Реагенты in vitro и расходные материалы для системы медицинской "Проклеикс Тигрис" (Procleix Tigris) для молекулярно-диагностических исследований, в отдельных упаковках и наборах — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 ---
«УТВЕРЖДАЮ»
Г енеральный директор
юрм”
:^^о ц е н ко Р. М .
2012г.
Инструкция по применению
Реагенты in vitro и расходные материалы для системы медицинской
Проклейке Тигрис (Procleix Tigris) для молекулярно-диагностических
исследований
Производства: Gen-Probe 1псофога1е(1, 10210 Genetic Center Drive, San Diego,
CA 92121 USA
2012
--- стр. 2 ---
Procleix® U ltrio ® Assay
Для диагностики In \fltro
Набор на 1000 тестов, набор на 5000 тестов
СОДЕРЖАНИЕ
► ОБЩ АЯ ИНФОРМАЦИЯ.
НАЗНАЧЕНИЕ ...............................
КРАТКОЕ ОБЪЯСНЕНИЕ ТЕСТА.
ПРИНЦИПЫ ПРОЦЕДУРЫ ...........
РЕАГЕНТЫ .....................................
ИНСТРУКЦИИ ПО ХРАНЕНИЮ............................
СБОР, ХРАНЕНИЕ И ОБРАБОТКА ОБРАЗЦОВ.
РАБОЧИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ...........................
...2
...2
...2
...3
...4
...4
.34
СПЕЦИФИЧНОСТЬ................................................................................................................................................................................... 3 4
ИССЛЕДОВАНИЯ НЕСПЕЦИФИЧНОЙ РЕАКТИВНОСТИ........................................................................................................................ 35
КЛИНИЧЕСКАЯ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ.................................................................................................................................................. 36
ДИАГНОСТИЧЕСКАЯ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ........................................................................................................................................ 3 7
АНАЛИТИЧЕСКАЯ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ................................................................................................................................................ 40
ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ ДЕТЕКЦИИ ГЕНЕТИЧЕСКИХ ВАРИАНТОВ HIV- 1, HCV, И H B V
.................................................................... 46
РАБОЧИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ PROCLEIX® ULTRIO® ASSAY ПРИ ИССЛЕДОВАНИИ ОБРАЗЦОВ ТРУПНОЙ КРОВИ, ВЗЯТОЙ
ОТ ДОНОРОВ ТКАНЕЙ................................................................................................................................................................................52
ВОСПРОИЗВОДИМОСТЬ......................................................................................................................................................................... 57
БИБЛИОГРАФИЯ...............................................................................................................................................................................................5 8
- ВЫБЕРИТЕ РАЗДЕЛ, СООТВЕТСТВУЮЩИЙ ИСПОЛЬЗУЕМОЙ ПЛАТФОРМЕ АППАРАТА -
► ПОЛЬЗОВАТЕЛИ PROCLEIX® SYSTEM.
ПРЕДОСТАВЛЕННЫЕ МАТЕРИАЛЫ................................................. 7
НЕОБХОДИМЫЕ ДЛЯ АНАЛИЗА МАТЕРИАЛЫ,
ПРЕДОСТАВЛЯЕМЫЕ ОТДЕЛЬНО................................................. 7
ДРУГИЕ МАТЕРИАЛЫ, ИМЕЮЩИЕСЯ В КОМПАНИИ CHIRON
ДЛЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ С ТЕСТ-НАБОРОМ PROCLEIX®
ULTRIO® ASSAY...............................................................................7
НЕОБХОДИМЫЕ, НО НЕ ПРЕДОСТАВЛЯЕМЫЕ МАТЕРИАЛЫ ...7
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ......................................................... 8
ПОДГОТОВКА РЕАГЕНТОВ............................................................... 8
ЗАМЕЧАНИЯ ПО ПРОЦЕДУРЕ.......................................................... 9
ПРОЦЕДУРА АНАЛИЗА..................................................................... 1 1
A. ПОДГОТОВКА ПРОБЫ / СВЯЗЫВАНИЕ МИШЕНИ ...............1 1
B. АМПЛИФИКАЦИЯ.................................................................... 1 2
C. РЕАКЦИЯ ЗАЩИТЫ ГИБРИДИЗАЦИЕЙ (HYBRIDIZATION
PROTECTION ASSAY НРА)..................................................... 1 3
D. ИЗБИРАТЕЛЬНЫЕ АНАЛИЗЫ PROCLEIX® HIV- 1, HCV И
HBV..........................................................................................1 4
ПРОЦЕДУРЫ КОНТРОЛЯ КАЧЕСТВА ............................................14
I . КРИТЕРИИ СООТВЕТСТВИЯ ТЕСТОВ PROCLEIX®
ULTRIO® ASSAY И ИЗБИРАТЕЛЬНЫХ ТЕСТОВ
PROCLEIX® HIV-1, HCV И HBV................................................1 4
I I . КРИТЕРИИ СООТВЕТСТВИЯ ДЛЯ КАЛИБРОВКИ И
РАСЧЕТА ПОРОГА ...................................................................1 4
ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ................................................. 20
► ПОЛЬЗОВАТЕЛИ PROCLEIX® TIGRIS® '
SYSTEM ...1 ............................21
ПРЕДОСТАВЛЕННЫЕ МАТЕРИАЛЫ.............................................. 2 1
НЕОБХОДИМЫЕ ДЛЯ АНАЛИЗА МАТЕРИАЛЫ,
ПРЕДОСТАВЛЯЕМЫЕ ОТДЕЛЬНО.............................................. 2 1
ДРУГИЕ МАТЕРИАЛЫ, ИМЕЮЩИЕСЯ В КОМПАНИИ CHIRON
ДЛЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ С ТЕСТ-НАБОРОМ PROCLEIX®
ULTRIO® A SSAY.............................................................................2 1
НЕОБХОДИМЫЕ, НО НЕ ПРЕДОСТАВЛЯЕМЫЕ
МАТЕРИАЛЫ...................................................................................2 1
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ....................................................... 2 2
ПОДГОТОВКА РЕАГЕНТОВ............................................................ 2 3
ЗАМЕЧАНИЯ ПО ПРОЦЕДУРЕ........................................................ 2 4
ПРОЦЕДУРА АНАЛИЗА................................................................... 2 5
ПРОЦЕДУРЫ КОНТРОЛЯ КАЧЕСТВА ...........................................25
I . КРИТЕРИИ СООТВЕТСТВИЯ ТЕСТОВ PROCLEIX®
ULTRIO® ASSAY И ИЗБИРАТЕЛЬНЫХ ТЕСТОВ
PROCLEIX® HIV-1, HCV И H BV............................................ 25
I I . КРИТЕРИИ СООТВЕТСТВИЯ ДЛЯ КАЛИБРОВКИ И
РАСЧЕТА ПОРОГА................................................................ 26
ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ .................................................3 3
500690RUPeA.B
--- стр. 3 ---
> О Б Щ А Я И Н Ф О Р М А Ц И Я
НАЗНАЧЕНИЕ
PROCLEIX® ULTRIO® Assay* - система качественного
амплификационного анализа нуклеиновых кислот in vitro для
детекции RNA вируса иммунодефицита человека типа 1 (HIV-1), RNA
вируса гепатита С (HCV) и/или DNA вируса гепатита В (HBV) в
образцах плазмы и сыворотки доноров. Кроме того, система может
использоваться для исследования плазмы и сыворотки с целью
скринингового обследования доноров органов и тканей и трупов (без
сердцебиения), из которых изымаются ткани или кровь. Система не
предназначена для исследования пуповинной фови.
Этот анализ не предназначен для использования в качестве
вспомогательного диагностического средства.
КРАТКОЕ ОБЪЯСНЕНИЕ ТЕСТА
Эпидемиологические исследования свидетельствуют, что вирус
иммунодефицита человека типа 1 (HIV- 1) является этиологическим
фактором синдрома приобретенного иммунодефицита (СПИД)^"^,
вирус гепатита С (HCV)®"’ ^ - этиологическим фактором в
большинстве случаев парентерального гепатита ни А, ни В (поп-А,
^поп-В hepatitis, NANBH), а вирус гепатита В (HBV) - этиологическим
фактором сывороточного инфекционного гепатита. HIV-1, HCV и HBV
передаются в основном при контакте с инфицированной кровью,
препаратами крови, определенными биологическими жидкостями или
тканями, а также от матери к плоду или ребенку.
В настоящее время для детекции HIV -1 в банках крови используется
метод анализа нуклеиновых кислот (Nucleic Acid Testing, NAT)
для детекции RNA вируса и/или метод
иммуноферментного анализа (enzyme immunoassay, EIA) для
серологического скрининга на противовирусные антитела с
последующим подтверждением результатов с помощью
дополнительных методов определения антител, в частности,
Вестерн-блоттинга или иммунофлюоресцентного анализа. Кроме
того, в зависимости от того, какая тест система NAT используется,
применяют исследование на р24Ад с последующим подтверждением
реакцией нейтрализации. Внедренные недавно методы, основанные
на амплификации нуклеиновых кислот, позволяют сократить период
детекции на 6-11 суток, тем самым, обеспечив предотвращение
более чем половины случаев инфицирования IH I V-1 при переливании
крови.’9-2 1.зз
Для детекции инфицирования HCV в службах переливания крови в
настоящее время применяется NAT на RNA вируса HCV
''м/или серологический скрининг на противовирусные антитела
Ииетодами твердофазного иммуноферментного анализа (enzyme-
lini^ed immunoabsorbent assay, ELISA) либо иммуноферментного
анализа (enzyme immunoassays, EIA) с подтверждением методом
иммуноблоттинга на полоске (напр., CHIRON® RIBA® HCV 3.0 SIA).
Внедренные недавно тесты на RNA H C V на основании
амплификации нуклеиновых кислот позволяют определить
инфицирование HCV приблизительно на 59 дней раньще, чем
современные тесты на антитела к вирусу.'®"^'’
Для детекции инфицирования HBV в службах переливания крови в
настоящее время применяется серологический скрининг HBsAg
методом иммуноферментного анализа (enzyme immunoassay, EIA) с
подтверждением в реакции нейтрализации. Исследование случаев
трансфузионного инфицирования свидетельствуют о том, что HBsAg
определяется, начиная с 50-60 дней после трансфузии.’ ^ В
проведенных недавно исследованиях показано, что тесты на DNA
HBV на основании амплификации нуклеиновых кислот позволяют
определить инфицирование HBV на несколько недель раньше, чем
удается определить HBsAg.’ ® ”'®
Разработчик - Gen-Probe в сотрудничестве с Novartis
Vaccines and Diagnostics, Inc.; изготовитель - Gen-Probe
lncoф orated.
ОБЩАЯ ИНФОРМАЦИЯ
В тесте PROCLEIX® ULTRIO® Assay для детекции RNA вирусов HIV - 1
и HCV и DNA вируса HBV используется методика амплификации
нуклеиновой кислоты-мишени после гибридизации с зондом.
Включенные в тест-набор реагенты позволяют одновременно
проводить определение трех вирусов (HIV- 1, H CV и HBV)
одновременно либо по отдельности. Для контроля точности
определения вируса в каждом образце в тестах PROCLEIX® Assay
предусмотрен внутренний контроль.
ПРИНЦИПЫ ПРОЦЕДУРЫ
Анализ с помощью тест-набора PROCLEIX® ULTRIO® Assay состоит
из трех основных этапов, выполняемых в одной и той же пробирке:
подготовка пробы, амплификация мишеней RNA HIV-1 или HCV или
DNA HBV методом транскрипционной амплификации (Transcription-
Mediated Amplification, ТМА)^^ и детекция продуктов амплификации
(ампликонов) в реакции защиты гибридизацией (Hybridization
Protection Assay, НРА).^^
Подготовка проб включает процесс связывания мишени для
выделения RNA и ONA вирусов из пробы. Пробу обрабатывают
детергентом для растворения оболочки вируса, денатурации
составляющих ее белков высвобождения RNA и/или DNA генома
вируса. Далее олигонуклеотиды, гомологичные участкам HIV-1, HCV
и HBV с низкой вариабельностью (олигонуклеотиды связывания
мишени), гибридизируются с RNA вируса HIV -1 или HCV либо DNA
вируса HBV (при наличии таковой в образце). Затем
гибридизированные молекулы-мишени связываются с магнитными
микрочастицами, которые под действием магнитного поля
отделяются от образца. Для удаления посторонних компонентов из
реакционной пробирки проводится отмывка. Магнитная сепарация и
отмывка осуществляется системой связывания мишени.
Амплификация мишени проводится методом амплификации
нуклеиновых кислот посредством транскрипции ТМ А с
использованием двух ферментов: обратной транскриптазы MMLV и
RNA-полимеразы 17. Обратная транскриптаза используется для
получения DNA (с промоторной последовательностью для RNA-
полимеразы Т7) с последовательности-мишени. RNA-полимераза Т7
размножает копии ампликона RNA с полученной копии DNA-матрицы.
В наборе PROCLEIX ULTRIO Assay метод ТМА используется для
амплификации участков RNA вирусов HIV-1 и HCV и/или DNA вируса
HBV
Для детекции продуктов амплификации применяется метод НРА.
Используются комплементарные ампликону одноцепочечные зонды,
меченные хемилюминесцентными метками. Меченые зонды
нуклеиновой кислоты специально гибридизируются с ампликоном.
Под действием селекционного реагента происходит инактивация
метки на негибридизированных молекулах зонда. Это позволяет
провести дифференциацию между гибридизированными и
негибридизироваными зондами. На этапе детекции люминометром
измеряется хемилюминесцентный сигнал гибридизированых молекул
зондов. Результат выражается в относительных световых единицах
(Relative Light Unit, RLU).
В каждый исследуемый образец, контрольный образец и калибратор
добавляют рабочий реагент для связывания мишени (vtrorking Target
Capture Reagent, v^TCR), который содержит внутренний контрольный
образец. Внутренний контроль нужен для обеспечения правильности
обработки образцов, амплификации и детекции. Сигнал внутреннего
контроля в каждой пробирке и каждой реакции анализа отличается
от сигнала HIV-1/HCV/HBV, так как зонды с разными метками имеют
разные кинетические характеристики св е ч е н и я .Д л я детекции
ампликона внутреннего контроля используется зонд с меткой
кратковременного свечения (быстрогаснущий сигнал). Для детекции
ампликонов, специфичных к HIV-1/HCV/HBV, используются зонды с
более продолжительным свечением метки (медленногаснущий
сигнал). Диф ф еренциация меток с медленногаснущими и
быстрогаснущими сигналами производится методом двойного
кинетического анализа (Dual Kinetic Assay, DKA).^® При
одновременной детекции HIV- 1, HCV и HBV система PROCLEIX
ULTRIO Assay обеспечивает различение между сигналом внутреннего
500690RU Ред. В
--- стр. 4 ---
ОБЩАЯ ИНФОРМАЦИЯ
контроля и совместным сигналом HIV-1/HCV/HBV, но не различение
между сигналами HIV-1, HCV и HBV.
Если образец дал положительную реакцию в тесте PROCLEIX
ULTRIO Assay, можно лоставить избирательные анализы HIV- 1, HCV
и/или HBV, которые позволят выяснить, имеются ли в образце
нуклеиновые кислоты HIV-1, HCV, HBV или любые их сочетания.
Избирательные анализы PROCLEIX® HIV-1, HCV и HBV построены по
той же трехэтапной схеме, что и PR O CLEIX ULTRIO Assay
(связывание мишени, ТМА и НРА). Единственное отличие состоит в
том, что вместо зонда PROCLEIX ULTRIO Assay используются зонды,
специфичные к HIV-1, HCV, либо к HBV.
