Набор реагентов для выявления ДНК Mycoplasma pneumoniae и Chlamydophila pneumoniae в… — инструкция и характеристики, РУ ФСР 2012/13957 | TenderMatch

Набор реагентов для выявления ДНК Mycoplasma pneumoniae и Chlamydophila pneumoniae в биологическом материале методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с гибридизационно-флуоресцентной детекцией "АмплиСенс® Mycoplasma pneumoniae/Chlamydophila pneumoniae-FL" по ТУ 9398-176-01897593-2012 — инструкция и характеристики

РУ: ФСР 2012/13957 от 12.10.2012 · класс риска 2б

Производитель: ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора (Россия)

Вид изделия: Множественные бактерии респираторных заболеваний нуклеиновые кислоты ИВД, набор, анализ нуклеиновых кислот

В госконтрактах 44-ФЗ: 216 контрактов, медианная цена за единицу 22 567 ₽.

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ

Сейчас 3 закупки, где это изделие полностью проходит по требованиям хотя бы в одной позиции.

ЗакупкаОкончание подачиНач. цена
Поставка реагентов для проведения исследований клинического материала методом ПЦР (лот № 8 СЦБЛ)
№ 0372200026226000291 · САНКТ-ПЕТЕРБУРГСКОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ЗДРАВООХРАНЕНИЯ "ДЕТСКАЯ ГОРОДСКАЯ БОЛЬНИЦА № 22" · г. Санкт-Петербург
10.11.20261 499 000 ₽
Электронный аукцион на поставку расходных материалов для молекулярно-биологических исследований (Лот 2-4, 399-зк)
№ 0373200011426001825 · ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ЗДРАВООХРАНЕНИЯ ГОРОДА МОСКВЫ "ГОРОДСКАЯ КЛИНИЧЕСКАЯ БОЛЬНИЦА № 67 ИМЕНИ Л. А. ВОРОХОБОВА ДЕПАРТАМЕНТА ЗДРАВООХРАНЕНИЯ ГОРОДА МОСКВЫ" · г. Москва
13.11.20261 273 875 ₽
Поставка медицинских изделий (реагенты)
№ 0818500000826007818 · ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ЗДРАВООХРАНЕНИЯ "ЦЕНТР ОХРАНЫ МАТЕРИНСТВА И ДЕТСТВА ГОРОДА СОЧИ" МИНИСТЕРСТВА ЗДРАВООХРАНЕНИЯ КРАСНОДАРСКОГО КРАЯ · Краснодарский край
16.11.20261 500 000 ₽
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно

