Набор реагентов для определения однонуклеотидных полиморфизмов (SNP) rs8099917 и rs12979860 в гене Интерлейкин-28B (IL28B) в клиническом материале методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме «реального времени» «АмплиСенс® Геноскрин-IL28B-FL» по ТУ 9398-201-01897593-2012 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 3 --- г список СОКРАЩЕНИЙ В настоящей инструкции применяются следующие сокращения и обозначения; ВКО В- К + К- ПКО ПЦР ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора FRT SNP - внутренний контрольный образец - отрицательный контроль экстракции -положительный контроль ПЦР - отрицательный контроль ПЦР - Положительный контрольный образец - полимеразная цепная реакция “ Федеральное бюджетное учреждение науки «Центральный научно-исследовательский институт эпидемиологии» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека - флуоресцентная детекция в режиме «реального времени» -однонуклеотидный полимоофизм НАЗНАЧЕНИЕ Набор реагентов «АмплиСенс® reHOCKpMH-/L28B-FL» предназначен для определения SNP rs8099917 и rs12979860 в гене Интерлейкин-28В (/L28B) в клиническом материале (цельная кровь или мазок с внутренней поверхности щеки (буккальный эпителий)) методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме «реального времени». ВНИМАНИЕ! Результаты ПЦР-исследования учитываются в комплексной диагностике заболевания^ ПРИНЦИП МЕТОДА Метод основан на экстракции тотальной ДНК человека из образцов клинического материала и проведении ПЦР-амплификации с гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме «реального времени» фрагментов ДНК человека, содержащих SNP rs8099917 и rs12979860 в гене /L28B и участка гена, кодирующего (i-глобин человека, в качестве эндогенного внутреннего контроля (ВКО). ВКО позволяет контролировать все этапы анализа и оценивать влияние ингибиторов ПЦР на результаты исследования. Анализ одного образца проводится в двух пробирках, в одной из которых определяются SNP rs8099917 и ВКО, в другой - SNP rs12979860 и ВКО. Набор реагентов позволяет дифференцировать гомо- и гетерозиготное состояние по каждому из исследуемых SNP. Набор разработан для приборов, имеющих три и более канала детекции флуоресценции. В таблице 1 указаны каналы, по которым ^ В соответствии с Диреетивой Европейского Союза 98/79/ЕС. --- стр. 4 --- д е те ктир ую тся н у кл е о ти д н ы е ва р и а н ты и ссл е д уе м ы х S N P и ВКО . Д етекци я SN P Реакционная смесь Канал для флуорофора FAM JOE ROX «rs17» «гзбО» Выявляемые нуклеотиды ВКО ВКО Т аб лица 1 Г г Ф ОРМ АТЫ И Ф О Р М Ы В Ы П У С КА Н А Б О Р А РЕ А ГЕ Н ТО В Набор реагентов в ы пускается в 1 ф орм ате: Ф орм ат FRT Набор реагентов выпускается в 4 формах комплектации: Ф орма 1 включает комплекты реагентов «РИБО-преп» вариант 100, «Гемолитик» (1 флакон), РНК-буфер (1 пробирка), «ПЦР-комплект» вариант FRT-100 F. Ф орма 2 включает комплект реагентов «ПЦР-комплект» вариант FRT-100 F. Ф орма 3 включает комплект реагентов «ПЦР-комплект» вариант FRT-50 F. Форма 4 включает наборы реагентов оптом, расфасованные по отдельным реагентам, с маркировкой реагентов на их оптовой фасовке. Форма комплектации 1 предназначена для проведения полного ПЦР- исследования, включающего экстракцию ДНК из клинического материала и амплификацию ДНК с гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме «реального времени». Формы комплектации 2 и 3 предназначены для проведения амплификации ДНК с гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме «реального времени». Для проведения полного ПЦР-исследования необходимо использовать комплекты реагентов для экстракции ДНК, рекомендованные ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора. Форма комплектации 4 предназначена для производственных целей для последующей маркировки на языке заказчика и комплектации по наборам. ВНИМАНИЕ! Форма комплектации 4 используется только в соответствии с регламентом, утвержденным ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора. --- стр. 5 --- А Н А Л И ТИ Ч Е С КИ Е Х А Р А К Т И С Т И К И А налитическая чув ств и тел ь н о сть Объём экстракции, мкл i клинического материала Аналитическая чувствительность, копий/мл 100 Цельная кровь, мазок с внутренней поверхности щеки (буккальный эпителий) 5x10' Г Г А налитическая сп ец и ф и чн о сть Оценка аналитической специфичности набора реагентов показала отсутствие перекрестных реакций между выявляемыми аллелями в пределах каждого исследуемого SNP при использовании высококонцентрированных положительных контрольных образцов и клинических образцов. МЕРЫ П Р Е Д О С ТО Р О Ж Н О С ТИ Работа должна проводиться в лаборатории, выполняющей молекулярно- биологические (ПЦР) исследования клинического материала на наличие возбудителей инфекционных болезней, с соблюдением санитарно-эпидемических правил СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней», СанПиН 2.1.7.2790-10 «Санитарно-эпидемиологические требования к обращению с медицинскими отходами» и методических указаний МУ 1.3.2569-09 «Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности». При работе всегда выполнять следующие требования; - Следует рассматривать исследуемые образцы как инфекционно-опасные, организовывать работу и хранение в соответствии с СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней». - Убирать и дезинфицировать разлитые образцы или реактивы, используя дезинфицирующие средства в соответствии с СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами I1I-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней». - Лабораторный процесс должен быть однонаправленным. Анализ проводится в отдельных помещениях (зонах). Работу следует начинать в Зоне Выделения, продолжать в Зоне Амплификации и Детекции. Не возвращать образцы, 5 --- стр. 21 --- г г СРОК годности. УС Л О В И Я Т Р А Н С П О Р ТИ Р О В А Н И Я и Х Р А Н ЕН И Я Срок годности. 12 мес. Набор реагентов с истекшим сроком годности применению не подлежит. Срок годности вскрытых реагентов соответствует сроку годности, указанному на этикетках для невскрытых реагентов, если в инструкции не указано иное. Транспортирование. Набор реагентов транспортировать при температуре от 2 до 8 °С не более 5 сут. При получении разукомплектовать в соответствии с указанными температурами хранения. Хранение. Комплект реагентов «РИБО-преп» хранить при температуре от 2 до 8 °С. Комплект реагентов «ПЦР-комплект» хранить при температуре от минус 24 °С до минус 16 °С. ПЦР-смесь-1-FRT IL28B rs8099917 и ПЦР-смесь-1-FRT IL28B rs12979860 хранить в защищенном от света месте. Реагенты «Гемолитик» и РНК-буфер, прилагающиеся к комплекту реагентов «РИБО- преп», хранить при температуре от 2 до 8 °С. Условия отпуска. Для лечебно-профилактических и санитарно-профилактических учреждений. Рекламации на качество набора реагентов «А м плиС енс® Геноскрин /L28B-FL» направлять на предприятие-изготовитель ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора (111123 г, Москва, ул. Новогиреевская, д. За) в отдел по работе с рекламациями и организации обучения (тел. (495) 974-96-46, факс (495) 916-18-18, e-mail: products@pcr.ru)^°. Заведующий НПЛ ОМДиЭ ^ Родионова ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзор^ Главный врач ФГБУ «Поликлиника № 1» Р А Е.Л.Никонов Управления делами Президента Российской Федерации Отзывы и предложения о продукции «Ам плиС енс» вы м ож ете оставить, заполнив анкету потребителя на сайте: w w w .am plisen s.ru. --- стр. 22 --- ЭКСТРАКЦИЯ ДНК г г П РИ ЛО Ж ЕНИ Е. Э кстр акц и я Д Н К с испол ь зо вани ем ко м пл екта реагентов «РИБ О -преп». Порядок работы . 1 . Раствор д ля л и зи са (если он хранился при температуре от 2 до 8 °С) прогреть при температуре до 65 °С до полного растворения кристаллов. А1. Подготовка кл и н и ческого м атериала при вы делении Д Н К из крови 1 . Отобрать необходимое количество одноразовых пробирок на 1,5 мл (включая отрицательный контроль экстракции). Промаркировать пробирки. 