РЕАГЕНТЫ
Тест-набор PROCLEIX® ULTRIO® Assay
Каждый набор включает;
Название реагента
Реагент с внутренним
контролем
' Детергент и транскрипт RNA в
буферном растворе H EPES.
Запечатанный реагент
хранить при температуре
от-15'С до-35'С .
Реагент для связывания
мишени
Детергент, связывающие
мишень олигонуклеотиды и
магнитные микрочастицы в
буферном растворе H EPES.
Хранить при температуре от
2 ’С до 8 "С. (Н е замораж иват ь)
Необходимо добавить в реагент
для связывания мишени реагент
внутреннего контроля, прежде
чем использовать их для
анализа.
Амплификационный реагент
П раймеры , dN T P , NTP и
коф акторы в буферном
растворе TRIS, содерж ащ ем
к PR O Cl/ Л / ® 300 в качестве
^консерванта.
Запечатанный реагент
хранить при температуре
от -15 'С до -35 " С .
Ферментативный реагент
О братная транскриптаза M M L V
и RNA-попимераза 77 в
буферном растворе HEPES/TRIS
с 0,05% натрия азидом в
качестве консерванта.
Запечатанный реагент
хранить при температуре
от -15 ‘С до -35 'С .
Зонд
Хемипюминесцентные
олигонуклеотидные зонды в
буферизированном растворе
сукцината с детергентом.
Запечатанный реагент
хранить при температуре
от -15 'С до -35 'С .
Количество флаконов/
количество во флаконе
Набор на 1000
. тестов
2 X 5 мл
Набор на 5000
тестов
10 X 5 мл
2 X 280 мл 10 X 280 мл
2 X 50 мл 10 X 50 мл
2 X 18 мл 10х 18мл
2 X 75 мл 10x 75 мл
Каждый набор включает:
Название реагента
Селекционный реагент
Сурфактант в боратном
буферном растворе.
Хранить при температуре
от 15 'С до 30 'С .
Отрицательный калибратор
PROCLEIX®
Дефибринированнвя нормальная
человеческая плазма (не дающая
реакции на H IV -1 /2, HCVuHBV
при исследовании с помощью
лицензированных F D A тест-
систем) с гентамицином и 0,2%
раствором азида натрия в
качестве консерванта.
Хранить при температуре
от -15 'С до -35 'С .
Положительный калибратор
PROCLEIX® HIV- 1
И нактивированная H IV -1 -
полож ительная плазма в
дефибринированноО нормальной
человеческой плазме (не дающей
реакции на H IV -2, HCVuHBV при
исследовании с помощью
лицензированных F D A тест-
систем) с гентамицином и 0,2%
раствором азида натрия в
качестве консерванта.
Хранить при температуре
от-15 'С до-35’С .
Положительный калибратор
PROCLEIX® HCV
Инактивированная H C V -
полож ительная плазма в
дефибринированной нормальной
человеческой плазме (не дающей
реакции на H IV -1/2 и HBVпри
исследовании с помощью
лицензированных F D A тест-
систем) с гентамицином и 0,2%
раствором азида натрия в
качестве консерванта.
Хранить при температуре
от-15'С до-35'С .
Положительный калибратор
PROCLEIX® HBV
Инактивированная H BV -
полож ительная плазма в
дефибринированной нормальной
человеческой плазме (не дающей
реакции на H IV - 1 /2 и H CV при
исследовании с помощ ью
лицензированных F D A тест-
систем) с гентамицином и 0,2%
раствором азида натрия в
качестве консерванта.
Хранить при температуре
от-15 'С до-35'С .
Количество флаконов/
количество во флаконе
Набор на 1000
тестов
2 х 180 мл
30 X 2 мл
Набор на 5000
тестов
10 x 180 мл
90 X 2 мл
30 х 2 мл 90 X 2 мл
30 X 2 мл 90 X 2 мл
30 X 2 мл 90 X 2 мл
500690RU Ред. В
--- стр. 5 ---
ОБЩАЯ ИНФОРМАЦИЯ
ИНСТРУКЦИИ ПО ХРАНЕНИЮ
A. Комнатная температура определяется как температура от 15 °С
до 30 'С.
B. Д Зонд в тест-наборе PROCLEIX® ULTRIO® Assay и
избирательные зонды чувствительны к воздействию света. Во
время хранения и подготовки к работе эти реагенты следует
предохранять от света.
C. Не используйте реагенты и жидкости, срок годности которых
истек.
D. Если за период хранения в TCR образовался осадок, см.
инструкции в разделе П О Д ГО ТО ВКА Р Е А Г Е Н Т О В . НЕ
ПЕРЕМЕШИВАТЬ НА ВОРТЕКСЕ. НЕ ЗАМОРАЖИВАТЬ TCR.
П римечание. Если после хранения TCR при температуре от 2 °С
до 8 "С дать осадку опуститься на дно емкости, существенно
повысится вероятность образования желатинообразного осадка.
E. Повторное замораживание внутреннего контроля,
амплификационного и ферментативного реагентов, зонда и
избирательных зондов HIV-1, HCV и HBV не допускается.
F. Отрицательный, HIV- 1-положительный, HBV-положительный и
^ HCV-положительный калибраторы выпускаются во флаконах для
однократного применения и после использования подлежат
утилизации.
G. Если за период хранения в отмывочном растворе,
амплификационном или селекционном реагенте, растворе зонда
или избирательного зонда по HIV-1, HBV или HCV образовался
осадок, см. инструкции в разделе ПОДГОТОВКА РЕАГЕНТОВ.
H. Изменение внешнего вида реагента может свидетельствовать о
его нестабильности либо непригодности. В случае изменения
внешнего вида реагента после ресуспендирования (напр.,
изменение цвета либо помутнение раствора,
свидетельствующее о микробной контаминации) использовать
его нельзя.
I . Указания по хранению реагентов указаны в таблице ниже.
Реагент/жидкость
Срок хранения
запечатанной
емкости
Срок хранения
после вскрьп^ия
упаковки/
размораживания
(до истечения
срока годности)
Реагент с внутренним
контролем (Infernal
Control, 1C)
О т-15°С до
-35 °С, до
истечения срока
годности
8 часов после
добавления TCR при
КТ*
Реагент для
связывания мишени
(Target Capture
Reagent, TCR), wTCR~
О т2 ° С д о8 *С,
до истечения
срока годности
30 суток при
температуре от 2 °С
до 8 °С; 80 часов при
кт”
Зонды
О т-15°С до
-35 ”С, до
истечения срока
годности
30 суток при
температуре от 2 °С
до 8 °С; 80 часов при
кт
Амплификационный
реагент
О т-15'С до
-35 ”С, до
истечения срока
годности
30 суток при
температуре от 2 °С
до 8 °С; 80 часов при
кт
Ферментативный
реагент
О т-15°С до
-35 ’С, до
истечения срока
годности
30 суток при
температуре от 2 °С
д о8 °С;80 часов при
КТ
Реагент/жидкость
Срок хранения
запечатанной
емкости
Срок хранения
после вскрытия
упаковки/
размораживания
(до истечения
срока годности)
Селекционный реагент
При КТ до
истечения срока
годности 30 суток при КТ
Калибраторы
О т-15 “С до
-35 °С, до
истечения срока
годности 8 часов при КТ
Реагенты Auto Detect
При КТ до
истечения срока
годности 30 суток при КТ
Буфер для жидкости
для деактивации
При КТ до
истечения срока
годности 30 суток при КТ
Жидкость для
деактивации Неприменимо 30 суток при КТ
Масло
При КТ до
истечения срока
годности 30 суток при КТ
Отмывочный раствор
При КТ до
истечения срока
годности 30 суток при КТ
* КТ = комнатная температура
* * Срок стабильности TCR включает суммарное время,
истекшее до и после добавления внутреннего контроля
* * * Повышение температуры до комнатной на 80 часов
допускается в течение 30 дней.
СБОР, ХРАНЕНИЕ И ОБРАБОТКА ОБРАЗЦОВ
Предупреждение. С о в с е м о б р а з ц а м и с л е д у е т о б р а щ а т ь с я к а к с
п о т е н ц и а л ь н ы м и и с т о ч н и к а м и и н ф е к ц и и .
Работая с пробами, будьте осторожны, чтобы не допустить
перекрестной контаминации. В частности, использованные
материалы не следует проносить над открытыми пробирками.
ОБРАЗЦЫ КРОВИ Ж И ВЫХ ДОНОРОВ
A. Можно использовать кровь, собранную в стеклянные либо
пластиковые пробирки.
B. Можно использовать плазму, собранную в пробирки с K 2EDTA,
K3EDTA или пробирки подготовки плазмы Becton-Dickinson EDTA
(BD РРТ™). Следуйте инструкциям от производителя пробирок
для проб. На стабильность образцов отрицательно влияет
повышение температуры. Срок хранения цельной крови, плазмы
или сыворотки может составлять до 72 часа с момента забора
при температуре s 25 'С; повышение температуры не более,
чем до 30 °С допускается в течение не более, чем 24 часов.
После центрифугирования образцы можно дополнительно
хранить еще пять суток при температуре от 2 'С до 8 °С.
Отделенная от форменных элементов плазма сохраняет
пригодность для тестирования в течение более длительного
срока при температуре S -20 °С. Не замораживайте цельную
кровь.
500690RU Ред. В
--- стр. 6 ---
' О Б Щ А Я ИНФОРМАЦИЯ
Температура {*С)
Срок (сутки)
*Упомянутоо повышение температуры от 2 °С до 30 *С и от
2 °С до 25 °С допускается в любое время в течение периода
хранения.
Можно использовать дополнительные образцы, полученные в
учреждениях заготовки крови или плазмы и собранные в
емкости с цитратом натрия или кислой цитрат-декстрозой в
соответствии с инструкциями производителя контейнера сбора
образцов. Срок хранения цельной крови или плазмы в кислой
цитрат-декстрозе, гепарине или в натрия цитрате соответствует
сроку, указанному в разделе В выше.
Можно использовать дополнительные образцы, собранные в
пробирки для сыворотки в соответствии с инструкциями
производителя контейнера сбора образцов. Хранить сыворотку
следует в соответствии с указаниями в разделе В выше.
Можно использовать дополнительные образцы, полученные в
учреждениях заготовки крови или плазмы и собранные в
емкости с антикоагулянтом ЦФД, ЦФ 2Д или ЦФДА -1 в
соответствии с инструкциями производителя контейнера сбора
образцов. Центрифугирование цельной крови (не плазмы),
содержащей эти антикоагулянты, может производиться не
позднее, чем через 13 суток хранения при температуре от 2 °С
до 8 °С. В лкзбое время в течение этих 13 суток температура
хранения образца цельной крови может быть повышена до
30 “С на 1 сутки и до 25 °С на не более 2 суток. После
центрифугирования образцы плазмы можно дополнительно
хранить еще пять суток при температуре от 2 "С до 8 *С.
Отделенная от форменных элементов плазма сохраняет
пригодность для тестирования в течение более длительного
срока при температуре s -20 °С.
Показано, что трехкратное замораживание и оттаивание плазмы
или сыворотки не влияло на рабочие характеристики тест-
набора.
При наличии в образце видимого осадка или фибрина следует
провести осаживание путем центрифугирования в течение 10
минут при 1000-3000 х д. Не проводите исследование образцов
с недостаточным объемом жидкости над гелевым сепаратором
или над верхним краем слоя эритроцитов.
После оттаивания следует тщательно размешать плазму или
сыворотку и центрифугировать ее в течение 10 минут при 1000-
3000 X д. Время и скорость центрифугирования размороженных
пробирок BD РРТ должны быть подтверждены пользователем.
Остальные условия сбора и хранения образцов должны быть
подтверждены пользователем. Для транспортировки образцы
необходимо упаковать и снабдить этикетками в соответствии с
ф едеральным и международным законодательством
относительно транспортировки образцов клинических
материалов и инфекционных агентов.
Недостаточные меры по предотвращению перекрестной
контаминации во время обработки проб могут стать причиной
ложноположительного результата исследования.
ОБРАЗЦЫ ТРУПНОЙ КРОВИ
А. Забор трупной крови может осуществляться в пробирку с EDTA
либо в пробирку без антикоагулянта. Следуйте инструкциям от
производителя пробирок для проб.
П римечание. Сбор, обработка и исследование образцов, взятых
перед смертью у пациента, чьи органы или ткани затем будут
использованы для трансплантации, должны проводиться в
соответствии с инструкциями по работе с трупными
материалами.
В.
С.
D.
Если в течение 1 2 часов после смерти труп был охлажден (до
температуры от 1 "С до 10 'С ), забор образцов может
производиться не позднее, чем через 24 часа после смерти.
Если труп не был охлажден (до температуры от 1 ”С до 10 °С),
забор образцов может производиться не позднее, чем через 1 5
часов после смерти. На стабильность образцов отрицательно
влияет повышение температуры.
Срок хранения цельной крови (в EDTA) или плазмы может
составлять до 72 часов при температуре от 2 “С до 8 ’ С;
повышение температуры до 25 “С допускается в течение не
более чем 24 часов. После центрифугирования образцы можно
дополнительно хранить еще 5 суток при температуре от 2 “С до
8 °С. Отделенная от форменных элементов плазма сохраняет
пригодность для тестирования в течение более длительного
срока при температуре S -20 "С. Не замораживайте цельную
кровь.
Срок хранения цельной крови (в пробирке для свернувшейся
крови) или сыворотки может составлять до 72 часов при
температуре от 2 °С до 8 "С; повышение температуры до 25 °С
допускается в течение не более чем 24 часов. После
центрифугирования образцы можно дополнительно хранить еще
двое суток при температуре от 2 °С до 8 °С. Отделенная от
свертка крови сыворотка сохраняет пригодность для
тестирования в течение более длительного срока при
температуре S -20 °С. Не замораживайте цельную кровь.
Температура (*С)
Срок (сутки)
‘Упомянутое выше повышение температуры от 2 °С до 25 ‘С может
иметь место в любое время.
E. Показано, что трехкратное замораживание и оттаивание плазмы
и сыворотки не влияло на рабочие характеристики тест-набора.
F. При наличии в образце видимого осадка или фибрина следует
провести осаживание путем центрифугирования в течение 10
минут при 1000-3000 х д. Не проводите исследование образцов
с недостаточным объемом жидкости над гелевым сепаратором
или над верхним краем слоя эритроцитов.
G. После оттаивания следует тщательно размешать плазму или
сыворотку и центрифугировать ее в течение 10 минут при 1000-
3000 X д. Время и скорость центрифугирования размороженных
пробирок BD РРТ должны быть подтверждены пользователем.
H. Остальные условия сбора, обработки и хранения образцов
трупных материалов должны быть подтверждены
500690RU Ред. В
--- стр. 7 ---
О Б Щ А Я И Н ФОРМАЦИЯ
пользователем. Для транспортировки образцы необходимо
упаковать и снабдить этикетками в соответствии с федеральным
и международным законодательством относительно
транспортировки образцов клинических материалов и
инфекционных агентов.^ ®
Недостаточные меры по предотвращению перекрестной
контаминации во время обработки проб могут стать причиной
ложноположительного результата исследования.
