--- стр. 1 ---
«УТВЕРЖДАЮ»
'^р^В «ы й директор
ностикс»
, Абасов
_ 20//г.
ИНСТРУКЦИЯ по ПРИМЕНЕНИЮ
Набора реагентов
для универсального/высокочувствительного определения С-реактивного белка
латекс-усиленным иммунотурбидиметрическим методом в сыворотке и плазме крови
(СРБ-УНИВЕРСАЛЬНЫЙ/ВЫСОКОЧУВСТВИТЕЛЬНЫЙ)
р -у * * * * * * * /* И»!)!**
НАЗНАЧЕНИЕ
Набор предназначен для количественного определения содержания С-реактивного белка (СРВ) в сыво
ротке и плазме крови человека методом латекс-усиленной иммунотурбидиметрии в универсальном (диапазон
концентраций СРВ 0,3-350 мг/л) и высокочувствительном (диапазон концентраций СРВ 0,05-20 мг/л) режимах
для применения на ручных фотометрах, полуавтоматических и автоматических анализаторах в клинико-
диагностических лабораториях.
Количество определений зависит от объема фасовки и используемого биохимического анализатора.
ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ
Набор реагентов СРВ-УНИВЕРСАЛЬНЫЙ/ВВ1СОКОЧУВСТВИТЕЛЬНЫЙ должен использоваться
квалифицированным персоналом в области клинической лабораторной диагностики.
СПРАВОЧНАЯ ИНФОРМАЦИЯ
С-реактивный белок является одним из наиболее чувствительных маркеров повреждения тканей орга
низма. Наличие СРВ в крови является признаком воспалительного процесса, травмы, некроза, проникновения
инфекционных агентов. Уровень СРВ резко повышается в острый период заболевания, поэтому его называют
маркерным белком острой фазы. С переходом в хроническую форму заболевания уровень СРВ снижается. По
вышение концентрации СРВ является ранним диагностическим признаком заболевания. Функции в организме:
СРВ обладает многочисленными неспецифическими защитными свойствами, в частности, активирует нейтро
филы и синтез ими иммуноглобулинов, выступает в роли опсонина, непосредственно связывая липополисаха-
риды - микробные токсины, ассоциирует их выведение из внутрисосудистого русла и последующий лизис.
НОРМАЛЬНЫЕ ЗНАЧЕНИЯ
С ы ворот ка/т азм а К онцент рация СРБ, м г/л
Взрослые <5,0
Новорожденные до 3-х недель <4,1
Младенцы до 4-х недель, дети <2,8
Рекомендуется в каждой лаборатории уточнить диапазон значений нормальных величин для обследуе
мого контингента людей.
МЕТОД
Латекс-усиленный иммунотурбидиметрический метод с двумя режимами измерения: - универсальный,
характеризуется широким спектром определения (диапазон концентраций СРВ 0,3 - 350 мг/л) при малом объе
ме образца; - высокочувствительный, рекомендуется для образцов с концентрацией СРВ ниже 0,3 мг/л, а также
когда требуется высокая точность и качество определения в диапазоне 0,05 - 20 мг/л.
ПРИНЦИП МЕТОДА
Метод основан на иммунохимической реакции агглютинации между антителами к человеческому СРВ,
иммобилизованными на латексных (полистироловых) частицах, и С-реактивным белком, присутствующим в
пробе. Иммобилизация антител на полистироловых частицах значительно повышает чувствительность и точ
ность метода, позволяя использовать набор в двух режимах. Фотометрически при длине волны 578 (570-590) нм
(универсальное определение) и 500 (490-510) нм (высокочувствительное определение) определяется оптическое
--- стр. 2 ---
логлощение раствора в ходе реакции. Величина оптической плотности (степень помутнения реакционной сме
си) зависит от содержания СРВ в образце и определяется по нелинейной калибровочной кривой.
СОСТАВ НАБОРА
Реагент 1: буферно-солевой раствор, содержащий HEPES, 10 ммоль/л; полиэтиленгликоль 6000, 2,5%;
аммония ацетат, 20 ммоль/л; натрия хлорид, 150 ммоль/л.
Реагент 2: суспензия латексных частиц, покрытых антителами к С-реактивному белку человека; фос
фатно-солевой буфер, 10 ммоль/л; Tween 20, не более 0,1%.
Инструкция по применению.
Варианты исполнения:
1. Реагент 1 - 1 флакон 65 мл,
Реагент 2 - 1 флакон 21 мл.
Инструкция по применению;
2. Реагент 1 - 2 флакона по 65 мл.
Реагент 2 - 2 флакона по 21 мл.
Инструкция по применению;
3. Реагент 1 - 1 канистра 750 мл.
Реагент 2 - 1 канистра 250 мл.
Инструкция по применению.
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
• Линейность:
-универсальное определение в диапазоне от 0,3 до 350 мг/л;
- высокочувствительное определение от 0,05 до 20 мг/л.
• Отклонение от линейности не превышает 10%.
• Чувствительность:
- универсальное определение не более 0,3 мг/л;
- высокочувствительное определение не более 0,05 мг/л.
• Коэффициент вариации - не более 10%.
• Эффект прозоны не наблюдается до концентрации СРВ 1000 мг/л.
КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА
Для калибровки фотометрических систем рекомендуется использовать калибраторы TruCal CRP U и
TruCal CRP hs производства «DiaSys Diagnostic Systems GmbH» (Германия), РУ № ФСЗ 2010/07505, либо КА-
ЛИВРАТОР СРВ ДЦС производства АО «ДИАКОН-ДС» (Россия), РУ № РЗН 2017/6572. Для внутреннего кон
троля качества с каждой серией образцов рекомендуется проводить измерения контрольных сывороток TruLab
CRP и TruLab CRP hs, уровни 1 и 2, производства «DiaSys Diagnostic Systems GmbH» (Германия), РУ № ФСЗ
2010/07506.
Возможно использование других контрольных сывороток, аттестованных в соответствии с латекс-
усиленным иммунотурбидиметрическим методом и не уступающих по своим свойствам рекомендуемым.
Калибровку рекомендуется проводить в следующих случаях: при нестабильности результатов измере
ния контроля качества, в случае выхода значений контроля качества за пределы установленных диапазонов для
используемого лота контрольного материала, при использовании нового Набора.
ОБРАЗЦЫ
Негемолизированная сыворотка крови, гепаринизированная или ЭДТА-плазма.
С т абш ьност ь С Р Б в сы ворот ке/т аш е:
До 8 суток при 2-8°С
Не более 3 месяцев при -20°С
Замораживать образцы можно не более одного раза.
Загрязненные образцы хранению не подлежат!
ОБОРУДОВАНИЕ И РЕАГЕНТЫ
спектрофотометр, фотометр, полуавтоматический или автоматический биохимический анализатор,
длина волны 500 (490-510) и 578 (570-590) нм;
термостат, поддерживающий температуру 37 ± ГС;
вода очищенная;
калибратор С-реактивного белка универсальный - TruCal CRP U (кат. № 1 7040 99 10 059, производ
ство DiaSys Diagnostic Systems GmbH, Германия) или КАЛИБРАТОР СРБ ДЦС (кат. № 10 371, произ
водство АО «ДИАКОН-ДС», Россия);
калибратор С-реактивного белка высокочувствительный - TruCal CRP hs (кат. №1 7080 99 10 059, про-
--- стр. 3 ---
изводство D iaSys D iagnostic Systems G m bH , Германия).
Г
ПОДГОТОВКА к АНАЛИЗУ
Реагенты 1 и 2 готовы к использованию.
Следует тщательно закрывать флаконы с Реагентами 1 и 2 непосредственно после каждого использова
ния, в том числе при хранении на борту автоматических биохимических анализаторов (в нерабочее время).
Флаконы с реагентами не рекомендуется встряхивать перед использованием.
ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА
Адапт ации к авт ом ат изированны м сист ем ам запраш ивайт е дополнит ельно.
Компоненты реакционной смеси отбирать в количествах, указанных в таблице.
Контрольная проба Калибровочная проба Опытная проба
Отмерить, мкл* Универсальное
определение
Высоко
чувстви
тельное
определе
ние
Универсальное
определение
Высоко
чувстви
тельное
определе
ние
Универсальное
определение
Высоко
чувстви
тельное
определе
ние
Дистиллированная
вода 3 30 - - - -
Калибратор** - - 3 30 - -
Образец - - - 3 30
Реагент 1 270 270 270
Пробы перемешать и вьщержать при температуре 37°С в течение 3-5 минут. Затем добавить:
Реагент 2 90 90 90
Пробы перемешать, через 10 секунд измерить оптическую плотность (А]) опытной и калибровочных проб против кон
трольной пробы при длине волны 578 (570-590) нм (универсальное определение) или 500 (490-510) нм (высокочувстви
тельное определение) в кювете с длиной оптического пути 10 мм. Инкубировать 5 мин при 37°С и повторно измерить
оптическую плотность опытной и калибровочных проб против контрольной пробы (А 2) при той же длине волны.
* Примечание. При использовании полуавтоматических и автоматических биохимических анализаторов
количество реагентов и анализируемых образцов в зависимости от объема используемой кюветы может быть
пропорционально изменено (соотношение реагент 1: образец: реагент 2 составляет для универсального опреде
ления 90:1:30, для высокочувствительного определения 90:10:30).
** См. п. «Контроль качества».
РАСЧЕТЫ
Вычислить ДА=А 2 - А ь построить калибровочный график и по нему определить концентрацию СРВ в
образцах.
При использовании автоматических или полуавтоматических биохимических анализаторов концентра
ция СРВ определяется по калибровочной кривой, построенной по пяти точкам с использованием соответству
ющей математической модели, например, logit/log.
СПЕЦИФИЧНОСТЬ/ПОМЕХОУСТОЙЧИВОСТЬ
Триглицериды до 20000 мг/л, билирубин до 400 мг/л, гемоглобин до 5000 мг/л, ревматоидный фактор
до 300 МЕ/мл не влияют на точность анализа.
ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ
Транспортирование должно производиться с использованием крытого грузового авто-, авиа-, ж/д-
транспорта, в соответствии с требованиями и правилами, принятыми на данном виде транспорта, при темпера
туре 2-8°С. Допускается транспортирование Набора при температуре до 25°С не более 5 суток.
ХРАНЕНИЕ
Хранение Набора должно производиться при температуре 2-8°С в упаковке предприятия-изготовителя
в течение всего срока годности. Допускается хранение Набора при температуре до 25°С не более 5 суток. Замо
раживание компонентов Набора не допускается.
УСЛОВИЯ ЭКСПЛУАТАЦИИ
Набор должен применяться согласно Инструкции по применению. При соблюдении условий хранения
все компоненты Набора стабильны в течение всего срока годности.
После вскрытия флаконов реагенты стабильны до конца месяца, указанного в сроке годности, при хра-