Текст инструкции: технические характеристики

--- стр. 3 ---
с п и с о к  СО КРАЩ ЕНИ Й
В настоящ ей инструкции прим еняю тся следую щ ие сокращ ения и обозначения:
в- - Отри ц ате л ьн ы й  контроль экстракции (выделения) Д Н К
Д Н К - дезоксирибонуклеиновая кислота
к+ - Полож ительны й контроль П Ц Р
к- - О три ц ате л ьны й  контроль П Ц Р
око - О три ц ате л ьны й  контрольный образец
пко - Полож ительны й контрольный образе ц
П Ц Р - П ол и м е разн ая цепная реакция
Ф Б У Н  Ц Н И И
Эпидем иологии
Роспотребн ад зора
- ф е д ерал ьн ое бюдж етное учреж дение науки «Централ ьны й 
научно-исследовательский институт эпидем иологии» 
Ф едеральной службы по надзору в сф ер е защиты прав 
потре би те л е й  и благопол учия человека
F E P - Ф л уоресцен тн ая детекция по «конечной точке»
F R T - Ф л уоресцен тн ая детекция в режиме «р е а л ь н о го  врем ени»
НАЗНАЧЕНИЕ
Н а б о р  р е аге н то в  «АмплиСенс® Mycoplasma pneumoniae I Chlamydophila 
pneumoniae-fL» предназначен для вы явления Д Н К  M y c o p la s m a  p n e u m o n ia e и  
C h la m y d o p h ila  p n e u m o n ia e в биологическом  м атериал е методом полимеразной 
цепной реакции ( П Ц Р )  с гибрид изац ионно-ф л уоресц ентной детекцией.
М атери ал ом  для проведения П Ц Р  служ ат пробы Д Н К , полученны е из образцов 
следую щ его м ате р и ал а: мокроты (либо аспи ратов из т р а хе и ), промывных вод 
бронхов, бронхо-ал ьвеолярного лаваж а, мазков со слизистой нижнего носового хода 
и задней стенки ротогл отки , секционного м атери ал а.
Н а б о р  также может использоваться при изучении роли M y c o p la sm a  p n e u m o n ia e и  
C h la m y d o p h ila  p n e u m o n ia e в патогенезе неинф екционны х хронических заболеваний, 
наприм ер, серд ечно - сосудистой системы путем обнаруж ения Д Н К  M yc o p la sm a 
p n e u m o n ia e и C h la m y d o p h ila  p n e u m o n ia e в цельной крови при использовании для 
экстракции Д Н К  комплекта р е аге н тов « Р И Б О - с о р б » .
ВНИМАНИЕ! Результаты  П Ц Р -и с с л е д о в а н и я  учиты ваю тся в комплексной 
диагностике з а б о л е в а н и я \
ПРИНЦИП МЕТОДА
Вы явление Д Н К  M y c o p la s m a  p n e u m o n ia e и C h la m y d o p h ila  p n e u m o n ia e методом 
полимеразной цепной реакции ( П Ц Р )  с гибрид изационно-ф луоресцентной детекцией 
включает в себя два этап а: экстракцию Д Н К  из образцов биологического м атериала, 
амплификацию участков генов « p u ta tiv e  lip o p ro tein »  M y c o p la sm a  p n e u m o n ia e  и  
« о т р А »  C h la m y d o p h ila  p n e u m o n ia e  в присутствии ф луоресцентно-м ечены х 
олигонуклеотидны х зондов и гибрид изационно-ф л уоресцентную  детекцию, которая
в соответствии с Д ирективой Европейского Союза 98/79/ЕС


--- стр. 4 ---
производится л и бо непосред ственно в ходе П Ц Р  (ф о р м ат F R T ) , либо после ее 
заверш ения (ф о р м ат F E P ) .  В анализе используется принцип эндогенного внутреннего 
контроля - ам плиф икация участка гена протром би на человека, что позволяет 
контролировать присутствие в образце клеток и Д Н К  человека в достаточном 
количестве. Таким  о б р а з о м , эндогенный внутренний контроль позволяет не только 
контролировать этапы П Ц Р -и с с л е д о в а н и я  (экстракцию Д Н К  и проведение П Ц Р ) , но и  
оценивать адекватность взятия м атериал а и его хр ан ен и я.
ФОРМАТЫ И ФОРМЫ ВЫПУСКА НАБОРА РЕАГЕНТОВ 
Набор реагентов выпускается в 2 форматах.
Формат FEP
Н а б о р  ре аге нтов вы пускается в 7  ф о р м а х комплектации:
Форма 1  вклю чает комплекты ре аге нтов « Р И Б О - п р е п »  вари ант 50, «П Ц Р -к о м п л е к т » 
вариант F E P  (пробирки 0 ,5  мл);
Форма 2 вклю чает комплекты р е аге н тов « Р И Б О - п р е п »  вариант 50, «П Ц Р -к о м п л е к т » 
вариант F E P  (пробирки 0 ,2  мл);
Форма 3 включает комплекты р е аге н тов « Р И Б О - с о р б »  вариант 50, «П Ц Р -к о м п л е к т » 
вариант F E P  (пробирки 0 ,5  мл);
Форма 4 включает комплекты р е аге н тов « Р И Б О - с о р б »  вариант 50, «П Ц Р -к о м п л е к т » 
вариант F E P  (пробирки 0 ,2  мл);
Форма 5 вклю чает комплект ре аге нтов « П Ц Р -к о м п л е к т »  вариант F E P  (пробирки
0,5 мл);
Форма 6 вкпю чает комплект ре аге нтов «П Ц Р -к о м п л е к т »  вариант F E P  (пробирки
0 ,2  мл);
Форма 7 вклю чает наборы  р е аге н тов оп том , расф асованны е по отдельным 
реагентам , с маркировкой р е аге н тов на их оптовой ф асовке.
Формы комплектации 1 , 2 предназначены  для проведения полного П Ц Р -  
исследования, вкпю чаю щ его экстракцию Д Н К  из биологического м атериала методом 
преципитации и амплиф икацию  Д Н К  с гибрид изационно-ф луоресцентной детекцией 
по «конечной то ч к е »
Формы комплектации 3, 4 предназначены для проведения полного П Ц Р - 
исследования, вклю чаю щ его экстракцию Д Н К  из биологического м атериала методом 
сорбции на силикагеле и амплиф икацию  Д Н К  с гибридизационно-ф луоресцентной 
детекцией по «конеч ной  то ч к е »
Формы комплектации 5, 6 предназначены для проведения амплификации Д Н К  с 
гибрид изационно-ф л уоресцентной детекцией по «конечной то ч к е ». Для проведения
полного П Ц Р -и с с л е д о в а н и я  необход им о использовать комплекты реагентов для
4


