Набор реагентов для дифференциального выявления ДНК вирусов папилломы человека 6, 11 и 44 типов методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (РеалБест ДНК ВПЧ 6/11/44) по ТУ 21.20.23-088-23548172-2019 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 --- «УТВЕРЖДАЮ» Генеральный директор .АО «Вектор-Бест» М.Д. Хусаинов 'Г Я 2020 г. ИНСТРУКЦИЯ по применению набора реагентов для дифференциального выявления ДНК вирусов папилломы человека 6. 11 и 44 типов методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени «РсалБес! ДИК ВПЧ 6/11/44» 1. НАЗНАЧЕНИЕ Набор реагентов для дифференциального выявления ДНК вирусов папилломы чело века 6, 11 и 44 типов методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени «РеалБест ДНК ВНЧ 6/11/44» предназначен для качественного дифференциального выявле ния ДНК вирусов папилломы человека (ВПЧ) 6, 11 и 44 типов в клинических образцах (со- скобы эпителиальных клеток) методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с гибридизаци- онно-флуоресцентной детекцией продуктов ПЦР в режиме реального времени. Набор может быть использован при диагностике папилломавирусной инфекции. 2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА 2.1. Принцип метода. Принцип анализа основан на регистрации процесса амплификации выбранного участ ка ДНК возбудителя инфекции в ходе проведения ПЦР. Процесс амплификации заключается в повторяющихся циклах: температурная дена турация ДНК-матрицы. отжиг праймеров с комплементарными последовательностями ДНК- матрицы, синтез комплементарной цепи с этих праймеров Taq ДНК-полимеразой. В основе регистрации'процесса а.мплификации лежит измерение сигналов флуоресценции в каждом цикле ПЦР. Увеличение сигналов флуоресценции происходит благодаря использованию ги- бридизационного ДНК-зонда. специфичного для выбранного участка ДНК возбудителя ин фекции, который в ходе реакции связывается с одной из цепей ДНК, обеспечивая также до полнительную специфичность метода. ДНК-зонд содержит на 5'-конце флуоресцентный кра- Ипструкцш составлена сотрудниками АО «Вектор-Бест»: Директором по производству Ткачевым В.К. и нач. отделения производства ПЦР наборов Трухиной А. В. У --- стр. 2 --- ситель. а на З'-конце - гаситель флуоресценции, значительно снижающий интенсивность флуоресценции. В ходе полимеразного синтеза комплементарной цепи, благодаря 5'-3’- нуклеазной активности I'aq ДНК-полимеразы, зонд расщепляется с 5'-конца и происходит разобщение красителя и гасителя, приводящее по мере накопления продукта реакции к воз растанию сигнала флуоресценции. При этом измеряемая интенсивность флуоресценции за висит от количества образовавшихся специфических ампликонов и динамика нарастания флуоресценции определяется исходным количеством целевой ДНК в образце. Учёт эффективности выделения ДНК из образцов обеспечивается выделением целе вой ДНК из клинического материала совместно с предварительно внесённым внутренним контрольным образцом (ВКО). 2.2. Состав набора: Компонент набора (сокращение) О писание. Количество Положительный контрольный образен (ПКО) Б есцвет ная ж идкост ь, со д ер ж и т нат рия а зи д (0.05% ) 1 пробирка. 1 мл Готовая реакционная смесь для ПЦР (ГРС) Л иоф и ли зи р о ва н н а я 96 пробирок Оптическая пленка 1.5 листа 2.3. Условия применении. Аналитические и диагностические характеристики набора были валидированы при вы делении ДНК из клинических образцов (соскобы эпителиальных клеток) с использованием наборов: «РеалБест ДНК-экспресс», «РеалБест ДНК-экстракция 3», «РеалБест экстракция 100», «РеалБест УниМаг» и «Лизирующий раствор» производства АО «Вектор-Бест». Набор применяется с регистрирующими амплификаторами планшетного типа: «CFX96», «iQ5 iCycler» (фирма Bio-Rad, США); «ДТ-96», «ДТпрайм», «ДТлайт» (ООО «НПО ДНК-Технология». Россия). Набор рассчитан на проведение анализа 96 образцов, включая контрольные образцы. 