Набор реагентов для выявления ДНК Candida albicans и ДНК Gardnerella vaginalis методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (РеалБест ДНК Candida albicans/Gardnerella vaginalis) по ТУ 9398-263-23548172-2010 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 --- «УТВЕРЖДАЮ» Генеральный директор АО «BeiCFOji-BecT» М.Д. Хусаинов 2020 г. ИНСТРУКЦИЯ по применению набора реагентов” для выявления ДНК Candida albicans и ДНК Gardnerella vaginalis методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени «РеалБест ДНК Candida albicans / Gardnerella vaginalis» (комплект 1) 1. НАЗНАЧЕНИЕ Набор реагентов «РеалБест ДНК Candida albicans / Gardnerella vaginalis» предназна чен для выявления ДНК Candida albicans и ДНК Gardnerella vaginalis, вьщеленной из кли нических проб, методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с гибридизационно- флуорссцентной детекцией продуктов ПЦР в режиме реального времени. Выделение ДИК из клинических проб проводится с помощью наборов: «РеалБест ДНК-экспресс», «РеалБест ДНК-экстракция 1», «РеалБест ДНК-экстракция 3» и «РеалБест экстракция 100». Комплект 1 предназначен для применения с регистрирующими амплификаторами: «iQ iCycler», «iQ5 iCycler» и «CFX96» (фирма Bio-Rad, США), «ДТ-96» (ООО «НПО ДНК- Технология», Россия) или их аналогами. Комплект 1 рассчитан на проведение анализа 96 образцов, включая контрольные об разцы. 2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА 2.1. Принцип метода. Принцип анализа основан на регистрации процесса амплификации выбранного фраг мента ДНК. заключающегося в повторяющихся циклах: температурная денатурация, отжиг праймеров с комплементарными последовательностями, достройка полинуклеотидных по следовательностей с этих праймеров Taq-полимеразой. Ииструкцт составлена сотрудниками АО «Вектор-Бест»: Директором по производству Ткачевым В. К. и нач. отделения производства ПЦР наборов Трухиной А. В. --- стр. 2 --- в основе используемого метода регистрации лежит измерение сигналов флуоресцен ции в каждом цикле ПЦР. Увеличение сигналов флуоресценции происходит благодаря использованию специ фичного для данного участка ДНК возбудителя инфекции гибридизационного ДНК-зонда, который в ходе реакции связывается с одной из цепей ДНК. обеспечивая дополнительную специфичность метода. ДНК-зонд содержит на 5 конце флуоресцентный краситель, а на 3 конце - гаситель флуоресценции, значительно снижающий интенсивность флуоресценции. В ходе полимеразного синтеза комплементарной цепи, благодаря 5'-3'экзонуклеазной активности l'aq-полимеразы, зонд расщепляется с 5 конца и происходит разобщение красителя и гасите ля, приводящее по мере накопления продукта реакции к возрастанию сигнала флуоресцен ции. При этом измеряемая интенсивность флуоресценции зависит от количества образовав шихся специфических ампликонов и динамика нарастания флуоресценции определяется ис ходным количеством ДНК возбудителя инфекции в образце. Учёт эффективности выделения ДНК Candida albicans и ДНК Gardnerella vaginalis из образцов обеспечивается выделением ДНК Candida albicans и ДНК Gardnerella vaginalis из клинических проб совместно с предварительно внесённым неконкурентным внутренним контрольным образцом (ВКО). 2.2. Состав набора: - положительный контрольный образец универсальный (ПКО) - на основе плазмид- ной ДНК со встройкой фрагментов ДНК ряда герпес вирусов и возбудителей ИППП, в том числе ДНК Candida albicans и ДНК Gardnerella vaginalis - 1 пробирка (1,0 мл); - готовая реакционная смесь для ПЦР (ГРС), лиофилизированная - 96 пробирок. Набор дополнительно комплектуется: -оптической плёнкой - 1,5 листа. 3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ 3.1. Чувствительность - выявление 100 копий ДНК Candida albicans и ДНК Gardnerella vaginalis в стандартных образцах предприятия - 100%. 3.2. Специфичность выявления ДНК Candida albicans и ДНК Gardnerella vaginalis (по стандартной панели предприятия отрицательных ДНК-экстрактов) - 100%. 4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ Внимание! Несоблюдение приведённых ниже требований может привести к «с- кажению результатов ПЦР, 4.1. Потенциальный риск применения набора - класс 26 (приказ М3 РФ от 06.06.2012 №4н). --- стр. 3 --- 4.2. При работе с набором следует соблюдать СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней». 