--- стр. 5 ---
экстракции Д Н К / Р Н К , рекомендованны е Ф Б У Н  Ц Н И И  Эпидемиологии 
Ро спотре бн ад зора.
Форма комплектации 7  предназначена для производственны х целей для 
последующей маркировки на языке заказчика и комплектации по наборам . 
В Н И М А Н И Е !  Ф орм а комплектации 7  используется только в соответствии с 
реглам ентом , утвержденны м Ф Б У Н  Ц Н И И  Эпид ем иологии Ро спотребн ад зора.
Ф о р м а т  F R T
Н а б о р  ре аге нтов вы пускается в 7  ф о р м а х комплектации:
Ф о р м а  1 вклю чает комплекты ре аге нтов « Р И Б О - с о р б »  вариант 50, «П Ц Р -к о м п л е к т » 
вариант F R T  (пробирки 0 ,2  мл в соответствии с типом ам плиф икатора).
Ф о р м а  2 вклю чает комплекты ре аге нтов « Р И Б О - п р е п »  вари ант 50, «П Ц Р -к о м п л е к т » 
вариант F R T  (пробирки 0 ,2  мл в соответствии с типом ам плиф икатора).
Ф о р м а  3 вклю чает комплекты ре аге нтов « Р И Б О - с о р б »  вариант 10 0 , « П Ц Р -  
комплект» вари ант F R T - 1 0 0  F .
Ф о р м а  4  вклю чает комплекты реагентов « Р И Б О - п р е п »  вариант 10 0 , « П Ц Р -  
комплект» вари ант F R T - 1 0 0  F .
Ф о р м а  5 включает комплект р е аге н тов «П Ц Р -к о м п л е к т »  вариант F R T  (пробирки 0,2 
мл в соответствии с типом  ам плиф икатора)
Ф о р м а  6 вклю чает комплект р е аге н тов « П Ц Р -к о м п л е к т »  вариант F R T - 1 0 0  F .
Ф о р м а  7  вклю чает наборы  ре аге нтов оп том , расф асованны е по отдельным 
реагентам , с маркировкой р е аге н то в  на их оптовой ф асовке.
Формы комплектации 1 , 2 предназначены  для проведения полного П Ц Р - 
исследования, включающего экстракцию Д Н К  из биологического материала методом 
преципитации и амплиф икацию  Д Н К  с гибрид изационно-ф луоресцентной детекцией 
в режиме «р е а л ь н о го  в р е м е н и ».
Формы комплектации 3, 4 предназначены  для проведения полного П Ц Р - 
исследования, включающего экстракцию Д Н К  из биологического материала методом 
сорбции на силикагеле и амплификацию Д Н К  с гибридизационно-ф луоресцентной 
детекцией в режиме «р е а л ь н о го  в р е м е н и ».
Формы комплектации 5, 6 предназначены для проведения амплификации Д Н К  с 
гибрид изационно-ф л уоресцентной детекцией в режиме «р е а л ь н о го  врем ени ». Для 
проведения полного П Ц Р -и с с л е д о в а н и я  необход им о использовать комплекты 
реагентов для экстракции Д Н К / Р Н К , рекомендованны е Ф Б У Н  Ц Н И И  Эпидемиологии 
Ро спотре бн ад зора.
Форма комплектации 7  предназначена для производственны х целей для 
последующей маркировки на языке заказчика и комплектации по наборам .


