Набор реагентов "BioPlex 2200 HIV Ag-Ab Reagent Pack" для одновременного определения антигена p24 ВИЧ-1, антител к ВИЧ-1, 2 в сыворотке и плазме крови человека методом мультиплексной проточной иммунофлуоресценции на приборе BioPlex 2200 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 4 --- С Ш Э УСЛОВНЫЕ ОБОЗНАЧЕНИЯ REF Ф LOT ш ! I . I Каталожны Номер серииПредупре и номер н 7 н ждение Произвол Количество итель тестов Температур ные пределы Срок годности (год/месяц/дат а) IVD □ 3 с с ЕС REP Для диагностики ш vitro Обратитесь к руководству по А Внимание! Изучите прилагаемую документацию применению BEAD Набор микросфер Соответствует европейским стандартам Авторизованный представитель в Европейском Союзе CONJ 1 CONJ 2 CONT VER Конъюгат Содержит Версия HIV Ag-Ab RftCK Набор реагентов «BioPlex 2200 HIV Ag- Ab Reagent Pack» BioPlex 2200 HIV Ag-Ab Биологическая опасность при нарушении целостности кожных покровов --- стр. 5 --- Оглавление УСЛОВНЫЕ ОБОЗНАЧЕНИЯ...................................................................................................................2 НАЗНАЧЕНИЕ.................................................................................................................................................5 КРАТКИЙ ОБЗОР И ПОЯСНЕНИЯ.........................................................................................................5 ПРИНЦИП МЕТОДА....................................................................................................................................6 СОСТАВ НАБОРА..........................................................................................................................................6 НЕОБХОДИМЫЕ ДОПОЛНИТЕЛБНБ1Е МАТЕРИАЛЕ! И ИЗДЕЛИЯ, ИОСТАВЛЯЕМБ1Е КОМПАНИЕЙ BIO-RAD.....................................................................................8 ПРЕДУПРЕЖДЕНИЯ/ МЕРЕ! ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ ................................................................9 ПОРЯДОК ЗАБОРА И РАБОТА С ОБРАЗЦАМИ ............................................................................11 ПОДЕОТОВКА И ХРАНЕНИЕ РЕАЕЕНТОВ....................................................................................12 ПРИЗНАКИ НЕСТАБИЛБНОСТИ ИЛИ ДЕЕРАДАЦИИ РЕАЕЕНТОВ ...................................12 ПРОЦЕДУРА..................................................................................................................................................12 A) Калибровка ..........................................................................................................................................13 B) Контроль качества.............................................................................................................................14 C) З агрузка/обработка образцов ....................................................................................................15 РЕКОМЕНДАЦИИПО ИНТЕРПРЕТАЦИИ РЕЗУЛБТАТОВ ......................................................15 Вычисление................................................................................................................................................15 Анализ ДАННЫХ.........................................................................................................................................15 ОЕРАНИЧЕНИЯ МЕТОДА.......................................................................................................................18 ТЕХНИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ...............................................................................................20 Диагностическая СПЕЦИФИЧНОСТЬ..................................................................................................20 Доноры крови ....................................................................................................................... 20 Госпитализированные пациенты .......................................................................................20 Диагностическая чувствительность .............................................................................................20 Определение антигенов ВИЧ-1/ВИЧ-2 в культуре супернатантов ...............................20 Реактивность подтверж денных положительных на ВИЧ-1 образцов ........................20 Реактивность подтверж денных положительных на антитела к ВИЧ-2 образцов... 