Набор реагентов для выявления генов резистентности к гликопептидным и бета-лактамным антибиотикам у бактерий методом ПЦР в режиме реального времени (БакРезиста GLA, БакРезиста GLA Van/Mec) по ТУ 21.20.23-103-46482062-2018 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас 1 закупка, где это изделие полностью проходит по требованиям хотя бы в одной позиции.
| Закупка | Окончание подачи | Нач. цена |
|---|---|---|
| Поставка реагентов для проведения исследований клинического материала методом ПЦР (лот № 8 СЦБЛ)
№ 0372200026226000291 · САНКТ-ПЕТЕРБУРГСКОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ЗДРАВООХРАНЕНИЯ "ДЕТСКАЯ ГОРОДСКАЯ БОЛЬНИЦА № 22" · г. Санкт-Петербург |
10.11.2026 | 1 499 000 ₽ |
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 8 --- f И нструкция по прим енению БакРезиста GLA, БакРезиста G LA Van/M ec Л и с т 8 Л и сто в 35 1 НАЗНАЧЕНИЕ 1.1 Настоящая инструкция распространяется на Набор реагентов для выявления генов резистентности к гликопептидным и бета-лактамиым антибиотикам у бактерий методом ПЦР в режиме реального времени (БакРезиста GLA, БакРезиста GLA Van/Mec), далее по тексту - набор реагентов. 1.2 Набор реагентов предназначен для выявления генов резистентности к гликопептидным и бета-лактамным антибиотикам в препаратах ДНК, полученных из биологического материала человека и бактериальных культур из этого биоматериала (мокрота, моча, мазки\соскобы из дыхательных путей, желудочно-кишечного и урогенитального тракта, фекалии, аспираты, экссудаты) методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени с использованием детектирующих амплификаторов. 1.3 Функциональное назначение: вспомогательное средство для диагностики in vitro. 1.4 Показания к проведению исследования; необходимость исследования возможной антибиотикорезистентности у бактерий, вызвавших развитие инфекционных процессов. 1.5 Набор реагентов может быть использован в клинико-диагностических лабораториях медицинских учреждений и научно-исследовательской практике. 1.6 Применение набора реагентов не зависит от популяционных и демографических аспектов. Противопоказаний к применению нет. 1.7 Потенциальные пользователи: квалифицированный персонал, обученный методам молекулярной диагностики и правилам работы в клинико-диагностической лаборатории. 1.8 Применять набор реагентов строго по назначению согласно данной инстрзчсции по применению. --- стр. 9 --- И нструкция по прим енению Л и с т 9 БакРезиста GLA, БакРезиста G LA Van/M ec Л и сто в 35 2 ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА Набор реагентов (БакРезиста GLA, БакРезиста GLA Van/Mec) выпускается в следующих вариантах исполнения: - БакРезиста GLA; - БакРезиста GLA Van/Mec. Набор реагентов в исполнении БакРезиста GLA используется для выявления генов резистентности к гликопептидным и бета-лактамным антибиотикам: van А\В (ванкомицину, тейкопланину); тес А (метициллину, оксациллину); tem, ctx-M-1, shv (пенициллинам и цефалоспоринам); оха-40-like, оха-48-like, оха-23-like, оха-51-like, imp, крс, ges, ndm, vim (карбапенемам). Набор реагентов в исполнении БакРезиста GLA Van/Mec является сокращенным вариантом БакРезиста GLA и используется для выявления генов резистентности к гликопептидным и бета-лактамным антибиотикам: van А\В (ванкомицину, тейкопланину); тес А (метициллину, оксациллину). 2.1 Состав набора 2.1.1 БакРезиста GLA R1-P026-S3/5, фасовка S, стрипы Наименование компонентов Внешний вид Количество пробирок Номинальный объём компонента Смеси для амплификации, запечатанные парафином Прозрачная бесцветная или голу бая жидкость под белым воско образным слоем 24 Стрипа по 8 пробирок по 20 мкл Раствор Taq-полимеразы Прозрачная бесцветная жидкость 4 пробирки 500 мкл Минеральное масло Прозрачная бесцветная вязкая маслянистая жидкость 4 пробирки 1,0 мл Положительный контроль ный образец Прозрачная бесцветная жидкость 1 пробирка 320 мкл Крышки для Стрипов 24 шт. I к --- стр. 10 --- И нструкция по прим енению БакРезиста GLA, БакРезиста G LA Van/M ec Л и с т 10 Л и сто в 35 2.1.2 БакРезиста GLA Van/Mec R1-P027-S3/4, фасовка S, ст])ИПЫ Наименование компонен тов Внешний вид Количество про бирок Номинальный объём компо нента Смесь для амплификации, запечатанная парафином Прозрачная бесцветная жидкость под белым воскообразным слоем 6 стрипов по 8 пробирок по 20 мкл Раствор Taq-полимеразы Прозрачная бесцветная жидкость 1 пробирка 500 мкл Минеральное масло Прозрачная бесцветная вязкая маслянистая жидкость 1 пробирка 1,0 мл Положительный контроль ный образец Прозрачная бесцветная жидкость 1 пробирка 75 мкл Крышки для стрипов 6 шт. R1-P027-23/4, фасовка S, пробирки Наименование компонентов Внешний вид Количество пробирок Номинальный объём компонента Смесь для амплификации, запечатанная парафином Прозрачная бесцветная жидкость под белым воскообразным слоем 48 пробирок по 20 мкл Раствор Taq-полимеразы Прозрачная бесцветная жидкость 1 пробирка 500 мкл Минеральное масло Прозрачная бесцветная вязкая маслянистая жидкость 1 пробирка 1,0 мл Положительный контроль ный образец Прозрачная бесцветная жидкость 1 пробирка 75 мкл 2.2 Количество анализируемых проб Набор реагентов в исполнении БакРезиста GLA предназначен для одноразового применения и рассчитан на проведение 24 определений, что соответствует исследованию не более 20 неизвестных образцов, отрицательного контрольного образца и положительного контрольного образца. Набор реагентов в исполнении БакРезиста GLA Van/Mec предназначен для одноразового применения и рассчитан на проведение 48 определений, что соответствует исследованию не более 46 неизвестных образцов, отрицательного контрольного образца и положительного контрольного образца. --- стр. 11 --- И нструкция по прим енению Л и с т 11 БакРезиста GLA, БакРезиста G LA Van/M ec Л и сто в 35 ? 