Набор реагентов для определения цитратов в моче ферментативным методом (Фотоцитраты) по ТУ 9398-214-04545110-2012 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 --- У Т В Е Р Ж Д А Ю Генеральный директор Ш ^ ф М П А К Т » ----------- ВолковД.В. 2012 г. Ь Л Л с - %>-- - _. И Н С Т Р У К Ц И Я ^ по применению набора реагентов для определения цитратов в моче фермента тивным методом. Ф О Т О Ц И Т Р А Т Ы Н А З Н А Ч Е Н И Е Набор предназначен для количественного определения содержания ли монной кислоты (цитратов) в моче ферментативным методом в клинико- диагностических и биохимических лабораториях и научно-исследовательской практике. Набор рассчитан на проведение 20 определений. П Р И Н Ц И П М Е Т О Д А Лимонная кислота является важным химическим ингибитором камнеобразова- ния. Гипоцитратурия является одним из самых частых метаболических дефек тов, который предрасполагает к камнеобразованию в мочеполовой системе, по этому в качестве первичной или дополнительной терапии почти всех пациентов, у которых диагностируются кальций содержащие камни, рекомендуется опре делять содержание цитратов. Ферментативный гидролиз лимонной кислоты в присутствии фермента Цитратлиазы (ЦЛ) протекает до образования щавелевоуксусной кислоты, с по следующим декарбоксилированием ее до пировиноградной кислоты и восста новлении образовавшихся кислот под действием восстановленного Никотина- мидадениндинуклеотида (НАДН) в присутствии ферментов L-малатдегидро- геназы (МДГ) и L-лактатдегидрогеназы (ЛДГ) до L-яблочной и L-молочной кис лот. При этом НАДН превращается в окисленную форму НАД+. Уменьшение концентрации НАДН в исследуемом растворе пропорционально концентрации лимонной кислоты или ее соли. Изменение оптической плотности измеряется при длине волны 340 нм (334-365 нм), С О С ТА В Н АБ О РА: 1. Реагент 1: Буфер- глицилглицин 0,1 моль/л, pH -7 ,8 - 1 флакон (20 мл) 2. Реагент 2: Суспензия ферментов - М ДГ-600 ед/мл, ЛДГ ~1400ед/мл - 1 флакон (0,5 мл) 3. Реагент 3: Н А Д Н - 0,1 ммоль/л - 1 флакон (1,0мл) 4. Реагент 4: Фермент Цнтратлназа -4 0 ед/мл - 1 флакон (50 мг) 5. Реагент 5: Калибратор (калибровочный раствор лимонной кислоты, 1,04 ммоль/л) - 1 флакон (2,0 мл) --- стр. 2 --- А Н А Л И Т И Ч Е С К И Е Х А Р А К Т Е Р И С Т И К И Набор обеспечивает линейность при определении цитратов в моче в диа пазоне концентраций от 0,26 до 2,08 мМ /л, отклонение от линейности - не более 7%. Чувствительность - не более 0,2 мМ/л. Коэффициент вариации - не более 7%. Для проверки правильности определений рекомендуется использовать контрольные растворы лимонной кислоты известной концентрации (калибра тор) и отечественные или зарубежные контрольные материалы мочи. Нормальные величины содержания цитратов в моче -0 ,6 -1,67 ммоль/л. Рекомендуется в каждой лаборатории уточнить диапазон значений нор мальных величин для обследуемого контингента людей. М Е Р Ы П Р Е Д О С Т О Р О Ж Н О С Т И Компоненты набора не токсичны. При работе с Реагентом 1, содер жащим в качестве консерванта азид натрия (0,095%), следует соблюдать осторожность и не допускать попадания на кожу и слизистые. В случае по падания на кожу и слизистые следует промыть пораженное место большим количеством проточной воды. А Н А Л И З И Р У Е М Ы Е ОБРАЗЦЫ Суточную мочу собирают в стеклянную или пластиковую бутылку, содер жащую соляную кислоту или 1 о г борной кислоты в качестве консерванта. Объ ем мочи записывают в литрах. Цитраты стабильны в течение 30 суток при хра нении в холодильнике или в замороженном состоянии. Пациентам рекомендуется отказаться по возможности от приема ле карств, вызывающих защелачивание или закисление мочи. Используют прозрачные образцы, при необходимости пробу можно от фильтровать. Проверить pH мочи. Если pH больше 7,0 скорректировать добав лением 1 N НС1. Если pH меньше 5,0 - добавить 1N N aO H . О Б О Р У Д О В А Н И Е И Р Е А ГЕ Н Т Ы - Спектрофотометр, фотометр или автоматический анализатор, длина волны 340 (334, 365) нм, - кювета для измерений в УФ области спектра с длиной оптического пути 10мм; - пипетки полуавтоматические