22 Реактивность образцов псщиентов с сочетанной инфекгщей ВИ Ч -1/-2 ......................22 Панели сероконверсии ВИ Ч-1 .............................................................................................22 Панель с низкими титрами антител ................................................................................23 Аналитическая чувствительность ................................................................................................23 Воспроизводимость и точность результатов анализа ...........................................................24 Воспроизводимость результатов ....................................................................................................24 Промежуточная точность...................................................................................................................26 Про.ме.жуточная точность меж ду теста.ми - дисперсионный анализ (ANOVA) .......26 Про.межуточная точность .между серия.ми - дисперсионный ана.шз (ANOVA) .........28 665-0534А рус Руководство по применению 3 --- стр. 6 --- А налитическая специф ичн ость .....................................................................................................................................30 Перекрестная реакт ивност ь .............................................................................................30 Интерференция ................................................................................................................... 31 Х ук -эфф ект ............................................................................................................................................................................................31 СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ..........................................................................................................32 ИНФОРМАЦИЯ О ТОВАРНОМ ЗНАКЕ.................................................................................35 --- стр. 12 --- соответствии с рекомендуемыми Общими мерами предосторожности при работе с патогенами, передающимися с кровью, согласно рекомендациям по Биобезопасности 2 уровня в действующих теребованиях CDC/NIH (Центр по контролю и профилактике заболеваний/Национальный Центр Исследования Здоровья) Биобезопааюст ь в микробиологических и биомедицинских лабораториях^^, WHO Руководство по безопасности в лаборатории^^, а также требованиям по биобезопасности 2 уровня и/или местным, региональным, или национальным требованиям^'^. В данном наборе содержатся следующие производные человеческой крови: a. Каждая единица человеческой сыворотки, используемая для производства наборов реагентов «BioPlex 2200 HIV Ag-Ab Reagent Pack» (включая наборы калибраторов и контрольных материалов), была проверена методами, одобренными FDA, на поверхностный антиген вируса гепатита В (HBsAg) и антитела к вирусу гепатита С (HCV), все реакции были отрицательными. b. Материалы человеческого происхождения, используемые при приготовлении отрицательного контроля, также проверены методами, одобренными FDA, на вирус иммунодефицита человека (ВИЧ-1 и ВИЧ-2), все реакции были отрицательными. c. Материалы человеческого происхождения, содержащие человеческие антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2, подвергались термической обработке. d. Калибратор антигенов, содержащий антиген ВИЧ-1 р24 и положительный контроль подвергались инактивации хаотропным агентом. 5. Любые материалы человеческого происхождения следует рассматривать как потенциально опасные в плане инфекционного заражения; обращайтесь с ними, используя принятые меры биологической безопасности и предосторожности, указанные в нормативах 29 CFR 1910.1030^". 6. Не следует курить, принимать пищу или пить в помещениях, где проводится работа с биообразцами пациентов или с реагентами. 7. Не пипетируйте рто.м. 8. Данный набор должен использовать только квалифицированный персонал, обученный лабораторным процедурам и ознакомленный с потенциальными рисками. При работе с любыми реагентами и образцами и во время эксплуатации прибора BioPlex 2200 пользуйтесь средствами индивидуальной защиты, включая лабораторную одежду, защиту для глаз/лица, а также одноразовые перчатки (рекомендуются синтетические, но не латексные, перчатки). После проведения анализа тщательно помойте руки. 9. Утилизируйте любые отходы в соответствии с действующими национальными, региональными и/или местными требованиями. 10. В процессе работы или утилизации любые отходы, содержащие отобранные у пациентов образцы или биологические материалы, должны рассматриваться как представляющие биологическую опасность. 11. Обращайтесь с химическими реагентами в соответствии с принципами надлежащей лабораторной практики (GLP). 12. Немедленно и тщательно устраняйте любые утечки/проливы. Проведите обеззараживание поверхности, на которой произошла утечка/пролив биологически опасных материалов, с использованием эффективного дезинфектанта. Произведите соответствующую утилизацию загрязненных материалов. 