2.3 Принцип метода Метод: Полимеразная цепная реакция (ПЦР) с детекцией результатов в режиме реального времени; качественный и полуколичественный мультиплексный анализ. Принцип метода основан на использовании процесса амплификации ДНК с по мощью полимеразной цепной реакции (ПЦР). Процесс амплификации заключается в повторяющихся циклах температурной де натурации ДНК, отжига праймеров с комплементарными последовательностями и после дующей достройки полинуклеотидных цепей с этих праймеров Taq-полимеразой. Для повышения чувствительности и специфичности реакции предусмотрено при менение «горячего» старта, который обеспечивается методикой приготовления реакцион ной смеси, состоящей из двух слоёв, разделённых прослойкой из парафина. Смешение сло ёв и превращение их в реакционную смесь происходит только после плавления парафина, что исключает неспецифический отжиг праймеров на ДНК-мишени при начальном прогре ве пробирки. В реакционную смесь для амплификации введены ДНК-зонды, каждый из которых содержит флуоресцентную метку и гаситель флуоресценции. При образовании специфич ного продукта ДНК-зонд разрушается, действие гасителя на флуоресцентную метку пре кращается, что ведет к возрастанию уровня флуоресценции, который фиксируется .детекти рующим амплификатором. Количество разрушенных зондов увеличивается пропорцио нально количеству образовавшихся специфических ампликонов. Уровень флуоресценции измеряется на каждом цикле амплификации в режиме реального времени. Набор реагентов в варианте исполнения БакРезиста GLA включает смеси для ам плификации, специфичные для определения генов, ассоциированных с резистентностью (van А, van В, тес А, imp, оха-51-like, tern, ctx-M-1, оха-40-like, оха-48-like, крс, ges, ndm, оха-23-like, shv, vim), и для ДНК всех бактерий (ОБМ). Набор реагентов в варианте исполнения БакРезиста GLA Van/Mec включает смесь для амплификации, специфичную для определения генов резистентности (van А, van В, тес А). В состав смесей для амплификации (кроме пробирки №3 для варианта исполнения БакРезиста GLA) включен внутренний контроль, предназначенный для оценки качества по лимеразной цепной реакции в каждой отдельной пробирке. В состав ДНК-зондов, использу ющихся для детекции продуктов амплификации генов, ассоциированных с резистентностью, включены флуоресцентные метки Fam и Су5. В состав ДНК-зондов, использующихся для детекции продукта амплификации внутреннего контроля, входит флуоресцентный краситель Hex. --- стр. 12 --- И нструкция по п рим енени ю I Л и ст 12 БакРезиста GLA, БакРезиста G LA Van/M ec | Л и сто в 35 В смесь для амплификации пробирки № 8 набора в варианте исполнения БакРезиста GLA добавлен олигонуклеотид с флуоресцентной меткой Rox - «Маркер». Он используется прибором для определения положения стрипа в термоблоке детектирующего амплификато- ра. После окончания программы программное обеспечение проводит сравнение заданного оператором расположения стрипов с реальным положением маркера Rox, и, если находит несовпадение (при неправильном расположении стрипов), то предупреждает об этом опера тора. Использование нескольких флуоресцентных красителей позволяет сократить коли чество пробирок, поскольку появляется возможность регистрировать результаты разных ре акций амплификации, проходящих в одной пробирке, одновременно. Варианты исполнения набора реагентов (БакРезиста GLA, БакРезиста GLA Van/Mec), выявляемые показатели, цветовая маркировка и каналы детекции продуктов ам плификации приведены в таблице 1. Таблица 1- Варианты исполнения набора реагентов (БакРезиста GLA, БакРези ста GLA Van/Mec), выявляемые показатели, цветовая маркировка и каналы детекции про дуктов амплификации № пробирки в стрипе Каналы детекции Цветовая маркировка смесиFam Hex Rox Cy5 Cy5.5 БакРезиста GLA 1 imp BK** - - - Голубая 2 ОБМ* BK - oxa-51 -like - Бесцветная 3 ctx-M-1 - - tern - 4 van А\В BK - mec A - 5 оха-48-like BK - оха-40-like - 6 vim BK - kpc - 7 оха-23-like BK - ndm - 8 shv BK Маркер ges - БакРезиста GLA Van/Mec - van A\B BK - mec A - Бесцветная *ОБМ - общая бактериальная масса, **ВК - внутренний контроль I Исследование с использованием набора реагентов БакРезиста GLA, БакРезиста GLA Van/Mec состоит из следующих этапов: выделение ДНК (пробоподготовка) и ПЦР- амплификация ДНК с детекцией результатов в режиме реального времени. 2.4 Время проведения анализа (без учета пробоподготовки): от 1,5 часов. 