Набор реагентов для определения рРНК Chlamydia trachomatis в клиническом материале с помощью реакции транскрипционной амплификации (НАСБА) в режиме «реального времени» для диагностики in vitro «АмплиСенс® Chlamydia trachomatis-РИБОТЕСТ» по ТУ 9398-016-01897593-2009 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 3 ---
1
УТВЕРЖДЕНА
Приказом Росздравнадзора
от № ________
УТВЕРЖДАЮ
Директор Федерального
государственного учреждения науки
«Центральный научно-исследова
тельский институт эпидемиологии»
Федеральной службы по надзору в
сфере защиты прав потребителей и
благопшучия_чщювека
/[/Д -л /В.И.Покровский
«ш > Z Z 2 & L 2009 Г.
ИНСТРУКЦИЯ
по применению набора реагентов
для выявления рРНК Chlamydia trachomatis,
полученной из клинического материала, методом NASBA
в режиме «реального времени»
«АмплиСенс® Chlamydia trachomatis- РИБОТЕСТ»
--- стр. 4 ---
НАЗНАЧЕНИЕ.
2
Набор реагентов «АмплиСенс® Chlamydia trachomatis- РИБОТЕСТ» предназначен
для выявления рРНК Chlamydia trachomatis в клиническом материале методом NASBA в
режиме «реального времени».
ФОРМА КОМПЛЕКТАЦИИ.
Набор реагентов выпускается в 2 формах комплектации:
Форма 1 включает комплекты реагентов «РИБОТЕСТ-сорб» и «РИБОТЕСТ-NASBA».
Форма предназначена для ручной экстракции.
Форма 2 включает комплект реагентов «РИБОТЕСТ-NASBA». Форма предназначена для
автоматической экстракции.
ВНИМАНИЕ! При работе с формой 2 заявленные аналитические характеристики набора
реагентов гарантируются только в случае выделения РНК при помощи автоматической
станции «NucliSENS® easyMAG™» («bioMerieux», Франция).
Форма комплектации 1 предназначена для полного анализа, включая выделение
нуклеиновых кислот из клинического материала, амплификации РНК Chlamydia
trachomatis методом NASBA в режиме «реального времени».
Набор реагентов рассчитан на 60 тестов, включая контроли.
СОСТАВ.
Комплект реагентов «РИБОТЕСТ-сорб» - комплект реагентов для выделения
нуклеиновых кислот из клинического материала включает:
Реактив Описание Объем (мл) Кол-во
Лизирующий буфер Прозрачная бесцветная
жидкость 27 1 флакон
Отмывочный буфер Прозрачная бесцветная
жидкость 44 1 флакон
Раствор для отмывки 3 Прозрачная бесцветная
жидкость 100 1 флакон
Раствор для отмывки 4 Прозрачная бесцветная
жидкость 20 2 флакона
Сорбент Суспензия белого цвета 0,8 2 пробирки
РНК-элюент Прозрачная бесцветная
жидкость 1,5 2 пробирки
Комплект реагентов рассчитан на выделение нуклеиновых кислот из 60 проб, включая
контроли.
При хранении лизирующего буфера и отмывочного буфера при температуре от 2 до 8 °С возможно
образование осадка в виде кристаллов.
--- стр. 5 ---
Комплект реагентов «РИБОТЕСТ-NASBA» - комплект реагентов для амплификации
3
РНК Chlamydia trachomatis методом NASBA в режиме «реального времени» включает:
Реактив Описание Объем (мл)
Масса (мг) Кол-во
Гранула с ферментами
(цветовой код - красный) Шарик белого цвета 5,0 мг 6 штук
Растворитель фермента
(цветовой код - красный)
Прозрачная бесцветная
жидкость 0,5 мл 1 пробирка
Гранула с реагентами
(цветовой код - синий) Шарик белого цвета 6,5 мг 6 штук
Растворитель реагентов
(цветовой код - синий)
Прозрачная бесцветная
жидкость 0,6 мл 1 пробирка
Раствор КС1
(цветовой код - желтый)
Прозрачная бесцветная
жидкость 0,5 мл 1 пробирка
d e p c -h 2o
(цветовой код - белый)
Прозрачная бесцветная
жидкость 1,5 мл 1 пробирка
CT-Mix Прозрачная розовая
жидкость 0,05 мл 1 пробирка
ПКО СТ Прозрачная бесцветная
жидкость 0,1 1 пробирка
Комплект реагентов рассчитан на проведение 60 реакций амплификации, включая контроли.
Дополнительно к комплекту реагентов прилагаются контрольные образцы этапа
выделения:
Реактив Описание Объем (мл) Кол-во
ВКО СТ-гес Прозрачная бесцветная
жидкость 0,11 5 пробирок
Транспортная среда для
мазков
Прозрачная бесцветная
жидкость 30 1 флакон
ВЗЯТИЕ КЛИНИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА. ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ И
ХРАНЕНИЕ ПРОБ.
Для проведения анализа используется следующий материал:
- соскоб эпителиальных клеток из урогенитального тракта женщин
Цервикальный канал. Удаляют слизь с поверхности шейки матки тампоном, вводят
зонд в цервикальный канал на 1-1,5 см и вращают его в течение 3-5 с. Извлекают зонд и
помещают его в стерильную одноразовую пробирку с транспортной средой для мазков.
Погрузив рабочую часть зонда в пробирку с 500 мкл транспортной среды для мазков,
вращают зонд в течение 10-15 с, избегая разбрызгивания раствора. Вынимают зонд из
раствора, прижимая его к стенке пробирки и, отжав избыток жидкости, удаляют зонд и
закрывают пробирку. Для выделения нуклеиновых кислот используется 100 мкл образца.
Уретра. Перед взятием соскоба из уретры необходимо обработать ее наружное
отверстие тампоном, смоченным стерильным физиологическим раствором (0,9 % раствор
NaCl). Производят массаж уретры пальцем со стороны влагалища, прижимая ее к лобковой
--- стр. 8 ---
11. Микроцентрифуга для пробирок типа «Эппендорф» до 16 тыс об/мин (например, «Elmi»,
Латвия; «Hettish», Германия).
12. Вакуумный отсасыватель медицинский с колбой-ловушкой для удаления надосадочной
жидкости (например, «ОМ-1», г. Ульяновск, Россия).
13. Одноразовые наконечники для пипеток переменного объема до 200 мкл (например,
«Axygen», США).
14. Штатив для дозаторов переменного объема до 200 мкл (например, «Axygen», США).
