Набор реагентов для выявления ДНК Mycoplasma genitalium методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (РеалБест ДНК Mycoplasma genitalium) по ТУ 9398-156-23548172-2015 — инструкция и характеристики

РУ: РЗН 2016/3794 от 17.03.2016 · класс риска 2б

Производитель: АО "Вектор-Бест" (Россия)

Вид изделия: Mycoplasma genitalium нуклеиновая кислота ИВД, набор, анализ нуклеиновых кислот

В госконтрактах 44-ФЗ: 127 контрактов, медианная цена за единицу 8 309 ₽.

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

--- стр. 1 ---
«УТВЕРЖДАЮ» 
;[;1.у(ои_Ердд^еральный директор 
¡^ектор-Бест»
_М.Д. Хусаинов 
2016 г.
ИНСТРУКЦРШ
по применению набора реагентов для выявления ДНК Mycoplasma genitalium 
методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени 
«РеалБест ДНК Mycoplasma genitalium»
(комплект 1)
1. НАЗНАЧЕНИЕ
Набор реагентов для выявления ДНК Mycoplasma genitalium методом полимеразной 
цепной реакции в режиме реального времени «РеалБест ДНК Mycoplasma genitalium» пред­
назначен для выявления ДНК Mycoplasma genitalium методом полимеразной цепной реакции 
(ПЦР) с гибридизационно-флуоресцентной детекцией продуктов ПЦР в режиме реального 
времени.
Выделение ДНК из клинических проб проводится с помощью наборов «РеалБест ДНК- 
экспресс», «РеалБест ДНК-экстракция 1», «РеалБест ДНК-экстракция 2», «РеалБест ДНК- 
экстракция 3» или «РеалБест экстракция 100».
Комплект 1 предназначен для применения с регистрирующими амплификаторами 
планшетного типа: «iQ5 iCycler», «СРХ96» (фирма Bio-Rad, США), «ДТ-96» (ООО «НПО 
ДНК-Технология», Россия) или их аналогами.
Комплект 1 рассчитан на проведение анализа 96 образцов, включая контрольные.
2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА
2.1. Принцип метода.
Принцип анализа основан на регистрации процесса амплификации выбранного участка 
ДНК возбудителя инфекции в ходе проведения ПЦР.
Процесс амплификации заключается в повторяющихся циклах: температурная денату­
рация ДНК-матрицы, отжиг праймеров с комплементарными последовательностями ДНК-
Инструкция составлена сотрудниками ЗАО «Вектор-Бест»: директором
по производству Ткачевым В.К. и нач. отделения производства ПЦР наборов Трухиной А.В.


--- стр. 2 ---
41атрицы, синтез комплементарной цепи с этих праймеров Taq-полимеразой. В основе реги­
страции процесса амплификации лежит измерение сигналов флуоресценции в каждом цикле 
ПЦР. Увеличение сигналов флуоресценции происходит благодаря использованию гибриди- 
зационного ДНК-зонда, специфичного для выбранного участка ДНК возбудителя инфекции, 
который в ходе реакции связывается с одной из цепей ДНК, обеспечивая также дополни­
тельную специфичность метода. ДНК-зонд содержит на 5'-конце флуоресцентный краситель, 
а на 3'-конце - гаситель флуоресценции, значительно снижающий интенсивность флуорес­
ценции. В ходе полимеразного синтеза комплементарной цепи, благодаря 5'-3'-нуклеазной 
активности Taq-полимеразы, зонд расщепляется с 5'-конца и происходит разобщение краси­
теля и гасителя, приводящее по мере накопления продукта реакции к возрастанию сигнала 
флуоресценции. При этом измеряемая интенсивность флуоресценции зависит от количества 
образовавшихся специфических ампликонов и динамика нарастания флуоресценции опреде­
ляется исходным количеством ДНК возбудителя инфекции в образце.
Учёт эффективности выделения ДНК из образцов обеспечивается выделением ДНК 
возбудителя инфекции из клинических проб совместно с предварительно внесённым внут­
ренним контрольным образцом (ВКО).
2.2. Состав набора:
В состав набора входят следующие компоненты:
- положительный контрольный образец универсальный (ПКО) - 1  пробирка (1,0 мл);
- готовая реакционная смесь для ПЦР (ГРС), лиофилизированная - 96 пробирок (12 
стрипов по 8 пробирок).
Набор дополнительно комплектуется:
- оптической плёнкой - 1,5 листа.
3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
3.1. Специфичность выявления ДНК Mycoplasma genitalium определяется по стандарт- 
ной панели предприятия отрицательных образцов ДНК-экстрактов, СПП (per. № 05-2-291), 
как процентное содержание образцов, определенных набором как отрицательные, и состав­
ляет 100%;
3.2. Чувствительность определяется по пяти образцам с содержанием ДНК бактерий 
Mycoplasma genitalium 100 копий в пробе, приготовленным из СОН ДНК бактерий Myco­
plasma genitalium (per. № 05-2-312), как процентное содержание образцов, определенных 
набором как положительные, и составляет 100%;
3.3. Диагностическая чувствительность выявления ДНК Mycoplasma genitalium: клини­
ческие испытания, проведенные на 94 положительных образцах, показали 100 % чувстви­
тельность (интервал 97 %-100 %, с доверительной вероятностью 90 %);


