--- стр. 1 ---
ООО «Научно-производственная фирма «АБРИС+»
УТВЕРЖДАЮ
Г енеральный директор
ООО «НПФ «АБРИС+»
ИНСТРУКЦИЯ
по применению медицинского изделия для диагностики in vitro
«НАБОР РЕАГЕНТОВ ДЛЯ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ
КОНЦЕНТРАЦИИ ПРЯМОГО БИЛИРУБИНА
В СЫВОРОТКЕ И ПЛАЗМЕ КРОВИ»
«БИЛИРУБИН ПРЯМОЙ АБРИС+»
Директор по исследовательской работе
ООО «НПФ,«АБРИС+»
Попов Ю.Г.
^.^2018г.
Руководитель отдела разработок
и службы сервиЫЮрО«АБРИС+»
___________Москвичева Ю.Б.
yV. / / 2018г.
г. Санкт-Петербург
--- стр. 2 ---
/
ПРОИЗВОДИТЕЛЬ
ООО «Научно-производственная фирма «АБРИС+»
ООО «НПФ «АБРИС+»
Адрес предприятия: 196084, Российская Федерация, г. Санкт-Петербург, ул. Цветочная,
Д.16, лит. М, 2-й этаж.
тел./факс: 8-800-1000-422 (бесплатный по России), тел.: 8(812) 458-44-07, 458-44-35;
e-mail: abris@abrisplus.ru ; http://www.abrisplus.ru
1. НАЗНАЧЕНИЕ
1.1. Набор предназначен для количественного определения концентрации прямого
билирубина в сыворотке и плазме крови методом Йендрашика-Грофа с
диазотированной сульфаниловой кислотой.
1.2. Область применения набора - клиническая лабораторная диагностика.
Потенциальными потребителями набора являются профессиональные медицинские и
научные сотрудники. Набор может использоваться различными специалистами,
имеющими профессиональный уровень не ниже медицинского лабораторного
техника. Набор может использоваться при ручной, полуавтоматической и
автоматической постановке.
1.3. Прямой билирубин - соединение свободного билирубина с глюкуроновой кислотой -
глюкуронид билирубина. Хорошо растворим в воде, проникает в ткани, малотоксичен,
дает прямую реакцию с диазотированной сульфаниловой кислотой, откуда и
происходит название «прямой» билирубин (в отличие от неконъюгированного
свободного «непрямого» билирубина, который требует добавления акселератора для
реакции). Для клинической лабораторной диагностик! имеет значение определение
количественного содержания прямого билирубина у пациента.
1.4. Функциональное назначение набора - вспомогательное средство в диагностике
гемолитических, гематологических и метаболических заболеваний печени, включая
гепатит, цирроз и непроходимость желчных протоков.
1.5. Анализируемыми образцами являются свежая сыворотка и гепаринизированная или
ЭДТА-плазма крови человека.
1.6. Набор рассчитан на проведение 500, 1000 или 2500 анализов при конечном объеме
реакционной смеси 265 мкл.
1.7. Набор предназначен только для in vitro диагностики.
2. ФУНКЦИОНАЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА
2.1. Принцип метода
За основу набора взят метод Йендрашика-Грофа с диазотированной сульфаниловой
кислотой. В результате реакции между диазотированной сульфаниловой кислотой и
прямым (конъюгированным) билирубином образуется окрашенный комплекс,
имеющий максимум поглощения при длине волны 540 нм.
2.2. Состав набора
Комплектация №1, рассчитана на проведение 500 анализов при конечном объеме
реакционной смеси 265 мкл:
- «Реагент 1»- Физиологический раствор, 1 флакон объемом 100 мл;
- «Реагент 2» - Сульфаниловая кислота, 5 флаконов объемом 5 мл;
- «Реагент 3 » - Нитрит натрия, 1 флакон объемом 1 мл;
--- стр. 3 ---
- «Калибратор» - Билирубин прямой, 1 флакон объемом на 1 мл.
Комплектация №2, рассчитана на проведение 1000 анализов при конечном объеме
реакционной смеси 265 мкл:
- «Реагент 1» - Физиологический раствор, 1 флакон объемом 200 мл;
- «Реагент 2»- Сульфаниловая кислота, 5 флаконов объемом 10 мл;
- «Реагент 3 » - Нитрит натрия, 1 флакон объемом 1 мл;
- «Калибратор» - Билирубин прямой, 1 флакон объемом на 1 мл.
