Набор реагентов для выявления ДНК Trichomonas vaginalis в клиническом материале методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с гибридизационно-флуоресцентной детекцией "АмплиСенс® Trichomonas vaginalis-FL" по ТУ 9398-021-01897593-2009 — инструкция и характеристики

РУ: ФСР 2009/06556 · класс риска 2б

Производитель: ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора (Россия)

Вид изделия: Trichomonas vaginalis нуклеиновая кислота ИВД, набор, анализ нуклеиновых кислот

В госконтрактах 44-ФЗ: 61 контракт, медианная цена за единицу 10 251 ₽.

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

--- стр. 3 ---
УТВЕРЖДЕНА  
Приказом Росздравнадзора 
№от
IU)
УТВЕРЖДАЮ  
Директор Федерального 
государственного учреждения 
науки «Центральный научно- 
исследовательский институт 
эпидемиологии» Федеральной 
службы по надзору в сфере 
защиты прав потребителей и
ИНСТРУКЦИЯ
по применению набора реагентов 
для выявления ДНК Trichomonas vaginalis  
в клиническом материале методом 
полимеразной цепной реакции (ПЦР) 
с гибридизационно-флуоресцентной детекцией
«АмплиСенс® Trichomonas vaginalis-FL»


--- стр. 4 ---
/)Г
ОГЛАВЛЕНИЕ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ...........................................................................................................3
НАЗНАЧЕНИЕ...............................................................................................................................3
ПРИНЦИП МЕТОДА....................................................................................... 3
ВАРИАНТЫ И ФОРМЫ ВЫПУСКА НАБОРА РЕАГЕНТОВ .............................................4
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ.................................................................................6
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ...............................................................................................6
ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ МАТЕРИАЛЫ И ОБОРУДОВАНИЕ................................................7
ВЗЯТИЕ, ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ И ХРАНЕНИЕ ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛА. 9
ВАРИАНТ FEP............................................................................................................................10
СОСТАВ..................................................................................................................................10
ПРОВЕДЕНИЕ ПЦР-ИССЛЕДОВАНИЯ ...........................................................................11
ЭКСТРАКЦИЯ ДНК ИЗ ИССЛЕДУЕМЫХ ОБРАЗЦОВ.................................................12
ПРОВЕДЕНИЕ АМПЛИФИКАЦИИ И ФЛУОРЕСЦЕНТНОЙ ДЕТЕКЦИИ ПО
«КОНЕЧНОЙ ТОЧКЕ»..........................................................................................................12
А. Подготовка пробирок для проведения амплификации .............................12
Б. Проведение амплификации.................................................................................13
ФЛУОРЕСЦЕНТНАЯ ДЕТЕКЦИЯ ПРОДУКТОВ АМПЛИФИКАЦИИ .........................14
ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ..................................................................................14
ВАРИАНТ FRT............................................................................................................................16
СОСТАВ...................................................................................................................................16
ПРОВЕДЕНИЕ ПЦР-ИССЛЕДОВАНИЯ ...........................................................................18
ЭКСТРАКЦИЯ ДНК ИЗ ИССЛЕДУЕМЫХ ОБРАЗЦОВ.................................................18
ПРОВЕДЕНИЕ АМПЛИФИКАЦИИ С ДЕТЕКЦИЕЙ В РЕЖИМЕ «РЕАЛЬНОГО
ВРЕМЕНИ»..............................................................................................................................18
А. Подготовка пробирок для проведения ампификации ..............................18
Б. Проведение амплификации с детекцией в режиме «реального времени». 19
АНАЛИЗ И ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ............................................................*... 20
СРОК ГОДНОСТИ. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ И ХРАНЕНИЯ .....................23
с