При использовании автоматической станции «NucliSens" easyMAG™»
дополнительно требуется:
1. Автоматическая станция для выделения РНК/ДНК «NucliSens® easyMAG™» (поставщик
«ИнтерЛабСервис», Россия).
2. Набор реактивов и расходных материалов к автоматической станции «NucliSens"
easyMAG™» (NucliSens буфер для экстракции 1, NucliSens буфер для экстракции 2,
NucliSens буфер для экстракции 3, NucliSens буфер для лизиса, NucliSens
магнетизированная силика) («bioMerieux», Франция).
ЗОНА 2.
Для проведения NASBA-Real-Time требуются:
1. Анализатор и программное обеспечение «NucliSens® EasyQ» («bioMerieux», Франция),
«Rotor-Gene» 3000/6000 («CorbettResearch», Австралия) или «iQ iCycler» и «iQ5»
(«BioRad», США).
2. Инкубатор «NucliSens® EasyQ» («bioMerieux», Франция).
3. ПЦР-бокс (например, «БАВ-ПЦР-»Ламинар-С», «Ламинарные системы», Россия).
4. Вортекс (например, «ТЭТА-2», «Биоком», Россия).
5. Набор электронных и механических дозаторов переменного объема (например,
«Ленпипет», Россия).
6. Штатив-контейнер для пробирок 0,2 мл с крышкой («ЫоМёпеих», Франция).
7. Устройство для закрывания пробирок («bioMerieux», Франция).
8. Стрипованные пробирки (например, PCR -0208-С, «Axygen», СИТА).
9. Стрипованные крышки (например, PCR-02CP-C, «Axygen», США).
10. Мини-центрифуга для стрипованных пробирок (± 6 000 об/мин, 2 000 g)
(«bioMerieux», Франция).
11. Центрифуга для пробирок на 1,5 мл (до 10 000 g) (например, «Elmi», Латвия, «Hettish»,
Е ермания).
12. Отдельный халат и одноразовые резиновые перчатки.
6
--- стр. 9 ---
13. Емкость с дезинфицирующим раствором.
14. Холодильник от 2 до 8 °С с морозильной камерой не выше минус 16 °С.
ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА.
ЭТАП 1. ВЫДЕЛЕНИЕ НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ ИЗ ПРОБ.
(проводится в ЗОНЕ 1 - помещении для обработки исследуемого материала).
Выделение РНК из исследуемого материала с помощью автоматической станции
«NucliSens® easyMAG™» («ЫоМёпеих», Франция) описано в Приложении 1.
ВНИМАНИЕ! Для работы необходимо использовать только одноразовые
стерильные пластиковые расходные материалы, имеющие специальную маркировку
«RNase-free», «DNase-free». Работу проводят только в одноразовых перчатках,
которые меняют при каждой операции. Избегайте касания пробирок с реагентами
для NASBA руками без перчаток.
Порядок работы.
1. До начала процедуры прогрейте флаконы с лизирующим буфером и отмывочным
буфером при температуре 25-37 °С до полного растворения кристаллов. В процессе
прогрева периодически перемешивайте флаконы. Убедитесь, что кристаллы
лизирующего буфера и отмывочного буфера полностью растворились. Охладите до
комнатной температуры.
2. Подготовьте необходимое количество одноразовых пробирок объемом 1,5 мл (включая
отрицательный контроль выделения). Внесите на стенку пробирок (кроме пробирки
положительного контроля выделения) по 10 мкл ВКО СТ-rec. Затем внесите по 400
мкл лизирующего буфера. Промаркируйте пробирки.
3. В пробирки с лизирующим буфером и ВКО СТ-rec внесите по 100 мкл проб,
используя наконечники с аэрозольным барьером. В пробирку отрицательного контроля
(ОК) выделения внесите 100 мкл транспортной среды для мазков. Закройте
пробирки после внесения образца.
4. Плотно закрытые пробирки тщательно перемешайте на вортексе и центрифугируйте в
течение 5 с при 5 тыс об/мин на микроцентрифуге для удаления капель с внутренней
поверхности крышки пробирки.
5. Тщательно ресуспендируйте сорбент на вортексе. В каждую пробирку отдельным
наконечником с аэрозольным барьером добавьте по 25 мкл ресуспендированного
сорбента. Закройте пробирки и перемешайте их на вортексе.
6. Оставьте пробирки на 10 мин при комнатной температуре. Во избежание оседания
частиц сорбента на дно пробирки регулярно (каждые 2 мин) перемешивайте.
7
--- стр. 10 ---
8
7. Центрифугируйте пробирки для осаждения сорбента 30 с при 10 тыс об/мин. Удалите
надосадочную жидкость с помощью вакуумного отсасывателя. Используйте отдельный
наконечник без аэрозольного барьера для каждой пробы.
8. Добавьте по 500 мкл отмывочного буфера в каждую пробирку. Перемешайте на
вортексе до полного ресуспендирования сорбента. Центрифугируйте 30 с при
10 тыс об/мин. Удалите надосадочную жидкость с помощью вакуумного отсасывателя.
Используйте отдельный наконечник без аэрозольного барьера для каждой пробы.
9. Добавьте в пробирки 500 мкл раствора для отмывки 3. Тщательно ресуспендируйте
сорбент на вортексе. Центрифугируйте 30 с при 10 тыс об/мин. Удалите надосадочную
жидкость с помощью вакуумного отсасывателя. Используйте отдельный наконечник
без аэрозольного барьера для каждой пробы.
10. Повторите отмывку раствором для отмывки 3, следуя пункту 9.
11. Добавьте в пробирки по 500 мкл раствора для отмывки 4. Тщательно
ресуспендируйте сорбент на вортексе. Центрифугируйте 30 с при 10 тыс об/мин.
Полностью удалите надосадочную жидкость из каждой пробирки отдельным
наконечником без аэрозольного барьера, используя вакуумный отсасыватель.
12. Поместите пробирки в термостат при температуре (56+1) °С на 15 мин для
подсушивания сорбента. При этом крышки пробирок должны быть открыты.
13. По окончании сушки добавьте по 50 мкл РНК-элюента в каждую пробирку,
используя наконечник с аэрозольным барьером. Перемешайте пробирки на вортексе до
полного ресуспендирования сорбента. Поместите в термостат при температуре (56+1)
°С на 5 мин.
Примечание - По истечении 2 мин перемешайте пробирки на вортексе во избежание
оседания сорбента на дно пробирки.
14. Центрифугируйте 2 мин при 10 тыс об/мин.
15. Надосадочную жидкость используется для постановки реакции NASBA-Real-time.