Если объем образца трупной крови недостаточен, а также для
ослабления возможного ингибирующего эффекта содержащихся
в нем веществ, образец можно развести. Для разведения
образцов используется солевой раствор (0,9% хлорид натрия) в
пропорции 1:4, т. е. к 100 мкл пробы прибавляют 400 мкл
солевого раствора. После разведения следует перемешать
пробу, несколько раз перевернув пробирку. Затем можно
начинать исследование пробы по стандартной методике, внеся
500 мкл разведенной пробы в TTU с TCR.
Примечание. Если для пипетирования проб будет
использоваться пипеточный дозатор для подготовки тестов,
минимальный объем пробы после разведения должен
составлять 1100 мкл (220 мкл пробы и 880 мкл солевого
раствора).
Примечание. Эти требования были проверены в исследованиях
на материале от трупов неинфицированных лиц, в который
вносили вирус. Стабильность HIV -1 HCV и HBV в трупном
материале не оценивалась.
500690RU Ред. В
--- стр. 8 ---
► П О Л Ь З О В А Т Е Л И P R O C L E I X ®
S Y S T E M
ПРЕДОСТАВЛЕННЫЕ МАТЕРИАЛЫ
PROCLEIX® ULTRIO® Assay Набор на 1000 тестов P/N 301103
Набор на 5000 тестов P/N 301105
Реагент с внутренним контролем
Реагент для связывания мишени
Амплификационный реагент
Ферментативный реагент
Зонд
Селекционный реагент
Отрицательный калибратор PROCLEIX®
Положительный калибратор PROCLEIX® HIV- 1
Положительный калибратор PROCLEIX® HCV
Положительный калибратор PROCLEIX® HBV
^Н Е О Б Х О Д И М Ы Е ДЛЯ АНАЛИЗА МАТЕРИАЛЫ,
^П Р Е Д О С ТА В Л Я Е М Ы Е ОТДЕЛЬНО
Избирательные зонды PROCLEIX® HIV- 1, HCV и HBV
Реагент с избирательным зондом HIV-1 P/N 301107
Реагент с избирательным зондом HCV P/N 301108
Избирательный зонд HBV P/N 301109
Жидкости, используемые для анализа PROCLEIX®
Assay P/N 301116
Отмывочный раствор
Масло
Буфер для жидкости для деактивации
Реагенты PROCLEIX® Auto Detect P/N 30112O
Auto Detect 1
Auto Detect 2
Расходные материалы
(Все расходные материалы предназначены только для
Ш^днократного использования. Не используйте их
^^повтормо. Использование других расходных
материалов не рекомендуется).
10-пробирочные секции (Теп Tube Unit, TTU) P/N TU 0040
Кассеты на 10 наконечников P/N 104578
Изолирующая пленка P/N 102085
Оборудование и программное обеспечение
Система связывания мишени и руководство
оператора
Люминометр, соответствующее профаммное
обеспечение и руководство оператора
Многопробирочный вортекс-смешиватель
Водяная баня
Специально выделенные шаговые пипеточные
дозаторы с постоянным или переменным объемом,
позволяющие дозировать 25-500 мкл жидкости с
точностью ± 5% и коэффициентом вариации
(coefficient of variation, CV) й 5% .
ПОЛЬЗОВАТЕЛИ PROCLEIX® SYSTEM
ДРУГИЕ МАТЕРИАЛЫ, ИМЕЮЩИЕСЯ В
КОМПАНИИ CHIRON ДЛЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ С
ТЕСТ-НАБОРОМ PROCLEIX® ULTRIO® ASSAY
Калибраторы PROCLEIX® ULTRIO® Assay р/м 3011 0 6
Отрицательный калибратор PROCLEIX®
Положительный калибратор PROCLEIX® HIV- 1
Положительный калибратор PROCLEIX® HCV
Положительный калибратор PROCLEIX® HBV
Оборудование и программное обеспечение для системы
PROCLEIX® System
Пипеточный дозатор для подготовки тестов, сопутствующее
программное обеспечение и руководство оператора
Программа Worklist Editor с руководством оператора
Оборудование и программное обеспечение общего назначения
Программное обеспечение для исследования пупов образцов,
руководство оператора и краткий справочник
Инкубатор подготовки реагентов (Reagent Preparation Incubator,
RPI) и автономный термомонитор (independent temperature
nionitor, ITM) с руководством оператора
Установка добавления реагентов (Reagent Addition Station, RAS),
руководство оператора и краткий справочник
Характеристики аппаратуры и информация для оформления заказа
может быть получена в службе поддержки покупателей Chiron.
НЕОБХОДИМЫЕ, НО НЕ ПРЕДОСТАВЛЯЕМЫЕ
МАТЕРИАЛЫ
Наконечники для шагового пипеточного дозатора ( 1,25 мл, 2,5 мл,
5,0 мл, 10,0 мл. 12,5 мл)
Если вы пипетируете пробы вручную: фильтрующие фиксированные
наконечники для пипеточного дозатора, позволяющие дозировать
500 мкл жидкости (для проб) и повторные наконечники для
пипеточного дозатора на 400 мкп жидкости (для wTCR).
Одноразовые фильтрующие проводящие наконечники емкостью
1000 мкл или 1100 мкл в штативе, одобренном для использования с
данным оборудованием
Кюветы с реагентами для пипеточного дозатора для подготовки
тестов
Хлорная известь
Для приготовления рабочих растворов с концентрацией
гипохлорита натрия 5% и 0,5%
Аналог хлорной извести (необязательно)
Перечень аналогов хлорной извести и указания по их
применению можно получить в службе технической поддержки
Chiron.
Стерильны е полипропиленовые конические пробирки с
герметичными крышками. Рекомендуется использовать свободно
стоящие пробирки двух размеров ( 5-10 мл и ^ 30 мл). Пробирки
должны соответствовать диаметру наконечника для шагового
пипеточного дозатора.
Другое
К рат кий справочник по PROCLEIX^ System
(PROCLEIX® System QRG)
500690RU Ред. В
--- стр. 9 ---
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
A. Для диагностики in vitro.
B. Для снижения риска получения недействительных результатов,
перед началом серии анализа внимательно прочтите весь
вкладыш PROCLEIX® ULTRIO® Assay, QRG по PROCLEIX®
System и руководства оператора.
C. Анализируемые образцы могут быть инфицированы. Во время
исследования руководствуйтесь универсальными мерами
предосторожности.^®' ^ Работа с материалами и их утилизация
должны выполняться в соответствии с местными,
государственными и ф едеральными нормативными
требовани ям и.И сследовани е должно проводиться только
персоналом, обладающим адекватной квалификацией для
работы с PROCLEIX ULTRIO Assay, и обученным правильной
работе с инфицированными материалами.
D. УВЕДОМЛЕНИЕ. Часть составляющих набора содержит
препараты крови человека. Входящий в набор HIV- 1-
положительный калибратор содержит HIV- 1-положительную
плазм у, п рош едш ую тер м и ч еск ую о б р а б о тк у для
инактивации вируса. HCV-положитвльный калибратор
содерж ит H C V -полож ительную плазму, прош едш ую
► термическую обработку для инактивации вируса. HBV-
положительный калибратор содержит HBV-положительную
плазм у, п рош едш ую тер м и ч ескую об р а б о тк у для
инактивации вируса. Отсутствие HIV- 1/2, HCV и HBV в
отри цательном калибраторе проверено с помощ ью
лицензированных FDA тест-систем. Не существует метода,
который давал бы абсолютную гарантию, что препарат,
полученный из крови человека, не является источником
инфекции. Следует считать все материалы, полученные из
человеческой крови, инфицированными, и соблюдать при
работе с ними универсальные меры предосторожности,^^'
В случае утечки биологических материалов немедленно
проведите дезинф екцию, протрите поверхность 0,5%
(окончательная концентрация) раствором гипохлорита
натрия (разведенная хлорная известь) либо действуйте в
с о о тв е тств и и с п ри н яты м и в ваш ем учреж дении
ин стр укц и ям и . А н ал о ги хло рн ой и зв е сти можно
использовать только для обработки преамплификационных
зон. В зоне амплификации, а также в зонах, которые могут
бьп-ь контаминированы продуктами амплификации, аналоги
хлорной извести применять нельзя.
E. Соблюдайте обычные меры предосторожности при работе в
лаборатории. Запрещается набирать растворы в пипетку ртом.
Ч Запрещается принимать пищу, пить или курить в помещениях,
W предназначенных для работы. С образцами и реагентами
следует работать в одноразовых перчатках и лабораторных
халатах. После работы с образцами и реагентами тщательно
мойте руки.
F. В качестве консерванта в данном наборе используется азид
натрия. Не переносите реагенты в металлических пробирках.
Сливать использованные в ходе анализа азидосодержащие
растворы в канализационную систем у разреш ается,
предварительно разбавив их и смыв большим количеством
проточной воды. Эти меры предосторожности нужны во
избежание накопления в металлических трубах взрывоопасных
отложений.
G. Не допускайте попадания реагентов Auto Detect 1 и 2 на глаза,
кожу и слизистые оболочки. После контакта с этими реагентами
соответствующий участок следует промыть водой. Пролившийся
реагент разведите водой, далее действуйте в соответствии с
принятой в вашем учреждении инструкцией.
И. Выполняйте требования местного, государственного и
федерального законодательства в отношении утилизации
материалов, которые контактировали с образцами и
ПОЛЬЗОВАТЕЛИ PROCLEIX® SYSTEM
р е а ге н та м и .Т щ а те л ь н о очищайте и дезинфицируйте все
рабочие поверхности.
I . Используйте исключительно расходные материалы,
поставленные вместе с тест-набором, либо указанные в
руководстве.
J. Не используйте тест-набор после истечения срока годности. НЕ
смешивайте, НЕ заменяйте и НЕ комбинируйте реагенты из
наборов, различающихся номерами партий.
К. Не допускайте микробной контаминации реагентов и попадания
в них рибонуклеазы.
L. Соблюдайте требования относительно температуры хранения
всех аналитических реагентов. Нарушение условий хранения
аналитических реагентов отрицательно скажется на точности
анализа. Конкретные указания приведены в разделах
ИНСТРУКЦИИ ПО ХРАНЕНИЮ и ПОДГОТОВКЕ РЕАГЕНТОВ.
М. Соблюдайте требования относительно температуры хранения
всех образцов. Нарушение условий хранения образцов
отрицательно скажется на точности анализа. Конкретные
указания приведены в разделе СБО Р, Х Р А Н Е Н И Е И
ОБРАБОТКА ОБРАЗЦОВ.
N. Не комбинируйте аналитические реагенты и жидкости без
соответствующих инструкций.
О. На некоторые входящие в данный набор реагенты нанесена
маркировка по безопасности согласно Европейской Директиве
1999/45/ЕС. При работе с этими реагентами следует соблюдать
соответствующие требования.
Паспорта данных по безопасности материалов предоставляются
по требованию.
0,2% азид натрия в качестве консерванта содержится в
следующих реагентах. Эти реагенты также могут являться
опасными биологическими материалами:
Отрицательный калибратор PROCLEIX®
Положительный калибратор PROCLEIX® HIV-1
Положительный калибратор PROCLEIX® HCV
Положительный калибратор PROCLEIX® HBV
Хп. Опасно Биологическая опасность
R22/R32/S2/
S13/S36/S46
R22 Вреден при приеме внутрь
R32 При контакте с кислотой высвобоадает высокотоксичный газ
S2 Хранить в недоступном для детей месте
S13 Хранить вдали от пищи, напитков и корма для животных
S36 Использовать соответствующую защитную одежду
S46 При приеме внутрь немедленно обратитесь за медицинской
помощью и предъявите данный контейнер или этикетку
Р. См. меры предосторожности, указанные в других вкладышах
PROCLEIX® Assay а также ORG к данному тесту.
ПОДГОТОВКА РЕАГЕНТОВ
Перед началом процесса связывания мишени следует провести в
зоне, не контаминированной матричными нуклеиновыми кислотами
и ампликонами.
A. Комнатная температура определяется как температура от 15 °С
до 30 “С.
B. Убедитесь, что срок годности реагентов не истек.
C. Извлеките бутыль с селекционным реагентом из места, где она
хранилась при комнатной температуре.
500690RU Ред. В
--- стр. 10 ---
реагент следует1. Перед использованием селекционный
выдержать при комнатной температуре.
2. Если селекционный реагент по ошибке хранился при
температуре от 2 °С до 8 °С, а также, если температура в
лаборатории находится в пределах от 2 °С до 1 5 °С, в бутыли
может образоваться осадок.
3. В случае образования осадка в селекционном реагенте,
выдержите его при температуре 60 °С ± 1 “С в течение не
более чем 45 минут, часто (каждые 5-10 минут) встряхивая
бутыль. После полного растворения осадка поставьте бутыль
на водяную баню комнатной температуры, как минимум, на
1 час, для уравновешивания температуры. В качестве
альтернативы можно использовать инкубатор для подготовки
реагентов (Reagent Preparation Incubator, RPI) в соответствии с
QRG по PROCLEIX® System. Использовать селекционный
реагент можно только после уравновешивания температур.
4. При наличии пены осторожно удалите ее стерильным
тампоном либо стерильной пипеткой. Для каадого флакона
следует брать чистый тампон или пипетку.
5. Не используйте реагенты, в которых осадок не растворился,
либо имеется помутнение.
6. Запишите дату вскрытия флакона в отведенном месте на
этикетке (OPEN DATE).
Перед использованием нагрейте все реагенты до комнатной
температуры и тщательно перемешайте. Для этого можно
использовать водяную баню комнатной температуры, которая не
используется в других целях, либо RPI. Указания по
использованию RPI для нагрева TCR, зондов, ферментативного
и амплификационного реагентов см. в QRG по PROCLEIX®
System.
1. Размораживайте реагенты в вертикальном положении.
2. Для перемешивания амплификационного реагента,
избирательных зондов на HIV- 1, HCV и на HBV и
неизбирательных зондов можно использовать вортекс.
3. Ферментативный реагент следует тщательно перемешать,
осторожно переворачивая его в руках, избегая образования
чрезмерного количества пены.
4. Запишите дату размораживания ка> едого флакона в
отведенном месте на этикетке (THAW DATE).
Убедитесь, что осадок полностью растворился. Не используйте
реагенты, в которых осадок не растворился, либо имеется
помутнение.
НЕ НАГРЕВАЙТЕ зонды в водяной бане выше 30 °С. Не
нагревайте зонды в RPI выше 35 °С. См. QRG по PROCLEIX®
System.
Зонд в тест-наборе PROCLEIX® ULTRIO® Assay и
избирательные зонды чувствительны к воздействию света. Во
время хранения и подготовки к работе эти реагенты следует
предохранять от света.
При хранении при температуре от 2 °С до 8 °С в
неизбирательных и избирательных зондах образуется осадок.
Для ускорения растворения осадка зонды можно нагреть в
водяной бане, но температура бани не должна превышать 30 °С.
Размораживание зондов на лабораторном столе может занять
до 4 часов с периодическим помешиванием для полного
растворения осадка. Для размораживания зондов можно также
использовать RPI при температуре 32 °С ±2 °С, но не более
35 ”С. См. QRG по PROCLEIX System. Убедитесь, что осадок в
растворе зонда полностью растворился. Не используйте
реагенты, в которых осадок не растворился, либо имеется
помутнение.
Подготовьте рабочий реагент для связывания мишени (working
Target Capture Reagent, wTCR)
1. Извлеките TCR из места, где он хранился при температуре от
2 °С до 8 “С. НЕМЕДЛЕННО энергично перемешайте
ПОЛЬЗОВАТЕЛИ PROCLEIX® SYSTEM
содержимое бутыли (переверните ее не менее 1 0 раз). НЕ
ПЕРЕМЕШИВАТЬ НА ВОРТЕКСЕ.