4.3. Для предотвращения контаминации необходимо территориально разделять этапы выделения ДНК/РНК и постановки ПЦР согласно МУ 1.3. 2569-09 «Организация работы ла бораторий, исследующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материа лом, содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности». 4.4. При работе с набором следует надевать одноразовые медицинские перчатки. 4.5. Каждое рабочее место должно быть снабжено собственным набором пипеток пе ременного объема, необходимыми вспомогательными материалами и оборудованием. За прещается их перемещение между рабочими местами. 4.6. Для проведения реакции амплификации с детекцией продуктов ПЦР в режиме ре ального времени необходимо использовать только одноразовые наконечники с фильтром для пипеток. 4.7. Не допускается использование одних и тех же наконечников при добавлении раз ных образцов. 4.8. После окончания работ для предотвращения контаминации рабочие поверхности ламинарных боксов и лабораторных столов следует подвергнуть действию бактерицидных УФ ламп в течение 1 часа. Затем обработать регламентированными санитарными правилами дезинфицирующими средствами (такими, как: 0,2% раствор ДП-2Т; 1-3% раствор «Диабак»; 0,5% раствор «Лизафин»; 0,5-1% раствор «Мистраль»). 4.9. Все использованные одноразовые материалы подвергать обработке дезинфици рующими средствами с последующей утилизацией. 5. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ - амплификатор с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени: «1Q iCycler», «iQ5 iCycler», «СКХ96» (фирма Bio-Rad, США), «ДТ-96» (ООО «НПО ДНК-Технология», Россия) или их аналог; - ПЦР-бокс или отдельный стол, освещаемый УФ-лампой (например, «ЦиклоТемп» фирмы СП «РТС», Россия); - холодильник бытовой, поддерживающий температуру от 2 до 8 °С; - микроцентрифуга типа «Eppendorf MiniSpin» (фирма Eppendorf, Германия); - пипетки полуавтоматические (дозаторы механические) одноканальные с перемен ным объёмом, со сменными наконечниками (фирма Ленпипет, Россия; фирма Biohit, Фин ляндия); --- стр. 8 --- Всегс прошито, пронумеровано и скреплено печатью ^ листов. Директор-чо технологии и качеству --- стр. 9 --- «УТВЕРЖДАЮ» Генеральный директор «Вектор-Бест» М.Д. Хусаинов 2020 г. ИНСТРУКЦИЯ по применению набора реагентов для выявления ДНК Candida albicans и ДНК Gardnerella vaginalis методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени «РеалБестДНК Candida albicans /Gardnerella vaginalis» (комплект 2) 1. НАЗНАЧЕНИЕ Набор реагентов «РеалБест ДНК Candida albicans / Gardnerella vaginalis» предназна чен для выявления ДНК Candida albicans и ДНК Gardnerella vaginalis, выделенной из кли нических проб, методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с гибридизационно- флуоресцентной детекцией продуктов ПЦР в режиме реального времени. Выделение ДНК из клинических проб проводится с помощью наборов: «РеалБест ДНК-экспресс», «РеалБест ДНК-экстракция 1», «РеалБест ДНК-экстракция 3» и «РеалБест экстракция 100». Комплект 2 предназначен для применения с регистрирующими амплификаторами как роторного типа: «Rotor-Gene 3000», «Rotor-Gene 6000» (фирма Corbett Research, Австралия), так и планшетного типа: «iQ iCycler», «iQ5 iCycler», «СРХ96» (фирма Bio-Rad. США), «ДТ-96» (ООО «НПО ДНК-Технология», Россия) или их аналогами. Комплект 2 рассчитан на проведение анализа 100 образцов, включая контрольные об разцы. 2, ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА 2.1. Принцип метода. Принцип анализа основан на регистрации процесса амплификации выбранного фраг мента ДНК, заключающегося в повторяющихся циклах: температурная денатурация, отжиг праймеров с комплементарными последовательностями, достройка полинуклеотидных по следовательностей с этих праймеров Taq-полимеразой. Инструкция составлена сотрудниками АО «Вектор-Бест»: Директором по производству Ткачевым В. К. и нач. отделения производства ПЦР наборов Трухиной А. В. --- стр. 10 --- в основе используемого метода регистрации лежит измерение флуоресценции в каждом цикле ПЦР. Увеличение сигналов флуоресценции происходит благодаря использованию специфич ного для данного участка ДНК возбудителя инфекции гибридизационного ДНК-зонда, кото рый в ходе реакции