13. Для получения более детальной информации по безопасности, а также ознакомления с особыми мерами предосторожности относительно имеющихся --- стр. 13 --- химических и биологических рисков, обратитесь к Паспорту безопасности материата (SDS). Паспорта безопасности материата доступны на сайте www.bio-rad.com или могут быть предоставлены по запросу. 14. Не пользуйтесь наборами и материатами с истёкши.м сроком годности. Срок годности указывается на всех упаковках. 15. Не меняйте крышки и пробки с различных пробирок и флаконов; это может привести к перекрестной контаминации. 16. Следует чётко соблюдать протокол, указанный в настоящем документе, для обеспечения надлежащего использования данного продукта. При получении искаженных результатов обратитесь в Службу технической поддержки компании Bio-Rad. 17. Никогда не смешивайте содержимое разных флаконов одного и того же реагента. Это может привести к контаминации реагентов и нарушить эксплуатационные характеристики набора. 18. Азид натрия может вступать в химические реакции со свинцом или медью водопроводных труб, образуя чрезвычайно взрывоопасные азиды данных металлов. Для предотвращения образования отложений азидов, смывайте удаляемые жидкости большим количеством воды.^' ПОРЯДОК ЗАБОРА И РАБОТА С ОБРАЗЦАМИ Меры предосторожности при заборе образцов для тестирования Любые материалы человеческого происхождения следует рассматривать как потенциально опасные в плане инфекционного заражения и обращаться ними с соблюдением стандартных процедур биобезопасности. Типы образцов Для анализа подходят образцы сыворотки или плазмы (К 2 EDTA, Кз EDTA антикоагулянты, гепарин литий, гепарин натрия). Избегайте гемолиза. В наборе реагентов «BioPlex 2200 HIV Ag-Ab Reagent Раск»могут использоваться следующие типы пробирок для образцов: Типы образцов Антикоагулянт Стекло Пластик Сыворотка Нет X X Сыворотка- SST* Нет X X Плазма Дикалий (К2) и трикалий (К3) ЭДТА X Плазма Цитрат натрия (не используйте замороженные образцы цитрата натрия) X Плазма Натрий-гепарин X Плазма Литий-гепарин X Плазма-PST** Литий-гепарин X * Пробирка для отделения сыворотки; ** Пробирка для отделения плазмы Условия хранения образцов Сыворотка и плазма может храниться не более 4 дней при комнатной температуре или до 7 дней в холодильнике (при температуре 2-8°С). Для более длительного хранения образцов храните их при температуре -20°С или ниже. 665-0534А РУС Руководство по применению 11 --- стр. 14 --- Подготовка образцов Убедитесь в том, что образцы тщательно перемешаны и гомогенны. Отцентрифугируйте образцы с целью удаления крупных частиц. При использовании замороженных образцов выполните следующие шаги: • Доведите образец до полного оттаивания. • Тщательно перемешайте путем вращения 10 раз, или вихревым способом. Продолжайте перемешивать до достижения визуальной гомогенности образцов. • Центрифугируйте при >10 000 RCF в течение 10 минут. • Избегайте множественных циклов замораживания/оттаивания (допустимо до 4 циклов). Порядок транспортировки образцов Если планируется транспортировка образцов, то они должны быть упакованы в соответствии с местыми, региональными и международны.ми требованиям по транспортировке возбудителей заболеваний. В исследованиях подтверждено, что образцы могут транспортироваться при температуре 2 - 8°С или в замороженном виде (например, в сухо.м льду). Если продолжительность транспортировки превышает 7 дней, то образцы должны быть заморожены до температуры -20 °С или ниже. Подготовка и хранение реагентов • Не захюраживайте Набор реагентов «BioPlex 2200 HIV Ag-Ab Reagent Раек». • Набор реагентов «BioPlex 2200 HIV Ag-Ab Reagent Pack» готов к использованию. После первого при.менения все реагенты сохраняют стабильность в течение 60 дней или до истечения срока годности при хранении в не распечатанном виде внутри прибора или в холодильнике при температуре 2-8”С. • Не используйте реагенты с истекшим сроком годности. ПРИЗНАКИ НЕСТАБИЛЬНОСТИ ИЛИ ДЕГРАДАЦИИ РЕАГЕНТОВ . Храните все реагенты в соответствии с температурными указаниями и не используйте после истечения срока годности. • Не используйте реагенты с любым изменением цвета, помутнением и осадком. Не используйте реагенты со следами протечки. • Не превышайте время хранения и температурный режим, описанные выше. ПРОЦЕДУРА Для получения достоверных и непротиворечивых результатов точно выполняйте положения настоящей Инструкции по применению. Не изменяйте условия хранения и способ обработки реагентов и образцов пациентов. Используйте ручной прокалыватель Manual Reagent Pack Piercer для прокалывания каесеты. Следуйте инструкциям: 1. Поместите набор реагентов на твердой плоской поверхности. Твердо держите „ о<упаковку одной рукой при прокалывании другой рукой. 