2. После перемешивания нагрейте TCR от 22 °С до 30 °С.
Встряхивайте бутыль приблизительно каждых 10 минут, пока
осадок не растворится. Растворение осадка в TCR обычно
происходит в течение приблизительно 30 минут. Для
размораживания TCR можно также использовать RPI при
температуре 32 “С ±2 °С, но не более 35 °С. См. QRG по
PROCLEIX System.
Примечание. Если после выполнения перечисленных выше
действий в бутыли образуется гель, следует взять новую
бутыль в соответствии с рекомендациями выше. Бутыль с
гелем поставьте обратно в холодильник при температуре от
2 °С до 8 °С для дальнейшего использования.
3. Разморозьте один флакон реагента внутреннего контроля при
температуре от 2 °С до 8 °С либо при комнатной температуре
в течение не более 8 часов. Не используйте RPI для
размораживания реагента внутреннего контроля.
4. Тщательно перемешайте реагент внутреннего контроля на
вортексе либо путем переворачивания флакона.
5. Когда реагент внутреннего контроля (Intemal Control, 1C) и TCR
нафеются до комнатной температуры, тщательно
перемешайте TCR путем переворачивания флакона.
Перелейте весь реагент внутреннего контроля из флакона в
бутыль с TCR. Теперь рабочий реагент для связывания
мишени (working Target Capture Reagent, wTCR) готов.
Тщательно перемешайте содержимое бутыли.
6. В соответствующем месте на бутыли с TCR запишите дату
добавления реагента внутреннего контроля и номер партии
добавленного реагента (1C LOT). Запишите дату истечения
срока годности wTCR в отведенном месте на этикетке.
J. Разморозьте калибраторы при комнатной температуре.
1. Флаконы с калибраторами предназначены для однократного
использования и размораживаются перед кахздой серией
анализа.
2. Осторожно перемешайте флаконы с калибраторами,
перевернув их несколько раз, чтобы не образовалась пена.
3. При наличии пены удалите ее стерильным тампоном либо
стерильной пипеткой. Для каждого флакона следует брать
чистый тампон или пипетку.
К. Отмывочный раствор поставляется при температуре
окружающей среды и хранится при комнатной температуре. В
ходе транспортировки и хранения, если температура опускается
от 2 °С до 15 °С, в отмывочном растворе может образоваться
осадок. Для ускорения его растворения раствор можно нагреть
Температура не должна превышать 30 “С. Перед
использованием отмывочного раствора убедитесь, что осадок
полностью растворился. Не используйте реагенты, в которых
осадок не растворился, либо имеется помутнение.
L. Укажите дату вскрытия флаконов с отмывочным раствором,
маслом, селекционным реагентом, буфером для жидкости для
деактивации. Auto Detect 1 и Auto Detect 2 в отведенном месте
на этикетке (OPEN DATE).
М. Чтобы приготовить жидкость для деактивации, смешайте 1 часть
буфера и 1 часть 5% гипохлорита натрия. Запишите дату
приготовления жидкости для деактивации.
ЗАМЕЧАНИЯ ПО ПРОЦЕДУРЕ
А. Для снижения риска получения недействительных результатов,
перед началом серии анализа внимательно прочтите весь
вкладыш PROCLEIX® ULTRIO® Assay, и QRG. Данный вкладыш
следует использовать с соответствующим QRG. Процедуры
технического обслуживания и информацию о работе
программного обеспечения см. в QRG по PROCLEIX® System.
500690RU Ред. В
--- стр. 11 ---
ПОЛЬЗОВАТЕЛИ PROCLEIX® SYSTEM
В. ПОДГОТОВКА ОБОРУДОВАНИЯ
1 .Следует использовать для работы три выделенных
исключительно для этих целей водяных бани: для связывания
мишени и преамплификационных процедур (60 °С ± 1 °С). для
амплификации (41,5 °С ± 1 °С) и для гибридизации и селекции
(62 "О ± 1 °С). Нужен также контейнер с водой температурой
23 'С ± 4 “С для действия перед этапом детекции.
2. Настройте водяные бани для связывания мишени на 60 °С
± 1 'С, а для амплификации - на 41,5 °С ± 1 °С.
3. Если используется пипеточный дозатор для подготовки тестов,
выполните настройку в соответствии с QRG.
4. Подготовьте систему связывания мишени в соответствии с
указаниями в QRG.
5. Если используется установка добавления реагентов (Reagent
Addition Station, RAS), включите ее. Дальнейшие указания см.
в QRG по RAS. Каждый аппарат RAS можно использовать
только в одной зоне: для добавления реагентов до
амплификации, либо после.
6. Ежедневно протирайте рабочие поверхности и пипеточные
дозаторы разведенной хлорной известью ( 0,5% водный
раствор гипохлорита натрия). После не менее чем 1 5-
минутной экспозиции раствор хлорной извести следует смыть
с пипеточных дозаторов и рабочих поверхностей водой.
Аналоги хлорной извести можно использовать только для
обработки преамплификационных зон. В зоне
амплификации, а также в зонах, которые могут быть
контаминированы продуктами амплификации, аналоги
хлорной извести применять нельзя. НЕ ОБРАБАТЫВАЙТЕ
РАБОЧИЕ ПОВЕРХНОСТИ РАСТВОРОМ ДЛЯ ДЕАКТИВАЦИИ.
7. Настройте водяную баню для гибридизации и селекции на
62 *С ± 1 °С.
8. Перед детекцией наполните контейнер водой при температуре
23 °С ± 4 °С для охлаждения смеси.
9. Подготовьте люминометр в соответствии с указаниями в ORG
по PROCLEIX System.
РАЗМЕР СЕРИИ
1. Тест-набор рассчитан на серию анализа в среднем из 55
тестов. При меньшем размере серии относительное число
полезных тестов будет меньше.
2. В каждой серии PROCLEIX® ULTRIO® Assay, включающей до
100 тестов, девять тестов используется на трехкратный повтор
анализа отрицательного калибратора и двукратный повтор
анализа калибраторов, положительных по HIV-1, по HCV и по
HBV.
3. В каждой серии избирательного анализа PROCLEIX® на HIV-1,
HCV или HBV 1 0 тестов используется на трехкратный повтор
анализа отрицательного калибратора, трехкратный повтор
анализа соответствующего положительного калибратора и
двукратный повтор анализа каждого из двух оставшихся
положительных калибраторов.
КОНФИГУРАЦИЯ СЕРИИ
1. В начале каждого рабочего списка должен находиться набор
калибраторов.
2. Набор калибраторов для теста PROCLEIX ULTRIO Assay и для
избирательных тестов включает по одному флакону
отрицательного калибратора и калибраторов, положительных
по HIV-1,HCVhHBV.
РЕАГЕНТЫ
1 .
2 .
Для внесения реагентов используйте шаговый пипеточный
дозатор с точностью ± 5% и прецизионностью < 5% CV.
Ежемесячно проверяйте точность пипеточного дозатора и
регулярно проводите его калибровку.
Для уменьшения расхода амплификационного реагента,
масла, ферментативного реагента и растворов
избирательных зондов на HIV- 1, HCV и HBV, а также
селекционного реагента, разделите их пропорционально
размеру серии. Разделение реагентов выполняется после их
приготовления в зоне, не контаминированной матричными
нуклеиновыми кислотами и апликонами. Используются
стерильные полипропиленовые конические пробирки с
герметичными крышками. До и после разделения реагентов
следует протереть рабочее место разведенной хлорной
известью ( 0,5% водный раствор гипохлорита натрия).
Аналоги хлорной извести можно использовать только для
обработки преамплификационных зон. В зоне
амплификации, а также в зонах, которые могут быть
контаминированы продуктами амплификации, аналоги
хлорной извести применять нельзя. Разделенные реагенты
следует использовать в тот же день. НЕ ХРАНИТЕ реагенты в
конических пробирках для разделения.
F. ПРОЦЕСС ВЫПОЛНЕНИЯ РАБОТ
1. Для сведения к минимуму вероятности заноса ампликонов в
другие зоны лаборатории работа должна быть организована
по принципу поточности. Переходите от подготовки реагента к
подготовке пробы, затем к зоне амплификации и детекции.
Обратное перемещение проб, оборудования и реагентов на
предыдущий этап не допускается. Персонал может
переходить из зоны проведения НРА в зоны предыдущих
этапов анализа только при наличии соответствующих средств
предотвращения контаминации.
2. Подготовка реагентов должна выполняться в чистой зоне
(свободной от матричных нуклеиновых кислот и ампликонов).
3. Подготовка проб, связывание мишени и преамплификационные
процедуры должны выполняться в свободной от амкликонов
зоне.
4. Реакция защиты гибридизацией должна проводиться в зоне,
отделенной от зон подготовки реагентов и выполнения
амплификации.
G. ПАРАМЕТРЫ СРЕДЫ
1. Этапы связывания мишени, амплификации, гибридизации и
селекции требуют определенной температуры. В связи с этим
следует обязательно поддерживать температуру водяных
бань в указанном температурном диапазоне. Для этого
используйте калиброванный термометр.
2. Комнатная температура определяется как температура от
15“С д о30’С.
3. Процесс детекции является чувствительным к температуре.
Температура воздуха в зоне детекции должна составлять от
2 1 ”С до 27 “С.
4. Температура в помещении, где работает RPI, должна
находиться в пределах от 1 5 “С до 25 “С.
H. ВРЕМЯ
Этапы связывания мишени, амплификации и реакции защиты
гибридизацией имеют ограничения по времени. Эти офаничения
указаны в разделе ПРОЦЕДУРА АНАЛИЗА.
I . ПЕРЕМЕШИВАНИЕ В ВОРТЕКСЕ
Для обеспечения точности исследования при помощи
PROCLEIX® ULTRIO® Assay важно правильно выполнять
перемешивание на вортексе. Вортексы различаются скоростью
вращения. Сначала следует установить низкую скорость
вращения, затем постепенно повышать ее, чтобы достичь
нужной степени перемешивания. При этом реакционная смесь
не должна подняться до изолирующей пленки. Очень важно на
каждом этапе, предусм атриваю щ ем исп ользование
вортекса, хорошо перемешать содержимое пробирок.
1 0 500690RU Ред. В
--- стр. 12 ---
ПОЛЬЗОВАТЕЛИ PROCLEIX® SYSTEM
1 .
J. ПИПЕТИРОВАНИЕ
1. Для рабочих характеристик тест-набора очень важна точность
выполняемого оператором пипетирования.
2. За исключением wTCR, при добавлении реагентов в пробирки
наконечник дозатора не должен опускаться в пробирку или
касаться ее ободка, чтобы минимизировать вероятность
переноса материала из одной пробирки в другую.
3. Все пипеточные дозаторы, использующиеся на этапах
амплификации и НРД не должны использоваться в других
целях. Все пипеточные дозаторы, использующиеся на этапе
связывания мишени, не должны использоваться в других
целях.
4. При добавлении масла, раствора зонда и селекционного
реагента направляйте наконечник дозатора на стенки
пробирки, а не на ее дно, во избежание всплеска жидкости.
К. РУЧНОЕ ПИПЕТИРОВАНИЕ ОБРАЗЦОВ
Неправильная техника ручного пипетирования проб или wTCR
может повлиять на результаты анализа. Во избежание
нарушения отслеживания идентификаторов проб
рекомендуется, чтобы рабочие списки проверял другой
сотрудник.
Убедитесь, что TTU в штативе ориентирована заостренным
концом к левой части штатива, а закругленным концом - к
правой. Внесите первый калибратор в первую пробирку,
начиная с заостренного конца TTU. Пипетирование проб
производится слева направо.
Для каждой пробы следует брать новый наконечник дозатора.
После использования наконечник следует выбрасывать в
контейнер для биологических отходов. Для предотвращения
перекрестной контаминации во время пипетирования
образцов и утилизации наконечников не проносите их над
открытыми пробирками и не касайтесь наконечниками другого
оборудования и поверхностей в лаборатории.
Во избежание контаминации между сериями анализа
проводите очистку и деконтаминацию ручных пипеточных
дозаторов.
Убедитесь, что пробы правильно установлены в TTU в
соответствии с рабочим списком.
4.
5.
L. ДЕКОНТАМИНАЦИЯ
1. В связи с чрезвычайно высокой точностью теста должны быть
приняты все меры для предотвращения контаминации.
Ежедневно протирайте столы и пипетки разведенной хлорной
известью (0,5% водный раствор гипохлорита натрия). После
^ не менее чем 1 5-минутной экспозиции раствор хлорной
' извести следует смыть водой. Растворы, содержащие хлор,
могут разъедать металл. Во избежание коррозии тщательно
смывайте раствор хлорной извести с поверхностей
оборудования.
2. Аналоги хлорной извести можно использовать только для
обработки преамплификационных зон. В зоне
амплификации, а также в зонах, которые могут быть
контаминированы продуктами амплификации, аналоги
хлорной извести применять нельзя.
3. Реакционные пробирки должны быть деконтаминированы с
помощью жидкости для деактивации, как описано в QRG по
PROCLEIX System.
4. Следуйте инструкциям в QRG по PROCLEIX System по
деконтаминации и техническому обслуживанию аппарата.
М. ИЗОЛИРУЮЩАЯ ПЛЕНКА
1 .
2 .
Накройте TTU изолирующей пленкой и спепса прижмите ее,
чтобы обеспечить контакт со всеми пробирками. Каждый раз
используйте новую изолирующую пленку. НЕ используйте
изолирующую пленку повторно.
Чтобы снять изолирующую пленку, осторожно приподнимите
ее и удалите одним движением, чтобы избежать образования
аэрозоли и перекрестной контаминации проб. Немедленно
выбросьте пленку в соответствующий контейнер для отходов.
ПРОЦЕДУРА АНАЛИЗА
С л е д уе т и сп о л ь зо в а ть к а л и ^ а т о р ы и реагенты с
избирательными зондами PROCLEIX® ULTRIO® Assay из одной и
той же основной партии PROCLEIX® ULTRIO® и избирательных
анализов. Оператор должен убедиться, что номер основной
партии калибраторов и реагентов с избирательными зондами
PROCLEIX ULTRIO Assay соответствует номеру основной партии
реагентов набора, указанному на листке используемой партии
реагентов PROCLEIX ULTRIO Assay.
Образцы от доноров тканей и органов, включая трупный
м атериал, долж ны и ссл е д о в а ть ся только по методике
обследования индивидуальных доноров. Для исследования
трупной (без сердцебиения) крови можно брать растворенные и
нерастворенны е образцы , как указано в разделах СБОР,
ХРАНЕНИЕ И ОБРАБОТКА ОБРАЗЦОВ, Образцы трупной крови.
Для детекции RNA вирусов HIV -1 и HCV и DNA вируса HBV с
помощью PROCLEIX ULTRIO Assay, выполняйте указания в разделах
«Подготовка проб», «Связывание мишени», «Амплификация» и
«Реакция защиты гибридизацией» ниже. Перед началом
избирательного анализа PROCLEIX® на RNA вируса HIV-1 или HCV и
DNA вируса HBV см. раздел D.
Примечание. Указания по работе с аппаратом и программным
обеспечением см. в QRG по PROCLEIX System.
Примечание. Непрерывность выполнения исследования. Все
описанные ниже этапы исследования должны выполняться
последовательно и с минимальными временными интервалами, либо
без промежутков между отдельными этапами.