12 --- стр. 13 --- И нструкция по прим енению Л и с т 13 БакРезиста GLA, БакРезиста GLA Van/M ec Л и сто в 35 3 АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ 3.1 Специфичность анализа В образцах исследуемого материала, содержащего ДНК бактерий, резистентных к гликопептидным и бета-лактамным антибиотикам во время проведения амплификации программное обеспечение детектирующего амплификатора фиксирует положительные результаты амплификации специфических продуктов по заявленным каналам детекции. В образцах исследуемого материала, не содержащего ДНК резистентных бактерий, при проведении амплификации программное обеспечение детектирующего амплификатора фиксирует отрицательные результаты амплификации специфических продуктов по заявленным каналам детекции. Показано отсутствие перекрестных неспецифических реакций для каждой специфической системы, входящей в состав набора, к аналитам, выявляемым другими специфическими системами набора. 3.2 Интерферирующие вещества Наличие ингибиторов ПЦР в образце биологического материала может быть причиной сомнительных (неопределённых) результатов. Признаком ингибирования ПЦР является одновременное отсутствие амплификации внутреннего контроля и специфического продукта (см. раздел 2.3, раздел 9.3). К ингибиторам ПЦР, источником которых может являться образец ДНК, по результатам анализа рисков и проведения НИОКР отнесены следующие вещества; гемоглобин, присутствующий в образце ДНК в результате неполного удаления в ходе выделения ДНК из образца биоматериала, содержащего примесь крови, а также изопропиловый спирт и метилацетат, присутствующие в образце ДНК в результате неполного удаления промывочных растворов в ходе пробоподготовки. Максимальные концентрации интерферирующих веществ, при которьгх не наблюдалось влияние на амплификацию лабораторного контрольного образца и внутреннего контрольного образца составляют: гемоглобин - 0,35 мг/мл образца ДНК, изопропиловый спирт - 100 мкл/мл образца ДНК, метилацетат - 100 мкл/мл образца ДНК. Примеси, содержащиеся в образце биоматериала, такие как слизь, кровь, элементы тканевого распада и воспаления, местные лекарственные препараты, в том числе содержащиеся в суппозиториях, тальк, спермицид и др. удаляются в ходе выделения ДНК с использованием комплектов/наборов для пробоподготовки. Для снижения количества ингибиторов ПЦР необходимо соблюдать правила взятия биологического материала. При подозрении на наличие в образце большого количества ингибиторов ПЦР рекомендуется выбирать методы выделения ДНК, позволяющие максимально удалить ингибиторы ПЦР из образца. --- стр. 14 --- И нструкция по прим енению Л и ст 14 БакРезиста GLA, БакРезиста GLA Van/M ec Л и сто в 35 3.3 предел обнаружения Предел обнаружения для генов резистентности составляет 10 копий ДНК на ам- плификационную пробирку (2,0x10^ копий/мл препарата ДНК). Предел обнаружения уста новлен путем анализа серийных разведений лабораторных контрольных образцов (ЛКО). Предел обнаружения в исследуемом образце зависит от используемого набора (комплекта) реагентов для выделения ДНК и конечного объёма элюции (разведения) выде ленной ДНК, например, мазки\соскобы из урогенитального тракта, в 500 мкл транспортной среды: Комплекты)еагентов для выделения ДНК / объём элюции ПРОБА-НК/50 ПРОБА-ГС /100 ПРОБА-НК-ПЛЮС / 300 ПРОБА-ГС-ПЛЮС / 300 ПРОБА-МЧ-РАПИД / 300 100 копий/образец 200 копий/образец 600 копий/образец 3.4 Диагностические характеристики Количество образцов (п) - 105. Диагностическая чувствительность (95% ДИ) - 100% (98,7 - 100%); Диагностическая специфичность (95% ДИ) - 100% (99,8 - 100%). 3.5 Сведения о повторяемости и воспроизводимости Образец Наличие генов резистентности в образце Количество совпавших результатов исследования Повторяемость (проведение ПЦР в один день, одним оператором на одном приборе, одна серия набора) Воспроизводимость (проведение ПЦР в разные дни, на разных приборах, разными операторами, на разных сериях набора) №1 van А\В 3 повтора из 3 4 повтора из 4 №2 ndm 3 повтора из 3 4 повтора из 4 №3 тес А 3 повтора из 3 4 повтора из 4 _ №4 ctx-M-1, tem, vim 3 повтора из 3 4 повтора из 4 №5 оха-51-like, tem оха-40-like 3 повтора из 3 4 повтора из 4 --- стр. 15 --- ^ Д № - Т Е Х Н О Л Ш Я И нструкция по прим енению Л и ст 15 БакРезиста GLA, БакРезиста G LA Van/M ec Л и сто в 35 4 МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ Организация работы ПЦР-лаборатории, оборудование и материалы должны соот ветствовать требованиям ГОСТ Р 52905-2007, методических указаний МУ 1.3.2569-09 «Ор ганизация работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот, при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности», с со блюдением санитарно-эпидемиологических правил СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами 1I1-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней». К работе с набором реагентов допускается только персонал, обученный методам молекулярной диагностики и правилам работы в клинико-диагностической лаборатории. Исследуемые образцы рассматриваются как потенциально-опасные. При работе с