2. Резко надавите до соприкосновения флаконов с основанием ручного прокалывателя в наборе реагентов, в соответствии с рисунком ниже.®® 3. Убедитесь в том, что набор реагентов достаточно проколот, в соответствии с --- стр. 21 --- помогая при диагностике пациентов с клиническими проявлениями или симптомами ВИЧ-инфекции или для выявления предшествующего инфицирования ВИЧ-1 или ВИЧ-2. В клинических исследованиях уточняются и улучшаются интерпретация и оценка клинической значимости присутствия антител к ВИЧ-1 или ВИЧ2."'“ Реактивные образцы необходимо исследовать дополнительными, более специфичными вспомогательными методами. Рекомендации по адекватному при.менению подобных дополнительных анализов периодически выпускаются ANSM (Французским национальным агентством по безопасности лекарственных средств и товаров для здоровья). Лицам с подтвержденной реактивностью антигенов или антител должны быть предложены соответствующие консультации и диагностические процедуры. Подтверждение результатов анализа, полученного на свежем образце, и консультация являются важными компонентами анализа на наличие антигена р24 ВИЧ-1 и антител к ВИЧ-1 и ВИЧ-2. 4. СПИД и СПИД-ассоциированные заболевания представляют собой клинические синдромы, и их диагноз основывается на клинических данных. Изолированные результаты анализа не могут использоваться для постановки диагноза СПИД, даже если рекомендуемый анализ соответствующих образцов предполагает высокую вероятность присутствия антител к ВИЧ-1 или ВИЧ-2 или антигена р24 ВИЧ-1. 5. Не реактивный результат анализа на любом этапе исследования индивидуальных пациентов не исключает возможность контакта с инфекцией или инфицирования ВИЧ-1 и/или ВИЧ-2. 6. Не реактивные результаты могут наблюдаться в случае, если количество маркера в образце слишком низкое для порога определения тестом. 7. В случае, если сохраняется подозрение на наличие инфекции или на ошибку при выполнении процедуры, требуется повторный анализ. 8. Риск развития СПИД или СПИД-ассоциированных заболеваний у лиц без симптомов с положительной реакцией сыворотки неизвестен, поскольку течение ВИЧ- инфекции может варьировать у индивидуальных пациентов, а также может изменяться ПОД воздействием антиретровирусной терапии. ' Однако, в проспективном исследовании наблюдалось развитие СПИД у 51% гомосексуалов мужского пола после 10-летней инфекции."^^ 9. Считается, что выявление антител к ВИЧ у младенцев, рожденных от сероположительных матерей, является неадекватным критерием для диагностики ВИЧ- инфекции у младенца, поскольку материнские антитела класса IgG зачастую сохраняются до 18 месяцев после рождения. Дополнительные тест-системы, разработанные специально для применения на образцах новорожденных, могут оказаться полезны.ми при разрешении подобных случаев."^^ 10. Лицо с наличием антител к ВИЧ считается инфицированным вирусом, хотя у лица, принимавшего участие в исследовании вакцинации против ВИЧ, могут образовываться антитела к вакцине, и при этом оно может или не может быть инфицированным ВИЧ. В подобных случаях необходима клиническая оценка, соответствующая консультация, медицинский осмотр и, возможно, дополнительные анализы для принятия решения о том, насколько точен диагноз ВИЧ-инфекции. 11. При использовании загрязненной, пожелтевшей, липемической, гемолизированной или инактивированной нагреванием сыворотки могут получаться ошибочные результаты, поэтому этого следует избегать. --- стр. 22 --- Ш 2 Э ТЕХНИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ Проводился анализ с целью определения технических характеристик набора реагентов «BioPlex 2200 HIV Ag-Ab Reagent Раек». Диагностическая спепифнчность Доноры крови Образцы, полученные от случайных доноров крови (N = 5295), включая 2689 образцов сыворотки, 1308 образцов К2 ЭДТА-плазмы и 1298 образцов плазмы с литием-гепарином, были проанализированы с помощью набора реагентов «BioPlex 2200 HIV Ag-Ab Reagent Pack» в банках крови, разделенных географически. 