А . ПОДГОТОВКА ПРОБЫ / СВЯЗЫВАНИЕ МИШЕНИ
Подготовка пробы
ЕСЛИ ИСПОЛЬЗУЕТСЯ ПИПЕТОЧНЫЙ ДОЗАТОР ДЛЯ ПОДГОТОВКИ
ТЕСТОВ
1. Подготовьте пипеточный дозатор для подготовки тестов для
автоматического пипетирования калибраторов, проб и wTCR;
см. QRG по PROCLEIX System.
2. Аппарат внесет в реакционные пробирки по 400 мкл wTCR.
3. Аппарат внесет в соответствующие реакционные пробирки по
500 мкл калибратора и исследуемой пробы.
4. После завершения пипетирования проб перенесите TTU в
штатив для ТТи. Накройте TTU изолирующей пленкой. См.
ЗАМЕЧАНИЯ ПО ПРОЦЕДУРЕ для пользователей
PROCLEIX® System.
5. Перейдите к разделу «Связывание мишени».
ЕСЛИ ПИПЕТИРОВАНИЕ ПРОИЗВОДИТСЯ ВРУЧНУЮ
Шаговые пипеточные дозаторы, использующиеся на этапе
П О Д ГО ТО В К И П Р О Б , не долж ны использоваться в других целях
1. Для отслеживания проб следует создать электронный рабочий
список в профамме PROCLEIX® WorWlst Editor. Указания
приведены в ORG по PROCLEIX® System либо могут быть
получены в службе технической поддержки Chiron.
Рекомендуется, чтобы другой сотрудник проверял
соответствие идентификаторов проб на пробирках, в рабочем
списке и в подробном отчете по серии анализа. В отчете по
серии результаты по пробам, пипетирование которых
проводилось вручную, будут обозначены буквой «М».
2. Загрузите в штатив для TTU достаточное количество TTU для
серии анализа.
1 1 500690RU Ред. В
--- стр. 13 ---
ПОЛЬЗОВАТЕЛИ PROCLEIX® SYSTEM
3. Непосредственно перед использованием тщательно
перемешайте wTCR, чтобы микрочастицы пребывали во
взвешенном состоянии.
4. В соответствии с рабочим списком осторожно добавьте в
ках^1ую пробирку, в которую будет внесена проба, по 400 мкл
wTCR. Для этого опустите наконечник приблизительно на
1/4 глубины пробирки под некоторым углом и выпустите
wTCR по стенке пробирки. Старайтесь не задеть
наконечником пипетки ободок или боковую стенку
пробирки. Сначала следует вносить в пробирку wTCR,
затем пробу.
5. Проведите пипетирование образцов.
a. По рабочему списку сопоставьте идентификационные
номера ТТи, калибратора и исследуемой пробы.
b. Аспирируйте 500 мкл каждого калибратора,
контрольного раствора или исследуемого образца из
соответствую щ ей пробирки посредством
одноканального пипеточного дозатора с
соответствующ им фильтрующим одноразовым
наконечником. Погружайте в пробу только кончик
наконечника дозатора. Если в пробирке есть осадок, не
взболтайте его.
c. Внося жидкость в пробирку, опустите наконечник
дозатора на половину ее глубины, не касаясь стенок
верхней части пробирки. Затем выпустите жидкость в
пробирку по нижней части стенки под углом. Не
отпускайте поршень дозатора до извлечения
наконечника из пробирки. Вынимая наконечник из
пробирки, старайтесь не задеть ее ободок или боковую
стенку.
6. Замените наконечник пипетки на новый и повторите действие
5 с каждой пробой.
7. Визуально убедитесь, что в пробирку внесен надлежащий
объем пробы и wTCR.
8. Накройте TTU изолирующей пленкой. Перейдите к разделу
«Связывание мишени».
Связывание мишени
Ш аговые пипеточные дозаторы, использующиеся на этапе
С ВЯЗЫ ВАН И Я М И Ш Е Н И , не долж ны использоваться в других
целях
1. Перемешивайте содержимое штатива с TTU в вортексе не
менее 20 секунд до ресуспендирования магнитных частиц.
См. ЗАМЕЧАНИЯ ПО ПРОЦЕДУРЕ для пользователей
PROCLEIX® System.
2. Перед инкубацией при температуре 60 °С ± 1 'С штатив может
находиться при комнатной температуре на протяжении не
более 75 минут.
3. Длительность инкубации в водяной бане при 60 “С ±1 “С
должна составлять 20 ± 1 минута.
4. Затем следует извлечь штатив с TTU и перенести его в зону
связывания мишени.
5. Выдержите штатив с TTU на лабораторном столе при
комнатной температуре в течение 14-20 минут
6. Затем перенесите штатив с TTU в систему связывания
мишени (target capture system, TCS) и оставьте на 9-20 минут.
7. Выполните одну операцию аспирации и отмывки. Для этого
используйте 1 мл отмывочного раствора (см. раздел
«Связывание мишени* в QRG по PROCLEIX System).
8. Перемешайте содержимое пробирок в вортексе, чтобы
ресуспендировать микрошарики. Убедитесь визуально, что
магнитные частицы образовали однородную суспензию.
9. Установите штатив с TTU в TCS на 4-10 минут.
10. Осторожно снимите изолирующую пленку и выбросьте ее.
11. Повторите действия 7-10.
12. Аспирируйте весь раствор из ка> ед ой пробирки. Указания см. в
разделе «Связывание мишени» в QRG по PROCLEIX System.
В . АМПЛИФИКАЦИЯ
Не используйте в этой зоне аналоги хлорной извести.
ЕСЛИ ИСПОЛЬЗУЕТСЯ УСТАНОВКА ДОБАВЛЕНИЯ РЕАГЕНТОВ
(REAGENT ADDITION STATION, RAS)
1. Перенесите штатив в RAS (указания см. в QRG по RAS).
2. Осторожно снимите изолирующую пленку и выбросьте ее. См.
ЗАМЕЧАНИЯ ПО ПРОЦЕДУРЕ для пользователей
PROCLEIX® System.
3. Аппарат внесет в реакционные пробирки по 75 мкл
амплификационного реагента (при этом изменится цвет
раствора в пробирке).
4. Аппарат внесет в реакционные пробирки по 200 мкл масла.
5. Накройте TTU изолирующей пленкой.
6. Перемешивайте содержимое штатива с TTU в вортексе не
менее 20 секунд до ресуспендирования микрочастиц.
Убедитесь, что магнитные частицы отсоединились от стенок
пробирки и образовали однородную суспензию.
7. Проведите инкубацию TTU в водяной бане при 60 °С ± 1 °С в
течение 10 ± 1 минута.
8. Проведите инкубацию TTU в водяной бане при 41,5 °С ± 1 °С в
течение 9-20 минут.
9. Перенесите штатив обратно в RAS (дополнительные указания
см. в QRG по RAS).
10. Осторожно снимите изолирующую пленку и выбросьте ее.
1 1. Аппарат внесет в реакционные пробирки по 25 мкл
ферментативного реагента (при этом изменится цвет раствора
в пробирке). Блок нафева, установленный на штатив для TTU,
обеспечит поддержку надлежащей температуры.
12. Закройте TTU новой изолирующей пленкой.
13. Извлеките штатив с TTU из RAS и перемешайте его
содержимое встряхиванием. НЕ ПЕРЕМЕШИВАТЬ НА
ВОРТЕКСЕ. После извлечения из RAS штатив нужно как
можно скорее перенес™ в водяную баню.
14. Проведите инкубацию TTU в водяной бане при 41,5 °С ± 1 °С в
течение 60 ± 5 минут.
15. Извлеките штатив с TTU из водяной бани и перенесите его в
зону реакции защиты гибридизацией. Перед внесением зонда
штатив может находиться при комнатной температуре на
протяжении не более 30 минут.
ЕСЛИ ДОБАВЛЕНИЕ РЕАГЕНТОВ ПРОИЗВОДИТСЯ ВРУЧНУЮ
Шаговые пипеточные дозаторы, использующиеся на этапе
А М П Л И Ф И К А Ц И И , не долж ны использоваться в других целях.
1. Осторожно снимите изолирующую пленку и выбросьте ее. См.
ЗАМЕЧАНИЯ ПО ПРОЦЕДУРЕ для пользователей
PROCLEIX® System.
2. Внесите в реакционные пробирки по 75 мкл
амплификационного реагента (при этом изменится цвет
раствора в пробирке). Относительно пипетирования, см.
ЗАМЕЧАНИЯ ПО ПРОЦЕДУРЕ для пользователей
PROCLEIX® System.
3. Внесите в реакционные пробирки по 200 мкл масла.
4. Накройте TTU изолирующей пленкой.
5. Перемешивайте содержимое штатива с TTU в вортексе не
менее 20 секунд до ресуспендирования микрочастиц.
Убедитесь, что магнитные частицы отсоединились от стенок
пробирки и образовали однородную суспензию.
6. Проведите инкубацию TTU в водяной бане при 60 “С ± 1 °С в
течение 10 ± 1 минута.
7. Проведите инкубацию TTU в водяной бане при 41,5 °С ± 1 ”С в
течение 9-20 минут.
1 2 500690RU Ред. В
--- стр. 21 ---
Сводная таблица расчета критериев соответствия
избирательного теста PROCLEIX® HBV
Контрольный критерий
Отрицательный калибратор
Определяемая
последовательность iO и S 45000 RLU
Внутренний контроль ^ 75000 и £ 375000 RLU
Калибратор, положительный
noHBV
Определяемая
последовательность г: 300000 и S 1800000 RLU
Внутренний контроль S 475000 RLU
Положительный по HIV-1
калибратор и
положительный по HCV
калибратор*
Определяемая
последовательность 2 0 и S 45000 RLU
Внутренний контроль S 75000 и 5 375000 RLU
|* 0 6 р а т и т * в н и м а н и е , ч т о п о л о ж и т е л ь н ы й п о HIV-1 к а л и б р а т о р и
п о л о ж и т е л ь н ы й п о HCV к а л и б р а т о р п р и и з б и р а т е л ь н о м а н а л и з е
PROCLEIX* HBV даю т результат, близкий к результату по отриц ательном у
калибратору.
Сведенная таблица расчета пороговых значений
избирательного теста PROCLEIX® HBV
Порог сигнала определяемой
последовательности =
Порог сигнала внутреннего
контроля =
Средний сигнал RLU
определяемой
последовательности NC
+ 0,04 X (Средний сигнал RLU
определяемой
последовательности в PC HBV)
0,5 X (Средний сигнал RLU
отрицательного калибратора в 1C )
ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
Все оп и санны е вы ш е расчеты пр овод ятся пр ограм м н ы м
обеспечением люминометра. Для каждого теста определяются два
пороговых значения: для сигнала определяемой последовательности
(медленногаснущий сигнал), т. е. порог сигнала определяемой
Последовательности, и для сигнала внутреннего контроля (Internal
C ontrol, 1C ) (быстрогаснущий сигнал), т. е. порог сигнала внутреннего
контроля. Методика расчета этих пороговых значений показана
выше. Для каждой пробы определяю тся значения сигнала
определяемой последовательности и внутреннего контроля в RLU.
Отношение сигнала определяемой последовательности к порогу
сигнала определяемой последовательности в RLU указывается в
отчете как отношение сигнала определяемой последовательности к
порогу (Signal/Cutoff, S/CO).
Если сигнал определяемой последовательности в пробе меньше
порога (т. е. S/CO определяемой последовательности < 1,00), чтобы
результат считался действительным, сигнал внутреннего контроля
должен быть больше или равен порогу сигнала внутреннего контроля
(1C Cutoff). В таком случае по внутреннему контролю будет
зафиксирован Действительный (Valid) результат, а проба будет
обозначена как Нет р е а кц и и (N o n re a c tiv e ). Если сигнал
определяемой последовательности больше или равен порогу сигнала
определяемой последовательности, (т. е. S/CO определяемой
последовательности ^ 1,00), будет зафиксирован результат анализа
пробы Есть реакция (R eactive). Если сигнал определяемой
последовательности меньше порога сигнала определяемой
последовательности (т. е. S/CO определяемой последовательности
< 1,00), а сигнал внутреннего контроля меньше порога сигнала
П О Л Ь З О В А Т Е Л И P R O C L E IX ® S Y S T E M
внутреннего контрол я, будет зарегистрирован результат
Н е д е й с тв и те л ь н ы й (in v a lid ) по внутреннему контролю и
Недействительный (invalid) по пробе. Сигнал внутреннего контроля
для всех проб не должен превыш ать 550000 RLU. Проба
автоматически будет объявлена Недействительной (Invalid).
При исследовании образцов трупной (без сердцебиения) крови
причиной получения недействительного результата может стать
наличие в пробе ингибиторных веществ. В таком случае можно
развести пробу в соответствии с разделом СБОР, ХРАНЕНИЕ 1 / 1
ОБРАБОТКА ОБРАЗЦОВ, образцы трупной крови и повторить анализ
только этой пробы.
Резюме интерпретации результатов исследования проб:
Интерпретация пробы Критерий
Нет реакции S/CO определяемой
последовательности < 1,00
И
1 C г Порог 1 C
И
1 C S 550000 RLU
Есть реакция S/CO определяемой
последовательности г 1,00
и
1 C S 550000 RLU
Недействительный 1 C > 550000 RLU
И л и
S/CO определяемой
последовательности < 1,00
И
1 C < Порог 1 C
20 500690RU Ред. В
--- стр. 22 ---
, П О Л Ь З О В А Т Е Л И P R O C L E IX ® T IG R IS ® S Y S T E M
► П О Л Ь З О В А Т Е Л И P R O C L E IX ®
T IG R IS ® S Y S T E M
ПРЕДОСТАВЛЕННЫЕ МАТЕРИАЛЫ
PROCLEIX® ULTRIO® Assay Набор на 1000 тестов P/N 301103
Набор на 5000 тестов P/N 301105
Реагент с внутренним контролем
Реагент для связывания мишени
Амплификационный реагент
Ферментативный реагент
Зонд
Селекционный реагент
Отрицательный калибратор PROCLEIX®
Положительный калибратор PROCLEIX® HIV-1
Положительный калибратор PROCLEIX® HCV
Положительный калибратор PROCLEIX® HBV
Ф НЕОБХОДИМЫЕ ДЛЯ АНАЛИЗА МАТЕРИАЛЫ,
ПРЕДОСТАВЛЯЕМЫЕ ОТДЕЛЬНО
Избирательные зонды PROCLEIX® HIV-1, HCV
и HBV
Реагент с избирательным зондом HIV-1
Реагент с избирательным зондом HCV
Избирательный зонд HBV
Жидкости, используемые для анализа
PROCLEIX* Assay
Отмывочный раствор
Масло
Буфер для жидкости для деактивации
Реагенты PROCLEIX® Auto Detect
Auto Detect 1
Auto Detect 2
^онсервант системной жидкости PROCLEIX®
S ystem
Контрольные реагенты PROCLEIX® ULTRIO®
TIGRIS®
Отрицательный контроль PROCLEIX®
ULTRIO® TIGRIS®
Контроль HIV-1 PROCLEIX® ULTRIO®
TIGRIS®
Контроль HCV PROCLEIX® ULTRIO®
TIGRIS®
Контроль HBV PROCLEIX® ULTRIO®
TIGRIS®
Расходные материалы
(Все расходные материалы предназначены
только для однократного использования. Не
используйте их повторно. Использование
других расходных материалов не
рекомендуется).
P/N 301107
P/N 301108
P/N 301109
P/N 301116
P/N 301120
P/N 301175
P/N 301177 / 302193
Многопробирочные секции (Multi-Tube Unit.