--- стр. 3 ---
/
/
3.4. Диагностическая специфичность выявления ДНК Mycoplasma genitalium: клиниче­
ские испытания, проведенные на 94 отрицательных образцах, показали 100 % специфичность 
(интервал 97 %-100 %, с доверительной вероятностью 90 %).
4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Внимание! Несоблюдение приведённых ниже требований может привести к  
искажению результатов ПЦР.
4.1. Потенциальный риск применения набора - класс 26 (Приказ М3 РФ от 06.06.2012 
№ 4н).
4.2. При работе с набором следует соблюдать СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с 
микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных 
болезней».
4.3. Для предотвращения контаминации необходимо территориально разделять этапы 
выделения ДНК/РНК и постановки ПЦР согласно МУ 1.3. 2569-09 «Организация работы ла­
бораторий, исследующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материа­
лом, содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности».
4.4. При работе с набором следует надевать одноразовые медицинские перчатки.
4.5. Каждое рабочее место должно быть снабжено собственным набором пипеток пере­
менного объема, необходимыми вспомогательными материалами и оборудованием. Запре­
щается их перемещение между рабочими местами.
4.6. Для проведения реакции амплификации с детекцией продуктов ПЦР в режиме ре­
ального времени необходимо использовать только одноразовые наконечники с фильтром для 
пипеток.
4.7. Не допускается использование одних и тех же наконечников при добавлении раз­
ных образцов.
4.8. После окончания работ для дезинфекции и предотвращения контаминации все ра­
бочие поверхности и оборудование следует подвергнуть действию бактерицидных УФ ламп 
в течение 1  часа. Затем обработать регламентированными санитарными правилами дезинфи­
цирующими средствами (такгши, как: 0,2% раствор <(ДП-2Т»; 1-3% раствор «Диабак»;  
0,5% раствор «Лизафин»; 0,5-1% раствор «Мистраль»; 0,5-2% раствор «Велтолен»),
4.9. Все использованные одноразовые материалы подвергать обработке дезинфициру­
ющими средствами с последующей утилизацией (см. МУ 287-113 «Методические указания 
по дезинфекции, предстерилизационной очистке и стерилизации изделий медицинского 
назначения»).
4.10. При использовании набора образуются отходы классов А, Б и Г, которые класси­
фицируются и уничтожаются (утилизируются) в соответствии с СанПиН 2.1.7.2790-10 «Са-