3. АНАЛИТИЧГХКИЕ И ДИАГНОСТИЧГХКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ 3.1. Аналитическая чувствительность: Чувствительность выявления ДНК ВПЧ 6 типа - не более 100 копий в пробе; определя ется по стандартному образцу предприятия (СОП 05-2-422), образцы с содержанием ДНК ВПЧ 6 типа 100 копий в пробе в 100 % случаев дают положительный результат. Чувствительность выявления ДНК ВПЧ 11 типа - не более 100 копий в пробе; опреде ляется по стандартному образцу предприятия (СОП 05-2-423); образцы с содержанием ДНК ВПЧ 11 типа 100 копий в пробе в 100 % случаев дают положительный результат. Чувствительность выявления ДИК ВПЧ 44 типа - не более 100 копий в пробе; опреде ляется по стандартному образцу предприятия (СОП 05-2-473), образцы с содержанием ДНК --- стр. 3 --- ВПЧ 44 типа 100 копий в пробе в 100 % случаев дают положительный результат. 3.2. Аналитическая специфичность: Для оценки аналитической специфичности были проведены проверки с ДНК бактерий, грибов и вирусов, которые могут присутствовать в урогенитальных соскобах эпителиальных клеток: ВПЧ 16, 18. 26, 31, 33, 35, 39. 45. 51. 52. 53. 56, 58, 59, 66. 68. 73. 82 типов. Candida albicans. Neisseria gonorrhoeae. Chlamydia trachomatis. Mycoplasma hominis. Mycoplasma geni- talium. Ureaplasma species. Trichomonas vaginalis, Gardnerella vaginalis, ЦМВ, ВЭБ. ВПГ-1. ВПГ-2. Перекрестно реагирующих ДНК бактерий, грибов и вирусов по данным, полученным при исследованиях в рамках клинико-лабораторных испытаний, обнаружено не было. Был проведен in silico анализ последовательностей праймеров и зондов по базам после довательностей микроорганизмов и вирусов, которые могут присутствовать в урогениталь ном тракте человека (Myeoplasma genitalium. Mycoplasma hominis. Chlamydia trachomatis. Ureaplasma urealyticum; Ureaplasma parvum; Neisseria gonorrhoeae, Lactobacillus species. Gard- nerclla vaginalis, Atopobium vaginae, Prevotella species, Mobiluncus curlisii, Mobiluncus mulieris, Candida albicans, ЦМВ, ВЭБ, ВПГ-1 и ВПГ-2. ВГВ. ВГС. ВИЧ), a также ВНЧ других типов. Возможность перекрестных реакций исключена. 3.3. Диагностическая чувствительность выявления ДНК ВПЧ 6 тина: клинические ис пытания. проведенные на 45 положительных образцах, содержащих ДНК ВПЧ 6 тина, пока зали 100 % чувствительность (интервал 92.1 % - 100 %, с доверительной вероятностью 95 %); Диагностическая чувствительность выявления ДПК ВПЧ 11 типа: клинические испы тания. проведенные на 46 положительных образцах, содержащих ДНК ВПЧ 11 типа, показа ли 100 % чувствительность (интервал 92.3 % - 100 %. с доверительной вероятностью 95 %); Диагностическая чувствительность выявления ДНК ВПЧ 44 типа: клинические испы тания, проведенные на 46 положительных образцах, содержащих ДНК ВПЧ 44 типа, показа ли 100 % чувствительность (интервал 92,3 % - 100 %. с доверительной вероятностью 95 %); 3.4. Диагностическая специфичность выявления ДНК ВПЧ 6 типа: клинические испы тания, проведенные на 186 отрицательных образцах, не содержащих ДНК ВПЧ 6 типа, пока зали 100 % специфичность (интервал 98.0 % - 100 %, с доверительной вероятностью 95 %); Диагностическая специфичность выявления ДНК ВПЧ 11 типа: клинические испыта ния. проведенные на 185 отрицательных образцах, не содержащих ДНК ВПЧ 11 типа, пока зали 100 % специфичность (интервал 98.0 % - 100 %. с доверительной вероятностью 95 %); Диагностическая специфичность выявления ДНК ВПЧ^14 типа: клинические испыта ния. проведенные на 185 отрицательных образцах, не содержащих ДНК ВПЧ 44 типа, пока зали 100 % специфичность (интерваз 98.0 % - 100 %, с доверительной вероятностью 95 %). 3.5. Воспроизводимость результатов качественного дифференциального выявления --- стр. 8 --- чение порогового цикла Ct ПКО. 8.1.2. В ОКО программа должна фиксировать нарастание сигнала амплификации ДНК ВКО (канал «Су5») и определять Ct ВКО. при этом по каналам «НЕХ», «ROX» и «РАМ» программа не должна регистрировать нарастание сигнала специфического продукта ампли фикации ДНК с Ct меньше или равно 40. Если для ОКО значение Ct по каналам «НЕХ», и/или «КОХ», и/или «РАМ» .меньше или равно 40. то это свидетельствует о наличии контаминации (см. п. 8.2.4). 