--- стр. 5 ---
список СОКРАЩЕНИИ
В настоящей инструкции применяются следующие сокращения и обозначения:
BKO-FL - внутренний контрольный образец для наборов с 
гибридизационно-флуоресцентной детекцией
ИППП - инфекции, передаваемые половым путем
ОКО - отрицательный контрольный образец
ПКО - положительный контрольный образец
ПЦР - полимеразная цепная реакция
FEP - флуоресцентная детекция по «конечной точке»
FRT - флуоресцентная детекция в режиме «реального времени»
ФГУН ЦНИИЭ 
Роспотребнадзора
- Федеральное государственное учреждение науки 
«Центральный научно-исследовательский институт 
эпидемиологии» Федеральной службы по надзору в сфере 
защиты прав потребителей и благополучия человека
НАЗНАЧЕНИЕ
Набор реагентов «АмплиСенс® T richom onas vaginalis-FL»  предназначен для 
выявления ДНК Trichomonas vaginalis  путем амплификации специфического 
фрагмента ДНК данного микроорганизма методом ПЦР с гибридизационно- 
флуоресцентной детекцией продуктов амплификации. Материалом для проведения 
ПЦР служат пробы ДНК, полученные путем экстракции ДНК из соскобного 
отделяемого слизистых оболочек урогенитального тракта, образцов мочи, секрета 
предстательной железы человека. Для выделения ДНК используются наборы 
реагентов, рекомендованные ФГУН ЦНИИЭ Роспотребнадзора.
ВНИМАНИЕ! Результаты ПЦР-исследования учитываются в комплексной 
диагностике заболевания.
ПРИНЦИП МЕТОДА
Выявление Trichomonas vaginalis методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с 
гибридизационно-флуоресцентной детекцией включает в себя три этапа: экстракцию 
(выделение) ДНК из образцов клинического материала, амплификацию фрагмента 
ДНК данного микроорганизма и гибридизационно-флуоресцентную детекцию, которая 
производится либо непосредственно в ходе ПЦР (вариант FRT), либо после ее 
завершения (вариант FEP). Экстракция ДНК из клинического материала лроводится в 
присутствии внутреннего контрольного образца (BKO-FL), который позволяет 
контролировать выполнение процедуры исследования для каждого образца. Затем с 
полученными пробами ДНК проводится реакция амплификации фрагмента ДНК 
Trichomonas vaginalis при помощи специфичных к нему праймеров и фермента Taq- 
полимеразы. В составе реакционной смеси присутствуют флуоресцентно-меченые 
олигонуклеотидные зонды, которые гибридизуются с комплементарным участком


--- стр. 7 ---
/24
Формы комплектации 4, 5, 6 и 7 предназначены для проведения полного ПЦР- 
исследования, включая взятие клинического материала, экстракцию (выделение) из него 
ДНК и амплификацию ДНК Trichomonas vaginalis с гибридизационно-флуоресцентной 
детекцией по «конечной точке».
Вариант FRT
Набор реагентов выпускается в 7 формах комплектации:
Форма 1 включает комплект реагентов «ПЦР-комплект» вариант FRT.
Форма 2 включает комплект реагентов «ПЦР-комплект» вариант FRT-100 F.
Форма 3 включает комплект реагентов «ПЦР-комплект» вариант FRT-1000 F.
Форма 4 включает комплекты реагентов «ПЦР-комплект» вариант FRT, «ДНК-сорб- 
АМ» вариант 100, «Транспортную среду с муколитиком (ТСМ)» 100 пробирок по 
0,5 мл.
Форма 5 включает комплекты реагентов «ПЦР-комплект» вариант FRT, «ДНК-сорб- 
АМ» вариант 100, «Транспортную среду для мазков» 100 пробирок по 0,5 мл.
Форма 6 включает комплекты реагентов «ПЦР-комплект» вариант FRT-100 F, «ДНК- 
сорб-АМ» вариант 100, «Транспортную среду с муколитиком (ТСМ)» 100 пробирок по 
0,5 мл.
Форма 7 включает комплекты реагентов «ПЦР-комплект» вариант FRT-100 F, «ДНК- 
сорб-АМ» вариант 100, «Транспортную среду для мазков» 100 пробирок по 0,5 мл.
Формы комплектации 1, 2 и 3 предназначены для проведения ПЦР-амплификации 
ДНК Trichomonas vaginalis с гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме 
«реального времени». Для проведения полного ПЦР-исследования необходимо 
использовать комплекты реагентов для экстракции ДНК, рекомендованные ФГУН 
ЦНИИЭ Роспотребнадзора.
Формы комплектации 4, 5, 6 и 7 предназначены для проведения полного ПЦР- 
исследования, включая взятие клинического материала, экстракцию (выделение) из него 
ДНК и амплификацию ДНК Trichomonas vaginalis с гибридизационно-флуоресцентной 
детекцией в режиме «реального времени».
h