--- стр. 6 ---
ценции в режиме реального времени.
8. РЕГИСТРАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
8.1. В положительном контрольном образце универсальном (ПКО) программа должна 
фиксировать:
- нарастание сигнала амплификации ДНК ВКО (канал «РАМ») и определять значение 
порогового цикла Ct ВКО;
- нарастание сигнала амплификации ДНК Mycoplasma genitalium  (канал «КОХ») и 
определять значение порогового цикла Ct Mycoplasma genitalium.
8.2. В отрицательном контрольном образце (ОКО) программа должна фиксировать 
нарастание сигнала амплификации ДНК ВКО (канал «РАМ») и определять Ct ВКО, при этом 
программа не должна регистрировать нарастания сигнала специфического продукта ампли­
фикации ДНК по каналу «КОХ».
8.3. В каждом исследуемом образце программа должна фиксировать нарастание сигна­
ла амплификации ДНК ВКО (канал «РАМ») и определять CtBKO.
9. УЧЁТ РЕЗУЛЬТАТОВ
9.1. Вычислить (Ct ВКО)ср как среднее значение Ct ВКО всех анализируемых образцов 
(включая ПКО и ОКО). Отбраковке подлежат значения Ct ВКО, отличающиеся более чем на 
2 от значения (Ct ВКО)ср. После отбраковки пересчитать (Ct ВКО)ср для оставшихся значе­
ний.
9.2. Анализируемый образец считается положительным, содержащим ДНК Mycoplasma 
genitalium, если для этого образца значение Ct по каналу «КОХ» меньше или равно 40.
9.3. Результат анализа образца считается отрицательным, если для этого образца значе­
ние Ct по каналу «КОХ» больше 40 или не определяется.
Если для такого образца значение Ct ВКО превышает значение (Ct ВКО)ср более чем на 
2, то результат по данному образцу не подлежит анализу и учету как отрицательный. Необ­
ходимо провести повторный анализ данного образца, начиная с этапа выделения.
9.4. Если для ОКО значение Ct по каналу «КОХ» меньше или равно 40, то это свиде­
тельствует о наличии контаминации в системе. В этом случае положительные результаты, 
полученные в данной индивидуальной постановке ПЦР, считаются недостоверными. Требу­
ется предпринять меры по выявлению и ликвидации источника контаминации и повторить 
анализ всех образцов данной постановки, для которых получен положительный результат.
Образцы, анализ которых дал отрицательный результат, следует учитывать как отрица­
тельные.


--- стр. 7 ---
/ю . УСЛОВР1Я ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ, ХРАНЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЯ НАБОРА
10.1. Транспортировать изделия следует транспортом всех видов в крытых транспорт­
ных средствах в соответствии с правилами перевозок, действующими на транспорте данного 
вида, при температуре (2-8) °С. Допускается транспортирование при температуре до 25 °С не 
более 10 суток.
10.2. Хранение набора в упаковке предприятия-изготовителя должно проводиться при 
температуре (2-8) °С в течение всего срока годности.
10.3. Срок годности набора - 12 месяцев со дня выпуска. Не допускается применение 
наборов по истечении срока их годности.
10.4. Для получения надёжных результатов необходимо строгое соблюдение данной 
инструкции по применению набора.
11. ГАРАНТИЙНЫЕ ОБЯЗАТЕЛЬСТВА
11.1. Производитель гарантирует соответствие выпускаемых изделий требованиям 
нормативной и технической документации.
Безопасность и качество изделия гарантируются в течение всего срока годности.
11.2. Производитель отвечает за недостатки изделия, за исключением дефектов, воз­
никших вследствие нарушения правил пользования, условий транспортирования и хранения, 
либо действия третьих лиц, либо непреодолимой силы.
11.3. Производитель обязуется за свой счет заменить изделие, технические и функцио­
нальные характеристики (потребительские свойства) которого не соответствуют норматив­
ной и технической документации, если указанные недостатки явились следствием скрытого 
дефекта материалов или некачественного изготовления изделия производителем.
Срок годности набора - 12 месяцев со дня выпуска.
По вопросам, касающимся качества набора «РеалБест ДНК Mycoplasma genitalium», 
следует обращаться в ЗАО «Вектор-Бест» по адресу:
630128, г. Новосибирск-128, а/я 102,
тел. (383) 332-92-49, 227-60-30; тел./факс (383), 332-94-47, 332-94-44.
E-mail: plkobtk&.vector-best. ru
Начальник отделения 
ЗАО «Вектор-Бест»
Директор по производству 
ЗАО «Вектор-Бест»
А.В. Трухина
й работе 
нздрава России
В.К. Ткачев
Т.И. Поспелова


