Диагностические наборы для идентификации ДНК плода в крови матери по ТУ 9398-001-64943561-2010 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 ---
УТВЕРЖДЕНА «УТВЕРЖДАЮ»
Приказом Росздравнадзора
20 г. №от
« У Т В Е Р Ж Д А Ю
ганизации-
Ф.И .О.
г.
Гончаров Н .Г
2010
И Н С Т Р У К Ц И Я
Диагностические наборы для идентификации Д Н К плода в крови матери:
1. Набор для идентификации гена резус-ф актора (RH D ) плода в крови матери
"Д Н К -резус ребенка" (для 50 и 100 определений).
2. Набор для идентификации гена резус-фактора (RH D ) плода в крови матери
"Д Н К -резус ребенка плюс" (для 50 и 100 определений).
3. Набор для идентификации гена S R Y плода в крови матери "ДНК-пол
ребенка" (для 50 и 100 определений).
4. Набор для идентификации гена S R Y плода в крови матери "ДНК-пол
ребенка плюс" (для 50 и 100 определений).
--- стр. 2 ---
1. с п и с о к СОКРАЩ ЕНИИ
В н астоящ ей и нструкц и и п ри м ен яю тся следую щ ие сок р ащ ен и я и обозн ачен и я:
П Ц Р п о л и м е р а з н а я ц е п н а я р е а к ц и я
RHD г е н р е з у с - ф а к т о р а
Д Н К д е з о к с и р и б о н у к л е и н о в а я к и с л о т а
П К О п о л о ж и т е л ь н ы й к о н т р о л ь н ы й о б р а з е ц
О К О о т р и ц а т е л ь н ы й к о н т р о л ь н ы й о б р а з е ц
S R Y г е н п о л о в о й п р и н а д л е ж н о с т и
Д Н К д е з о к с и р и б о н у к л е и н о в а я к и с л о т а
П К О п о л о ж и т е л ь н ы й к о н т р о л ь н ы й о б р а з е ц
О К О о т р и ц а т е л ь н ы й к о н т р о л ь н ы й о б р а з е ц
2. НАЗНАЧЕНИЕ
- ДЛЯ определения резус-ф актора плода по к р ов и резус-отрицательной берем енной
ж ен щ и н ы м етодом полим еразной цепной р еак ц и и (П Ц Р ) с гибридизационно-
ф луоресцентной детекцией . М атери алом для проведения П Ц Р служ ат п робы Д Н К ,
вы дел ен н ы е и з п л азм ы к р ов и .
- дл я определения пола плода п о к р ов и берем енной ж ен щ и н ы м етодом
п олим еразной цепной р еак ц и и (П Ц Р ) с гибридизационно-ф луоресцентной детек ц ией .
М атер и ал ом дл я п роведения П Ц Р служ ат пробы Д Н К , вьщ ел ен н ы е и з п л азм ы к р о в и .
3. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА
д л я о п р е д е л е н и я р е з у с - ф а к т о р а п л о д а .
3 . 1 . П р и н ц и п д е й с т в и я
В ы явл ен и е Д Н К гена резус-ф актора {RHD) м етодом полим еразной ц еп ной р еак ц и и
(П Ц Р ) с гибридизационно-ф луоресцентной детекцией в к л ю ч ает в себя ч еты р е э т а п а :
1 ) эк страк ц и ю (вы деление) Д Н К и з исследуемого м атер и ал а;
2) П Ц Р -ам п ли ф и кац и ю Д Н К ;
3) гибридизационно-ф луоресцентную детекцию , к отор ая производится в о в р ем я
прохож дения П Ц Р .