MTU) - в коробках по 100 шт P/N 104772
Набор пакетов для отходов (MTU и
наконечников) - по 30 шт каждый P/N 900907
Крышка для отходов MTU P/N 105523
Дефлектор отходов МТи P/N 105258
Запасные крышки для реагентов
(TCR, селекционный реагент и раствор
зонда) P/N CL0039
Запасные крышки для реагентов
(Амплификационный реагент) P/N CL0042
Запасные крышки для реагентов
(Ферментативный реагент и раствор
избирательного зонда) P/N CL0043
Набор растворов для технического
обслуживания PROCLEIX® TIGRIS® System P/N 105655
Оборудование
PROCLEIX® TIGRIS® System и руководство
оператора
Инкубатор подготовки реагентов (Reagent
Preparation Incubator, RPI) и автономный
термомонитор (independent temperature
monitor, ITM) с руководством оператора
Другое
Краткий справочник по PROCLEO^
TIGRIS System (PROCLEIX® TIGRIS®
System QRG)
ДРУГИЕ МАТЕРИАЛЫ, ИМЕЮЩИЕСЯ В
КОМПАНИИ CHIRON ДЛЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ С
ТЕСТ-НАБОРОМ PROCLEIX® ULTRIO® ASSAY
Калибраторы PROCLEIX® ULTRIO® Assay р/м 301106
Отрицательный калибратор PROCLEIX®
Положительный калибратор PROCLEIX® HIV-1
Положительный калибратор PROCLEIX® HCV
Положительный калибратор PROCLEIX® HBV
Оборудование и программное обеспечение общего
назначения
Пипеточный дозатор для подготовки тестов,
профаммное обеспечение для подготовки пулов,
руководство оператора и краткий справочник
Одноразовые фильтрующие проводящие
наконечники емкостью 1000 мкл или 1100 мкл в
штативе, одобренном для использования с данным
оборудованием (только для исследования пулов
образцов)
Характеристики аппаратуры и информация для оформления заказа
может быть получена в службе поддержки покупателей Chiron.
НЕОБХОДИМЫЕ, НО НЕ ПРЕДОСТАВЛЯЕМЫЕ
МАТЕРИАЛЫ
Хлорная известь
Для приготовления рабочих растворов с концентрацией
гипохлорита натрия 5% и 0,5%
Аналог хлорной извести (необязательно)
2 1 500690RU Ред. В
--- стр. 23 ---
П О Л Ь З О В А Т Е Л И P R O C L E IX ® T IG R IS ® S Y S T E M
Перечень аналогов хлорной извести и указания по их
применению можно получить в службе технической поддержки
Chiron.
Спирт (70% этанол, 70% раствор изопропилового спирта или
салфетки с 70% раствором изопропилового спирта)
Вода, соответствующая критериям типа 1 Национального комитета
по клиническим лабораторным стандартам (NCCLS)
Одноразовые фильтрующие проводящие наконечники емкостью
1000 мкл в штативе, одобренном для использования с PROCLEIX®
TIGRIS® System, Сведения об одобренных для применения
наконечниках можно получить в службе технической поддержки
Chiron.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
A. Для диагностики in vitro.
B. Для снижения риска получения недействительных результатов,
перед началом серии анализа внимательно прочтите весь
вкладыш PROCLEIX® ULTRIO* Assay и QRG по PROCLEIX®
TIGRIS® System.
C. Анализируемые образцы могут быть инфицированы. Во время
I исследования руководствуйтесь универсальными мерами
пред остор ож н о сти .Р аб о та с материалами и их утилизация
долж ны вы полняться в соо тве тствии с м естны м и,
го сударственны м и и ф едеральны м и норм ативны м и
т р е б о в а н и я м и .И с с л е д о в а н и е должно проводиться
персоналом, обладающим адекватной квалификацией для
работы с PROCLEIX® ULTRIO® Assay, и обученным правильной
работе с инфицированными материалами.
D. УВЕДОМЛЕНИЕ. Часть составляющих набора содержит
п р е п а р а ты кр о в и ч е л о в е ка . H IV -1-п о л о ж и т е л ь н ы й
калибратор в этом наборе и контрольный реагент по HIV-1
PROCLEIX® ULTRIO® TIGRIS® содержит HIV-1-положительную
человеческую плазму, прошедшую термическую обработку
для инактивации вируса. HCV-положительный калибратор в
этом наборе и контрольны й реагент по HCV PROCLEIX®
ULTRIO® TIG RIS® с о д е р ж и т HCV-п о л о ж и т е л ь н у ю
человеческую плазму, прошедшую термическую обработку
для инактивации вируса. HBV-положительный калибратор в
этом наборе и контрольны й реагент по HBV PROCLEIX®
ULTRIO® TIG RIS® с о д е р ж и т H B V -п о л о ж и т е л ь н у ю
человеческую плазму, прошедшую термическую обработку
для инактивации вируса. Отсутствие HIV-1/2, HCV и HBV в
о т р и ц а т е л ь н о м к а л и б р а т о р е и в о т р и ц а т е л ь н о м
^ ко н тр о л ь н о м о б р а зц е PROCLEIX® ULTRIO® TIGRIS®
' проверено с помощью лицензированных FDA тестч:иствм.
Не сущ ествует метода, которы й давал бы абсолю тную
гарантию, что препарат, полученный из крови человека, не
является источником инф екции. Следует считать все
м а т е р и а л ы , д о б ы т ы е из ч е л о в е ч е с ко й к р о в и ,
и н ф и ц и р о в а н н ы м и , и со б л ю д а ть при работе с ними
универсальны е меры п р е д о с т о р о ж н о с т и . В случае
утечки биологических материалов немедленно проведите
дезинфекцию, протрите поверхность 0,5% (окончательная
концентрация) раствором гипохлорита натрия (разведенная
хл орная и зве сть ) л и б о д е й ств уй те в с о о тве тств и и с
принятыми в вашем учреждении инструкциями. Аналоги
хлорной извести можно использовать только для обработки
зон подготовки проб и в RPI. Не используйте аналоги
хлорной извести для обработки PROCLEIX® TIGRIS® System.
E. Соблюдайте обычные меры предосторожности при работе в
лаборатории. Запрещается набирать растворы в пипетку ртом.
Запрещается принимать пищу, пить или курить в помещениях,
предназначенных для работы. С образцами и реагентами
следует работать в одноразовых перчатках и лабораторных
халатах. После работы с образцами и реагентами тщательно
мойте руки.
F. В качестве консерванта в данном наборе используется азид
натрия. Не переносите реагенты в металлических пробирках.
Сливать использованные в ходе анализа азидосодержащие
растворы в кан ал и за ци он н ую систем у разреш ается,
предварительно разбавив их и смыв большим количеством
проточной воды. Эти меры предосторожности рекомендуется
соблюдать во избежание накопления в металлических трубах
взрывоопасных отложений.
G. Не допускайте попадания реагентов Auto Detect 1 и 2 на глаза,
кожу и слизистые оболочки. После контакта с этими реагентами
соответствующий участок следует промыть водой. Пролившийся
реагент разведите водой, далее действуйте в соответствии с
принятой в вашем учреждении инструкцией.
H. Выполняйте требования местного, государственного и
федерального законодательства в отношении утилизации
м атериалов, которы е кон та кти ро ва ли с образцами и
р е а ге н т а м и .Т щ а т е л ь н о очищайте и дезинфицируйте все
рабочие поверхности.
I. Используйте исключительно расходные материалы,
поставленные вместе с тест-набором, либо указанные в
руководстве.
J. Не используйте тест-набор после истечения срока годности. НЕ
смешивайте, НЕ заменяйте и НЕ комбинируйте реагенты из
наборов, различающихся номерами партий.
К. Не допускайте микробной контаминации реагентов и попадания
в них рибонуклеазы.
L. Соблюдайте требования относительно температуры хранения
всех аналитических реагентов. Нарушение условий хранения
аналитических реагентов отрицательно скажется на точности
анализа. Конкретны е указания приведены в разделах
ИНСТРУКЦИИ ПО ХРАНЕНИЮ и ПОДГОТОВКА РЕАГЕНТОВ.
М. Не комбинируйте аналитические реагенты и жидкости без
соответствующих инструкций. Не добавляйте реагенты и
растворы в контейнеры, уже содержащие некоторое количество
жидкости. Система PROCLEIX TIGRIS System осуществляет
контроль уровня жидкости.
N. На некоторые входящие в данный набор реагенты нанесена
маркировка по безопасности согласно Европейской Директиве
1999/45/ЕС. При работе с этими реагентами следует соблюдать
соответствующие требования.
Паспорта данных по безопасности материалов предоставляются
по требованию.
0,2% азид натрия в качестве консерванта содержится в
следующих реагентах. Эти реагенты также могут являться
опасными биологическими материалами.
Отрицательный калибратор PROCLEIX®
Положительный калибратор PROCLEIX® HIV-1
Положительный калибратор PROCLEIX® HCV
Положительный калибратор PROCLEIX® HBV
Отрицательный контроль PROCLEIX® ULTRIO® TIGRIS®
Контроль HIV-1 PROCLEIX® ULTRIO® TIGRIS*
Контроль HCV PROCLEIX® ULTRIO® TIGRIS®
Контроль HBV PROCLEIX® ULTRIO® TIGRIS®
Xn. Опасно by!^i,«3gil Биологическая опасность
R22/R32/S2/
S13/S36/S46
R22 Вреден при приеме внутрь
R32 При контакте с кислотой высвобождает высокотоксичный газ
S2 Хранить в недоступном для детей месте
S13 Хранить вдали от пищи, напитков и корма для животных
S36 Использовать соответствующую защитную одежду
22 500690RU Ред. В
--- стр. 24 ---
S46 При приеме внутрь немедленно обратитесь за медицинской
помощью и предъявите данный контейнер или этикетку
О. При первом считывании штрих-кодов квадранта реагентов
система PROCLEIX® TIGRIS® System регистрирует их как фуппу.
В дальнейшем во всех рабочих списках эти реагенты должны
использоваться совместно. Нельзя заменять бутыли в
за р еги стри р ов ан н ом наборе на буты ли из других
зарегистрированных наборов. Более подробно см. в QRG по
PRCXLEIX TIGRIS System.
R He рекомендуется исследовать с помощью PROCLEIX ULTRIO
Assay рабочие списки или контролированные группы из 50 или
менее проб, так как в этом случае программное обеспечение не
отбраковывает результаты по критерию 10% недействительных
результатов.
Q. См. меры предосторожности, указанные в соответствующем
вкладыше PROCLEIX* Assay, а также в QRG к PROCLEIX
TIGRIS System.
ПОДГОТОВКА РЕАГЕНТОВ
A. Комнатная температура определяется как температура от 15 °С
до 30 ”С.
B. Выберите новый или открытый ранее комплект реагентов,
достаточный для количества проб в рабочем списке. Не
используйте реагенты, которые использовались вне PROCLEIX®
TIGRIS® System, так как аппарат выполняет проверку объема
реагентов в емкостях.
C. Убедитесь, что срок стабильности реагентов, включая срок
стабильности с момента вскрытия/размораживания, не истек.
1. Система PROCLEIX TIGRIS System не отслеживает
стабильность комнатной температуры реагентов или
жидкостей. Однако отслеживается время с момента зафузки
каждого реагента в анализатор. Анализ с использованием
реагентов, для которых истек срок хранения либо срок
стабильности с момента размораживания/вскрытия, не
допускается системой PROCLEIX TIGRIS System. Указания по
хранению реагентов с момента размораживания/вскрытия
приведены в таблице ниже.
Реагент/жидкость
Стабильность после
размораживания/
вскрытия*
wTCR, растворы зондов,
ферментативный реагент,
амплификационный реагент и
селекционный реагент 60 часов**
Отмывочный раствор, масло,
системная жидкость, жидкость для
деактивации, реагенты Auto Detect 14 суток
Срок хранения после размораживания/вскрытия
включается в срок хранения при комнатной
температуре, указанный в разделе «Общая
информация», ИНСТРУКЦИИ ПО ХРАНЕНИЮ.
Нельзя вклкэчать в очередь рабочие списки, если с
момента вскрытия/размораживания реагентов
прошло более 48 часов.
2.
D.
Чтобы проверить время до конца срока стабильности годных
наборов реагентов в базе данных системы, напечатайте отчет
по статусу аналитических реагентов.
Извлеките бутыль с селекционным реагентом из места, где она
хранилась при комнатной температуре.
1. Перед использованием селекционный реагент следует
выдержать при комнатной температуре.
• П О Л Ь З О В А Т Е Л И P R O C L E IX ® T IG R IS ® S Y S T E M
2. Если селекционный реагент по ошибке хранился при
температуре от 2 °С до 8 'С, а также, если температура в
лаборатории находится в пределах от 2 °С до 15 °С, в бутыли
может образоваться осадок.
3. При наличии помутнения или осадка можно использовать RPI
в соответствии с указаниями в ORG по PROCLEIX TIGRIS
System. Не используйте реагенты, в которых осадок не
растворился, либо имеется помутнение.
4. При наличии пены удалите ее стерильным тампоном либо
стерильной пипеткой. Для каждого флакона следует брать
чистый тампон или пипетку.
5. Запишите дату вскрытия флакона в отведенном месте на
этикетке (OPEN DATE).
E. Подготовка перечисленных ниже реагентов с помощью RPI
описана в QRG по PROCLEIX TIGRIS System: TCR, зонд,
ферментативный реагент, амплификационный реагент и
избирательные зонды для определения HIV-1, HCV и HBV.
Запишите дату размораживания каждого флакона в отведенном
месте на этикетке (THAW DATE).
F. Убедитесь, что осадок полностью растворился. Не используйте
реагенты, в которых осадок не растворился, либо имеется
помутнение.
G. Температурные параметры RP1 приведены в QRG по PROCLEIX
TIGRIS System.
H. Подготовьте рабочий реагент для связывания мишени (working
Target Capture Reagent, wTCR)
1. Извлеките TCR из места, где он хранился при температуре от
2 °С до 8 °С. НЕМЕДЛЕННО энергично перемешайте
содержимое бутыли (переверните ее не менее 10 раз). НЕ
ПЕРЕМЕШИВАТЬ НА ВОРТЕКСЕ.
2. Установите TCR в RPI и следуете указаниям в ORG по
PROCLEIX TIGRIS System.
3. Разморозьте один флакон реагента внутреннего контроля при
температуре от 2 ”С до 8 °С либо при комнатной температуре
в течение не более 8 часов. Не используйте RPI для
размораживания реагента внутреннего контроля.
4. Тщательно перемешайте реагент внутреннего контроля на
вортексе либо путем осторожного переворачивания флакона.
5. Выгрузив TCR из RPI и нафев 1 C до комнатной температуры,
перелейте все содержимое флакона реагента внутреннего
контроля в бутыль для TCR. Теперь рабочий реагент для
связывания мишени (working Target Capture Reagent, wTCR)
готов. Тщательно перемешайте содержимое бутыли.
6. В соответствующем месте на бутыли с TCR запишите дату
добавления реагента внутреннего контроля и номер партии
добавленного реагента (1C LOT). Запишите дату истечения
срока годности wTCR в отведенном месте на этикетке.
7. Не выбрасывайте флакон для 1 C , чтобы считать и внести в
систему его штрих-код.
I. Разморозьте калибраторы при комнатной температуре.
1. Флаконы с калибраторами предназначены для однократного
использования и размораживаются перед кахздой серией
анализа.