99,96% (5293/5295) из популяции доноров первоначально были не реактивными, 0,02% (1/5295) первоначально были в серой зоне, а 0,02% (1/5295, индекс 1,0) были первоначально реактивными, однако при повторном анализе реактивные образцы отсутствовали. Специфичность набора реагентов «BioPlex 2200 HIV Ag-Ab Reagent Pack» составила 99,96% (5293/5295 с 95% доверительным интервалом 99,9 - 100%) на основе данных о первоначально реактивных образцах, а также 100% (5295/5295) с 95% доверительным интервалом 99,9 - 100% на основе данных о повторном анализе образцов. Госпитализированные пациенты ВИЧ-отрицательные образцы сыворотки (N = 1470), полученные из проспективного исследования, проводившегося с участием 1005 пациентов на базе одного клинического центра, были проанализированы с помощью набора реагентов «BioPlex 2200 HIV Ag-Ab Reagent Pack». Специфичность набора реагентов «BioPlex 2200 HIV Ag-Ab Reagent Pack» составила 99,4% (1461/1470) c 95% доверительным интервалом 98,8 - 99,7% на основе данных о первоначально реактивных образцах, а также 99,5% (1462/1470) с 95% доверительным интервалом 98,9 - 99,8% на основе данных о повторном анализе образцов. Специфичность теста ИФА (иммуноферментного анализа) 4 поколения с маркировкой СЕ составила 99,5% (1463/1470) с 95% доверительным интервалом 99,0 - 99,8% на основе данных о первоначально реактивных образцах. Диагностическая чувствительность Определение антигенов ВИЧ-1/ВИЧ-2 в супернатанте культуры Пятьдесят три (53) супернатантов культуры ВИЧ-1 и (1) выделенный, очищенный препарат вируса ВИЧ-2 были проанализированы с помощью набора реагентов «BioPlex 2200 HIV Ag-Ab Reagent Pack». Супернатанты ВИЧ-1 относились к субтипам А, В, С, D, А/Е, F, G, Н, J, О и к циркулирующим рекомбинантным формам. Все образцы по результатам анализа оказались реактивными, а чувствительность набора реагентов «BioPlex 2200 HIV Ag-Ab Reagent Pack» составила 100% (54/54) с 95% доверительным интервалом 93,4 - 100%. Результаты, полученные системой BioPlex, были подтверждены при анализе супернатантов клеточной культуры теста р24 с маркировкой СЕ, а не методом нейтрализации. Реактивность подтвержденных положительных на ВИЧ-1 образцов Пятьсот сорок девять (549) образцов (161 образец сыворотки и 388 образцов плазмы) от пациентов с подтвержденной инфекцией ВИЧ-1, с положительной реакцией по данным скрининговой методики 4 поколения с маркировкой СЕ, были проанализированы с помощью набора реагентов «BioPlex 2200 Ag-Ab Reagent Pack». Среди этих образцов 35 были проспективными, а 514 были ретроспективными. Значения для ретроспективных --- стр. 23 --- образцов представлены в Таблице С. Таблица С. Популяция ретроспективных образцов для анализа Тип образца для анализа ЬСоличесгво проанализированных образцов (все оказались РЕАКТИВНЫМИ) ВИЧ-1, Группа О 41 ВИЧ-1 субтип В 35 ВИЧ-1 не-В (А, С, D, F, G, Н, J, CRF) 196 Мониторируемый 228 Набор из стационара 5 Ранняя сероконверсия 15* * (минус 4 проспективных и 2 генотипированных образца) Чувствительность набора реагентов «BioPIex 2200 H1V Ag-Ab Reagent Pack» для всех ВИЧ-1 положительных образцов, включая 28 различных генотипов, составила 100% (549/549) с 95% доверительным интервалом 99,5 - 100%. Во всех образцах при заключительной интерпретации была подтверждена реактивность на антитела к ВИЧ-1, за исключением трех образцов с сероконверсией, представленных в Таблице D. Один образец с сероконверсией оказался реактивным, недифференцируемым на ВИЧ 1/2 по данным анализа, а оставшиеся 548 образцов оказались ВИЧ-1-положительными. Таким образом, степень дифференциации ВИЧ-1/-2 в образцах с положительной реакцией на антитела к ВИЧ-1 составила 99,8% (548/549) с 95% доверительным интервалом 98,9 - 100%. Два оставшихся образца с сероконверсией оказались реактивными по данным набора реагентов «BioPIex 2200 H1V Ag-Ab Reagent Pack» за счет выявления антигена р24 ВИЧ-1, однако антитела так и не были выявлены. Тридцать пять (35) свежих (< 24 часов) ВИЧ-1 положительных образцов от упомянутых выше проспективных или мониторируемых пациентов были проанализированы с помощью набора реагентов «BioPIex 2200 H1V Ag-Ab Reagent Pack». Чувствительность и степень дифференциации ВИЧ-1/ВИЧ-2 составила 100% (35/35). Таблица D. Чувствительность образцов ВИЧ-1 с сероконверсией Образ ец Антиген р24 ВИЧ- 1 Антитела к ВИЧ-1 Антитела к ВИЧ-2 Интерпрета ция результатов анализа антигенов- антител к ВИЧ Инде КС (ШХ) Интерпрета ция результатов Инде КС (ШХ) Интерпретация результатов Инде КС (ШХ) Интерпретация результатов 1 64,29 РЕАКТИВН ЫЙ 2,72 РЕАКТИВНЫЙ 0,68 Не реактивный РЕАКТИВН ЫЙ 2 63,67 РЕАКТИВН ЫЙ 29,64 РЕАКТИВНЫЙ 0,28 Не реактивный РЕАКТИВН ЫЙ 3 12,58 РЕАКТИВН ЫЙ 0,08 Не реактивный 0,09 Не реактивный РЕАКТИВН ЫЙ 4 10,17 РЕАКТИВН ЫЙ 6,20 РЕАКТИВНЫЙ 0,06 Не реактивный РЕАКТИВН ЫЙ --- стр. 24 --- 5 9,84 РЕАКТИВН ЫЙ 0,24 Не реактивный 0,24 Не реактивный РЕАКТИВН ЫЙ 6 8,73 РЕАКТИВН ЫЙ 4,13 РЕАКТИВНЫЙ 0,20 Не реактивный РЕАКТИВН ЫЙ 7 3,63 РЕАКТИВН ЫЙ 4,23 РЕАКТИВНЫЙ 0,07 Не реактивный РЕАКТИВН ЫЙ 8 3,2 РЕАКТИВН ЫЙ 39,40 РЕАКТИВНЫЙ 0,27 Не реактивный РЕАКТИВН ЫЙ 9 1,97 РЕАКТИВН ЫЙ 47,23 