4) и н терп р етац и я р езультатов
--- стр. 3 ---
Э к стр ак ц и я Д Н К из исследуем ого м атер и ала п роводится с пом ощ ью
реком ендованной процедуры в ы дел ен и я . Затем с получен н ы м и п робам и Д Н К п р оводя тся
р еак ц и и ам п л и ф и к ац и и уч астк ов ген ов R H D и G A P D H в реакционном буф ере п р и п ом ощ и
специф ичны х к эти м уч астк ам Д Н К прайм еров и ф ерм ента T aq -п оли м еразы . В составе
реакционной см еси дл я ам п л и ф и к ац и и присутствую т ф луоресцентно-м ечены е
олигонуклеотидны е зонды , к оторы е гибридизую тся с к ом п л ем ен тар н ы м уч астк ом
ам п лиф ицируем ой Д Н К -м ищ ени и разрущ аю тся T aq -полим еразой, в р езультате ч его
происходит н ар астан и е интенсивности ф луоресценции. Э то п озволяет р еги стр и р овать
накопление специф ического п родукта ам п л и ф ик ац и и п утем изм ерения и н тен си вн ости
ф луоресцентного си гн ал а. Д етекция ф луоресцентного си гн ал а осущ ествляется
непосредственно в ходе П Ц Р с пом ощ ью ам п л и ф и к атора с систем ой детек ц ии
ф луоресцентного си гн ала в реж им е «реального врем ени ». П о к ан ал у, соответствую щ ем у
ф луороф ору F A M , детектируется п родукт ам п л и ф и к ац и и Д Н К ген а R H D и ген а G A P D H .
3.2. Состав набора
Н абор реагентов (в ар и ан т
вклю чает:
«Д Н К -резус ребенка») дл я п роведения 50 определений
Реактив Описание Объем,
мл Количество
С м есь дл я П Ц Р R H D -1П р озр ач н ая ж идкость
розового ц вета 0,72 1 п роби р к а
С м есь д л я П Ц Р R H D -2П р озр ач н ая ж идкость
розового ц вета 0,72 1 п роби р к а
С м есь для П Ц Р G A PD HП р озр ач н ая ж идкость
розового ц вета 0,48 1 п роби рк а
Т aq-no ли м еразаП р озр ач н ая бесцветная
ж идкость 0 ,1 1 п роби р к а
Резус -п о л ож и тел ьн ая
к он тр ол ьн ая Д Н К (П К О )
П р озр ач н ая бесцветная
ж идкость 1,9 2 п р оби р к и
Д еионизованная водаП р озр ач н ая бесцветная
ж идкость 5,0 1 п роби рк а
--- стр. 5 ---
€ Набор реагентов (вариант «ДНК-резус ребенка плюс») для проведения 50 определений
включает:
Р е а к т и в О п и с а н и еО б ъ е м ,
м л К о л и ч е с т в о
С м есь для П Ц РП р озр ач н ая бесцветная
ж идкость 1,92 2 п р оби р к и
С м есь п рай м еров R H D -1П розрач н ая ж идкость
розового ц вета 0,72 1 п р оби р к а
С м есь п рай м еров R H D -2П розрач н ая ж и дк ость
розового ц вета 0,72 1 п р оби р к а
С м есь п райм еров G A PD HП розрач н ая ж и дк ость
розового ц вета 0,48 1 п роби р к а
Резус-полож ительная
к он тр ол ьн ая Д Н К (П К О )
П р озр ач н ая бесцветная
ж идкость 1,9 2 п р оби р к и
Д еионизованная водаП р озр ач н ая бесцветная
ж идкость 5,0 1 п роби р к а
Н абор реагентов (в ар и ан т «Д Н К -резус ребенка плю с») для проведения 100 определении
вклю чает:
Р е а к т и в О п и с а н и еО б ъ е м ,
м л К о л и ч е с т в о
С м есь дл я П Ц РП розрач н ая бесц ветн ая
ж идкость 3,84 4 п р оби р к и
С м есь п рай м еров RHD-1П розрач н ая ж идк ость
розового ц вета 1,44 1 п роби р к а
С м есь прай м еров R H D -2П р озр ач н ая ж идкость
розового ц вета 1,44 1 п роби р к а
С м есь прай м еров G A PD HП розрач н ая ж идкость
розового ц вета 0,96 1 п роби р к а
Резус-полож ительная
к он тр ол ьн ая Д Н К (П К О )
П розрач н ая бесцветная
ж идкость 3,8 4 п р оби рк и
Д еионизованная водаП розрач н ая бесц ветн ая
ж идкость 5,0 1 п роби рк а
--- стр. 6 ---
4. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА для определения пола плода
4.1. Принцип действия
В ы явлен и е Д Н К гена п оловой принадлеж ности (S R Y ) м етодом полим еразной ц еп н ой
р еак ц и и (П Ц Р ) с гибридизационно-ф луоресцентной детекцией в к л ю ч ает в себя ч еты р е
эт а п а :
1 ) эк страк ци ю (в ь в д ел ен и е) Д Н К и з исследуемого м атер и ал а;
2) П Ц Р -ам п ли ф и к ац и ю Д Н К ;
3) гибридизационно-ф луоресцентную детекцию , к отор ая производится в о в р ем я
прохож дения П Ц Р .