связьшается с одной из цепей ДНК, обеспечивая дополнительную специ фичность метода. ДНК-зонд содержит на 5' конце флуоресцентный краситель, а на 3' конце - гаситель флуоресценции, значительно снижающий интенсивность флуоресценции. В ходе по лимеразного синтеза комплементарной цепи, благодаря 5'-3' экзонуклеазной активности Taq- полимеразы. зонд расщепляется с 5'конца и происходит разобщение красителя и гасителя, приводящее по мере накопления продукта реакции к возрастанию сигнала флуоресценции. При этом измеряемая интенсивность флуоресценции зависит от количества образовавщихся специфических ампликонов и динамика нарастания флуоресценции определяется исходным количеством ДНК возбудителя инфекции в образце. Учёт эффективности выделения ДНК Candida albicans и ДНК Gardnerella vaginalis из образцов обеспечивается выделением ДНК Candida albicans и ДНК Gardnerella vaginalis из клинических проб совместно с предварительно внесённым неконкурентным внутренним контрольным образцом (ВКО). 2.2. Состав набора: - положительный контрольный образец универсальный (ПКО) - на основе плазмидной ДНК со встройкой фрагментов ДНК ряда герпес вирусов и возбудителей ИППП, в том числе ДНК Candida albicans и ДНК Gardnerella vaginalis - I пробирка (1,0 мл); - реакционная смесь для ПЦР (PC), лиофилизированная - 10 пробирок, каждая на 10 определений; - раствор для восстановления (РВ) - 2 флакона (по 2,0 мл). 3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ 3.1. Чувствительность - выявление 100 копий ДНК Candida albicans и ДНК Gardnerella vaginalis в стандартных образцах предприятия - 100%. 3.2. Специфичность выявления ДНК Candida albicans и ДНК Gardnerella vaginalis (по стандартной панели предприятия отрицательных ДНК-экстрактов) - 100%. 4, МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ Внимание! Несоблюдение приведённых ниже требований может привести к иска жению результатов ПЦР. 4.1. Потенциальный риск применения набора - класс 26 (приказ М3 РФ от 06.06.2012 Х»4н). --- стр. 11 --- / 4.2. При работе с набором следует соблюдать СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней». 4.3. Для предотвращения контаминации необходимо территориально разделять этапы выделения ДНК/РНК и постановки ПЦР согласно МУ 1.3. 2569-09 «Организация работы ла бораторий, исследующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материа лом, содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности». 4.4. При работе с набором следует надевать одноразовые медицинские перчатки. 4.5. Каждое рабочее место должно быть снабжено собственным набором пипеток пере менного объема, необходимыми вспомогательными материалами и оборудованием. Запре щается их перемещение между рабочими местами. 4.6. Для проведения реакции амплификации с детекцией продуктов ПЦР в режиме ре ального времени необходимо использовать только одноразовые наконечники с фильтром для пипеток. 4.7. Не допускается использование одних и тех же наконечников при добавлении разных образцов. 4.8. После окончания работ для предотвращения контаминации рабочие поверхности ла минарных боксов и лабораторных столов следует подвергнуть действию бактерицидных УФ ламп в течение 1 часа. Затем обработать регламентированными санитарными правилами дез инфицирующими средствами (такими, как: 0,2% раствор ДП-2Т; 1-3% раствор «Диабак»; 0,5% раствор «Лизафин»; 0,5-1% раствор «Мистраль»). 4.9. Все использованные одноразовые материалы подвергать обработке дезинфицирую щими средствами с последующей утилизацией. 5. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ - амплификатор с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени роторного типа: «Rotor-Gene 3000», «Rotor-Gene 6000» (фирма Corbett Research, Австралия) или план шетного типа: «10 iCycler», «iQ5 iCycIer», «СРХ96» (фирма Bio-Rad, США), «ДТ-96» (ООО «НПО ДНК-Технология», Россия) или их аншюг; - ПЦР-бокс или отдельный стол, освещаемый УФ-лампой (например, «ЦиклоТемп» фирмы СП «РТС», Россия); - холодильник бытовой, поддерживающий температуру от 2 до 8 °С; - микроцентрифуга типа «Eppendorf MiniSpin» (фирма Eppendorf, Германия); - пипетки полуавтоматические (дозаторы механические) одноканальные с перемен ным объемом, со сменными наконечниками (фирма Ленпипет, Россия; фирма Biohit, Фин ляндия);