микроорганизмами 1-1V групп патогенности выбор типа защитного костюма (рабочей одежды и средств индивидуальной защиты) проводится в строгом соответствии с СП 1.3.2322-08 и определяется видом возбудителя, диагностическим методом, рабочей зоной, оснащением ее боксами биологической безопасности. При работе с набором следует надевать одноразовые перчатки без талька. Использовать только новые наконечники и пробирки. Не допускается использование одних и тех же наконечников при обработке раз личных образцов биологического материала. Выделение ДНК следует проводить в боксах биологической безопасности II класса. Подготовку к ПЦР с использованием набора реагентов возможно проводить в ПЦР-боксах. Все лабораторное оборудование, в том числе дозаторы, штативы, лабораторная по суда, халаты, головные уборы и пр., а также растворы реагентов должны быть строго ста ционарными. Запрещается их перемещение из одного помещения в другое. Дозаторы должны быть соответствующим образом поверены (в аккредитованных лабораториях) и промаркированы. Использованные одноразовые принадлежности (пробирки, наконечники и др.) должны сбрасываться в контейнер для медицинских отходов, содержащий дезинфицирую щий раствор (при необходимости). Поверхности рабочих столов, а также помещений, в которых проводится ПЦР, сле дует обязательно, до и после проведения работ, облучать с помощью бактерицидных уста новок в течение 15-30 минут. --- стр. 21 --- ^днк-ш нмогия И нструкция по прим енению Л и с т 21 БакРезиста GLA, БакРезиста GLA Van/M ec Л и сто в 35 6.3.7 Бактериальные культуры Взятие материала с жидких и плотных сред осуществляется при помощи одноразо вой микробиологической петли или щпателя. Поместите одиночную колонию клеток или 100 мкл жидкой среды в одноразовую пластиковую пробирку объёмом 1,5-2,0 мл, в которую предварительно внесено 500 мкл фи зиологического раствора стерильного. Плотно закройте крышку пробирки и промаркируйте пробирку. 6.4 Транспортирование и хранение исследуемых образцов 6.4.1 Мокрота Образцы мокроты допускается транспортировать и хранить: - при комнатной температуре от 18 °С до 25 °С не более 6 часов; - при температуре от 2 °С до 8 °С не более 3 суток. 6.4.2 Нативные и предварительно обработанные образцы мочи: Нативные и предварительно обработанные образцы мочи допускается транспорти ровать и хранить: - при температуре от 2 °С до 8 °С не более одних суток; - при температуре от минус 18 °С до минус 20 °С не более одной недели; - при температуре минус 70 °С - 6 месяцев. ВНИМАНИЕ! Допускается лишь однократное замораживание-оттаивание материала. 6.4.3 Мазки\соскобы из дыхательных путей, желудочно-кишечного и урогениталь ного тракта, экссудаты Мазки\соскобы из дыхательных путей, желудочно-кишечного и урогенитального'тракта, экссудаты следует транспортировать и хранить согласно инструкциям к рекомендуемым комплектам реагентов для выделения НК (ПРОБА-НК, ПРОБА-ГС, ПРОБА-НК-ПЛЮС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, ПРОБА-МЧ-РАПИД). 6.4.4 Образцы нативных фекалий Образцы нативных фекалий допускается траспортировать и хранить: - при комнатной температуре от 18 °С до 25 °С не более 6 часов; - при температуре от 2 °С до 8 °С не более 3 суток. 6.4.5 Аспират, бактериальные культуры: Аспират, бактериальные культуры допускается транспортировать и хранить: --- стр. 22 --- И нструкция по прим енению Л и с т 22 БакРезиста GLA, БакРезиста GLA Van/M ec Л и сто в 35 - при температуре от 2 °С до 8 °С не более одних суток; - при температуре от минус 18 °С до минус 20 °С не более одной недели; - при температуре минус 70 °С - 6 месяцев. ВНИМАНИЕ! Допускается лишь однократное замораживание-оттаивание материала. 6.5 Подготовка биологического материала человека для исследования. ВНИМАНИЕ! Относительное ускорение центрифуги (RCF или g) зависит от частоты вра щения и радиуса центрифугирования (Приложение А). Для определения соответствия цен трифуги заданным параметрам центрифугирования обратитесь к руководству по эксплуа тации. 6.5.1 Мокрота 6.5.1.1 Способ №1 1. Перенесите примерно 500 мкл биологического материала в стерильную посуду и плот но закройте крышкой. 2. Добавьте к пробе мокроты равный объём 10% трехзамещённого фосфорнокислого натрия XI2H2O, плотно закройте крышкой и интенсивно встряхните. 3. Инкубируйте смесь при температуре 37 °С в течение 18-24 часов, затем нейтрализуйте 1 М НС1 до pH 6,8-7,4. 4. Центрифугируйте при 900 х g в течение 20 мин. 5. Слейте надосадочную жидкость в ёмкость с 5 % раствором хлорамина для обеззаражи вания. 6. Добавьте к осадку 500 мкл дистиллированной воды, перемешайте пипетированием и перенесите в одноразовую пластиковую пробирку объёмом 1,5 мл. 7. Центрифугируйте пробирку при 16 000 х g в течение 10 мин. 8. Удалите надосадочную жидкостъ, оставив в пробирке примерно 100 мкл (оса док + жидкая фракция). 6.5.1.2 Способ №2 1. В контейнер с образцом добавьте муколизин в соотношении 5:1 (5 частей муколизина к одной части мокроты), ориентируясь по градуировке контейнера. 