2. В пробирки, предназначенные для клинических проб, внести отдельными наконечниками по 1,0 мл гем олитика и по 100 мкл исследуемых образцов цельной крови в соответствии с маркировкой. Закрыть пробирки и аккуратно перемешать содержимое пробирок на вортексе. 3. Оставить пробирки при комнатной температуре на 5 мин; затем еще раз аккуратно перемешать содержимое пробирок на вортексе; оставить на 5 мин. 4. Центрифугировать пробирки на микроцентрифуге при 8 тыс об/мин в течение 2 мин. 5. Аккуратно отобрать надосадочную жидкость, не задевая осадок, используя вакуумный отсасыватель и отдельный наконечник для каждой пробы. Полученны й о с ад о к л ей ко ц и то в м ож но хр ан и ть при тем ператур е не выше минус 16 °С в те ч е н и е 2 нед или при тем пер атур е не вы ш е минус 68 "С в течение 1 года. А2. П одготовка кл и н и ческого м атериала при вы делении Д Н К из мазков с внутренней пов ер хности щ еки 1 . Отобрать необходимое количество одноразовых пробирок на 1,5 мл (включая отрицательный контроль экстракции). Промаркировать пробирки. 2. Пробирки с мазками с внутренней поверхности щеки в «Транспортной среде для хранения и транспортировки респираторных мазков» тщательно перемешать, а затем коротко осадить на вортексе. 3. В пробирки, предназначенные для клинических проб, внести по 100 мкл исследуемых образов в соответствии с маркировкой. Б. Лизис кл и н и ческого м атериала 1 . В промаркированные пробирки с клиническим материалом и пробирку, предназначенную для отрицательного контроля экстракции, внести по 300 мкл раствора для л и зи са. 22 --- стр. 23 --- ЭКСТРАКЦИЯ ДНК г г 2. в пробирку отрицательного контроля экстракции (В-) внести 100 мкл ОКО. 3. Содержимое пробирок тщательно перемешать на вортексе, процентрифугировать в течение 5 с на микроцентрифуге для удаления капель с внутренней поверхности крышки и прогреть 5 мин при 65 “С в термостате. 4. Добавить в пробирки по 400 мкл раствора д л я преципитации, тщательно перемешать на вортексе. 5. Центрифугировать пробирки на микроцентрифуге при 12 тыс д (например, 13 400 об/мин для центрифуги MiniSpin, Eppendorf) в течение 5 мин. 6. Аккуратно отобрать надосадочную жидкость, не задевая осадок, используя вакуумный отсасыватель и отдельный наконечник на 200 мкл для каждой пробы, 7. Добавить в пробирки по 500 мкл раствора д л я отм ы вки 3, плотно закрыть крышки, осторожно промыть осадок, переворачивая пробирки 3-5 раз. Можно провести процедуру одновременно для всех пробирок, для этого необходимо накрыть пробирки в штативе сверху крышкой или другим штативом, прижать их и переворачивать штатив. 8. Центрифугировать при 12 ты с g в течени е 1-2 мин на микроцентрифуге. 9. Осторожно, не захватывая осадок, отобрать надосадочную жидкость, используя вакуумный отсасыватель и отдельный наконечник на 10 мкл для каждой пробы. 10.Добавить в пробирки по 200 мкл раствора д л я отм ы вки 4, плотно закрыть крышки и осторожно промыть осадок, переворачивая пробирки 3-5 раз. Можно провести процедуру одновременно для всех пробирок, для этого необходимо накрыть пробирки в штативе сверху крышкой или другим штативом, прижать их и переворачивать штатив, 11. Центрифугировать при 12 ты с g в течение 2 м ин на микроцентрифуге. 12. Осторожно, не захватывая осадок, тщательно отобрать надосадочную жидкость, используя вакуумный отсасыватель и отдельный наконечник на 10 мкл для каждой пробы. 13. Поместить пробирки в термостат при температуре 65 °С на 5 мин для подсушивания осадка (при этом крышки пробирок должны быть открыты), 14.Добавить в пробирки по 100 мкл Р Н К-буф ера, Перемешать на вортексе. Поместить в термостат при температуре 65 °С на 5 мин, периодически встряхивая на вортексе. 15.Центрифугировать пробирки при 12 ты с g в те ч е н и е 1 м ин на микроцентрифуге. Надосадочная жидкость содержит очищенную ДНК. Пробы готовы к постановке 23