4) и нтерп ретац и я результатов
Э к стр ак ц и я Д Н К из исследуемого м атер и ала п роводится с п ом ощ ью
реком ендованной п роцедуры в ы дел ен и я . Затем с полученньш и пробам и Д Н К п р оводя тся
р еак ц и и ам п л и ф и к ац и и участк ов ген ов 5 7 ? 7 и G A P D H в реакционном буф ере п р и п ом ощ и
спец иф ичны х к эти м уч астк ам Д Н К прайм еров и ф ерм ен та T aq-п оли м еразы . В составе
реакционной см еси дл я ам п л и ф и к ац и и присутствую т ф луоресцентно-м ечены е
олигонуклеотидны е зон ды , к оторы е гибридизую тся с к ом п лем ен тар ны м уч астк ом
ам пли ф иц и руем ой Д Н К -м ищ ени и разруш аю тся Т ац-полим еразой, в р езул ьтате ч его
происходит н арастан ие интенсивности ф луоресценции. Э то п озволяет р еги стр и р овать
н акоп ление специф ического продукта ам п л и ф и к ац и и п утем изм ерения и н тен си вн ости
ф луоресцентного си гн ал а. Д етекция ф луоресцентного сигн ала осущ ествл яется
непосредственно в ходе П Ц Р с пом ощ ью ам п л и ф и к атора с систем ой детек ц и и
ф луоресцентного си гн ала в реж им е «реального врем ени ». П о к ан ал у, соответствую щ ем у
ф луороф ору РА М , детектируется п родукт ам п л и ф и к ац и и Д Н К гена 5 7 ? Г и гена G A P D H .
--- стр. 7 ---
4.2. Состав набора
Н абор реаген тов (в ар и ан т «Д Н К -пол ребенка») для проведения 50 определений
вклю чает:
Реактив Описание Объем,
мл Количество
С м есь дл я П Ц Р SR YП р озр ач н ая ж идкость
розового ц вета 0,72 1 п роби рк а
С м есь для П Ц Р G A PD HП р озр ач н ая ж идкость
розового ц вета 0,48 1 п роби рк а
Т aq -полим еразаП р озр ач н ая бесцветная
ж идк ость 0,08 1 п роби рк а
М уж ск ая к он тр ол ьн ая Д Н К
(П К О )
П р озр ач н ая бесцветная
ж идкость 0,95 1 п роби рк а
Д еионизованная водаП р озр ач н ая бесцветная
ж идкость 5,0 1 п роби рк а
Н абор реаген тов (в ар и ан т «Д Н К -пол ребенка») для проведения 100 определений
вклю чает:
Реактив Опяеание Объем,
мл Количество
С м есь дл я П Ц Р SR YП р озр ач н ая ж идкость
розового цвета 1,44 1 п роби рк а
С м есь д л я П Ц Р G A PD HП р озр ач н ая ж идкость
розового цвета 0,96 1 п роби р к а
T aq -полим еразаП р озр ач н ая бесцветная
ж идкость 0,16 1 п роби рк а
М уж ск ая к он тр ол ьн ая Д Н К
(П К О )
П р озр ач н ая бесцветная
ж и дк ость 1 ,9 2 п р оби рк и
Д еионизованная водаП р озр ач н ая бесцветная
ж и дк ость 5,0 1 п роби рк а
--- стр. 8 ---
Набор реагентов (вариант «ДНК-пол ребенка плюс») для проведения 50 определений
включает:
Р е а к т и в О п и с а н и еО б ъ е м ,
м л К о л и ч е с т в о
С м есь дл я П Ц РП р озр ач н ая бесцветная
ж идкость 1 ,2 1 п роби рк а
С м есь п рай м еров SR YП р озр ач н ая ж идкость
розового ц вета 0,72 1 п роби рк а
С м есь п рай м еров G A PD HП розрач н ая ж идкость
розового ц вета 0,48 1 п роби рк а
М уж ск ая к он тр ол ь н ая Д Н К
(П К О )
П розрач н ая бесцветная
ж идк ость 0,95 1 п роби рк а
Д еионизованная водаП р озр ач н ая бесцветная
ж идкость 5,0 1 п роби рк а