2. Закройте крышку контейнера, встряхните содержимое и инкубируйте 20-30 мин при комнатной температуре, каждые 2-3 мин встряхивая контейнер. --- стр. 23 --- И нструкция по прим енению Л и ст 23 БакРезиста GLA, БакРезиста G LA Van/M ec Л и сто в 35 6.5.2 Моча 1. Перенесите 1,0 мл мочи в пластиковую пробирку объёмом 1,5 мл. 2. Центрифугируйте пробирку при 16 000 х g в течение 10 мин. 3. Наиболее полно удалите надосадочную жидкость. 4. Добавьте к осадку 1,0 мл физиологического раствора стерильного. 5. Центрифугируйте пробирку при 16 000 х g в течение 10 мин. 6. Удалите надосадочную жидкость, оставив в пробирке примерно 50 мкл (оса док + жидкая фракция). 6.5.3 Мазки\соскобы из дыхательных путей, желудочно-кишечного и урогениталь ного тракта, аспираты, экссудаты, бактериальные культуры с жидких и плотных сред 1. Центрифугируйте пробирку при 16 000 х g в течение 10 мин. 2. Удалите надосадочную жидкость, оставив в пробирке примерно 50 мкл (оса док + жидкая фракция) при использовании комплектов реагентов ПРОБА-ГС, ПРОБА- ГС-ПЛЮС или 100 мкл (осадок + жидкая фракция) при использовании комплектов реа гентов ПРОБА-НК, ПРОБА-НК-ПЛЮС и ПРОБА-МЧ-РАПИД. 6.5.4 Фекалии 1. Перенесите -250 мг (мкл) фекалий в одноразовую пластиковую пробирку объёмом 1,5 мл с 1,0 мл физиологического раствора стерильного. 2. Встряхните пробирку на вортексе в течение 5-10 с. 3. Центрифугируйте пробирку при 900 х g в течение 2-3 мин. 4. Перенесите 800-1000 мкл надосадочной жидкости в новую одноразовую пластиковую пробирку объёмом 1,5 мл, центрифугируйте при 16 000 х g в течение 10 мин. 5. Удалите надосадочную жидкость, оставив в пробирке примерно 100 мкл (осадок + жидкая фракция). Дальнейшая обработка указанных выше видов биологического материала осу ществляется согласно инструкциям к используемым комплектам реагентов для выделения ДНК. --- стр. 24 --- I» И нструкция по прим енению Л и ст 24 БакРезиста GLA, БакРезиста G LA Van/M ec Л и сто в 35 7 ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА 7Л Выделение ДНК из биологического материала 7ЛЛ Выделение ДНК проводят в соответствии с инструкцией к используемому комплекту реагентов. Рекомендуемые комплекты для выделения ДНК из биологического материала: ПРОБА-НК, ПРОБА-ГС, ПРОБА-НК-ПЛЮС, ПРОБА-ГС-ПЛЮС, ПРОБА- МЧ-РАПИД. ВНИМАНИЕ! Одновременно с выделением ДНК из биологического материала необходи мо подготовить отрицательный контрольный образец и провести его через все этапы про- боподготовки. В качестве отрицательного контрольного образца рекомендуется использо вать физиологический раствор или отрицательный контрольный образец, входящий в со став комплекта реагентов для выделения ДНК, в объёме, указанном в инструкции к ком плекту реагентов. 7.2 Подготовка и проведение ПЦР 7.2.1 Набор реагентов БакРезиста GLA: промаркируйте по одному стрипу со сме сями для амплификации, запечатанными парафином, для каждого исследуемого образца, один для положительного контрольного образца (К-Ь) и один для отрицательного контроль ного образца (К-). Пр и м е р: Необходимо проанализировать два образца. Для этого необходимо промаркиро вать четыре Стрипа: два для исследуемых образцов, один для «К-f» и один для «К-» (табли ца 2). 7.2.2 Набор реагентов БакРезиста GLA Van/Mec: промаркируйте по одной пробир ке Стрипа (или по одной отдельной пробирке) со смесью для амплификации, запечатанной « парафином, для каждого исследуемого образца, одну для положительного контрольного образца (К+), и одну для отрицательного контрольного образца (К-). Пример: Необходимо проанализировать два образца. Для этого необходимо промаркиро вать четыре пробирки: две для исследуемых образцов, одну для «К-ь» и одну для «К-» (таб лица 2). --- стр. 25 --- И нструкция по прим енению Л и с т 25 БакРезиста GLA, БакРезиста GLA Van/M ec Л и сто в 35 Таблица 2 - Пример маркировки стрипов или пробирок для проведения ПЦР Образцы БакРезиста GLA БакРезиста GLA Van/Mec Образец 1 Стрип 1 Пробирка 1 Образец 2 Стрип 2 Пробирка 2 К- Стрип 3 Пробирка 3 К+ Стрип 4 Пробирка 4 12.Ъ Встряхните пробирку с раствором Taq-полимеразы в течение 3-5 с на микро- центрифуге-вортексе и центрифугируйте в течение 1-3 с на микроцентрифуге-вортексе. 7.2.4 Добавьте во все промаркированные пробирки, не повреждая слой парафина, по 10 мкл раствора Taq-полимеразы. 7.2.5 7.2.4 Добавьте в каждую пробирку по одной капле минерального масла (около 20 мкл). Закройте пробирки/стрипы. 7.2.6 Встряхните пробирки с препаратом ДНК, положительным контрольным об разцом (К+) и отрицательным контрольным образцом (К-) в течение 3-5 с на микроцентри фуге-вортексе и центрифугируйте в течение 1-3 с на микроцентрифуге-вортексе. ВНИМАНИЕ! 1. При использовании для выделения ДНК комплектов реагентов ПРОБА-ГС и ПРОБА-ГС-ПЛЮС необходимо после встряхивания центрифугировать про бирки с препаратом ДНК при 16 000 х g в течение одной минуты для осажде ния сорбента. В случае если после выделения надосадочная жидкость, содер жащая выделенную ДНК, была перенесена в новые пробирки, центрифугиро вание производится в течение 3-5 с на микроцентрифуге-вортексе. 