--- стр. 8 ---
Прошнуровано, пронумеровано и 
скреплено печатью 9^ листов.
Отв. за учет договоров НИР ГБОУ ВПО НЕМУ 
Минздрава России
^  Захарова Л.Н
201^ г.


--- стр. 9 ---
«УТВЕРЖДАЮ»
Генеральный директор 
:<Вектор-Бест»
- М.Д. Хусаинов 
2016 г.
ИНСТРУКЦИЯ
по применению набора реагентов для выявления ДНК Mycoplasma genitalium 
методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени 
«РеалБест ДНК Mycoplasma genitalium»
(комплект 2)
1. НАЗНАЧЕНИЕ
Набор реагентов для выявления ДНК Mycoplasma genitalium методом полимеразной 
цепной реакции в режиме реального времени «РеалБест ДНК Mycoplasma genitalium» пред­
назначен для выявления ДНК Mycoplasma genitalium методом полимеразной цепной реакции 
(ПЦР) с гибридизационно-флуоресцентной детекцией продуктов ПЦР в режиме реального 
времени.
Выделение ДНК из клинических проб проводится с помощью наборов «РеалБест ДНК- 
экспресс», «РеалБест ДНК-экстракция 1», «РеалБест ДНК-экстракция 2», «РеалБест ДНК- 
экстракция 3» или «РеалБест экстракция 100».
Комплект 2 предназначен для применения с регистрирующими амплификаторами как 
роторного типа: «Rotor-Gene 3000», «Rotor-Gene 6000» (фирма Corbett Research, Австралия), 
«Rotor-Gene Q» (фирма Qiagen, Германия), так и планшетного типа: «iQ5 iCycler», «CFX96» 
(фирма Bio-Rad, США), «ДТ-96» (ООО «НПО ДНК-Технология», Россия) или их аналогами.
Комплект 2 рассчитан на проведение анализа 100 образцов, включая контрольные.
2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА
2.1. Принцип метода.
Принцип анализа основан на регистрации процесса амплификации выбранного участка 
ДНК возбудителя инфекции в ходе проведения ПЦР.
Процесс амплификации заключается в повторяющихся циклах: температурная денату-
Инструкция составлена сотрудниками ЗАО «Вектор-Бест»: директором
по производству Ткачевым В.К. и нач. отделения производства ПЦР наборов Трухиной А. В.


