Набор реагентов для иммуноферментного определения антител к ВИЧ 1/2 (ИФА-ВИЧ 1/2-АТ-ФАКТОР) по ТУ 9398-004-69721380-2012 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 ---
•.. i , ■ .f
• ■ , . . ' •
s .- > '
. ' b . . ■
' '
4-7 v.'V ■ ;
УТВЕРЖДЕНА
Приказом Росздравиадзора
от 2012 г. №
„^Е РЖ Д А Ю
в к т о р С Х Ю
I
ИНСТРУКЦИЯ
по прймененшо набора реагентов для
иммунофсрментного определения
. ! антител к ВИЧ-1/2‘ \
(ИФА-ВИЧ-1/2-АТ-ФАКТОР)
'I
НАЗНАЧЕНИЕ.
Набор предназначен дпя^офеделения специфических антител к а а ^ ^
вирусу иммунодефицита человека 1 и 2 типов в сьшоротке или
методом иммуиоф^рментногс анализа.
Набор рассчитан, в заа1с|мости от комплектации, на проведение 96, 192
анализов. 1 '
ПРИНЦИП АНАЛИЗА. I
Принцип анализа базируется на методе твердофазного ИФА в «сэндвич» варианте и
представляет собой одноэтапную процедуру с одновременной инкубацией сМвороток
(плазм) крови и конъюгата. ^ |
При внесении в лунки Планшета конъюгата и образцов исследуемых сшороток
(плазм) крови ВИЧ-специфические антитела в случае их наличия связыв8ютф| как с
рекомбинантными антигенами на твердой фазе, так и с антигенами конъюгата^ образу*
комплексы антиген-антитело. j
После отмывания несвязайных компонентов в лунки добавляют pactpop проявителя^
Пероксидазную реакцию останавливают, добавляя стоп-реагент,‘ и измеряют опфгаескую
плотность смеси в лунках планшета при двухволновом режиме (основной фильтра 450 им,,
референс фильтр - в диапазоне 620-650 нм.). Оптическая плотность пропорциональна
концентрации ВИЧ-специфйческих антител в образцах сьшоротки или плазмы крови.
I Н С Г Ш Я
i. В Е Р Н А
--- стр. 2 ---
'■ Я '" ..' i
СОСТАВ НАБОРА: • 1 ^J
Компонент
Иммуносорбеят
Полистироловый планшет, в лунках которого сорбированы
рекомбинантные полипептиды - аналоги антигенов ВИЧ-1
юу1 (я ?120. йр41), йад1 (р24. р17) и ВИЧ-2 env2 (йрЗб) __
Концевтра '1 конъюга! а (11х)»
Смесь рекомбинантных полипептидов - аналогов антигенов
ВИЧ-1 (envl, gagl) и ВИЧ-2 (ehv2), конъюгированных с
пероксидазой хрена. Красная опепса опачесцирующая
жидкость ^
Положительный коигроль
Очищенные иммуноглобулин!»! класса IgG человека,
специфические к ВИЧ. Светло-желтая слегка
оиайесцирующая жидкость ^
Отрицательный кон-гроль
Инактивированная сыворотка крови человека, не содержащая
антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2, а также поверхностный антиген
вируса гепатита В (HBsAg) и антитела к вирусу гепатита С и
Treponema pallidmn. Светло-желтая слегка опалесцирующая
жидкость
К дкцётрат промывочного раствора (26х)
Концентрат фосфатно-солевОго буфера, содержит
детергент. Бесцветная опайеСцирующая жидкость,
допускается расслоение и вьШадение кристаллического
осадка, который растворяете^ при нагревании_________
Раствор для разведения ко^ю гата
Фосфатно-солевой буфер, содержит детергент, казеиновую
фракцию белков молока, блс(к-компопенты, краситель и
консерванты. Зеленая опадес^ругощая жидкость__________
ТМБ субстрат j
3^’,5,5’-тетраметилбен:шдин в растворе, содержащем
:|[< Ч )ек ись водорода. Прозрачная бесцветная жидкость______
‘ 'С тбп-реагснт
Раствор серной кислоты. Прозрачная бесцветная жидкость
Клейкая плепка
480
анализов
1x6 мл
1x1,5 МЛ
1x2 М Л
1х180мл
1x60 М Л
1x60 М Л
1 хбО мл
15 шт.