2. При использовании для выделения ДНК набора реагентов ПРОБА-МЧ-РАПИД необходимо после встряхивания поместить пробирки с препаратом ДНК в маг нитный штатив. В случае если после выделения надосадочная жидкость, со держащая выделенную ДНК, была перенесена в новые пробирки, центрифуги рование производится в течение 3-5 с на микроцентрифуге-вортексе. ВНИМАНИЕ! Для предотвращения контаминации следует перед внесением ДНК откры вать крышку только того стрипа (или только той пробирки), в который будет вноситься данный образец, и закрывать её перед внесением следующего. Препараты ДНК и контроль ные образцы следует вносить наконечниками с фильтром. 7.2.7 Внесите в соответствующие промаркированные пробирки, не повреждая слой парафина, 5,0 мкл выделенного из образца препарата ДНК.В пробирки «К+» и «К-» --- стр. 26 --- И нструкция по прим енению Л и с т 26 БакРезиста GLA, БакРезиста GLA Van/M ec Л и сто в 35 препарат ДНК не вносится. 7.2.8 Внесите в пробирку (стрип), промаркированную «К-», не повреждая слой па рафина, 5,0 мкл отрицательного контрольного образца, прошедшего этап выделения ДНК (см. 7.1). 7.2.9 Внесите в пробирку (стрип), промаркированную «К+», не повреждая слой па рафина, 5,0 мкл положительного контрольного образца. 7.2.10 Центрифугируйте пробирки (стрипы) в течение 1-3 с на микроцентрифуге- вортексе. 7.2.11 Установите все пробирки (стрипы) в блок детектирующего амплификатора. 7.2.12 Запустите программное обеспечение RealTime_PCR в режиме «Работа с прибором». Загрузите файлы «BacResista.Vl.ini» (для варианта исполнения БакРези- ста GLA) или «GLA VanMec.ini» (для варианта исполнения БакРезиста GLA Van/Mec). До бавьте в протокол соответствующие тесты, укажите количество и идентификаторы образ цов, отметьте расположение пробирок на матрице термоблока в соответствии с их установ кой (см. 7.2.11) и проведите ПЦР. При выборе этих тестов в окне «Запуск программы ам плификации» должна отображаться программа, приведённая в таблице 3. Таблица 3 - Программа амплификации для детектирующих амплификаторов «ДТпрайм», «ДТлайт» и «ДТ-96» № -блока Температура, °С мин с Число цик лов Режим оптиче ских измерений Тип блока 1 80 0 30 1 Цикл94 1 30 2 94 0 30 5 Цикл64 0 15 V 3 94 0 10 45 Цикл64 0 15 V 4 94 0 5 1 Цикл 5 10 Хранение Хранение Тесты (ini файлы) для приборов «ДТпрайм», «ДТлайт» и «ДТ-96» предоставляются производителем набора реагентов. --- стр. 31 --- Инструкция по прим енению I Л и с т 31 БакРезиста GLA, БакРезиста GLA Van/M ec | Л и сто в 35 10 ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ, ХРАНЕНИЕ И ЭКСПЛУАТАЦИЯ 10.1 Транспортирование 10.1.1 Транспортирование набора реагентов осуществляют в термоконтейнерах с хладоэлементами всеми видами крытого транспорта при температуре внутри контейнера от 2 °С до 25 °С не более 5 суток. 10.1.2 Наборы реагентов, транспортированные с нарушением температурного режима, применению не подлежат. 10.2 Хранение 10.2.1 Набор реагентов следует хранить в холодильнике или холодильной камере при температуре от 2 °С до 8 °С в течение всего срока годности набора реагентов. 10.2.2 Смеси для амплификации, запечатанные парафином, следует хранить в хо лодильнике или холодильной камере при температуре от 2 °С до 8 °С в защищённом от све та месте в течение всего срока годности набора реагентов. 10.2.3 Наборы реагентов, хранившиеся с нарушением регламентированного ре жима, применению не подлежат. 10.3 Указания по эксплуатации 10.3.1 Набор реагентов должен применяться согласно действующей версии утвержденной инструкции по применению. 10.3.2 Для получения достоверных результатов необходимо строгое соблюдение инструкции по применению набора реагентов. 10.3.3 После вскрытия упаковки компоненты набора реагентов следует хранить при следующих условиях: - компоненты набора реагентов следует хранить в холодильнике или холодиль ной камере при температуре от 2 °С до 8 °С в течение всего срока годности набора реагентов; - смеси для амплификации, запечатанные парафином, следует хранить в холо дильнике или холодильной камере при температуре от 2 °С до 8 °С в защищён ном от света месте в течение всего срока годности набора реагентов. 10.3.4 Наборы реагентов с истекшим сроком годности применению не подлежат. --- стр. 32 --- И нструкция по прим енению Л и ст 32 БакРезиста GLA, БакРезиста G LA Van/M ec Л истов 35 11 УКАЗАНИЯ по УТИЛИЗАЦИИ 11Л При использовании набора реагентов в клинико-диагностической лаборатории образуются отходы классов А и Б, которые классифицируютея и утилизируютея в соответствии с требованиями СанПиН 2Л.7.2790-10. 11.2 Наборы реагентов, пришедпше в непригодность, в том числе, в связи с истечением срока годности, и неиспользованные реактивы, относятся к классу Б и подлежат утилизации в соответствии с требованиями СанПиН 2.1.7.2790-10 и МУ 1.3.2569-09. 11.3 Упаковка набора реагентов (коробки, грипперы) после использования по назначению, относитея к отходам клаееа А и утилизируется с бытовыми отходами. 12 ГАРАНТИИ ИЗГОТОВИТЕЛЯ 12.1 Предприятие-изготовитель гарантирует соответствие набора реагентов требованиям технических условий при соблюдении условий транспортирования, хранения и эксплуатации, установленных техничеекими уеловиями. 