ЭТАП 2. ПРОВЕДЕНИЕ РЕАКЦИИ АМПЛИФИКАЦИИ И ДЕТЕКЦИИ В РЕЖИМЕ
«РЕАЛЬНОГО ВРЕМЕНИ» (NASBA-Real-Time).
(проводится в ЗОНЕ 2 - помещении для проведения амплификации).
ВНИМАНИЕ! При работе необходимо использовать только одноразовые
стерильные пластиковые расходные материалы, имеющие специальную
маркировку «RNase-free», «DNase-free».
I. Приготовление рабочих растворов реагентов на 10 реакций.
(При постановке большего количества проб реактивы рекомендуется объединить).
--- стр. 11 ---
9
Порядок работы:
1. Перенесите пробирки с образцами прошедшими пробоподготовку в помещение для
амплификации.
2. Включите анализатор («NucliSens® EasyQ», «Rotor-Gene» 3000/6000 или «iQ iCycler» и
«iQ5») дайте ему как минимум 15 мин прогреться.
3. Создайте или выберите протокол анализа как описано в Приложении 2 для «NucliSens
EasyQ», в Приложении 3 для «iQ iCycler» и «iQ5» или в Приложении 4 для «Rotor-Gene»
4. Перед добавлением всех реагентов их необходимо разморозить, перемешать и осадить
капли со стенок пробирок центрифугированием в течение 3 с.
5. Приготовьте раствор ферментов. Добавьте 50 мкл растворителя ферментов
(цветовой код - красный) к одной грануле с ферментами (цветовой код - красный).
Оставьте на 10-15 мин при комнатной температуре. Перемешайте раствор ферментов
потряхиванием. Не используйте вортекс! Осадите капли центрифугированием в
течение 3 с. Используйте полученный раствор в течение 1 ч.
6. Приготовьте Смесь-1 (после добавления каждого компонента немедленно хорошо
перемешайте на вортексе): последовательно добавьте к одной грануле с реагентами
(цветовой код - синий) 70 мкл растворителя реагентов (цветовой код - синий), 8 мкл
DEPC-H 2O (цветовой код - белый) и 16 мкл раствора КС1 (цветовой код - желтый).
Не центрифугируйте полученный раствор!
7. Приготовьте Смесь-2: добавьте 8 мкл CT-Mix к Смеси-1. Перемешайте на вортексе.
Используйте в течение 30 мин после приготовления. Не центрифугируйте!
Если полученная Смесь-2 не прозрачная, выдержите при температуре 65 °С в течение
5 мин и снова перемешайте на вортексе. Не используйте раствор с осадком!
Готовый раствор ферментов можно хранить в течение 2 нед при температуре не выше
минус 68 °С при условии, что раствор заморожен сразу после приготовления. Повторно
замораживать раствор нельзя. Смесь-1 и Смесь-2 хранению не подлежат!
II. Проведение амплификации.
А. Проведение реакции амплификации на анализаторе «NucIiSens“ EasyQ» или
«iQ iCycler» и «iQ5».
Порядок работы.
1. Приготовьте необходимое количество стрипованных пробирок. Поместите стрипы на 8
пробирок в штатив как показано на рисунке. Правила размещения стрипов: чередуйте
ряды со стрипами с пустыми рядами. Например, при помещении стрипа с 8
пробирками в первый ряд штатива второй ряд оставляйте пустым, следующий стрип
3000/6000.
--- стр. 15 ---
официального дилера — компанию ООО «ИнтерЛабСервис» (тел. (495) 105-05-54, факс
(495) 916-18-18, e-mail: products@pcr.ru ).
Заведующий НПЛ Е.Н. Родионова
--- стр. 16 ---
ПРИЛОЖЕНИЕ 1.
ВЫДЕЛЕНИЕ НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ
АВТОМАТИЧЕС-КОЙ СТАНЦИИ «NucliSens® easyMAG™».
Порядок работы.
Вариант 1. Выделение нуклеиновых кислот из отделяемого уретры, цервикального
канала, влагалища и лизис образца вне прибора.
1. Включить прибор «NucliSens® easyMAGTM» и подготовить его к выделению
нуклеиновых кислот, следуя инструкции к прибору.
2. В соответствующем окне программного обеспечения прибора заполнить таблицу
исследуемых образцов. Ввести для каждого образца следующие параметры:
• Поле Sample ID - задать название образца;
• Поле Request - оставить без изменений;
• Поле Volume - указать 100 мкл;
• Поле Eluate - указать 55 мкл;
• Поле Туре - отметить Lysed;
• Поле Priority - отметить Normal;
• Поле Matrix - выбрать Other.
Название образца, материал (Matrix) для выделения нуклеиновых кислот - другое
(Other), объем образца (volume) - 0,1 мл, объем элюции (Eluate) - 55 мкл, тип образца
(Туре) - Lysed, очередность выделения РНК/ДНК в образцах (priority) - normal.
3. Создать новый протокол выделения нуклеиновых кислот и сохранить его. В протоколе
указать, что лизис и инкубация образцов происходит в режиме Off-board («Лизис вне
прибора»): On-board Lysis Buffer Dispensing-NO, On-board Lysis Incubation-NO).
4. Перенести таблицу образцов в созданный протокол.
5. В пробирки, предназначенные для выделения нуклеиновых кислот в приборе
«NucliSens® easyMAG™», внести на стенку по 10 мкл ВКО СТ-rec. После чего внести
по 500 мкл лизирующего буфера.
6. В каждую пробирку добавить 100 мкл исследуемого образца отдельным наконечником
с аэрозольным барьером, тщательно перемешать пипетированием. В пробирку
отрицательного контроля внести 100 мкл транспортной среды для мазков,
тщательно перемешать пипетированием.
ВНИМАНИЕ! Избегайте попадания в пробирку сгустков слизи и крупных частиц.
7. Инкубировать в течение 10 мин при комнатной температуре.
8. Ресуспендировать пробирку с магнитной силикой NucliSens, интенсивно перемешав на
вортексе. Внести в каждую пробирку отдельным наконечником с аэрозольным
барьером по 25 мкл магнитной силики, тщательно перемешать пипетированием.
Магнитная силика должна быть равномерно распределена по всему объему пробирки.
9. Поместить пробирки с образцами в прибор, установить наконечники, запустить
программу выделения нуклеиновых кислот согласно режиму Off-board IB I («Лизис
вне прибора»),
10. После окончания выделениия нуклеиновых кислот, извлечь пробирки из прибора.
Надосадочная жидкость содержит очищенные нуклеиновые кислоты. Пробы готовы к
постановке реакции амплификации.