192
анализа
1x2 мл
1x1 мл
1x1,5 мл
1x90 мл
9 6анвлизов
Ц Т
i x l мл
1x1,5 мл
: %
i
flx90 мл
1x20 мл
1x28 мл
1x28 мл
1x15 мл
1x14 мл
1x14 мл
3 щг.
ОБОРУДОВАНИЕ И РЕАГЕНТЫ:
- фотометр вертика;п>ного сканирования, позволяющий проводить' измерения
оптической плопюсги в лунках планшета при двухволновом режиме (основой фильтр-
450нм., референс филь*гр - в диапазоне 620-650 нм.); ' » ■
- вода дистиллированная;
' дезинфи 1щряощие средства, не оказьшающие негативного воздействия на качество
ИФА (комбинированные средства на основе ЧАС, спиртов, третичных аминов);
- спирт этиловый, 70°; ;
- вата гигроскопическая;
--- стр. 3 ---
' 1 ?■ f
f i
- бумага фильтровальная;
- пипетки одноканальные (5-40,20-200,200i^jp00 мкп) и наконечники к ним,
- пипетки 8-канальиые (50-300 мкл) и наконечники к ним; -
- мерный стакан или цилин1др(1000 мл); > ' '
- ванночки для реагентов;
- флаконы для реагентов, 20 мл; ^
- термостат суховоздушный ра температуру (37±2)®С;
- аппарат для промьтания планшетов (вошер);
- контейнер для твердых загрязненных отходов;
- контейнер для загрязнешхых жидкостей.
ч , I
МЕРЫ БЕЗОПАСНОСТИ ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ НАБОРА. |
1 . Работу следует проводить в спещ1ально оборудованном помещении лабор^ш рии.
2. П ри работе с набором необходимо использовать индивидуальные сред<^ защ иты :
халат, головной убор, резиновые или пластиковы е перчатки, специальная обувь, Защ итны е
очки или щиток), так к ак образцы сы воротки или плазмы крови следует р ассМ ач р и вать
к ак потенциально инфицированный биоматериал.
3. Все промывные растворы собираются в специальный контейнер и о бр абаЯ п ь ш и сгая
дезинфицирующими средствами, разреш енггы м и для применения на террятор№1 РФ в
установленном поря/шс, в концентрации и с экспозицией, указанных в и н ст]^ ук ц и ях к
применению. ;
4. Все твердые отходЬ! собираются в специальны й контейнер, обеззараживаются и
утилизируются в соответствии с ‘ требованиями СанПиН 2.1.7.2790-10 «С анитарно-
эпидемиологические требования к обращению с медицинскими отходами».
5. Лабораторная посуда многоразового использования и расходные ^м атери алы ,
контактирующ ие с исследуемыми и контрольны ми образцами, о1беззараж иваю тся с
использованием дезинфицирующих средств, не содержащих активны й кислород и хлор,
оказы ваю щ их негативное воздействие на качество ИФ А.
6. Инструменты, оборудование, а такж е рабочие поверхности столой йеобходимо
протирать 70° раствором .этилового спирта. |
ПРАВИЛА РАБОТЫ С ТЕСТ-СИСТЕМОЙ.
П -
■ i
1 .
2.
3.
4.
;
i
посуду.
He использовать набор после окончания срока годности.
Не смешивать компоненты наборов разны х серий. ^
Тщательно перемешивать реагенты при подготовке и проведении а н а л н ^ и » .
Использовать для приготовления реагентов химически чистую
обработанную дистиллированной водой.
5. Не допускать высыхания лунок на всех этапах постановки ИФ А.
6. Использовать только оборудование, прошедшее метрологетескую поверку.
7. Исключить прямое воздействие солнечных лучей на планшет во врем я проведения
исследования.
, , 8. Не допускать присутствие паров перекиси водорода и хлора в помещ ении при
проведении ИФА.