8.1.3. В каждом исследуемо.м образце програ.мма должна фиксировать нарастание сигнала амплификации ДНК ВКО (канал «Су5») и определять Ct ВКО. 8.2. Учёт результатов. 8.2.1 Вычислить (Ct ВКО)ср как среднее значение Ct ВКО всех анализируемых образ цов (включая ПКО и ОКО). Отбраковке подлежат значения Ct ВКО. отличающиеся более чем на 2 от значения (Ct ВКО)ср. После отбраковки пересчитать (Ct ВКО)ср для оставшихся значений. 8.2.2. Анализируемый образец считается отрицательны.м (не содержащим ДНК ВНЧ 6. ВПЧ 11 и ВПЧ 44), если для этого образца Ct по каналам «НЕХ», «КОХ» и «РАМ» больше 40 или не определяется. Если для такого образца значение Ct ВКО превышает значение (Ct ВКО)ср более чем на 2. то результат по данному образцу не подлежит анализу и учету как отрицательный. Необходимо провести повторный анализ данного образца, начиная с этапа выделения ДНК. 8.2.3. Анализируемый образец считается положительны.м (содержащим ДНК ВПЧ 6), если для этого образца значения Ct по каналу «НЕХ» меньше или равно 40. Анализируемый образец считается положительным (содержащим ДНК ВПЧ 11). если для этого образца значения Ct по каналу «КОХ» меньше или равно 40. Анализируемый образец считается положительным (содержащим ДНК ВПЧ 44), если для этого образца значения Ct но кана.ту «РАМ» меньше или равно 40. 8.2.4. В случае контаминации все положительные результаты по данной индивидуаль ной постаноэке ПЦР считаются недостоверными. Требуется предпринять меры по выявле нию и ликвидации источника контаминации и повторить аназиз всех образцов данной по становки. для которых получен положительный результат. Образцы данной постановки, ана лиз которых дал отрицательный результат, следует учитывать, как отрицательные. --- стр. 9 --- 9. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ, ХРАНЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЯ НАБОРА 9.1. Транспортировать изделия следует транспортом всех видов в крытых транспорт ных средствах в соответствии с правилами перевозок, действующими на транспорте данного вида, при температуре (2-8) °С. Допускается транспортирование при температуре до 26 °С нс более 10 суток. 9.2. Хранение набора в упаковке предприятия-изготовителя должно осуществляться при температуре (2-8) °С в течение всего срока годности в холодильных камерах или холо дильниках, обеспечивающих рсгла.ментированный температурный режим с ежедневной ре гистрацией температуры. 9.3. Срок годности набора - 12 месяцев со дня выпуска. Нс допускается при.менение наборов по истечении срока их годности. 9.4. Для получения надёжных результатов необходимо строгое соблюдение инструк ции но применению набора. 9.5. Изделие не требует технического обслуживания и нс подлежит ремонту. 10. ГАРАНТИЙНЫЕ ОБЯЗАТЕЛЬСТВА 10.1. Производитель гарантирует соответствие выпускае.мых изделий требованиям нормативной и технической документации. Безопасность и качество изделия гарантируются в течение всего срока годности. 10.2. Производитель отвечает за недостатки изделия, за исключением дефектов, воз никших вследствие нарушения правил пользования, условий транспоргирования и хране ния. либо действия третьих лиц, либо непреодолимой силы. 10.3. Производитель обязуется за свой счет заменить изделие, технические и функци ональные характеристики (потребительские СЕЮЙства) которого не соответствуют норма тивной и технической документации, если указанные недостатки явились следствием скры того дефекта материалов или некачественного изготовления изделия производителем. По вопросам, касающи.мся качества набора «РеалБест ДНК НПЧ 6/11/44», следует об ращаться в АО «Вектор-Бссг» по адресу: 630117. г. Новосибирск-117, а/я 492, тел. (383) 332-92-49, 227-60-30; тел./факс (383), 332-94-47. 332-94-44. E -m ail: D lk o h t k ( a ) . v e c t o r - b e s t . ru --- стр. 10 --- Начальник отделения производства ПЦР-наборов АО «Вектор-Бест» Директор по производству АО «Вектор-Бест» Проректор по научной работе ФГБОУ ВО НГМУ Минздрава России Д . М . Н . , профессор м.п. А.в. Трухина В.К. Ткачев Т.И. Поспелова /