Примечание - Во избежание попадания магнитной силики в очищенный раствор
нуклеиновых кислот надосадочную жидкость необходимо перенести в стерильные
пробирки в течение 30 мин после выделения.
Вариант 2. Выделение нуклеиновых кислот из отделяемого уретры, цервикального
канала, влагалища и лизис образца в приборе.
1. Включить прибор «NucliSens® easyMAG™» и подготовить его к выделению
нуклеиновых кислот, следуя инструкции к прибору.
--- стр. 17 ---
2. В соответствующем окне программного обеспечения прибора заполнить таблицу
исследуемых образцов. Ввести для каждого образца следующие параметры:
Поле Sample ID - задать название образца;
Поле Request - оставить без изменений;
Поле Volume - указать 100 мкл;
Поле Eluate - указать 55 мкл;
Поле Туре - отметить Primary;
Поле Priority - отметить Normal;
Поле Matrix - выбрать Other.
3. Создать новый протокол выделения нуклеиновых кислот и сохранить его. В
протоколе указать, что лизис и инкубация образцов происходит в режиме On-board
(«Лизис в приборе»): On-board Lysis Buffer Dispensing-YES, On-board Lysis
Incubation-YES).
4. Перенести таблицу образцов в созданный протокол.
5. В пробирки, предназначенные для выделения нуклеиновых кислот в приборе
«NucliSens® easyMAG™», внести на стенку по 10 мкл ВКО СТ-гес.
6. В каждую пробирку добавить 100 мкл исследуемого образца отдельным
наконечником с аэрозольным барьером. В пробирку отрицательного контроля внести
100 мкл транспортной среды для мазков.
ВНИМАНИЕ! Избегайте попадания в пробирку сгустков слизи и крупных частиц.
7. Поместить пробирки с образцами в прибор, установить наконечники, запустить
программу выделения нуклеиновых кислот согласно режиму On-board 8 S («Лизис
в приборе»).
8. По окончании инкубации ресуспендировать пробирку с магнитной силикой
NucliSens, интенсивно перемешав ее содержимое на вортексе. Открыть крышку
прибора и в каждую пробирку с образцом внести отдельным наконечником с
аэрозольным барьером по 25 мкл магнитной силики, тщательно перемешать
пипетированием. Магнитная силика должна быть равномерно распределена по всему
объему пробирки.
9. Закрыть крышку прибора и продолжить выделение нуклеиновых кислот нажав
10. После окончания выделения нуклеиновых кислот, извлечь пробирки из прибора.
Надосадочная жидкость содержит очищенные нуклеиновые кислоты. Пробы готовы
к постановке реакции амплификации.
Примечание - Во избежание попадания магнитной силики в очищенный раствор
нуклеиновых кислот надосадочную жидкость необходимо перенести в стерильные
пробирки в течение 30 мин после выделения.
15
Вариант 3. Выделение нуклеиновых кислот из первой порции мочи и лизис образца в
приборе.
1. Включить прибор «NucliSens® easyMAG™» и подготовить его к выделению
нуклеиновых кислот, следуя инструкции к прибору.
2. В соответствующем окне программного обеспечения прибора заполнить таблицу
исследуемых образцов. Ввести для каждого образца следующие параметры:
• Поле Sample ID - задать название образца;
• Поле Request - оставить без изменений;
• Поле Volume - указать 1000 мкл;
• Поле Eluate - указать 55 мкл;
• Поле Туре - отметить Primary;
• Поле Priority - отметить Normal;
• Поле Matrix - выбрать Other.
--- стр. 18 ---
3. Создать новый протокол выделения нуклеиновых кислот и сохранить его. В
протоколе указать, что лизис и инкубация образцов происходит в режиме On-board
(«Лизис в приборе»): On-board Lysis Buffer Dispensing-YES, On-board Lysis
Incubation-YES).
4. Перенести таблицу образцов в созданный протокол.
5. В пробирки, предназначенные для выделения нуклеиновых кислот в приборе
«NucliSensL K > easyMAG™», внести на стенку по 10 мкл ВКО СТ-гес.
6. В каждую пробирку добавить 1000 мкл исследуемой мочи отдельным наконечником
с аэрозольным барьером. В пробирку отрицательного контроля внести 1000 мкл
транспортной среды для мазков.
7. Поместить пробирки с образцами в прибор, установить наконечники, запустить
программу выделения нуклеиновых кислот согласно режиму On-board fj!^f («Лизис
в приборе»).
8. По окончании инкубации ресуспендировать пробирку с магнитной силикой
NucliSens, интенсивно перемешав ее содержимое на вортексе. Открыть крышку
прибора и в каждую пробирку с образцом внести отдельным наконечником с
аэрозольным барьером по 25 мкл магнитной силики, тщательно перемешать
пипетированием. Магнитная силика должна быть равномерно распределена по всему
объему пробирки.
16
9. Закрыть крышку прибора и продолжить выделение нуклеиновых кислот нажав ЯН!
10. После окончания выделения нуклеиновых кислот, извлечь пробирки из прибора.
Надосадочная жидкость содержит очищенные нуклеиновые кислоты. Пробы готовы
к постановке реакции амплификации.
Примечание - Во избежание попадания магнитной силики в очищенный раствор
нуклеиновых кислот надосадочную жидкость необходимо перенести в стерильные
пробирки в течение 30 мин после выделния.
--- стр. 20 ---
18
1 Откройте иконку NucliSens EasyQ Analysis Software.
2 Выберите File > Open (Файл ... открыть)
3
Выберите желаемый файл импорта (в данном случае составленный в предыдущем
пункте).
Результат: В текстовом окне File name появится имя файла.
4 Нажать Open.
Результат: Е1а экране появятся импортированные данные.
3. Выполнение теста.
Перейдите к задаче Runs, которая включает в себя:
о Overview (обзор)
о Run layout (формат теста)
о Details (подробности)
Выбором меню Edit и последующим выбором подменю Measurement Parameters
установите длительность теста равную 90 мин.
Меню Edit Залами Runs
--- стр. 21 ---
19
До начала процедуры амплификации проведите следующие проверки:
Шаг Действие Где проверять Обозначения
1
Проверьте, подготовлены ли пробирки
и находятся ли они в непосредственной
близости
Лаборатория
2 Правильно ли записаны в программу
значения объемов
Клавиша формат
теста (Run Layout)
3 Проверьте положение образцов на
плате
Клавиша формат
теста (Run Layout)
4 Проверьте подключение анализатора и
готовность его к работе
Клавиша Обзор
(Overview)
Состояние и
название
анализатора
5 Удостоверьтесь, что температура в
измерительной камере достигла 41°С
Клавиша Обзор
(Overview)
Температура
платы носителя
6
Удостоверьтесь, что длительность теста
установлена правильно. Если это не так,
скорректируйте это значение с помощью
меню параметров Edit > Measurement
Parameters
Клавиша Обзор
(Overview) Длительность теста
Состояние и название анализатора
Длительность
теста
--- стр. 22 ---
20
-ReadaStstus-
Reada Name
T empetatute
^----
Current: ;40S5
Plate Position
......