--- стр. 4 ---
t 1
'i
< ■ -!.■ > ■ • ■ /
. . f
ТРЕБОВАНИЯ К ПРОМЫВКЕ.
Процедуру промывки необходимо выполнять в соответствии с аребоваииями
инструкции. Некачественное промьшание планшета может привести к получению
некорректных результатов, j. „Промывку планшета рекомендуется проводить с использованием вошера. ;случае
отсутствия вошера допускается промывка лунок 8-канальной иипетеой. ■ ^
При каждой промывке необходимо выполнить следующие оп^>ации: >
- полностью удалит.ъ содержимое лунок; f -
- полностью заполнить лунки промывочным раствором (не менее 350 мкл1^ лунку),
без переполнения и перетекаюм жидкости в соседние лунки;
- выдержать лунки с промывочным раствором в течение 40-60 секунд; ;
- полностью удалить pactoop из лунок. ‘
На поверхности рамки -и стрипов после последней аспирации не должно быть
остатков жидкости. Удалить остатки жидкости, перевернув планшет и постукивая
планшетом по фильтровальной бумаге. т
ПОДГОТОВКА ОБРАЗЦОВ.
- 1
й
ЧI .
Образцы сыворотки или плазмы крови можно хранить при температурь 2 -8 ® С не
более 72 часов. Допускается замораживание образцов (желательно до температуры ниже -
2 0 ® С ) не более двух раз. Необходимо осветлять образцы сыворотки (плазмы), которые
содержат агрегаты и осадок, с помощью центрифугирования.
Образцы с азидом натрия, гемолизом, гиперлипидемией или баю гориш ш ны м
проростом не пригодны для анализа.
ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ. ;
Компоненты набора и анализируемые образцы крови должны быть выдержаны при
комнатной температуре (] в течение времени не менее 30 минут до начала анализа
и оставаться при указанной температуре в течение постановки анализа.
После использования компоненты набора следует хранить при “ гемпературе (2 -8 )® C i' i\
■ ' - ■ Иммуносорбент.
Извлеките необходимое количество стрипов из упаковки, вставьте йх в рамку.
Неиспользованные стрипы можно хранить в плотно закрытом пакете при температуре
(2-8)°С не больше З О дней. >
■ >
i Промывочный раствор.
Содержимое одного флакона концентрата промывочного раствора:; интенсивно
взболтайте. Если концентрат раствора содержит кристаллы, прогрейте его при
температуре 37°С до гюдаого растворения кристаллов. Разведите концентрат раствора
(26х) дистиллированной водо?согласно таблице, п ерем еш а< 1гге.
Количество 3
лунок i Дистиллированная вода, млКонцентрат промывочного
раствора, мл
8 ^ 1 7 5 7
16 1 7 5 7
32 250 10'
--- стр. 5 ---
т' Д . Я И ' ■
; ; 1 1 С
Приготовленный промывочный раствор можно хранить не более 10 даей при'
температуре (2-8)®С. ? |
Раствор конъюгата.
Разведите в чистом флаконе концентрат конъЪгата №1 (И х) раствором для
конъюгата согласно таблице. Тщательно перемешайте, не допускаяразведения
пвноооразован и я.
Количество Раствор для разведения Концентрат 1конъюГЙ га,№ 1,
лунок конъюгата Xal, мл мкл it
8 1 100
16 1 1,5 150 >
32 Л 3 300
ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА1 f
• Подготовьте планш ет сиеобходимым количеством лунок.
• Внесите в лунки по 60 м к л раствора конъю гата. Внесите исследуемы е сы воротк и
(плазм ы ) и кон1роли: j | л ,
-в лунки Л 1 и В1 - г ю 30 м к л полож ительного к о гггр о л я ; |
-в лунки С 1 и Е 1 - 1ю 30 м к л отрицательного контроля; if
-в остальны е лунки - по 30 м к л исследуемы х образцов сьш оррток. ; |:
О сторож но пипетируют смесь в лунках (во вр ем я пипетирования происходит изм енение
цвета раствора в лунках с зеленого н а синий).