одноканальные со сменными наконечника ми, позволяющие отбирать объемы жидкости 0,02 - 1,0 мл; - секундомер; - пробирки стеклянные вместимостью 10 мл; - вода дистиллированная. П О Д Г О Т О В К А К А Н А Л И З У Флаконы Реагент 1, Реагент 2 и Реагент 3 - готовы к употреблению. Содержимое флакона Реагент 4 растворить в 2,0 мл дистиллированной во ды. Раствор стабилен не более 1 недели при температуре (+2 ^ +8®С) или 2 ме сяца при температуре ( - 1 8 ^ - 20°С). П Р О В Е Д Е Н И Е А Н А Л И З А Внести в пробирки анализируемые образцы и реагенты по следующей схеме: --- стр. 3 --- Реагенты Холостая проба, мл Калибровочная проба, мл Опытная проба, мл Реагент 1 1,0 1,0 1,0 Реагент 2 0,02 0,02 0,02 Реагент 3 0,05 0,05 0,05 Реагент 5 - 0,1 - Проба - - 0,1 Дистилл ирован- ная вода 0,1 - - Перемешать и измерить величину оптической плотности (Ai) опытной, калибровочной и холостой пробы в кюветах с длиной оптического пути 10 мм при длине волны 340 (334, 365) нм относительно оптической плотности воздуха через 2 мин. Затем внести: Реагент 4 0,1 0,1 0,1 Перемешать и измерить величину оптической плотности (Аг) растворов через 3 мин. При проведении серийных испытаний для всей серии образцов использу ют только одну холостую пробу. Рассчитать разность оптических плотностей (Ai - Аг) пр. Она должна находиться в интервале от 0,05 до 1,0 (измерения при длинах волн 334 и 340 нм) или от 0,1 до 0,5 (измерения при длине волны 365 нм). При большей разности оптических плотностей раствор пробы разбавить в 2 раза (к 1 объему мочи до бавить 1 объем дистиллированной воды) и далее провести анализ как описано выше. Результаты умножить на фактор разведения F =2. Р А С Ч Е Т Ы Рассчитать разность оптических плотностей опытной [(Ai - Аг)пр ], калиб ровочной [(Ai - А 2)кш|] и х о л о с т о й [(Ai - А 2)хп] пробы: (^1 — А2)пр “ (А| — Аг)х ДАкал= (А| - А2)кал“ (A i — Аг)х Расчёт концентрации цитратов в анализируемых пробах провести по формуле: ААпр С = ---------------- X l,04xF /хп /хп АА. где: С - концентрация лимонной кислоты, ммоль /л; 1,04 -концентрация лимонной кислоты в калибраторе,ммоль/л; F - фактор разбавления пробы (при проведении определения без разбавления Р=1). Количество цитратов в суточной моче = С (ммоль/л) х суточный объем мочи. --- стр. 4 --- А В Т О М А Т И З А Ц И Я При работе на автоматических анализаторах приготовить рабочий рас твор: смешать: Реагент 1-10 мл; Реагент 2 - 0,2 мл; Реагент 3 - 0,5 мл. При использовании автоматических или полуавтоматических биохимиче ских анализаторов количество реагентов и анализируемых образцов может быть пропорционально изменено в зависимости от объема используемой кюветы (со отношение объема мочи к рабочему раствору составляет 1: 10). У С Л О В И Я Х Р А Н Е Н И Я И Э К С П Л У А Т А Ц И И Хранение набора должно проводиться в упаковке предприятия- изготовителя при температуре +2 8^С в темном месте в течение всего срока годности. Буферный раствор можно хранить при температуре (+2 8)^С не более 6 месяцев после вскрытия флакона. Суспензию ферментов можно хранить при температуре (+2 -ь+ 8)^С не бо лее 6 месяцев после вскрытия флакона. Раствор НАДН можно хранить при температуре (+2 ч - +8)^С не более 3 месяцев после вскрытия флакона. Раствор ЦЛ можно хранить при температуре (+2 ч - +8)^С не более 1 недели или при температуре (-20 - 25)°С не более 2 месяцев при условии достаточной герметизации флакона. Рабочий раствор для автоматического анализатора можно хранить при температуре (+2 ^ +8)^С не более 3 суток или при температуре (-20 - 5 - - 25)°С не более 4 недель. Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение ин струкции по применению набора. По вопросам, касающимся качества набора «Фотоцитраты», следует об ращаться в ООО «ИМПАКТ» по телефону: (495) 679-17-03, 8-919-109-29-31 (Журавлева Нина Ивановна). Главный специалист ООО «ИМПАКТ» К.Х.Н. Журавлева И. И. Зав. кафедрой клинической лабораторной диагностики ГБОУ ДПО РМАПО Минздрав соцразвития России д. м. н., профессор ' Подпись, удостоверяю: Специалист по i Подпись \ : ^ : - ам Р М А П О Г M L 2 0 ,|д а