WklA'L
-R iffi Status-
Status:
RunTime
Approximate Duration: ^
Tim© Elapsed:!
Time Left :
ContiolRun
Start
Re-эф To Run
mnutes
his • mm: secs
his: mins secs
str*? i
ЗАПУСК ПРИБОРА.
Далее (после завершения инкубации).
Шаг Действие
1 Выберете задачу Runs
2 Если плата-носитель находилась внутри прибора, нажмите кнопку «Out»
3
Откройте крышку платы носителя и поставьте на нее поддон с
пробирками
Удостоверьтесь в том, что пробирки плотно сидят в гнездах, а поддон
правильно позиционирован внутри платы носителя, причем пробирки
должны быть расположены равномерно
4 Закройте крышку платы носителя и нажмите «1п» в подменю Overview
5 Нажмите Start для запуска теста.
В ходе выполнения теста вы можете следить за его ходом в подменю Обзор
(Overview). Характеристики экспериментальных кривых можно наблюдать в подменю
Подробности (Details).
--- стр. 23 ---
По окончании теста автоматически генерируется файл результатов измерений. Он
записывается в директорию /Results с расширением «.ехр».Эти необработанные данные в
дальнейшем можно обработать в соответствии с программой в рабочем журнале
анализатора.
АНАЛИЗ РЕЗУЛЬТАТОВ.
Импорт данных.
21
Шаг Действие
Выберете рабочий журнал NucliSens EasyQ Data Analyzer. Появится диалоговое
окно с запросом, желаете ли вы воспользоваться макросами. Нажмите кнопку
Enable Macro's (Включить макросы).
Результат: Откроется Excel с рабочим журналом NucliSens EasyQ Data Analyzer
В окне графического листа выберите задачу Import (импорт)
I Import measurement data m
Select export file to Import:
I demo.exp
tests,exp
1
Tnporf 1 1 Cancel
i
1 ' ' ЧГ vJ
Результат: Появится диалоговое окно импорта измеренных данных
Выберите файл для импорта
Нажмите Import
Результат: В окне графического листа появляется кнопка Print, и на экране
высвечиваются рассчитанные необработанные данные. Результаты автоматически
запоминаются
В окне графического листа введите порог определения: Threshold WT - 1.180,
Threshold SC - 1.110 после чего нажмите Enter (Ввод). Значения Threshold могут
отличаться для разных серий наборов реагентов, поэтому при введении
Threshold всегда следуйте инструкции к набору реагентов данной серии!
Помните, что программа воспринимает точку как десятичный разделитель!
Результат: Данные немедленно пересчитываются и выводятся на экран.__________
Выберите лист General sheet и введите имя оператора в желтое поле ввода. Длина
имени должна быть не более 8 символов ________________________
Выберите Graphic sheet и нажмите кнопку Print в окне графического листа. _________
Выберите File > Save As..>, выберите директорию и имя файла, после чего выберите
> Save (сохранить)_____________________________________________________________
9 Закройте рабочий журнал the NucliSens EasyQ Data Analyzer
4. Выключение системы
Если анализатор в течение 3 мин не получает команд, он автоматически переключается
Л
--- стр. 24 ---
в дежурный режим. При этом лампа гаснет, но температура платы-носителя
поддерживается на уровне, предусмотренном по умолчанию. Рекомендуется выключать
систему в конце каждого рабочего дня, а также по окончании всех тестов. Для
выключения анализатора выполните следующие действия.
22
Шаг Действие
1 Выдвиньте плату-носитель
2 Удалите из платы-носителя все оставшиеся пробирки. Для удаления поддона
воспользуйтесь предназначенным для этой цели инструментом.
3 Если плата-носитель выдвинута, задвиньте ее
4 Закройте приложение
5 Отключите питание анализатора выключателем, расположенным на левой стороне
прибора
6 Отключите питание ПК
7 Накройте Анализатор чехлом
ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ.
После импорта измеренных данных в NucliSens EasyQ Data Analyzer необходимо
ввести пороговые значения (Threshold - желтые поля) для специфической мишени (WT) и
ВКО (SC).
_ ' ..............-
Положительный и отрицательный результаты.
Если величины флуоресценции выше пороговых значений (в строке отклонения
результата анализа отображается как Signal Detected), результат интерпретируется как
положительный. Порог определения определяется как уровень флуоресценции на границе
--- стр. 27 ---
ПРИЛОЖЕНИЕ 3.
25
ПРОВЕДЕНИЕ РЕАКЦИИ АМПЛИФИКАЦИИ. АНАЛИЗ И УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ
ПРИ ПОМОЩИ ПРИБОРА «iQ iCycler» или «iQ5»(«BioRad», США).
1. Запрограммируйте прибор для выполнения программы «41-90» нажав клавишу Create
a new protocol, перейдя в задачи Workshop.
2. В меню Edit Protocol запрограммируйте прибор с помощью вспомогательных клавиш.
Программа амплификации «41-90»:
90 циклов: 41 °С - 45 с, детекция флуоресценции на первом цикле первого шага.
3. В меню Edit Plate Setup подменю Samples задайте расположение образцов и их
идентификацию.
--- стр. 28 ---
26
4. В подменю Select and loadfluorophores задать измерение флуоресцентного сигнала во
всех пробирках по каналам FAM и ROX. Сохранить установки.
Для прибора «iQ5» для создания схемы планшета в окне Selected Plate Setup модуля
Workshop нажать кнопку Create New или Edit Plate Setup. Редактировать схему планшета в
режиме Whole Plate loading. Для того чтобы включить второй флуорофор, использовать
пиктограмму Ш) над схемой. Задать объем реакции ( Sample Volume) 20 мкл, тип крышек
(Seal Type): Domed Сар, тип пробирок (Vessel Type): Tubes. Сохранить заданную схему
планшета, нажав кнопку Save &Exit Plate Editing. Необходимо провести калибровку
прибора под заданные параметры объема и типа пробирок!