Комплектация №3, рассчитана на проведение 2500 анализов при конечном объеме
реакционной смеси 265 мкл:
- «Реагент 1» - Физиологический раствор, 2 флакона объемом 200 мл;
- «Реагент 2» - Сульфаниловая кислота, 5 флаконов объемом 20 мл;
- «Реагент 3 » - Нитрит натрия, 1 флакон объемом 1 мл;
- «Калибратор» - Билирубин прямой, 1 флакон объемом на 1 мл.
Комплектация №4, рассчитана на проведение 500 анализов при конечном объеме
реакционной смеси 265 мкл:
- «Реагент 1»- Физиологический раствор, 1 флакон объемом 100 мл;
- «Реагент 2» - Сульфаниловая кислота, 5 флаконов объемом 5 мл;
- «Реагент 3»- Нитрит натрия, 1 флакон-капельница объемом 1 мл;
- «Калибратор» - Билирубин прямой, 1 флакон объемом на 1 мл.
Комплектация №5, рассчитана на проведение 1000 анализов при конечном объеме
реакционной смеси 265 мкл:
- «Реагент 1» - Физиологический раствор, 1 флакон объемом 200 мл;
- «Реагент 2» - Сульфаниловая кислота, 10 флаконов объемом 5 мл;
- «Реагент 3» - Нитрит натрия, 1 флакон-капельница объемом 1 мл;
- «Калибратор» - Билирубин прямой, 1 флакон объемом на 1 мл.
Комплектация №6, рассчитана на проведение 2500 анализов при конечном объеме
реакционной смеси 265 мкл:
- «Реагент 1» - Физиологический раствор, 2 флакона объемом 200 мл;
- «Реагент 2» - Сульфаниловая кислота, 20 флаконов объемом 5 мл;
- «Реагент 3 » -Нитрит натрия, 1 флакон-капельница объемом 1 мл;
- «Калибратор» - Билирубин прямой, 1 флакон объемом на 1 мл.
2.3. Анализируемыми образцами являются свежая сыворотка и гепаринизированная или
ЭДТА-плазма крови человека, полученные с помощью стандартных процедур.
Гемолиз недопустим. Анализируемые образцы необходимо хранить в темноте.
Прямой билирубин в анализируемых образцах стабилен не более 7 часов при
комнатной температуре (от 18 до 25°С); не более 5 суток при температуре от 2 до 8°С
или не более 14 суток при температуре минус 20°С (допускается только однократное
размораживание).
2.4. Оборудование и материалы, необходимые при работе с изделием:
-спектрофотометр, позволяющий проводить измерения оптической плотности на
длине волны 540 нм, поддерживающий температуру жидкости в кювете в процессе анализа
37±1,0°С;
--- стр. 4 ---
г
- дозаторы полуавтоматические одноканальные со сменными наконечниками,
позволяющие отбирать объёмы жидкости 10-100 мкл, 20-200 мкл, 100-1000 мкл, 1000-
5000 мкл, аттестованные по значению средней дозы и сходимости результатов дозирования
(погрешность не более 3%);
- секундомер (ТУ 25-1894.003-90);
- перчатки резиновые хирургические (ГОСТ 52238-2004);
- вода деионизованная (ГОСТ Р 52501-2005);
-термостат, поддерживающий температуру 37±1,0°С, типа ТС-1/20СПУ (ТУ 9452-
002-00141798-97);
-пробирки стеклянные химические вместимостью 5-10 мл (ГОСТ 25336-82 с
изменениями 1-4);
- дезинфицирующий раствор.
2.5. Подготовка и стабильность реагентов
2.5.1. Реагент 1 готов к использованию.
2.5.2. Приготовление Диазореагента
Комплектации №№1, 2 и 3. Для приготовления Диазореагента смешать Реагент 2 и
Реагент 3 в соотношении 100 к 1 и тщательно перемешать.
Комплектации №№4, 5 и 6 с флаконом-капельницей. Для приготовления
Диазореагента добавить 1 каплю Реагента 3 к 1 флакону Реагента 2 и тщательно
перемешать.