РЕАКТИВНЫЙ 0,10 Не реактивный РЕАКТИВН ЫЙ 10 1,24 РЕАКТИВН ЫЙ 5,79 РЕАКТИВНЫЙ 0,09 Не реактивный РЕАКТИВН ЫЙ 11 0,33 Не реактивный 30,23 РЕАКТИВНЫЙ 0,08 Не реактивный РЕАКТИВН ЫЙ 12 0,29 Не реактивный 104,0 9 РЕАКТИВНЫЙ 0,09 Не реактивный РЕАКТИВН ЫЙ 13 0,25 Не реактивный 113,6 8 РЕАКТИВНЫЙ 0,10 Не реактивный РЕАКТИВН ЫЙ 14 0,14 Не реактивный 13,56 РЕАКТИВНЫЙ, недифференцируе мый 3,49 РЕАКТИВНЫЙ, недифференцируе мый РЕАКТИВН ЫЙ 15 0,11 Не реактивный 7,23 РЕАКТИВНЫЙ 0,08 Не реактивный РЕАКТИВН ЫЙ Реактивность подтвержденных положительных на ант ит ела к ВИЧ-2 образцов Образцы, полученные от пациентов с подтвержденной инфекцией ВИЧ-2 (N = 204) на базе двух клинических лабораторий, были проанатизированы с помощью набора реагентов «BioPlex 2200 HIV Ag-Ab Reagent Раек». Чувствительность составила 100% (204/204) с 95% доверительным интервалом 98,5 - 100%. Сто восемьдесят три (183) образца по данным анализа оказались ВИЧ-2 реактивными, а 21 оказался ВИЧ-1/-2 недифференцируемым. Степень дифференциации составила 89,7% (183/204) с 95% доверительным интервалом 84,7-93,5%. Реактивность образцов пациентов с сочетанной инфекцией ВИЧ-1/-2 Двадцать два (22) образца от четырнадцати пациентов с подтвержденной сочетанной инфекцией ВИЧ-1/-2 были получены из двух клинических лабораторий. Все они оказались реактивными по данным набора реагентов «BioPlex 2200 HIV Ag-Ab Reagent Pack». Чувствительность составила 100% (22/22). Двенадцать образцов оказались ВИЧ-1/-2 недифференцируемыми, а у двоих пациентов наблюдалась положительная реакция только на ВИЧ-2. Степень дифференциации между ВИЧ-1/-2 с учетом статуса пациента составила 85,7% (12/14). Панели сероконверсии ВИЧ-1 Чувствительность набора реагентов «BioPlex 2200 HIV Ag-Ab Reagent Pack» определялась в сравнении с методом скрининга ВИЧ 4 поколения с маркировкой СЕ, на 316 образцах из 34 коммерческих панелей сероконверсии. В 26 панелях результаты анализа BioPlex и эталонного метода совпадали в первых реактивных пробах. В одной панели одна проба была реактивной по данным эталонного метода и не реактивной по данным BioPlex. В оставшихся семи панелях реактивность пробы была установлена раньше с помощью --- стр. 25 --- BioPlex, чем эталонного метода. Определение первой положительной пробы в целом происходило на 20% (7/34) раньше для каждой панели при помощи набора реагентов «BioPlex 2200 H1V Ag-Ab Reagent Раек», по сравнению с методом скрининга ВИЧ 4 поколения с маркировкой СЕ. Степень дифференциации антигена р24 ВИЧ-1 и антител к ВИЧ-1 вычислялась для 43 панелей сероконверсии (34 упомянутых выше плюс 9 с отсутствием результатов, полученных методом скрининга ВИЧ 4 поколения с маркировкой СЕ). Степень дифференциации составила 94,3% (33/35) с наличием образцов, положительных на антитела и отрицательных на антигены, в соответствии с результатами антигена ВИЧ и антител к ВИЧ, полученными эталонными метода.ми. Также в 5,7% (2/35) образцов наблюдалась реактивность на антитела к ВИЧ-1, а также очень низкая реактивность на антиген р24 ВИЧ-1 (индекс 2,61 и 2,82). Панель с низкими титрами антител 34 панели сероконверсии содержали 118 образцов с ранней сероконверсией, которая характеризовалась положительной реакцией на антиген р24 ВИЧ-1, а также отрицательной или промежуточной реакцией по данным вестерн-блоттинга. Среди них 69% (81/118) были положительными на антиген р24 ВИЧ-1 но данным набора реагентов «BioPlex 2200 H1V Ag-Ab Reagent Pack», по сравнению с 64% (75/118) образцов, проанализированных методом скрининга ВИЧ 4 поколения с маркировкой СЕ. 43 панели сероконверсии содержали 56 образцов с низкими титрами антител, которые характеризовались положительной реакцией на антиген и отрицательной реакцией на антитела по данным эталонных методов. Среди них 94,6% (53/56) были положительны.ми на антиген р24 ВИЧ-1 по данным набора реагентов «BioPlex 2200 H1V Ag-Ab Reagent Pack». Среди 53 образцов с низкими титрами антител, которые по результатам анализа оказались положительными, 94,3% (50/53) с 95%> доверительным интервалом 84,3-98,8% были правильно определены как положительные по антигену р24 ВИЧ-1 при помощи набора реагентов «BioPlex 2200 HIV Ag-Ab Reagent Pack». Также в 5,7% (3/53) образцов наблюдалась реактивность на антиген р24 ВИЧ-1, а также очень низкая реактивность на антитела к ВИЧ-1 (индекс 1,04, 1,25 и 2,48). Только для 46 из 56 образцов с низким титром антител были получены результаты при помощи метода скрининга ВИЧ 4 поколения с маркировкой СЕ; всего было получено 87,0% (40/46) положительных результатов. Аналитическая чувствительность Набор реагентов «BioPlex 2200 HIV Ag-Ab Reagent Pack» был разработан чтобы обеспечить