--- стр. 10 ---
эация ДНК-матрицы, отжиг праймеров с комплементарными последовательноетями ДНК- 
матрицы, еинтез комплементарной цепи с этих праймеров Taq-полимеразой. В основе реги­
страции процесса амплификации лежит измерение сигналов флуоресценции в каждом цикле 
ПЦР. Увеличение сигналов флуоресценции происходит благодаря использованию гибриди- 
зационного ДНК-зонда, специфичного для выбранного участка ДНК возбудителя инфекции, 
который в ходе реакции связывается с одной из цепей ДНК, обеспечивая также дополни­
тельную специфичность метода. ДНК-зонд содержит на 5'-конце флуоресцентный краситель, 
а на 3'-конце - гаситель флуоресценции, значительно снижающий интенсивность флуорес­
ценции. В ходе полимеразного синтеза комплементарной цепи, благодаря 5'-3'-нуклеазной 
активности Taq-полимеразы, зонд расщепляется с 5'-конца и происходит разобщение краси­
теля и гасителя, приводящее по мере накопления продукта реакции к возрастанию сигнала 
флуоресценции. При этом измеряемая интенсивность флуоресценции зависит от количества 
образовавшихся специфических ампликонов и динамика нарастания флуоресценции опреде­
ляется исходным количеством ДНК возбудителя инфекции в образце.
Учёт эффективности выделения ДНК из образцов обеспечивается вьщелением ДНК 
возбудителя инфекции из клинических проб совместно с предварительно внесённым внут­
ренним контрольным образцом (ВКО).
2.2. Состав набора:
- положительный контрольный образец универсальный (ПКО) - 1  пробирка (1,0 мл);
- реакционная смесь для ПЦР (PC), лиофилизированная - 10 пробирок, каждая на 10 
определений;
- раствор для восстановления (РВ) - 2 флакона (по 2,0 мл).
3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
3.1. Специфичность выявления ДНК Mycoplasma genitalium определяется по стандарт­
ной панели предприятия отрицательных образцов ДНК-экстрактов, СПП (per. № 05-2-291), 
как процентное содержание образцов, определенных набором как отрицательные, и состав­
ляет 100%;
3.2. Чувствительность определяется по пяти образцам с содержанием ДНК бактерий 
Mycoplasma genitalium 100 копий в пробе, приготовленным из СОН ДНК бактерий Mycoplas­
ma genitalium (per. № 05-2-312), как процентное содержание образцов, определенных набо­
ром как положительные, и составляет 100%;
3.3. Диагностическая чувствительность выявления ДНК Mycoplasma genitalium; клини­
ческие испытания, проведенные на 94 положительных образцах, показали 100 % чувстви­
тельность (интервал 97 %-100 %, с доверительной вероятностью 90 %);


--- стр. 11 ---
3.4. Диагностическая специфичность выявления ДНК Mycoplasma genitalium: клиниче­
ские испытания, проведенные на 94 отрицательных образцах, показали 100 % специфичность 
(интервал 97 %-100 %, с доверительной вероятностью 90 %).
4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Внимание! Несоблюдение приведённых ниже требований может привести к  
искажению результатов ПЦР.
4.1. Потенциальный риск применения набора - класс 26 (Приказ М3 РФ от 06.06.2012 
№ 4н).
4.2. При работе с набором следует соблюдать СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с 
микроорганизмами III-1V групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных 
болезней».
4.3. Для предотвращения контаминации необходимо территориально разделять этапы 
выделения ДНК/РНК и постановки ПЦР согласно МУ 1.3. 2569-09 «Организация работы ла­
бораторий, исследующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материа­
лом, содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности».
4.4. При работе с набором следует надевать одноразовые медицинские перчатки.
4.5. Каждое рабочее место должно быть снабжено собственным набором пипеток пере­
менного объема, необходимыми вспомогательными материалами и оборудованием. Запре­
щается их перемещение между рабочими местами.
4.6. Для проведения реакции амплификации с детекцией продуктов ПЦР в режиме ре­
ального времени необходимо использовать только одноразовые наконечники с фильтром для 
пипеток.
4.7. Не допускается использование одних и тех же наконечников при добавлении раз­
ных образцов.
4.8. После окончания работ для дезинфекции и предотвращения контаминации все.ра­
бочие поверхности и оборудование следует подвергнуть действию бактерицидных УФ ламп 
в течение 1 часа. Затем обработать регламентированными санитарными правилами дезинфи­
цирующими средствами (такими, как: 0,2% раствор «ДП-2Т»; 1-3% раствор «Диабак»;  
0,5%раствор «Лизафин»; 0,5-1%раствор «Мистраль»; 0,5-2%раствор «Велтолен»),
4.9. Все использованные одноразовые материалы подвергать обработке дезинфициру­
ющими средствами с последующей утилизацией (см. МУ 287-113 «Методические указания 
по дезинфекции, предстерилизационной очистке и стерилизации изделий медицинского 
назначения»).
4.10. При использовании набора образуются отходы классов А, Б и Г, которые класси-