12.2 Срок годности набора реагентов - 12 месяцев при соблюдении всех уеловий транспортирования, хранения и экеплуатации. 13 РЕМОНТ И ТЕХНИЧЕСКОЕ ОБСЛУЖИВАНИЕ Набор реагентов предназначен для одноразового иепользования и не подлежит техничеекому обслуживанию и текущему ремонту. 14 СИМВОЛБ1, ИСПОЛБЗУЕМЫЕ ПРИ МАРКИРОВКЕ НАБОРА РЕАГЕНТОВ Медицинское изделие для диа гностики in vitro □ и Обратитесь к инструкции по при менению Температурный диапазон IbefI Каталожный номер W Количество тестов ad Адрес изготовителя Г оден до Не допускается воздействие сол нечного света IlotI Серия набора реагентов Дата изготовления --- стр. 33 --- И нструкция по прим енению Л и ст 33 БакРезиста GLA, БакРезиста G LA Van/M ec Л и сто в 35 1 15 ПЕРЕЧЕНЬ ПРИМЕНЯЕМЫХ НАЦИОНАЛЬНЫХ СТАНДАРТОВ ГОСТ 2.105-95 Общие требования к текстовым документам. ГОСТ ISO 14971-2011 Изделия медицинские. Применение менеджмента риска к медицинским изделиям. ГОСТ Р 15.309-98 Система разработки и постановки продукции на производство. Испытания и приёмка выпускаемой продукции. Основные положения. ГОСТ Р 51088-2013 Медицинские изделия для диагностики ин витро. Реагенты, наборы реагентов, тест-системы, контрольные материалы, питательные среды. Требования к изделиям и поддерживающей документации. ГОСТ Р 51352-2013 Медицинские изделия для диагностики ин витро. Методы испытаний. ГОСТ Р 53022.3-2008 Требования к качеству клинических лабораторных исследований, Ч.З. Правила оценки клинической информативности лабораторных тестов. ГОСТ Р ИСО 18113-1-2015 Медицинские изделия для диагностики in vitro. Информация, предоставляемая изготовителем (маркировка). Часть 1. Термины, определения и общие требования. ГОСТ Р ИСО 18113-2-2015 Медицинские изделия для диагностики in vitro. Информация, предоставляемая изготовителем (маркировка). Часть 2. Реагенты для диагностики in vitro для профессионального применения. ГОСТ Р ИСО 23640-2015 Медицинские изделия для диагностики in vitro. Оценка стабильности реагентов для диагностики in vitro. ГОСТ Р ИСО 15223-1-2014 Изделия медицинские. Символы, применяемые при маркировании на медицинских изделиях, этикетках и в сопроводительной документации. Ч. 1. Основные требования. ГОСТ Р 52905-2007 (ИСО 15190:2003) Лаборатории медицинские. Требования безопасности. Примечание - Указанные выше стандарты были действующими на момент утверждения ин струкции по применению. В дальнейшем, при пользовании документом, целесообразно проверить действие ссьшочных нормативных документов на текущий момент. Если ссылочный документ за менён или изменён, то при применении настоящего документа следует пользоваться заменённым (изменённым документом). --- стр. 34 --- < ^ W K -Т Е Х Н М О Г И Я И нструкция по п рим енению Л и ст 34 БакРезиста GLA, БакРезиста G LA Van/M ec Л и сто в 35 16 АДРЕС ДЛЯ ОБРАЩЕНИЯ Производство наборов реагентов имеет сертифицированную систему менеджмента каче ства и соответствует требованиям стандарта систем менеджмента качества ISO 9001 в обла сти разработки, производства и продажи IVD реагентов и приборов для молекулярно генетической диагностики, и другого лабораторного применения и EN ISO 13485 в области разработки, производства и продажи IVD реагентов и приборов для медицинской молеку лярно-генетической диагностики. Производитель: Общество с ограниченной ответственностью «ДНК-Технология ТС»; ООО «ДНК-Технология ТС», Россия. Адрес производителя: ООО «ДНК-Технология ТС», Россия, 117246, г. Москва, Научный проезд, д. 20, стр. 4. Место производства: ООО «ДНК-Технология ТС»: Россия, 117246, г. Москва, Научный про езд, д. 20, стр.4. Рекламации по вопросам качества набора реагентов (БакРезиста GLA, БакРезиста GLA Van/Mec) следует направлять по адресу: ООО «ДНК-Технология», 117587, г. Москва, Варшавское шоссе, д. 125 ж, к.6., этаж 5, ком. 14, тел./факс +7 (495) 640-17-71, www.dna- technology.ru Служба клиентской поддержки: 8(800) 200-75-15 (звонок по России бесплатный), +7(495) 640-16-93 (для стран СНГ и зарубежья, звонок платный). E-mail: hotline@dna-technology.ru Старший научный сотрудник ООО «НПФ ДНК-Технология» --- стр. 36 --- Пронумерова1=ге, прошито и --- стр. 37 --- Паспорт качества № ХХХХХХ Набор реагентов для выявления генов резистентности к гликопептидным и бета-лактамным антибиотикам у бактерий методом ПЦР в режиме реального времени (БакРезиста GLA, БакРезиста GLA Van/Mec) Вариант исполнения: БакРезиста GLA Фасовка: Серия: Дата изготовления: Срок годности: S, Стрипы XXXXXS-2M ХХ-ХХ-ХХХХ до ХХ-ХХ-ХХХХ* Результат контроля 1, Проверка комплектности, упаковки и маркировки - соответствует требованиям ТУ 21.20.23-103-46482062-2018. К о м п о н е н т К о л и ч е с т в о Х а р в 1 с т е р и с т и к а и н о р м а У с л о в и я х р а н е н и я Р е з у л ь т а т Смеси для амплификации 24 стрипа по 8 пробирок Прозрачная бесцветная или голубая жидкость под белым воскообразным слоем от 2 °С до 8 °С Соответствует Раствор Taq- полимеразы 4 пробирки Прозрачная бесцветная жидкость от 2 °С до 8 ° С Соответствует Минеральное масло 4 пробирки Прозрачная бесцветная вязкая маслянистая жидкость от 2 °С до 8 °С Соответствует