Диазореагент стабилен 7 дней при температуре от 2 до 8°С в плотно закрытом
флаконе в темноте.
2.5.3. Приготовление калибратора
Выдержать флакон с Калибратором при температурсют 18 до 25°С в течение 30 мин,
затем открыть, не допуская потери лиофилизированного материала. Внести во
флакон 1,0 мл деионизованной воды комнатной температуры. Аккуратно закрыть
флакон и вьщержать его 30 мин до полного растворения Калибратора. По истечении
указанного времени содержимое перемешать путем переворачивания и вращения
флакона вручную, избегая образования пены. Необходимо следить за смачиванием
всей сухой массы, постоянно помешивая содержимое флакона круговыми
движениями, не допуская потери материала.
Раствор Калибратора можно хранить не более 7 часов при комнатной температуре (от
18 до 25°С); не более 5 суток при температуре от 2 до 8°С или не более 14 суток при
температуре минус 20°С (допускается только однократное размораживание). При
хранении следует защищать от воздействия света во избежание разрушения
билирубина.
2.6. Процедура анализа
Внести в пробирку Опытная проба Калибратор
Реагент 1, мкл 200 200
Сыворотка (плазма) крови, мкл 40 -
Калибратор, мкл - 40
Смешать и инкубировать в течение не менее 1 минуты при температуре 37°С.
Измерить El при Х = 540 (520-560) нм и d = 1 см против Реагента 1.
Диазореагент, мкл 25 25
Инкубировать в течение 5 минут при температуре 37°С. Измерить Ег. Вычислить
A E=E2-E i.
--- стр. 5 ---
;
Постановка с использованием автоматических анализаторов.
Подготовить прибор в соответствии с инструкцией по его эксплуатации, ввести
программу анализа, соответствующую используемому набору, и провести анализ.
2.7. Расчет
Расчет концентрации прямого билирубина для исследуемого материала провести по
формуле:
Ссыворотки (мкмоль/л) (Скалибратора ^ АЕсыворотки)/ ДЕкалибратора
Раечет концентрации прямого билирубина на автоматичееких и полуавтоматических
анализаторах определяется параметрами теста в памяти анализатора.
2.8. Коэффициент переечета концентраций: С (мкмоль/л) = 17,1 х С (мг/дл).
2.9. Калибровка
Для калибровки данного метода рекомендуется использовать мультикалибратор
BioCal или BioCal Е (фирма Analyticon Biotechnologies AG, Германия), либо любой
другой коммерчееки доступный мультикалибратор, аттестованный по методу
Йендрашика-Г рофа.
3. ТЕХНИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА
3.1. Концентрация прямого билирубина в Калибраторе прослеживается к международному
стандарту прямого билирубина SRM 1950, сертифицированному Национальным
институтом стандартов и технологии NIST (National Institute of Standards 8 c
Teehnology, USA).
3.2. Диапазон измерения
Диапазон линейноети набора находитея от 2,0 до 250 мкмоль/л прямого билирубина.
Отклонение от линейности на данном диапазоне зна^ний концентраций менее 5%.
3.3. Аналитическая чувствительность
Чувствительность набора составляет не более 2,0 мкмоль/л.
3.4. Аналитичеекая специфичноеть
Набор имеет высокую аналитическую специфичность.
Гемолиз влияет на результаты анализа, приводя к заниженным значениям прямого
билирубина. Свежие аналитические образцы также необходимо беречь от солнечного
света во избежание ложных низких значений в евязи с деградацией прямого
билирубина. Гемоглобин в концентрации меньше 2,5 г/л (250 мг/дл) и триглицериды в
концентрации до 11,40 ммоль/л (1000 мг/дл) не влияют на выявление аналита.
3.5. Точность измерений
Погрешноеть измерения прямого билирубина набором составляет не более 5%.
3.6. Воспроизводимость
Уровень 1 Уровень 2 Уровень 3
Воспроизводимость внутри анализа
Среднее значение концентрации, мкмоль/л 10,2 42,9 159
Среднеквадратическое отклонение (SD) 0,08 0,56 1,28
Коэффициент вариации (CV)% 0,5 0,8 0,9
Количество повторов 20 20 20
Воспроизводимость между анализами
Среднее значение концентрации, мкмоль/л 11,9 43,8 167
Среднеквадратическое отклонение (SD) 0,11 0,72 2,01
Коэффициент вариации (CV)% U 2,1 1,9
Количество повторов 20 20 20
--- стр. 6 ---
3.7. Коэффициент вариации
Коэффициент вариации результатов определения не более 5%.