2. Осторожно перемешайте флаконы с калибраторами,
перевернув их несколько раз. чтобы не образовалась пена.
3. При наличии пены удалите ее стерильным тампоном либо
стерильной пипеткой. Для ка)^цого флакона следует брать
чистый тампон или пипетку.
J. Следуйте указаниям по подготовке контрольных проб PROCLEIX
ULTRIO TIG R IS во вклады ш ах к контрольны м пробам
PROCLEIX® ULTRIO® TIGRIS®.
1. Не допускайте пенообразования в растворе реагента.
23 500690RU Ред. В
--- стр. 25 ---
П О Л Ь З О В А Т Е Л И P R O C L E IX ® T IG R IS ® S Y S T E M
2. При наличии пены удалите ее стерильным тампоном либо
стерильной пипеткой. Для ка^едого флакона следует брать
чистый тампон или пипетку,
К. Реагенты для избирательного анализа могут использоваться с
любым зар еги стри р ов ан н ы м набором реагентов
(амплификационный, ферментативный, селекционный реагент,
TCR и зонд) в пределах основной партии.
L. Отмывочный раствор поставляется при температуре
окружающей среды и хранится при комнатной температуре. В
ходе транспортировки и хранения, если температура опускается
2 °С до 15 °С, в отмывочном растворе может образоваться
осадок. Для ускорения его растворения раствор можно нагреть.
Т ем пература не долж на превы ш ать 30 *С. Перед
использованием отмывочного раствора убедитесь, что осадок
полностью растворился. Не используйте реагенты, в которых
осадок не растворился, либо имеется помутнение.
М. Укажите дату вскрытия и загрузки в PROCLEIX TIGRIS System
флаконов с отмывочным раствором, маслом и реагентами Auto
Detect 1 и Auto Detect 2 в отведенном месте на этикетке (OPEN
DATE).
N. Для приготовления жидкости для деактивации вылейте
. содержимое одной бутыли буф ера для ж идкости для
F деактивации в бутыль для жидкости для деактивации.
1. Доведите раствор в бутыли для жидкости для деактивации 5%
раствором гипохлорита натрия до линии уровня жидкости.
2. Прикрепите штрих-код от буфера для жидкости для
деактивации к верхней части бутыли. Во время учета запасов
жидкостей этот штрих-код должен быть сосканирован и
сохранен в системе.
3. Запишите дату приготовления жидкости для деактивации на
этикетке буфера.
О. Для приготовления системной жидкости вылейте содержимое
одной бутыли консерванта системной жидкости PROCLEIX®
System в бутыль для системной жидкости.
1. Доведите раствор в бутыли для системной жидкости до линии
уровня жидкости водой, соответствующей критериям типа 1
Национального комитета по клиническим лабораторным
стандартам (NCCLS).
2. Прикрепите штрих-код от консерванта системной жидкости
PROCLEIX System к верхней части бутыли. Во время учета
запасов жидкостей этот штрих-код должен быть сосканирован
и сохранен в системе.
3. Запишите дату приготовления системной жидкости на
^ этикетке консерванта.
Р . В соответствии с указаниями в QRG по PROCLEIX TIGRIS
System загрузите жидкости в PROCLEIX TIGRIS System.
ЗАМЕЧАНИЯ ПО ПРОЦЕДУРЕ
Примечание. Для снижения риска получения недействительных
результатов, перед началом серии анализа внимательно прочтите
весь вкладыш PROCLEIX® ULTRIO® Assay. Этот вкладыш следует
использовать вместе с QRG по PROCLEIX® TIGRIS® System.
Процедуры технического обслуживания и информацию о работе
программного обеспечения см. в QRG по PROCLEIX TIGRIS System.
A. ПОДГОТОВКА ОБОРУДОВАНИЯ
См. QRG по PROCLEIX TIGRIS System.
B. РАЗМЕР СЕРИИ
1. Тест-набор рассчитан на серию анализа в среднем из 55
тестов. При меньшем размере серии относительное число
полезных тестов будет меньше.
2. Кахздый рабочий список для анализа с помощью PROCLEIX®
ULTRIO® Assay, может содержать до 500 тестов.
С.
2.
3. При проведении избирательных тестов размер серии
ограничен количеством реагентов-зондов. Максимальный
размер серии составляет 100 тестов.
КОНФИГУРАЦИЯ СЕРИИ
1. Каждый рабочий список должен начинаться с набора
калибраторов и заканчиваться набором контрольных проб
PROCLEIX® TIGRIS®.
Набор калибраторов для теста PROCLEIX ULTRIO Assay
включает по одному флакону отрицательного калибратора и
калибраторов, положительных по HIV-1, HCV и HBV. Набор
контрольных проб PROCLEIX TIGRIS включает по одному
флакону отрицательного контроля PROCLEIX® ULTRIO®
TIGRIS®, положительного по HIV-1 контроля PROCLEIX®
ULTRIO® TIGRIS®, положительного по HCV контроля
PROCLEIX® ULTRIO® TIGRIS® и положительного по HBV
контроля PROCLEIX® ULTRIO® TIGRIS®.
Набор калибраторов для избирательных тестов включает по
одному флакону отрицательного калибратора и
соответствующего положительного калибратора. Набор
контрольных проб PROCLEIX TIGRIS включает по одному
флакону отрицательного контроля PROCLEIX TIGRIS и
соответствующего положительного контроля (т е.
положительного по HIV-1 контроля PROCLEIX ULTRIO TIGRIS,
положительного по HCV контроля PROCLEIX ULTRIO TIGRIS,
или положительного по HBV контроля PROCLEIX ULTRIO
TIGRIS).
Контролированная группа - это группа проб в рабочем списке,
ограниченная контрольными пробами PROCLEIX TIGRIS.
Результаты исследования контролированной фуппы зависят
от соответствия каждой контрольной пробы критериям
действительности (подробно см. в разделе «Критерии
действительности серии»). По умолчанию размер
контролированной фуппы составляет 172 пробы, однако
программное обеспечение системы PROCLEIX TIGRIS System
software позволяет настраивать этот параметр. В начале
первой контролированной фуппе рабочего списка
контрольные пробы PROCLEIX TIGRIS ставить
необязательно.
4.
5. Максимальный размер серии анализа для каждого из трех
избирательных тестов составляет 100 проб, т . е. меньше, чем
размер контролированной фуппы по умолчанию. Таким
образом, если размер контролированной фуппы меньше 100,
набор контрольных проб требуется включить только в конце
каждого рабочего списка избирательного анализа, вне
зависимости от размера этого списка.
6. Для определения позиции штатива и пробирки, в которые
нужно установить калибраторы и контрольные пробы можно
использовать печатный от^ет по рабочему списку. Указания по
просмотру и печати отчета по рабочему списку см. в QRG по
PROCLEIX TIGRIS System.
7. Система автоматически считывает и проверяет правильность
установки калибраторов и контрольных проб PROCLEIX
TIGRIS. PROCLEIX TIGRIS System не допускает выполнения
анализа, при неправильной установке калибраторов или
контрольных проб PROCLEIX TIGRIS, а также, если на них
отсутствует либо не может быть прочитан штрих-код.
ПРОЦЕСС ВЫПОЛНЕНИЯ РАБОТ
24 500690RU Ред. В
--- стр. 26 ---
C r .
1. Подготовка реагентов должна выполняться в чистой зоне
(свободной от матричных нуклеиновых кислот и апликонов).
2. Зона зафузки проб должна быть чистой от ампликонов.
E. ПАРАМЕТРЫ СРЕДЫ
В помещении, где работает PROCLEIX® TIGRIS® System
(включая RPI) должна поддерживаться температура от 15 °С до
25 °С и влажность воздуха 20-85%.
F . ДЕКОНТАМИНАЦИЯ
1. В связи с чрезвычайно высокой точностью теста должны быть
приняты все меры для предотвращения контаминации.
Ежедневно протирайте столы 0,5% водным раствором
гипохлорита натрия (разведенной хлорной известью). После
не менее чем 15-минутной экспозиции раствор хлорной
извести следует смыть водой. Растворы, содержащие хлор,
могут разъедать металл. Во избежание коррозии тщательно
смывайте раствор хлорной извести с поверхностей
оборудования.
2. Аналоги хлорной извести можно использовать только для
обработки зон подготовки проб и в инкубаторе для подготовки
реагентов. Не используйте аналоги хлорной извести для
обработки PROCLEIX TIGRIS System.
I 3. Система PROCLEIX TIGRIS System деконтаминируется
автоматически путем добавления жидкости для деактивации в
МТи перед их утилизацией.
4. Следуйте инструкциям в QRG по PROCLEIX TIGRIS System по
деконтаминации и техническому обслуживанию аппарата.
G. ВОДА, СООТВЕТСТВУЮЩАЯ КРИТЕРИЯМ ТИПА 1
НАЦИОНАЛЬНОГО КО М И ТЕТА ПО КЛИНИЧЕСКИМ
ЛАБОРАТОРНЫМ СТАНДАРТАМ (NCCLS)
Требуется вода, соо тве тствую щ ая критериям типа 1
Национального комитета по клиническим лабораторным
стандартам (NCCLS). Колебания до 100 кое/мл отрицательно не
влияют на результаты анализа. См. инструкции производителя
относительно технического обслуживания водяной системы.
ПРОЦЕДУРА АНАЛИЗА
Следует использовать калибраторы и реагенты с избирательными
зондами PROCLEIX® ULTRIO® Assay из одной и той же основной
партии PROCLEIX® ULTRIO® и избирательных анализов. Оператор
должен убедиться, что номер основной партии калибраторов и
реагентов с избирательными зондами PROCLEIX ULTRIO Assay
соответствует номеру основной партии реагентов набора, указанному
листке используемой партии реагентов PROCLEIX ULTRIO Assay.
О бразцы от д о н оро в тканей и ор га но в, вклю чая трупн ы й
м а тери а л, д о л ж н ы и с с л е д о в а т ь с я т о л ь к о по м е то д и ке
обследования индивидуальны х доноров. Для исследования
трупной (без сердцебиения) крови можно брать растворенные и
нерастворенны е об р а зц ы , как указан о в разделах СБОР,
ХРАНЕНИЕ И ОБРАБОТКА ОБРАЗЦОВ, образцы трупной крови.
Указания по подготовке оборудования и штативов и выполнению
анализа см. в ORG по PROCLEIX® TIGRIS® System.
ПРОЦЕДУРЫ КОНТРОЛЯ КАЧЕСТВА
I. КРИТЕРИИ СООТВЕТСТВИЯ ТЕСТОВ PROCLEIX®
ULTRIO® ASSAY И ИЗБИРАТЕЛЬНЫХ ТЕСТОВ PROCLEIX®
HIV-1, HCVH HBV
П О Л Ь З О В А Т Е Л И P R O C L E IX ® T IG R IS ® S Y S T E M
Критерии действительности серии
А. Если серия (рабочий список) или контролированная фуппа
зарегистрирована программой как недействительная, действуйте
согласно схеме ниже:
В. В контексте системы PROCLEIX® TIGRIS® System термин
«Suspect» (Сомнительный) относится к не давшим реакции
пробам, которы е не являю тся недействительны м и
автоматически, однако подлежат дальнейшей оценке в
соответствии с критериям и в данном разделе. При
определенных условиях, изложенных в разделе D, эти пробы
могут быть расценены как действительные, не давшие
положительной реакции.
Действительная серия должна содержать минимальное число
действительных калибраторов, отвечающих следующим
критериям соответствия:
1. В серии анализа PROCLEIX® ULTRIO® Assay
действительными должны быть не менее семи из девяти
калибраторов. Действительными должны также быть не менее
двух из трех дублирующих отрицательных калибраторов и не
менее пяти из шести дублирующих положительных
калибраторов.
2. В серии избирательного анализа PROCLEIX® на HIV-1, HCV
или HBV действительными должны быть не менее двух из
трех дублирующих отрицательных калибраторов и не менее
двух из трех дублирующих положительных калибраторов.
3. PROCLEIX® TIGRIS® System software автоматически
проверяеткритерии соответствия для калибраторов. Если
число действительных калибраторов меньше минимально
допустимого, PROCLEIX TIGRIS System software
автоматически регистрирует серию как недействительную.
4. Для действительных серий автоматически рассчитываются
значения порогов для внутреннего контроля (быстрогаснущий
сигнал) и определяемой последовательности
(медленногаснущий сигнал).
5. Сигнал внутреннего контроля ниже порога не делает результат
по пробе или положительному калибратору
недействительным при положительной реакции на
определяемую последовательность (медленногаснущий
сигнал).
25 500690RU Ред. В
--- стр. 27 ---
П О Л Ь З О В А Т Е Л И P R O C L E IX ® T IG R IS ® S Y S T E M
D. Интерпретация результатов проводится в соответствии с
разделением на контролированные группы, как показано ниже.
1. Результаты анализа пробы включаются в отчет, только если
вся контролированная фуппы действительна.
Контролированная фуппа считается действительной, если
действительны наборы контрольных проб PROCLEIX®
TIGRIS® в начале и в конце фуппы (за исключением первой
группы, в которой контрольные пробы PROCLEIX TIGRIS
имеются только в конце). Набор контрольных проб
действителен, если действительны все входящие в него
пробы.
Контрольная проба PROCLEIX TIGRIS может быть объявлена
недействительной по одной из двух причин (определения см. в
QRG по PROCLEIX TIGRIS System):
a. Ошибки аппарата
b. Ошибки обработки результатов
В обоих случаях не давшие положительной реакции пробы
до и после набора контрольных проб PROCLEIX TIGRIS
будут отмечены PROCLEIX TIGRIS System software как
сомнительные (Suspect). Недействительные пробы будут
отмечены как «Недействительные» (Invalid), а давшие
реакцию - как «Есть реакция» (R eactive). Указания
приведены в схеме ниже:
3.
5.
Если контрольные пробы PROCLEIX TIGRIS недействительны
по причине аппаратной ошибки, результаты по всем
сомнительным пробам следует считать действительными с
отрицательной реакцией, при условии, что следующий набор
контрольных проб действителен. Если в следующих
контрольных фуппах нет действительных контрольных проб,
все сомнительные пробы должны считаться
недействительными и подлежат повторному исследованию с
тем же тест-набором.
Если контрольные пробы PROCLEIX TIGRIS недействительны
по причине ошибки обработки результатов, все сомнительные
пробы должны считаться недействительными и подлежат
повторному исследованию с тем же тест-набором.
Контроль правильности обработки результатов анализа
осуществляется PROCLEIX TIGRIS System software
автоматически.
E. Рабочий С Л И С О К или отдельная проба могут быть объявлены
недействительны м и оператором , если обнаруж ены и
задокументированы определенные проблемы, связанные с
техническими вопросами, оператором либо аппаратом.
F. Если недействительны более 10% образцов в контролированной
группе PROCLEIX ULTRIO Assay, состоящей из более чем 50
образцов, пробы, давшие реакцию, будут отмечены как «Есть
реакция» (Reactive), не давшие реакцию - как «Сомнительные»
(Suspect) а недействительные - как «Недействительные»
(Invalid). Если рабочий список PROCLEIX ULTRIO Assay состоит
из более чем 50 образцов, и разделение на контролированные
группы отсутствует, критерий 10% недействительных результатов
рассчитывается для всего рабочего списка.
1. Если оператор отметил отдельные пробы как
недействительные вне PROCLEIX TIGRIS System softvwire
10%, доля недействительных проб должна быть рассчитана
вручную.