аналитическую чувствительность менее <12,5 пг/мл для антигена р24 ВИЧ-1 в соответствии со стандартами Французского HannoHajibHoro агентства по безопасности лекарственных средств и товаров для здоровья (ANSM) и <2 МЕ/мл в соответствии с Международными стандартами ВОЗ по ВИЧ-инфекции NIBSC 90/636. Результаты представлены в Таблице Е. Таблица Е. Аналитическая чувствительность на антиген р24 ВИЧ-1 Рсфсрснсный антиген р24 ВИЧ-1 Чувствительность* 95“/о доверительный интервал Французский национальный стандарт (PN72217) 7,02 пг/мл 6,82 - 7,22 пг/мл Международный стандарт ВОЗ 0,637 МЕ/мл 0,615 -0,658 МЕ/мл * Чувствительность представляет собой уровень антигена р24 ВИЧ-1, необходимый для достижения порогового значения (Индекс - 1,00). --- стр. 26 --- Воспроизводимость и точность результатов анализа Панель из 14 образцов использовалась для определения воспроизводимости и точности результатов, получаемых с помощью набора реагентов «BioPlex 2200 H1V Ag-Ab Reagent Pack». Панель из 14 образцов включала 6 образцов для определения антигена р-24 ВИЧ-1 (2 образца сыворотки, 3 образца плазмы с ЭДТА и 1 положительный контроль), а также 8 образцов для определения антител к ВИЧ-1 группы М, группы О и антител к ВИЧ-2 (4 образца сыворотки, 3 образца плазмы с ЭДТА и 1 положительный контроль). Состав панели был следующим: Таблица F. Состав образцов панели (для определения антигена р24 ВИЧ-1) # Уровень анализируемого вещества Индекс (IDX) антигена р24 ВИЧ-1 1 Значения, близкие к пограничным (сыворотка) 0,8 - 1,2 2 Умеренный (сыворотка) 1,5 -2,0 3 Значения, близкие к пороговым (плазма с ЭДТА) 0,8 - 1,2 4 Умеренный (плазма с ЭДТА) 1,5-2,0 5 Высокий (плазма с ЭДТА) >2,0 6 Положительный контроль антигенов 1,5 - 8,0 Таблица G. Состав образцов панели (для определения антител к ВИЧ-1 группы М, группы О и антител к ВИЧ-2) # Уровень анализируемого вещества Индекс антител к ВИЧ-1/-2 (IDX) 1 Высокий отрицательный (сыворотка) <0,8 2 Значения, близкие к пограничным (сыворотка) 0,8 - 1,2 3 Умеренный (сыворотка) 1,5 -2,0 4 Высокий (сыворотка) >2,0 5 Высокий отрицательный (плазма с ЭДТА) <0,8 6 Значения, близкие к пороговым (плазма с ЭДТА) 0,8 - 1,2 7 Умеренный (плазма с ЭДТА) 1,5 -2,0 8 Положительный контроль антител 1,5 - 8,0 Воспроизводимость результатов Воспроизводимость результатов набора реагентов «BioPlex 2200 HIV Ag-Ab Reagent Pack» определялась с помощью панели антигенов (N = 6) и панели антител (N = 8), описанных в Таблицах F и G. Образцы испытывались в 30 повторах в один и тот же день с одной и той же серией набора реагентов «BioPlex 2200 HIV Ag-Ab Reagent Pack». Средние значения индекса, стандартное отклонение (СО) и процентный коэффициент вариации (%КВ) представлены в Таблицах Н-К. Таблица И. Воспроизводимость результатов - набор реагентов «BioPlex 2200 HIV Ag-Ab Reagent Pack» (антиген p24 ВИЧ-1) --- стр. 41 --- разводился контрольным образцом для получения всех необходимых образцов с целью получения необходимого для исследования диапазона концентрации. Каждый из образцов был протестирован в 5 репликах с проведением анализа данных с использованием средних значений и значений стандартных отклонений, рассчитанных на основе данных повторов. Результаты: Воздействие компонентов крови на ВИЧ-положительные образцы Присутствие аномальных концентраций компонентов крови не приводит к значительному эффекту, за исключением концентрации общего белка, равной 12 г/дл, и слабоположительных образцов (антитела), где среднее значение индекса ВИЧ-1М значительно увеличивается, до 16% (с 1,66 (контроль) до 1,92 (интерферирующее вещество)). Так как эффект данного общего белка является положительным, риск недооценки ВИЧ-инфекции отсутствует. Однако было выполнено доза-эффект исследование с концентрациями альбумина от 7(эталон) до 12 г/дл. Кривая доза-эффекта и полученные данные подтверждают, что эффект альбумина увеличивает индекс ВИЧ-1М максимум на 20%, при этом значительный эффект появляется при достижении концентрации альбумина, равной 10 г/дл (увеличение индекса на 14,7%). Наличие аномальных концентраций компонентов крови не оказывает значительного эффекта на определение антител к ВИЧ-10, ВИЧ-2 и антигена р24. При определении ВИЧ-Ш аномальные концентрации белка (10-12 г/дл) в образцах антител низкого уровня приводят к значительному (на 15-20%) увеличению индекса, однако не создают риска недооценки инфекции пациента. Воздействие компонентов крови на ВИЧ-отрицательные образцы Все значительные эффекты, связанные с наличием аномальных концентраций компонентов крови, являются допустимыми в связи с высокими значениями специфичного отклонения (все > 27 Критерий приемлимости > 10). Самые