• Закройте планш ет клейкой пленкой и л и к ры ш кой и инкубируйте п ри тем пературе
(37±2)°С в течение 90;минут. ^
• Промойте п л а н ы 1ет 8 раз пром ы вочн ы м раствором (так, к а к это описано в разделе
Требовант к пром ш т ). J
• Внесите в лунки по 100 м кл ТМ Б -субстрата. ?
• Закройте планш ет клейкой пленкой или к р ы ш к ой и инкубируйте при ком на1яой
температуре (18-25° Ф ) в темном месте в течение 30 минут, i
• Внесите в лунки по 100 м к л стоп-реагента для остановки цветной реак ц и и (в той ж е
последовательносги фтеекия, ч то и Т М Б -субстрат). ^ ^
• Н е более чем через 5^инут после остан овки цветной реакции изм ерьте офсичес!^^
плотность в лунка>1 в;двухволновом реж име (основной филыр - 450 нм , {^ереис
ф ильтр - в диапазон^ 620-650 нм ). В изуальны й учет результатов не допускается.
УЧЕТ И ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
• Рассчитайте среднее значение оптической плотности (СП) отрицательного контроля
- ОКср. Исключите значение ОК, которое больше 0,1 либо в 2 раза превьшхают О К ср.
Рассчитайте О К«р по оставшимся значениям. '
^ • Проведение анализа считают достоверным, если ОКср не больше 0,1, а ОП
положительного контроля не меньше 0,6. » ?
• Рассчитайте граничное значение (ГЗ), прибавляя константную величину кОК«р.
ГЗ“ ОКсрН-0,1.
• Результат анализа считается отрицательным, если ОП исследуемого образца меньше
ГЗ. " • ‘ ■К
• Результат анализа считается положительным, если ОП исследуемого образОД больше
ГЗ. . ' I
• Образцы, давшие положительный результат, необходимо исследовать повторно не
--- стр. 6 ---
... - . .
и;:, .r jv .,' - к • ■
W
I
■ f
^ й |-
менее, чем в двух луиках набора. ^
- образцы положительные в одной или более лунках набора считают положительными;
“ образцы отрицательные двух И более лунках набора стата^ отрицательными, '
Все образцы, которые при повторном анализе были положитеяьнймн, Йблжяы быть
проверены подтверждающими тестами.
■ - i
УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА -
Хранение наборов должно производиться в темном месте при темлературе (2 -8 )® С в
упаковке предприятия-изготовителя в течение всего срока годности. Допускается
хранение наборов при температуре до 2 5 ® С не более 3 суток. Замораживание
компонентов набора не допускается. j
Срок годности набора -15 месяцев. ^ |
Промывочный раствор, приготовленный для использования, можно Х1йфть при
темпера1уре 2-8° С не более 1 0 дней. t
Приготовленные для исйользования растворы конъюгатов № 1 и № 2 хр^шию не
подлежат. ^ I . • . 1
Остальные компоненты! набора можно хранить при температуре 2-8° С течение,
всего срока годности набора.
Для получения надежных результатов необходимо строгое с о б л К )д в Я 1 Й > '1
по применению набора. I ;
По ■ вопросам, касающимся качества набора ИФА-ВИЧ-1/2-АТ-ФАКТ0Р, следует
обращаться в ООО «ФакторгМед Продакшн» по адресу:
119334, г. Москва, 5-ый Донской п-д., д. 15, тел/факс (495) 661-70-82. 4
^ I■ . ?■ ■ S
:!
«СОГЛАСОВАНО» Инструкцию составил:
ГАУЗ КО «Калужский областной
Центр по п роф и лш (ё1> ((^19^б(^у^бе
со СПИД и и н d i^lra» 6 I^* lk ^(< JlШ !!^P лe
ниями»
Зав. проИЗтодством |
1ед Продакпш»
1да«ЁовВ.Н.
5012 г;
--- стр. 7 ---
П р о н ум е р о в а н о , п р о ш н у р о в а н о ^
II скр еп л ен о п е а д т ь ю_________^
( )л и <
I с II. директор
Г л .б у х г а д т е р .
, 1;1та