--- стр. 6 ---
ВНИМАНИЕ! Ф орма комплектации 7  используется только в соответствии с 
реглам ентом , утвержденны м Ф Б У Н  Ц Н И И  Эпид ем иологии Роспотребн ад зора.
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ 
Аналитическая чувствительность
Вид 
клиническог 
о материала
Возбудител
ь
Объем 
материал 
а мкл
Комплект для 
экстракции 
ДНК/РНК
Комплект для 
амплификаци 
и и детекции
Аналитическая 
чувствительно 
сть ГЭ/мл ^
тСлизистая
нижнего
носового
хода и
задней
стенки
ротоглотки и
мокроты,
обработаннй
муколизином
«Р И Б О -с о р б »
« Р И Б О -п р е п »
M ycoplasm a
pn eu m o n ia e,
C hlam ydophil
а
p n eu m o n ia e
N u c liS EN S
e asyM AG
« П Ц Р -
комплект»
вариант F E P
100 «Р И Б О -с о р б »
« Р И Б О -п р е п »
N u c liS EN S
ea syM A G
« П Ц Р - 
комплект» 
вариант F R T , 
вариант F R T -  
100 F
1x10
5x10"
5 x10'
IxlO'"
5x10"
5 x10"
Аналитическая специфичность
Н а б о р  р е аге н то в  обн ар уж и вает ф рагм енты  Д Н К  заявленны х возбудителей. 
Аналитическая специф ичность н аб ор а р е аге н тов доказана при исследовании Д Н К  
следую щих м икроорганизм ов: S tr e p to c o c c u s s p p ., M o ra xella  catarrhalis, S ta p h ilo c o c c u s  
a u re u s, S ta p h ilo c o c c u s  sa p ro p h itic u s, H a e m o p h ilu s  in flu e n z a e , P r o te u s  mirabilis,  
K leb siella  p n e u m o n ia e , P s e u d o m o n a s  a e ru g in o sa , M y c o b a c te ria  tu b e rc u lo sis 2 7 2 9 4  105, 
N e isse ria  flava. N e is s e r ia  sic c a , N e is s e r ia  m u c o s a , E. coli A T C C , N C T C , E n te ro c o c c u s  
fa eca lis, L e g io n e lla  p n e u m o p h ila . S h ig e lla  fle x n e h , S h ig e lla  s o n n e i. S a lm o n e lla  enteritidis,  
Y ersin ia  en tero co llitica , B o rd e te lla  p e r tu s s is , B o rd e te lla  p a r a p e rtu s s is , B o rd etella  
b ro n c h ise p tic a , a также геном ной Д Н К  человека. П оказано отсутствие активности 
компонентов н а б о р а  в отнош ении родственны х м икроорганизм ов: C h la m yd o p h ila 
arginini, C h la m y d o p h ila  p e c o ru m . C h la m y d ia  tra c h o m a tis, C h la m yd ia  m uridarum .  
C h la m yd ia  su is, C h la m y d o p h ila  a b o rtu s, C h la m y d o p h ila  p sitta ci, M y c o p la sm a  arginini,  
M y c o p la sm a  m y c o id e s (подвид c a p h ), M y c o p la s m a  hyo rin is, M y c o p la s m a  bo vig en ita liu m . 
M y c o p la sm a  b o v in e , M y c o p la s m a  sa liva riu m . M y c o p la s m a  fa u ciu m . M yc o p la sm a  
g a llisep ticu m . M y c o p la s m a  s in o v ia e , M y c o p la s m a  g e n ita liu m , M y c o p la s m a  h o m in is.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Р а б о та  должна проводиться в л а б о р а то р и и , выполняющей молекулярно­
биологические ( П Ц Р )  исследования клинического м атериала на наличие 
возбудителей инф екционны х бол езней, с соблю дением санитарно-эпидемических
■  Чувствительность выражается в геномных эквивалентах (ГЭ) возбудителя в 1  мл пробы.