--- стр. 15 ---
8.3. в каждом исследуемом образце программа должна фиксировать нарастание сигна­
ла амплификации ДНК ВКО (канал «РАМ»/«Green») и определять CtBKO.
9. УЧЁТ РЕЗУЛЬТАТОВ
9.1. Вычислить (Ct ВКО)ср как среднее значение Ct ВКО всех анализируемых образцов 
(включая ПКО и ОКО). Отбраковке подлежат значения Ct ВКО, отличающиеея более чем на 
2 от значения (Ct ВКО)ср. После отбраковки пересчитать (Ct ВКО)ср для оставшихся значе­
ний.
9.2. Анализируемый образец считается положительным, содержащим ДНК Mycoplasma 
genitalium, если для этого образца значение Ct по каналу «ROX»/«Orange» меньше или равно 
40.
9.3. Результат анализа образца считается отрицательным, если для этого образца значе­
ние Ct по каналу «ROX»/«Orange» больше 40 или не определяется.
Если для такого образца значение Ct ВКО превышает значение (Ct ВКО)ср более чем 
на 2, то результат по данному образцу не подлежит анализу и учету как отрицательный. 
Необходимо провести повторный анализ данного образца, начиная с этапа выделения.
9.4. Если для ОКО значение Ct по каналу «ROX»/«Orange» меньше или равно 40, то это 
свидетельствует о наличии контаминации в системе. В этом случае положительные резуль­
таты, полученные в данной индивидуальной постановке ПЦР, считаютея недостоверными. 
Требуется предпринять меры по выявлению и ликвидации источника контаминации и повто­
рить анализ всех образцов данной постановки, для которых получен положительный резуль­
тат.
Образцы, анализ которых дал отрицательный результат, еледует учитывать как отрица­
тельные.
10. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ, ХРАНЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЯ НАБОРА
10.1. Транспортировать изделия следует транспортом всех видов в крытых транспорт­
ных средствах в соответствии с правилами перевозок, действующими на транспорте данного 
вида, при температуре (2-8) °С. Допускается транспортирование при температуре до 25 °С не 
более 10 суток.
10.2. Хранение набора в упаковке предприятия-изготовителя должно проводиться при 
температуре (2-8) °С в течение всего срока годности.
10.3. Срок годности набора - 12 месяцев со дня выпуска. Не допускается применение 
наборов по истечении срока их годности.
10.4. Для получения надёжных результатов необходимо строгое соблюдение данной 
инструкции по применению набора.


--- стр. 16 ---
11. г а р а н т и й н ы е о б я з а т е л ь с т в а
11.1. Производитель гарантирует соответствие выпускаемых изделий требованиям 
нормативной и технической документации.
Безопасность и качество изделия гарантируются в течение всего срока годности.
11.2. Производитель отвечает за недостатки изделия, за исключением дефектов, воз­
никших вследствие нарушения правил пользования, условий транспортирования и хранения, 
либо действия третьих лиц, либо непреодолимой силы.
11.3. Производитель обязуется за свой счет заменить изделие, технические и функцио­
нальные характеристики (потребительские свойства) которого не соответствуют норматив­
ной и технической документации, если указанные недостатки явились следствием скрытого 
дефекта материалов или некачественного изготовления изделия производителем.
Срок годности набора - 12 месяцев со дня выпуска.
По вопросам, касающимся качества набора «РеалБест ДНК Mycoplasma genitalium», 
следует обращаться в ЗАО «Вектор-Бест» по адресу:
630128, г. Новосибирск-128, а/я 102,
тел. (383) 332-92-49, 227-60-30; тел./факс (383), 332-94-47, 332-94-44.
E-mail: vlkobtk(a)vector-best. ru
Начальник отделения 
ЗАО «Вектор-Бест» А.в. Трухина
Директор по производству 
ЗАО «Вектор-Бест»
[О Й  работе 
[инздрава России
___ В.К. Ткачев
Т.И. Поспелова


--- стр. 17 ---
«
Прошнуровано, пронумеровано и 
ск^р^ено печатью лиетов.
за учет договоров НИР ГБОУ ВПО НЕМУ
"^Минздрава Роесии
Захарова Л.Н
^  Ш<^  г.