Набор реагентов "ИФА-овальбумин" Тест-система иммуноферментная для определения овальбумина по ТУ 9388-105-14237183-2010 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 --- СДЕНА «УТВЕРЖДАЮ» [Росздравнадзора 201 г. № ____ Первый заместитель генерального директора ФГУП ^ДЩЕГ^Ликроген» И.В. Сакаева 2010 г. ИНСТРУКЦИЯ по применению набора реагентов "ИФА-овальбумин" Тест-система иммуноферментная для определения овальбумина НАЗНАЧЕНИЕ абор реагентов "ИФА-овальбумин" предназначен для количественного определения умина в иммунобиологических препаратах, содержащих овальбумин. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА 1 Принцип действия. финцип действия набора реагентов "ИФА-овальбумин" основан на трехступенчатом фазном иммуноферментном анализе. Внесение антител к овальбумину в лунки вролового планшета приводит к сорбции антител на полимерную поверхность. Избыток удаляется промыванием планшета. После внесения исследуемых образцов в лунки овальбумин (в случае наличия его в образце) связывается с антителами, иыми на твердой фазе, образуя комплекс антиген-антитело. Внесение конъюгата I к овальбумину, меченных пероксидазой хрена) приводит к образованию комплекса ититело-конъюгат, прикрепленного к поверхности лунок планшета. Избыток конъюгата промыванием. Для выявления образовавшегося комплекса в лунки добавляется раствор В(ТМБ). В результате ферментативной реакции, хромоген переходит в окрашенную еакция останавливается внесением раствора серной кислоты. Интенсивность ж измеряется на спектрофотометре при длине волны 450 нм. Величина оптической зависит от концентрации овальбумина в образце. ■став набора. |реагентов "ИФА-овальбумин" (тест-система иммуноферментная для определения а) включает следующие реагенты для проведения твердофазного иммуноферментного (ИФ А): Планшет для сорбции - планшет для иммунологических реакций однократного ения - 96-луночный полистироловый цельный с плоским дном - 1 шт ; 1Г-0А - антитела к овальбумину; прозрачная бесцветная жидкость - 50 мкл, пробирка или 1 флакон; Г-0А - положительный контрольный образец (концентрация овальбумина - л); аморфный порошок белого цвета - 1 ампула; югат - антитела к овальбумину, меченные пероксидазой хрена; прозрачная розового ’ватого цвета жидкость - 50 мкл, 1 микропробирка или 1 флакон ; (х4) - карбонатно-бикарбонатный буфер 4-х кратный концентрат; прозрачная ая жидкость - 3 мл, 1 флакон; -фосфатно-солевой буфер, таблетки белого цвета - 5 таблеток, 1 флакон; --- стр. 2 --- | Твин'20 вязкая светло-желтого цвета жидкость - 0,25 мл, 1 флакон; 1Уж' ~1 флаТконетИЛбеНЗИДИН) " Хр°Моген- прозрачная светло-желтого цвета жидкость - « к Гфла́ко“ СЬЮ°Р0Т0ЧНЫЙ аЛьбуМИН' П°Р°Ш0К белого пп- светло-желтого цвета БСА 2 М раств°Р кислоты серной; прозрачная, бесцветная жидкость - 1 АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ пецифическая активность. П (оптическая плотность) контроля конъюгата должна быть не более 0,15; ИКПАГ-ОА в концентрации 4,0 нг/мл должна быть не менее 0 5- !Г А,Г‘0А В концентРа«ии °’5 нг/^ должна превышать ОП контроля коньюгата не кчемв/ раза. ■Тиейность. [диапазоне калибровочной кривой коэффициент корреляции должен быть не ниже 0 98. Ч В Д ел обнаружения (аналитическая чувствительность) - не более 0 5 нг/мл Цфициент вариации - не более 10%. 'М ЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ работе следует использовать резиновые одноразовые перчатки, для розлива жидкостей - с одноразовыми пластиковыми наконечниками. Оборудование, находившееся в «биологическими образцами и реагентами, следует дезинфицировать до и после работы чованием 70 % этилового спирта. Все сточные растворы следует обрабатывать 6 % 1 перекиси водорода в течение 4 ч. Пробы и реагенты человеческого происхождения, 1 и загрязненный материал, следует утилизировать замачиванием в 6 % растворе «водорода на 4 ч или автоклавированием при температуре 120 °С. Все компоненты исключением хромогена и стоп-реагента (раствор серной кислоты) являются |№ . Входящий в тест-систему стоп-реагент содержит 2 М кислоту серную, и «м с ним следует осторожно. Раствор серной кислоты обладает раздражающим ■ Избегать разбрызгивания и попадания на кожу и слизистые. В случае попадания «серной кислоты на кожу и слизистые необходимо промыть пораженный участок Количеством воды. Следует избегать любого контакта хромогена с кожей и слизистыми [ОБОРУДОВАНИЕ И М АТЕРИАЛЫ ы полуавтоматические одно- и многоканальные переменного объема; одноразовые на 0,5-200 мкл и 200-1000 мкл; пробирки; стаканы мерные; промывающее планшет, термостат; спектрофотометр типа «Мультисан, «Унискан»; перчатки (и л е пластиковые; вода очищенная (дистиллированная или деионизованная); растворы тпвания. 