ВНИМАНИЕ! Процедура постановки реакции NASBA на приборе «iQ iCycler»
требует использования внешнего планшета для измерения факторов лунок, который
устанавливается в прибор до реакционных пробирок. Процедуру считывания
факторов лунок необходимо проводить до внесения нуклеиновых кислот в
стрипованные пробирки.
Перед запуском выполнения программы в окне Run Prep модуля Workshop следует
--- стр. 29 ---
проверить правильность выбранного имени протокола и имени схемы планшета. Задать
объем реакционной смеси - 20 мкл.
В окне запуска выполнения программы модуля Run-Time Central будет автоматически
задано использование внешнего планшета для измерения факторов лунок - под строкой
Select well factor source будет отмечен вариант Well Factor Plate.
После выполнения процедуры считывания факторов лунок, когда прибор перейдет в
режим паузы при температуре 60 °С, нужно вынуть пробирки с раствором для
определения факторов лунок, нажать кнопку Continue Running Protocol в окне блока Run
Time Central и ждать пока температура блока не достигнет 41 °С.
Для прибора «iQ5» внешний планшет не используется. Перед запуском выполнения
программы анализа следует проверить правильность выбранного протокола (Selected
Protocol) и схемы планшета (Selected Plate Setup). Для запуска нажать кнопку Run.
Выбрать для измерения факторов лунок вариант Use Persistent Well Factors (предлагается
по умолчанию).
После того, как температура реакционного блока достигнет 41 °С, нажать кнопку
Pause, открыть крышку и поместить реакционные пробирки в ячейки амплификатора в
соответствии с предварительно запрограммированной схемой планшета. Закрыть крышку
прибора и нажать кнопку Continue Running Protocol (Resume Run для модели «iQ5») в
окне блока Run-Time Central, ждать окончания реакции.
27
УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ.
Полученные данные интерпретируются с помощью программного обеспечения
прибора «iQ iCycler» или «iQ5» по наличию пересечения кривой флуоресценции с
установленной на соответствующем уровне пороговой линией (что соответствует
наличию значения порогового цикла «Ct» в соответствующей графе в таблице
результатов). Накопление продукта амплификации участка РНК Chlamydia trachomatis
детектируется по каналу FAM, накопление продукта амплификации ВКО СТ-гес - по
каналу ROX.
1. Выбрать в окне модуля PCR Quantification данные по каналу FAM (для «iQ iCycler»
выбрать значок канала FAM-490 в окне Select a Reporter). При этом должен быть выбран
режим анализа данных PCR Base Line Subtracted Curve Fit (выбирается по умолчанию).
Задать уровень пороговой линии на уровне, соответствующем 10-20 % от максимального
уровня флуоресценции, полученного для образца ПКО в последнем цикле амплификации.
(Уровень флуоресценции ПКО считают равным ближайшему к нему делению шкалы,
помеченному цифрой). При этом необходимо, чтобы график флуоресценции для образца
ПКО показывал характерное экспоненциальное нарастание флуоресцентного сигнала.
--- стр. 33 ---
Поде для введения
имени оператора
Поле для введения
комментариев
Объем реакционной
смеси
5. Запрограммируйте прибор, нажав клавишу Edit profde/Редактор профиля.
Программа «41-90» для амплификатора «Rotor-Gene» 3000/6000:
41 °С-1 мин
95 циклов: 41 °С - 40 с
детекция флуоресценции по каналам FAM/Green и
ROX/Orange.
6. Нажмите ОК/Да.
Изменить профиль
Калибровка
Вставить после
Вставить до
Удалить
Количество циклов
Установка детекции
флуоресценции
--- стр. 34 ---
7. Задайте автоматическую калибровку для выбора параметра Ояш/Усиление сигнала.
Для этого в окне Channel Setup выбрать кнопку Calibrate/Gain
Optimisation. ../Опт.уровня сиги. В открывшемся окне Auto Gain Calibration
Setup/Авто-оптимизация уровня сигнала нажать кнопку Calibrate Acquiring/Optimize
Acquiring/Onm. Детек-мых, пометить галочкой бокс в строке Perform Calibration Before
1st Acquisition» /Perform Optimisation Before 1-st Acquisition/Выполнить оптимизацию
при 1-м шаге детекции. Для канала FAM/Sybr/Green нужно указать в графе Min
Reading/Миним. Сигнал значение 10, а в графе Мах Reading/Максим. Сигнал значение
12. Для канала ROX/Orange нужно указать в графе Min Reading/Миним. Сигнал
значение 1, а в графе Мах Reading/Максим. Сигнал значение 5. В графе Tube
position/Позиция Пробирки следует указать номер любой пробирки с реакционной
смесью (не пустой). Закрыть окно Auto Gain Calibration Setup/Авто-оптимизация
уровня сигнала.
32
Auto Gain Calibration Setup
Calibration: -
urn xj
Auto-Gain Calibration will read the fluoresence on the inserted sample at
different gain levels until it finds one at which the fluorescence levels aie
acceptable. The range of fluorescence you are looking for depends on the
chemistry you are performing.
Set temperature to |GCi -jj degrees.
Calibrate All j Calibrate Acquiring |
P? iPeriormCaibiation Before 1 st Acquisition
Г Perform Calibration At SO Degrees At Beginning Of Run
Channel Settings:
Add..
Name T ube Position
FAM/Sybr 1
ROX 1
Min Reading | Max Reading Min Gain M axG .Edit...
10FI
1 FI
12FI
5FI
-10
-10
10
10
Remove
Remove All
il
Start | Manual. | Close j Help
2J
Добавить
Изменить
Удалить
Удалить все
8. После запуска выполнения программы кнопкой Start Run/Старт в открывшемся окне
таблицы образцов откройте предварительно сохраненную в виде файла таблицу
образцов (или отредактируйте последовательность образцов) и нажмите кнопку
Finish/OK.
УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ.
Полученные данные интерпретируются с помощью программного обеспечения прибора
«Rotor-Gene» 3000/6000 по наличию пересечения кривой флуоресценции с установленной
на соответствующем уровне пороговой линией (что соответствует наличию значения
порогового цикла «Ct» в соответствующей графе в таблице результатов). Накопление
продукта амплификации участка РНК Chlamydia trachomatis детектируется по каналу для
флуорофора FAM/Green, а накопление продукта амплификации ВКО СТ-гес - по каналу
для флуорофора ROX/Orange.
1. Выбрать в главном меню значок меню Analysis/Анализ, в ниспадающем меню выбрать
вкладку Quantitation/Количественный. В ы п о л н и т ь эту операцию для данных канала
--- стр. 35 ---
FAM/Green, выбрав в поле Cycling A FAM/Cycling A Green, затем для данных канала
ROX/Orange, выбрав в поле Cycling A ROXlCycling A Orange.
