в соответствующие лунки по 50 мкл калибровочной пробы и контрольной 
сыворотки. В остальные лунки внесите по 50 мкл исследуемых образцов сыворотки (плазмы) 
крови. Внесение калибровочных проб, контрольной сыворотки и исследуемых образцов 
необходимо произвести в течение 15 минут.
8.4. Аккуратно перемешайте содержимое планшета круговыми движениями по 
горизонтальной поверхности, заклейте планшет бумагой для заклеивания планшета. Инкубируйте 
планшет в течение 30 минут при температуре +18-25°С и постоянном встряхивании со скоростью
600-800 об/мин.
8.5. По окончании инкубации удалите содержимое лунок аспирацией (например, с помощью 
водоструйного насоса) или декантированием и отмойте лунки 3 раза. При каждой отмывке 
добавьте во все лунки по 250 мкл отмывочного раствора, встряхните планшет круговыми 
движениями по горизонтальной поверхности с последующей аспирацией или декантированием. 
Задержка при отмывке (замачивание лунок) не требуется. При каждом декантировании 
необходимо тщательно удалять остатки жидкости из лунок.
8.6. Внесите во все лунки по 100 мкл конъюгата.
8.7. Заклейте планшет бумагой для заклеивания планшета и инкубируйте его в течение 30 
минут при температуре +18-25®С и постоянном встряхивании со скоростью 600-800 об/мин.
8.8. По окончании инкубации удалите содержимое лунок и отмойте лунки 5 раз.
8.9. Внесите во все лунки по 100 мкл субстратного раствора тетраметилбензидина (ТМБ). 
Внесение субстратного раствора тетраметилбензидина в лунки необходимо произвести в течение 
2-3 мин. Инкубируйте планшет в темноте при комнатной температуре (+18-25®С) в течение 10-20 
минут в зависимости от степени развития синего окрашивания.
8.10. Внесите во все лунки с той же скоростью и в той же последовательности, как и 
субстратный раствор тетраметилбензидина, по 100 мкл стоп-реагента, при этом содержимое лунок 
окрашивается в ярко-желтый цвет.


--- стр. 8 ---
"  8.11. Измерьте величину оптической плотности (ОП) содержимого лунок планшета на 
^тометре вертикального сканирования при длине волны 450 нм. Измерение ОП содержимого 
,1унок планшета необходимо произвести в течение 15 мин после внесения стоп-реагента. Бланк 
фотометра выставляйте по калибровочной пробе С1.
9. УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ РЕАКЦИИ.
9.1. Постройте в линейных координатах калибровочный график: ось абсцисс (х) -  
концентрация СА15.3 в калибровочных пробах (Ед/мл), ось ординат (у) -  оптическая плотность 
калибровочных проб (ОП 450 нм). Для алгоритма обсчета (аппроксимации) калибровочного 
графика используйте интервальный (кусочно-линейный, «от точки к точке») метод или четырех 
параметрический сплайн.
9.2. Определите по калибровочному графику содержание СА15.3 в исследуемых образцах. 
Если исследуемый образец предразводили, умножьте полученный результат на фактор разведения.
10. ОГРАНИЧЕНИЕ МЕТОДА.
10.1. При использовании Набора для проведения нескольких независимых серий анализов 
следует иметь в виду, что для каждого независимого определения необходимо построение нового 
калибровочного графика; кроме этого, рекомендуется определение концентрации СА15.3 в 
контрольной сыворотке.
10.2. Набор реагентов «СА15.3(М12)-ИФА» предназначен для диагностических целей, 
однако окончательный диагноз не должен основываться только на результатах данного теста.
10.3. Диагноз должен быть поставлен врачом после полного клинического и лабораторного 
обследования пациента.
11. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВКИ,
ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА.
Информация, об особенностях транспортирования должна учитываться всеми лицами, 
участвующими в хранении, перевозке и утилизации (уничтожении) этого изделия.
11.1. Транспортирование.
11.1.1. Транспортирование Набора реагентов «СА15.3(М12)-ИФА» должно производиться 
всеми видами крытого транспорта в соответствии с требованиями и правилами, установленными 
на данном виде транспорта, при температуре +2-8°С.
Допускается транспортировка Набора при температуре до +25°С не более 15 суток. Не 
допускается замораживание целого Набора.
11.1.2. Транспортирование изделий при температурах, требующих соблюдения "Холодовой 
цепи", обеспечивающей сохранность температурного режима, должно осуществляться в 
термоконтейнерах одноразового пользования, содержащих хладоэлементы, или в


--- стр. 9 ---
1рмоконтеинерах многократного применения с автоматически поддерживаемой температурой 
iiH  в авторефрижераторах с использованием термоиндикаторов.
11.1.3. Изделия, транспортированные с нарушением температурного режима, применению не 
подлежат.
11.2. Хранение.
Хранение изделий и/или компонентов при температуре от +2-8°С должно осуществляться в 
холодильных камерах или в холодильниках, обеспечивающих регламентированный 
температурный режим с ежедневной регистрацией температуры. Хранение светочувствительных 
изделий и/или компонентов должно осуществляться в темном месте.
11.2.1. Набор реагентов «СА15.3(М12)-ИФА» должен храниться в упаковке предприятия- 
изготовителя при температуре +2-8°С в течение всего срока годности. Допускается хранение 
Набора при температуре до +25°С не более 15 суток. Не допускается замораживание целого 
Набора.
11.2.2. В случае дробного использования Набора компоненты следует хранить следующим 
образом:
-  оставшиеся неиспользованными стрипы необходимо тщательно заклеить бумагой для 
заклеивания планшета и хранить при температуре +2-8°С в течение всего срока годности Набора;
-  конъюгат, ИФА-Буфер, субстратный раствор тетраметилбензидина (ТМБ), стоп-реагент 
после вскрытия флаконов следует хранить при температуре +2-8°С в течение всего срока годности 
Набора;
-  калибровочные пробы и контрольную сыворотку после вскрытия флаконов следует 
хранить при температуре +2-8°С не более 2 месяцев. Допускается однократное замораживание 
калибровочных проб и контрольной сыворотки в аликвотах при температуре -20°С;
-  оставшийся неиспользованным концентрат отмывочного раствора следует хранить при 
температуре +2-8°С в течение всего срока годности Набора;
-  приготовленный отмывочный раствор хранить при температуре +2-8°С не более 45 суток, 
допускается хранение при комнатной температуре +18-25®С не более 15 суток;
Примечание.  После использования реагента немедленно закрывайте крышку флакона. 
Закрывайте каждый флакон своей крышкой.
11.2.3. Изделия, хранившиеся с нарушением регламентированного режима, применению не 
подлежат.
11.2.4. Срок годности Набора реагентов «СА15.3(М12)-ИФА» - 18 месяцев.
11.3. Эксплуатация.
Все комплекты предназначены для ручной постановки и для постановки на автоматических 
анализаторах для иммуноферментного анализа открытого типа с возможностью, как дробного 
использования планшета (набора), так и для постановки целого планшета (набора).