3 /о раствор хлорамина или 6% раствор перекиси водорода; спирт этиловый; иая бумага. ШИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ биологические препараты, содержащие овальбумин. ВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА жшление рабочих растворов для ИФА. В$-7’: 5 таблеток ФСБ растворить в 500 мл воды очищенной. Залить 5 мл полученного №кон с твин-20, перемешать, перелить содержимое флакона в емкость с ФСБ. Промыть --- стр. 3 --- пор Л? 2. ФСБ -Т-БСА: 0,25 г БСА растворить в 50 мл раствора № 1, аккуратно перемешать, мается хранение в течение 24 ч при температуре от 2 до 8 °С. щ№ 3. КБР: 3 мл КБР(х4) довести до 12 мл водой очищенной и перемешать. Раствор КБР М ен к использованию в течение рабочего дня. ш разведение ИГ-ОА: для сенсибилизации планшета ИГ-ОА разводят раствором № 3 до чего разведения, указанного на этикетке пробирки, рабочий раствор готовят непосредственно априменением, хранение не допускается. т е разведение КПАГ-ОА: содержимое ампулы с КПАГ-ОА разводят в 1 мл раствора № 2 г/м л ). Из полученного КПАГ-ОА с использованием раствора № 2 готовят рабочие разведения щентрациями: 4,0; 2,0; 1,0; 0,5; 0,25 нг/мл. Для этого берут 5 пробирок: в пробирку № 1 г 1 ,8 4 мл раствора № 2 и 0,16 мл раствора КПАГ-ОА (50 нг/мл), содержимое пробирки (сшивают (получают раствор КПАГ-ОА с концентрацией 4,0 нг/мл). В остальные 4 пробирки ппо 1,0 мл раствора № 2. В пробирку № 2 добавляют 1,0 мл раствора из пробирки № 1, гаик меняют. Содержимое пробирки № 2 перемешивают и 1,0 мл раствора переносят в ф ку № 3 и т.д. до пробирки № 5 включительно. Растворы готовят непосредственно перед кованием, хранение рабочих разведений КПАГ-ОА не допускается. ке разведение конъюгата: конъюгат используют в рабочем разведении, указанном на не. Конъюгат разводят раствором № 2 непосредственно перед применением, хранение не ЕСТСЯ. ‘2.Проведение иммуноферментного анализа. 8 лунки планшета для сорбции внести по 0,1 мл раствора ИГ-ОА в рабочем разведении, н ет закрыть крышкой или полимерной пленкой и инкубировать в термостате при ратуре (36-38) °С в течение 1,5 ч. По окончании инкубации содержимое лунок удалить 1встряхиванием перевернутого планшета, каждую лунку промывают 3 раза раствором № 1 ем е 0,3 мл и осушают постукиванием планшета по фильтровальной бумаге, сложенной в вне твином-20 раствором ФСБ не менее трех раз. Раствор ФСБ-Т хранить в течение рабочего лунки А-Е 1-3 рядов планшета внести по 0,1 мл рабочих разведений КПАГ-ОА с фациями 4,0; 2,0; 1,0; 0,5; 0,25 нг/мл (троекратно каждое разведение КПАГ-ОА - в одну каж дого из трех рядов планшета). лунки Р 1-3 рядов планшета внести по 0,1 мл раствора № 2 (контроль конъюгата - Б С А ). В лунки О-Н 1-3 рядов и А-Н 4-12 рядов планшета внести по 0,1 мл рабочих ш й образцов исследуемых препаратов (каждая серия в 2 - 3 лунках одного разведения). I растворить в растворе № 2 в пределах диапазона анализа. Планшет закрыть крышкой и и при температуре (36-38) °С в течение 1,5 ч. вержимое лунок удалить резким встряхиванием перевернутого планшета и каждую фомы ть раствором № 1 в объеме 0,3 мл 3 раза и осушить постукиванием планшета по ильной бумаге, сложенной в 4 слоя. все лунки планшета внести по 0,1 мл раствора конъюгата в рабочем разведении, инкубировать при температуре (36-38) °С в течение 1,5 ч. По окончании инкубации юелунок удалить и промыть 3 раза раствором № 1 как описано выше, все лунки планшета внести по 0,1 мл раствора ТМБ и выдержать при комнатной |уре в течение 15 мин. Реакцию остановить внесением в каждую лунку планшета по Г" 1ЕГИСТРАЦИЯ И УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ маты реакции должны быть учтены не позднее чем через 10 мин после внесение в ► реагента. ер ен и я проводят при длине волны 450 нм. Выведение спектрофотометра на нулевой Б ланк") осуществляют по воздуху. иагь средние значения оптической плотности К П А Г - О А при 450 нм ( О П 4 5 0 ). По средним встроить график зависимости оптической плотности от концентрации овальбумина. По [отложить концентрацию О А в нг/мл, по оси ординат - О П 4 5 0 .