Н абор реаген тов (вар и ан т «Д Н К -пол ребенка плю с») дл я проведения 100 определений
включает:
Р е а к т и в О п и с а н и еО б ъ е м ,
м л К о л и ч е с т в о
С м есь дл я П Ц РП розрач н ая бесцветная
ж идкость 2,4 2 п р оби рк и
С м есь п р ай м ер ов SR YП р озр ач н ая ж идкость
розового ц вета 1,44 1 п роби рк а
С м есь п рай м еров G A PD HП р озр ач н ая ж идкость
розового ц вета 0,96 1 п роби рк а
М уж ск ая к он тр ол ьн ая Д Н К
(П К О )
П р озр ач н ая бесцветная
ж и дк ость 1,9 2 п р оби р к и
Д еионизованная водаП р озр ач н ая бесцветная
ж идкость 5,0 1 п роби р к а
--- стр. 9 ---
5. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И
ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
н а б о р а д л я о п р е д е л е н и я р е з у с - ф а к т о р а п л о д а
Объём вьщеления,
мкл Метод выделения Вид исследуемого
материала
Аналитическая
чувствительность
200 Р еком ендованны йП лазм а к р ов и200 к оп и й /м л
1000 Реком ендованны й П лазм а к р ов и50 к оп и й /м л
6. М ЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖ НОСТИ
Работа долж на проводиться в лаборатории, вы п ол н я ю щ ей м олек улярн о
биологические (П Ц Р ) исследования клин и ческ ого м атер иала с соблю дением сани тарно
эпидем ических п р ав и л С П 2.1.7.728-99 «П р ав и л а сбора, хранения и удален и я отходов
лечебно-проф илактических учреж дений» П р и работе всегда следует в ы п о л н я ть
следую щ ие тр ебован и я:
- У дал я ть неиспользованны е р еак ти в ы в соответствии с тр ебован и ям и С П 2.1.7.728-
99 «П р ав и л а сбора, хранения и удаления отходов лечебн о-п роф и лактическ их
учреж дений».
ВНИ М АНИ Е! П р и удалении отходов после ам п л и ф и к ац и и (пробирок, содерж ащ их
п родук ты П Ц Р ) недопустим о отк р ы в ан и е пробирок и разбры згиван ие содерж им ого,
п оск ольк у это м ож ет п ривести к к он там и н ац и и п родук там и П Ц Р лабораторной зон ы ,
оборудования и реаген тов.
- П р и м ен я ть н абор строго по н азначению , согласно данной и н стр ук ц и и .
- Д оп ускать к работе с набором тол ьк о спец иальн о обученны й п ер сон ал.
- Н е и сп ользовать набор п о истечению срока годности.
- И збегать к он так та с кож ей, гл азам и и слизистой оболочкой. П р и к он так те
нем едленно п р о м ь ггь пораж енное м есто водой и обратиться за м едицинской п ом ощ ью .
7. ОБОРУДОВАНИЕ И М АТЕРИАЛЫ
1 . П Ц Р -бокс (нап ри м ер, «Б А В -П Ц Р-«Л ам инар-С », «Л ам и н ар н ы е систем ы », Р осси я).
2. В ортек с (нап ри м ер, «ТЭТ А -2», «Б иоком », Р оссия).
3. Н абор элек трон н ы х и л и автом атическ и х дозаторов перем енного объем а
(нап ри м ер, «Л енпипет», Россия).
4. О дноразовы е н ак он еч н и к и с аэрозольн ы м барьером до 200 м к л , до 100 м к л , до 20
и до 1 0 м к л . (нап ри м ер, «Axygen», С Ш А ).
--- стр. 10 ---
5 . Ш тати в ы дл я након ечни к ов (н ап ри м ер, «A xygen», С Ш А ) и м ик роп роби рок н а 0,5
(0,2) м л (н априм ер, «И нтерЛ абС ервис», Р оссия).