низкие специфичные отклонения наблюдаются у сигнала ВИЧ-1 антигена р24 (28 с билирубином, 68 для триглицеридов, 47 - белки и 27 - гемоглобин). В связи с тем, что все специфичные отклонения как правило больше 10, в случае отрицательных образцов эффект компонентов крови является допустимым. Заключение: Наличие аномальных концентраций компонентов крови не оказывает значительного эффекта на определение антител к ВИЧ-1, ВИЧ-2, ВИЧ-Ю и антигена р24. У ВИЧ-положительных образцов концентрация общего белка, равная 10-12 г/дл, оказывает значительный (15-20%) положительный эффект на индекс антитела к ВИЧ-Ш образцов низкого уровня, однако не представляет риска для определения ВИЧ-инфекции. У ВИЧ-отрицательных образцов все четыре компонента крови оказывают значительный эффект на показатели индекса антител к ВИЧ-Ш, ВИЧ-Ю, ВИЧ-2 и антигена р24, однако достаточно высокие конкретные пороговые значения (> 27) позволяют избежать риска получения ложноположительных результатов. Противопоказания Нет --- стр. 42 --- Международные стандарты, используемые при производстве В соответствии с Директивой 98/79/ЕС Европейского Парламента и Совета от 27 октября 1998 года, касающейся изделий медицинского назначения для диагностики in vitro: Приложение III - Декларация о соответствии ЕС, компания Bio-Rad Laboratories, Inc., США заявляет, что Набор реагентов BioPlex 2200 HIV Ag-Ab Reagent Pack предназначен для профессионального использования и соответствуют действующим положениям директивы. Процедура подтверждения соответствия •Директива 98/79/ЕС Приложение III. Директива 98/79/ЕС Европейского Парламента и Совета от 27 октября 1998 года, касающаяся изделий медицинского назначения для диагностики in vitro: Приложение III - Декларация о соответствии ЕС EN ISO 13485.Изделия медицинские. Системы менеджмента качества. Системные требования для целей регулирования EN ISO 14971.Медицинские изделия. Применение менеджмента риска для медицинских изделий. EN 62366. Изделия медицинские. Проектирование медицинских изделий с учетом I эксплуатационной пригодности EN 13612.Оценка функциональных характеристик медицинских изделий для диагностики in vitro EN 17511. Метрологическая прослеживаемость значений, приписанных калибратором и контрольным материалам EN 13640. Исследование стабильности реагентов для диагностики in vitro EN 13641. Устранение или снижение риска инфицирования, связанного с реагентами для диагностики in vitro EN ISO 18113. Медицинские изделия для диагностики in vitro. Информация, предоставляемая изготовителем (маркировка). Часть 1. Термины, определения и общие требования ISO 15223.Символы, применяемые при маркировании на медицинских изделиях, этикетках и в сопроводительной документации. Часть 1. Основные требования EN 980.Приборы медицинские. Графические символы, используемые при маркировке. Процесс проектирования, обеспечивающий контроль Набора реагентов «BioPlex I 2200 HIV Ag-Ab Reagent Раек»: Согласно NF EN ISO 17511. T ранспортирование Изделие следует перевозить в оригинальной упаковке производителя, защищающей продукцию от внещних воздействий, на всех видах транспорта в крытых транспортных средствах в соответствии с правилами перевозок, действующими на транспорте данного вида, при температуре 2-30°С. При проведении погрузочно-разгрузочных работ и транспортировании следует строго выполнять требования манипуляционных знаков, нанесенных на упаковке и транспортной таре. При несоблюдении условий транспортирования и хранения медицинское изделие не подлежит использованию! --- стр. 43 --- Утилизация Утилизация изделия должна производиться в соответствии с требованиями локального, регионального и национального законодательства. Все образцы и материалы, использующиеся и образующиеся при выполнении исследований, в том числе реагенты с истекшим сроком годности, следует утилизировать в соответствии с СанПиН 2.1.7.2790-10 как потенциально инфицированные медицинские отходы (класс Б). Срок годности Срок годности -18 месяцев Г арантии Производитель гарантирует соответствие характеристик изделия заявленным в эксплуатационной документации при условии применения в соответствии с инструкцией и по назначению, предусмотренному производителем. I По всем вопросам, для получения технической консультации, рекламациям и поддержки ’ следует обращаться к уполномоченному представителю производителя на территории РФ: ООО «Био-Рад Лаборатории» Адрес: 105064, г. Москва, Нижний Сусальный переулок, дом 5, строение 5А. Телефон: +7 (495) 721-14-04. E-mail: diag_support_rcis@bio-rad.com http://www.bio-rad.com --- стр. 44 --- <jyсл “ D0 E1c 0 03 Q J1 О П t: " D 0 3 b (b 1о 0ЭоО— tо Dтз01 *< a>TD0 03 a;1 О