--- стр. 8 ---
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ  
Аналитическая чувствительность
Вид
клинического
материала
Транспортная
среда
Набор для  
экстракции  
ДНК
Комплект для  
амплификации  
и детекции
Аналитическая
чувствительность
Соскобное
отделяемое
слизистых
оболочек
урогенитального
тракта
«Транспортная 
среда для 
мазков» или 
«Транспортная 
среда с 
муколитиком 
(ТСМ)»
«ДНК-сорб-
АМ»
«ПЦР- 
комплект» 
варианты FEP 
и FRT
5x10^ ГЭ/мл^
Моча^ - «ДНК-сорб-
АМ»
«ПЦР- 
комплект» 
варианты FEP 
и FRT
1x10^ ГЭ/мл
Аналитическая специфичность
Отсутствовали неспецифические реакции при тестировании образцов ДНК 
человека и панели образцов ДНК следующих микроорганизмов; Gardnerella vaginalis; 
Lactobacillus spp.; Escherichia coli; Staphylococcus aureus; Streptococcus pyogenes;  
Streptococcus agalactiae; Candida albicans; Mycoplasma hominis; Ureaplasma  
urealyticum; Ureaplasma parvum; Neisseria flava; Neisseria subfiava; Neisseria sicca;  
Neisseria mucosa; Neisseria gonorrhoeae; Chlamydia trachomatis; Treponema pallidum;  
Toxoplasma gondii; HSV 1  и 2 типа; CMV; HPV.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Работа должна проводиться в лаборатории, выполняющей молекулярно­
биологические (ПЦР) исследования клинического материала на наличие 
возбудителей инфекционных болезней, с соблюдением санитарно-эпидемических 
правил СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III -  IV групп 
патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней», СП 2.1.7.728- 
99 «Правила сбора, хранения и удаления отходов лечебно-профилактических 
учреждений» и методических указаний МУ 1.3.1888-04 «Организация работы при
исследованиях методом ПЦР материала, инфицированного патогенными
¥
биологическими агентами III -  IV групп патогенности».
При работе всегда следует выполнять следующие требования:
- Использовать наконечники с фильтрами для автоматических дозаторов. Для 
каждой процедуры использовать новый наконечник.
‘ Количество геномных эквивалентов микроорганизма (ГЭ) в 1  мл образца клинического материала, 
помещенного в указанную транспортную среду.
‘ Требуется предобработка образцов мочи.


--- стр. 9 ---
- Следует рассматривать образцы как потенциально вызывающие инфекцию и 
хранить в биологическом кабинете в соответствии с СП 1.3.2322-08 
«Безопасность работы с микроорганизмами III -  IV групп патогенности 
(опасности) и возбудителями паразитарных болезней».
- Убирать и дезинфицировать разлитые образцы или реактивы, используя 
дезинфицирующие средства в соответствии СП 1.3.2322-08 «Безопасность 
работы с микроорганизмами III - IV групп патогенности (опасности) и 
возбудителями паразитарных болезней».
- Уничтожать образцы и неиспользованные реактивы в соответствии с 
требованиями СП 2.1.7.728-99 «Правила сбора, хранения и удаления отходов 
лечебно-профилактических учреждений».
ВНИМАНИЕ! При удалении отходов после амплификации и детекции - пробирок, 
содержащих продукты ПЦР, после амплификации, недопустимо их открывание и 
разбрызгивание содержимого, поскольку это может привести к контаминации 
продуктами амплификации лабораторной зоны, оборудования и реагентов.
- Применять набор строго по назначению, согласно данной инструкции.
- Допускать к работе с набором только специально обученный персонал.
- Не использовать набор по истечении срока годности.
- Использовать одноразовые перчатки, лабораторные халаты, защищать глаза во»
время работы с образцами и реактивами. Тщательно вымыть руки по окончании 
работы.
- Избегать контакта с кожей, глазами и слизистой оболочкой. При контакте 
немедленно промыть пораженное место водой и обратиться за медицинской 
помощью.
- Спецификация по безопасности материалов (MSDS -  material safety data sheet) 
доступна по запросу.
- В лаборатории нельзя есть, пить, курить, использовать косметику, снимать или 
надевать контактные линзы.
ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ МАТЕРИАЛЫ И ОБОРУДОВАНИЕ
1. Транспортная среда - «Транспортная среда с муколитиком (ТСМ)» (ТУ 9398-098- 
01897593-2009) или «Транспортная среда для мазков» (ТУ 9398-088-01897593- 
2009), или другие рекомендованные ФГУН ЦНИИЭ Роспотребнадзора -  при 
работе с формами комплектации 1-3 (вариант FEP и вариант FRT).
2. Комплект реагентов для выделения ДНК - «ДНК-сорб-АМ» (ТУ 9398-036-01897593- 
2009) или другие рекомендованные ФГУН ЦНИИЭ Роспотребнадзора -  при работе
к