6. Х олодильник от 2 до 8 °С с м орозильной к ам ер ой н е в ы ш е м инус 1 6 °С .
7. О тдел ьн ы й хал ат и одноразовы е п ер ч атк и .
8 . Е м к ость с к р ы ш к ой д л я дезинф ицирую щ его р аств ор а.
9 . А м п лиф ик атор роторного ти п а, н априм ер, «R otor-G ene» 3000 и л и 6000 («C orb ett
R esearch», А встрали я) и л и ам п л и ф и к атор п ланш етн ого ти п а, н ап р и м ер , «iQ 5» («B ioR ad»,
С Ш А ), « М х З О О О Р » («Stratagene», С Ш А ) и л и эк в и в ал ен тн ы е.
1 0 . О дноразовы е п олипропиленовы е п робирки дл я П Ц Р :
а ) на 0,2 м л (п л оск ая к р ь п ы к а , н естрипованны е), (нап ри м ер «A xygen», С Ш А ) дл я
п остан овк и в ротор н а 36 пробирок - дл я приборов для П Ц Р в р еал ьн ом в рем ен и с
детекцией через дно п роби рк и (нап ри м ер, «R otor-G ene»).
б) н а 0,2 м л (куполообразная к р ы ш к а ) (нап ри м ер, «A xygen», С Ш А ) - дл я п ри боров
дл я П Ц Р в р еальн ом вр ем ен и с детекцией через к р ь п п к у (нап ри м ер, «iQ 5», « М х З О О О Р » ).
8. АНАЛИЗИРУЕМ Ы Е ОБРАЗЦЫ
П еред н ач ал ом работы следует озн ак ом и ться с м етодическим и рек ом ендаци ям и
«В зятие, тр ан сп орти ровк а, хранение к ли н и ческ ого м атер и ала дл я П Ц Р -ди агн ости ки »,
разработан н ы м и Ф Г У Н Ц Н И И Э Роспотребнадзора, М оск ва, 2008 г .
Д л я проведения ан ал и за используется следую щ ий м атер и ал :
- п лазм а периф ерической к р ов и .
О бразец долж ен доставляться в лабораторию в течение 16-24 ч после в зя т и я
м атер и ал а (реком ендуется м ак си м альн о уск ор ять доставку и осущ ествлять ее н а льду и л и
в терм оконтейнерах п р и тем пературе м инус 20°С ).
Д ля получения п л азм ы к р ов ь (не менее 8-10 м л ) отбираю т в проби рк у с Э Д Т А .
Зак р ы тую пробирку с к р ов ью н еск олько р аз п ер еворач и ваю т. В течение 24 ч с м ом ен та
в зя ти я к р ов и следует отобрать плазм у и перенести в новую п робирку. Д л я этого п роби рк у
с к р ов ью центриф угирую т 1 0 м ин п р и 1600g, после чего ак к ур атн о отби раю т вер хн и й
слой п л азм ы и переносят его в отдельную одноразовую п робирку, избегая п опадан и я в
отби раем ы й м атер и ал сгустков лейк оц итов и слоев с эр и тр оц и там и . П л азм у
центриф угирую т 1 0 м и нут п р и 16000g и в н ов ь отбираю т верхний слой в отдельн ую
пробирку, не затр аги в ая осадка на дне п роби рк и . П олученную п л азм у м ож но
и сп ользовать дл я в ь а д ел ен и я Д Н К и ли зам орозить п р и тем пературе н е в ь ш1е м инус 70°С
--- стр. 15 ---
10. РЕГИСТРАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
Р егистрацию результатов поводят с п ом ощ ью п рограм м ного обеспечения
используем ого прибора дл я проведения П Ц Р с детекцией в реж им е «реал ьн ого в р ем ен и ».
А нализирую т к р и в ы е н ак оп л ен и я ф луоресцентного сигн ала по одному к а н а л у :
- по к ан ал у FAM /Green регистрируется си гн ал , свидетельствую щ ий о н ак оп л ен и и
п родуктов ам п л и ф и к ац и и RHD и GAPDH
Р езул ьтаты и нтерпретирую тся на основании н ал и ч и я (и л и отсутствия) пересечени я
к р и в ой ф луоресценции с установленной н а соответствую щ ем уровне пороговой ли н и ей ,
что определяет н ал и ч и е (и л и отсутствие) для данной п робы Д Н К зн ач ен и я п орогового
ц и к л а « C t» в соответствую щ ей гр аф е в таблице р езультатов.
11. УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ РЕАКЦИИ
Интерпретация результатов в исследуемых образцах
П олучен ны е резул ьтаты интерпретирую т н а основании дан н ы х об уровне
ф луоресцентного сигн ала относительно ф она по соответствую щ им к а н а л а м д л я
к он тр ол ьн ы х образцов и проб Д Н К , вы делен ны х и з исследуем ы х образц ов.
И н терп ретац и я производится ав том ати ч еск и с пом ощ ью п рограм м н ого обеспечения
используем ого п ри бора.
П ри н ц и п интерп ретац и и р езультатов следую щ ий:
- Д Н К гена резус-ф актора обнаруж ена, если дл я данной пробы си гн ал ы п о к а н а л у
F A M в пробирках R H D -1 и R H D -2 в ы ш е установленного порогового зн ач ен и я , и си гн ал
по к ан ал у FA M в пробирке G A PD H в ы ш е установленного п орогового зн ач ен и я
- ДН К гена резус-ф актора не обнаруж ена, если дл я данной п робы си гн ал п о к а н а л у
FA M в пробирках R H D -1 и R H D -2 ниж е установленного порогового зн ач ен и я, а си гн ал п о
к ан ал у FA M в пробирке G A PD H в ы ш е установленного порогового зн ач ен и я .
- Р езультат ан ал и за н евали дны й , если дл я данной пробы си гн ал по к ан а л у F A M в
пробирке G A PD H н иж е установленного порогового зн ачен и я.
Если для пробы получен невалидный результат, требуется повторить П Ц Р-
исследование соответствующ его исследуемого образца, начиная с повторного
выделения ДНК из плазмы .
- Р езультат ан ал и за сом н ительн ы й, если для данной пробы си гн ал по к ан ал у F A M в
одной из пробирок R H D -1 и л и R H D -2 н и ж е установленного порогового зн ач ен и я , а в
другой - в ь п п е установленного порогового зн ач ен и я и л и зн ачен ия порогового ц и к л а « C t»
дл я этих пробирок составляет более 45.
Если для пробы получен сомнительный результат, требуется повторить П Ц Р *
--- стр. 16 ---
€ исследование соответствующ его исследуемого образца. В случае повторения
аналогичного результата образцы считать положительными (рекомендуется
провести дополнительное исследование пациента через несколько недель). П ри
получении отрицательного результата по этим образцам - результат считается
сомнительным.
Н абор непригоден к дальнейш ем у использованию , если си гн ал по к ан ал у F A M в
одной и з пробирок П К О R H D -1 и л и П К О R H D -2 ниж е установленного п орогового
зн ач ен и я и этот результат устойчиво воспроизводится.
Интерпретация результатов в контрольных образцах
Р езул ьтат П Ц Р -исследования считается достоверны м , если получен ы п р а в и л ь н ы е
р езул ьтаты дл я отр иц ательн ы х к онтролей ам п л и ф и к ац и и и полож ительн ы х к он тр ол ен
ам п л и ф и к ац и и .
12. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И
ДИАГНОСТИ ЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Объём выделения,
мкл Метод выделения Ввд исследуемого
материала
Аналитическая
жувствительность
200 Р еком ендованны й П л азм а к р ов и200 к оп и й /м л
1000 Р еком ендованны й П л азм а к р ов и 50 к оп и й /м л
13. М ЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖ НОСТИ
Работа долж на проводи ться в лаборатори и, в ьш ол н яю щ ей м олек улярн о
биологические (П Ц Р ) исследования к ли н и ческ ого м атер и ал а с соблю дением сан и тарно
эпидем ических п р ав и л С П 2.1.7.728-99 «П р ав и л а сбора, хранения и удален и я отходов
лечебно-проф илактических учреж дений» П р и работе всегда следует в ы п ол н я ть
следую щ ие тр ебован и я:
- У дал ять неиспользованны е р еак ти в ы в соответствии с требовани ям и С П 2.1.7.728-
99 «П р ави л а сбора, хранения и удален ия отходов лечебн о-п роф и лактическ их
учреж дений».