2. Щелкнув кнопкой мыши на графике нормализованных кривых флуоресценции по
каналу FAM/Green нажать в меню над графиком кнопку Dynamic tube/Динамич.фон,
затем кнопку More Settings/Outlier Removal/Устранение выбросов и ввести в текстовом
поле значение 5 (5 %). Задать уровень пороговой линии, введя в текстовом поле
Threshold/Порог значение 0,05 (под таблицей образцов). Внизу под графиком появится
таблица результатов с указанием значения порогового цикла по каналу FAM/Green для
каждого образца {Quant. Results - Cycling A. FAM/Quant. Results - Cycling A. Green).
3. Щелкнув кнопкой мыши на графике нормализованных кривых флуоресценции по
каналу ROX/Orange нажать в меню над графиком кнопку Dynamic tube/Динамич.фон,
затем кнопку More Settings/Outlier Removal/Устранение выбросов и ввести в текстовом
поле значение 5 (5 %). Задать уровень пороговой линии в текстовом поле
Threshold/Порог значение 0,05. Внизу под графиком появится таблица результатов с
указанием значения порогового цикла по каналу ROX/Orange для каждого образца
{Quant. Results - Cycling A. ROXlQuant. Results - Cycling A. Green).
33
Положительный и отрицательный результаты.
Если величины флуоресценции выше порога определения (в таблице результатов
пороговых циклов для них определено значение Ct), результат интерпретируется как
положительный. Если величины флуоресценции ниже порога определения (в таблице
результатов пороговых циклов для них не определено значение Ct), результат
интерпретируется как отрицательный.
Порог определения был установлен при анализе выборки отрицательных образцов.
Таблица 3.
Оценка результатов анализа
Канал FAM (Green) Канал ROX (Orange) Результат
+ + Положительный
+ - Положительный
- + Отрицательный
- - Недействительный
Результаты не подлежат учету:
1. Если величина флуоресценции по каналу FAM/Green клинического образца ниже
порога определения (не пересекает пороговую линию), и контрольное значение по
каналу ROX/Orange ниже порога определения (не пересекает пороговую линию)
результат признается недействительным. Тест для такого образца необходимо
повторить (начиная с этапа выделения РНК).
Контрольные образцы.
Отсутствие сигнала по каналу ROX/Orange как в клинических образцах, так и в
отрицательном контроле выделения (ОК), а также, отсутствие сигнала по каналу
FAM/Green в положительном контроле выделения (ПК) могут быть вызваны:
- несоблюдением необходимых условий работы с РНК;
- неэффективной пробоподготовкой;
- разрушением препарата ВКО СТ-rec (ПКО СТ) и/или CT-Mix в результате истечения
срока годности или несоблюдения условий хранения;
- неисправностью прибора.
--- стр. 40 ---
условия и Инструкцию по применению) на набор реагентов не повлияли на
качество, безопасность и эффективность набора реагентов «АмплиСенс
Chlamydia trachomatis-РИБОТЕСТ». Внесенные изменения в НД
рекомендуются к согласованию в установленном порядке
Материалы рассмотрены на заседании Ученого совета ГИСК
им.Л.А.Тарасевича
от «23» июня 2009г. протокол № 9 .
/
Зав. лабораторией
арбовирусных инфекций,
риккетсиозов и ВИЧ-инфекции
профессор М.С.Воробьева
4
--- стр. 41 ---
ФРЖ "Государственный научно-игслодошйлгчи.
институт стандартизации и контроля
медицинских биологических препаратов
имени Л.А.ТАРАСЕВИит\"
1 19002 Москва Г-2, Сивцев-Вражек, 4!
ПРОТОКОЛ КОНТРОЛЯ № 1
Наименование набора реагентов для выявления
рРНК Chlamydia trachomatis , полученной из
клинического материала, методом NASBA
режиме «реального времени» «АмплиСенс
Chlamydia trachomatis-PWbOTYiCY»
Серия 18.05.09 срок годности до 18.11.09 форма 1
Изготовитель: ФГУН ЦНИИЭ Роспотребнадзора
Учреждение, приславшее образцы на анализ:
ФГ’УН ЦНИИЭ Роспотребнадзора
Вид контроля: на соответствие требованиям
проекта ТУ 9398-016-01897593-2009
Зоказатели Требования проекта ТУ Результаты
анализа
внешний вид Лизирующий буфер - прозрачная бесцветная жидкость(возможно
образование осадка в виде кристаллов);
соответствует
Отмывочный буфер - прозрачная бесцветная жидкость (возможно
образование осадка в виде кристаллов)
соответствует
Раствор для отмывки 3 - прозрачная бесцветная жидкость соответствует
Раствор для отмывки 4 - прозрачная бесцветная жидкость соответствует
Сорбент - суспензия белого цвета соответствует
РНК-элюент - прозрачная бесцветная жидкость соответствует
ВКО СТ-гес - прозрачная бесцветная жидкость соответствует
Транспортная среда для мазков - прозрачная бесцветная жидкость соответствует
Гранулы с ферментами - шарики белого цвета соответствует
Растворитель фермента - прозрачная бесцветная жидкость соответствует
Гранулы с реагентами - шарики белого цвета соответствует
Растворитель реагентов - прозрачная бесцветная жидкость соответствует
Раствор КС1 - прозрачная бесцветная жидкость соответствует
DEPC-H20 - прозрачная бесцветная жидкость соответствует
CT-Mix - прозрачная розовая жидкость соответствует
ПКО СТ - прозрачная бесцветная жидкость соответствует
Технические
характеристики:
чувствительность
и специфичность
Чувствительность - величина флуоресценции по каналу WT выше
порогового значения (в строке отклонения результата анализа
отображается как Signal Detected) в разведениях стандартного образца
предприятия № 35 «СОП ПКО СТ-гес», содержащих рРНК
С.trachomatis в концентрации не менее 3x104 копий/мл
соответствует
Специфичность Отсутствие флуоресценции по каналу WT. Величина
флуоресценции по каналу SC выше порогового значения (в строке
отклонения результата анализа отображается как Signal Detected) в
«ОК» (отрицательном контрольном образце),
соответствует
Упаковка
Маркировка
В соответствии с проектом ТУ
ВКЛЮЧЕНИЕ: Серия 18.05.09 срок годности 18.11.09 (форма 1) набора реагентов