3.8. Референтный интервал значений прямого билирубина включает значения до 3,4
мкмоль/л.
Однако рекомендуется для каждой лаборатории определять свои собственные
референтные интервалы значений прямого билирубина для отражения возраста, пола,
диеты и географического положения исследуемой популяции.
4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
4.1. Потенциальный риск применения набора - класс 2а.
(ГОСТ Р 51088-2013, ГОСТ 31508-2012 Приказ М3 РФ № 4н от 06.06.2012 г. «Об
утверждении номенклатурной классификации медицинских изделий» (с изменениями
от 25 сентября 2014 г.).
4.2. При работе с набором следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые
медицинские перчатки, так как образцы крови человека следует рассматривать как
потенциально инфицированные, способные длительное время сохранять и передавать
ВИЧ, вирусы гепатита или любой другой возбудитель вирусных инфекций.
4.3. Запрещается приём пищи, использование косметических средств и курение в
помещениях, предназначенных для работы с наборами.
4.4. При работе с исследуемыми образцами необходимо соблюдать «Правила устройства,
техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима
и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-
эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения СССР»,
Москва, 1981 г.
4.5. Меры предосторожности при работе с набором - соблюдение правил «Инструкции по
мерам профилактики распространения инфекционных заболеваний при работе в
клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений»
(Утв. Минздравом СССР 17 января 1991 г.), ГОСТ Р 52905-2007 (ИСО 15190:2003).
4.6. При использовании набора образуются отходы классов А, Б и Г, которые
классифицируются и уничтожаются (утилизируются) в соответствии с СанПиН
2.1.7.2790-10 «Санитарно-эпидемиологические требования к обращению с
медицинскими отходами». Дезинфекцию наборов реагентов следует проводить по МУ
287-113 «Методические указания по дезинфекции, предстерилизационной очистке и
стерилизации изделий медицинского назначения».
5. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ И ХРАНЕНИЯ
5.1. Транспортировать изделия следует транспортом всех видов в крытых транспортных
средствах в соответствии с правилами перевозок, действующими на транспорте
данного вида, при температуре от 2 до 8°С.
5.2. Набор должен храниться в упаковке предприятия-изготовителя в крытых
вентилируемых помещениях, не допуская воздействия прямых солнечных лучей, при
температуре от 2 до 8°С в течение всего срока годности.
5.3. Срок годности набора - 18 месяцев со дня выпуска. Не допускается применение
наборов по истечении срока их годности. Дата изготовления, серия, номер по каталогу
и срок годности указаны на упаковке набора.
--- стр. 7 ---
5.4. Набор стабилен после вскрытия флаконов при температуре от 2 до 8°С в течение всего
срока годности при условии достаточной герметизации флаконов.
5.5. Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение инструкции
по применению набора!
6. ГАРАНТИЙНЫЕ ОБЯЗАТЕЛЬСТВА
6.1. Производитель гарантирует соответетвие выпускаемых изделий требованиям
нормативной и технической документации.
Безопасность и качество изделия гарантируется в течение всего срока годности.
6.2. Производитель отвечает за недостатки изделия, за исключением дефектов, возникших
вследствие нарушения правил пользования, условий транспортирования и хранения,
либо действия третьих лиц, либо непреодолимой силы.
6.3. Производитель обязуется за свой счет заменить изделие, технические и
функциональные характеристики (потребительские свойства) которого не
соответствуют нормативной и технической документации, если указанные недостатки
явились следствием скрытого дефекта материалов или некачественного изготовления
изделия производителем.
6.4. «Набор реагентов для количественного определения прямого билирубина в сыворотке
и плазме крови» «БИЛИРУБИН ПРЯМОЙ АБРИС+» выпускается впервые.
Номер регистрационного удостоверения ФСР ХХХХ/ХХХХ.
СОГЛАСОВАНО:
Г енеральный директор
ООО «ВБ1МПЕЛ-МЕДЦЕНТР»
М.П.
--- стр. 8 ---
прошито и пронумеровано
е<^ листов
г енеральный