ВНИМ АНИЕ! П р и удалении отходов после ам п л и ф и к ац и и (пробирок, содерж ащ их
п р одук ты П Ц Р ) недопустим о о тк р ьш ан и е пробирок и разбры згиван ие содерж им ого,
поск ольк у это м ож ет п ри вести к к он там и н ац и и п родук там и П Ц Р лабораторной зон ы ,
оборудования и реагентов.
- П ри м ен ять набор строго по назначению , согласно данной и н стр ук ц и и .
--- стр. 17 ---
- Д опускать к работе с набором тол ьк о спец иальн о обученны й персонал.
- Н е исп ользовать н абор по истечению срок а годности.
- И збегать к он так та с к ож ей, гл азам и и слизистой оболочкой. П р и к он т ак т е
нем едленно п р ом ы ть пораж енное м есто водой и обрати ться за м едицинской п ом ощ ью .
14. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ
1 . П Ц Р-бокс (нап ри м ер, «Б А В -П Ц Р-«Л ам инар-С », «Л ам и н ар н ы е систем ы », Р осси я).
2. В ортекс (н ап ри м ер, «ТЭТ А -2», «Б иоком », Р оссия).
3 . Н абор эл ектрон н ы х и л и автом ати ческ и х дозаторов перем енного объем а
(н ап ри м ер, «Л енпипет», Р оссия).
4. О дноразовы е н ак он еч н и к и с аэрозольн ы м барьером до 200 м к л , до 1 0 0 м к л , до 20
и до 1 0 м к л . (нап ри м ер, «A xygen», С Ш А ).
5. Ш тати в ы для н ак он еч н и к ов (н ап ри м ер, «A xygen», С Ш А ) и м ик роп роби рок н а 0,5
(0,2) м л (нап ри м ер, «И нтерЛ абС ервис», Р оссия).
6. Х олодильник от 2 до 8 °С с м орозильной к ам ер ой не в ь п п е м инус 1 6 °С.
7 . О тдельн ы й халат и одноразовы е п ер ч атк и .
8 . Е м к ость с к р ь п п к о й дл я дезинф ицирую щ его р аств ор а.
9. А м плиф ик атор роторного ти п а, н ап ри м ер, «R otor-G ene» 3000 и л и 6000 («C orb ett
R esearch», А встрали я) и л и ам п л и ф и к атор п ланш етн ого ти п а, н априм ер, «iQ 5» («B ioR ad»,
С Ш А ), « М х З О О О Р » («Stratagene», С Ш А ) и л и эк ви в ал ен тн ы е.
1 0 . О дноразовы е п олипропиленовы е пробирки дл я П Ц Р :
а ) н а 0,2 м л (п л оск ая к р ы ш к а , н естрипованны е), (нап ри м ер «A xygen», С Ш А ) дл я
п остан овк и в ротор н а 36 пробирок - для приборов для П Ц Р в р еал ьн ом вр ем ен и с
детекцией через дно п роби рк и (н ап ри м ер, «R otor-G ene»).
б) н а 0,2 м л (куполообразная к р ы ш к а ) (н ап ри м ер, «A xygen», С Ш А ) - д л я приборов
дл я П Ц Р в реальн ом врем ени с детекцией через к р ь п п к у (нап ри м ер, «iQ 5», « М х З О О О Р » ).
15. АНАЛИЗИРУЕМ Ы Е ОБРАЗЦЫ
П еред н ач ал ом работы следует ознаком иться с м етодическим и рек ом ен дац и ям и
«В зятие, тран сп орти ровк а, хранение к ли н и ческ ого м атер и ал а для П Ц Р -ди агн ости к и »,
разработан н ы м и Ф Г У Н Ц Н И И Э Роспотребнадзора, М оск ва, 2008 г .
Д л я проведения ан ал и за используется следую щ ий м атер и ал :
> п л азм а периф ерической к р ов и .
О бразец долж ен доставляться в лабораторию в течение 16-24 ч после в зя т и я
м атер и ал а (реком ендуется м ак си м альн о уск ор ять доставк у и осущ ествлять ее н а льду и л и
в терм оконтейнерах п р и тем пературе м инус 20°С ).