--- стр. 7 ---
правил С П  1 .3 .2 3 2 2 -0 8  «Б е з о п а с н о сть  работы  с микроорганизмами III-1V  групп 
патогенности (опасности) и возбудителями паразитарны х б о л е з н е й », С а н П и Н  
2 .1 .7 .2 7 9 0 - 1 0  «Сан и тарн о-эп и д ем и ол оги че ски е треб о ван и я к  обращ ению  с 
медицинскими о тх о д а м и » и методических указаний М У  1.3 .2 5 6 9 -0 9  «О ргани зац и я 
работы  л а б о р а то р и й , использую щ их методы амплиф икации нуклеиновы х кислот при 
р аботе с м атери ал ом , содержащ им микроорганизмы I - I V  групп патоген н о сти ».
При работе всегда следует выполнять следующие требования:
-  С л е д уе т рассм атривать исследуемые образцы  как инф екционно-опасны е, 
организовы вать р а б о ту  и хр ан ен и е в соответствии с С П  1.3 .2 3 2 2 -0 8  
«Б е з о п а сн о сть  работы  с микроорганизмами II I-IV  групп патогенности 
(опасности) и возбудителями паразитарны х б о л е з н е й ».
-  У б и р а ть  и дезинф ицировать разлитые образцы  или реактивы, используя 
дезинф ицирую щ ие сред ства в соответствии С П  1 .3 .2 3 2 2 -0 8  «Безопасность 
работы  с микроорганизм ам и III-IV  групп патогенности (опасности) и  
возбудителями паразитарны х б о л е з н е й ».
-  Лабораторны й процесс должен быть однонаправленны м. Анализ проводится в 
отдельных помещ ениях (зонах). Р а б о ту  следует начинать в Зоне Выделения, 
продолжать в З оне Амплификации и Детекции. Н е  возвращать образцы, 
оборудование и реактивы в зону, в которой была проведена предыдущая стадия 
процесса.
-  Неиспользованны е реактивы , реактивы с истекшим сроком годности, а также 
использованны е реактивы следует удалять в соответствии с требованиям и 
С а н П и Н  2 .1 .7 .2 7 9 0 - 1 0  «С ан и тарн о-эпи д ем и ол оги че ски е требования к  
обращ ению  с медицинскими о тхо д а м и ».
ВНИМАНИЕ! П р и  уд алении отход ов после амплиф икации (пробирок, содержащих 
продукты П Ц Р )  недопустим о откры вание пробирок и разбры згивание содержимого, 
поскольку это может привести к контаминации продуктами П Ц Р  лабораторной зоны, 
оборуд ования и р е а ге н то в .
-  Испол ьзовать и менять при каждой операции одноразовы е наконечники для 
автом атических д озаторов с ф ильтром . О д н о р азо в ую  пластиковую посуду 
(пробирки, наконечники) необход им о сбрасы вать в специальный контейнер, 
содержащий дезинф ицирую щ ий 0 ,2  %  раствор Д П -2 Т .
-  П о в е р хн о сти  сто л о в , а также пом ещ ения, в которы х проводится постановка 
П Ц Р , до начал а и после заверш ения р а б о т необходим о подвергать 
ул ьтр а ф и о л е то в о м у облучению  в течение 30 мин.
-  Прим енять набор стр ого по назначению , согл асно данной инструкции.
7


--- стр. 32 ---
м икроцентриф уге.
1 3 .О с то р о ж н о , не захваты вая осадок, о то бр ать надосадочную  жидкость, используя 
вакуумный отсасы вател ь и отдельный наконечник на 10 мкл для каждой пробы.
1 4 .Пом естить пробирки в тер м остат с те м п е ратуро й  65 “С на 5 мин для 
подсуш ивания осадка (при этом крышки пробирок должны быть открыты).
15 .Д о б а в и ть  в пробирки по 50 мкл РНК-буфера. П е р е м е ш а ть  на вортексе. 
П ом естить в те р м о с та т с тем п е р атур о й  65 °С на 5 мин, периодически встряхивая 
на вортексе.
16 .П р о ц е н тр и ф уги р о в а ть  пробирки при 13 тыс об/мин в течение 1  мин на 
м икроцентриф уге. Н ад осад очная жидкость содержит очищ енную  Д Н К . Пробы  
готовы к  постановке П Ц Р .
О ч и щ е нная Д Н К  может храниться в течение 1 нед при те м п е ратуре от 2 до 8 ° С , в 
течение 1 года при те м п е р а тур е  не выше минус 16  ° С , бол ее длительно при 
тем пературе не выше минус 68 ° С .
32


--- стр. 33 ---
ПРИЛОЖЕНИЕ 3. Экстракция ДНК из проб при использовании автоматической
станции NucliSENS easyMAG
Вариант 1. Экстракция ДНК с лизисом образца вне прибора
Данный метод вы деления позволяет снизить расход  б уф е р а  для лизиса NucliSens и
предпочтительнее при р а б о те  с образцам и клинического м атери ал а, содержащего
сгустки (м окрота, аспираты ).
Порядок работы;
1 . Включить прибор N u c liS E N S  e a s y M A G  и подготовить е го  к  выделению Д Н К , 
следуя инструкции к при бо ру.
2. В окне для ввода исследуемы х образцов ввести для каждого образца следующие 
параметры : название о б р а з ц а , м атериал {M atrix)  для выделения Д Н К  (установить 
O ther),  объ ем  образц а {v o lu m e ) - 0 ,1 ml, объ ем  элюции {E luate) - 25 mkl, тип 
образца {Т у р е ) - L y s e d , очеред ность вьщ еления Д Н К  в образцах {priority) -  
norm al.
3. Создать новый протокол вьщ еления Д Н К  и сохранить его . В  протоколе указать, 
что лизис и инкубация образц ов происходит вне п ри б о ра: O n -b o a rd  L y sis Buffer  
D is p e n sin g  - N o , O n -b o a r d  L y s is  In cu b a tio n  - N o.
4 . П е рен ести  таб л и ц у образц о в в созданный протокол.
5. О т о б р а т ь  н е обхо д и м о е количество специализированны х одноразовы х пробирок, 
предназначенны х для выделения Д Н К  в приборе N u c liS E N S  e a s y M A G , (включая 
отрицательны й контроль вы деления). Д о бави ть в пробирки по 550 мкл буфера 
для лизиса NucliSens.
ВНИМАНИЕ! П ри  р а б о те  с м атери ал ом , содержащ ем сгустки, лизис 
рекомендуется проводить в пробирках объ ём ом  1 ,5  мл. П о сл е окончания 
инкубации (см. п. 8) след ует провести центриф угирование пробирок при 10 тыс 
об/мин в тече н и е 1 мин на м икроцентриф уге и перенести надосадочную жидкость 
в специализированны е пробирки, предназначенны е для выделения Д Н К  в 
приборе N u c l i S E N S  e a s y M A G .
6. В пробирки с раствором для лизиса внести по 100 мкл подготовленных проб, 
используя наконечники с аэрозольным барьером  и тщ ательно перемешать 
пипетированием . (С л е д у е т  избегать попадания в пробирку сгустков слизи и  
крупных части ц .)
7. В пробирку отр и ц а те л ь н о го  контроля выделения (В-) выделения внести 100 мкл 
ОКО.
33


--- стр. 34 ---
8. Инкуби ровать пробирки в течение 10  мин при комнатной те м п е ратуре .
9. Ресуспеид ировать пробирку с магнитной силикой NucliSens, интенсивно 
перем еш ав на вортексе. Внести в каждую пробирку отдельным наконечником с 
аэрозольным бар ь е р о м  по 25 мкл магнитной силики и тщ ательно перемеш ать 
пипетированием . М агн и тн ая силика должна быть равно м е рно распределена по 
всему о б ъ е м у пробирки.
10 . Загрузить пробирки с образцам и в при бор, установи ть наконечники, запустить 
програм м у выделения Д Н К  с лизисом образцов вне прибора {off  board).
1 1 . П о сл е  окончания выделения Д Н К , извлечь пробирки из при бора.
При  необход им ости хр ан ен и я очищ енны е Д Н К  след ует перенести в стерильные
пробирки в тече ни е 30 мин после экстракции. О ч и щ е н н а я  Д Н К  может храниться в
течение 1 нед при т е м п е р а тур е  от 2 до 8 ° С , в тече ни е 1 года при тем пературе не
выше минус 16  °С , б о л е е  длительно при те м п е р а тур е  не выше минус 68 °С .
Вариант 2. Экстракция ДНК с лизисом образца в приборе.
Порядок работы:
1 . Включить прибор N u c l i S E N S  e a s y M A G  и подготовить его к  выделению Д Н К , 
следуя инструкции к  п ри бо ру.
2. В окне для ввода исследуемы х образцов ввести для каждого образца следующие 
параметры : название о б р а з ц а , м атериал (M atrix)  для выделения Д Н К  (установить 
O ther),  объ ем  образц а (v o lu m e ) -  0 ,1 ml, объ ем  элюции (E lu a te) - 25 mkl, тип 
образца (Туре)  - P rim a ry, очеред ность выделения Д Н К  в образц ах (priority) - 
normal.
3. Создать новый протокол выделения Д Н К  и сохрани ть его . В протоколе указать, 
что лизис и инкубация образц ов происходит в п ри бо ре: O n -b o a rd  L y sis Buffer  
D is p e n s in g  -  Y e s , O n -b o a r d  L y s is  In c u b a tio n  -  Y e s .
4 . П е рен ести  таб л и ц у образц о в в созданный протокол.
5. О т о б р а т ь  не обхо д и м о е количество одноразовы х пробирок, предназначенных для 
выделения Р Н К / Д Н К  в приборе N u c liS E N S  e a s y M A G , (включая отрицательный 
контроль вы деления).
6. В пробирки внести по 100 мкл подготовленных проб, используя наконечники с 
аэрозольным б а р ь е р о м . (С л е д уе т избегать попадания в пробирку сгустков слизи 
и  крупных частиц).
7. В пробирку отр и ц ате л ь н о го  контроля выделения ( В - )  внести 100 мкл ОКО.
8. Загрузить пробирки с образцам и в при бор, установи ть наконечники, запустить
34


--- стр. 35 ---
п р о г р а м м у  в ы д е л е н и я  Д Н К  с  л и з и с о м  о б р а з ц о в  в п р и б о р е  {o n  boarcf).
9. Д о ж д а т ь с я , п ок а а в т о м а т и ч е с к а я  с т а н ц и я  N u c liS E N S  e a s y M A G  н е  о с т а н о в и т 
р а б о т у  в п о л о ж е н и и  I n s t r u m e n t  S t a t e  -  Idle.
Ю .Р е с у с п е н д и р о в а т ь  п р о б и р к у  с  м а г н и т н о й  с и л и к о й  N u c l i S e n s ,  и н т е н с и в н о 
п е р е м е ш а в  н а в о р т е к с е . О ткры ть кры ш ку п р и б о р а  и в к а ж д у ю  п р о б и р к у  в н ес т и 
о т д е л ь н ы м  н а к о н е ч н и к о м  с  а э р о з о л ь н ы м  б а р ь е р о м  п о 2 5  м к л  м а г н и т н о й  с и л и к и 
и т щ а т е л ь н о  п е р е м е ш а т ь  п и п е т и р о в а н и е м . М а гн и тн а я  с и л и к а  д о л ж н а  бы ть 
р а в н о м е р н о  р а с п р е д е л е н а  п о  в с е м у  о б ъ е м у  п р о б и р к и .
1 1 .З а к р ы т ь  кры ш ку п р и б о р а  и п р о д о л ж и т ь  п р о г р а м м у  в ы д е л е н и я  ДНК.
1 2 .П о с л е  о к о н ч а н и я  в ы д е л е н и я  Д Н К , и з в л е ч ь  п р о б и р к и  и з п р и б о р а .
П ри н е о б х о д и м о с т и  х р а н е н и я  о ч и щ е н н ы е  Д Н К  с л е д у е т  п е р е н е с т и  в с т е р и л ь н ы е 
п р о б и р к и  в т е ч е н и е  3 0  м и н  п о с л е  эк стр ак ц и и . О ч и щ е н н а я  Д Н К  м о ж е т  х р а н и т ь ся  в 
т е ч е н и е  1  н е д  при т е м п е р а т у р е  о т  2  д о  8  °С , в т е ч е н и е  1  г о д а  при т е м п е р а т у р е  н е 
в ы ш е  м и н у с  1 6  °С , б о л е е  д л и т е л ь н о  при т е м п е р а т у р е  н е  в ы ш е  м и н у с  6 8  °С.
35