--- стр. 10 ---
I '2?
С формами комплектации 1-3 (вариант FEP и вариант FRT).
3. Дополнительные материалы и оборудование для экстракции ДНК - согласно 
инструкции к комплекту реагентов для экстракции ДНК.
4. Бокс абактериальной воздушной среды (ПЦР-бокс).
5. Центрифуга/вортекс.
6. Автоматические дозаторы переменного объема (от 5 до 20 мкл, при работе с «ПЦР- 
комплект» вариант FRT-100 F - от 5 до 20 мкл и от 20 до 200 мкл).
7. Одноразовые наконечники с фильтром до 100 мкл в штативах.
8. Штативы для микропробирок объемом 0,2 мл или 0,5 мл (в соответствии с 
используемыми комплектами реагентов). Холодильник от 2 до 8 °С с морозильной 
камерой не выше минус 16 °С для выделенных проб ДНК.
9. Отдельный халат, шапочки, обувь и одноразовые перчатки по МУ 1.3.1888-04.
10. Емкость для сброса наконечников.
При работе с «nUP-комплектом» вариант FEP:
11. Программируемый амплификатор (например, «Терцик» («ДНК-Технология», Россия), 
«Gradient Palm Cycler» («Corbett Research», Австралия), «MAXYGENE» («Ахудеп», 
США), «GeneAmp PCR System 2700» («Applied Biosystems») или аналогичные).
12. Флуоресцентный ПЦР-детектор (например, «АЛА-1/4» («BioSan», Латвия), «Джин» 
(«ДНК-Технология», Россия) или аналогичные). >
13. Пластиковая пипетка для минерального масла (для работы с «ПЦР-комплектом» 
вариант FEP-1000).
При работе с «nUP-комплектом» вариант FRT:
14. Программируемый амплификатор с системой детекции флуоресцентного сигнала 
в режиме «реального времени» - при работе с «ПЦР-комплект» вариант FRT 
(например, «Rotor-Gene» 3000/6000 («Corbett Research», Австралия), «Rotor- 
Gene Q» («Qiagen», Германия), «iQ5» («Bio-Rad», США), «МхЗОООР» («Stratagene», 
США), «ДТ-96» («ДНК-Технология», Россия) или аналогичные).
15. Одноразовые полипропиленовые микропробирки для ПЦР объемом 0,2 мл или 
0,1 мл - при работе с «ПЦР-комплект» вариант FRT-100 F:
а) тонкостенные пробирки для ПЦР объемом 0,2 мл с выпуклой крышкой 
(например, «Ахудеп», США) - при использовании прибора планшетного типа;
б) тонкостенные пробирки для ПЦР объемом 0,2 мл с плоской крышкой 
(например, «Ахудеп», США), или пробирки для ПЦР к «Rotor-Gene», объемом 
0,1 мл в стрипах по 4 шт. с крышками (например, «Corbett Research», 
Австралия; «Qiagen», Германия) - при использовании прибора роторного типа.