Положительный контрольный образец 1 пробирка Прозрачная бесцветная жидкость от 2 ®С до 8 ®С Соответствует Крышки для Стрипов 24 шт. - от 2 °С до 25 ° С Соответствует 3. Проверка функциональных показателей Наименование показателя Харакзеристика и норма Результат Предел обнаружения, 10 копий ДНК на амплифи- кационную пробирку (2.0Х1СР копий/мл препарата ДНК) При анализе комплекта лабораторных контрольных образцов значения Ср указаны по каналам детекции Fam, Су5 Соответствует Специфичность При анализе комплекта лабораторных контрольных образцов значения Ср указаны по каналам детекции Fam, Су5 в соответствующих пробирках. CooTBiJTcrByeT При анализе отрицательного контрольного образца значения Ig по каналам Fam, Су5 не указаны, для ОБМ (вторая пробирка) значение Ig по каналу Fam не указано или lg<3,5 Условия транспортирования: от 2 °С до 25°С не более 5 суток Заключение ОТК: соответствует требованиям ТУ 2Ь20.23тЮЗ-|16Ч.в2062-2018 Дата выдачи паспорта: ХХ-ХХ-ХХХХ ^ / \ ,/S. копия ВЕРНА ГЕНЕРАЛЬНЫЙ ДИРЕКТОР ^ 000«ДНК-Т ехнология ТС САМАРИН С.А. подпись --- стр. 38 --- i Паспорт качества № ХХХХХХ Набор реагентов для выявления генов резистентности к гликопептидным и бета-лактамным антибиотикам у бактерий методом ПЦР в режиме реального времени (БакРезиста GLA, БакРезиста GLA Van/Mec) Вариант исполнения: БакРезиста GLA Van/Mec Фасовка: Серия: Дата изготовления: Срок годности: S, стрипы XXXXXS-2M ХХ-ХХ-ХХХХ до ХХ-ХХ-ХХХХ* Результат контроля I. Проверка комплектности, упаковки и маркировки требованиям ТУ 21.20.23-103-46482062-2018. соответствует К о м п о н е н т К о л и ч е с т в о Х а р а к т е р и с т и к а и н о р м а У с л о в и я х р а н е н и я Р е з у л ь т а т Смесь для ампли())икаиии 6 стрипов по 8 пробирок Прозрачная бесцветная жидкость под белым воскообразным слоем от 2 °С до 8 °С Соответствует Раствор Taq- полимеразы 4 пробирки Прозрачная бесцветная жидкость от 2 °С до 8 °С Ссютветствует Минеральное масло 4 пробирки Прозрачная бесцветная вязкая маслянистая жидкость от 2 °С до 8 °С Соответствует Положительный контрольный образец 1 пробирка Прозрачная бесцветная жидкость от 2 до 8 °С Соответствует Крышки для Стрипов 6 шт. - от 2 °С до 25 °С Соответствует 3. Проверка функциональных показателей Наименование показателя Характеристика и норма Результат Предел обнаружения, 10 копий ДНК на амплификацион- ную пробирку (2,0X10^ копий/мл препарата ДНК) При анализе комплекта лабораторных контрольных образцов значения Ср указаны по каналам детекции Fam, Су5 Соответствует Специфичность При анализе лабораторного контрольного образца значения Ср указаны по каналам дегекции Fam, Су5 в соответствующих пробирках. -Соответствует 1 / При анализе огрицательного контрольного обр^з^а значения Ср по каналам Fam, Су5 не указаны, Условия транспортирования: от 2 °С до 25°С не более 5 qyroijf »/ \ 1 , Заключение ОТК: соответствует требованиям ТУ 21.2(1:23-103-464^6^^-2018 Дата выдачи паспорта: ХХ-ХХ-ХХХХ \ —^ (I . *Срок годности 12 месяцев от даты изготовления КОПНЯ ВЕРНА Г Е Н Е Р А Л Ь Н Ы Й Д И Р Е К Т О Р 000сДНК-ТЕХЖПШ>1Я тс» САМАРИН подпись --- стр. 39 --- ( Паспорт качества № ХХХХХХ Набор реагентов для выявления генов резистентности к гликопептидным и бета-лактамным антибиотикам у бактерий методом ПЦР в режиме реального времени (БакРезиста GLA, БакРезиста GLA Van/Mec) Вариант исполнения: БакРезиста GLA Van/Mec Фасовка; Серия: Дата изготовления: Срок годности: S,пробирки XXXXXS-2M ХХ-ХХ-ХХХХ до ХХ-ХХ-ХХХХ» Результат контроля 1. Проверка комплектности, упаковки и маркировки требованиям ТУ 21.20.23-103-46482062-2018. соответствует Компонент Количество Характеристика и норма Ус.'ювия хранения Результат Смесь для амплификации 48 пробирок Прозрачная бесцветная жидкость под белым воскообразным слоем от 2 °С до 8 °С Соответствует Раствор Taq- полнмсразы 1 пробирка Прозрачная бесцветная жидкость от 2 “С до 8 ®С Соответствует Минеральное масло 1 пробирка Прозрачная бесцветная вязкая маслянистая жидкость от 2 °С до 8 °С Соответствует Положительный контрольный образец 1 пробирка Прозрачная бесцветная жидкость от 2 °С до 8 ®С Соответсгвует 3. Проверка функциональных показателей Наименование показателя Характеристика и норма Результат Предел обнаружения, 10 копий ДНК на амплификацион- ную пробирку (2,0X10^ копий/мл препарата ДНК) При анализе комплекта лабораторных контрольных образцов значения Ср указаны по каналам детекции Fam, Су5 Соответствует Специфичность При анализе лабораторного контрольного образца значения Ср указаны по каналам детекции Fam, Су5 в соответезвуюших пробирках. Соответствует % При анализе отрицазельного контрольного образца значения Ср по каналам Fam, CyS не указаны.. Условия транспортирования; от 2 °С до 25°С не более 5 < tfTK^-ч Заключение ОТК: соответствует требованиям ТУ 21.20.23-103-464fep62-2018 _.''0Дата выдачи паспорта: ХХ.ХХ.ХХХХ *Срок годности 12 месяцев от даты изготовления КОПИЯ ВЕРНА Г Е Н Е Р А Л Ь Н Ы Й Д И Р Е К Т О Р 0 0 0 * Д Н К - ТехжШгия т с» САМАРИН С.А. подпись /Л ^ --- стр. 40 --- Прошито, пронумеровано и скреплено печатью J ( (ов) специал Щерба: