--- стр. 3 ---
ф
ф
Р е а к т и в ы B IO L A B O п р е д н а з н а ч е н ы д л я п р о ф е с с и о н а л ь н о й д и а гн о с т и к и in vitro.
• И с п о л ь з о в а т ь с о о т в е т с т в у ю щ у ю з а щ и т у (з а щ и т н а я о д е ж д а , п е р ч а т к и , о ч к и ),
• Н е п и п е т и р о в а т ь р то м .
• В с л у ч а е к о н т а к т а с к о ж е й и г л а з а м и т щ а т е л ь н о п р о м ы ть п о в р е ж д е н н ы е у ч а с т к и б о л ь ш и м
к о л и ч е с т в о м воды и о б р а т и т ь с я з а м е д и ц и н с к о й п о м о щ ь ю .
• Р е а к т и в ы с о д е р ж а т а з и д н а т р и я {к о н ц е н т р а ц и я < 0 ,1 % ) ко то р ы й м о ж е т в с т у п и ть в р е а к ц и ю с
м е д н ы м и или с в и н ц о в ы м и э л е м е н т а м и т р у б о п р о в о д а . П о с л е у т и л и з а ц и и с м ы ть б о л ь ш и м
к о л и ч е с т в о м воды .
• П а с п о р т б е з о п а с н о с т и х и м и ч е с к о го в е щ е с т в а п р е д о с т а в л я е т с я по з а п р о с у .
• У т и л и з а ц и я о тх о д о в : В с о о т в е т с т в и и с д е й с т в у ю щ и м в с т р а н е з а к о н о д а т е л ь с т в о м .
С о в с е м и п р о б а м и с л е д у е т о б р а щ а т ь с я к а к с п о т е н ц и а л ь н ы м и с т о ч н и к о м и н ф е к ц и и в с о о тв е т с т в и и
с п р и н ц и п а м и д о б р о с о в е с т н о й л а б о р а т о р н о й п р а к т и к и , и с о б л ю д а я с о о т в е т с т в у ю щ и е м ер ы
п р е д о с т о р о ж н о с т и . В с о о т в е т с т в и и с д е й с т в у ю щ и м в с т р а н е з а к о н о д а т е л ь с т в о м .
ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАКТИВОВ
• Ф л а ко н ы R 1 , R 2 , R 4 , R 5 го то в ы к у п о т р е б л е н и ю .
• Ф л а к о н R 3: б ы с т р о д о б а в и т ь к с о д е р ж и м о м у ф л а к о н а с о о т в е т с т в у ю щ е е к о л и ч е с т в о
д е м и н е р а л и з о в а н н о й в оды , у к а з а н н о е н а я р л ы ке .
П е р е д и с п о л ь з о в а н и е м р е а к т и в а о с т о р о ж н о п е р е м е ш а т ь и д о ж д а т ь с я п о л н о го р а с т в о р е н и я
(п р и б л и з и т е л ь н о 2 м и н у ты ).
Ф л а к о н R 3 : Д л я с н я т и я а л ю м и н и е в о й кр ы ш ки н е и с п о л ь з о в а т ь о с т р ы е и н с т р у м е н т ы .
СТАБИЛЬНОСТЬ И ХРАНЕНИЕ
Хранить при температуре 2-8®С, в затемненном месте
• Н е в с к р ы ты е у п а к о в к и с р е а к т и в а м и : го д ны к у п о т р е б л е н и ю д о и с т е ч е н и я с р о к а го д н о с ти ,
у к а з а н н о го н а я р л ы к е .
• П о с л е в с кр ы ти я у п а к о в к и :
Р е а к т и в ы (ф л а к о н ы R 1 , R 2 , R 4 , R 5 ) с т а б и л ь н ы в т е ч е н и е м и н и м у м 6 м е с я ц е в при у с л о в и и
о тс у тс т в и я з а г р я з н е н и я . В о с с т а н о в л е н н ы й с у б с т р а т (ф л а к о н R 3 ) с т а б и л е н в т е ч е н и е м и н и м у м 3 0
д н е й п р и у с л о в и и о т с у т с т в и я з а гр я з н е н и я .
Н е и с п о л ь з о в а т ь р е а к т и в в с л у ч а е п о м у т н е н и я , или е с л и о п т и ч е с к а я п л о т н о с т ь по х о л о с т о м у
р е а к т и в у п р и 4 0 5 нм > 0 ,2 0 0 (с м . § НЕАВТОМАТИЧЕСКАЯ ПРОЦЕДУРА).
Д а н н ы й н а б о р м о ж н о т р а н с п о р т и р о в а т ь в т е ч е н и е м и н и м у м 1 н е д е л и п р и к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е .
ОТБОР ПРОБ И РАБОТА С ПРОБАМИ (2)
Н е г е м о л и з и р о в а н н а я с ы в о р о т к а . О т д е л и т ь о т с гу с т к а в м а к с и м а л ь н о к о р о т к и й с р о к п о с л е с б о р а и
с о о т в е т с т в у ю щ е го а н а л и з а . О к и с л я т ь при p H 4 ,5 - 6 ,2 , д о б а в и в к а п л и и з ф л а к о н а R 5 (С т а б и л и з а т о р )
д л я 1 м л с ы в о р о тки .
А кт и в н о с т ь ки с л о й ф о с ф а т а з ы с т а б и л ь н а в о к и с л е н н о й с ы в о р о т к е в т е ч е н и е :
• 7 д н е й при 2 -8 °С.
ИНТЕРФЕРЕНЦИЯ (2 ) (3 )
О к с а л а т и ф т о р и д ы и н ги б и р у ю т а к т и в н о с т ь ки с л о й ф о с ф а т а з ы .
Билирубин: недооценка свыше 30 мг/л.
Г е м о л и з : а к т и в н о с т ь ки с л о й ф о с ф а т а з ы з а в ы ш е н а ,
А к т и в н о с т ь ки с л о й ф о с ф а т а з ы в с ы в о р о т к е я в л я е т с я л а б и л ь н о й (а к т и в н о с т ь с н и ж а е т с я н а 5 0 % в
т е ч е н и е 8 ч а с о в ).
Б о л е е п о д р о б н ы й о б з о р ф а к т о р о в , о к а з ы в а ю щ и х в л и я н и е н а д а н н о е и с с л е д о в а н и е , п р и в е д е н в
п у б л и к а ц и и Y o u n g D .S ,
НЕОБХОДИМЫЕ МАТЕРИАЛЫ, НЕ ВХОДЯЩИЕ В КОМПЛЕКТ
1. О с н о в н о е л а б о р а т о р н о е о б о р у д о в а н и е д л я м е д и ц и н с к о го а н а л и з а .
2 . Н о р м а л ь н а я и п а т о л о г и ч е с к а я ко н т р о л ь н ы е с ы в о р о тки .
3. Д е м и н е р а л и з о в а н н а я в о д а д л я п р и го т о в л е н и я р е а к т и в а R 3 .
КАЛИБРОВКА
Р е з у л ь т а т ы з а в и с я т о т т о ч н о с т и к а л и б р о в к и п р и б о р а , в р е м е н и т е с т и р о в а н и я , с о о т н о ш е н и я
р е а к т и в /п р о б а , а т а к ж е р е гу л и р о в а н и я т е м п е р а т у р ы .
Р е к о м е н д у е т с я и с п о л ь з о в а т ь т е о р е т и ч е с к и й к а л и б р о в о ч н ы й к о э ф ф и ц и е н т (§ ВЫЧИСЛЕНИЯ) или
к а л и б р а т о р , о т н о с я щ и й с я к с п р а в о ч н о м у м е т о д у и л и м а т е р и а л у .
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
• B IO L A B O E X A T R O L -N (н о р м а л ь н ы е з н а ч е н и я ) R E F 9 5 0 1 0 .
--- стр. 4 ---
• B IO L A B O E X A T R O L -P (п а т о л о г и ч е с к и е з н а ч е н и я ) R E F 9 5 0 1 1 .
• Д р у ги е к о н т р о л ь н ы е с ы в о р о тк и , о т н о с я щ и е с я к т о м у ж е м е т о д у .
• В н е ш н я я п р о г р а м м а к о н т р о л я к а ч е с т в а .
Р е к о м е н д у е т с я в ы п о л н я т ь к о н т р о л ь к а ч е с т в а в с л е д у ю щ и х с л у ч а я х ;
• М и н и м у м о д и н р а з з а ц и кл .
• М и н и м у м о д и н р а з в т е ч е н и е 2 4 ч а с о в .
• П р и з а м е н е ф л а к о н а и л и р е а к т и в а .
• П о с л е о б с л у ж и в а ю щ и х п р о ц е д у р в о т н о ш е н и и п р и б о р а .
Е сл и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й , в ы п о л н и те с л е д у ю щ и е
д е й с тв и я ;
1. П о в т о р и т ь т е с т с и с п о л ь з о в а н и е м т о го ж е к о н т р о л ь н о го р а с т в о р а .
2 . Е с л и к о н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
п р и го т о в ь т е с в е ж у ю к о н т р о л ь н у ю с ы в о р о тк у и п о в то р и т ь т е с т .
3. Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
п р о в е р и ть п а р а м е т р ы а н а л и з а ; д л и н а в ол н ы , т е м п е р а т у р а , о т н о ш е н и е п р о б а /р е а к т и в ,
п р о д о л ж и т е л ь н о с т ь и з м е р е н и я , к а л и б р о в о ч н ы й к о э ф ф и ц и е н т .
4. Е сл и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
и с п о л ь з о в а ть но в ы й ф л а к о н с р е а к т и в о м и п о в то р и т ь т е с т .
5 . Е с л и к о н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
о б р а т и т ь с я в с л у ж б у т е х н и ч е с к о й п о д д е р ж к и B IO L A B O и л и к в а ш е м у м е с т н о м у п р е д с т а в и т е л ю .
ОЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ (2 )
П р о с т а т и ч е с к а я к и с л о а я ф о с ф а т а з а
0 -0 ,6 Е д /л 0 -0 ,0 1 р к а т /л
К а ж д о й л а б о р а т о р и и с л е д у е т у с т а н о в и т ь с в о и с о б с т в е н н ы е д и а п а з о н ы н о р м а л ь н ы х з н а ч е н и й д л я
группы н а с е л е н и я , к о т о р у ю о н а о б с л у ж и в а е т .
ЛИНЕЙНОСТЬ
Т е с т я в л я е т с я л и н е й н ы м д о 8 0 Е д /л ( 1 ,3 3 i j к а т /л ).
Е с л и о п т и ч е с к а я п л о т н о с т ь > 1 ,4 0 0 , р а з б а в и т ь п р о б у с о л я н ы м р а с т в о р о м и в ы п о л н и ть п о в то р н ы й
т е с т , у ч и ты в а я к о э ф ф и ц и е н т р а з б а в л е н и я д л я в ы ч и с л е н и я р е з у л ь т а т а . П р е д е л л и н е й н о с т и
з а в и с и т о т с о о т н о ш е н и я п р о б а /р е а к т и в .
ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
ОБЩАЯ КИСЛАЯ ФОСФАТАЗА
В р а м к а х ц и к л аН и з к и й В ы со ки й М е ж д у ц и к л а м иН и з к и й В ы сокий
п = 20 у р о в е н ь у р о в е н ь п = 4 0 у р о в е н ь у р о в е н ь
С р е д н е е
з н а ч е н и е Е д /л
С р е д н е
к в а д р а т и ч е с к о е
о т к л о н е н и е
Е д /л
9 ,2
0 ,1 3
5 0 ,4
0 ,7 7
С р е д н е е
з н а ч е н и е Е д /л
С р е д н е
к в а д р а т и ч е с к о е
о т к л о н е н и е Р д /л
8 ,9
0 ,3 5
3 4 ,1
1,0
К о э ф ф и ц и е н т
в а р и а ц и и % 1 ,4 1 ,5 К о э ф ф и ц и е н т
в а р и а ц и и % 4 2 ,9
1Р0СТАТИЧЕСКАЯ КИСЛАЯ ФОСФАТАЗА
В р а м к а х ц и к л а
п = 4 0
Н и з ки й
у р о в е н ь
В ы со ки й
у р о в е н ь
М е ж д у ц и к л а м и
п = 4 0
Н и з ки й
у р о в е н ь
В ы сокий
у р о в е н ь
С р е д н е е
з н а ч е н и е Е д /л
С р е д н е
3 ,3 11,8 С р е д н е е з н а ч е н и е
Е д /л
С р е д н е
3 ,0 5 8 ,5 5
к в а д р а т и ч е с к о е
о т к л о н е н и е Е д /л
0,12 0 ,7 0 к в а д р а т и ч е с к о е
о т к л о н е н и е Е д /л
0 ,1 6 0 ,6 7
К о э ф ф и ц и е н т 3 ,6 5 ,9 К о э ф ф и ц и е н т 5,1 7 ,8в а р и а ц и и % в а р и а ц и и %
П р ед ел к о л и ч е с т в е н н о го о п р е д е л е н и я : п р и б л и з и т е л ь н о 0 ,7 Е д /л
Ч у в с т в и т е л ь н о с т ь д л я 1 Е д /л (0 ,0 1 7 ц к а т /п ); п р и б л и з и т е л ь н о 0 ,0 1 8 Л б е п р и 4 0 5 нм .
--- стр. 5 ---
НЕАВТОМАТИЧЕСКАЯ ПРОЦЕДУРА
Ф
Д л я к а ж д о й с ы в о р о тки , п и п е т и р о в а т ь в 3 т е с т о в ы е
п р о б и р ки :
Холостая
сыворотка
Тест1 (А1) Тест 2 (А2)
Флакон R1 (Цитратный буфер) 1 мл 1 мл
Флакон R2 (Тартратный буфер) 1 мл
Сыворотка 100 ЦП 100 рл
П е р е м е ш а т ь . О с т а в и т ь н а 5 м и н у т при 3 0 ° С или 3 7 ° С . Д о б а в и т ь с о д е р ж и м о е ф л а к о н а R 3 в
с о о т в е т с т в и и с и н ф о р м а ц и е й н и ж е , и о д н о в р е м е н н о в кл ю ч и ть т а й м е р :
Флакон R3 (Субстрат) 200 рл 200 рл 200 рл
П е р е м е ш а т ь . О с т а в и т ь р о в н о н а 15 м и н у т при 3 0 ° С или 3 7 ° С , Д о б а в и т ь :
Флакон R4 (Останавливающий реактив) 200 рл 200 рл 200 рл
Сыворотка 100 рл
П е р е м е ш а т ь . О п р е д е л и т ь з н а ч е н и я о п т и ч е с к о й п л о т н о с т и по А 1 (Т е с т 1) и А 2 (Т е с т 2 ) при 4 0 5 нм
п р о ти в х о л о с т о й с ы в о р о тки .
Х о л о с т о й р е а к т и в : П р и г о т о в и т ь д о п о л н и т е л ь н у ю п р о б и р к у н а з а м е н у п р о б ы с д е м и н е р а л и з о в а н н о й
во до й . Д о б а в и т ь д р у г и е реанггивы , к а к у к а з а н о в т а б л и ц е . Д а н н о е и з м е р е н и е и с п о л ь з у е т с я то л ь ко в
ка ч е с т в е п о д т в е р ж д е н и я к а ч е с т в а р е а к т и в а и н е п р и м е н я е т с я в р а м к а х п р о ц е д у р ы (§
СТАБИЛЬНОСТЬ И ХРАНЕНИЕ)
ВЫЧИСЛЕНИЯ
В ы ч и сл я ть р е з у л ь т а т с л е д у ю щ и м о б р а з о м
О б щ а я к и с л а я Ф о с Ф а т а з а :
С т е о р е т и ч е с к и м к о э ф ф и ц и е н т о м :
Ед/л = А1 X 54
Мкат/л = А1 X 0,90
С с ы в о р о то ч н ы м м у л ь т и к а л и б р а т о р о м :
Активность РАТ = А1 тест I А1 калибратор х Концентрация калибратора
П р о с т а т и ч е с к а я к и с л а я Ф о с Ф а т а з а :
С т е о р е т и ч е с к и м к о э ф ф и ц и е н т о м :
Ед/л = (А1 - А2) X 54
ркат/л = (А1 - А2) х 0,90
С м у л ь т и к а л и б р а т о р о м :
Активность РАТ = (А1 -- А2) тест / (А1 А2) калибратор х Концентрация калибратора
--- стр. 7 ---
ф
ф
Хранить при температуре 2-8® С , в затемненном месте
• Н е в с к р ы ты е у п а к о в к и с р е а к т и в а м и : го д ны к у п о т р е б л е н и ю д о и с т е ч е н и я с р о к а го д н о с ти ,
у к а з а н н о го н а я р л ы ке .
• П о с л е в скр ы ти я у п а к о в к и ;
Р е а к т и в R1 с т а б и л е н в т е ч е н и е м и н и м у м 3 -х м е с я ц е в п р и у с л о в и и о т с у т с т в и я з а гр я з н е н и я .
С т а б и л ь н о с т ь с т а н д а р т а (Ф л а к о н R 2 '): Н е с к о л ь к о н е д е л ь {п е р е н е с т и т р е б у е м о е к о л и ч е с тв о ,
за кр ы ть кр ы ш ко й и х р а н и т ь п р и 2 -8 ° С ).
Н е и с п о л ь з о в а т ь р е а1стив в с л у ч а е п о м у т н е н и я , ил и е с л и е г о о п т и ч е с к а я п л о т н о с т ь при 6 3 0 нм >
0 .3 0 0 .
Д а н н ы й н а б о р м о ж н о т р а н с п о р т и р о в а т ь в т е ч е н и е м и н и м у м 1 н е д е л и п р и к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е .
ОТБОР ПРОБ И РАБОТА С ПРОБАМИ
Сыворотка или плазма (См.§ ИНТЕРФЕРЕНЦИЯ).
А л ь б у м и н с ы в о р о тки с т а б и л е н в с ы в о р о т к е в т е ч е н и е ;
- 7 2 ч а с о в п р и 2 -8 ° С
- 6 м е с я ц е в п р и -2 0 ° С .
ИНТЕРФЕРЕНЦИЯ ( 4 ) (5 ) (6) (7 )
Р е з у л ь т а т ы по ге п а р и н и з и р о в а н н о й п л а з м е о б ы ч н о б о л е е в ы с о ки е , ч е м по с ы в о р о тке . Д а н н у ю
и н т е р ф е р е н ц и ю в о з м о ж н о и с кл ю ч и ть , в ы п о л н я я б и х р о м а т и ч е с к у ю п р о ц е д у р у (в т о р а я д л и н а волн ы
5 5 0 нм или 7 0 0 н м ),
К л о ф и б р а т и ф е н и л б у т а з о н с н и ж а ю т з н а ч е н и е а л ь б у м и н а в р а м к а х д а н н о й п р о ц е д у р ы .
Б л а го д а р я к о э ф ф и ц и е н т у р а з б а в л е н и я ге м о л и з с ы в о р о тки и л и п о м у т н е н и е н е о к а з ы в а ю т
с у щ е с т в е н н о го в л и я н и я н а р е з у л ь т а т .
Б о л е е п о д р о б н ы й о б з о р ф а к т о р о в , о к а з ы в а ю щ и х в л и я н и е н а д а н н о е и с с л е д о в а н и е , п р и в е д е н в
п у б л и к а ц и и Y o u n g D .S ,
НЕОБХОДИМЫЕ МАТЕРИАЛЫ, НЕ ВХОДЯЩИЕ В КОМПЛЕКТ
1 . О с н о в н о е л а б о р а т о р н о е о б о р у д о в а н и е д л я м е д и ц и н с к о го а н а л и з а .
2. Н о р м а л ь н а я и п а т о л о г и ч е с к а я ко н тр о л ь н ы е с ы в о р о тки .
КАЛИБРОВКА
• С т а н д а р т н ы й р а с т в о р , в кл ю ч е н н ы й в н а б о р (Ф л а к о н R 2 ), и л и B IO L A B O -M u ltic a lib ra to r R E F 9 5 0 1 5 .
• Т а к ж е л ю б о й к а л и б р а т о р , п р и п и с ы в а е м ы й к с п р а в о ч н о м у м е т о д у и л и м а т е р и а л у .
Ч а с т о т а к а л и б р о в к и з а в и с и т о т р а б о ч е г о с о с т о я н и я п р и б о р а и о т с о х р а н н о с т и р е а к т и в а .
Р е к о м е н д у е т с я в ы п о л н я т ь к а л и б р о в к у в с л е д у ю щ и х с л у ч а я х :
1. П р и з а м е н е п а р т и и р е а к т и в а .
2. П о с л е о б с л у ж и в а ю щ и х п р о ц е д у р в о т н о ш е н и и п р и б о р а .
3. Е с л и ко н т р о л ь н ы е з н а ч е н и я в ы х о д я т з а п р е д е л ы у с т а н о в л е н н о го д и а п а з о н а , д а ж е п о с л е
и с п о л ь з о в а н и я н о в о го ф л а к о н а с о с в е ж е й к о н т р о л ь н о й с ы в о р о тк о й .
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
• B IO L A B O E X A T R G L -N (н о р м а л ь н ы е з н а ч е н и я ) R E F 9 5 0 1 0 .
• B IO L A B O E X A T R O L -P (п а т о л о г и ч е с к и е з н а ч е н и я ) R E F 9 5 0 1 1 .
• И с с л е д у е м а я к о н т р о л ь н а я с ы в о р о тк а , о т н о с я щ а я с я к т о м у ж е м е т о д у .
• В н е ш н я я п р о г р а м м а к о н т р о л я к а ч е с т в а .
Р е к о м е н д у е т с я в ы п о л н я т ь к о н т р о л ь к а ч е с т в а в с л е д у ю щ и х с л у ч а я х :
• М и н и м у м о д и н р а з з а ц и кл .
• М и н и м у м о д и н р а з в т е ч е н и е 2 4 ч а с о в .
• П р и з а м е н е ф л а к о н а и л и р е а к т и в а .
• П о с л е о б с л у ж и в а ю щ и х п р о ц е д у р в о т н о ш е н и и п р и б о р а .
Е с л и ко н тр о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й , в ы п о л н и ть с л е д у ю щ и е
д е й с тв и я :
1. П о в т о р и т ь т е с т с и с п о л ь з о в а н и е м т о г о ж е к о н т р о л ь н о го р а с т в о р а .
2. Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
п р и го т о в и ть с в е ж у ю к о н т р о л ь н у ю с ы в о р о тку и п о в то р и т ь т е с т ,
3. Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
--- стр. 8 ---
и с п о л ь з о в а ть но в ы й ф л а к о н с к а л и б р а т о р о м и л и с в е ж и й к а л и б р а т о р , и п о в то р и т ь т е с т .
4. Е с л и к о н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
к а л и б р о в а т ь с и с п о л ь з о в а н и е м н о в о го ф л а к о н а с р е а к т и в о м .
5. Е с л и к о н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
с в я з а т ь с я с о с л у ж б о й т е х н и ч е с к о й п о д д е р ж к и B IO L A B O и л и с в а ш и м м е с т н ы м п р е д с т а в и т е л е м .
ОЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ (4)
А л ь б у м и н г/д л [ц м о л ь /л ]
о т 0 д о 4 д н е й 2 ,8 - 4 ,4 [4 21 -6 6 2 ]
о т 4 д н е й д о 1 4 л е т 3 ,8 -5 ,4 [5 7 2 -8 1 3 ]
14 - 1 8 л е т 3 ,2 - 4 ,5 [4 8 2 -6 7 7 ]
1 8 - 6 0 л е т 3 ,4 -4 ,8 [5 1 2 -7 2 2 ]
6 0 д о 9 0 л е т 3 ,2 - 4 ,6 [4 8 2 -6 9 2 ]
> 9 0 л е т 2 ,9 - 4 ,5 [4 3 6 -6 7 7 ]
К а ж д о й л а б о р а т о р и и с л е д у е т у с т а н о в и т ь с в о и с о б с т в е н н ы е д и а п а з о н ы н о р м а л ь н ы х з н а ч е н и й д л я
группы н а с е л е н и я , к о т о р у ю о н а о б с л у ж и в а е т .
ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ (7 )
Ф
В рамках цикла Низкий Нормальный
п = 20 уровень уровень
Между циклами Низкий Нормальный
п = 20 уровень уровень
С р е д н е е
з н а ч е н и е г/д л
С р е д н е
к в а д р а т и ч е с к о е 0 ,0 3 4 0 ,0 4 0
о т к л о н е н и е г/д л
К о э ф ф и ц и е н т -
в а р и а ц и и » /»
С р е д н е е з н а ч е н и е „ . д .
г/д л
С р е д н е
к в а д р а т и ч е с к о е 0 ,0 8 0 0 ,0 8 2
о т к л о н е н и е г/д л
К о э ф ф и ц и е н т
в а р и а ц и и %
П р е д е л к о л и ч е с т в е н н о го о п р е д е л е н и я ; п р и б л и з и т е л ь н о 0 ,3 г/д л
Ч у в с т в и т е л ь н о с т ь д л я 0 ,1 г/д л : 0 ,0 0 6 А б с при 6 3 0 нм.
С р а в н и т е л ь н о е и с с л е д о в а н и е с и с п о л ь з о в а н и е м и м е ю щ е го с я в п р о д а ж е р е а к т и в а ;
у = 1 ,0 4 4 X -0 ,0 3 4 г = 0 ,9 9 5 4
А н а л и т и ч е с к а я с п е ц и ф и ч н о с т ь в ы ш е п р и с н я т и и п о к а з а н и й в т е ч е н и е п е р в о й м и н у ты .
ЛИНЕЙНОСТЬ
П р о ц е д у р а № 1 ; д о 6 ,0 г/д л (9 0 3 р м о л ь /л ).
П р о ц е д у р а № 2 : д о 1 0 ,0 г/д л { 1 5 0 5 р м о л ь /л ).
В ы ш е , р а з б а в и т ь п р о б у с о л я н ы м р а с т в о р о м и в ы п о л н и ть п о в то р н ы й т е с т , у ч и ты в а я к о э ф ф и ц и е н т
р а з б а в л е н и я д л я в ы ч и с л е н и я р е з у л ь т а т а . П р е д е л л и н е й н о с т и з а в и с и т о т с о о т н о ш е н и я
п р о б а /р е а к т и в .
НЕАВТОМАТИЧЕСКАЯ ПРОЦЕДУРА (7 )
О с т а в ь т е р е а к т и в ы и п р о б ы п р и к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е .
Процедура №1: Объем пробы 10 мл
П и п е т и р о в а т ь в с о о т в е т с т в у ю щ и м о б р а з о м
о б о з н а ч е н н ы е т е с т о в ы е п р о б и р к и :
Холостой реактив Стандарт Тест
Реактив 2мл 2 м л 2 мл
Деминерализированная вода 10 цл
Проба 10 мл
Стандартный раствор Ю ц л
Х о р о ш о п е р е м е ш а т ь . З а ф и к с и р о в а т ь о п т и ч е с к у ю п л о т н о с т ь п р и 6 3 0 н м ( 6 2 0 - 6 4 0 ) в т е ч е н и е 3 -х м и н у т
по х о л о с т о м у р е а к т и в у , и л и л у ч ш е с р а з у п о с л е 1 м и н у ты (п р и м е ч а н и е 2).
Процедура N**2: Объем пробы 5 л
--- стр. 9 ---
П и п е т и р о в а т ь в с о о т в е т с т в у ю щ и м о б р а з о м
о б о з н а ч е н н ы е т е с т о в ы е п р о б и р ки :
Холостой реактив Стандарт Тест
Реактив 2,5 мл 2,5 мл 2 ,5 мл
Деминерализированная вода 5 р л
Проба 5 ил
Стандартный раствор рл
Х о р о ш о п е р е м е ш а т ь . З а ф и к с и р у й т е з н а ч е н и я о п т и ч е с к о й п л о т н о с т и пр и б З О нм ( 6 2 0 -6 4 0 ) в т е ч е н и е 3 -
X м и н у т по х о л о с т о м у р е а к т и в у , и л и л у ч ш е с р а з у п о с л е 1 м и н у ты (п р и м е ч а н и е 2).
Примечания;
1 -П о з а п р о с у п р е д о с т а в л я ю т с я с п е ц и ф и ч е с к и е п р о ц е д у р ы д л я а в т о м а т и ч е с к и х п р и б о р о в .
О б р а т и т ь с я в с л у ж б у т е х н и ч е с к о й п о д д е р ж к и B IO L A B O .
2 -Д л я с н и ж е н и я и н т е р ф е р е н ц и и с д р у ги м и б е л к а м и (о с о б е н н о в с л у ч а е в о с п а л и т е л ь н ы х
п р о ц е с с о в ).
ВЫЧИСЛЕНИЯ
В ы ч и сл я ть р е з у л ь т а т с л е д у ю щ и м о б р а з о м :
Абс (Тест)
Результат= Абс (Стандарт) X Концентрация стандартного
раствора
--- стр. 11 ---
ф
СТАБИЛЬНОСТЬ И ХРАНЕНИЕ
Хранить при температуре г-З^С, в затемненном месте
• Н е в с кр ы ты е у п а к о в к и с р е а к т и в а м и : го д ны к у п о т р е б л е н и ю д о и с т е ч е н и я с р о к а го д н о с ти ,
у к а з а н н о го н а я р л ы к е
• П о с л е в о с с т а н о в л е н и я ;
Р а б о ч и й р е а к т и в с т а б и л е н в т е ч е н и е м и н и м у м 3 0 д н е й при у с л о в и и о т с у т с т в и я з а гр я з н е н и я .
Н е и с п о л ь з о в а т ь р е а к т и в в с л у ч а е л о м у т н е н и я , или е с л и о п т и ч е с к а я п л о т н о с т ь при 4 0 5 нм > 0 ,8 0 0 .
Д а н н ы й н а б о р м о ж н о т р а н с п о р т и р о в а т ь в т е ч е н и е м и н и м у м 1 н е д е л и п р и к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е .
ОТБОР ПРОБ И РАБОТА С ПРОБАМИ (2)
Н е г е м о л и з и р о в а н н а я с ы в о р о т к а и л и ге п а р и н и з и р о в а н н а я п л а з м а , н е з а м е д л и т е л ь н о о х л а ж д е н н а я .
А к т и в н о с т ь щ е л о ч н о й ф о с ф а т а з ы с т а б и л ь н а в п р о б е в т е ч е н и е :
• 2 -3 д н е й п р и 2-8°С.
• 1 м е с я ц а при -2 5 °С .
ИНТЕРФЕРЕНЦИЯ(З)
Триглицериды: О т с у т с т в и е з н а ч и м о й и н т е р ф е р е н ц и и д о 1 0 0 0 м г/д л .
Гемоглобин: О т с у т с т в и е з н а ч и м о й и н т е р ф е р е н ц и и д о to 1 ,6 г/д л .
Общий билирубин: О т с у т с т в и е з н а ч и м о й и н т е р ф е р е н ц и и д о 1 5 м г/д л .
Б о л е е п о д р о б н ы й о б з о р ф а к т о р о в , о к а з ы в а ю щ и х в л и я н и е н а д а н н о е и с с л е д о в а н и е , п р и в е д е н в
п у б л и к а ц и и Y o u n g D .S .
НЕОБХОДИМЫЕ МАТЕРИАЛЫ, НЕ ВХОДЯЩИЕ В КОМПЛЕКТ
1 . О с н о в н о е л а б о р а т о р н о е о б о р у д о в а н и е д л я м е д и ц и н с к о го а н а л и з а .
2. Н о р м а л ь н а я и п а т о л о г и ч е с к а я ко н тр о л ь н ы е с ы в о р о тки .
КАЛИБРОВКА
Р е з у л ь т а т ы з а в и с я т о т т о ч н о с т и к а л и б р о в к и п р и б о р а , в р е м е н и т е с т и р о в а н и я , с о о т н о ш е н и я
р е а к т и в /п р о б а , а т а к ж е р е гу л и р о в а н и я т е м п е р а т у р ы .
Р е к о м е н д у е т с я и с п о л ь з о в а т ь т е о р е т и ч е с к и й к а л и б р о в о ч н ы й к о э ф ф и ц и е н т (§ ВЫЧИСЛЕНИЯ) или
м у л ь т и л а р а м е т р и ч е с к и й к а л и б р а т о р , о т н о с я щ и й с я к с п р а в о ч н о м у м а т е р и а л у .
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
• B IO L A B O E X A T R O L -N {н о р м а л ь н ы е з н а ч е н и я ) R E F 95010.
• B 1 0 L A B 0 E X A T R O L -P (п а т о л о г и ч е с к и е з н а ч е н и я ) R E F 9 5 0 1 1 .
• Д р у ги е и с с л е д о в а н н ы е к о н т р о л ь н ы е с ы в о р о тки , о т н о с я щ и е с я к т о м у ж е м е т о д у .
• В н е ш н я я п р о г р а м м а к о н т р о л я к а ч е с т в а .
Р е к о м е н д у е т с я в ы п о л н я т ь к о н т р о л ь к а ч е с т в а в с л е д у ю щ и х с л у ч а я х :
• М и н и м у м о д и н р а з з а ц и кл .
• М и н и м у м о д и н р а з в т е ч е н и е 24 ч а с о в .
• П р и з а м е н е ф л а к о н а и л и р е а к т и в а .
• П о с л е о б с л у ж и в а ю щ и х п р о ц е д у р в о т н о ш е н и и п р и б о р а .
Е сл и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й , в ы п о л н и ть с л е д у ю щ и е
д е й с т в и я :
1. П о в т о р и ть т е с т с и с п о л ь з о в а н и е м т о го ж е к о н т р о л ь н о го р а с т в о р а .
2. Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
п р и го т о в и ть с в е ж у ю к о н т р о л ь н у ю с ы в о р о тку и п о в т о р и т ь т е с т .
3. Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
п р о в е р и ть п а р а м е т р ы а н а л и з а : д л и н а в олн ы , т е м п е р а т у р а , о т н о ш е н и е п р о б а /р е а к т и в ,
п р о д о л ж и т е л ь н о с т ь и з м е р е н и я , к а л и б р о в о ч н ы й к о э ф ф и ц и е н т ,
4. Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
и с п о л ь з о в а т ь но в ы й ф л а к о н с р е а к т и в о м и п о в т о р и т ь т е с т ,
5. Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
о б р а т и т ь с я в с л у ж б у т е х н и ч е с к о й п о д д е р ж к и B IO L A B O и л и к в а ш е м у м е с т н о м у п р е д с т а в и т е л ю .
11
--- стр. 12 ---
ОЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ (2 )
Ед/л при ЗТ^С Мужчины Женщины
2 0 -2 9 л е т 1 0 0 -3 2 0 7 0 - 2 6 0
3 0 -3 9 л е т 9 0 - 3 2 0 7 0 - 2 6 0
4 0 -4 9 л е т 1 0 0 -3 6 0 8 0 - 2 9 0
5 0 -5 9 л е т 1 1 0 -3 9 0 1 1 0 -3 8 0
6 0 - 6 9 л е т 1 2 0 -4 5 0 1 1 0 -3 8 0
> 6 9 л е т 1 2 0 -4 6 0 9 0 -4 3 0
К а ж д о й л а б о р а т о р и и с л е д у е т у с т а н о в и т ь сво и с о б с т в е н н ы е д и а п а з о н ы н о р м а л ь н ы х з н а ч е н и й д л я
группы н а с е л е н и я , к о т о р у ю о н а о б с л у ж и в а е т .
ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
В рамках цикла
N = 33
Нормальный
уровень
Высокий
уровень
Между циклами
N = 33
Нормальный
уровень
Высокий
уровень
С р е д н е е з н а ч е н и е1 3 3 3 0 6 С р е д н е е з н а ч е н и е 1 4 7 7 6 2
Е д /л Е д /л
С р е д н е 2 ,2 6 3 ,9 5 С р е д н е 2 ,5 2 1 1 ,4 2
к в а д р а т и ч е с к о е к в а д р а т и ч е с к о е
о т к л о н е н и е Е д /л о т к л о н е н и е Е д /л
К о э ф ф и ц и е н т 1 ,7 1 ,2 9 К о э ф ф и ц и е н т 1 ,71 1 ,5
в а р и а ц и и % в а р и а ц и и %
П р е д е л к о л и ч е с т в е н н о го о п р е д е л е н и я : п р и б л и з и т е л ь н о 3 0 Е д /л .
Ч у в с т в и т е л ь н о с т ь д л я 1 0 Е д /л : п р и б л и з и т е л ь н о 0 ,0 0 2 Д А б с /м и н п р и 4 0 5 нм .
С р а в н е н и е с и с п о л ь з о в а н и е м и м е ю щ е го с я в п р о д а ж е р е а к т и в а :
у = 0 ,9 7 9 3 X + 3 ,1 2 6 1 г = 0 ,9 9 6 2
ЛИНЕЙНОСТЬ
Т е с т я в л я е т с я л и н е й н ы м д о 1 2 0 0 Е д /л (2 0 м ка т/л ).
Е с л и Д А б с /м и н > 0 ,2 2 5 , р а з б а в и т ь п р о б у с о л я н ы м р а с т в о р о м и в ы п о л н и ть п о в то р н ы й т е с т ,
у чи ты в ая к о э ф ф и ц и е н т р а з б а в л е н и я д л я в ы ч и с л е н и я р е з у л ь т а т а . П р е д е л л и н е й н о с т и з а в и с и т о т
с о о т н о ш е н и я п р о б а /р е а1а и в .
НЕАВТОМАТИЧЕСКАЯ ПРОЦЕДУРА
О с т а в и т ь р е а к т и в ы и п р о б ы п р и к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е .
П и п е т и р о в а т ь в т е р м о с т а т и ч е с к у ю кю в е ту с д л и н о й о п т и ч е с к о го п у ти 1 см:
Реактив 1 мл
Д о в е с т и д о 37°С, з а т е м д о б а в и т ь :
Проба 10 рл
П е р е м е ш а т ь . В к л ю ч и ть т а й м е р . З а р е г и с т р и р о в а т ь и с х о д н у ю о п т и ч е с к у ю п л о т н о с т ь с п у с тя 1
м и н у ту п р и 4 0 5 н м . Р е г и с т р и р о в а т ь о п т и ч е с к у ю п л о т н о с т ь к а ж д у ю м и н у т у в т е ч е н и е 3 -х
м и н ут._________________________________________________________________________________________________________
Р а с с ч и т а т ь и з м е н е н и я з н а ч е н и й о п т и ч е с к о й п л о т н о с т и в м и н у т у (Д А б с /м и н ).
Примечание:
П о з а п р о с у п р е д о с т а в л я ю т с я с п е ц и ф и ч е с к и е п р о ц е д у р ы д л я а в т о м а т и ч е с к и х п р и б о р о в .
О б р а т и т ь с я в с л у ж б у т е х н и ч е с к о й п о д д е р ж к и B IO L A B O .
ВЫЧИСЛЕНИЯ
В ы ч и сл я ть р е з у л ь т а т с л е д у ю щ и м о б р а з о м :
С теоретическим коэффициентом:
Ед/л = (ДАбс/мин) X 5450
ркат/л = Ед/л / 60
С СЫ ВО РО ТО ЧНЫ М мультикалибратором:
ЩФ активность = (ДАбс/мин) тест / (ДАбс/мин) калибратор х Концентрация калибратора
12
--- стр. 13 ---
т
Р е а к т и в д л я к о л и ч е с т в е н н о го о п р е д е л е н и я а к т и в н о с т и а л а н и н -а м и н о -т р а н с ф е р а з ы (А Л Т ) [Е С
2 .6,1 .2] в ч е л о в е ч е с к о й с ы в о р о т к е и п л а з м е .
R E F 8 0 0 2 7 R 1: 2 0 x 1 0 м л .
R E F 8 0 1 2 7 R 1: 8 x 3 0 м л
R E F 8 0 2 2 7 R 1: 1 0 x 1 2 5 м л
R E F 8 0 3 2 7 R 1 :6 x 2 0 0 м л
ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ IN VITRO
КЛИНИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ (1) (2)
А Л Т с о д е р ж и т с я в о ч е н ь в ы с о ко й к о н ц е н т р а ц и и в п е ч е н и и п о ч к а х и в м е н ь ш е м к о л и ч е с т в е в
с к е л е т н о й м у с к у л а т у р е и в с е р д ц е . Н е с м о т р я н а то , ч т о п р и л ю б о м п р о гр е с с и р о в а н и и п а то л о ги и ,
з а т р а г и в а ю щ е й ц е л о с т н о с т ь к л е т о к п е ч е н и , п о в ы ш а е т с я с ы в о р о то ч н ы й у р о в е н ь и A C T и А Л Т , А Л Т
я в л я е т с я б о л е е с п е ц и ф и ч н ы м д л я п е ч е н и ф е р м е н т о м . П о в ы ш е н и е а к т и в н о с т и А Л Т в с ы в о р о тке
крови р е д к о н а б л ю д а е т с я п р и с о с т о я н и я х , о т л и ч н ы х о т п а р е н х и м а т о з н ы х з а б о л е в а н и й п е ч е н и
(ц и р р о з о в , г е п а т и т о в , к а р ц и н о м ы , о б с т р у к т и в н о й ж е л т у х и и л и и н с у л ь т о в п е ч е н и ). К р о м е то го ,
п о в ы ш е н и е е е а к т и в н о с т и с о х р а н я е т с я д о л ь ш е , ч е м п о в ы ш е н и е а к т и в н о с т и A C T . И з м е р е н и е
с о д е р ж а н и я и A C T , и А Л Т и м е е т н е к о т о р о е з н а ч е н и е д л я д и ф ф е р е н ц и р о в а н и я ге п а т и т о в о т д р у ги х
п а р е н х и м а т о з н ы х з а б о л е в а н и й .
ПРИНЦИП (4 ) (5 ) (6)
М е т о д р а з р а б о т а н W ro b le s k i и L a D u e , о п т и м и з и р о в а н Н е п гу и B e rg m e y e r (п о с л е в ы х о д а и з м е н е н и й
к р е к о м е н д а ц и я м IF C C . С х е м а р е а к ц и и с л е д у ю щ а я :
ALT
L- Alanine 2-Oxoglutarat0 ...- ....► Pyruvate L-Glutania1e
LDHpyruvate 4 NADH * H ’ -----------► L-Lactate MAO'
У р о в е н ь с н и ж е н и я а б с о р б ц и и в р е з у л ь т а т е т р а н с ф о р м а ц и и Н А Д Н в НАД"", п р о п о р ц и о н а л ь н ы й
а кт и в н о с т и А Л Т в о б р а з ц е , и з м е р я е т с я при 3 4 0 н м . О т с у т с т в и е Р5Р п о в ы ш а е т с т а б и л ь н о с т ь
р а б о ч и х р е а ге н т о в .
СОСТАВ РЕАКТИВА
Флакон R1 РАБОЧИЙ РЕАКТИВ
A L T / T G P ( I F C C ) в о д н о й п р о б и р к е
2-о к с о гл у т а р а т1 5 м м о л ь /л
L-а л а н и н 5 0 0 м м о л ь /л
л д г > 1 6 0 0 Е д /Л
Н А Д Н > 0 , 1 8 м м о л ь /л
Б у ф е р T ris 100 м м о л ь /л
p H при 3 0 ° С 7 ,5 0 ± 0,1
К о н с е р в а н т
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Р е а кти в ы B IO L A B O п р е д н а з н а ч е н ы д л я п р о ф е с с и о н а л ь н о й д и а гн о с т и к и in vitro,
• И с п о л ь з о в а т ь с о о т в е т с т в у ю щ у ю з а щ и т у (з а щ и т н а я о д е ж д а , п е р ч а т к и , о ч к и ).
• Н е п и п е т и р о в а т ь р то м ,
• В с л у ч а е к о н т а к т а с к о ж е й и г л а з а м и т щ а т е л ь н о п р о м ы ть п о в р е ж д е н н ы е у ч а с т к и б о л ь ш и м
ко л и ч е с т в о м воды и о б р а т и т ь с я з а м е д и ц и н с к о й п о м о щ ь ю .
• Р е а к т и в ы с о д е р ж а т а з и д н а т р и я (к о н ц е н т р а ц и я < 0 ,1 % ) ко то р ы й м о ж е т в с т у п и ть в р е а к ц и ю с
м е д н ы м и или с в и н ц о в ы м и э л е м е н т а м и т р у б о п р о в о д а . П о с л е у т и л и з а ц и и см ы ть б о л ь ш и м
к о л и ч е с т в о м воды .
• П а с п о р т б е з о п а с н о с т и х и м и ч е с к о го в е щ е с т в а п р е д о с т а в л я е т с я по з а п р о с у .
• У т и л и з а ц и я о тх о д о в ; В с о о т в е т с т в и и с д е й с т в у ю щ и м в с т р а н е з а к о н о д а т е л ь с т в о м .
С о в с е м и п р о б а м и с л е д у е т о б р а щ а т ь с я к а к с п о т е н ц и а л ь н ы м и с т о ч н и к о м и н ф е к ц и и в с о о т в е т с т в и и
с п р и н ц и п а м и д о б р о с о в е с т н о й л а б о р а т о р н о й п р а к т и к и , и с о б л ю д а я с о о т в е т с т в у ю щ и е м ер ы
п р е д о с т о р о ж н о с т и . В с о о т в е т с т в и и с д е й с т в у ю щ и м в с т р а н е з а к о н о д а т е л ь с т в о м .
ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАКТИВА
Б ы стр о д о б а в и т ь к с о д е р ж и м о м у ф л а к о н а с о о т в е т с т в у ю щ е е к о л и ч е с т в о д е м и н е р а л и з о в а н н о й
воды , у к а з а н н о е н а я р л ы к е .
13
--- стр. 14 ---
П е р е д и с п о л ь з о в а н и е м p e a ia n s a о с т о р о ж н о п е р е м е ш а т ь и д о ж д а т ь с я п о л н о го р а с т в о р е н и я
(п р и б л и з и т е л ь н о 2 м и н у ты ).
R E F 8 0 0 2 7 : Д л я с н я т и я а л ю м и н и е в о й кр ы ш ки н е и с п о л ь з о в а т ь о с т р ы е и н с т р у м е н т ы .
СТАБИЛЬНОСТЬ И ХРАНЕНИЕ
Хранить при температуре 2-8®С, в затемненном месте
• Н е в с к р ы ты е у п а к о в к и с р е а к т и в а м и : го д н ы к у п о т р е б л е н и ю д о и с т е ч е н и я с р о к а го д н о с ти ,
у к а з а н н о го н а я р л ы ке .
• П о с л е в с кр ы ти я у п а к о в к и :
Р а б о ч и й р е а к т и в с т а б и л е н в т е ч е н и е м и н и м у м 6 0 д н е й п р и у с л о в и и о т с у т с т в и я з а гр я з н е н и я .
Н е и с п о л ь з у й т е р е а к т и в в с л у ч а е п о м у т н е н и я , или е с л и о п т и ч е с к а я п л о т н о с т ь п р и 3 4 0 нм < 1 ,0 0 0 .
Д а н н ы й н а б о р м о ж н о т р а н с п о р т и р о в а т ь в т е ч е н и е м и н и м у м 1 н е д е л и п р и к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е .
ОТБОР РОБ И РАБОТА С ПРОБАМИ (2) (7)
Н е г е м о л и з и р о в а н н а я с ы в о р о т к а или ге п а р и н и з и р о в а н н а я п л а з м а .
А Л Т в с ы в о р о т к е и л и п л а з м е в т е ч е н и е :
• 2 4 ч а с о в при к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е .
• 7 д н е й при 2 -8 ° С .
ИНТЕРФЕРЕНЦИЯ (3) ( 6).
Г е м о гл о б и н : О т с у т с т в и е и н т е р ф е р е н ц и и д о 3 0 0 р м о л ь /л НЬ.
Г ем о л и з: П о л о ж и т е л ь н а я и н т е р ф е р е н ц и я б л а г о д а р я A L T , в ы с в о б о ж д а е м о й и з э р и тр о ц и то в .
Б и л и р у б и н : О т с у т с т в и е и н т е р ф е р е н ц и и д о 2 0 м г/д л (3 4 2 р м о л ь /л ).
П о м у т н е н и е : О т с у т с т в и е и н т е р ф е р е н ц и и д о 7 ,0 0 м м о л ь /л т р и гл и ц е р и д о в .
Л Д Г в с о с т а в е р е а к т и в а п о з в о л я е т в т е ч е н и е п р е д -и н к у б а ц и о н н о г о э т а п а с н и з и т ь у р о в е н ь
э н д о ге н н о го п и р у в а т а , ко то р ы й м о ж е т п о л о ж и т е л ь н о и н т е р ф е р и р о в а т ь .
П о в ы ш е н н ы й у р о в е н ь А Л Т м о ж е т п о д р а з у м е в а т ь у м е н ь ш е н и е Н А Д И в о в р е м я п р е д -и н к у б а ц и о н н о й
с т а д и и , ч т о м о ж е т с т а т ь п р и ч и н о й з а н и ж е н н ы х р е з у л ь т а т о в . В с л у ч а е л и п е м и ч е с к и х или
и к т е р и ч е с к и х п р о б п о в ы ш е н н а я о п т и ч е с к а я п л о т н о с т ь м о ж е т с кр ы ть д а н н ы й ф е н о м е н .
Р е к о м е н д у е т с я п р о в е р я т ь т а к и е п р о б ы , р а з б а в и в с о л я н ы м р а с т в о р о м (1 + 4 ) .
Б о л е е п о д р о б н ы й о б з о р ф а к т о р о в , о к а з ы в а ю щ и х в л и я н и е н а д а н н о е и с с л е д о в а н и е , п р и в е д е н в
п у б л и к а ц и и Y o u n g D .S .
НЕОБХОДИМЫЕ МАТЕРИАЛЫ, НЕ ВХОДЯЩИЕ В КОМПЛЕКТ
1. О с н о в н о е л а б о р а т о р н о е о б о р у д о в а н и е д л я м е д и ц и н с к о го а н а л и з а .
2. Н о р м а л ь н а я и п а т о л о г и ч е с к а я ко н т р о л ь н ы е с ы в о р о тки .
3. Д е м и н е р а л и з и р о в а н н а я в о д а д л я п р и го т о в л е н и я р е а к т и в а
КАЛИБРОВКА
Р е з у л ь та ты з а в и с я т о т т о ч н о с т и к а л и б р о в ки п р и б о р а , в р е м е н и т е с т и р о в а н и я , с о о т н о ш е н и я
р е а к т и в /п р о б а , а т а к ж е р е гу л и р о в а н и я т е м п е р а т у р ы .
Р е к о м е н д у е т с я и с п о л ь з о в а т ь т е о р е т и ч е с к и й к а л и б р о в о ч н ы й к о э ф ф и ц и е н т (§ ВЫЧИСЛЕНИЯ) или
м у л ь т и п а р а м е т р и ч е с к и й к а л и б р а т о р , о т н о с я щ и й с я к с п р а в о ч н о м у м е т о д у и л и м а т е р и а л у .
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
• B IO L A B O E X A T R O L -N (н о р м а л ь н ы е з н а ч е н и я ) R E F 9 5 0 1 0 .
• B IO L A B O E X A T R O L -P (п а т о л о г и ч е с к и е з н а ч е н и я ) R E F 9 5 0 1 1 .
• Д р у га я к о н т р о л ь н а я с ы в о р о т к а , о т н о с я щ а я с я к т о м у ж е м е т о д у .
• В н е ш н я я п р о г р а м м а к о н т р о л я к а ч е с т в а .
Р е к о м е н д у е т с я в ы п о л н я т ь к о н т р о л ь к а ч е с т в а в с л е д у ю щ и х с л у ч а я х :
• М и н и м у м о д и н р а з з а ц и кл .
• М и н и м у м о д и н р а з в т е ч е н и е 2 4 ч а с о в .
• П р и з а м е н е ф л а к о н а и л и р е а к т и в а .
• П о с л е о б с л у ж и в а ю щ и х п р о ц е д у р в о т н о ш е н и и п р и б о р а .
Е сл и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й , в ы п о л н и ть с л е д у ю щ и е
д е й с тв и я :
1. П о в т о р и т ь т е с т с и с п о л ь з о в а н и е м т о г о ж е к о н т р о л ь н о го р а с т в о р а .
2. Е сл и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
п р и го т о в и ть с в е ж у ю к о н т р о л ь н у ю с ы в о р о тк у и п о в т о р и т ь т е с т .
3. Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
и с п о л ь з о в а ть но в ы й ф л а к о н с к а л и б р а т о р о м или с в е ж и й к а л и б р а т о р , и п о в то р и т ь т е с т .
4 . Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
к а л и б р о в а т ь с и с п о л ь з о в а н и е м н о в о го ф л а к о н а с р е а к т и в о м .
14
--- стр. 15 ---
5. Е с л и к о н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
о б р а т и т ь с я в с л у ж б у т е х н и ч е с к о й п о д д е р ж к и B IO L A B O и л и к в а ш е м у м е с т н о м у п р е д с т а в и т е л ю .
ОЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ (2)
Ед/л при 30*^0 при 37®С
Н о в о р о ж д е н н ы е , м л а д е н ц ы 9 -3 2 1 3 -4 5
М у ж ч и н ы 7 -2 8 1 0 -4 0
Ж е н щ и н ы 5 - 2 5 7 -3 5
К а ж д о й л а б о р а т о р и и с л е д у е т у с т а н о в и т ь с в о и с о б с т в е н н ы е д и а п а з о н ы н о р м а л ь н ы х з н а ч е н и й д л я
группы н а с е л е н и я , к о т о р у ю о н а о б с л у ж и в а е т .
ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
В рамках цикла
N = 30
Нормальный
уровень
Высокий
уровень
Между циклами
N = 33
Нормальный
уровень
Высокий
уровень
С р е д н е е з н а ч е н и е
Е д /л
С р е д н е
3 2 141 С р е д н е е з н а ч е н и е
Е д /л
С р е д н е
3 9 9 8
к в а д р а т и ч е с к о е
о т к л о н е н и е Е д /л
1 ,0 6 1 ,9 4 к в а д р а т и ч е с к о е
о т к л о н е н и е Е д /л
1 ,1 5 1 ,4 5
К о э ф ф и ц и е н т
в а р и а ц и и % 3 ,3 1 ,4 К о э ф ф и ц и е н т
в а р и а ц и и % 2 .9 1 ,5
П р е д е л к о л и ч е с т в е н н о го о п р е д е л е н и я : п р и б л и з и т е л ь н о 7 Е д /л
Ч у в с т в и т е л ь н о с т ь д л я 1 7 Е д /л : п р и б л и з и т е л ь н о 0 ,0 1 0 Д А б с /м и н п р и 3 4 0 нм .
С р а в н е н и е с и с п о л ь з о в а н и е м и м е ю щ е го с я в п р о д а ж е р е а к т и в а :
у = 0 ,9 8 1 3 х -0 ,6 6 0 6 г = 0 ,9 9 8 3
ЛИНЕЙНОСТЬ
Т е с т я в л я е т с я л и н е й н ы м д о 3 5 0 Е д /л .
If Л Д б с /м и н > 0 ,2 0 0 , р а з б а в и т ь п р о б у с о л я н ы м р а с т в о р о м и в ы п о л н и ть п о в то р н ы й т е с т , у ч и ты в ая
к о э ф ф и ц и е н т р а з б а в л е н и я д л я в ы ч и с л е н и я р е з у л ь т а т а . П р е д е л л и н е й н о с т и з а в и с и т о т
с о о т н о ш е н и я п р о б а /р е а к т и в .
НЕАВТОМАТИЧЕСКАЯ ПРОЦЕДУРА
О с т а в и т ь р е а к т и в ы и п р о б ы п р и к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е .________________________
П и п е т и р о в а т ь в т е р м о с т а т и ч е с к у ю кю в е ту с д л и н о й о п т и ч е с к о го п у ти 1 см:
Реактив 1 мл
Д о в е с т и д о 3 7 ° С { 3 0 ° С ), з а т е м д о б а в и т ь :
Проба 100 pL
П е р е м е ш а т ь . В к л ю ч и т ь т а й м е р . З а р е г и с т р и р о в а т ь и с х о д н у ю о п т и ч е с к у ю
п л о тн о с ть с п у с т я 1 м и н у т у п р и 3 4 0 н м . Р е г и с т р и р о в а т ь о п т и ч е с к у ю п л о т н о с т ь
к а ж д у ю м и н у т у в т е ч е н и е 3 -х м и н у т.
Р а с с ч и т а т ь и з м е н е н и я з н а ч е н и й о п т и ч е с к о й п л о т н о с т и в м и н у т у (Д А б с /м и н ).
Примечание:
П о з а п р о с у п р е д о с т а в л я ю т с я с п е ц и ф и ч е с к и е п р о ц е д у р ы д л я а в т о м а т и ч е с к и х п р и б о р о в .
О б р а т и т ь с я в с л у ж б у т е х н и ч е с к о й п о д д е р ж к и B IO L A B O .
ВЫЧИСЛЕНИЯ
В ы ч и сл я ть р е з у л ь т а т с л е д у ю щ и м о б р а з о м :
С теоретическим коэффициентом:
Ед/л = (ДАбс/мин) X 1746
ркат = Ед/л 160
С СЫ ВО РО ТО ЧНЫ М м у л ь т и к а л и б р а т о р о м :
АЛТ активность = (ДАбс/мин) тест / (ДАбс/мин) калибратор х Концентрация калибратора
(AAbs/mln) AssayALT Activity = X Calibrator Concentration
(AAbs/min) Caiibrator
15
--- стр. 16 ---
Р е а к т и в ДЛЯ к о л и ч е с т в е н н о г о о п р е д е л е н и я а к т и в н о с т и А с п а р т а т -а м и н о -т р а н с ф е р а з ы (A C T ) [Е С
2 .6 .1 ,1 ] в ч е л о в е ч е с к о й с ы в о р о т к е и п л а з м е .
A S T / T G O ( I F C C ) в о д н о й п р о б и р к е
R E F 8 0 0 2 5 R1 2 0 Х 1 0 м л R E F 8 0 1 2 5 R 1 8 x 3 0 мл
R E F 8 0 2 2 5 R1 1 0 х 1 2 5 м л R E F 8 0 3 2 5 R 1 6 х 2 0 0 м л
ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ IN VITRO
КЛИНИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ (1) (2)
A C T в с т р е ч а е т с я во в с е х т к а н я х о р га н и з м а , но м а к с и м а л ь н а я е е а к т и в н о с т ь о т м е ч а е т с я в п е ч е н и ,
с е р д ц е , с к е л е т н о й м у с к у л а т у р е и в э р и т р о ц и т а х . М и н и м а л ь н а я а к т и в н о с т ь п р и с у т с т в у е т в ко ж е ,
п о ч к а х и в п о д ж е л у д о ч н о й ж е л е з е . Н е с м о т р я н а т о , ч т о при л ю б о м п р о гр е с с и р о в а н и и п а то л о ги и ,
з а т р а г и в а ю щ е й ц е л о с т н о с т ь к л е т о к п е ч е н и (в и р у с н ы й ге п а т и т , н е к р о з п е ч е н и , ц и р р о з),
п о в ы ш а е т с я п л а з м е н н ы й у р о в е н ь и A C T , и А Л Т , п о в ы ш е н и е а к т и в н о с т и A C T в с ы в о р о тк е или
п л а з м е о т м е ч а е т с я б о л е е ч е м в 9 7 % с л у ч а е в и н ф а р к т а м и о к а р д а . У р о в е н ь с о д е р ж а н и я A C T (а
в м е с т е с н е й и А Л Т ) т а к ж е п о в ы ш а е т с я п р и п р о гр е с с и р у ю щ е й м ы ш е ч н о й д и с т р о ф и и , л е го ч н о й
э м б о л и и , о с т р о м п а н к р е а т и т е ...
ПРИНЦИП (4) (5)
М е т о д р а з р а б о т а н K a rm e n и д р . и о п т и м и з и р о в а н Н е п гу и д р . (в с о о т в е т с т в и и с и зм е н е н н ы м и
р е к о м е н д а ц и я м и IF C C )
С х е м а р е а к ц и и с л е д у ю щ а я :
AST
L'Aspartate - 2-Oxoglutarate ^ ► Oxaioacetate L-Glutamate
MDH ^
Oxaloacelate + NADH ^ 4 ....^ L-Ma!ate + NAD '
У р о в е н ь с н и ж е н и я а б с о р б ц и и по п р и ч и н е т р а н с ф о р м а ц и и Н А Д И в Н А Д "^, п р о п о р ц и о н а л ь н ы й
а к т и в н о с т и A C T в о б р а з ц е , и з м е р я е т с я п р и 340 н м . О т с у т с т в и е Р5Р п о в ы ш а е т с т а б и л ь н о с т ь
р а б о ч и х р е а ге н т о в .
СОСТАВ РЕАКТИВОВ
Флакон R1: РАБОЧИЙ РЕАКТИВ
Э Д Т А 5 м м о л ь /л
2 -о к с о к л у т а р а т 12 м м о л ь /л
L-а с п а р т а т 2 0 0 м м о л ь /л
м д г 4 9 5 Е д /л
л д г 8 2 0 Е д /л
Н А Д Н < 0 ,1 8 м м о л ь /л
Б у ф е р T ris 8 0 м м о л ь /л
p H при 3 0 “С 7 ,8 0 ± 0 ,1
К о н с е р в а н т
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Р е а кти в ы B IO L A B O п р е д н а з н а ч е н ы д л я п р о ф е с с и о н а л ь н о й д и а гн о с т и к и in vitro.
• И с п о л ь з о в а т ь с о о т в е т с т в у ю щ у ю з а щ и т у (з а щ и т н а я о д е ж д а , п е р ч а т к и , о ч к и ).
• Н е п и п е т и р о в а т ь р то м .
• В с л у ч а е к о н т а к т а с к о ж е й и г л а з а м и т щ а т е л ь н о п р о м ы ть п о в р е ж д е н н ы е у ч а с т к и б о л ь ш и м
к о л и ч е с т в о м воды и о б р а т и т ь с я з а м е д и ц и н с к о й п о м о щ ь ю .
• Р е а к т и в ы с о д е р ж а т а з и д н а т р и я (к о н ц е н т р а ц и я < 0 .1 % ) ко то р ы й м о ж е т в с т у п и ть в р е а к ц и ю с
м е д н ы м и или с в и н ц о в ы м и э л е м е н т а м и т р у б о п р о в о д а . П о с л е у т и л и з а ц и и с м ы ть б о л ь ш и м
к о л и ч е с т в о м воды .
• П а с п о р т б е з о п а с н о с т и х и м и ч е с к о го в е щ е с т в а п р е д о с т а в л я е т с я по з а п р о с у .
• У т и л и з а ц и я о тх о д о в : В с о о т в е т с т в и и с д е й с т в у ю щ и м в с т р а н е з а к о н о д а т е л ь с т в о м .
С о в с е м и п р о б а м и с л е д у е т о б р а щ а т ь с я к а к с п о т е н ц и а л ь н ы м и с т о ч н и к о м и н ф е к ц и и в с о о т в е т с т в и и
с п р и н ц и п а м и д о б р о с о в е с т н о й л а б о р а т о р н о й п р а к т и ки , и с о б л ю д а я с о о т в е т с т в у ю щ и е м еры
п р е д о с т о р о ж н о с т и . В с о о т в е т с т в и и с д е й с т в у ю щ и м в с т р а н е з а к о н о д а т е л ь с т в о м .
ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАКТИВОВ
П о с л е в скр ы ти я б ы с т р о д о б а в и т ь во ф л а к о н у к а з а н н о е н а я р л ы к е к о л и ч е с т в о
16
--- стр. 17 ---
ф
д е м и н е р а л и з и р о в а н н о й воды .
П е р е д и с п о л ь з о в а н и е м р е а к т и в а о с т о р о ж н о п е р е м е ш а т ь и д о ж д а т ь с я п о л н о го р а с т в о р е н и я
(п р и б л и з и т е л ь н о 2 м и н у ты ).
R E F 8 0 0 2 5 : Д л я с н я т и я а л ю м и н и е в о й кр ы ш ки н е и с п о л ь з о в а т ь о с т р ы е и н с т р у м е н т ы .
СТАБИЛЬНОСТЬ И ХРАНЕНИЕ
Хранить при температуре 2-8'*С, в затемненном месте
• Н е в с к р ы ты е у п а к о в к и с р е а к т и в а м и : го д ны к у п о т р е б л е н и ю д о и с т е ч е н и я с р о к а го д н о с ти ,
у к а з а н н о го н а я р л ы к е .
• П о с л е в с кр ы ти я у п а к о в к и :
Р а б о ч и й р е а к т и в с т а б и л е н в т е ч е н и е м и н и м у м 6 0 д н е й п р и о т с у т с т в и и з а гр я з н е н и я .
Н е и с п о л ь з о в а т ь р е а к т и в в с л у ч а е п о м у т н е н и я , или е с л и о п т и ч е с к а я п л о т н о с т ь при 3 4 0 нм < 1 ,0 0 0 .
Д а н н ы й н а б о р м о ж н о т р а н с п о р т и р о в а т ь в т е ч е н и е м и н и м у м 1 н е д е л и при к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е .
ОТБОР ПРОБ И РАБОТА С ПРОБАМИ (2)
Н е г е м о л и з и р о в а н н а я с ы в о р о т к а или ге п а р и н и з и р о в а н н а я п л а з м а . A C T с т а б и л ь н а в с ы в о р о тке или
п л а з м е в т е ч е н и е :
• 2 4 ч а с о в п р и к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е
• 2 8 д н е й при 2 - 8 °С
• м и н и м у м 1 го д п р и -2 0 °С .
Д о б а в л е н и е п и р и д о к с а л -ф о с ф а т а (0 ,1 м М ) п о в ы ш а е т с т а б и л ь н о с т ь при к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е д о
7 д н е й .
ИНТЕРФЕРЕНЦИЯ (3) ( 6)
Г е м о гл о б и н : П о л о ж и т е л ь н а я и н т е р ф е р е н ц и я с в ы ш е 1 5 0 р м о л ь /л .
Г ем о л и з: П о л о ж и т е л ь н а я и н т е р ф е р е н ц и я б л а г о д а р я A C T , в ы с в о б о ж д а е м о й из э р и т р о ц и т о в .
П о м у т н е н и е : О т с у т с т в и е и н т е р ф е р е н ц и и .
О б щ и й б и л и р у б и н : О т р и ц а т е л ь н а я и н т е р ф е р е н ц и я с в ы ш е 2 0 м г/д л .
Л Д Г в с о с т а в е р е а к т и в а п о з в о л я е т во в р е м я п р е д -и н к у б а ц и о н н о г о э т а п а с н и з и т ь у р о в е н ь
э н д о ге н н о го п и р у в а т а , ко то р ы й м о ж е т в ы зы в ать п о л о ж и т е л ь н у ю и н т е р ф е р е н ц и ю .
Т а к ж е о к с а л о а ц е т а т , п р о д у к т р е а к ц и и , к а р б о кс и л и р у е т с я в п и р у в а т . Д а н н о е с о е д и н е н и е т а к ж е
п о гл о щ а е т с я Л Д Г , в х о д я щ и м в с о с т а в р е а к т и в а , и н е б у д е т и н т е р ф е р и р о в а т ь с и з м е р е н и е м A C T .
Б о л е е п о д р о б н ы й о б з о р ф а к т о р о в , о к а з ы в а ю щ и х в л и я н и е н а д а н н о е и с с л е д о в а н и е , п р и в е д е н в
п у б л и к а ц и и Y o u n g D .S .
НЕОБХОДИМЫЕ МАТЕРИАЛЫ, НЕ ВХОДЯЩИЕ В КОМПЛЕКТ
1. О с н о в н о е л а б о р а т о р н о е о б о р у д о в а н и е д л я м е д и ц и н с к о го а н а л и з а .
2. Н о р м а л ь н а я и п а т о л о г и ч е с к а я ко н т р о л ь н ы е с ы в о р о тки .
3. Д е м и н е р а л и з о в а н н а я в о д а д л я п р и го т о в л е н и я р е а к т и в а .
КАЛИБРОВКА
Р е з у л ь т а т ы з а в и с я т о т т о ч н о с т и к а л и б р о в ки п р и б о р а , в р е м е н и т е с т и р о в а н и я , с о о т н о ш е н и я
р е а к т и в /п р о б а , а т а к ж е р е гу л и р о в а н и я т е м п е р а т у р ы .
Р е к о м е н д у е т с я и с п о л ь з о в а т ь т е о р е т и ч е с к и й к а л и б р о в о ч н ы й к о э ф ф и ц и е н т (§ ВЫЧИСЛЕНИЯ) или
м у л ь т и п а р а м е т р и ч е с к и й к а л и б р а т о р , о т н о с я щ и й с я к с п р а в о ч н о м у м е т о д у и л и м а т е р и а л у .
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
• B IO L A B O E X A T R O L -N (н о р м а л ь н ы е з н а ч е н и я ) R E F 9 5 0 1 0 .
• B IO L A B O E X A T R O L -P (п а т о л о г и ч е с к и е з н а ч е н и я ) R E F 9 5 0 1 1 .
• Д р у га я и с с л е д о в а н н ы е к о н т р о л ь н ы е с ы в о р о тки , о т н о с я щ и е с я к т о м у ж е м е т о д у ,
• В н е ш н я я п р о г р а м м а к о н т р о л я к а ч е с т в а .
Р е к о м е н д у е т с я в ы п о л н я т ь к о н т р о л ь к а ч е с т в а в с л е д у ю щ и х с л у ч а я х :
• М и н и м у м о д и н р а з з а ц икл ,
• М и н и м у м о д и н р а з в т е ч е н и е 2 4 ч а с о в .
• П р и з а м е н е ф л а к о н а и л и р е а к т и в а ,
• П о с л е о б с л у ж и в а ю щ и х п р о ц е д у р в о т н о ш е н и и п р и б о р а .
Е с л и ко н тр о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й , в ы п о л н и ть с л е д у ю щ и е
д е й с тв и я :
1. П о в т о р и т ь т е с т с и с п о л ь з о в а н и е м т о го ж е к о н т р о л ь н о го р а с т в о р а .
17
--- стр. 18 ---
2. Е сл и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
п р и го т о в и ть с в е ж и й к о н т р о л ь н у ю с ы в о р о тку и п о в то р и т ь т е с т .
3. Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
п р о в е р и ть п а р а м е т р ы а н а л и з а ; д л и н а в олн ы , т е м п е р а т у р а , о т н о ш е н и е п р о б а /р е а к т и в ,
п р о д о л ж и т е л ь н о с т ь и з м е р е н и я , к а л и б р о в о ч н ы й к о э ф ф и ц и е н т .
4. Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
и с п о л ь з о в а ть но в ы й ф л а к о н с р е а к т и в о м и п о в т о р и т ь т е с т .
5. Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
с в я з а т ь с я со с л у ж б о й т е х н и ч е с к о й п о д д е р ж к и B IO L A B O или с в а ш и м м е с т н ы м п р е д с т а в и т е л е м .
ОЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ (1) (2)
Ед/л__________________при 30°С _____________при 37”С _____________
Н о в о р о ж д е н н ы й 2 5 - 7 5 3 9 -1 1 7
М л а д е н е ц 1 5 -6 0 2 3 -9 4
В зр о сл ы й 8 - 2 0 1 3 -3 1
К а ж д о й л а б о р а т о р и и с л е д у е т у с т а н о в и т ь сво и с о б с т в е н н ы е д и а п а з о н ы н о р м а л ь н ы х з н а ч е н и й д л я
группы н а с е л е н и я , к о т о р у ю о н а о б с л у ж и в а е т .
ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
В рамках цикла
N = 30
Нормальный
уровень
Высокий
уровень
Между циклами N =
33
Нормальный
уровень
Высокий
уровень
С р е д н е е з н а ч е н и е3 1 ,6 1 6 1 ,1 С р е д н е е з н а ч е н и е3 4 ,4 1 7 9 ,3
Е д /л Е д /л
С р е д н е 1 ,2 2 3 ,0 6 С р е д н е 0 ,5 8 2 ,6 2
к в а д р а т и ч е с к о е к в а д р а т и ч е с к о е
о т к л о н е н и е Е д /л о т к л о н е н и е Е д /л
К о э ф ф и ц и е н т 3 ,8 5 1 ,9 0 К о э ф ф и ц и е н т 1 ,6 9 1 ,4 6
в а р и а ц и и % в а р и а ц и и %
П р е д ел к о л и ч е с т в е н н о го о п р е д е л е н и я : п р и б л и з и т е л ь н о 3 Е д /л .
Ч у в с т в и т е л ь н о с т ь д л я 1 7 Е д /л : п р и б л и з и т е л ь н о 0 ,0 1 0 А б с /м и н п р и 3 4 0 нм .
С р а в н и т е л ь н о е и с с л е д о в а н и е с и с п о л ь з о в а н и е м и м е ю щ е го с я в п р о д а ж е р е а к т и в а :
у = 1 ,0 2 6 5 X + 0 ,9 9 0 6 г = 0 ,9 9 8 3
ЛИНЕЙНОСТЬ
Т е с т я в л я е т с я л и н е й н ы м д о 3 5 0 Е д /л .
Е с л и А А б с /м и н > 0 ,2 0 0 , с о к р а т и т ь о б ъ е м р е а к т и в а или р а з б а в и т ь п р о б у с о л я н ы м р а с т в о р о м и
вы п о л н и ть п о в то р н ы й т е с т , у ч и т ы в а я к о э ф ф и ц и е н т р а з б а в л е н и я д л я в ы ч и с л е н и я р е з у л ь т а т а .
П р е д е л л и н е й н о с т и з а в и с и т о т с о о т н о ш е н и я п р о б а /р е а к т и в .
НЕАВТОМАТИЧЕСКАЯ ПРОЦЕДУРА
О с т а в и т ь р е а к т и в ы и п р о б ы п р и к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е .
________________________________________
П и п е т и р о в а т ь в т е р м о с т а т и ч е с к у ю кю в е ту с д л и н о й о п т и ч е с к о го п у ти 1 с м
Реактив 1 мл
Д о в е с т и д о 3 7 ° С (3 0 ° С ), з а т е м д о б а в и ть :
Проба 100 рл
П е р е м е ш а т ь . В к л ю ч и ть т а й м е р . З а р е г и с т р и р о в а т ь и с х о д н у ю о п т и ч е с к у ю п л о т н о с т ь с п у с тя
1 м и н у ту при 3 4 0 н м . Р е г и с т р и р о в а т ь о п т и ч е с к у ю п л о т н о с т ь к а ж д у ю м и н у т у в т е ч е н и е 3 -х
м и н ут.
Р а с с ч и т а т ь и з м е н е н и я з н а ч е н и й о п т и ч е с к о й п л о т н о с т и в м и н у т у (д Д б с /м и н ).__________________
Примечание:
П о з а п р о с у п р е д о с т а в л я ю т с я с п е ц и ф и ч е с к и е п р о ц е д у р ы д л я а в т о м а т и ч е с к и х п р и б о р о в .
О б р а т и т ь с я в с л у ж б у т е х н и ч е с к о й п о д д е р ж к и B IO L A B O .
ВЫЧИСЛЕНИЯ
В ы чи сл ять р е з у л ь т а т с л е д у ю щ и м о б р а з о м :
С теоретическим коэффициентом:
Ед/л = (ААбс/мин) X 1746
ркат/л = Ед/л / 60
С С Ы В О Р О Т О Ч Н Ы М мультикалибратором:
ACT активность = (ААбс/мин) тест / (ААбс/мин) калибратор х Концентрация калибратора
18
--- стр. 19 ---
А М И Л А З А М е т о д E -P N P G 7
Р е а к т и в д л я к о л и ч е с т в е н н о го о п р е д е л е н и я а к т и в н о с т и а -а м и л а з ы [ Е С 3 .2 .1 .1 ] в ч е л о в е ч е с к о й
с ы в о р о тке или м о ч е .
R E F 8 0 0 2 3 R1 2 0 х З м л
R E F 8 0 1 2 3 R1 8 х 2 0 м л
R E F 8 0 2 2 3 R1 1 0 x 1 0 0 м л
ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ IN VITRO
КЛИНИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ (1) (2)
С о д е р ж а н и е а л ь ф а -а м и л а з ы н а и б о л е е ч а с т о и з м е р я е т с я п р и д и а г н о с т и к е о с т р о го п а н к р е а т и т а . В
п о д о б н ы х с л у ч а я х в р е м е н н о е п о в ы ш е н и е а к т и в н о с т и а м и л а з ы в с ы в о р о т к е н а б л ю д а е т с я в
п р е д е л а х 2 - 1 2 ч а с о в п р о я в л е н и я з а б о л е в а н и я , а м а к с и м а л ь н ы й у р о в е н ь с о д е р ж а н и я
у с т а н а в л и в а е т с я н а 1 2 -7 2 ч а с а п о з ж е . О д н а к о , п о в ы ш е н и е а к т и в н о с т и а л ь ф а -а м и л а з ы в с ы в о р о тке
т а к ж е а с с о ц и и р у е т с я с д р у ги м и п а т о л о ги я м и {з а б о л е в а н и я б р ю ш н о й п о л о с ти , п а то л о ги я
б и л и а р н о го т р а к т а , д и а б е т и ч е с к и й к е т о а ц и д о з , т я ж е л а я г л о м е р у л я р н а я д и с ф у н к ц и я , з а б о л е в а н и я
с л ю н н ы х ж е л е з ...) . И н о гд а , о р га н -и с т о ч н и к м о ж н о и д е н т и ф и ц и р о в а т ь , у с т а н о в и в п р е д с т а в л е н а ли
б о л ь ш а я ч а с т ь и з о ф е р м е н т а Р -т и п о м (п а н к р е а т и ч е с к и м ) и л и S -т и п о м (с л ю н н ы м ). Д и а г н о с т и ч е с к а я
с п е ц и ф и ч н о с т ь и ч у в с т в и т е л ь н о с т ь п о в ы ш е н и я а к т и в н о с т и а л ь ф а -а м и л а з ы в м о ч е о с т а е т с я
с п о р н о й . Б ы л о у с т а н о в л е н о , ч т о п о ч е ч н ы й к л и р е н с а м и л а з ы , в с р а в н е н и и с ко н с т а н т н ы м в н о р м е
к л и р е н с о м к р е а т и н и н а , п р е д с т а в л я е т и н т е р е с , к а к д и а г н о с т и ч е с к а я к о н ц е п ц и я .
ПРИНЦИП (4)
Д л я и з м е р е н и я а к т и в н о с т и а л ь ф а -а м и л а з ы в с ы в о р о т к е кр о в и и с п о л ь з у ю т с я н е с к о л ь к о п р о ц е д у р
(а м и л о с т а т и ч е с к и е м е т о д ы , с а х а р о г е н н ы е м е т о д ы ). О б а эти м е т о д а х а р а к т е р и з у ю т с я н и зко й
л и н е й н о с т ь ю , ч у в с т в и т е л ь н о с т ь ю и т о ч н о с т ь ю в с р а в н е н и и с м е т о д о м E -P N P G 7 . С х е м а р е а к ц и и
с л е д у ю щ а я :
1 ) 5 E'PNPG^ - 5 Н 2О
a-amylase
E -G3 - 1 P N P -G4 - 2 E -G4 - 2 p N P G ;j ^ 2 E -G ^ ^ 2 p N P G j,
2 ) 1 p N P -G ^ , + 2 pN P03 * 2 P N F G2 ^ 1 4 H2O
«-glucosidase
5 p N P + 14 G
E = Э т и л е н , P N P = П а р а н и т р о ф е н о л , G = Г л ю ко з а
У р о в е н ь ф о р м и р о в а н и я p N P (р -Н и т р о ф е н о л а ), п р я м о п р о п о р ц и о н а л ь н ы й у р о в н ю а кт и в н о с т и
а л ь ф а -а м и л а з ы , и з м е р я е т с я п р и 4 0 5 нм .
СОСТАВ РЕАКТИВА
E - P N P G7 1,1 м м о л ь /л
а -гл ю к о з и д а з а 1 5 0 0 Е д /л
N a C I 51 м м о л ь /л
Б у ф е р p H 7 ,0 п р и 2 0 ° С
К о н с е р в а н т
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Р е а к ти в ы B IO L A B O п р е д н а з н а ч е н ы д л я п р о ф е с с и о н а л ь н о й д и а гн о с т и к и in vitro.
• И с п о л ь з о в а т ь с о о т в е т с т в у ю щ у ю з а щ и т у (з а щ и т н а я о д е ж д а , п е р ч а т к и , о ч к и ).
• Н е п и п е т и р о в а т ь р то м .
• В с л у ч а е к о н т а к т а с к о ж е й и г л а з а м и т щ а т е л ь н о п р о м ы ть п о в р е ж д е н н ы е у ч а с т к и б о л ь ш и м
к о л и ч е с т в о м воды и о б р а т и т ь с я з а м е д и ц и н с к о й п о м о щ ь ю .
• Р е а к т и в ы с о д е р ж а т а з и д н а т р и я (к о н ц е н т р а ц и я < 0 .1 % ) ко то р ы й м о ж е т в с т у п и т ь в р е а к ц и ю с
м е д н ы м и и л и с в и н ц о в ы м и э л е м е н т а м и т р у б о п р о в о д а . П о с л е у т и л и з а ц и и с м ы ть б о л ь ш и м
к о л и ч е с т в о м воды .
• П а с п о р т б е з о п а с н о с т и х и м и ч е с к о го в е щ е с т в а п р е д о с т а в л я е т с я по з а п р о с у .
• У т и л и з а ц и я о т х о д о в ; В с о о т в е т с т в и и с д е й с т в у ю щ и м в с т р а н е з а к о н о д а т е л ь с т в о м .
19
--- стр. 20 ---
С о в с е м и п р о б а м и с л е д у е т о б р а щ а т ь с я к а к с п о т е н ц и а л ь н ы м и с т о ч н и к о м и н ф е к ц и и в с о о т в е т с т в и и
с п р и н ц и п а м и д о б р о с о в е с т н о й л а б о р а т о р н о й п р8 1сгики, и с о б л ю д а я с о о т в е т с т в у ю щ и е м еры
п р е д о с т о р о ж н о с т и . В с о о т в е т с т в и и с д е й с т в у ю щ и м в с т р а н е з а к о н о д а т е л ь с т в о м .
ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАКТИВА
П о с л е в с кр ы ти я б ы с т р о д о б а в и т ь к о л и ч е с т в о д и с т и л л и р о в а н н о й и л и д е и о н и з и р о в а н н о й воды ,
у к а з а н н о е н а я р л ы к е . И с к л ю ч и т ь з а г р я з н е н и е с л ю н н о й а м и л а з о й . П е р е д и с п о л ь з о в а н и е м р е а к т и в а
о с т о р о ж н о п е р е м е ш а т ь и д о ж д а т ь с я п о л н о го р а с т в о р е н и я (п р и б л и з и т е л ь н о 2 м и н уты ).
R E F 8 0 0 2 3 ; Д л я с н я т и я а л ю м и н и е в о й кр ы ш ки с ф л а к о н а н е и с п о л ь з о в а т ь о с тр ы е и н с т р у м е н т ы .
СТАБИЛЬНОСТЬ И ХРАНЕНИЕ
Хранить при температуре 2-8*’С, в затемненном месте
• Н е в с к р ы ты е у п а к о в к и с р е а к т и в а м и : годны к у п о т р е б л е н и ю д о и с т е ч е н и я с р о к а го д н о с ти ,
у к а з а н н о го н а я р л ы ке .
• Р а б о ч и й р е а к т и в с т а б и л е н в т е ч е н и е м и н и м у м 3 м е с я ц е в п р и х р а н е н и и п р и 2 -8 ° С.
Н е и с п о л ь з о в а т ь р е а к т и в в с л у ч а е п о м у т н е н и я , или е с л и о п т и ч е с к а я п л о т н о с т ь при 4 0 5 нм > 0 ,6 0 0 .
Д а н н ы й н а б о р м о ж н о т р а н с п о р т и р о в а т ь в т е ч е н и е м и н и м у м 1 н е д е л и п р и к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е .
ОТБОР ПРОБ И РАБОТА С ПРОБАМИ (1) (2)
Н е г е м о л и з и р о в а н н а я с ы в о р о т к а и л и ге п а р и н и з и р о в а н н а я п л а з м а .
А кт и в н о с т ь а -а м и л а з ы с т а б и л ь н а в с ы в о р о т к е /п л а з м е в т е ч е н и е :
• м и н и м у м 7 д н е й п р и к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е .
• 1 м е с я ц а п р и 2 -8 ° С .
М о ч а : Д о в е д и т е p H д о щ е л о ч н о г о у р о в н я п е р е д х р а н е н и е м .
А кт и в н о с т ь а -а м и л а з ы с т а б и л ь н а в в м о ч е в т е ч е н и е 7 д н е й п р и 2 -8 ° С .
В с л у ч а е з а д е р ж е к п р и т р а н с п о р т и р о в к и м о чи в л а б о р а т о р и ю и с п о л ь з у й т е к о н с е р в а н т , т а к о й как
м е р т и о л а т и л и т и м е р о з а л (0 ,2 4 м М и л и 0 ,1 г/л ).
ИНТЕРФЕРЕНЦИЯ (3)
Г эмоглобин о т с у т с т в и е и н т е р ф е р е н ц и и д о 5 2 2 м г/д л
Свободный
билирубин
о т с у т с т в и е и н т е р ф е р е н ц и и д о 1 5 ,5 м г/д л (2 6 5
М м о л ь /л )
Билирубин в
соединениях
о т с у т с т в и е и н т е р ф е р е н ц и и д о 1 6 ,7 м г/д л (2 8 6
^ J м о л ь /л )
Липемия о т с у т с т в и е и н т е р ф е р е н ц и и при л и п е м и и ,
е с л и о п т и ч е с к а я п л о т н о с т ь при 6 3 0 нм н е
п р е в ы ш а е т 1 ,1 8 0 Л б е .
Б о л е е п о д р о б н ы й о б з о р ф а к т о р о в , о к а з ы в а ю щ и х в л и я н и е н а д а н н о е и с с л е д о в а н и е , п р и в е д е н в
п у б л и к а ц и и Y o u n g D .S .
НЕОБХОДИМЫЕ МАТЕРИАЛЫ, НЕ ВХОДЯЩИЕ В КОМПЛЕКТ
1. О с н о в н о е л а б о р а т о р н о е о б о р у д о в а н и е д л я м е д и ц и н с к о го а н а л и з а .
2. Н о р м а л ь н а я и п а т о л о г и ч е с к а я ко н т р о л ь н ы е с ы в о р о тки .
3. Д е м и н е р а л и з и р о в а н н а я в о д а д л я п р и го т о в л е н и я р е а к т и в а .
КАЛИБРОВКА
Р е з у л ь т а т ы з а в и с я т о т т о ч н о с т и к а л и б р о в ки п р и б о р а , в р е м е н и т е с т и р о в а н и я , с о о т н о ш е н и я
р е а к т и в /п р о б а , а т а к ж е р е гу л и р о в а н и я т е м п е р а т у р ы .
Р е к о м е н д у е т с я и с п о л ь з о в а т ь т е о р е т и ч е с к и й к а л и б р о в о ч н ы й к о э ф ф и ц и е н т (§ ВЫЧИСЛЕНИЯ) или
М у л ь т и к а л и б р а т о р B IO L A B O R E F 9 5 0 1 5 , а т а к ж е м у л ь т и п а р а м е т р и ч е с к и й к а л и б р а т о р ,
о т н о с я щ и й с я к с п р а в о ч н о м у м е т о д у или м а т е р и а л у .
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
• B IO L A B O E X A T R O L -N (н о р м а л ь н ы е з н а ч е н и я ) R E F 9 5 0 1 0
• B IO L A B O E X A T R O L -P (п а т о л о г и ч е с к и е з н а ч е н и я ) R E F 9 5 0 1 1
• Д р у га я к о н т р о л ь н а я с ы в о р о т к а , о т н о с я щ а я с я к т о м у ж е м е т о д у .
• В н е ш н я я п р о г р а м м а к о н т р о л я к а ч е с т в а .
Р е к о м е н д у е т с я в ы п о л н я т ь к о н т р о л ь к а ч е с т в а в с л е д у ю щ и х с л у ч а я х :
• М и н и м у м о д и н р а з з а ц и кл .
• М и н и м у м о д и н р а з в т е ч е н и е 2 4 ч а с о в .
20
--- стр. 21 ---
т
ф
• П р и з а м е н е ф л а к о н а и л и р е а к т и в а .
• П о с л е о б с л у ж и в а ю щ и х п р о ц е д у р в о т н о ш е н и и п р и б о р а .
Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й , в ы п о л н и ть с л е д у ю щ и е
д е й с тв и я ;
1. П о в т о р и ть т е с т с и с п о л ь з о в а н и е м т о г о ж е к о н т р о л ь н о го р а с т в о р а .
2. Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
п р и го т о в и ть с в е ж у ю к о н т р о л ь н у ю с ы в о р о тку и п о в то р и т ь т е с т .
3. Е с л и к о н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
п р о в е р и ть п а р а м е т р ы а н а л и з а : д л и н а в олн ы , т е м п е р а т у р а , о т н о ш е н и е п р о б а /р е а к т и в ,
п р о д о л ж и т е л ь н о с т ь и з м е р е н и я , к а л и б р о в о ч н ы й к о э ф ф и ц и е н т .
4. Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
и с п о л ь з о в а т ь н о в ы й ф л а к о н с р е а к т и в о м и п о в т о р и т ь т е с т .
5. Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
с в я з а т ь с я со с л у ж б о й т е х н и ч е с к о й п о д д е р ж к и B IO L A B O или с в а ш и м м е с т н ы м п р е д с т а в и т е л е м .
ОЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ (1)
Сыворотка (37*’ С) а-амилаза (Ед/л) а-амилаза (ркат/л)
2 2 - 8 0 [0 ,3 8 -1 ,3 6 ]
Urines (3 7 Х ) 2 4 - 4 0 8 Е д /2 4 ч [0 ,4 1 -6 ,9 4 ]/2 4 ч
К а ж д о й л а б о р а т о р и и с л е д у е т у с т а н о в и т ь с в о и с о б с т в е н н ы е д и а п а з о н ы н о р м а л ь н ы х з н а ч е н и й д л я
группы н а с е л е н и я , к о т о р у ю о н а о б с л у ж и в а е т .
ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ (5 )
В рамках цикла: Н о р м а л ь н ы й В ы с о ки йО т ц и к л а к ц и кл у: Н о р м а л ь н ы йВ ы сокий
N = 4 0 у р о в е н ь у р о в е н ь N = 4 0 у р о в е н ь у р о в ен ь
С р е д н е е 8 0 ,3 1 8 5 С р е д н е е 8 7 ,5 4 6 2
з н а ч е н и е Е д /л з н а ч е н и е Е д /л
С р е д н е 3 ,4 4 ,6 С р е д н е 3 ,5 1 6 ,8
к в а д р а т и ч е с к о е к в а д р а т и ч е с к о е
о т к л о н е н и е Е д /л о т к л о н е н и е Е д /л
К о э ф ф и ц и е н т4 ,3 2 ,5 К о э ф ф и ц и е н т 3 ,9 5 3 ,6
в а р и а ц и и % в а р и а ц и и %
П р е д е л к о л и ч е с т в е н н о го о п р е д е л е н и я : п р и б л и з и т е л ь н о 10 Е д /л ( 0 ,2 м ка т /л ).
Ч у в с т в и т е л ь н о с т ь д л я 1 Е д /л ; 0 .1 9 5 м А б с /м и н .
С р а в н и т е л ь н о е и с с л е д о в а н и е с и с п о л ь з о в а н и е м и м е ю щ е го с я в п р о д а ж е р е а к т и в а ;
у = 0 ,9 9 8 7 х - 1 ,8 г = 0 ,9 8 0 5
ЛИНЕЙНОСТЬ
Т е с т я в л я е т с я л и н е й н ы м д о 2 0 0 0 Е д /л (3 3 р к а т /л ).
Е с л и Д Л б с /м и н > 0 ,3 9 0 , р а з б а в ь т е п р о б у с о л я н ы м р а с т в о р о м и в ы п о л н и т е п о в то р н ы й т е с т ,
у ч и ты в а я к о э ф ф и ц и е н т р а з б а в л е н и я д л я в ы ч и с л е н и я р е з у л ь т а т а . П р е д е л л и н е й н о с т и з а в и с и т о т
с о о т н о ш е н и я п р о б а /р е а к т и в .
НЕАВТОМАТИЧЕСКАЯ ПРОЦЕДУРА
О с т а в и т ь р е а к т и в ы и п р о б ы п р и к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е ._____________________
П и п е т и р о в а т ь в к ю в е т у с д л и н о й о п т и ч е с к о го п у ти 1 см
Реактив 1 м л
Д о в е с т и д о 3 7 ° С (3 0 ° С ), з а т е м д о б а в и т ь :
Проба 2 5 рл
П е р е м е ш а т ь . В к л ю ч и ть т а й м е р . З а р е г и с т р и р о в а т ь и с х о д н у ю о п т и ч е с к у ю
п л о т н о с т ь с п у с т я 1 м и н у т у п р и 4 0 5 н м . Р е г и с т р и р о в а т ь о п т и ч е с к у ю
п л о т н о с т ь к а ж д у ю м и н у т у в т е ч е н и е 3 -х м и н у т.
Р а с с ч и т а т ь и з м е н е н и я з н а ч е н и й о п т и ч е с к о й п л о т н о с т и в м и н у т у
(Д Л б с /м и н )._________________________________________________________________
Примечание:
П о з а п р о с у п р е д о с т а в л я ю т с я с п е ц и ф и ч е с к и е п р о ц е д у р ы д л я а в т о м а т и ч е с к и х п р и б о р о в .
О б р а т и т ь с я в с л у ж б у т е х н и ч е с к о й п о д д е р ж к и B IO L A B O .
21
--- стр. 22 ---
ВЫЧИСЛЕНИЯ
Вычислять результат следующим образом:
С теоретическим коэффициентом:
Ед/л = (ААбс/мин) X 5140
р кат/л = Ед/л / 60
С СЫ ВО РО ТО ЧНЫ М м у л ь т и к а л и б р а т о р о м :
Активность а-амилазы = (ААбс/мин) тест / (ДАбс/мин) калибратор х Концентрация
калибратора
22
--- стр. 24 ---
т
С т а б и л ь н о с т ь с т а н д а р т а (ф л а к о н R 3 ) : Н е с к о л ь к о н е д е л ь {п е р е н е с т и т р е б у е м о е
к о л и ч е с тв о , за к р ы т ь к р ы ш к о й и х р а н и т ь при 1 8 -2 5 ° С ). Н е и с п о л ь з о в а т ь л ю б о й р е а к т и в в с л у ч а е
п о м у т н е н и я и л и е с л и р е з у л ь т а т по х о л о с т о й п р о б е при 6 5 0 нм > 0 ,4 0 0 .
Д а н н ы й н а б о р м о ж н о т р а н с п о р т и р о в а т ь в т е ч е н и е м и н и м у м 1 н е д е л и п р и к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е .
ОТБОР ПРОБ И РАБОТА С ПРОБАМИ (1) (2)
С ы в о р о т ка или г е п а р и н и з и р о в а н н а я п л а з м а :
Н е и с п о л ь з о в а т ь ц и т р а т , о к с а л а т и л и Э Д Т А .
З а б о р кр о в и о с у щ е с т в л я ю т у п а ц и е н т о в н а т о щ а к , при у с л о в и и м и н и м а л ь н о й в е н о з н о й о ккл ю зи и ,
при о тс у тс т в и и ф и з и ч е с к о й н а гр у з к и и л и п о с л е в о с с т а н о в л е н и я к р о в о о б р а щ е н и я в т е ч е н и е
м и н и м у м 1 м и н уты .
2 4 ч м о ч а :
О к и с л и т ь п о с л е с б о р а с и с п о л ь з о в а н и е м 2 0 - 3 0 м л H C I 6 N с ц е л ь ю р а с т в о р е н и я с о л е й ка л ь ц и я .
Р а з б а в и т ь (1 + 2 ) д и с т и л л и р о в а н н о й в о д о й п е р е д в ы п о л н е н и е м т е с т а .
О б щ и й ка л ь ц и й с т а б и л е н в с ы в о р о т к е в т е ч е н и е :
• м и н и м у м 7 д н е й при 2 - 8 “С .
• 6 м е с я ц е в при -2 0 °С .
Д л и т е л ь н о е з а м о р а ж и в а н и е м о ж е т п р и в е с т и к а с с о ц и и р у е м о м у и с п а р е н и ю , л и о ф и л и з а ц и и , а т а к ж е
с о о с а ж д е н и ю с ф и б р и н о м (т .е .г е п а р и н и з и р о в а н н а я п л а з м а ) и л и л и п и д а м и .
ИНТЕРФЕРЕНЦИЯ (3)
Г е м о л и з , ж е л т у х а , л и п е м и я , п а р а п р о т е и н ы и м а гн и й : В ы п о л н и ть б и х р о м а т и ч е с к и й а н а л и з , или
а н а л и з с и с п о л ь з о в а н и е м м н о ж е с т в а д л и н в о л н , и л и и с п о л ь з о в а т ь х о л о с т у ю п р о б у с ц е л ь ю
с н и ж е н и я п о з и т и в н о й и л и н е га т и в н о й и н т е р ф е р е н ц и и .
О б р а щ а т ь с я о с т о р о ж н о с п р о б а м и , к а л и б р а т о р а м и и к о н т р о л я м и с ц е л ь ю и с к л ю ч е н и я з а гр я з н е н и я
к а л ь ц и е м из о к р у ж а ю щ е й с р е д ы . И с п о л ь з о в а т ь о д н о р а з о в ы е п р о б и р к и и кю веты , о ч и щ а т ь
с т е к л я н н у ю п о с у д у с и с п о л ь з о в а н и е м H C I 1 N , о п о л а с к и в а т ь б о л ь ш и м к о л и ч е с т в о м
д е м и н е р а л и з и р о в а н н о й воды .
П л а с т и к о в ы е и с т е к л я н н ы е к о н т е й н е р ы м о гу т а д с о р б и р о в а т ь ка л ь ц и й в о в р е м я х р а н е н и я ,
о с о б е н н о в с л у ч а е р а з б а в л е н н о г о р а с т в о р а .
Б о л е е п о д р о б н ы й о б з о р ф а к т о р о в , о к а з ы в а ю щ и х в л и я н и е н а д а н н о е и с с л е д о в а н и е , п р и в е д е н в
п у б л и к а ц и и Y o u n g D .S .
НЕОБХОДИМЫЕ МАТЕРИАЛЫ, НЕ ВХОДЯЩИЕ В КОМПЛЕКТ
1. О с н о в н о е л а б о р а т о р н о е о б о р у д о в а н и е д л я м е д и ц и н с к о го а н а л и з а .
2 . Н о р м а л ь н а я и п а т о л о г и ч е с к а я к о н т р о л ь н ы е с ы в о р о тки .
КАЛИБРОВКА
• С т а н д а р т , в кл ю ч е н н ы й в н а б о р (ф л а к о н R 2 ) и л и М у л ь т и к а л и б р а т о р B IO L A B O , R E F 9 5 0 1 5 .
• Т а к ж е л ю б о й к а л и б р а т о р , п р и п и с ы в а е м ы й к с п р а в о ч н о м у м е т о д у и л и м а т е р и а л у .
Ч а с т о т а к а л и б р о в к и з а в и с и т о т р а б о ч е г о с о с т о я н и я п р и б о р а и о т с о х р а н н о с т и р е а к т и в а .
Р е к о м е н д у е т с я в ы п о л н я т ь к а л и б р о в к у в с л е д у ю щ и х с л у ч а я х :
1. П р и з а м е н е п а р т и и р е а к т и в а .
2. П о с л е о б с л у ж и в а ю щ и х п р о ц е д у р в о т н о ш е н и и п р и б о р а .
3. Е с л и ко н т р о л ь н ы е з н а ч е н и я в ы х о д я т з а п р е д е л ы у с т а н о в л е н н о г о д и а п а з о н а , д а ж е п о с л е
и с п о л ь з о в а н и я н о в о го ф л а к о н а с о с в е ж е й с ы в о р о тко й .
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
• B IO L A B O E X A T R O L -N (н о р м а л ь н ы е з н а ч е н и я ), R E F 9 5 0 1 0 .
• B IO L A B O E X A T R O L -P (п а т о л о г и ч е с к и е з н а ч е н и я ), R E F 9 5 0 1 1 .
• И с с л е д у е м а я к о н т р о л ь н а я с ы в о р о тк а , о т н о с я щ а я с я к т о м у ж е м е т о д у .
• В н е ш н я я п р о гр а м м а к о н т р о л я к а ч е с т в а .
Р е к о м е н д у е т с я в ы п о л н я т ь к о н т р о л ь к а ч е с т в а в с л е д у ю щ и х с л у ч а я х :
• М и н и м у м о д и н р а з з а ц икл .
• М и н и м у м о д и н р а з в т е ч е н и е 2 4 ч а с о в .
• П р и з а м е н е ф л а к о н а и л и р е а к т и в а .
• П о с л е о б с л у ж и в а ю щ и х п р о ц е д у р в о т н о ш е н и и п р и б о р а .
Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й , в ы п о л н и ть с л е д у ю щ и е
д е й с т в и я :
1. П о в т о р и т ь т е с т с и с п о л ь з о в а н и е м т о г о ж е к о н т р о л ь н о го р а с т в о р а .
2. Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
24
--- стр. 25 ---
п р и го т о в и ть с в е ж у ю к о н т р о л ь н у ю с ы в о р о тк у и п о в т о р и т ь т е с т .
3. Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
и с п о л ь з о в а ть но в ы й ф л а к о н с к а л и б р а т о р о м или с в е ж и й к а л и б р а т о р , и п о в то р и т ь т е с т .
4 . Е с л и к о н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
к а л и б р о в а т ь с и с п о л ь з о в а н и е м н о в о го ф л а к о н а с р е а к т и в о м .
5. Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
с в я з а т ь с я с о с л у ж б о й т е х н и ч е с к о й п о д д е р ж к и B IO L A B O и л и с в а ш и м м е с т н ы м п р е д с т а в и т е л е м .
ОЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ (2 )
ОБЩИЙ КАЛЬЦИЙ в сыворотке:
Ф
Популяция мг/дл ммоль/л
Н е д о н о ш е н н ы е 6 ,2 - 1 1 ,0 [1 ,5 5 -2 ,7 5 ]
0 -1 0 д н е й 7 ,6 - 1 0 ,4 [1 ,9 0 -2 ,6 0 ]
1 0 д н е й -2 4 9 ,0 - 1 1 ,0 [2 ,2 5 -2 ,7 5 ]
м е с я ц а
2 4 м е с я ц а -1 2 л е т8 ,8 - 1 0 ,8 [2 ,2 0 -2 ,7 0 ]
12 л е т -1 8 л е т 8 ,4 - 1 0 ,2 [2 ,1 0 -2 ,5 5 ]
1 8 -6 0 л е т 8 ,6 - 1 0 ,0 [2 ,1 5 -2 ,5 0 ]
6 0 -9 0 л е т 8 ,8 - 1 0 ,2 [2 ,2 0 -2 ,5 5 ]
> 9 0 л е т 8 ,2 - 9 ,6 [2 ,0 5 -2 ,4 0 ]
о б щ и й к а л ь ц и и в 24 ч моче: < 3 0 0 м г /2 4 ч (< 7 ,5 м м о л ь /2 4 ч ). К а ж д о й л а б о р а т о р и и с л е д у е т
у с т а н о в и т ь с в о и с о б с т в е н н ы е д и а п а з о н ы н о р м а л ь н ы х з н а ч е н и й д л я гр у п п ы н а с е л е н и я , ко то р ую
о н а о б с л у ж и в а е т ,
ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
В рамках цикла Нормальный
п = 20 уровень
Высокий
уровень
Между циклами Нормальный
п - 20 уровень
Высокий
Уровень
С р е д н е е 8 ,8 2 1 4 ,0 2 С р е д н е е 8 ,9 6 1 4 ,1 4
з н а ч е н и е м г/д л з н а ч е н и е м г/д л
С р е д н е 0 ,0 4 0 ,0 6 С р е д н е 0 ,1 1 0 ,2 0
к в а д р а т и ч е с к о е к в а д р а т и ч е с к о е
о т к л о н е н и е о т к л о н е н и е
м г/д л м г/д л
К о э ф ф и ц и е н т0 ,5 0 ,4 К о э ф ф и ц и е н т1 ,2 6 1 ,4 2
в а р и а ц и и % в а р и а ц и и %
Ч у в с т в и т е л ь н о с т ь д л я 1 м г/д л ; 0 ,0 7 0 А б с при 6 5 0 нм.
С р а в н и т е л ь н о е и с с л е д о в а н и е с и с п о л ь з о в а н и е м и м е ю щ е го с я в п р о д а ж е р е а к т и в а :
у = 1 ,0 2 5 9 х - 0 ,1 8 1 1 г = 0 ,9 9 4 3
ЛИНЕЙНОСТЬ
Т е с т я в л я е т с я л и н е й н ы м д о 1 5 ,0 м г/д л (3 ,7 5 м м о л ь /л ). В ы ш е , р а з б а в и т ь п р о б у
д е м и н е р а л и з и р о в а н н о й в о д о й и п о в то р и т ь т е с т , у ч и ты в а я к о э ф ф и ц и е н т р а з б а в л е н и я . П р е д е л
л и н е й н о с т и з а в и с и т о т с о о т н о ш е н и я п р о б а /р е а к т и в ,
НЕАВТОМАТИЧЕСКАЯ ПРОЦЕДУРА
Н е о б х о д и м о п о д д е р ж и в а т ь п о с т о я н н у ю т е м п е р а т у р у , т а к как о п т и ч е с к а я п л о т н о с т ь к р а с и т е л я
П и п е т и р о в а т ь в с о о т в е т с т в у ю щ и м о б р а з о м о б о з н а ч е н н ы е
т е с т о в ы е п р о б и р ки :
Холостой
реактив
Стандарт Тест
Реактив 1 мл 1 мл 1 мл
Дистиллированная вода 20 рл
Стандарт 20 рл
Проба 20 рл
Х о р о ш о п е р е м е ш а т ь . О с т а в и т ь н а 1 м и н у т у при к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е . З а р е г и с т р и р о в а т ь
з н а ч е н и я о п т и ч е с к о й п л о т н о с т и п р и 6 5 0 нм ( 6 4 0 - 6 6 0 ) по х о л о с т о м у р е а к т и в у . О к р а с с т а б и л е н в
т е ч е н и е 1 ч а с а в з а т е м н е н н о м м е с т е .
Примечания:
25
--- стр. 26 ---
• Б и х р о м а т и ч е с к и й а н а л и з : в т о р а я д л и н а волн ы 7 0 0 нм .
• П о з а п р о с у п р е д о с т а в л я ю т с я с п е ц и ф и ч е с к и е п р о ц е д у р ы д л я а в т о м а т и ч е с к и х п р и б о р о в .
О б р а т и т ь с я в с л у ж б у т е х н и ч е с к о й п о д д е р ж к и B IO L A B O .
ВЫЧИСЛЕНИЯ
В ы ч и сл я ть р е з у л ь т а т с л е д у ю щ и м о б р а з о м ;
С ы в о р о т ка или п л а з м а :
Результат = Абс (тест) / Абс (стандарт) х Концентрация стандарта
М о ч а р а з б а в л е н н а я (1 + 2 ) : у м н о ж и т ь п о л у ч е н н ы й в ы ш е р е з у л ь т а т н а к о э ф ф и ц и е н т р а з б а в л е н и я 3,
26
--- стр. 28 ---
Р е а к т и в (ф л а к о н R 1 ) с т а б и л е н в т е ч е н и е м и н и м у м 3 -х м е с я ц е в п р и у с л о в и и о т с у т с т в и я
з а гр я з н е н и я .
С т а б и л ь н о с т ь с т а н д а р т а (сЬ лакон R 3 ) : Н е с к о л ь к о н е д е л ь (п е р е н е с т и т р е б у е м о е
ко л и ч е с тв о , за к р ы т ь к р ы ш к о й и х р а н и т ь п р и 1 8 -2 5 ° С ).
Н е и с п о л ь з у й т е л ю б о й р е а к т и в в с л у ч а е п о м у т н е н и я или е с л и о п т и ч е с к а я п л о т н о с т ь по х о л о с т о м у
р е а к т и в у п р и 5 0 0 нм > 0 ,1 0 0 .
Д а н н ы й н а б о р м о ж н о т р а н с п о р т и р о в а т ь при к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е .
ОТБОР ПРОБ И РАБОТА С ПРОБАМИ (2) ( 6)
Н е г е м о л и з и р о в а н н а я с ы в о р о т к а или ге л а р и н и з и р о в а н н а я п л а з м а .
М о ч а и л и С М Ж .
Х л о р и д с т а б и л е н в п р о б е в т е ч е н и е ;
- 1 н е д е л и п р и к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е и л и п р и 2 - 8 '’С .
ИНТЕРФЕРЕНЦИЯ (3 )
Б и л и р у б и н : О т с у т с т в и е з н а ч и т е л ь н о й и н т е р ф е р е н ц и и д о 1 0 0 р м о л ь /л (6 ,0 м г/д л ).
В ы ш е , н е м н о го з а в ы ш е н н ы е р е з у л ь т а т ы , к о т о р ы е н е п р е в ы ш а ю т 2
м м о л ь /л в п р е д е л а х 1 0 0 - 3 7 5 р м о л ь /л б и л и р у б и н а .
М у тн о с ть : Е с л и о п а л е с ц и р у ю щ и й , з а в ы ш е н н ы е р е з у л ь т а т ы в п р е д е л а х
п р и б л и з и т е л ь н о 4 - 8 м м о л ь /л . Е с л и м о л о ч н о -м у т н ы й , т а к ж е
з а в ы ш е н н ы е р е з у л ь т а т ы . Д л я с н и ж е н и я д а н н о й и н т е р ф е р е н ц и и
в ы п о л н и т е т е с т по х о л о с т о й п р о б е , и л и б и х р о м а т и ч е с к и й а н а л и з (с м
§ НЕАВТОМАТИЧЕСКАЯ ПРОЦЕДУРА)
Г е м о гл о б и н : З а в ы ш е н н ы е р е з у л ь т а т ы н а 5 м м о л ь /л п р и к о н ц е н т р а ц и и
г е м о г л о б и н а в п р о б е 2 0 5 ц м о л ь /л (3 3 0 м г/д л ).
А с к о р б и н о в а я О т с у т с т в и е з н а ч и т е л ь н о й и н т е р ф е р е н ц и и д о 1 0 м г/д л в и т а м и н а С в
ки с л о та : п р о б е .
Б о л е е п о д р о б н ы й о б з о р ф а к т о р о в , о к а з ы в а ю щ и х в л и я н и е н а д а н н о е и с с л е д о в а н и е , п р и в е д е н в
п у б л и к а ц и и Y o u n g D .S .
НЕОБХОДИМЫЕ МАТЕРИАЛЫ, НЕ ВХОДЯЩИЕ В КОМПЛЕКТ
1. О с н о в н о е л а б о р а т о р н о е о б о р у д о в а н и е д л я м е д и ц и н с к о го а н а л и з а .
2. Н о р м а л ь н а я и п а т о л о г и ч е с к а я ко н т р о л ь н ы е с ы в о р о тки .
КАЛИБРОВКА
• С т а н д а р т , в кл ю ч е н н ы й в н а б о р (ф л а к о н R 2 ), и л и М у л ь т и к а л и б р а т о р B IO L A B O , R E F 9 5 0 1 5 .
Т а к ж е л ю б о й к а л и б р а т о р , п р и п и с ы в а е м ы й к с п р а в о ч н о м у м е т о д у и л и м а т е р и а л у .
Ч а с т о т а к а л и б р о в к и з а в и с и т о т р а б о ч е г о с о с т о я н и я п р и б о р а и о т с о х р а н н о с т и р е а к т и в а .
Р е к о м е н д у е т с я в ы п о л н я т ь к а л и б р о в к у в с л е д у ю щ и х с л у ч а я х :
1. П р и з а м е н е п а р т и и р е а к т и в а .
2. П о с л е о б с л у ж и в а ю щ и х п р о ц е д у р в о т н о ш е н и и п р и б о р а .
3. Е с л и к о н т р о л ь н ы е з н а ч е н и я в ы х о д я т з а п р е д е л ы у с т а н о в л е н н о г о д и а п а з о н а , д а ж е п о с л е
и с п о л ь з о в а н и я н о в о го ф л а к о н а с о с в е ж е й с ы в о р о тко й .
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
• B IO L A B O E X A T R O L -N (н о р м а л ь н ы е з н а ч е н и я ), R E F 9 5 0 1 0 .
• B IO L A B O E X A T R O L -P (п а т о л о г и ч е с к и е з н а ч е н и я ), R E F 9 5 0 1 1 .
• И с с л е д у е м а я к о н т р о л ь н а я с ы в о р о т к а , о т н о с я щ а я с я к т о м у ж е м е т о д у .
• В н е ш н я я п р о г р а м м а к о н т р о л я к а ч е с т в а .
Р е к о м е н д у е т с я в ы п о л н я т ь к о н т р о л ь к а ч е с т в а в с л е д у ю щ и х с л у ч а я х :
• М и н и м у м о д и н р а з з а ц и кл .
• М и н и м у м о д и н р а з в т е ч е н и е 2 4 ч а с о в .
• П р и з а м е н е ф л а к о н а и л и р е а к т и в а .
• П о с л е о б с л у ж и в а ю щ и х п р о ц е д у р в о т н о ш е н и и п р и б о р а .
Е с л и к о н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й , в ы п о л н и ть с л е д у ю щ и е
д е й с тв и я :
1. П о в т о р и т ь т е с т с и с п о л ь з о в а н и е м т о г о ж е к о н т р о л ь н о го р а с т в о р а .
2. Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
п р и го т о в и ть с в е ж у ю к о н т р о л ь н у ю с ы в о р о тк у и п о в т о р и т ь т е с т .
3. Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
и с п о л ь з о в а т ь н о в ы й ф л а к о н с к а л и б р а т о р о м и л и с в е ж и й к а л и б р а т о р , и п о в т о р и т ь т е с т .
4 . Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
к а л и б р о в а т ь с и с п о л ь з о в а н и е м н о в о го ф л а к о н а с р е а к т и в о м .
28
--- стр. 29 ---
5. Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
с в я з а т ь с я с о с л у ж б о й т е х н и ч е с к о й п о д д е р ж к и B 1 0 L A B 0 и л и с в а ш и м м е с т н ы м п р е д с т а в и т е л е м .
ОЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ (2)
В сыворотке или плазме
Хлорид мЭкв/л [ммоль/л]
В п у п о в и н е 9 6 - 1 0 4 [9 6 -1 0 4 ]
Н е д о н о ш е н н ы е 9 5 - 1 1 0 [9 5 -1 1 0 ]
0 - 3 0 д н е й 9 8 - 1 1 3 [9 8 -1 1 3 ]
д о 9 0 д н е й 9 8 - 1 0 7 ( 1 0 8 ) [9 8 - 1 0 7 ( 1 0 8 ) ]
> 9 0 л е т 9 8 -1 1 1 [9 8 -1 1 1 ]
В моче 24 ч
Хлорид мЭкв/л [ммоль/л]
Н о в о р о ж д е н н ы е 2 -1 0 [2 -1 0 ]
Д е т и < 6 л е т 1 5 -4 0 [1 5 -4 0 ]
6 -1 0 л е т , М 3 6 - 1 1 0 [3 6 -1 1 0 ]
6 -1 0 л е т , Ж 1 8 -7 4 [1 8 -7 4 ]
1 0 -1 4 л е т , М 6 4 - 1 7 6 [6 4 -1 7 6 ]]
1 0 -1 4 л е т , Ж 3 6 - 1 7 3 [3 6 -1 7 3 ]
В зр о с л ы е 1 1 0 -2 5 0 [1 1 0 -2 5 0 ]
> 6 0 л е т 9 5 - 1 9 5 [9 5 -1 9 5 ]
ВЦСЖ
Хлорид мЭкв/л [ммоль/л]
Д е т и 1 1 0 -1 3 0 [1 1 0 -1 3 0 ]
В зр о с л ы е 1 1 8 -1 3 2 [1 1 8 -1 3 2 ]
К а ж д о й л а б о р а т о р и и с л е д у е т у с т а н о в и т ь с в о и с о б с т в е н н ы е д и а п а з о н ы н о р м а л ь н ы х з н а ч е н и й д л я
группы н а с е л е н и я , к о т о р у ю о н а о б с л у ж и в а е т .
ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
В рамках цикла Низкий Высокий Между циклами п -2 0 Низкий Высокий
п = 20 уровень уровень уровень уровень
С р е д н е е з н а ч е н и е м м о л ь /л 8 5 ,1 1 3 6 ,3 С р е д н е е з н а ч е н и е м м о л ь /л 8 4 ,6 1 3 3 ,4
С р е д н е к в а д р а т и ч е с к о е
о т к л о н е н и е м м о л ь /л
0 ,5 1 0 ,9 4 С р е д н е к в а д р а т и ч е с к о е
о т к л о н е н и е м м о л ь /л
0 ,6 7 1 ,9 5
К о э ф ф и ц и е н т в а р и а ц и и %0 ,6 0 0 ,6 9 К о э ф ф и ц и е н т в а р и а ц и и %0 ,7 9 1 .5
П р е д е л к о л и ч е с т в е н н о го о п р е д е л е н и я : п р и б л и з и т е л ь н о 1 ,4 м м о л ь /л
Ч у в с т в и т е л ь н о с т ь д л я 1 0 0 м м о л ь /л : п р и б л и з и т е л ь н о 0 ,3 5 0 Л б е при 5 0 0 нм .
С р а в н и т е л ь н о е и с с л е д о в а н и е с и с п о л ь з о в а н и е м и м е ю щ е го с я в п р о д а ж е р е а к т и в а :
у = 1 ,0 3 9 1 х -2 ,9 1 5 3 г = 0 ,9 9 4 4
ЛИНЕЙНОСТЬ
Т е с т я в л я е т с я л и н е й н ы м в д и а п а з о н е 7 0 - 1 4 0 м м о л ь /л . М а к с и м а л ь н о е р а с х о ж д е н и е с о с т а в л я е т ±
3 % о т т е о р е т и ч е с к о г о з н а ч е н и я . Д л я з н а ч е н и й , н е п р е в ы ш а ю щ и х 7 0 м Э к в /л , п о с тр о и ть
ка л и б р о в о ч н у ю к р и в у ю (с и с п о л ь з о в а н и е м р а с т в о р о в х л о р и д а 2 0 , 4 0 , 6 0 м Э к в /л ) или у в е л и ч и ть
о б ъ е м пр о б ы . С в ы ш е 1 4 0 м м о л ь /л , р а з б а в и т ь п р о б у д е м и н е р а л и з и р о в а н н о й в о д о й б е з х л о р и д а и
п о в то р и ть т е с т , у ч и т ы в а я к о э ф ф и ц и е н т р а з б а в л е н и я . П р е д е л л и н е й н о с т и з а в и с и т о т с о о т н о ш е н и я
п р о б а /р е а к т и в .
НЕАВТОМАТИЧЕСКАЯ ПРОЦЕДУРА
П и п е т и р о в а т ь в с о о т в е т с т в у ю щ и м о б р а з о м
о б о з н а ч е н н ы е т е с т о в ы е п р о б и р ки :
Холостой
реактив
Стандарт Тест
Реактив 1 мл 1 мл 1 мл
Деминерализированная вода 10 ил
Стандарт 10 рл
29
--- стр. 30 ---
ф
Проба 10 мл
Х о р о ш о п е р е м е ш а т ь . О с т а в и т ь н а 5 м и н у т при к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е . З а р е г и с т р и р о в а т ь
з н а ч е н и я о п т и ч е с к о й п л о т н о с т и при 5 0 0 нм ( 4 5 0 - 5 0 0 ) по х о л о с т о м у р е а к т и в у . О к р а с с т а б и л е н в
т е ч е н и е 3 0 м и н у т в з а т е м н е н н о м м е с т е .___________________________________________________________________
Примечания:
- П о з а п р о с у п р е д о с т а в л я ю т с я с п е ц и ф и ч е с к и е п р о ц е д у р ы д л я а в т о м а т и ч е с к и х п р и б о р о в .
О б р а т и т ь с я в с л у ж б у т е х н и ч е с к о й п о д д е р ж к и B IO L A B O .
- Т е с т по х о л о с т о й п р о б е м о ж е т б ы ть в ы п о л н е н с и с п о л ь з о в а н и е м с о л я н о го р а с т в о р а в м е с то
р е а к т и в а т и о ц и а н а т а . Х о л о с т у ю п р о б у и з м е р я ю т при 5 0 0 нм по с о л я н о м у р а с т в о р у , и з а т е м
в ы ч и та ю т п о л у ч е н н ы й р е з у л ь т а т и з з н а ч е н и я о п т и ч е с к о й п л о тн о с ти , п о л у ч е н н о й б е з х о л о с то й
пробы .
- Б и х р о м а т и ч е с к и й а н а л и з в д и а п а з о н е 5 0 0 - 6 0 0 нм п о з в о л я е т с н и з и т ь н а 5 0 % и н т е р ф е р е н ц и ю
в с л е д с т в и е п о м у т н е н и я , н е с м о т р я н а п о т е р ю ч у в с т в и т е л ь н о с т ь н а 1 0 % .
- Ч у в с т в и т е л ь н о с т ь в ы ш е пр и 4 5 0 - 4 6 0 нм , о д н а к о р е а к ц и я б о л е е с п е ц и ф и ч н а в д и а п а з о н е 4 8 0 -
5 0 0 нм .
т
ВЫЧИСЛЕНИЯ
В ы чи сл ять р е з у л ь т а т с л е д у ю щ и м о б р а з о м :
Результат = Абс (тест) I Абс (стандарт) х Концентрация стандарта
30
--- стр. 32 ---
ф
С о в с е м и п р о б а м и с л е д у е т о б р а щ а т ь с я к а к с п о т е н ц и а л ь н ы м и с т о ч н и к о м и н ф е к ц и и в с о о т в е т с т в и и
с п р и н ц и п а м и д о б р о с о в е с т н о й л а б о р а т о р н о й п р а к т и ки , и с о б л ю д а я с о о т в е т с т в у ю щ и е м еры
п р е д о с т о р о ж н о с т и . В с о о т в е т с т в и и с д е й с т в у ю щ и м в с т р а н е з а к о н о д а т е л ь с т в о м .
ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАКТИВА
Б ы стр о д о б а в и т ь с о д е р ж и м о е ф л а к о н а R 2 (Ф е р м е н т ы ) во ф л а к о н R 1 (Б у ф е р ). О с т о р о ж н о
п е р е м е ш а т ь и д о ж д а т ь с я п о л н о го р а с т в о р е н и я (п р и б л и з и т е л ь н о 2 м и н у ты ).
R E F 8 0 1 5 6 ; Б ы стр о д о б а в и т ь 2 0 м л с о д е р ж и м о го ф л а к о н а R 1 (Б у ф е р ) к с о д е р ж и м о м у ф л а к о н а R 2
(Ф е р м е н т ы ).
Ф л а к о н R 2 : Е с л и п р и м е н и м о , н е и с п о л ь з о в а т ь о с тр ы е и н с т р у м е н т ы д л я с н я т и я а л ю м и н и е в о й
кры ш ки.
СТАБИЛЬНОСТЬ И ХРАНЕНИЕ
Хранить при температуре 2-8®С, в затемненном месте
• Н е в с к р ы ты е у п а к о в к и с р е а к т и в а м и : го д н ы к у п о т р е б л е н и ю д о и с т е ч е н и я с р о к а го д н о с ти ,
у к а з а н н о го н а я р л ы ке .
• П о с л е в скр ы ти я у п а к о в к и :
Р а б о ч и й р е а к т и в с т а б и л е н в т е ч е н и е м и н и м у м 1 го д а .
С т а б и л ь н о с т ь с т а н д а р т а : Н е с к о л ь к о н е д е л ь (п е р е н е с т и т р е б у е м о е
к о л и ч е с тв о , за к р ы т ь к р ы ш ко й и х р а н и т е при 2 -8 ° С ). Н е и с п о л ь з о в а т ь л ю б о й р е а к т и в в с л у ч а е
п о м у т н е н и я и л и е с л и р е з у л ь т а т п о х о л о с т о й п р о б е п р и 5 0 0 н м > 0 ,4 0 0 .
Д а н н ы й н а б о р м о ж н о т р а н с п о р т и р о в а т ь в т е ч е н и е м и н и м у м 1 н е д е л и п р и к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е .
ОТБОР ПРОБ И РАБОТА С ПРОБАМИ (2 )
С ы в о р о т ка и л и п л а з м а (г е п а р и н и л и Э Д Т А ).
Н е и с п о л ь з о в а т ь о к с а л а т , ф л у о р и д или ц и т р а т . З а б и р а т ь у п а ц и е н т о в н а т о щ а к .
О т д е л и т ь с ы в о р о тк у о т к л е т о к в т е ч е н и е 2 -х ч а с о в .
Х о л е с т е р и н с т а б и л е н в п р о б е в т е ч е н и е :
• 5 -7 д н е й п р и 2 -8 ° С
• 3 -х м е с я ц е в п р и -2 0 ° С
• М н о ж е с т в а л е т п р и -7 0 °С .
• Н е д о п у с к а т ь п о в т о р н о го з а м о р а ж и в а н и я и о т т а и в а н и я .
ИНТЕРФЕРЕНЦИЯ ( 2 ) (3 ) (5 )
А с к о р б и н о в а я О т р и ц а т е л ь н а я и н т е р ф е р е н ц и я с в ы ш е 5 м г/д л .
ки с л о та :
Г е м о гл о б и н : П о л о ж и т е л ь н а я и н т е р ф е р е н ц и я с в ы ш е 3 3 м г/д л .
Б и л и р у б и н : О т р и ц а т е л ь н а я и н т е р ф е р е н ц и я с в ы ш е 8 ,6 м г/д л .
Х о л о с т а я с ы в о р о т к а м о ж е т у с и л и т ь д а н н у ю
и н т е р ф е р е н ц и ю .
Л и п е м и я : Н и з к а я и н т е р ф е р е н ц и я , о г р а н и ч е н н а я л и п а з н о й
а к т и в н о с т ь ю х о л е с т е р и н -э с т е р а з ы .
Ф е р м е н т н ы е м е то д ы п о в ы ш а ю т а н а л и т и ч е с к у ю с п е ц и ф и ч н о с т ь . Х о л е с т е р и н -о к с и д а з а т а к ж е
в с т у п а е т в р е а к ц и ю с 3 |3 -ги д р о к с и х о л е с т е р и н а м и (н е з н а ч и т е л ь н о е к о л и ч е с т в о в ч е л о в е ч е с к о й
с ы в о р о тке - т .е . д е г и д р о э п и а н д р о с т е р о н (Д Г Э А ), п р е гн е н о л о н ).
Б о л е е п о д р о б н ы й о б з о р ф а к т о р о в , о к а з ы в а ю щ и х в л и я н и е н а д а н н о е и с с л е д о в а н и е , п р и в е д е н в
п у б л и к а ц и и Y o u n g D .S и л и N . W . T ie tz .
НЕОБХОДИМЫЕ МАТЕРИАЛЫ, НЕ ВХОДЯЩИЕ В КОМПЛЕКТ
1. О с н о в н о е л а б о р а т о р н о е о б о р у д о в а н и е д л я м е д и ц и н с к о го а н а л и з а .
2. Н о р м а л ь н а я и п а т о л о г и ч е с к а я к о н т р о л ь н ы е с ы в о р о тки .
КАЛИБРОВКА
• С т а н д а р т , в кл ю ч е н н ы й в н а б о р (R 3 ) или или М у л ь т и к а л и б р а т о р B IO L A B O , R E F 9 5 0 1 5 .
Т а к ж е л ю б о й к а л и б р а т о р , п р и п и с ы в а е м ы й к с п р а в о ч н о м у м е т о д у и л и м а т е р и а л у .
Ч а с т о т а к а л и б р о в к и з а в и с и т о т р а б о ч е г о с о с т о я н и я п р и б о р а и о т с о х р а н н о с т и р е а к т и в а .
Р е к о м е н д у е т с я в ы п о л н я т ь к а л и б р о в к у в с л е д у ю щ и х с л у ч а я х :
1. П р и з а м е н е п а р т и и р е а к т и в а .
2. П о с л е о б с л у ж и в а ю щ и х п р о ц е д у р в о т н о ш е н и и п р и б о р а .
3. Е с л и ко н т р о л ь н ы е з н а ч е н и я в ы х о д я т з а п р е д е л ы у с т а н о в л е н н о г о д и а п а з о н а , д а ж е п о с л е
и с п о л ь з о в а н и я н о в о го ф л а к о н а со с в е ж е й с ы в о р о тко й .
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
32
--- стр. 33 ---
т
• B IO L A B O E X A T R O L -N (н о р м а л ь н ы е з н а ч е н и я ), R E F 9 5 0 1 0 .
• B IO L A B O E X A T R O L -P (п а т о л о г и ч е с к и е з н а ч е н и я ), R E F 9 5 0 1 1 .
• И с с л е д у е м а я к о н т р о л ь н а я с ы в о р о тк а , о т н о с я щ а я с я к т о м у ж е м е т о д у ,
• В н е ш н я я п р о гр а м м а к о н т р о л я к а ч е с т в а .
Р е к о м е н д у е т с я в ы п о л н я т ь к о н т р о л ь к а ч е с т в а в с л е д у ю щ и х с л у ч а я х :
• М и н и м у м о д и н р а з з а ц и кл .
• М и н и м у м о д и н р а з в т е ч е н и е 24 ч а с о в .
• П р и з а м е н е ф л а к о н а и л и р е а к т и в а .
• П о с л е о б с л у ж и в а ю щ и х п р о ц е д у р в о т н о ш е н и и п р и б о р а .
Е с л и к о н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й , в ы п о л н и ть с л е д у ю щ и е
д е й с т в и я :
1. П о в т о р и ть т е с т с и с п о л ь з о в а н и е м т о го ж е к о н т р о л ь н о го р а с т в о р а .
2. Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
п р и го т о в и ть с в е ж у ю к о н т р о л ь н у ю с ы в о р о тк у и п о в т о р и т ь т е с т .
3. Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
и с п о л ь з о в а т ь но в ы й ф л а к о н с к а л и б р а т о р о м и л и с в е ж и й к а л и б р а т о р , и п о в то р и т ь т е с т .
4. Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
к а л и б р о в а т ь с и с п о л ь з о в а н и е м н о в о го ф л а к о н а с р е а к т и в о м .
5. Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
с в я з а т ь с я со с л у ж б о й т е х н и ч е с к о й п о д д е р ж к и B IO L A B O или с в а ш и м м е с т н ы м п р е д с т а в и т е л е м .
ОЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ (2)
Общий холестерин мг/дл [ ммоль/л ]
Рекомендуемые <200 [<5,18]
значения
Низкий риск 200-239 [5,18-6,19]
Высокий риск >240 [>6,22]
Каждой лаборатории следует установить свои собственные диапазоны нормальных значений для
группы населения, которую она обслуживает.
ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ (4)
В рамках цикла Нормальный Высокий Между циклами п - 33 Нормальный Высокий
п = 30 уровень уровень уровень уровень
Среднее значение мг/дл 149 217 Среднее значение мг/дл 125 261
Среднеквадратическое 1,25 1,89 Среднеквадратическое 1,04 2,06
отклонение мг/дл отклонение мг/дл
Коэффициент вариации 0,84 0,87 Коэффициент вариации 0,83 0,79
% %
Предел количественного определения: приблизительно 1 мг/дл.
Чувствительность для 100 мг/дл: 0,235 ± 0,035
Сравнительное исследование с использованием имеющегося в продаже реактива:
у = 0,957 х+ 6,4 г = 0,9904
ЛИНЕЙНОСТЬ
Реакция является линейной до минимум 500 мг/дл (12,9 ммоль/л). Выше, разбавить пробу
соляным раствором и повторить тест, учитывая коэффициент разбавления. Предел линейности
зависит от соотношения проба/реактив.
33
--- стр. 34 ---
НЕАВТОМАТИЧЕСКАЯ ПРОЦЕДУРА
Ф
П и п е т и р о в а т ь в с о о т в е т с т в у ю щ и м о б р а з о м о б о з н а ч е н н ы е
т е с т о в ы е п р о б и р ки :
Холостой
реактив
Стандарт Тест
Реактив 1 мл 1 мл 1 мл
Деминерализированная вода 10 мл
Стандарт 10 \1п
Проба 10 \in
Х о р о ш о п е р е м е ш а т ь . О с т а в и т ь н а 5 м и н у т при 3 7 ° С или 1 0 м и н у т п р и к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е .
З а р е г и с т р и р о в а т ь з н а ч е н и я о п т и ч е с к о й п л о т н о с т и при 5 0 0 нм ( 4 8 0 - 5 2 0 ) по х о л о с т о м у р е а кти в у .
О к р а с с т а б и л е н в т е ч е н и е 1 ч а с а .
1римечание: П о з а п р о с у п р е д о с т а в л я ю т с я с п е ц и ф и ч е с к и е п р о ц е д у р ы д л я а в т о м а т и ч е с к и х
п р и б о р о в . С в я ж и т е с ь с о с л у ж б о й т е х н и ч е с к о й п о д д е р ж к и B IO L A B O .
ВЫЧИСЛЕНИЯ
В ы ч и сл я ть р е з у л ь т а т с л е д у ю щ и м о б р а з о м :
Результат = Абс (тест) / Абс (стандарт) х Концентрация стандарта
34
--- стр. 36 ---
Р е а кти в ы B IO L A B O п р е д н а з н а ч е н ы д л я п р о ф е с с и о н а л ь н о й д и а гн о с т и к и in vitro,
• Использовать соответствующую защиту (защитная одежда, перчатки, очки).
• Н е п и п е т и р о в а т ь р то м .
• В с л у ч а е к о н т а к т а с к о ж е й и г л а з а м и т щ а т е л ь н о п р о м ы ть п о в р е ж д е н н ы е у ч а с т к и б о л ь ш и м
к о л и ч е с т в о м воды и о б р а т и т ь с я з а м е д и ц и н с к о й п о м о щ ь ю .
• Р е а к т и в ы с о д е р ж а т а з и д н а т р и я {к о н ц е н т р а ц и я < 0 ,1 % ) ко то р ы й м о ж е т в с т у п и ть в р е а к ц и ю с
м е д н ы м и и л и с в и н ц о в ы м и э л е м е н т а м и т р у б о п р о в о д а . П о с л е у т и л и з а ц и и с м ы ть б о л ь ш и м
к о л и ч е с т в о м воды .
• П а с п о р т б е з о п а с н о с т и х и м и ч е с к о го в е щ е с т в а п р е д о с т а в л я е т с я по з а п р о с у .
• У т и л и з а ц и я о тх о д о в : В с о о т в е т с т в и и с д е й с т в у ю щ и м в с т р а н е з а к о н о д а т е л ь с т в о м .
С о в с е м и п р о б а м и с л е д у е т о б р а щ а т ь с я к а к с п о т е н ц и а л ь н ы м и с т о ч н и к о м и н ф е к ц и и в с о о т в е т с т в и и
с п р и н ц и п а м и д о б р о с о в е с т н о й л а б о р а т о р н о й п р а к т и ки , и с о б л ю д а я с о о т в е т с т в у ю щ и е м еры
п р е д о с т о р о ж н о с т и . В с о о т в е т с т в и и с д е й с т в у ю щ и м в с т р а н е з а к о н о д а т е л ь с т в о м .
ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАКТИВА
R E F 9 7 2 1 7 : Б ы с тр о д о б а в и т ь 3 м л с о д е р ж и м о г о ф л а к о н а R 2 (б у ф е р ) в с о д е р ж и м о е ф л а к о н а R1
(Ф е р м е н т ы -с у б с т р а т ).
R E F 9 7 3 1 7 : Б ы с т р о д о б а в и т ь с о д е р ж и м о е ф л а к о н а R 1 (Ф е р м е н т ы -с у б с т р а т ) во ф л а к о н R 2
(Б у ф е р ).
П е р е д и с п о л ь з о в а н и е м р е а к т и в а о с т о р о ж н о п е р е м е ш а т ь и д о ж д а т ь с я п о л н о го р а с т в о р е н и я
(п р и б л и з и т е л ь н о 2 м и н у ты ).
Ф л а к о н R 1 : Д л я с н я т и я а л ю м и н и е в о й кр ы ш ки н е и с п о л ь з о в а т ь о с т р ы е и н с т р у м е н т ы .
СТАБИЛЬНОСТЬ И ХРАНЕНИЕ
Хранить при температуре 2-8®С, в затемненном месте
• Н е в с к р ы ты е у п а к о в к и с р е а к т и в а м и : годны к у п о т р е б л е н и ю д о и с т е ч е н и я с р о к а го д н о с ти ,
у к а з а н н о го н а я р л ы к е .
• П о с л е в с кр ы ти я у п а к о в к и :
С о д е р ж и м о е ф л а к о н а R 2 с т а б и л ь н о в т е ч е н и е м и н и м у м 3 -х м е с я ц е в при у с л о в и и о тс у тс т в и я
з а гр я з н е н и я (з а к р ы т ь кр ы ш ко й и х р а н и т ь при 2 -8 ° С ).
Р а б о ч и й р е а к т и в с т а б и л е н в т е ч е н и е м и н и м у м 7 д н е й п р и у с л о в и и о т с у т с т в и я з а гр я з н е н и я .
Н е и с п о л ь з о в а т ь р е а к т и в в с л у ч а е п о м у т н е н и я , или е с л и о п т и ч е с к а я п л о т н о с т ь по х о л о с т о м у
р е а к т и в у п р и 3 4 0 нм > 0 ,7 0 0 .
Д а н н ы й н а б о р м о ж н о т р а н с п о р т и р о в а т ь в т е ч е н и е м и н и м у м 1 н е д е л и п р и к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е .
ОТБОР ПРОБ И РАБОТА С ПРОБАМИ (1) (2)
Н е г е м о л и з и р о в а н н а я с ы в о р о т к а . Х р а н и т ь при 2 -8 ° С в з а т е м н е н н о м м е с т е . И с п о л ь з о в а т ь
ге р м е т и ч н ы й к о н т е й н е р д л я п р е д о т в р а щ е н и я у т е ч к и С О г-
Н е р е к о м е н д у е т с я и с п о л ь з о в а т ь п л а з м у , т а к к а к а н т и к о а гу л я н т ы , т а к и е к а к ге п а р и н , Э Д Т А , ц и т р а т и
ф л у о р и д и н т е р ф е р и р у ю т с и з м е р е н и е м . П р и п о д о з р е н и и н а и н ф а р к т м и о к а р д а р е к о м е н д у е т с я
о с у щ е с т в и т ь з а б о р кр о в и у п а ц и е н т а с п у с т я 6 ч а с о в , 1 2 ч а с о в и 2 4 ч а с а . М и н и м а л ь н о т р е б у е м о е
ч и с л о п р о б кр о в и - д в е : с п у с т я 1 2 ч а с о в и 2 4 ч а с а п о с л е п о я в л е н и я с и м п т о м о в .
А к т и в н о с т ь К К -М В в с ы в о р о т к е с т а б и л ь н а в т е ч е н и е :
• 4 - 8 ч а с о в п р и к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е .
• 1 - 2 д н я при 2 -8 ‘^С.
• 1 м е с я ц п р и -2 0 ° С ,
ИНТЕРФЕРЕНЦИЯ (1) (3) (4) (5)
Г е м о л и з : а д е н и л а т -к и н а з а и д р у г и е п р о м е ж у т о ч н ы е з в е н ь я р е а к ц и и , т а к и е к а к А Т Р (а д е н о з и н
т р и ф о с ф а т ) и л и G e P (г л ю к о з а -6 -ф о с ф а т ) и н т е р ф е р и р у ю т с т е с т о м .
К К - В В : о б л а д а е т с п о с о б н о с т ь ю и н т е р ф е р и р о в а т ь с т е с т о м (р е д к о в с т р е ч а е т с я в с ы в о р о тке ).
А т и п и ч н ы е и з о с Ь е р м е н ты : в о з м о ж н а и н т е р ф е р е н ц и я с т е с т о м (о д н а ф о р м а , к о м п л е к с К К -В В и
и м м у н о гл о б у л и н G , н а и б о л е е ч а с т о в с т р е ч а е т с я у п о ж и л ы х ж е н щ и н ). П р и с у т с т в и е а ти п и ч н ы х
и з о ф е р м е н т о в н е п р е у м е н ь ш а е т з н а ч е н и е т е с т а , т а к к а к ф е р м е н т н а я к а р т и н а я в л я е т с я с т а б и л ь н о й
с т е ч е н и е м в р е м е н и . П р и о с т р о м и н ф а р к т е м и о к а р д а з н а ч е н и я К К - М В в о з р а с т а ю т , и
в о з в р а щ а ю т с я к н о р м а л ь н ы м у р о в н я м в т е ч е н и е 4 8 ч а с о в .
Б о л е е п о д р о б н ы й о б з о р ф а к т о р о в , о к а з ы в а ю щ и х в л и я н и е н а д а н н о е и с с л е д о в а н и е , п р и в е д е н в
п у б л и к а ц и и Y o u n g D .S .
НЕОБХОДИМЫЕ МАТЕРИАЛЫ, НЕ ВХОДЯЩИЕ В КОМПЛЕКТ
1, О с н о в н о е л а б о р а т о р н о е о б о р у д о в а н и е д л я м е д и ц и н с к о го а н а л и з а .
2, Н о р м а л ь н а я и п а т о л о г и ч е с к а я ко н т р о л ь н ы е с ы в о р о тки .
36
--- стр. 37 ---
ф
КАЛИБРОВКА
Р е з у л ь т а т ы з а в и с я т о т т о ч н о с т и к а л и б р о в к и п р и б о р а , в р е м е н и т е с т и р о в а н и я , с о о т н о ш е н и я
р е а к ги в /п р о б а , а т а к ж е р е гу л и р о в а н и я т е м п е р а т у р ы .
Р е к о м е н д у е т с я и с п о л ь з о в а т ь т е о р е т и ч е с к и й к а л и б р о в о ч н ы й к о э ф ф и ц и е н т (§ ВЫЧИСЛЕНИЯ) или
к а л и б р а т о р , о т н о с я щ и й с я к с п р а в о ч н о м у м е т о д у и л и м а т е р и а л у .
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
• И с с л е д о в а н н а я ч е л о в е ч е с к а я к о н т р о л ь н а я с ы в о р о тк а , о т н о с я щ а я с я к т о м у ж е м е то д у .
• В н е ш н я я п р о г р а м м а к о н т р о л я к а ч е с т в а .
Р е к о м е н д у е т с я в ы п о л н я т ь к о н т р о л ь к а ч е с т в а в с л е д у ю щ и х с л у ч а я х :
• М и н и м у м о д и н р а з з а ц и кл .
• М и н и м у м о д и н р а з в т е ч е н и е 2 4 ч а с о в ,
• П р и з а м е н е ф л а к о н а и л и р е а к т и в а .
• П о с л е о б с л у ж и в а ю щ и х п р о ц е д у р в о т н о ш е н и и п р и б о р а .
Е сл и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й , в ы п о л н и ть с л е д у ю щ и е
д е й с т в и я :
1. П о в т о р и ть т е с т с и с п о л ь з о в а н и е м т о го ж е к о н т р о л ь н о го р а с т в о р а .
2. Е с л и к о н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
п р и го т о в и ть с в е ж у ю к о н т р о л ь н у ю с ы в о р о тку и п о в то р и т ь т е с т .
3. Е с л и к о н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
п р о в е р и ть п а р а м е т р ы а н а л и з а : д л и н а в олн ы , т е м п е р а т у р а , о т н о ш е н и е п р о б а /р е а к т и в ,
п р о д о л ж и т е л ь н о с т ь и з м е р е н и я , к а л и б р о в о ч н ы й к о э ф ф и ц и е н т .
4. Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
и с п о л ь з о в а ть но в ы й ф л а к о н с р е а к т и в о м и п о в то р и т ь т е с т .
5. Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
с в я з а т ь с я со с л у ж б о й т е х н и ч е с к о й п о д д е р ж к и B IO L A B O или с в а ш и м м е с т н ы м п р е д с т а в и т е л е м .
ОЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ (2 )
3 0 ° С 3 7 ° С
К К -М В < 1 6 Е д /л < 2 5 Е д /л
К К - М В /К К С о о т н о ш е н и е К К - М В в д и а п а з о н е 6 - 2 5 %
а с с о ц и и р у е т с я с о с тр ы м и н ф а р к т о м
м и о к а р д а . П р и п о д о з р е н и и н а и н ф а р к т
м и о к а р д а з н а ч е н и я К К - М В в о з р а с т а ю т и
в о з в р а щ а ю т с я к н о р м а л ь н ы м у р о в н я м в
т е ч е н и е 4 8 ч а с о в .
К а ж д о й л а б о р а т о р и и с л е д у е т у с т а н о в и т ь с в о и с о б с т в е н н ы е д и а п а з о н ы н о р м а л ь н ы х з н а ч е н и й д л я
группы н а с е л е н и я , к о т о р у ю о н а о б с л у ж и в а е т .
ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ (1) ( 6)
В рамках цикла
п = 20
Нормальный
уровень
Высокий
уровень
Между циклами Нормальный
п = 20 уровень
Высокий
Уровень
С р е д н е е 3 7 1 5 6 С р е д н е е 3 7 1 5 6
з н а ч е н и е Е д /л з н а ч е н и е Е д /л
С р е д н е 1 ,7 2 ,5 С р е д н е - 1 ,3 3 ,3
к в а д р а т и ч е с к о е к в а д р а т и ч е с к о е
о т к л о н е н и е Е д /л о т к л о н е н и е Е д /л
К о э ф ф и ц и е н т4 ,6 1 ,6 К о э ф ф и ц и е н т 3 ,5 2,1
в а р и а ц и и % в а р и а ц и и %
П р е д е л к о л и ч е с т в е н н о го о п р е д е л е н и я : п р и б л и з и т е л ь н о 5 Е д /л .
Ч у в с т в и т е л ь н о с т ь д л я 6 ,7 Е д /л : п р и б л и з и т е л ь н о 0 ,0 0 1 А б с при 3 4 0 нм .
С п е ц и ф и ч н о с т ь : П р и о б щ е й а к т и в н о с т и С К < 1 0 0 0 Е д /л , м е т о д д е м о н с т р и р у е т и н ги б и р о в а н и е К К -
М М , п р е в ы ш а ю щ е е 9 9 ,5 % ,
С р а в н и т е л ь н о е и с с л е д о в а н и е с и с п о л ь з о в а н и е м и м е ю щ е г о с я в п р о д а ж е р е а к т и в а :
у = 1 ,0 2 х + 5 г = 0 ,9 9 5
ЛИНЕЙНОСТЬ
Т е с т я в л я е т с я л и н е й н ы м д о 1 0 0 0 Е д /л .
Е с л и Д Л б с /м и н > 0 ,1 5 0 , р а з б а в и т ь п р о б у с о л я н ы м р а с т в о р о м и п о в т о р и т ь т е с т , у ч и ты в а я
к о э ф ф и ц и е н т р а з б а в л е н и я . П р е д е л л и н е й н о с т и з а в и с и т о т с о о т н о ш е н и я п р о б а /р е а к т и в .
37
--- стр. 38 ---
НЕАВТОМАТИЧЕСКАЯ ПРОЦЕДУРА
О с т а в и т ь р е а к т и в ы и п р о б ы п р и к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е .
П и п е т и р о в а т ь в т е р м о с т а т и ч е с к и е кю веты с д л и н о й
о п т и ч е с к о го п у ти 1 см :
Реактив 1 мл
Д о в е с т и д о 3 7 ° С , з а т е м д о б а в и т ь :
Проба 50 рл
П е р е м е ш а т ь . З а р е г и с т р и р о в а т ь и с х о д н о е з н а ч е н и е
о п т и ч е с к о й п л о т н о с т и с п у с т я 5 м и н у т п р и 3 4 0 н м , и
з а т е м р е ги с т р и р о в а т ь з н а ч е н и я о п т и ч е с к о й
п л о т н о с т и каяодую м и н у т у в т е ч е н и е 5 м и н у т.
Р а с с ч и т а т ь и з м е н е н и е з н а ч е н и й о п т и ч е с к о й
п л о тн о с ти в м и н у т у (А Л б с /м и н )._________________________
Примечание: П о з а п р о с у п р е д о с т а в л я ю т с я с п е ц и ф и ч е с к и е п р о ц е д у р ы д л я а в т о м а т и ч е с к и х
п р и б о р о в . О б р а т и т ь с я в с л у ж б у т е х н и ч е с к о й п о д д е р ж к и B IO L A B O .
ВЫЧИСЛЕНИЯ
В ы ч и с л я ть р е з у л ь т а т с л е д у ю щ и м о б р а з о м :
С теоретическим коэффициентом:
Ед/л = (ААбс/мин) X 6667
И кат/л = Ед/л / 60
К а л и б р о в о ч н ы й к о э ф ф и ц и е н т п о д р а з у м е в а е т , ч т о а к т и в н о с т ь К К - М В в 2 р а з а п р е в ы ш а е т
а кт и в н о с т ь К К -В .
С человеческим калибратором:
Активность КК MB = (ЛАбс/мин) тест /(ДАбс/мин) калибратор х Концентрация калибратора
38
--- стр. 40 ---
#
#
• У т и л и з а ц и я о тх о д о в : В с о о т в е т с т в и и с д е й с т в у ю щ и м в с т р а н е з а к о н о д а т е л ь с т в о м .
С о в с е м и п р о б а м и с л е д у е т о б р а щ а т ь с я к а к с п о т е н ц и а л ь н ы м и с т о ч н и к о м и н ф е к ц и и в с о о т в е т с т в и и
с п р и н ц и п а м и д о б р о с о в е с т н о й л а б о р а т о р н о й п р а к т и к и , и с о б л ю д а я с о о т в е т с т в у ю щ и е м ер ы
п р е д о с т о р о ж н о с т и . В с о о т в е т с т в и и с д е й с т в у ю щ и м в с т р а н е з а к о н о д а т е л ь с т в о м .
ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАКТИВА
R E F 9 2 3 0 7 : Б ы с тр о д о б а в и т ь с о д е р ж и м о е ф л а к о н а R1 (Ф е р м е н т ы -с у б с т р а т ) во ф л а к о н R 2
(Б у ф е р ).
R E F 9 2 2 0 7 : Б ы с тр о д о б а в и т ь 3 м л с о д е р ж и м о го ф л а к о н а R 2 (Б у ф е р ) в с о д е р ж и м о е ф л а к о н а R1
(Ф е р м е н т ы -с у б с т р а т ).
П е р е д и с п о л ь з о в а н и е м р е а к т и в а о с т о р о ж н о п е р е м е ш а т ь и д о ж д а т ь с я п о л н о го р а с т в о р е н и я
(п р и б л и з и т е л ь н о 2 м и н у ты ).
Ф л а ко н R 1: Д л я с н я т и я а л ю м и н и е в о й кр ы ш ки н е и с п о л ь з о в а т ь о с т р ы е и н с т р у м е н т ы .
СТАБИЛЬНОСТЬ И ХРАНЕНИЕ
Хранить при температуре 2-8®С, в затемненном месте
• Н е в с к р ы ты е у п а к о в к и с р е а к т и в а м и : го д ны к у п о т р е б л е н и ю д о и с т е ч е н и я с р о к а го д н о с ти ,
у к а з а н н о го н а я р л ы ке .
• П о с л е в скр ы ти я у п а к о в к и :
С о д е р ж и м о е ф л а к о н а R 2 с т а б и л ь н о в т е ч е н и е м и н и м у м 3 -х м е с я ц е в при у с л о в и и о тс у тс т в и я
з а гр я з н е н и я (з а к р ы т ь кр ы ш ко й и х р а н и т ь п р и 2 -8 ° С ).
Р а б о ч и й р е а к т и в с т а б и л е н в т е ч е н и е м и н и м у м 7 д н е й при у с л о в и и о т с у т с т в и я з а гр я з н е н и я .
Н е и с п о л ь з о в а т ь р е аю -и в в с л у ч а е п о м у т н е н и я , или е с л и о п т и ч е с к а я п л о т н о с т ь п р и 3 4 0 нм > 0 ,8 0 0 .
Д а н н ы й н а б о р м о ж н о т р а н с п о р т и р о в а т ь в т е ч е н и е м и н и м у м 1 н е д е л и п р и к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е .
ОТБОР ПРОБ И РАБОТА С ПРОБАМИ (1 ) (2 )
Н е г е м о л и з и р о в а н н а я с ы в о р о т к а . Н е р е к о м е н д у е т с я и с п о л ь з о в а т ь а н т и к о а гу л я н т ы , т а к и е ка к
ге п а р и н , Э Д Т А , ц и т р а т и ф л у о р и д . Х р а н и т ь в т е м н о м м е с т е . И с п о л ь з о в а т ь ге р м е т и ч н ы й к о н т е й н е р
д л я п р е д о т в р а щ е н и я у т е ч к и С О г . П р и с о е д и н е н и е т и о л о в н е я в л я е т с я н е о б х о д и м ы м .
А кт и в н о с т ь К К с т а б и л ь н а в с ы в о р о т к е в т е ч е н и е ;
• 4 - 8 ч а с о в при к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е ,
• 1 - 2 д н е й при 2 -8 °С .
• 1 м е с я ц а при -2 0 ° С .
ИНТЕРФЕРЕНЦИЯ (1 ) (3 )
Н е и с п о л ь з о в а т ь ге м о л и з и р о в а н н ы е п р о б ы (н е к о т о р ы е ф е р м е н т ы и п р о м е ж у т о ч н ы е пр о д у кты ,
в ы с в о б о ж д а е м ы е э р и т р о ц и т а м и , и н т е р ф е р и р у ю т с р е а к ц и е й ).
Б о л е е п о д р о б н ы й о б з о р ф а к т о р о в , о к а з ы в а ю щ и х в л и я н и е н а д а н н о е и с с л е д о в а н и е , п р и в е д е н в
п у б л и к а ц и и Y o u n g D .S .
НЕОБХОДИМЫЕ МАТЕРИАЛЫ, НЕ ВХОДЯЩИЕ В КОМПЛЕКТ
1. О с н о в н о е л а б о р а т о р н о е о б о р у д о в а н и е д л я м е д и ц и н с к о го а н а л и з а .
2. Н о р м а л ь н а я и п а т о л о г и ч е с к а я ко н тр о л ь н ы е с ы в о р о тки .
КАЛИБРОВКА
Р е з у л ь т а т ы з а в и с я т о т т о ч н о с т и к а л и б р о в к и п р и б о р а , в р е м е н и т е с т и р о в а н и я , с о о т н о ш е н и я
р е а к т и в /п р о б а , а т а к ж е р е гу л и р о в а н и я т е м п е р а т у р ы .
Р е к о м е н д у е т с я и с п о л ь з о в а т ь т е о р е т и ч е с к и й к а л и б р о в о ч н ы й к о э ф ф и ц и е н т (§ ВЫЧИСЛЕНИЯ) или
м у л ь т и п а р а м е т р и ч е с к и й к а л и б р а т о р , о т н о с я щ и й с я к с п р а в о ч н о м у м е т о д у .
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
• B IO L A B O E X A T R O L -N (н о р м а л ь н ы е з н а ч е н и я ) R E F 9 5 0 1 0 .
• B IO L A B O E X A T R O L -P (п а т о л о г и ч е с к и е з н а ч е н и я ) R E F 9 5 0 1 1 .
• Д р у га я к о н т р о л ь н а я с ы в о р о т к а , о т н о с я щ а я с я к т о м у ж е м е т о д у .
• В н е ш н я я п р о г р а м м а к о н т р о л я к а ч е с т в а .
Р е к о м е н д у е т с я в ы п о л н я т ь к о н т р о л ь к а ч е с т в а в с л е д у ю щ и х с л у ч а я х :
• М и н и м у м о д и н р а з з а ц и кл .
• М и н и м у м о д и н р а з в т е ч е н и е 2 4 ч а с о в .
• П р и з а м е н е ф л а к о н а и л и р е а к т и в а .
• П о с л е о б с л у ж и в а ю щ и х п р о ц е д у р в о т н о ш е н и и п р и б о р а .
Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й , в ы п о л н и ть с л е д у ю щ и е
40
--- стр. 41 ---
д е й с тв и я :
1. П о в т о р и т ь т е с т с и с п о л ь з о в а н и е м т о го ж е к о н т р о л ь н о го р а с т в о р а ,
2 . Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
п р и го т о в и ть с в е ж у ю к о н т р о л ь н у ю с ы в о р о тк у и п о в т о р и т ь т е с т .
3. Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
п р о в е р и ть п а р а м е т р ы а н а л и з а : д л и н а в олн ы , т е м п е р а т у р а , о т н о ш е н и е п р о б а /р е а к т и в ,
п р о д о л ж и т е л ь н о с т ь и з м е р е н и я , к а л и б р о в о ч н ы й к о э ф ф и ц и е н т .
4. Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
и с п о л ь з о в а т ь н о в ы й ф л а к о н с р е а к т и в о м и п о в т о р и т ь т е с т .
5. Е с л и к о н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
с в я з а т ь с я с о с л у ж б о й т е х н и ч е с к о й п о д д е р ж к и B IO L A B O и л и с в а ш и м м е с т н ы м п р е д с т а в и т е л е м .
ф
Ф
ОЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ (1) (2)
А кт и в н о с т ь К К в с ы в о р о т к е о б у с л о в л е н а в о з р а с т о м , п о л о м , п р о и с х о ж д е н и е м , п о л н о т о й ,
ф и з и ч е с к о й а к т и в н о с т ь ю и д р у ги м и м е н е е и з в е с т н ы м и ге н е т и ч е с к и м и ф а к т о р а м и . Н а о с н о в а н и и
р е з у л ь т а т о в и с с л е д о в а н и я т р е х т и п о в п о п у л я ц и й в и д н о , ч т о а к т и в н о с т ь К К д е т е й в ы ш е а к т и в н о с т и
К К в зр о сл ы х, а к т и в н о с т ь К К у м у ж ч и н п р е в ы ш а е т э т о т ж е п о к а з а т е л ь у ж е н щ и н , а кт и в н о с т ь К К
а ф р о а м е р и к а н ц е в п р е в ы ш а е т т о т ж е п о к а з а т е л ь у е в р о п е й ц е в и л и л а т и н о а м е р и к а н ц е в . Н а п р и м е р ,
с п р а в о ч н ы й д и а п а з о н :
М у ж ч и н ыЕ д /л р к а т /л
при 3 0 ° С
при 3 7 ° С
2 5 - 1 1 5
3 8 -1 7 4
[0 ,4 3 -1 .9 5 ]
[0 ,6 5 -2 ,9 6 ]
Ж е н щ и н ыЕ д /л М к а т /л
при 3 0 ° С
при 3 7 ° С
1 7 -9 2
2 6 - 1 4 0
[0 ,3 0 -1 ,5 7 ]
[0 ,4 6 -2 ,3 8 ]
К а ж д о й л а б о р а т о р и и с л е д у е т у с т а н о в и т ь с в о и с о б с т в е н н ы е д и а п а з о н ы н о р м а л ь н ы х з н а ч е н и й д л я
группы н а с е л е н и я , к о т о р у ю о н а о б с л у ж и в а е т .
ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
В рамках цикла
п = 20
Нормальный
уровень
Высокий
уровень
Между циклами п =
20
Нормальный
уровень
Высокий
Уровень
С р е д н е е з н а ч е н и е5 9 ,6 2 8 2 ,7 С р е д н е е з н а ч е н и е5 9 ,6 2 8 4 ,2
Е д /л Е д /л
С р е д н е 0 ,9 2 1 ,4 9 С р е д н е 1,11 3 ,0 9
к в а д р а т и ч е с к о е к в а д р а т и ч е с к о е
о т к л о н е н и е Е д /л о т к л о н е н и е Е д /л
К о э ф ф и ц и е н т 1 ,5 4 0 ,5 3 К о э ф ф и ц и е н т 1 ,8 6 1 ,0 9
в а р и а ц и и % в а р и а ц и и %
Ч у в с т в и т е л ь н о с т ь д л я 3 3 0 Е д /л : 0 ,1 0 0 Д Д б с /м и н при 3 4 0 нм.
С р а в н и т е л ь н о е и с с л е д о в а н и е с и с п о л ь з о в а н и е м и м е ю щ е г о с я в п р о д а ж е р е а к т и в а при 3 7 ° С
(п = 2 4 );
у = 1 , 0 9 х - 7 , 8 8 г = 0 ,9 9 9 5
ЛИНЕЙНОСТЬ
Т е с т я в л я е т с я л и н е й н ы м д о 1 0 0 0 Е д /л (1 7 к а т /л .).
Е с л и Д А б с /м и н > 0 ,3 0 0 , р а з б а в и т ь п р о б у с о л я н ы м р а с т в о р о м и п о в т о р и т ь т е с т , у ч и ты в ая
к о э ф ф и ц и е н т р а з б а в л е н и я . П р е д е л л и н е й н о с т и з а в и с и т о т с о о т н о ш е н и я п р о б а /р е а к т и в .
НЕАВТОМАТИЧЕСКАЯ ПРОЦЕДУРА
О с т а в ь т е р е а к т и в ы и пр о б ы при к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е .
______
П и п е т и р о в а т ь в т е р м о с т а т и ч е с к и е кю веты с д л и н о й о п т и ч е с к о го п у ти 1 см:
Рабочий реактив 1 мл
Д о в е с т и д о 3 7 ° С (3 0 ° С ), з а т е м д о б а в и т ь :
Проба 50 рл
П е р е м е ш а т ь . В к л ю ч и ть т а й м е р и з а р е ги с т р и р о в а т ь и с х о д н о е з н а ч е н и е о п т и ч е с к о й п л о тн о с ти
с п у с тя 2 м и н у ты п р и 3 4 0 н м . Р е г и с т р и р о в а т ь з н а ч е н и я о п т и ч е с к о й п л о т н о с т и к а ж д у ю м и н у ту в
т е ч е н и е 3 -х м и н у т._____________________________________________________________________________________________
41
--- стр. 42 ---
Р а с с ч и т а т ь и з м е н е н и е а б с о р б ц и и в м и н у т у (Д А б с /м и н ),
Примечание: П о з а п р о с у п р е д о с т а в л я ю т с я с п е ц и ф и ч е с к и е п р о ц е д у р ы д л я а в т о м а т и ч е с к и х
п р и б о р о в . О б р а т и т ь с я в с л у ж б у т е х н и ч е с к о й п о д д е р ж к и B IO L A B O ,
ВЫЧИСЛЕНИЯ
В ы ч и сл я ть р е з у л ь т а т с л е д у ю щ и м о б р а з о м :
С теоретическим коэффициентом:
Ед/л = (ДАбс/мин) X 3333
Мкат/л = Ед/л / 60
С мультикалибратором:
Активность КК = (ДАбс/мин) тест /(ДАбс/мин) калибратор х Концентрация калибратора
т
Ф
42
--- стр. 44 ---
ф
А в т о м а т и ч е с к и й п р и б о р : р е а к т и в ы R1 и R 2 д о п у с к а е т с я д о б а в л я т ь п о о т д е л ь н о с т и (с м , §
НЕАВТОМАТИЧЕСКАЯ ПРОЦЕДУРА).
СТАБИЛЬНОСТЬ И ХРАНЕНИЕ
Хранить при температуре 18-25**С, в затемненном месте.
• Н е в с к р ы ты е у п а к о в к и с р е а к т и в а м и ; го д н ы к у п о т р е б л е н и ю д о и с т е ч е н и я с р о к а го д н о с ти ,
у к а з а н н о го н а я р л ы к е .
• П о с л е в с кр ы ти я у п а к о в к и р е а к т и в ы с т а б и л ь н ы в т е ч е н и е м и н и м у м 6 м е с я ц е в п р и у сл о в и и
о тс у тс т в и я з а г р я з н е н и я .
Р а б о ч и й р е а к т и в с т а б и л е н в т е ч е н и е м и н и м у м 3 0 д н е й п р и 2 -8 °С .
С т а б и л ь н о с т ь с т а н д а р т а (ф л а к о н R 3 ); Н е с к о л ь к о н е д е л ь (п е р е н е с т и т р е б у е м о е
к о л и ч е с тв о , за к р ы т ь к р ы ш к о й и х р а н и т ь при 1 8 -2 5 ° С ).
Н е и с п о л ь з о в а т ь л ю б о й р е а к т и в в с л у ч а е п о м у т н е н и я и л и е с л и о п т и ч е с к а я п л о т н о с т ь р а б о ч е го
р е а к т и в а > 0 ,3 0 0 п р и 4 9 0 нм .
Д а н н ы й н а б о р м о ж н о т р а н с п о р т и р о в а т ь в т е ч е н и е м и н и м у м 1 н е д е л и п р и к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е .
ОТБОР ПРОБ И РАБОТА С ПРОБАМИ (2)
С ы в о р о т ка или г е п а р и н и з и р о в а н н а я п л а з м а .
М о ч а ; С о б и р а т ь п р о б ы в т е ч е н и е т о ч н о о п р е д е л е н н ы х и н т е р в а л о в в р е м е н и (4 , 1 2 и ли 2 4 ч).
Р а з б а в и т ь 1 + 1 9 д и с т и л л и р о в а н н о й и л и д е м и н е р а л и р о в а н н о й в о д о й п е р е д о п р е д е л е н и е м .
• К р е а т и н н и н с т а б и л е н в п р о б е : в т е ч е н и е 2 4 ч при 2 -8 °С (з а м о р а ж и в а т ь д л я б о л е е д л и т е л ь н о го
х р а н е н и я ).
ИНТЕРФЕРЕНЦИЯ (1 ) (2 ) (3 ) (5 )
Г е м о л и з , б и л и р у б и н и л и п е м и я м о гу т о б у с л о в и т ь л о ж н о о т р и ц а т е л ь н ы е р е з у л ь т а т ы .
Б и л и р у б и н ; С м . § НЕАВТОМАТИЧЕСКАЯ ПРОЦЕДУРА, П р о ц е д у р а №2 ,
А с к о р б и н о в а я к и с л о т а , гл ю к о з а и н е к о т о р ы е а н т и б и о т и к и т а к ж е и н т е р ф е р и р у ю т с и з м е р е н и е м
к р е а т и н и н а в с о о т в е т с т в и и с м е т о д о м J a ffe .
И н т е р в а л с н я т и я п о к а з а н и й я в л я е т с я о с н о в н ы м ф а к т о р о м , о п р е д е л я ю щ и м с п е ц и ф и ч н о с т ь р е а к ц и и
J affe ; н е ко т о р ы е и н т е р ф е р е н т ы д е й с т в у ю т б ы стр о (а ц е т о а ц е т а т ) , а д р у г и е - м е д л е н н о (б е л к и ). Д л я
б о л ь ш и н с т в а к и н е т и ч е с к и х м е т о д о в р е к о м е н д у е т с я и с п о л ь з о в а т ь и н т е р в а л с н я т и я п о к а з а н и й 3 0 -
1 5 0 с е ку н д .
Б о л е е п о д р о б н ы й о б з о р ф а к т о р о в , о к а з ы в а ю щ и х в л и я н и е н а д а н н о е и с с л е д о в а н и е , п р и в е д е н в
п у б л и к а ц и и Y o u n g D .S .
НЕОБХОДИМЫЕ МАТЕРИАЛЫ, НЕ ВХОДЯЩИЕ В КОМПЛЕКТ
1 . О с н о в н о е л а б о р а т о р н о е о б о р у д о в а н и е д л я м е д и ц и н с к о го а н а л и з а .
2. Н о р м а л ь н а я и п а т о л о г и ч е с к а я ко н т р о л ь н ы е сы в о р о тки .
КАЛИБРОВКА
• С т а н д а р т , в кл ю ч е н н ы й в н а б о р (ф л а к о н R 3 ) и л и М у л ь т и к а л и б р а т о р B IO L A B O , R E F 9 5 0 1 5 .
• Т а к ж е л ю б о й к а л и б р а т о р , п р и п и с ы в а е м ы й к с п р а в о ч н о м у м е т о д у и л и м а т е р и а л у .
Ч а с т о т а к а л и б р о в ки з а в и с и т о т р а б о ч е г о с о с т о я н и я п р и б о р а и о т с о х р а н н о с т и р е а к т и в а .
Р е к о м е н д у е т с я в ы п о л н я т ь к а л и б р о в к у в с л е д у ю щ и х с л у ч а я х ;
1. П р и з а м е н е п а р т и и р е а к т и в а .
2. П о с л е о б с л у ж и в а ю щ и х п р о ц е д у р в о т н о ш е н и и п р и б о р а .
3. Е с л и к о н т р о л ь н ы е з н а ч е н и я в ы х о д я т з а п р е д е л ы у с т а н о в л е н н о г о д и а п а з о н а , д а ж е п о с л е
и с п о л ь з о в а н и я н о в о го ф л а к о н а с о с в е ж е й с ы в о р о тко й .
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
• B IO L A B O E X A T R O L -N (н о р м а л ь н ы е з н а ч е н и я ), R E F 9 5 0 1 0 .
• B IO L A B O E X A T R O L -P (п а т о л о г и ч е с к и е з н а ч е н и я ), R E F 9 5 0 1 1 .
• И с с л е д у е м а я к о н т р о л ь н а я с ы в о р о тк а , о т н о с я щ а я с я к т о м у ж е м е т о д у .
• В н е ш н я я п р о г р а м м а к о н т р о л я к а ч е с т в а .
Р е к о м е н д у е т с я в ы п о л н я т ь к о н т р о л ь к а ч е с т в а в с л е д у ю щ и х с л у ч а я х ;
• М и н и м у м о д и н р а з з а ц икл .
• М и н и м у м о д и н р а з в т е ч е н и е 2 4 ч а с о в .
• П р и з а м е н е ф л а к о н а и л и р е а к т и в а .
• П о с л е о б с л у ж и в а ю щ и х п р о ц е д у р в о т н о ш е н и и п р и б о р а .
Е с л и к о н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й , в ы п о л н и ть с л е д у ю щ и е
д е й с тв и я ;
1. П о в т о р и т ь т е с т с и с п о л ь з о в а н и е м т о го ж е к о н т р о л ь н о го р а с т в о р а .
44
--- стр. 45 ---
2. Е сл и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
п р и го т о в и ть с в е ж у ю к о н т р о л ь н у ю с ы в о р о тку и п о в то р и т ь т е с т .
3. Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
и с п о л ь з о в а ть но в ы й с[5л а к о н с к а л и б р а т о р о м и л и с в е ж и й к а л и б р а т о р , и п о в то р и т ь т е с т .
4. Е с л и к о н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
к а л и б р о в а т ь с и с п о л ь з о в а н и е м н о в о го ф л а к о н а с р е а к т и в о м .
5. Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
с в я з а т ь с я с о с л у ж б о й т е х н и ч е с к о й п о д д е р ж к и B IO L A B O или с в а ш и м м е с т н ы м п р е д с т а в и т е л е м .
ОЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ (2)
К р е а т и н и н м г/д л [ р м о л ь /л ]
М у ж ч и н ы 0 , 9 - 1 , 3
Ж е н щ и н ы 0 , 6 - 1 , 1
[8 0 -1 1 5 ]
[ 5 3 -9 7 ]
Моча
К р е а т и н и н м г / кг / 2 4 ч [ р м о л ь /к г / 2 4 ч 1]
М у ж ч и н ы 1 4 - 2 6
Ж е н щ и н ы 11 - 2 0
[ 1 2 4 -2 3 0 ]
[ 9 7 - 1 7 7 ]
С Г Ф (с к о р о с т ь
гл о м е р у л я р н о й
ф и л ь т р а ц и и )
м л в м и н у т у
В зр о с л ы е < 4 0 л е т
В зр о с л ы е > 4 0 л е т
1 2 0 ( 1 0 0 - 1 4 0 )
Ф и з и о л о г и ч е с к и
с н и ж а е т с я п р и б л и з и т е л ь н о н а
1 % в го д .
К а ж д о й л а б о р а т о р и и с л е д у е т у с т а н о в и т ь с в о и с о б с т в е н н ы е д и а п а з о н ы н о р м а л ь н ы х з н а ч е н и й д л я
группы н а с е л е н и я , к о т о р у ю о н а о б с л у ж и в а е т .
ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ (п р о ц е д у р а №1)
В рамках цикла
п^20
Нормальный
уровень
Высокий
уровень
Между циклами
п^20
Нормальный
уровень
Высокий
уровень
С р е д н е е з н а ч е н и е1 ,3 2 3 ,6 5 С р е д н е е з н а ч е н и е1 ,0 9 4 ,6 3
м г/д л м г/д л
С р е д н е 0 ,0 1 6 0 ,0 3 С р е д н е 0 ,0 6 5 0 ,1 2 5
к в а д р а т и ч е с к о е к в а д р а т и ч е с к о е
о т к л о н е н и е м г/д л о т к л о н е н и е м г/д л
К о э ф ф и ц и е н т 1.2 0,8 К о э ф ф и ц и е н т 5 ,9 2 ,7
в а р и а ц и и % в ^ и а ц и и %
П р е д е л к о л и ч е с т в е н н о го о п р е д е л е н и я ; п р и б л и з и т е л ь н о 0 ,2 м г/д л п р и 3 7 ° С .
Ч у в с т в и т е л ь н о с т ь д л я 1 м г/д л ; п р и б л и з и т е л ь н о 1 8 м А б с /м и н п р и 37°С.
С р а в н и т е л ь н о е и с с л е д о в а н и е с и с п о л ь з о в а н и е м и м е ю щ е го с я в п р о д а ж е р е а к т и в а ;
у = 1 ,0 6 х - 0 ,0 5 1 г = 1 ,0 0 0
ЛИНЕЙНОСТЬ
Т е с т я в л я е т с я л и н е й н ы м д о 1 5 м г/д л (1 3 2 7 р м о л ь /л ). В ы ш е , р а з б а в и т ь п р о б у с о л я н ы м р а с т в о р о м и
п о в то р и ть т е с т , у ч и т ы в а я к о э ф ф и ц и е н т р а з б а в л е н и я . П р е д е л л и н е й н о с т и з а в и с и т о т с о о т н о ш е н и я
п р о б а /р е а к т и в .
НЕАВТОМАТИЧЕСКАЯ ПРОЦЕДУРА
П о д д е р ж и в а т ь т е м п е р а т у р у р е а к т и в о в и п р о б , р а в н у ю т е м п е р а т у р е и з м е р е н и я . В ы п о л н я ть в се
те с т ы при п о с т о я н н о й т е м п е р а т у р е (с м . П р и м е ч а н и е 4 ).
Процедура №1: Для неиктерических проб с использованием «рабочего реактива».
П и п е т и р о в а т ь в кю в е ты с д л и н о й
о п т и ч е с к о го п у ти 1 см ;
Холостой реактив
(дополнительно)
Стандарт Тест
Рабочий реактив 1 мл 1 мл 1 мл
Деминерализированная вода 100 рл
Стандарт 100 рл
Проба (Примечание 1) 100 рл
45
--- стр. 46 ---
т
Х о р о ш о п е р е м е ш а т ь . С п у с т я 3 0 с е к у н д з а р е ги с т р и р о в а т ь з н а ч е н и е о п т и ч е с к о й п л о т н о с т и А 1 при
4 9 0 нм ( 4 9 0 - 5 1 0 ) п о х о л о с т о м у р е а к т и в у или д и с т и л л и р о в а н н о й в о д е . Р о в н о 2 м и н у ты с п у с тя
з а р е ги с т р и р о в а т ь з н а ч е н и е о п т и ч е с к о й п л о т н о с т и А 2 ._____________________________________________________
Процедура №2; Для иктерических проб с использованием using «би-реактива».
П и п е т и р о в а т ь в кю в еты с д л и н о й
о п т и ч е с к о го п у ти 1 см :
Холостой реактив
(дополнительно)
Стандарт Тест
Реактив R1 0,5 мл 0,5 мл 0,5 мл
Деминерализированная вода 100 рл
Стандарт 100 мл
Проба (Примечание 1) 100 рл
И н к у б и р о в а т ь в т е ч е н и е 5 м и н у т при п о с т о я н н о й т е м п е р а т у р е , з а т е м
д о б а в и ть :
Реактив R2 0,5 мл 0,5 мл 0,5 мл
Х о р о ш о п е р е м е ш а т ь . С п у с т я 3 0 с е к у н д з а р е ги с т р и р о в а т ь з н а ч е н и е о п т и ч е с к о й п л о тн о с ти А 1 при
4 9 0 нм ( 4 9 0 - 5 1 0 ) по х о л о с т о м у р е а к т и в у и л и д и с т и л л и р о в а н н о й в о д е . Р о в н о 2 м и н уты с п ус тя
з а р е ги с т р и р о в а т ь з н а ч е н и е о п т и ч е с к о й п л о т н о с т и А 2 .
Примечания:
1. П робы : с ы в о р о тк а , п л а з м а и л и р а з б а в л е н н а я м о ч а 1 + 1 9 д и с т и л л и р о в а н н о й в о д о й .
2 . П о з а п р о с у п р е д о с т а в л я ю т с я с п е ц и ф и ч е с к и е п р о ц е д у р ы д л я а в т о м а т и ч е с к и х п р и б о р о в .
О б р а т и т ь с я в с л у ж б у т е х н и ч е с к о й п о д д е р ж к и B IO L A B O .
3 . Р а б о ч и й р е а к т и в (с м § ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАКТИВОВ).
4. В ы п о л н я ть д а н н ы й т е с т п р и 37° С в ц е л я х о п т и м и з а ц и и ч у в с т в и т е л ь н о с т и .
ВЫЧИСЛЕНИЯ
В ы ч и сл я ть р е з у л ь т а т с л е д у ю щ и м о б р а з о м :
Сыворотка или плазма
Результат = (А2-А1) тест / (А2-А1) стандарт х концентрация стандарта
М о ч а , р а з б а в л е н н а я 1 + 1 9 : У м н о ж и т ь п о л у ч е н н ы й в ы ш е р е з у л ь т а т н а к о э ф ф и ц и е н т р а з б а в л е н и я
20.
С ко р о с т ь г л о м е р у л я р н о й ф и л ь т р а ц и и (м е т о д о м о п р е д е л е н и я к л и р е н с а к р е а т и н и н а );
С использованием 24 ч мочи и креатинина сыворотки:
Скорректированный клиренс креатинина (мл/мин) = UCr х V х 1,73 / SCr х BSA
и С г = К р е а т и н и н в м о ч е в м г/д л ил и р м о л ь /л ,
S C r = К р е а т и н и н с в ы с о р о т к е в м г/д л и л и р м о л ь /л .
V = О б ъ е м в ы д е л я е м о й м о ч и в м л /м и н (о б ъ е м 2 4 ч м о ч и /1 4 4 0 )
B S A = П л о щ а д ь п о в е р х н о с т и т е л а в м^.
ИЛИ
Используя только креатитин в сыворотке (по формуле Cockroft и Gault):
Клиренс креатинина = 140 - возраст в годах х 2,12 х вес в кг х К / сывороточный креатинин
(рмоль/л) X BSA (м^)
К = 1,00 д л я м у ж ч и н и л и К = 0 ,8 5 д л я ж е н щ и н
46
--- стр. 48 ---
т
ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАКТИВА
Б ы стро д о б а в и т ь с о д е р ж и м о е ф л а к о н а R 2 (с у б с т р а т ) во ф л а к о н R 1 (б у ф е р ). П е р е д
и с п о л ь з о в а н и е м р е а к т и в а о с т о р о ж н о п е р е м е ш а т ь и д о ж д а т ь с я п о л н о го р а с т в о р е н и я
(п р и б л и з и т е л ь н о 2 м и н у ты ).
Д л я с н я т и я а л ю м и н и е в о й кр ы ш ки н е и с п о л ь з о в а т ь о с т р ы е и н с т р у м е н т ы .
СТАБИЛЬНОСТЬ И ХРАНЕНИЕ
• Н е в с к р ы ты е у п а к о в к и с р е а к т и в а м и ; го д н ы к у п о т р е б л е н и ю д о и с т е ч е н и я с р о к а го д н о с ти ,
у к а з а н н о го н а я р л ы к е .
• П о с л е в с кр ы ти я у п а к о в к и :
Р а б о ч и й р е а к т и в с т а б и л е н в т е ч е н и е м и н и м у м 3 0 д н е й при у с л о в и и о т с у т с т в и я з а гр я з н е н и я .
Н е и с п о л ь з о в а т ь р е а к т и в в с л у ч а е п о м у т н е н и я , или е с л и о п т и ч е с к а я п л о т н о с т ь по х о л о с т о м у
р е а к т и в у при 4 0 5 нм > 0 ,4 0 0 ,
Д а н н ы й н а б о р м о ж н о т р а н с п о р т и р о в а т ь в т е ч е н и е м и н и м у м 1 н е д е л и п р и к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е .
ОТБОР ПРОБ И РАБОТА С ПРОБАМИ (1) (2)
Н е г е м о л и з и р о в а н н а я с ы в о р о т к а и л и Э Д Т А -п л а з м а (д о 1 м г/м л кр о в и ). Г е п а р и н п р и в о д и т к
п о м у т н е н и ю р е а к ц и о н н о й с м е с и ; ц и т р а т , о к с а л а т и ф л у о р и д п о д а в л я ю т а к т и в н о с т ь Г Г Т н а 1 0 -
1 5 % . Г Г Т с т а б и л ь н а в с ы в о р о т к е в т е ч е н и е :
• 1 м е с я ц а при 2 -8 ° С
• 1 го д а п р и -2 0 ° С .
ИНТЕРФЕРЕНЦИЯ ( 1 ) ( 3 )
Г е м о л и з и н т е р ф е р и р у е т с т е с т о м .
Б о л е е п о д р о б н ы й о б з о р ф а к т о р о в , о к а з ы в а ю щ и х в л и я н и е н а д а н н о е и с с л е д о в а н и е , п р и в е д е н в
п у б л и к а ц и и Y o u n g D .S ,
НЕОБХОДИМЫЕ МАТЕРИАЛЫ, НЕ ВХОДЯЩИЕ В КОМПЛЕКТ
1. О с н о в н о е л а б о р а т о р н о е о б о р у д о в а н и е д л я м е д и ц и н с к о го а н а л и з а .
2. Н о р м а л ь н а я и п а т о л о г и ч е с к а я к о н т р о л ь н ы е сы в о р о тки ,
КАЛИБРОВКА
Р е з у л ь т а т ы з а в и с я т о т т о ч н о с т и к а л и б р о в к и п р и б о р а , в р е м е н и т е с т и р о в а н и я , с о о т н о ш е н и я
р е а к т и в /п р о б а , а т а к ж е р е гу л и р о в а н и я т е м п е р а т у р ы .
Р е к о м е н д у е т с я и с п о л ь з о в а т ь т е о р е т и ч е с к и й к а л и б р о в о ч н ы й к о э ф ф и ц и е н т (§ ВЫЧИСЛЕНИЯ) или
м у л ь ти п а р а м е т р и ч е с к и й к а л и б р а т о р , о т н о с я щ и й с я к с п р а в о ч н о м у м е т о д у или м а т е р и а л у .
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
• B IO L A B O E X A T R O L -N (н о р м а л ь н ы е з н а ч е н и я ) R E F 9 5 0 1 0 .
• B IO L A B O E X A T R O L - P (п а т о л о г и ч е с к и е з н а ч е н и я ) R E F 9 5 0 1 1 .
• Д р у га я и с с л е д о в а н н а я к о н т р о л ь н а я с ы в о р о тка , о т н о с я щ а я с я к т о м у ж е м е т о д у .
• В н е ш н я я п р о г р а м м а к о н т р о л я к а ч е с т в а .
Р е к о м е н д у е т с я в ы п о л н я т ь к о н т р о л ь к а ч е с т в а в с л е д у ю щ и х с л у ч а я х :
• М и н и м у м о д и н р а з з а ц и кл .
• М и н и м у м о д и н р а з в т е ч е н и е 2 4 ч а с о в .
• П р и з а м е н е ф л а к о н а и л и р е а к т и в а .
• П о с л е о б с л у ж и в а ю щ и х п р о ц е д у р в о т н о ш е н и и п р и б о р а .
Е сл и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й , в ы п о л н и ть с л е д у ю щ и е
д е й с тв и я :
1. П о в т о р и т ь т е с т с и с п о л ь з о в а н и е м т о го ж е к о н т р о л ь н о го р а с т в о р а .
2. Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
п р и го т о в и ть с в е ж у ю к о н т р о л ь н у ю с ы в о р о тк у и п о в то р и т ь т е с т .
3. Е сл и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й , у то ч н и ть
п а р а м е т р ы а н а л и з а ; д л и н а в о л н ы , т е м п е р а т у р е , с о о т н о ш е н и е п р о б а /р е а к т и в , п р о д о л ж и т е л ь н о с т ь
и з м е р е н и я , к а л и б р о в о ч н ы й к о э ф ф и ц и е н т .
4. Е сл и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
и с п о л ь з о в а т ь н о в ы й ф л а к о н с р е а к т и в о м и п о в т о р и т ь т е с т .
5. Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
с в я з а т ь с я с о с л у ж б о й т е х н и ч е с к о й п о д д е р ж к и B IO L A B O и л и с в а ш и м м е с т н ы м п р е д с т а в и т е л е м .
ОЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ (2)
Активность ГГТ взрослых, измеренная при 37“С
М у ж ч и н ы (Е д /л ) 2 - 3 0
48
--- стр. 49 ---
Ж е н щ и н ы (Е д /л ) 1 -2 4
К а ж д о й л а б о р а т о р и и с л е д у е т у с т а н о в и т ь с в о и с о б с т в е н н ы е д и а п а з о н ы н о р м а л ь н ы х з н а ч е н и й д л я
группы н а с е л е н и я , к о т о р у ю о н а о б с л у ж и в а е т .
ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
В рамках цикла Нормальный Высокий Между циклами Нормальный Высокий
п = 30 уровень уровень п = 37 уровень уровень
С р е д н е е з н а ч е н и е Е д /л 2 9 ,2 1 1 5 ,1 С р е д н е е з н а ч е н и е Е д /л3 2 ,7 1 8 8 ,4
С р е д н е к в а д р а т и ч е с к о е 0 ,4 0 52,6 С р е д н е к в а д р а т и ч е с к о е 0 ,3 81 ,9 5
о т к л о н е н и е Е д /л о т к л о н е н и е Е д /л
К о э ф ф и ц и е н т в а р и а ц и и 1 ,3 92 ,2 5 К о э ф ф и ц и е н т в а р и а ц и и1 ,1 6 1 ,0 4
% %
П р е д е л к о л и ч е с т в е н н о го о п р е д е л е н и я ; п р и б л и з и т е л ь н о 4 Е д /л .
Ч у в с т в и т е л ь н о с т ь д л я 21 Е д /л : п р и б л и з и т е л ь н о 0 ,0 1 0 Д А б с /м и н .
С р а в н и т е л ь н о е и с с л е д о в а н и е с и с п о л ь з о в а н и е м и м е ю щ е г о с я в п р о д а ж е р е аю -и в а :
у= 1 ,0 0 3 х - 4 ,7 2 4 6 г = 0 .9 9 6 4
ЛИНЕЙНОСТЬ
Т е с т я в л я е т с я л и н е й н ы м д о 3 2 0 Е д /л ( 5 , 3 р к а т /л ).
В ы ш е , р а з б а в и т ь п р о б у с о л я н ы м р а с т в о р о м и п о в то р и т ь т е с т , у ч и т ы в а я к о э ф ф и ц и е н т
р а з б а в л е н и я . П р е д е л л и н е й н о с т и з а в и с и т о т с о о т н о ш е н и я п р о б а /р е а к т и в .
НЕАВТОМАТИЧЕСКАЯ ПРОЦЕДУРА
О с т а в и т ь р е а к т и в ы и п р о б ы п р и к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е .
П и п е т и р о в а т ь в т е р м о с т а т и ч е с к и е кю в е ты с д л и н о й о п т и ч е с к о го п у т и 1 см ;
Реактив 1 мл
Д о в е с т и д о З У Х (3 0 ° С ), з а т е м д о б а в и т ь ;
Проба или калибратор 50 рл
П е р е м е ш а т ь . З а р е г и с т р и р о в а т ь и с х о д н о е з н а ч е н и е о п т и ч е с к о й п л о т н о с т и с п у с т я 3 0 с е ку н д ,
р е ги с т р и р о в а т ь о п т и ч е с к у ю п л о т н о с т ь при 4 0 5 нм к а ж д у ю м и н у т у в т е ч е н и е 3 -х м и н у т.
В ы ч и сл и ть и з м е н е н и е з н а ч е н и й о п т и ч е с к о й п л о т н о с т и в м и н у т у (Д А б с /м и н ).
Примечание; П о з а п р о с у п р е д о с т а в л я ю т с я с п е ц и ф и ч е с к и е п р о ц е д у р ы д л я а в т о м а т и ч е с к и х
п р и б о р о в . О б р а т и т ь с я в с л у ж б у т е х н и ч е с к о й п о д д е р ж к и B IO L A B O .
ВЫЧИСЛЕНИЯ
В ы ч и сл я ть р е з у л ь т а т с л е д у ю щ и м о б р а з о м ;
Ф
С т е о р е т и ч е с к и м к о э ф ф и ц и е н т о м ;
Ед/л = (ДАбс/мин) X 2121
ркат/л = Ед/л / 60
С с ы в о р о то ч н ы м м у л ь т и к а л и б р а т о р о м ;
Активность ГГТ = (ДАбс/мин) тест/(ДАбс/мин) калибратор х Концентрация калибратора
49
--- стр. 50 ---
Г Л Ю К О З А Г О Д - П А П
Р е а к т и в д л я к о л и ч е с т в е н н о г о о п р е д е л е н и я гл ю ко зы в ч е л о в е ч е с к о й п л а з м е , с ы в о р о тке ,
с п и н н о м о з го в о й ж и д к о с т и ( С М Ж ) и л и м о ч е .
R E F 8 0 1 0 9 R1 1 х 2 5 0 м л R 2 1 x 3 .7 5 м лR 3 1 X 5 м л
R E F 8 0 0 0 9 R1 1 х 5 0 0 м л R 2 1 х 7 .5 м л R 3 1 X 5 м л
R E F 8 7 1 0 9 R1 6 х 2 5 0 м лR 2 6 х З ,7 5 м л R 3 1 X 5 м л
R E F 1 6 G L 8 R 1 6x 1000м л R 2 6 x 1 5 м л R 3 1 X 1 0 м л
т
ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ IN VITRO
КЛИНИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ (1) (6)
У р о в е н ь гл ю ко зы в кр о в и к о л е б л е т с я в п р е д е л а х д о с т а т о ч н о у з к о го д и а п а з о н а п р и р а зл и ч н ы х
у с л о в и я х (е д а , г о л о д а н и е , и л и т я ж е л ы е ф и з и ч е с к и е н а гр у з к и ) б л а г о д а р я г о р м о н а м -р е гу л я т о р а м ,
т а к и м к а к и н с у л и н , гл ю к а го н и л и а д р е н а л и н . И з м е р е н и е у р о в н я гл ю ко зы я в л я е т с я о д н о й из
н а и б о л е е ч а с т о в ы п о л н я е м ы х в л а б о р а т о р и я х , з а н и м а ю щ и х с я б и о х и м и ч е с к и м и а н а л и з а м и ,
п р о ц е д у р , в к о м б и н а ц и и с д р у ги м и т е с т а м и н а т о л е р а н т н о с т ь (п р о б а н а т о л е р а н т н о с т ь к гл ю ко зе ,
т е с т н а о п р е д е л е н и е у р о в н я гл ю ко зы ч е р е з 2 ч а с а п о с л е е д ы ...).
Н а и б о л е е ч а с т о в с т р е ч а ю щ и м с я н а р у ш е н и е м у гл е в о д н о г о о б м е н а в кр о в и я в л я е т с я
ги п е р гл и к е м и я , в ы з в а н н а я с а х а р н ы м д и а б е т о м .
Г и п е р гл и к е м и я в ы ш е 3 0 0 м г/д л (1 6 ,5 м м о л ь /л ) м о ж е т с п р о в о ц и р о в а т ь к е т о а ц и д о з и
ги п е р о с м о л я р н у ю ко м у .
П р и п р о д о л ж и т е л ь н о й ги п о гл и к е м и и , н и ж е 3 0 м г/д л (1 ,7 м м о л ь /л ), в о з м о ж н о н е о б р а т и м о е
п о в р е ж д е н и е м о з га .
ПРИНЦИП (4 ) (5 )
М е т о д T rin d e r. Г л ю к о з а о к и с л я е т с я с п о м о щ ь ю гл ю ко з о к с и з а д ы д о гл ю ко н о в о й ки с л о ты и
п е р о к с и д а в о д о р о д а , ко то р ы й в к о м б и н а ц и и с п и р о к с и д а з о й , р е а г и р у е т с х л о р о -4 -ф е н о л о м и П А П ,
о б р а з у я кр ас н ы й х и н о н о м и н . У р о в е н ь п о гл о щ е н и я о к р а ш е н н о г о к о м п л е к с н о го с о е д и н е н и я
п р о п о р ц и о н а л ь н ы й к о н ц е н т р а ц и и гл ю ко зы в о б р а з ц е и з м е р я е т с я в д и а п а з о н е 5 0 0 нм .
СОСТАВ РЕАКТИВОВ
Флакон R1 ФЕРМЕНТЫ-БУФЕР
Ф о с ф а тн ы й б у ф е р 1 5 0 м м о л ь /л
Г л ю ко з а о к с и д а з а (Г О Д ) > 2 0 ООО Е д /л
П е р о к с и д а з а (П О Д ) > 1 0ОО Е д /л
4 -а м и н о -а н т и п и р и н ( П А П ) 0 ,8 м м о л ь /л
Флакон R2 ХРОМОГЕН
Х л о р о -4 -ф е н о л
Флакон R3 СТАНДАРТ
Г л ю ко з а
2 м м о л ь /л
1 0 0 м г/д л (5 ,5 5 м м о л ь /л )
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Р е а кти в ы B IO L A B O п р е д н а з н а ч е н ы д л я п р о ф е с с и о н а л ь н о й д и а гн о с т и к и in vitro.
• И с п о л ь з о в а т ь с о о т в е т с т в у ю щ у ю з а щ и т у (з а щ и т н а я о д е ж д а , п е р ч а т к и , о ч к и ),
• Н е п и п е т и р о в а т ь р то м .
• В с л у ч а е к о н т а к т а с к о ж е й и г л а з а м и т щ а т е л ь н о п р о м ы ть п о в р е ж д е н н ы е у ч а с т к и б о л ь ш и м
ко л и ч е с т в о м во д ы и о б р а т и т ь с я з а м е д и ц и н с к о й п о м о щ ь ю .
• П а с п о р т б е з о п а с н о с т и х и м и ч е с к о го в е щ е с т в а п р е д о с т а в л я е т с я п о з а п р о с у .
• У т и л и з а ц и я о тх о д о в : В с о о т в е т с т в и и с д е й с т в у ю щ и м в с т р а н е з а к о н о д а т е л ь с т в о м .
С о в с е м и п р о б а м и с л е д у е т о б р а щ а т ь с я к а к с п о т е н ц и а л ь н ы м и с т о ч н и к о м и н ф е к ц и и в с о о т в е т с т в и и
с п р и н ц и п а м и д о б р о с о в е с т н о й л а б о р а т о р н о й п р а к т и ки , и с о б л ю д а я с о о т в е т с т в у ю щ и е м ер ы
п р е д о с т о р о ж н о с т и . В с о о т в е т с т в и и с д е й с т в у ю щ и м в с т р а н е з а к о н о д а т е л ь с т в о м .
50
--- стр. 51 ---
ПРИГОТОВЛЕНИЕ РЕАКТИВА
И с п о л ь з у я м е р н у ю к о л б у , о т м е р и т ь у к а з а н н о е н а я р л ы к е ф л а к о н а R 1 (Ф е р м е н т ы -б у ф е р )
к о л и ч е с т в о д е м и н е р а л и з и р о в а н н о й воды .
П е р е н е с т и с о д е р ж и м о е ф л а к о н а R 1 в к о л б у и о с т о р о ж н о п е р е м е ш а т ь д о п о л н о го р а с т в о р е н и я
(п р и б л и з и т е л ь н о 2 м и н у т ы ). З а т е м д о б а в и т ь с о д е р ж и м о е ф л а к о н а R 2 и о с т о р о ж н о п е р е м е ш а т ь .
Ф л а к о н R 1 и R 2 ; Е с л и п р и м е н и м о , н е и с п о л ь з о в а т ь о с т р ы е и н с т р у м е н т ы д л я с н я т и я а л ю м и н и е в о й
кр ы ш ки .
СТАБИЛЬНОСТЬ И ХРАНЕНИЕ
Хранить при температуре С, в затемненном месте.
• Н е в с к р ы ты е у п а к о в к и с р е а к т и в а м и ; го д н ы к у п о т р е б л е н и ю д о и с т е ч е н и я с р о к а го д н о с ти ,
у к а з а н н о го н а я р л ы ке .
• П о с л е в с кр ы ти я у п а к о в к и : Р а б о ч и й р е а к т и в с т а б и л е н в т е ч е н и е м и н и м у м 1 го д а при у сл о в и и
о т с у т с т в и я з а г р я з н е н и я .
С т а б и л ь н о с т ь с т а н д а р т а (Ф л а к о н R 3 ) : Н е с к о л ь к о н е д е л ь (п е р е н е с т и т р е б у е м о е
к о л и ч е с т в о , з а к р ы т ь к р ы ш ко й и х р а н и т ь при г - в Х ) .
Н е и с п о л ь з о в а т ь р е а к т и в в с л у ч а е п о м у т н е н и я и л и е с л и р е з у л ь т а т по х о л о с т о м у р е а к т и в у при 5 0 0
н м > 0 ,4 0 0 .
Д а н н ы й н а б о р м о ж н о т р а н с п о р т и р о в а т ь в т е ч е н и е м и н и м у м 1 н е д е л и п р и к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е .
ОТБОР ПРОБ И РАБОТА С ПРОБАМИ (2)
С ы в о р о т ка и л и п л а з м а :
Б ью тро о т д е л и т ь о т к л е т о к с ц е л ь ю п р е д о т в р а щ е н и я гл и к о л и з а . Е с л и в к а ч е с т в е к о н с е р в а н т а
и с п о л ь з у е т с я ф л у о р и д , в т е ч е н и е п е р в ы х 2-х ч а с о в н а б л ю д а е т с я с п а д н а 9 м г/д л (0,5 м м о л ь /л ),
з а т е м к о н ц е н т р а ц и я с т а б и л и з и р у е т с я .
Г л ю к о з а с т а б и л ь н а в с ы в о р о т к е и л и ге п а р и н и з и р о в а н н о й п л а з м е :
• в т е ч е н и е 8 ч п р и 2 5 ° С
• в т е ч е н и е 7 2 ч п р и 2 -8 ° С
Г л ю ко з а с т а б и л ь н а в п л а з м е (Ф л у о р и д н а т р и я или й о д о а ц е т а т ):
• в т е ч е н и е 2 4 ч п р и к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е .
С М Ж :
О б р а б а т ы в а т ь н е м е д л е н н о в о и з б е ж а н и е о ш и б о ч н о н и з к и х р е з у л ь т а т о в . Х р а н и т е при -2 0 ° С .
М о ч а :
О т о б р а т ь в б у ты л и и з т е м н о г о с т е к л а и х р а н и т ь при 2 “8 ° С . К о н с е р в и р о в а т ь 2 4 ч м о ч у с
и с п о л ь з о в а н и е м 5 м л к р и с т а л л и ч е с к о й у кс у с н о й ки с л о ты и л и 5 г б е н з о а т а н а т р и я или ф л у о р и д а
н а тр и я .
ИНТЕРФЕРЕНЦИЯ (3)
А с к о р б и н о в а я к и с л о т а : О т с у т с т в и е и н т е р ф е р е н ц и и д о 10 м г/д л .
О б щ и й б и л и р у б и н : О т р и ц а т е л ь н а я и н т е р ф е р е н ц и я с в ы ш е 2 0 м г/д л .
П р я м о й б и л и р у б и н : О т с у т с т в и е и н т е р ф е р е н ц и и .
Г е м о л и з : О т с у т с т в и е и н т е р ф е р е н ц и и .
Л и п е м и я : П о л о ж и т е л ь н а я и н т е р ф е р е н ц и я с в ы ш е 6 2 6 м г/д л т р и г л и ц е р и д о в .
Б о л е е п о д р о б н ы й о б з о р ф а к т о р о в , о к а з ы в а ю щ и х в л и я н и е н а д а н н о е и с с л е д о в а н и е , п р и в е д е н в
п у б л и к а ц и и Y o u n g D .S .
НЕОБХОДИМЫЕ МАТЕРИАЛЫ, НЕ ВХОДЯЩИЕ В КОМПЛЕКТ
1. О с н о в н о е л а б о р а т о р н о е о б о р у д о в а н и е д л я м е д и ц и н с к о го а н а л и з а .
2. Н о р м а л ь н а я и п а т о л о г и ч е с к а я к о н т р о л ь н ы е с ы в о р о тки .
КАЛИБРОВКА
• С т а н д а р т , в кл ю ч е н н ы й в н а б о р (ф л а к о н R 3 ) или М у л ь т и к а л и б р а т о р B IO L A B O , R E F 9 5 0 1 5 .
• Т а к ж е л ю б о й к а л и б р а т о р , п р и п и с ы в а е м ы й к с п р а в о ч н о м у м е т о д у и л и м а т е р и а л у .
Ч а с т о т а к а л и б р о в к и з а в и с и т о т р а б о ч е г о с о с т о я н и я п р и б о р а и о т с о х р а н н о с т и р е а к т и в а .
Р е к о м е н д у е т с я в ы п о л н я т ь к а л и б р о в к у в с л е д у ю щ и х с л у ч а я х :
1. П р и з а м е н е п а р т и и р е а к т и в а .
2 . П о с л е о б с л у ж и в а ю щ и х п р о ц е д у р в о т н о ш е н и и п р и б о р а .
3. Е с л и к о н т р о л ь н ы е з н а ч е н и я в ы х о д я т з а п р е д е л ы у с т а н о в л е н н о го д и а п а з о н а , д а ж е п о с л е
и с п о л ь з о в а н и я н о в о го ф л а к о н а с о с в е ж е й с ы в о р о тко й .
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
• B IO L A B O E X A T R O L -N (н о р м а л ь н ы е з н а ч е н и я ), R E F 9 5 0 1 0 .
51
--- стр. 52 ---
• B IO L A B O E X A T R O L -P (п а т о л о г и ч е с к и е з н а ч е н и я ), R E F 9 5 0 1 1 .
• И с с л е д у е м а я к о н т р о л ь н а я с ы в о р о т к а , о т н о с я щ а я с я к т о м у ж е м е т о д у .
• В н е ш н я я п р о гр а м м а к о н т р о л я к а ч е с т в а .
Р е к о м е н д у е т с я в ы п о л н я т ь к о н т р о л ь к а ч е с т в а в с л е д у ю щ и х с л у ч а я х ;
• М и н и м у м о д и н р а з з а ц и кл .
• М и н и м у м о д и н р а з в т е ч е н и е 2 4 ч а с о в .
• П р и з а м е н е ф л а к о н а и л и р е а к т и в а .
• П о с л е о б с л у ж и в а ю щ и х п р о ц е д у р в о т н о ш е н и и п р и б о р а .
Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й , в ы п о л н и ть с л е д у ю щ и е
д е й с т в и я :
1. П о в т о р и ть т е с т с и с п о л ь з о в а н и е м т о го ж е к о н т р о л ь н о го р а с т в о р а .
2. Е с л и к о н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
п р и го т о в и ть с в е ж и й к о н т р о л ь н ы й р а с т в о р и п о в то р и т ь т е с т .
3. Е с л и к о н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
и с п о л ь з о в а т ь но в ы й ф л а к о н с к а л и б р а т о р о м или с в е ж и й к а л и б р а т о р , и п о в т о р и т ь т е с т .
4 . Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
к а л и б р о в а т ь с и с п о л ь з о в а н и е м н о в о го ф л а к о н а с р е а к т и в о м .
5. Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
с в я з а т ь с я со с л у ж б о й т е х н и ч е с к о й п о д д е р ж к и B 1 0 L A B 0 и л и с в а ш и м м е с т н ы м п р е д с т а в и т е л е м .
ОЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ (2 )
В с ы в о р о тк е и л и п л а з м е : м г/д л[м м о л ь /л ]
Н о в о р о ж д е н н ы е 1 d a y
Н о в о р о ж д е н н ы е > 1 д н я
Д е т и
В зр о с л ы е
6 0 -9 0 л е т
> 9 0 л е т
4 0 - 6 0 [ 2 , 2 - 3 , 3 ]
5 0 - 8 0 [2 ,8 -4 ,4 ]
6 0 - 1 0 0 [3 ,3 -5 ,6 ]
7 4 - 1 0 6 [4 ,1 -5 ,9 ]
8 2 - 1 1 5 [4 ,6 -6 ,4 ]
7 5 -1 2 1 [4 ,2 -6 ,7 1
В С М Ж : м г/д л [м м о л ь /л ]
М л а д е н ц ы , д е т и
В зр о с л ы е
6 0 - 8 0
4 0 - 7 0
[3 .3 -4 ,4 ]
[ 2 , 2 - 3 , 9 ]
В 2 4 ч м о ч е : 1 -1 5 м г/д л [ 0 ,1 -0 ,8 м м о л ь /л ]
< 0 ,5 г /2 4 ч а с а [< 2 ,7 8 м м о л ь /2 4 ч а с а ]
К а ж д о й л а б о р а т о р и и с л е д у е т у с т а н о в и т ь с в о и с о б с т в е н н ы е д и а п а з о н ы н о р м а л ь н ы х з н а ч е н и й д л я
группы н а с е л е н и я , к о т о р у ю о н а о б с л у ж и в а е т .
ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
В рамках цикла Нормальный Высокий Между циклами Нормальный Высокий
п = 30 уровень уровень п = 60 уровень уровень
С р е д н е е з н а ч е н и е м г/д л 81 2 6 9 С р е д н е е з н а ч е н и е м г/д л81 2 8 4
С р е д н е к в а д р а т и ч е с к о е1 ,0 5 1 ,8 0 С р е д н е к в а д р а т и ч е с к о е0 ,9 7 3 ,0 1
о т к л о н е н и е м г/д л о т к л о н е н и е м г/д л
К о э ф ф и ц и е н т в а р и а ц и и1 ,3 0 ,6 7 К о э ф ф и ц и е н т в а р и а ц и и1,2 1 ,0 6
% %
Ч у в с т в и т е л ь н о с т ь д л я 1 0 0 м г/д л : п р и б л и з и т е л ь н о 0 ,4 2 0 Л б е п р и 5 0 0 нм .
С р а в н и т е л ь н о е и с с л е д о в а н и е с и с п о л ь з о в а н и е м и м е ю щ е го с я в п р о д а ж е р е а к т и в а :
у = 0 ,9 6 9 х + 1 ,3 3 г = 0 ,9 9 8 4
ЛИНЕЙНОСТЬ
Р е а к ц и я я в л я е т с я л и н е й н о й д о м и н и м у м 5 0 0 м г/д л (2 8 м м о л ь /л ).
В ы ш е , р а з б а в и т ь п р о б у с о л я н ы м р а с т в о р о м и п о в то р и т ь т е с т , у ч и т ы в а я к о э ф ф и ц и е н т
р а з б а в л е н и я . П р е д е л л и н е й н о с т и з а в и с и т о т с о о т н о ш е н и я п р о б а /р е а к т и в .
НЕАВТОМАТИЧЕСКАЯ ПРОЦЕДУРА
П и п е т и р о в а т ь в с о о т в е т с т в у ю щ и м о б р а з о м о б о з н а ч е н н ы е
т е с т о в ы е п р о б и р ки :
Холостой
реактив
Стандарт Тест
Реактив 1 мл 1 мл 1 мл
52
--- стр. 53 ---
Деминерализованная вода 10 рл
Стандарт 10 рл
Проба 10 рл
П е р е м е ш а т ь . О с т а в и т ь н а 1 0 м и н у т п р и 3 7 ° С или н а 2 0 м и н у т при к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е .
З а р е г и с т р и р о в а т ь з н а ч е н и я о п т и ч е с к о й п л о т н о с т и при 5 0 0 н м ( 4 6 0 - 5 6 0 ) по х о л о с т о м у р е а кти в у .
О к р а с с т а б и л е н в т е ч е н и е 1 5 -2 0 м и н у т п р и 3 7 ° С , з а т е м п о с т е п е н н о и с ч е з а е т .
Примечание: П о з а п р о с у п р е д о с т а в л я ю т с я с п е ц и ф и ч е с к и е п р о ц е д у р ы д л я а в т о м а т и ч е с к и х
п р и б о р о в . О б р а т и т ь с я в с л у ж б у т е х н и ч е с к о й п о д д е р ж к и B IO L A B O .
ВЫЧИСЛЕНИЯ
В ы ч и сл я ть р е з у л ь т а т с л е д у ю щ и м о б р а з о м :
Результат = Абс (тест) / Абс (стандарт) х Концентрация стандарта
Ф
С
53
--- стр. 55 ---
т
СТАБИЛЬНОСТЬ И ХРАНЕНИЕ
Х р а н и т ь п р и т е м п е р а т у р е 2 -8 ° С , в з а т е м н е н н о м м е с т е .
• Н е в с к р ы ты е у п а к о в к и с р е а к т и в а м и ; го д н ы к у п о т р е б л е н и ю д о и с т е ч е н и я с р о к а го д н о с ти ,
у к а з а н н о го н а я р л ы ке .
• П о с л е в с кр ы ти я у п а к о в к и , п е р е н е с т и т р е б у е м о е к о л и ч е с т в о и з а к р ы т ь ф л а к о н . Р е а к ти в ы R1 и R 2
с та б и л ь н ы в т е ч е н и е м и н и м у м 3 -х м е с я ц е в .
Н е и с п о л ь з о в а т ь л ю б о й р е а к т и в в с л у ч а е п о м у т н е н и я и л и е с л и р е з у л ь т а т п о х о л о с т о м у р е а к т и в у >
0 .0 5 0 .
Данный набор следует замораживать во время транспортировки.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Р е а к т и в ы B IO L A B O п р е д н а з н а ч е н ы д л я п р о ф е с с и о н а л ь н о й д и а гн о с т и к и in vitro.
• И с п о л ь з о в а т ь с о о т в е т с т в у ю щ у ю з а щ и т у (з а щ и т н а я о д е ж д а , п е р ч а т к и , о ч ки ).
• Н е п и п е т и р о в а т ь р то м .
• В с л у ч а е к о н т а к т а с к о ж е й и г л а з а м и т щ а т е л ь н о п р о м ы ть п о в р е ж д е н н ы е у ч а с т к и б о л ь ш и м
к о л и ч е с т в о м воды и о б р а т и т ь с я з а м е д и ц и н с к о й п о м о щ ь ю .
• Р е а к т и в ы с о д е р ж а т а з и д н а т р и я (к о н ц е н т р а ц и я < 0 ,1 % ) ко то р ы й м о ж е т в с т у п и ть в р е а к ц и ю с
м е д н ы м и и л и с в и н ц о в ы м и э л е м е н т а м и т р у б о п р о в о д а . П о с л е у т и л и з а ц и и с м ы ть б о л ь ш и м
к о л и ч е с т в о м в од ы .
• П а с п о р т б е з о п а с н о с т и х и м и ч е с к о го в е щ е с т в а п р е д о с т а в л я е т с я по з а п р о с у .
• У т и л и з а ц и я о тх о д о в : В с о о т в е т с т в и и с д е й с т в у ю щ и м в с т р а н е з а к о н о д а т е л ь с т в о м .
С о в с е м и п р о б а м и с л е д у е т о б р а щ а т ь с я как с п о т е н ц и а л ь н ы м и с т о ч н и к о м и н ф е к ц и и в с о о тв е т с т в и и
с п р и н ц и п а м и д о б р о с о в е с т н о й л а б о р а т о р н о й п р а к т и ки , и с о б л ю д а я с о о т в е т с т в у ю щ и е м еры
п р е д о с т о р о ж н о с т и , В с о о т в е т с т в и и с д е й с т в у ю щ и м в с т р а н е з а к о н о д а т е л ь с т в о м .
ОТБОР ПРОБ И РАБОТА С ПРОБАМИ (4)
П р о б ы с л е д у е т с о б и р а т ь у п а ц и е н т о в н а т о щ а к с п у с т я 12 -1 4 ч п о с л е п р и е м а п и щ и .
П л а з м а : с о б и р а т ь в Э Д Т А и л и г е п а р и н а т л и т и я или н а т р и я .
Ц е н т р и ф у ги р о в а т ь и о т д е л и т ь п л а з м у о т к л е т о к кр о в и в м а к с и м а л ь н о ко р о т ки й с р о к
(в т е ч е н и е 3 -х ч а с о в ).
С ы в о р о т к а : Ц е н т р и ф у г и р о в а т ь и о т д е л и т ь с ы в о р о тку о т к л е т о к кр о в и в м а к с и м а л ь н о ко р о тки й с р о к
(в т е ч е н и е 3 -х ч а с о в ).
Л П В П -х о л е с т е р и н в п р о б е с т а б и л е н в т е ч е н и е :
• 1 - 3 д н е й п р и 2 - 8 °С
• 1 м е с я ц а п р и - 2 0 “С .
ИНТЕРФЕРЕНЦИЯ (5)
И с с л е д о в а н н ы е к о н ц е н т р а ц и и (м г/д л ) б е з з н а ч и т е л ь н о й и н т е р ф е р е н ц и и (± 1 0 % ):
П р я м о й б и л и р у б и н : 6 0
О б щ и й б и л и р у б и н : 6 0
Г е м о гл о б и н : 1 0 0 0
А с к о р б и н о в а я к и с л о т а : 1 0 0
Л и п е м и я (In tra lip id ® ): 1 8 0 0
Э н д о ге н н ы е 2 0 0 0
тр и гл и ц е р и д ы :
Г а м м а -гл о б у л и н ы : 5 0 0 0
НЕОБХОДИМЫЕ МАТЕРИАЛЫ, НЕ ВХОДЯЩИЕ В КОМПЛЕКТ
1. О с н о в н о е л а б о р а т о р н о е о б о р у д о в а н и е д л я м е д и ц и н с к о го а н а л и з а .
2. B IO L A B O Л П В П -х о л е с т е р и н к а л и б р а т о р , н о м е р п о к а т а л о гу 9 5 4 0 6 (2 x 1 м л ), или л ю б о й
п р и м е н и м ы й к а л и б р а т о р ч е л о в е ч е с к о г о п р о и с х о ж д е н и я .
3. Л П В П -х о л е с т е р и н н о р м а л ь н а я и п а т о л о ги ч е с к а я ко н т р о л ь н ы е с ы в о р о тки ч е л о в е ч е с к о го
п р о и с х о ж д е н и я .
КАЛИБРОВКА
• Н е и с п о л ь з о в а т ь в о д н ы й к а л и б р а т о р .
• И с п о л ь з о в а т ь B IO L A B O Л П В П -х о л е с т е р и н к а л и б р а т о р R E F 9 5 4 0 6 .
• Т а к ж е л ю б о й к а л и б р а т о р ч е л о в е ч е с к о г о п р о и с х о ж д е н и я , п р и п и с ы в а е м ы й к с п р а в о ч н о м у м е т о д у
или м а т е р и а л у .
Ч а с т о т а к а л и б р о в к и з а в и с и т о т р а б о ч е г о с о с т о я н и я п р и б о р а и о т с о х р а н н о с т и р е а к т и в а .
Р е к о м е н д у е т с я в ы п о л н я т ь к а л и б р о в к у в с л е д у ю щ и х с л у ч а я х :
Реактивы готовы к использованию.
55
--- стр. 56 ---
1, П р и з а м е н е п а р т и и р е а к т и в а ,
2, П о с л е о б с л у ж и в а ю щ и х п р о ц е д у р в о т н о ш е н и и п р и б о р а .
3, Е с л и ко н т р о л ь н ы е з н а ч е н и я в ы х о д я т з а п р е д е л ы у с т а н о в л е н н о г о д и а п а з о н а , д а ж е п о с л е
и с п о л ь з о в а н и я н о в о го ф л а к о н а с о с в е ж е й с ы в о р о тко й .
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
• И с с л е д у е м а я к о н т р о л ь н а я с ы в о р о т к а ч е л о в е ч е с к о го п р о и с х о ж д е н и я , о т н о с я щ а я с я к то м у ж е
м е т о д у (к а т а л и з а т о р , с е л е к т и в н ы й д е т е р г е н т ).
• В н е ш н я я п р о г р а м м а к о н т р о л я к а ч е с т в а .
Р е к о м е н д у е т с я в ы п о л н я т ь к о н т р о л ь к а ч е с т в а в с л е д у ю щ и х с л у ч а я х :
• М и н и м у м о д и н р а з з а ц и кл .
• М и н и м у м о д и н р а з в т е ч е н и е 2 4 ч а с о в .
• П р и з а м е н е ф л а к о н а и л и р е а к т и в а .
• П о с л е о б с л у ж и в а ю щ и х п р о ц е д у р в о т н о ш е н и и п р и б о р а .
Е с л и к о н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й , в ы п о л н и ть с л е д у ю щ и е
д е й с тв и я :
1. П о в т о р и т ь т е с т с и с п о л ь з о в а н и е м т о го ж е к о н т р о л ь н о го р а с т в о р а .
2. Е сл и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
п р и го т о в и ть с в е ж у ю к о н т р о л ь н у ю с ы в о р о тку и п о в то р и т ь т е с т .
3. Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
и с п о л ь з о в а ть но в ы й ф л а к о н с к а л и б р а т о р о м и л и с в е ж и й к а л и б р а т о р , и п о в то р и т ь т е с т .
4 . Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
к а л и б р о в а т ь с и с п о л ь з о в а н и е м н о в о го ф л а к о н а с р е а к т и в о м .
5. Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
с в я з а т ь с я со с л у ж б о й т е х н и ч е с к о й п о д д е р ж к и B IO L A B O и л и с в а ш и м м е с т н ы м п р е д с т а в и т е л е м ,
ОЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ (6)
Л П В П - м г/д л [м м о л ь /л ]
х о л е с т е р и н
М у ж ч и н ы 3 0 -7 0 [0 ,7 8 -1 ,8 1 ]
Ж е н щ и н ы 3 0 -8 5 [0 ,7 8 -2 ,2 0 ]
К а ж д о й л а б о р а т о р и и с л е д у е т у с т а н о в и т ь с в о и с о б с т в е н н ы е д и а п а з о н ы н о р м а л ь н ы х з н а ч е н и й д л я
группы н а с е л е н и я , к о т о р у ю о н а о б с л у ж и в а е т .
ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ( 4 ) _______________
В рамках цикла Низкий Средний Высокий Между циклами Низкий Средний Высокий
N = 20
_____________________Уровень уровень уровень N = 40 _______________________уровень уровень уровень
С р е д н е е з н а ч е н и е
м г/д л
3 3 51 101 С р е д н е е з н а ч е н и е
м г/д л
3 3 5 0 100
С р е д н е к в а д р а т и ч е с к о е 0 ,2 6
о т к л о н е н и е м г/д л
0 ,2 6 0 ,7 1 С р е д н е к в а д р а т и ч е с к о е 0 ,4 3
о т к л о н е н и е м г/д л
0 ,7 5 1,1
К о э ф ф и ц и е н т
в а р и а ц и и %
0,8 0 ,5 0 ,7 К о э ф ф и ц и е н т
в а р и а ц и и %
1 ,3 1 ,5 1.1
П р е д е л к о л и ч е с т в е н н о го о п р е д е л е н и я : п р и б л и з и т е л ь н о 2 ,5 м г/д л .
Ч у в с т в и т е л ь н о с т ь д л я 1 0 0 м г/д л : 0 ,1 2 0 А б с .
Р е з у л ь т а т и с с л е д о в а н и я (п = 5 2 ) м е т о д о м в ы д е л е н н о го с р а в н е н и я (М В С ):
B IO L A B O С р е д н е е ; 5 8 ,3 м г/д л М В С С р е д н е е : 5 6 ,3 м г/д л
B IO L A B O Д и а п а з о н : 3 3 ,6 - 1 3 3 м г/д л М В С Д и а п а з о н : 3 2 - 1 3 3 м г/д л
B IO L A B O = 0 ,9 9 (М В С ) + 2 ,8 1 м г/д л г = 0 ,9 9 6
ЛИНЕЙНОСТЬ
Р е а к ц и я я в л я е т с я л и н е й н о й в д и а п а з о н е 2 ,5 - 2 0 0 м г/д л (о т 0 ,0 6 5 д о 5 ,1 7 м м о л ь /л ). В ы ш е ,
р а з б а в и т ь п р о б у (1 + 1 ) с о л я н ы м р а с т в о р о м и п о в то р и т ь т е с т , п р и м е н и в к о э ф ф и ц и е н т
р а з б а в л е н и я 2 д л я в ы ч и с л е н и я р е з у л ь т а т а . П р е д е л л и н е й н о с т и з а в и с и т о т с о о т н о ш е н и я
п р о б а /р е а к т и в ,
НЕАВТОМАТИЧЕСКАЯ ПРОЦЕДУРА
Не использовать водный калибратор.
О с т а в и т ь р е а к ти в ы и п р о б ы при к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е .
56
--- стр. 57 ---
Н а с т р о й т е п р и б о р н а с ч и т ы в а н и е м и к р о -о б ъ е м о в .Холостой реактив Стандарт Тест
Реактив R1 300 рл 300 рл 300 рл
Калибратор Зрл
Проба Зрл
Э н е р ги ч н о п е р е м е ш а т ь , о с т а в и т ь н а 5 м и н у т при 3 7 ° С . З а р е г и с т р и р о в а т ь з н а ч е н и я о п т и ч е с к о й
п л о тн о с ти А 1 п р и 6 0 0 нм по х о л о с т о м у р е а к т и в у .
Д о б а в и т ь Холостой реактив Стандарт Тест
Реактив R2 100 рл 100 рл 100 рл
Э н е р ги ч н о п е р е м е ш а т ь , о с т а в и т ь н а 5 м и н у т п р и 3 7 ° С . З а р е г и с т р и р о в а т ь з н а ч е н и я о п т и ч е с к о й
п л о тн о с ти А 2 п р и 6 0 0 нм по х о л о с т о м у р е а к т и в у .
Примечания:
1 . в з а в и с и м о с т и о т т е х н и ч е с к и х п а р а м е т р о в п р и б о р а м о ж н о и з м е н я т ь в ы ш е у к а з а н н ы е о б ъ е м ы н а
о с н о в е о д н о го и т о г о ж е к о э ф ф и ц и е н т а р а з б а в л е н и я (т .е . R 1 2 4 0 р л , R 2 8 0 цл, s p e c im e n 2 ,4 рл или
3 р л ). С м . § ЛИНЕЙНОСТЬ.
2. П о з а п р о с у п р е д о с т а в л я ю т с я с п е ц и ф и ч е с к и е п р о ц е д у р ы д л я а в т о м а т и ч е с к и х п р и б о р о в .
С в я ж и т е с ь с о с л у ж б о й т е х н и ч е с к о й п о д д е р ж к и B IO L A B O ,
ВЫЧИСЛЕНИЯ
Р е к о м е н д у е т с я и с п о л ь з о в а т ь а в т о м а т и ч е с к и й а н а л и з а т о р , б и х р о м а т и ч е к о е с н я т и е п о к а з а н и й (6 0 0 -
7 0 0 нм ).
И с п о л ь з у я н е а в т о м а т и ч е с к у ю п р о ц е д у р у , в ы ч и сл и ть ААбс = (А2 - 0,75 А1) д л я т е с т а и
к а л и б р а т о р а .
В ы ч и с л я ть р е з у л ь т а т с л е д у ю щ и м о б р а з о м :
ЛПВП-холестерин = ДЛбс (тест) / ДДбс (калибратор) х концентрация калибратора
м г/д л X 0 ,0 2 5 8 6 = м м о л ь /л
57
--- стр. 59 ---
ф
т
ОТБОР ПРОБ И РАБОТА С ПРОБАМИ (2)
Н е г е м о л и з и р о в а н н а я с ы в о р о т к а и л и п л а з м а :
О т д е л и т ь о т э р и т р о ц и т о в в т е ч е н и е 1 ч а с а п о с л е с б о р а .
• Ф о с ф о р с т а б и л е н в с ы в о р о т к е в т е ч е н и е ;
- н е с к о л ь к и х д н е й п р и 2 -8 ° С .
- н е с к о л ь к и х м е с я ц е в п р и -1 5 ° С .
2 4 ч м о ч а :
С о б и р а т ь в п р о м ы ты е к и с л о т о й , н е с о д е р ж а щ и е д е т е р г е н т к о н т е й н е р ы . О к и с л е н н у ю м о ч у (p H < 3 с
и с п о л ь з о в а н и е м к о н ц е н т р и р о в а н н о й с о л я н о й к и с л о ты ) с л е д у е т р а з б а в и т ь (1 + 9 )
д е м и н е р а л и з о в а н н о й в о д о й , н е с о д е р ж а щ е й ф о с ф о р а , п е р е д в ы п о л н е н и е м т е с т а .
• Ф о с ф о р с т а б и л е н в о к и с л е н н о й м о ч е в т е ч е н и е ;
- 6 м е с я ц е в .
ИНТЕРФЕРЕНЦИЯ (3 )
1. Ч то б ы и з б е ж а т ь з а г р я з н е н и я ф о с ф о р о м , н а х о д я щ и м с я в о к р у ж а ю щ е й с р е д е , р е к о м е н д у е т с я
и с п о л ь з о в а т ь о д н о р а з о в у ю с т е к л я н н у ю и л и п л а с т и к о в у ю п о с у д у , т щ а т е л ь н о о ч и щ е н н ы й с
п р и м е н е н и е м с о л я н о й ки с л о ты 0 ,1 N и пр о м ы ты й д о с т а т о ч н ы м к о л и ч е с т в о м д и с т и л л и р о в а н н о й
воды м а т е р и а л .
2. М а к р о ге м о л и з , л и п е м и я и л и ж е л т у х а м о гу т с т а т ь п р и ч и н о й о ш и б о ч н о в ы с о ки х р е з у л ь т а т о в
к р о м е с л у ч а е в , к о гд а и с п о л ь з у е т с я х о л о с т а я п р о б а .
Б о л е е п о д р о б н ы й о б з о р ф а к т о р о в , о к а з ы в а ю щ и х в л и я н и е н а д а н н о е и с с л е д о в а н и е , п р и в е д е н в
п у б л и к а ц и и Y o u n g D .S .
НЕОБХОДИМЫЕ МАТЕРИАЛЫ, НЕ ВХОДЯЩИЕ В КОМПЛЕКТ
1. О с н о в н о е л а б о р а т о р н о е о б о р у д о в а н и е д л я м е д и ц и н с к о го а н а л и з а .
2. Н о р м а л ь н а я и п а т о л о г и ч е с к а я к о н т р о л ь н ы е с ы в о р о тки .
КАЛИБРОВКА
• С т а н д а р т , в кл ю ч е н н ы й в н а б о р (ф л а к о н R 2 ) и л и М у л ь т и к а л и б р а т о р B IO L A B O , R E F 9 5 0 1 5 .
• Т а к ж е л ю б о й к а л и б р а т о р , п р и п и с ы в а е м ы й к с п р а в о ч н о м у м е т о д у и л и м а т е р и а л у .
Ч а с т о т а к а л и б р о в к и з а в и с и т о т р а б о ч е г о с о с т о я н и я п р и б о р а и о т с о х р а н н о с т и р е а к т и в а .
Р е к о м е н д у е т с я в ы п о л н я т ь к а л и б р о в к у в с л е д у ю щ и х с л у ч а я х :
1. П р и з а м е н е п а р т и и р е а к т и в а .
2. П о с л е о б с л у ж и в а ю щ и х п р о ц е д у р в о т н о ш е н и и п р и б о р а .
3. Е с л и ко н т р о л ь н ы е з н а ч е н и я в ы х о д я т з а п р е д е л ы у с т а н о в л е н н о г о д и а п а з о н а , д а ж е п о с л е
и с п о л ь з о в а н и я н о в о го ф л а к о н а с о с в е ж е й с ы в о р о тко й .
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
• B IO L A B O E X A T R O L -N (н о р м а л ь н ы е з н а ч е н и я ), R E F 9 5 0 1 0 .
• B IO L A B O E X A T R O L -P (п а т о л о г и ч е с к и е з н а ч е н и я ), R E F 9 5 0 1 1 .
• И с с л е д у е м а я к о н т р о л ь н а я с ы в о р о тк а , о т н о с я щ а я с я к т о м у ж е м е т о д у .
• В н е ш н я я п р о гр а м м а к о н т р о л я к а ч е с т в а .
Р е к о м е н д у е т с я в ы п о л н я т ь к о н т р о л ь к а ч е с т в а в с л е д у ю щ и х с л у ч а я х ;
• М и н и м у м о д и н р а з з а ц и кл .
• М и н и м у м о д и н р а з в т е ч е н и е 2 4 ч а с о в .
• П р и з а м е н е ф л а к о н а и л и р е а к т и в а .
• П о с л е о б с л у ж и в а ю щ и х п р о ц е д у р в о т н о ш е н и и п р и б о р а .
Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й , в ы п о л н и ть с л е д у ю щ и е
д е й с т в и я :
1. П о в т о р и т ь т е с т с и с п о л ь з о в а н и е м т о г о ж е к о н т р о л ь н о го р а с т в о р а .
2. Е сл и к о н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
п р и го т о в и ть с в е ж у ю к о н т р о л ь н у ю с ы в о р о тку и п о в то р и т ь т е с т .
3. Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
и с п о л ь з о в а т ь н о в ы й ф л а к о н с к а л и б р а т о р о м или с в е ж и й к а л и б р а т о р , и п о в т о р и т ь т е с т .
4. Е сл и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
к а л и б р о в а т ь с и с п о л ь з о в а н и е м н о в о го ф л а к о н а с р е а к т и в о м .
5. Е с л и ко н т р о л ь н ы е р е з у л ь т а т ы п о -п р е ж н е м у в ы х о д я т з а п р е д е л ы д о п у с т и м ы х з н а ч е н и й ,
с в я з а т ь с я с о с л у ж б о й т е х н и ч е с к о й п о д д е р ж к и B IO L A B O и л и с в а ш и м м е с т н ы м п р е д с т а в и т е л е м .
ОЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ (2)
В с ы в о р о тке и л и п л а з м е
59
--- стр. 60 ---
Ф о с ф о р (м г/д л ) (м м о л ь /л )
в п у п о в и н е 3 ,7 -8 ,1 [1 ,2 0 -2 ,6 2 ]
Н е д о н о ш е н н ы е5 ,4 - 1 0 ,9[1 ,7 4 -3 ,5 2 ]
0-10 д н е й 4 ,5 - 9 ,0 [ 1 ,4 5 -2 ,9 1 ]
10 д н е й -2 4 м е с я ц а4 ,5 - 6 ,7 [1 ,4 5 -2 ,1 6 ]
2 4 м е с я ц а -1 2 л е т4 ,5 - 5 ,5 [1 ,4 5 -1 ,7 8 ]
1 2 -6 0 л е т 2 ,7 - 4 ,5 [0 ,8 7 -1 ,4 5 ]
> 6 0 л е т , м у ж ч и н ы2 ,3 -3 ,7 [ 0 ,7 4 -1 ,2 0 ]
> 6 0 л е т , ж е н щ и н ы 2 ,8 -4 ,1[0 ,9 0 -1 ,3 2 ]
ф
3 2 4 ч м о ч е
Ф о с ф о р (г /2 4 ч) (м м о л ь /2 4 ч )
П о с т о я н н ы й е ж е д н е в н ы й п р и е м с п и щ е й '(*) <1 [< 3 2 ,3 ]
Н е о гр а н и ч е н н ы й п р и е м с п и щ е й0,4 -1 ,3 [1 2 ,9 -4 2 ,0 ]
К а ж д о й л а б о р а т о р и и с л е д у е т у с т а н о в и т ь с в о и с о б с т в е н н ы е д и а п а з о н ы н о р м а л ь н ы х з н а ч е н и й д л я
группы н а с е л е н и я , к о т о р у ю о н а о б с л у ж и в а е т .
П о с т о я н н ы й е ж е д н е в н ы й п р и е м с п и щ е й : 0 ,9 п р и 1 ,5 г Р ( 2 9 - 4 8 м м о л ь Р ) и 1 0 м г С а /К д (0 ,2 5 м м о л ь
С а /К д ).
ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
В рамках цикла Средний Высокий Между циклами Средний Высокий
п = 20 уровень уровень п = 20 уровень vpoeeHb
С р е д н е е з н а ч е н и е м г/д л3 ,8 3 6 ,2 7 С р е д н е е з н а ч е н и е м г/д л 3 ,6 27 ,5 3
С р е д н е к в а д р а т и ч е с к о е 0 ,0 70 ,0 4 С р е д н е к в а д р а т и ч е с к о е0,12 0 ,1 6
о т к л о н е н и е м г/д л о т к л о н е н и е м г/д л
К о э ф ф и ц и е н т в а р и а ц и и % 1 ,80,6 К о э ф ф и ц и е н т в а р и а ц и и % 3 ,32,1
П р е д е л к о л и ч е с т в е н н о го о п р е д е л е н и я ; п р и б л и з и т е л ь н о 0 ,7 м г/д л .
Ч у в с т в и т е л ь н о с т ь д л я 5 м г/д л : п р и б л и з и т е л ь н о 0 ,5 0 0 А б с п р и 3 4 0 нм .
С р а в н и т е л ь н о е и с с л е д о в а н и е с и с п о л ь з о в а н и е м и м е ю щ е г о с я в п р о д а ж е р е а к т и в а :
у = 0 ,9 9 0 X + 0 ,0 5 0 4 г = 0 ,9 9 4 8
ЛИНЕЙНОСТЬ
Т е с т я в л я е т с я л и н е й н ы м д о 1 0 м г/д л (3 ,2 2 м м о л ь /л ).
В ы ш е , р а з б а в и т ь п р о б у д е м и н е р а з и з и о в а н н о й в о д о й , н е с о д е р ж а щ е й ф о с ф о р а , и п о в то р и т ь т е с т ,
у ч и ты в а я к о э ф ф и ц и е н т р а з б а в л е н и я . П р е д е л л и н е й н о с т и з а в и с и т о т с о о т н о ш е н и я п р о б а /р е а к ги в .
НЕАВТОМАТИЧЕСКАЯ ПРОЦЕДУРА
П и п е т и р о в а т ь в с о о т в е т с т в у ю щ и м о б р а з о м
о б о з н а ч е н н ы е т е с т о в ы е п р о б и р к и
Холостой
реактив
Холостая
проба
Стандарт Тест
Реактив 1 мл 1 мл 1 мл
Соляной раствор 1 мл
Деминерализиованная вода 20 рл
Стандарт 20 рл
Проба 20 рл 20 рл
Х о р о ш о п е р е м е ш а т ь . И н к у б и р о в а т ь в т е ч е н и е 2 м и н у т при к о м н а т н о й т е м п е р а т у р е . И с п о л ь з о в а ть
кю в е ту с д л и н о й о п т и ч е с к о го п у ти 1 с м и з а р е г и с т р и р о в а т ь з н а ч е н и я о п т и ч е с к о й п л о т н о с т и
с т а н д а р т а и п р о б ы п р и 3 4 0 н м ( 3 3 4 - 3 6 6 ) по х о л о с т о м у р е а к т и в у . З а р е г и с т р и р о в а т ь з н а ч е н и е
о п т и ч е с к о й п л о т н о с т и х о л о с т о й п р о б ы по с о л я н о м у р а с т в о р у .
Примечания:
- П о з а п р о с у п р е д о с т а в л я ю т с я с п е ц и ф и ч е с к и е п р о ц е д у р ы д л я а в т о м а т и ч е с к и х п р и б о р о в .
О б р а т и т ь с я в с л у ж б у т е х н и ч е с к о й п о д д е р ж к и B IO L A B O .
“ И с п о л ь з о в а н и е х о л о с т о й пр о б ы : д л я м у тн о й или и к т е р и ч е с к о й с ы в о р о т к и , а т а к ж е д л я б ы чье й
ко н тр о л ь н о й с ы в о р о тк и и к а л и б р а т о р а , к о т о р ы е о б ы ч н о и м е ю т о ч е н ь с и л ь н у ю о к р а с ку .
- Ц е л е в ы е з н а ч е н и я к о н т р о л ь н о й с ы в о р о тки и к а л и б р а т о р а м о гл и б ы ть п о л у ч е н ы с
и с п о л ь з о в а н и е м и л и б е з и с п о л ь з о в а н и я х о л о с т о й п ро бы .
60
--- стр. 61 ---
ВЫЧИСЛЕНИЯ
В ы ч и сл я ть р е з у л ь т а т с л е д у ю щ и м о б р а з о м ;
С ы в о р о т ка и л и п л а з м а :
Результат = Абс (тест) - Абс (холостая проба) / Абс (стандарт) х Концентрация стандарта
М о ч а , р а з б а в л е н н а я 1 + 9 : У м н о ж и т ь р е з у л ь т а т н а 1 0 (к о э ф ф и ц и е н т р а з б а в л е н и я ).
61
--- стр. 69 ---
I.
р я я
h u
ПРОИЗВОДИТЕЛЬ:
BIOLABO SA,
0 2 1 6 0 . М е з и , Ф р а н ц и я
BIOLABO REAGENTS
WWW.biolabo.fr Г Е М О Г Л О Б И Н
Колориметрический метод (цианметгемоглобин)
Концентрированный реагент (разбавляется 1/50) для количественного
определения гемоглобина (НЬ) в цельной крови
REF 82250 R1 1 X 50 мл
ТЕХНИЧЕСКАЯ ПОДДЕРЖКА И ЗАКАЗЫ:
Гел: (33)03 23 2515 50
Раке: (33) 03 23 256 256 С € |У Р | д л я д и а гн о с т и к и в н е о р га н и з м а
] D D
(ЛИНИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ (1)
Достаточная концентрация гемоглобина в крови нужна для полноценной
•ранспортировки Ог и СОг между легкими и другими тканями,
чонцентрация гемоглобина крови может снизиться в результате
ровопотери или гемолиза или в результате замедленного
И ^Ж рования крови в костном мозге. Напротив, концентрация
ем Я Кбина крови может увеличиться при замедленном обмене газов в
1егких или при других нарушениях. Анализ концентрации гемоглобина
рови важен, как первый шаг в выявлении анемии (пониженная
:онцентрация гемоглобина) или полицитемии (повышенное количество
|ритроцитов и повышенная концентрация гемоглобина).
ПРИНЦИП (4) (5)
Летод признан международным комитетом по стандартизации в
ематологии, как эталонный метод.
гемоглобина окисляется феррицианидом до Fe^"^ метгемоглобина,
I метгемоглобин обращается в стабильный цианметгемоглобин
добавлением цианида калия (KCN).
1оглощение цианметгемоглобина прямо пропорционально
:онцентрации гемоглобина, измеряется на 546 мм (520-560).
:ОСТАВ РЕАГЕНТА
Флакон R1 РЕАГЕНТ
(концентрация бОх) Рабочий реагент
: токсичныи
^1^/25-51-53 S ;28-29-45-60-61
(>осфатный буфер 50 м Мол ь/л 1 мМ оль/л
Диакид калия 37,5 м Мол ь/л 0,75 м Мол ь/л
!>ерроцианид калия 30 м Мол ь/л 0,6 м Мол ь/л
Детергент 5 г/л 0,1 г/л
Сонсервант < 5 % < 0,1 %
ИЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
^еагенты BIOLABO предназначены
юпользования в лабораториях.
для профессионального
] Проверьте целостность содержимого перед использованием.
Используйте надлежащую защиту (перчатки, очки)
Не всасывать ртом.
После разбавления содержимое флакона R1 не причисляется к
опасным смесям, в соответствии с критериями, определенными в
директиве 1999/45/СЕ и ее обновлениях.
При попадании на кожу или глаза, тщательно промойте область
контакта обильным количеством воды и проконсультируйтесь с
врачом,
1 Паспорт безопасности вещества высылается по первому
требованию,
уО всеми образцами следует обращаться как с потенциально
жфекционными, в соответствии с лучшей лабораторной практикой,
юпользуя надлежащие меры предосторожности. Следуйте
(ействующему законодательству страны.
IVD Г
ПОДГОТОВКА РЕАГЕНТА
Разбавьте содержимое флакона R1 (1+49) обессоленной водой.
Аккуратно размешайте, чтобы сделать раствор гомогенным.
Смотрите § МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ.
СТАБИЛЬНОСТЬ И ХРАНЕНИЕ
Хранить при 18-25°С, хорош о закупоренным в оригинальном
флаконе и вдали от света.
Без контаминации (загрязнения) реагент стабилен до даты
истечения срока годности, указанной на этикетке комплекта, когда
хранится и используется как описано на листке вкладыше.
i Без контаминации разведенный реагент стабилен до даты
истечения срока годности, указанной на этикетке комплекта, когда
хранится и используется как описано на листке вкладыше.
• Разведенный реагент подлежит списанию при замутнении или если
поглощение на 546 нм > 0,010.
• Нельзя использовать разведенный реагент после окончания срока
годности, указанном на этикетке комплекта.
СБОР И ОБРАЩЕНИЕ С ОБРАЗЦАМИ
Цельная кровь (ЭДТАУ
Фетальная кровь: забор подкожной пуповинной крови.
Аккуратно размешайте круговыми движениями, чтобы гомогенизировать
жидкость перед анализом.
Гемоглобин стабилен, как образец следующее время:
i i 48 ч при 2-8 “С.
1 24 ч при комнатной температуре (< 25 °С)
ИНТЕРФЕРЕНЦИИ (2) (3)
Липемия или концентрация лейкоцитов > 25x10^ /л могут привести к
завышенному результату. Завышенные результаты были
зафиксированы при наличии гемоглобина С или S, при серьёзных
нарушениях печени или образовании глобулинов (например: при
множественной миеломе или макроглобулинемии Вальденстрёма).
Для более глубокого обзора фЭ 1сторов, искажающих этот анализ,
обратитесь к публикации Д.С.Янга.
НЕОБХОДИМЫЕ, НО НЕ ПОСТАВЛЯЕМЫЕ МАТЕРИАЛЫ
1. Простейшее лабораторное оборудование для медицинского анализа,
2, Нормальная и патологичная контрольная кровь.
КАЛИБРОВКА
Должен использоваться калибровочный фактор, указанный в § РАСЧЕТ
или калибратор (цианметгемоглобин), проанализированный тем же
методом.
Калибровка рекомендуется в следующих обстоятельствах:
1. При смене флакона реагента.
2. После операций обслуживания на приборе.
3. Если контрольные значение вне диапазона, даже после
использования нового флакона свежей крови.
[Версия : АТ 82250 12 09 2008|
Производитель Использ. □ 3 до ин витро LOT
--- стр. 70 ---
(ОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Анализируемая контрольная кровь ссылается на тот же метод.
Внешняя программа контроля качества,
Рекомендуется проводить контроль в следующих случаях:
1 По меньшей мере, один раз за цикл.
J Минимум один раз за 24 часа.
При смене флакона реагента.
После операции обслуживания на приборе.
:сли контроль вне диапазона, выполните следующее:
. Повторите анализ с тем же контролем,
!, Если контроль все так же вне диапазона, приготовьте свежий
юнтроль и повторите анализ.
1 . Если контроль все еще вне диапазона, проверьте параметры
жализа: длина волны, коэффициент образец/реагент, калибровочный
[)актор.
к Если контроль все еще вне диапазона, возьмите новый флакон
>еагента и повторите анализ.
), Если контроль все так же вне диапазона, свяжитесь с технической
юддержкой BIOLABO или с вашим Агентом.
ЗЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ
|0бин г/дл г/л мМоль/л
8-20 недель
!1-22 недели
13-25 недель
16-30 недель
В фетальной крови
11,5 ±0,78
12.3 ±0.89
12.4 ±0,77
13,4± 1,17
115± 7,8
123 ± 8,9
124 ±7,7
134 ± 12
7,13 ±0,48
7,63 ± 0,55
7,69 ± 0,48
8,31 ±0,75
В пуповинной
крови 13,5-20,5 135-205 8,37-12,7
i крови
Рекомендуется, чтобы каждая лаборатория основывала
юбственные диапазоны нормы для населения, которое
(АРАКТЕРИСТИКИ
свои
обслуживается.
в пределах
цикла N =20
Низкий
уровень
Высокий
уровень
средний г/дл 6,7 18,9
СрОткл г/дл 0,05 0,1
К З, % 0,7 0,6
1редел обнаружения: примерно 0,3 г/дл,
^yвcтвитeльнocтb для 10 г/дл : примерно 0,272 на 546 нм,
Сравнительное исследование коммерчески доступного реагента :
' = 0,9999 х + 0,08 г = 0,9962
Результаты линейны до 250 г/л, 25 г/дл, 15,5 ммоль/л (НЬ/4),
ВЫПОЛНЕНИЕ ПРОЦЕДУРЫ ВРУЧНУЮ
Разлейте из пипетки в трубки Бланк Анализ
Разведенный рабочий реагент 5 мл 5 мл
Обессоленная вода 20 мкл
Гомогенизированная кровь 20 мкл
Рекомендуется использовать пипетки замещающего типа для
распределения крови. Ополосните пипетку несколько раз в реагенте.
Хорошо размешайте и инкубируйте 3 минуты при комнатной
температуре. Фиксируйте поглощение на 546 нм (520-560)
относительно бланка.
Вдали отсвета реакция стабильна минимум 1 час.
Заметка ; Специальные процедуры доступны по запросу для
автоматических инструментов. По этому вопросу свяжитесь с
техподдержкой BIOLABO,
РАСЧЕТ
Л=530 нм А=546 нм X=540 H M
НЬ (г/л) Abs X 386,1 Abs X 367,7 Abs X 376,2
НЬ (г/л) Abs X 38,61 Abs X 36,77 Abs X 37,62
НЬ мМоль/л (НЬ/4) Abs X 23,96 Abs X 22,82 Abs X 23,34
)-5 месяцев 13,4-19,8 134-198 8,31-12,28
месяц 10,7-17,1 107-171 6,63-10,6
! месяца 9,4-13,0 94-130 5,83-8,06
i месяца 10,3-14,1 103-141 6,39-8,74
) месяцев 11,1-14,1 111-141 6,88-8,74
) месяцев 11,4-14,0 114-140 7,07-8,68
2 месяцев 11,3-14,1 113-141 7,01-8,74
-2 года 11,0-14,0 110-140 6,82-8,68
1-5 лет 11,0-14,0 110-140 6,82-8,68
11,5-14,5 115-145 7,13-8,99
и Я г 12,0-15-0 120-150 7,44-9,3
2-14 лет М 12,0-16,0 120-160 7,44-9,92
Ж 11,5-15,0 115-150 7,13-9,3
5-17 лет м 11,7-16,6 117-166 7,25-10,29
ж 11,7-15,3 117-153 7,25-9,49
8-44 года м 13,2-17,3 132-173 8,18-10,73
ж 11,7-15,5 117-155 7,25-9,61
t5-64 года м 13,1-17,2 131-172 8,12 -10,66
ж 11,7-16,0 117-160 7,25-9,92
>5-74 года м 12,6-17,4 126-174 7,81-10,79
ж 11,7-16,1 117-161 7,25-9,98
Abs = абсолютное значение.
Эти данные служат только для общего руководства и могут
незначительно варьироваться. Рекомендуется проверять контрольной
кровью,
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
(1) TIETZN. W. Text book of clinical chemistry, 3rd Ed. C.A. Burtis, E.R.
Ashwood,W.B. Saur^ders (1999) cmp. 1657-1688.
(2) Clinical Guide to Laboratory Test. 3rd Ed., N. W . TIETZ (1995) cmp.
312-314.
(3) YOUNG D.S., Effect of Drugs on Clinical laboratory Tests, 4th Ed. (1995)
cmp. 3-325 do 3-330
(4) DRABKIN, D.L, and AUSTIN. J.H., J Biol, Chem., (1935), 112, cmp.51
(5) VAN KAMPEN, E.J. and ZIJLSTRA W.G., Determination of hemoglobin
and its derivatives advances in clinical chemistry (1965), it 141-187
(6) VAN KAMPEN E.J. and ZIJLSTRA W .G ,, International Committee for
standardization in haematology, British journal of haematology (1967), 13
[SuppI] 71
Сделано во Франции
|Версия : AT 82250 12 09 2008|
В пределах Низкий Высокий
цикла N = 20 уровень уровень
Средний г/дл 6,3 17.1
СрОткл г/дл 0,29 0,42
К,3, % 4,6 2,5
1ИНЕИН0СТЬ
--- стр. 71 ---
1
с я
IK mmI
П Р О И З В О Д И Т Е Л Ь :
B IO L A B O S A ,
0 2 1 6 0 , М е з и , Ф р а н ц и я
BIOLABO REAGENTS
WWW. biolabo.fr Б И К А Р Б О Н А Т
Ферментный метод
Реагент для количественного определения общего содержания
углекислоты (СО2) в сы воротке или плазме человеческой крови.
R E F 9 9 8 3 2
R E F 9 9 8 5 2
R 1 8 X 3 0 м л Р а б о ч и й
Р е а г е н т
R 1 6 X 1 0 0 м л Р а б о ч и й
Р е а г е н т
R2 1 X 3 0 м л С т а н д а р т
R2 1 X 3 0 м л С т а н д а р т
Т Е Х Н И Ч Е С К А Я П О Д Д Е Р Ж К А И З А К А З Ы :
Гел: (33)03 23 2515 50
Раке: (33) 03 23 256 256 С € 1УР[цля д и а гн о с т и к и IN V IT R O
][ IDDD
(Л И Н И Ч Е С К А Я З Н А Ч И М 0 С Т Ь ( 1 )
5бщее содержание углекислого газа в крови определяется СО 2,
)астворенной в водном растворе, СО 2 свободно связанной с
шиногруппами в белках, бикарбонатом НСОз’, очень малым
ш иш ством ионов СОз^‘ и угольной кислотой (Н 2СО 3), Примерно 90%
>0 |^ » а з м е находится в форме бикарбонатов,
Определение общего содержания СОгПри определении электролитов
Na+, К+, CI-), газового состава крови и значений pH важно, главным
>бразом, для оценки концентрации НСОз" для определения кислотно-
)сновных нарушений метаболического или респираторного характера,
1 Р И Н Ц И П (4 ) (5)
1>ерментативный метод определения общего количества СОг в виде
жкарбонатов и растворенных газов. Схема реакции выглядит
следующим образом:
НСОз' + Фосфоэнолпируват Оксалоацетат + Н 2РО4"
)ксалоацетат + НАД-Н Малат + НАД*
Уменьшение оптической плотности в результате окисления НАД-Н до
в прямо пропорционально количеству общего СО 2 в образце и
1змеряется при длине волны 380 нм.
: О С Т А В Р Е А Г Е Н Т О В
I Флакон R 1 1
Фосфоэнолпируват
>осяРКнол пиру ват карбоксилаза
Лалат дегидрогеназа
)уфер pH (20°С) 8±0,1
Стабилизатор
Флакон R2 I
зикарбонат натрия
РАБОЧИИ РЕАГЕНТ
8,0 ммоль/л
1,6 ммоль/л
> 1000 МЕ/л
> 200 МЕ/л
66 ммоль/л
СТАНДАРТ
27 ммоль/л
1Л Е Р Ы П Р Е Д О С Т О Р О Ж Н О С Т И
^еагенты BIOLABO предназначены для профессионального
юпользования в лабораториях для диагностики in vitro,
] Проверьте целостность содержимого перед использованием,
1 Используйте надлежащую защиту (перчатки, очки)
J Не набирайте растворы в пипетку ртом,
I При попадании на кожу или в глаза, тщательно промойте область
контакта обильным количеством воды и проконсультируйтесь с
врачом.
i Реагенты содержат азид натрия (концентрация < 0,1%), способный
вступать в реакцию с медью и вызывать протечку. Промойте
большим количеством воды при сливе реагентов.
Паспорт безопасности вещества высылается по первому
требованию.
Утилизация отходов: Следуйте правилам, установленным в Вашей
стране,
;о всеми образцами следует обращаться как с образцами,
ютенциально способными вызвать инфекционные заболевания, в
юответствии с надлежащей лабораторной практикой, используя
соответствующие меры предосторожности. Следуйте законодательству,
действующему в Вашей стране,
П О Д Г О Т О В К А Р Е А Г Е Н Т А
Добавьте к содержимому флакона R1 тот объем дистиллированной или
деионизованной воды, который указан на этикетке.
Аккуратно перемешайте и дождитесь полного растворения, прежде чем
использовать реагент (примерно 2 минуты).
Во избежание контаминации СОг используйте свежую
дистиллированную воду, которая хранилась не более одного дня. Не
набирайте раствор в пипетку ртом.
С Т А Б И Л Ь Н О С Т Ь И Х Р А Н Е Н И Е
Хранить в темном месте, при температуре
закупоренными в оригинальном флаконе.
: . 1 Реагент (Флакон R1) и Стандарт (Флакон R2):
2-8°С, хорошо
закроите крышкой и
Возьмите
храните принеобходимое количество,
температуре 2-8“С.
I Неоткрытые реагенты при соблюдении правил хранения и
использования, описанных в листке-вкладыше, сохраняют
стабильность до истечения срока годности, указанного на этикетке
комплекта.
] Без контаминации готовый рабочий реагент стабилен в течение 4
месяцев. Закрывайте кры ш кой сразу же после использования.
J Не используйте ни один реагент при появлении помутнения и, в
случае, если бланк реагента при длине волны 380 нм < 1,000.
Нельзя использовать разведенный реагент после окончания срока
годности, указанного на этикетке комплекта.
С Б О Р О Б Р А З Ц О В И И Х И С П О Л Ь З О В А Н И Е (2) (в)
Негемолизированная сыворотка. Сбор образцов производиться в
анаэробных условиях. Предпочтительным антикоагулянтом является
гепарин.
Храните образцы при температуре 2-8 °С.не более одного часа.
И Н Т Е Р Ф Е Р Е Н Ц И И (3 )
Гемоглобин: В концентрации до 150 мг/дл не оказывает какого-либо
значительного влияния на результаты анализа.
Билирубин: В концентрации до 30 мг/дл не оказывает какого-либо
значительного влияния на результаты анализа,
Липемия: Не используйте подобные образцы.
Более подробный обзор факторов, способных оказывать влияние на
результаты анализа, приведен в публикации Д.С.Янга,
НЕОБХОДИМЫЕ, НО НЕ ПОСТАВЛЯЕМЫЕ МАТЕРИАЛЫ
1. Базовое аналитическое оборудование для медицинских лабораторий.
2. Нормальная и патологическая контрольная сыворотка,
3. Деминерализованная вода для приготовления реагента,
К А Л И Б Р О В К А
• Стандарт (флакон R2) прилагается к комплекту или любой
калибратор, пригодный для референсного метода.
Частота проведения калибровки зависит от функций анализатора и
сохранности реагента.
Рекомендуется проводить калибровку в следующих случаях:
1. При использовании новой партии реагентов.
--- стр. 72 ---
I icAuuwiy/TvriDeinvm апалгюа i v^c V /. i_ojiH I4 v jn I iDnoi^ 0Dlл^./^лl диаиаоипа ^a/147
после использования нового флакона со свежей сывороткой.
(ОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
• Контрол и, уста новл е н ныедляданного метод а.
• Внешняя программа контроля качества.
Рекомендуется выполнять контроль качества в следующих случаях:
• Минимум один раз за цикл
• Минимум один раз за 24 часа.
• При смене флакона с реагентом.
• После проведения техобслуживания анализатора.
:сли значения контроля выходят за установленный диапазон,
(ыполните следующие действия;
1. Повторите анализ с тем же контролем,
2. Если значения по-прежнему выходят за пределы диапазона,
приготовьте свежий контроль и повторите анализ.
3. Если значения по-прежнему выходят за пределы диапазона,
используйте новый флакон с калибратором или свежий
калибратор и повторите анализ.
4. Если значения по-прежнему выходят за пределы диапазона,
выполните калибровку с новым флаконом реагента.
5. Если значения по-прежнему выходят за пределы диапазона,
обратитесь в Службу технической поддержки компании
BIOLABO или к Вашему дистрибьютору.
ОЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ (2)
>икрабонат (мэкв/л) (ммоль/л)
Артериальная
:ровь
венозная
:ровь 22-29
[21-28]
[22-29]
^ек> ^ ндуется. чтобы каждая лаборатория устанавливала свои
собственные диапазоны нормы для популяции, которую она
(бслуживает.
(АРАКТЕРИСТИКИ
ручной анализ
(7)
В пределах
цикла
N=20
Низкий
уровень
Высокий
уровень
Среднее 12,4 38,2
мэкв/л
СО мэкв/л 0,9 0,7
К. В, % 7,4 1,8
Автоматический анализ
В пределах
цикла
N=20
Низкий
уровень
Высокий
уровень
Среднее 10,0 40
мэкв/л
СО мэкв/л 0,7 0,6
К, В. % 7,3 1,4
1редеп обнаружения; примерно 3,0 мэкв/л
^yвcтвитeльнocть для 1 мэкв/л; примерно 0,010 Лотн. плотности
. Производитель , Испопьздо
------- Инвитро
Сравнительное исследование коммерчески доступного реагента
Ручной анализ; у = 1,004 х + 0,31 г = 0,9744
Автоматический анализ; у = 0,96 х + 0,40 г = 0,96
ЛИНЕЙНОСТЬ
Результаты линейны до 50 мэкв/л (50 ммоль/л)
Кроме того, разведенные образцы с деминерализованной {не
содержащей СОг) водой и повторный анализ требуют учитывать
коэффициент разбавления. Предел линейности зависит от
коэффициента образец/реагент.
ВЫПОЛНЕНИЕ ПРОЦЕДУРЫ ВРУЧНУЮ
Оставьте реагенты и образцы при комнатной температуре.
Наберите в пробирки для
анализа при 37°С (30°С);
Бланк Стандарт Анализ
Рабочий реагент (флакон
R1)
1 мл 1мл 1 мл
Деминерализованная вода 10 мкл
Стандарт Ю нкл
Образец 10 мкп
Тщательно перемешайте. Инкубируйте при температуре З /Х (30°С)
в течение 5 минут.
Используйте кювету с длиной пути 1 см и считайте относительную
плотность при 380 нм относительно деминерализованной воды.
Примечание; По требованию возможно получение инструкций по
выполнению процедур на автоматических анализаторах. Обращайтесь
в Службу технической поддержки компании BIOLABO.
РАСЧЕТ
. Вычисление результатов выполняется следующим образом:
Общее СО; ’ п -o r
Концентрация стандарта
Между
циклами
N= 2 0
Низкий
уровень
Высокий
уровень
Среднее 12,4 38,2
мэкв/л
СО мэкв/л 0.4 2,1
К.В. % 3,1 5,5
Между
циклами
N= 2 0
Низкий
уровень
Высокий
уровень
Среднее 10,0 40,0
мэкв/л
СО мэкв/л 0.8 1,6
К.В. % 8.0 3,9
(*) Общее содержание СОг примерно на 10% выше концентрации
бикарбоната
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
(1) TIETZ N. W. Text book of clinical chemistry, 3rd Ed. C.A. Burtis, E.R.
Ashwood.W.B. Saunders (1999) cmp. 1104-1124.
(2) Clinical Guide to Laboratory Test, 3rd Ed., N. W. TIETZ (1995) cmp. 84-
85.
(3) YOUNG D.S., Effect of Drugs on Clinical laboratory Tests, 4th Ed. (1995)
cmp. 3-84 do 3-88
(4) NORRIS KA. ATKINSON AR, SMITH WG. Clin. Chem.. (1975) 21:1093.
(5) Fon-ester RL, Wataji JJ, Silvennan DA, Pierre JK. Clin. Chem. (1976) 22:
Стрю243-245
(6) Henry RL, Clin. Chem.. "Principles and technics" Harper and Row New-
York (1974)
(7) National Committee for clinical laboratory standards. User evaluation of
precision perfonvance of clinical chemistry devices. NCCLS (1984), NCCLS
Publication EP5-T.
Сделано во Франции
|Версия ;АТ 99832 01 10 2008|
IVD Г
Темп. Огр.
|REF|
кат.номер
СИ
см вкладыш
LOT
Номер партии
--- стр. 73 ---
1. Базовое аналитическое оборудование для медицинских
лабораторий.
2. Нормальный и патологический контроли.
ГВерсия :АТ 99261 17 02 200Э |
(А Л И Б Р О В К А
• Стандарт (флакон R3) прилагается к комплекту.
• Или любой калибратор, пригодный для референсного
метода.
Частота проведения калибровки зависит от функций анализатора и
юхранности реагента.
Рекомендуется проводить калибровку в следующих случаях;
1. При использовании новой партии реагентов.
2. После проведения техобслуживания анализатора.
3. Если контрольные значения выходят за пределы диапазона
даже после использования нового флакона со свежей
N=20
Среднее 8 6 ,2 500
мкг/дл
СО мкг/дл 3,2 3,9
К.В. % 3,7 0,78
N=20
Среднее 201,4 499,2
мкг/дл
СО мкг/дл 7,05 19,6
К В. % 3,5 3,92
Предел обнаружения: приблизительно 45,3 мкг/дл
Чувствительность для 500 мкг/дл NH 3: приблизительно 0,115 отн.
плотности при длине волны 340 нм.
ЛИНЕЙНОСТЬ
Метод сохраняет линейность до 2000 мг/дл (1175 ммоль/л).
Более высокие значения, образцы, разбавленные
деминерализованной {свободной от аммония) водой, и повторная
оценка требуют для вычисления результата учитывать коэффициент
разбавления.
Предел линейности зависит от коэффициента образец/реагент.
£
сывороткой.
СОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Контроль, установленный для данного метода.
• Внешняя программа контроля качества.
Рекомендуется выполнять контроль качества в следующих случаях:
• Минимум один раз за цикл
• Минимум один раз за 24 часа.
• При смене флакона с реагентом.
• После проведения техобслуживания анализатора.
Если значения контроля выходят за установленный диапазон,
»ыполните следующие действия:
1. Повторите анализ с тем же контролем.
2. Если значения по-прежнему выходят за пределы диапазона,
приготовьте свежий контроль и повторите анализ.
Если значения по-прежнему выходят за пределы диапазона,
используйте новый флакон с калибратором или свежий
калибратор и повторите анализ.
4. Если значения по-прежнему выходят за пределы диапазона,
выполните калибровку с новым флаконом реагента.
5. Если значения по-прежнему выходят за пределы диапазона,
обратитесь в Службу технической поддержки компании
BIOLABO или к Вашему дистрибьютору.
ОЖИДАЕМЫЕ ЗНАЧЕНИЯ (2)
JH3 мг/дп [ммоль/л]
)-10 дней 170-341 [100-200]
0 дней до 2
1ет 68-136 [40-80]
: 2 лет 19-60 [11-35]
каждая лаборатория устанавливает собственный диапазон нормы
1ЛЯ популяции, которую она обслуживает.
ХАРАКТЕРИСТИКИ
пределах Уровень Уровень
цикла I II
Между Уровень Уровень
циклами 1 II
--- стр. 74 ---
ЗЫПОЛНЕНИЕ ПРОЦЕДУРЫ ВРУЧНУЮ
вставьте реагенты и образцы при комнатной температуре.
^aбepитe в маркированные
|робирки;
Бланк Стандарт Анализ
1лазма 100 мкл
Стандарт R3 100 мкл
Деминерализованная вода 100 мкл
^еагент 1 1,5 мл 1,5 мл 1,5 мл
1еремешайте. Оставьте стоять при комнатной температуре в
ечение 1 минуты.
Считайте относительную плотность Д1 при 340 нм относительно
юды.
*еагент 2 J1 10 мл 1 1 10 мл 1 1 10 мл
1еремешайте. Оставьте стоять при комнатной температуре в
■ечение 10 минут.
Считайте относительную плотность А2 при 340 нм относительно
юды.
1римечание: По требованию возможно получение инструкций по
(ыполнению процедур на автоматических анализаторах,
Обращайтесь в Службу технической поддержки компании BIOLABO.
>А
вычисление результатов выполняется следующим образом:
•А1 — А2;Лн:а,1ИЗ - iA l —
\ммоний= - а : Ю тзнддрт - (А1
Сонцентрация стандарта
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
1 ) TIETZN . W . T ext book of clinical chem istry, 3rd E d . C .A . B urtls, E .R .
\shw ood, W . B . S aunders (1999) cm p . 1146 -1 1 4 1 .
2 ) C linical G uide to Laboratory T e s t. 3rd E d .. N . W . TIE TZ (1995) c m p .
1 4 -4 5 .
3 ) Y O U N G D .S .. E ffect of D rugs o n C linical laboratory T e sts, 4 th E d .
1 9 9 5 ) cm p . 3-40 d o 3-42
4 ) M O N ZD A C A . E H R ILC H G E , and SEEG M ILLER JE.: An enzym atic
ieterm ination of A m m onia in biological fluids. T h e journal of labporatory
ind C linical M edicine (J . L a b . C lin . M ed.) V ol 6 6 1965 cm p. 5 26-531.
5 ) ^ K A M P E N , E .J . and SCHIPHO RSTM .E. A kinetic detem iination
}fA^^nia in P la sm a . C linica C him ica A cta, 5 6 (1974) cm p. 1 5 1 -1 5 7 .
Сделано во Франции
Зерсия :АТ 99261 1702 2009|
--- стр. 77 ---
ф
Некоторые спирты влияют на концентрацию определяемого алкоголя, однако
реагируют гораздо медленней этанола:
Определяемый субстрат
э т а н о л
н -б у т а н о л
и з о - п р о п а н о л
м е т а н о л
э т и л е н г л и к о л ь
а ц е т о н
Относительная скорость
реакции (п о с р а в н е н и ю с
э т а н о л о м ), %
100
2 8
0 ,3
1,6
0,0
Д л я более полного об зора ф акт оров, влияю щ их н а определение эт ан о л а
р еко м ен д ует ся обрат ит ься к публ икац ии Ю нга (Young D . S . , 1 995)
Необходимые для анализа, но не поставляемые материалы:
• Оборудование для анализа (спектрофотометр)
• Нормальный и патологический контрольный материал
• Деминерализованная вода для растворения реагента
• ТХУ (трихлоруксусная кислота), 62,5 г/л
Калибровка:
• С помощью стандарта^ поставляемого с набором
• С помощью любого иного калибратора, соотносимого с методом
Частота калибровки зависит от свойств и функций анализатора, а так же от со
хранности реагента. Для получения устойчивых стабильных результатов реко
мендуется калибровка метода при замене партии реагента, после сервисного об
служивания анализатора, при выходе за границы допустимых значений кон
трольной сыворотки или при использовании нового флакона свежего контроль
ного материала.
Контроль качества:
• С применением аттестованного контрольного раствора, подходящего к
данному методу определения алкоголя
• По программе внешнего контроля качества
Рекомендуется проводить контроль качества в следующих случаях:
• Как минимум, один раз за серию исследований
• Как минимум, один раз в сутки
• При использовании нового флакона с реагентом
При выходе за границы допустимых значений контрольной сыворотки необхо
димо выполнить следующие процедуры:
1. Повторить анализ с текущим контрольным материалом
2. Если значение, по-прежнему, вне границ контроля, повторить анализ с но
вым контрольным материалом
--- стр. 78 ---
3. Если значение, по-прежнему, вне границ контроля, провести калибровку с
новым стандартом и повторить анализ
4. Если значение, по-прежнему, вне границ контроля, повторить анализ с но
вым реагентом
Ожидаемые значения:
Концентрация этанола в крови Степени алкогольного опьянения
г/л ммоль
0 , 5 -1,0 1 0 , 9 - 2 1 , 7 Р в о т а , з а м е д л е н и е р е ф л е к с о в , р а з д в о е н и е з р е н и я
> 1,0 > 2 1 ,7 У г н е т е н и е Ц И С
> 4 ,0 > 86,8 К о м а
Моча: з н а ч е н и я в п о с т - а б с о р б ц и о н н о м п е р и о д е б л и з к и к з н а ч е н и я м в к р о в и
Сыворотка: р е з у л ь т а т у м н о ж и т ь н а 1 ,2 -1 ,3 д л я п о л у ч е н и я з н а ч е н и я с о д е р ж а н и я э т а н о л а в
ц е л ь н о й к р о в и
Характеристики воспроизводимости метода;
В одном из
мерении
п=20
Низкий уро
вень
Высокий
уровень
М еж ду из
мерениями
п=20
Низкий уро
вень
Высокий
уровень
С р е д н е е з н а
ч е н и е , г /л
0 ,4 1 2 1 ,0 8 3
С р е д н е е з н а
ч е н и е , г /л
0 ,4 1 6 1 ,0 9 5
С К О , г /л 0 ,0 0 8 7 0 ,0 1 4 1 С К О , г /л 0 ,0 1 6 0 ,0 1 3
КВ , % 2,1 1 ,3 КВ , % 3 ,9 7 1 ,2 3
Предел обнаружения: 0,1 г/л
Чувст вит ельност ь для 1 ,0 г /л : приблизительно 0,430 а.о.е. при длине
волны 340 нм
Л инейн ост ь: 3,0 г/л (65 ммоль)
При превышении предела линейности необходимо разбавить образец фи
зиологическим раствором и повторить анализ, скорректировав концентрацию
согласно степени разбавления. Предел линейности зависит от соотношения
проба/реагент.
Выполнение анализа ручным методом:
Довести реагент и пробу до комнатной температуры.
П роц едура N91: без депрот еин изац ии 'сы ворот ка, п л а зм а , м о ч а )
Р а з л и т ь в п р о б и р к и н а 5 м л
Х о л о с т а я
п р о б а С т а н д а р т О п ы т
Р а б о ч и й р е а г е н т 3 ,0 м л 3 ,0 м л 3 ,0 м л
Д е м и н е р а л и з о в а н н а я в о д а 10 м к л
С т а н д а р т 10 м к л
П р о б а 10 м к л
С м е ш а т ь . И н к у б и р о в а т ь 10 м и н п р и т е м п е р а т у р е 3 7 ,0 ° С
И з м е р и т ь о п т и ч е с к у ю п л о т н о с т ь р а с т в о р а п р и д л и н е в о л н ы 3 4 0 м н п р о т и в х о л о с т о й п р о б ы
Р е а к ц и я с т а б и л ь н а 2 ч а с а
--- стр. 79 ---
П роц едура № 2: с деп р о т еи ни зац и ей (ц ельная ировь, ж е л т у ш н а я , гемо-
л и зн ая или м у т н а я сы ворот на или п л а зм а )
П р и г о т о в л е н и е с у п е р н а т а н т а
Р а з л и т ь в ц е н т р и ф у ж н ы е п р о б и р к и С т а н д а р т П р о б а
Р а с тв о р т р и х л о р у к с у с н о й к и с л о т ы 6 2 ,5 г /л1,8 м л 1,8 м л
С т а н д а р т 200 м к л
П р о б а 200 м к л
З а кр ы ть п р о б и р к и , т щ а т е л ь н о п е р е м е ш а т ь и в ы д е р ж а т ь 5 м и н
Ц е н т р и ф у г и р о в а т ь 5 м и н п р и 2 0 0 0 - 3 0 0 0 о б о р о т о в , с т а н д а р т н е ц е н т р и ф у г и р о в а т ь
А н а л и з с у п е р н а т а н т а
Р а з л и т ь в п р о б и р к и н а 5 м л Х о л о с т а я
п р о б а
С т а н д а р т О п ы т
Р а б о ч и й р е а г е н т 3 ,0 м л 3 ,0 м л 3 ,0 м л
Д е м и н е р а л и з о в а н н а я в о д а 100 м к л
С т а н д а р т 100 м к л
П р о б а 100 м к л
С м е ш а т ь . И н к у б и р о в а т ь 1 0 м и н п р и т е м п е р а т у р е 3 7 ,0 ° С
И з м е р и т ь о п т и ч е с к у ю п л о т н о с т ь р а с т в о р а п р и д л и н е в о л н ы 3 4 0 м н п р о т и в х о л о с т о й п р о б ы
Р е а к ц и я с т а б и л ь н а 2 ч а с а
Д л я а в т о м а т и ч е с ки х ан ал и зат о р о в п р ед усм от рен ы специальны е / и е -
т одиии, пост авляем ы е по запросу.
Расчеты:
Результат рассчитывают по формуле:
Г У й ч т A b s (п р о б а ) [с(пробы )
Abs (стандарт)
X [с(стандарт)
Рекомендуемая литература:
1. Tietz N.W. Textbook of clinical chemistry, 3'^ edition, CA. Burtis, E.R . Ash-
wood, W.B. Saunders (1999) p. 922-927
1. Clinical guide to laboratory test, 3’'^ edition, N. W. Tietz (1995) p. 224-225
3. Young D.S. Effect of drug on clinical laboratory test, 4^^ ed. (1995) p. 3-251-to
3-253
4. Gadsden R.H., Taylor E.H., Steindel SJ. et al: Ethanol at biological fluids by en
zymic analysis. In: Selected methods o f emergency toxicology. C .S . Frings,
W.L Faulkner, Eds. Vol. 11, Selected methods in clinical chemistry, Washing
ton DC, A ACC Press, 1986, p. 63-65