:АмплиСенс Chlamydia trachomatis- Г’ И ВО' ГНС ’ 1» соответствует проекту ТУ 9398-016-
11897593-2009
збораторией
ярусных инфекций
гсиозов и ВИЧ-инфекции it М.С.Воробьева
@ со
--- стр. 42 ---
ФПН 'Государственный научно-игследователглий
институт стандартизации и контроля
медицинских биологических препаратов
имени Л.А.ТАРАС£ВИиД'
1 19002 Москва Г-2, Сивцев-Вражск. 41
ПРОТОКОЛ КОНТРОЛЯ № 2
Наименование набора реагентов для выявления
рРНК Chlamydia trachomatis, полученной из
клинического материала, методом NASBA
режиме «реального времени» «АмплиСенс
Chlamydia trachomatis-РРПЮТЕСТ»
Серия 20.05.09 срок годности до 20.11.09 форма 1
Изготовитель: ФГУН ЦНИИЭ Роспотребнадзора
Учреждение, приславшее образцы на анализ:
ФГУН ЦНИИЭ Роспотребнадзора
Вид контроля: на соответствие требованиям
проекта ТУ 9398-016-01897593-2009
Показатели Требования проекта ТУ Результаты
анализа
Внешний вид Лизирующий буфер - прозрачная бесцветная жидкость(возможно
образование осадка в виде кристаллов);
соответствует
Отмывочный буфер - прозрачная бесцветная жидкость (возможно
образование осадка в виде кристаллов)
соответствует
Раствор для отмывки 3 - прозрачная бесцветная жидкость соответствует
Раствор для отмывки 4 - прозрачная бесцветная жидкость соответствует
Сорбент - суспензия белого цвета соответствует
РНК-элюент - прозрачная бесцветная жидкость соответствует
ВКО СТ-гес - прозрачная бесцветная жидкость соответствует
Транспортная среда для мазков - прозрачная бесцветная жидкость соответствует
Гранулы с ферментами - шарики белого цвета соответствует
Растворитель фермента - прозрачная бесцветная жидкость соответствует
Гранулы с реагентами - шарики белого цвета соответствует
Растворитель реагентов - прозрачная бесцветная жидкость соответствует
Раствор КС1 - прозрачная бесцветная жидкость соответствует
DEPC-H20 - прозрачная бесцветная жидкость соответствует
CT-Mix - прозрачная розовая жидкость соответствует
ПКО СТ - прозрачная бесцветная жидкость соответствует
Технические
характеристики:
чувствительность
и специфичность
Чувствительность - величина флуоресценции по каналу WT выше
порогового значения (в строке отклонения результата анализа
отображается как Signal Detected) в разведениях стандартного образца
предприятия № 35 «СОП ПКО СТ-гес», содержащих рРНК
С.trachomatis в концентрации не менее 3x104 копий/мл
соответствует
Специфичность Отсутствие флуоресценции по каналу WT. Величина
флуоресценции по каналу SC выше порогового значения (в строке
отклонения результата анализа отображается как Signal Detected) в
«ОК» (отрицательном контрольном образце),
соответствует
Упаковка
Маркировка
В соответствии с проектом ТУ
ЗАКЛЮЧЕНИЕ: Серия 20.05.09 срок годности 20.11.09 (форма 1) набора реагентов
«АмплиСенс® Chlamydia trachomatis-РИБОТЕСТ» соответствует проекту ТУ 9398-016-
01897593-2009
лабораторией
(вирусных инфекций
сетсиозов и ВИЧ-инфекции
М.С.Воробьева
® Ю
--- стр. 43 ---
OfVH ‘Государственный научно-исследовате/u ■'кий
институт стандартизации и контроля
медицинских биологических препаратов
имени Л.А.ТАРАСЕВИиА’
1 1900? МШйа Г-?| бивцее-Вражек, 41
ПРОТОКОЛ КОНТРОЛЯ № 3
Наименование набора реагентов для выявления
рРНК Chlamydia trachomatis , полученной из
клинического материала, методом NASBA
режиме «реального времени» «АмплиСенс
Chlamydia trachomatis-РИБОТЕСТ»
Серия 21.05.09 срок годности до 21.11.09 форма 1
Изготовитель: ФГУН ЦНИИЭ Роспотребнадзора
Учреждение, приславшее образцы на анализ:
ФГУН ЦНИИЭ Роспотребнадзора
Вид контроля: на соответствие требованиям
проекта ТУ 9398-016-01897593-2009
Указатели Требования проекта ТУ Результаты
анализа
внешний вид Лизирующий буфер - прозрачная бесцветная жидкость(возможно
образование осадка в виде кристаллов);
соответствует
Отмывочный буфер - прозрачная бесцветная жидкость (возможно
образование осадка в виде кристаллов)
соответствует
Раствор для отмывки 3 - прозрачная бесцветная жидкость соответствует
Раствор для отмывки 4 - прозрачная бесцветная жидкость соответствует
Сорбент - суспензия белого цвета соответствует
РНК-элюент - прозрачная бесцветная жидкость соответствует
ВКО СТ-гес - прозрачная бесцветная жидкость соответствует
Транспортная среда для мазков - прозрачная бесцветная жидкость соответствует
Г ранулы с ферментами - шарики белого цвета соответствует
Растворитель фермента - прозрачная бесцветная жидкость соответствует
Гранулы с реагентами - шарики белого цвета соответствует
Растворитель реагентов - прозрачная бесцветная жидкость соответствует
Раствор КС1 - прозрачная бесцветная жидкость соответствует
DEPC-H20 - прозрачная бесцветная жидкость соответствует
CT-Mix - прозрачная розовая жидкость соответствует
ПКО СТ - прозрачная бесцветная жидкость соответствует
Технические
характеристики:
1увствительность
и специфичность
Чувствительность - величина флуоресценции по каналу WT выше
порогового значения (в строке отклонения результата анализа
отображается как Signal Detected) в разведениях стандартного образца
предприятия № 35 «СОП ПКО СТ-гес», содержащих рРНК
С.trachomatis в концентрации не менее Зх104 копий/мл
соответствует
Специфичность Отсутствие флуоресценции по каналу WT. Величина
флуоресценции по каналу SC выше порогового значения (в строке
отклонения результата анализа отображается как Signal Detected) в
«ОК» (отрицательном контрольном образце),
соответствует
Упаковка
Маркировка
В соответствии с проектом ТУ
А.КЛЮЧЕНИЕ: Серия 21.05.09 срок годности 21.11.09 (форма 1) набора реагентов
АмплиСенс Chlamydia trachomatis-РИБОТЕСТ» соответствует проекту ТУ 9398-016-
1897593-2009
бораторией
[русных инфекций
сиозов и ВИЧ-инфекции М.С.Воробьева
ю ©