2. Все сомнительные образцы в рабочем списке подлежат
повторному исследованию. Давшие положительную реакцию
образцы обозначаются как «Есть реакция» (Reactive) и
должны исследоваться с помощью избирательных тестов на
HIV-1,H C Vh HBV.
3. Если размер рабочего списка или контролированной фуппы
составляет 50 или меньше проб, PROCLEIX TIGRIS System
software не применяет критерий 10% недействительных проб
автоматически. Поэтому оператор должен провести
дополнительную интерпретацию данных. Если более 10%
проб являются недействительными в связи с повторением
одной и той же аппаратной ошибки (т. е. отмечаются одним и
тем же флажком ошибки), контролированная фуппа должна
считаться недействительной. Для получения дополнительной
помощи обратитесь в службу технической поддержки Chiron.
II. КРИТЕРИИ СООТВЕТСТВИЯ ДЛЯ КАЛИБРОВКИ И
РАСЧЕТА ПОРОГА
А. PROCLEIX® ULTRIO® Assay
Критерии соответствия отрицательного калибратора
Анализ отрицательного калибратора (Negative Calibrator, NC)
проводится трехкратно. В каждом отрицательном калибраторе сигнал
внутреннего контроля (Internal Control, 1C ) должен иметь значение не
меньш е 75000 RLU и не больш е 375000 RLU. В каждом
отрицательном кал иб р атор е сигнал определяемой
последовательности должен иметь значение не меньше О RLU и не
больше 45000 RLU. Если один из отрицательных калибраторов
недействителен в связи с выходом значения сигнала 1 C либо
определяемой последовательности за указанные пределы, средний
сигнал отрицательных калибраторов (NCx) будет рассчитан, исходя
из двух приемлемых значений. Серия считается недействительной и
долж на быть исследована повторно, если сигнал 1C или
определяемой последовательности в двух и более из трех
отрицательных калибраторов находится вне указанных пределов.
Определение среднего сигнала отрицательных калибраторов (NCx)
по внутреннему контролю [NCx (Внутренний контроль)].
Пример:
Отрицательный калибратор RLU внутреннего контроля
1 124000
2 126000
3 125000
Сумма RLU внутреннего
контроля = 375000
NCx (Внутренний
контроль) = Сумма RLU внутреннего контроля ^ 125000
3
26 500690RU Ред. В
--- стр. 34 ---
П О Л Ь З О В А Т Е Л И P R O C L E IX ® T IG R IS ® S Y S T E M
Контрольный критерий
Отрицательный контроль
Определяемая
последовательность
S/CO определяемой
последовательности
Внутренний контроль
S/CO внутреннего контроля
2 0 и ^ 150000 RLU
<1,00
2 : 75000 и S 375000 RLU
2 1,00
Контроль по HCV
Определяемая
последовательность
S/CO определяемой
последовательности
_______Внутренний контроль
2 45000 и S 2700000 RLU
2 1,00 и <40,00
S 475000 RLU
К о н т р о л ь н ы е к р и т е р и и д л я к о н т р о л ь н ы х о б р а з ц о в
избирательного теста PROCLEIX® TIGRIS® на HBV
При анализе с помощ ью избирательного теста на HBV
действительная отрицательная контрольная проба PROCLEIX
^ULTRIO TIGRIS и действительная контрольная проба PROCLEIX
ULTRIO TIGRIS по HBV должна находиться в начале и в конце
контролированной группы, чтобы результаты анализа образцов
группы считались действительными. Другие контрольные пробы не
требуются. Отрицательный контроль принимается при S/CO меньше
1,00 (нет реакции). Контрольная проба по HBV принимается при S/
СО не меньше 1,00 (есть реакция).
Контрольный критерий
Отрицательный контроль
Определяемая
последовательность 2 0 и S 150000 RLU
S/CO определяемой
последовательности <1,00
Внутренний контроль 2 75000 и S 375000 RLU
S/CO внутреннего контроля 2 1,00
Контроль по HBV
Определяемая
последовательность 2 45000 и S 1800000 RLU
S/CO определяемой
последовательности 2 1,00 и < 40,00
Внутренний контроль S 475000 RLU
проба будет обозначена как Нет реакции (Non-reactlve). Если сигнал
определяемой последовательности больше или равен порогу сигнала
определяемой последовательности, (т. е. S/CO определяемой
последовательности г 1,00), будет зафиксирован результат анализа
пробы Есть реакция (R eactive). Если сигнал определяемой
последовательности меньше порога сигнала определяемой
последовательности (т е. 8/СО определяемой последовательности
< 1,00), а сигнал внутреннего контроля меньше порога сигнала
внутреннего кон тр ол я, будет зарегистрирован результат
Н е д е й с т в и те л ь н ы й (In v a lid ) по внутреннему контролю и
Недействительный (Invalid) по пробе. Сигнал внутреннего контроля
для всех проб не должен превыш ать 650000 RLU. Проба
автоматически будет объявлена Недействительной (Invalid).
При исследовании неразведенны х образцов трупной (без
сердцебиения) крови причиной получения недействительного
результата может стать наличие в пробе ингибиторных веществ. В
таком случае можно развести пробу в соответствии с разделом
СБОР, ХРАНЕНИЕ И ОБРАБОТКА ОБРАЗЦОВ, образцы трупной
крови и повторить анализ только этой пробы.
Р езю ме интерпретации результатов исследования проб:
Интерпретация
пробы
Критерий
Нет реакции S/CO определяемой
последовательности < 1,00
И
1 C 2 Порог 1 C
И
1 C 5 650000 RLU
Есть реакция S/CO определяемой
последовательности 2 1,00
И
1 C S 650000 RLU
Недействительный 1 C > 650000 RLU
И л и
S/CO определяемой
последовательности < 1,00
И
1 C < Порог 1 C
ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
Все описанны е выше расчеты вы полняю тся програм м ны м
обеспечением PROCLEIX® TIGRIS® System software. Для каждого
теста определяются два пороговых значения: для сигнала
определяемой последовательности (медленногаснущий сигнал), т . е.
порог сигнала определяемой последовательности, и для сигнала
внутреннего контроля (быстрогаснущий сигнал), т е. порог сигнала
внутреннего контроля. Методика расчета этих пороговых значений
показана выше. Для каждой пробы определяются значения сигнала
определяемой последовательности и внутреннего контроля в RLU.
Отношение сигнала определяемой последовательности к порогу
сигнала определяемой последовательности в RLU указывается в
отчете как отношение сигнала определяемой последовательности к
порогу (Signal/Cutoff, S/CO).
Если сигнал определяемой последовательности в пробе меньше
порога (т е. S/CO определяемой последовательности < 1,00), чтобы
результат считался действительным, сигнал внутреннего контроля
(Internal Control, 1C ) должен быть больше или равен порогу сигнала
внутреннего контроля (1C Cutoff). В таком случае по внутреннему
контролю будет зафиксирован Действительный (Valid) результат, а
33 500690RU Ред. В
--- стр. 35 ---
О Б Щ А Я И Н Ф О Р М А Ц И Я
► О Б Щ А Я И Н Ф О Р М А Ц И Я
РАБОЧИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
СПЕЦИФИЧНОСТЬ
PROCLEIX® System - специф ичность теста PROCLEIX® ULTRIO® и избирательны х тестов при исследовании
нормальной крови доноров
Исследованию с помощью теста PROCLEIX® ULTRIO® Assay (ULTRIO) и трех избирательных тестов PROCLEIX® (dHIV-1, dHCV
и dHBV) были подвергнуты 2947 образцов замороженной нормальной донорской плазмы, которые ранее были проверены с
помощью лицензированных серологических тестов на антитела anti-HIV, antl-HCV и HBsAg. Одна проба дала положительную
реакцию на HCV после повторного исследования и количественного анализа NAT. Эта проба была исключена из расчетов.
Общее число сбоев по внутреннему контролю (Internal Control, 1C ) при первоначальном исследовании составило 18 из 2946
(0,61%). Во всех случаях при повторном тестировании этих 1 C проб были получены действительные результаты. Это означает,
что ни в одной пробе не наблюдалось угнетение реакции амплификации. Первоначально положительная реакция была
получена при исследовании 0,24% (7 из 2946) образцов. Частота положительных реакций при первоначальном анализе с
помощью ULTRIO Assay составила 0% (О из 736). Частота положительных реакций первоначального анализа с помощью dHIV-
1, dHCV и dHBV составила 0,14% (1 из 730), 0,54% (4 из 740) и 0,27% (2 из 740) соответственно. Общая специфичность после
первоначального исследования составила 99,76%. После повторного исследования специфичность теста составила 100%
(Таблица 1а).
Таблица 1а. PROCLEIX® System - специфичность теста PROCLEIX® ULTRIO® и избирательных тестов при
исследовании нормальной замороженной плазмы доноров крови*
Исследовано проб
Реакция при первоначальном
обследовании
Частота положительных реакций при
первоначальном обследовании
Специфичность после первоначального
исследования
Скорректированная частота
положительных реакций
Специфичность после повторного
исследования
Общее среднее 3/СО отрицательных
проб по определяемой
последовательности
ULTRIO
736
0%
100%
0%
100%
0,08 ± 0,05
dHIV-1
730
0,14%
99,86%
0%*
100%
0,13 ±0,07
dHCV
740
0,54%
99,46%
0%*
100%
0,08 ±0,08
dHBV
740
0,27%
99,73%
0%*
100%
0,06 ± 0,08
•Для исследования были использованы реагенты из двух разных партий.
**Один из образцов дал положительную реакцию только при исследовании с помощью тестов ULTRIO и dHCV.
Положительная реакция на HCV в этой пробе была подтверждена при помощи количественного анализа на
нуклеиновую кислоту HCV. Проба была исключена из анализа.
•"После повторного анализа положительная реакция не была получена ни для одной из проб, которые дали
положительную реакцию при первоначальном исследовании.
PROCLEIX® TIGRIS® System - специфичность теста PROCLEIX® ULTRIO® и избирательных тестов при обследовании
нормальной донорской крови
Исследованию с помощью теста PROCLEIX® ULTRIO® Assay (ULTRIO) и трех избирательных тестов PROCLEIX® (dHIV-1, dHCV
и dHBV) были подвергнуты 6006 образцов замороженной нормальной донорской плазмы, которые ранее были проверены с
помощью лицензированных серологических тестов на антитела anti-HIV, anti-HCV и HBsAg и лицензированных тестов NAT на
HIV-1 и HCV. Общее число сбоев по внутреннему контролю (Internal Control, 1C ) при первоначальном исследовании составило
4 из 6006 (0,07%). Во всех случаях при повторном тестировании этих 1 C проб были получены действительные результаты. Это
означает, что ни в одной пробе не наблюдалось угнетение реакции амплификации. Первоначально положительная реакция
была получена при исследовании 0,17% (10 из 6006) образцов. Частота положительных реакций при первоначальном анализе
с помощью ULTRIO теста составила 0,40% (6 из 1500). Частота получения положительных результатов первоначального
анализа с помощью dHIV-1, dHCV и dHBV составила 0% (О из 1500), 0,27% (4 из 1500) и 0% (О из 1506) соответственно.
Общая специфичность после первоначального исследования составила 99,83%. После повторного исследования
специфичность теста составила 100%.
34 500690RU Ред. В
--- стр. 36 ---
О Б Щ А Я И Н Ф О Р М А Ц И Я
Таблица 1Ь. PROCLEIX® TIGRIS® System - специфичность теста PROCLEIX® ULTRIO® и избирательных тестов
при исследовании нормальной замороженной плазмы доноров крови*
ULTRIO dHIV-1 dHCV dHBV
Исследовано проб 1500 1500 1500 1506
Реакция при первоначальном
обследовании
Частота положительных реакций при
первоначальном обследовании 0,40% 0% 0,27% 0%
Специфичность после первоначального
исследования 99,60% 100% 99,73% 100%
Скорректированная частота
положительных реакций 0%* 0% 0%* 0%
Специфичность после повторного
исследования 100% 100% 100% 100%
Общее среднее 8/СО отрицательных
проб по определяемой
последовательности 0,05 ± 0,07 0,03 ± 0,05 0,04 ± 0,07 0,03 ± 0,05
*Для исследования были использованы реагенты из трех разных партий.
“ После повторного анализа положительная реакция не была получена ни для одной из проб, которые дали
положительную реакцию при первоначальном исследовании.
ИССЛЕДОВАНИЯ НЕСПЕЦИФИЧНОЙ РЕАКТИВНОСТИ
PROCLEIX® System - специфичность и чувствительность теста PROCLEIX® ULTRIO® и избирательных тестов при
наличии факторов донора и забора материала, осложняющих анализ
Перекрестная реактивность или влияние на результат посторонних веществ при исследовании с помощью ULTRIO теста и
соответствующих избирательных тестов гемолизированных, липидемических образцов и образцов, содержащих сывороточный
альбумин (до 6 г/дл), гемоглобин (до 500 мг/дл) и липиды (до 3000 мг/дл) обнаружена не была. При детекции на HIV-1 и HCV
не была обнаружена перекрестная реактивность или влияние на результат посторонних веществ, а при детекции на HBV не
была обнаружена перекрестная реактивность во время анализа естественной иктерической плазмы или плазмы, содержащей
билирубин в концентрации до 20 мг/дл. Однако высокий уровень билирубина (при его добавлении в пробу) обусловливает
некоторое снижение аналитической чувствительности определения HBV. Этот эффект не был обнаружен при концентрации
билирубина 2,5 мг/дл.
При исследовании образцов пациентов с аутоиммунными заболеваниями и заболеваниями печени, не являющихся следствием
инфекции HCV или HBV, перекрестная реактивность и влияние посторонних веществ на результат анализа не наблюдалось.
Было исследовано большое число образцов пациентов со следующими аутоимунными состояниями: ревматоидный артрит,
ревматоидный фактор, антинуклеарные антитела, рассеянный склероз, красная системная волчанка и множественная
миелома. Кроме того, исследовались образцы от лиц, вакцинированных от фиппа, от пациентов с повышенным уровнем 1дМ ,
IgG, ALT, а также от пациентов с алкогольным циррозом печени.
При исследовании плазмы, контаминированной бактериями, а также плазмы пациентов, инфицированных другими кровяными
агентами, случаи перекрестной реактивности и влияния посторонних веществ на результат анализа не наблюдались. Было
исследовано большое число образцов пациентов со следующими вирусными инфекциями: простой герпес 1 и 2 типа, ЦМВ,
вирус Эпштейна-Барра, вирус гепатита А, HTLV-I, HTLV-II, HIV-2, вирус гепатита G, краснухи и парвовирус В-19.
PROCLEIX® TIGRIS® System - специфичность и чувствительность теста PROCLEIX® ULTRIO® и избирательных тестов
при наличии факторов донора и забора образцов
Перекрестная реактивность или влияние на результат посторонних веществ при исследовании с помощью ULTRIO теста и
соответствующих избирательных тестов гемолизированных, липидемических образцов и образцов, содержащих сывороточный
альбумин (до 6 г/дл), гемоглобин (до 500 мг/дл) и липиды (до 3000 мг/дл) обнаружена не была. При детекции на HIV-1 и HCV
не была обнаружена перекрестная реактивность или влияние на результат посторонних веществ, а при детекции на HBV не
была обнаружена перекрестная реактивность во время анализа естественной иктерической плазмы или плазмы, содержащей
билирубин в концентрации до 20 мг/дл. Однако высокий уровень билирубина (при его добавлении в пробу) обусловливает
некоторое снижение аналитической чувствительности определения HBV. Этот эффект не был обнаружен при концентрации
билирубина 2,5 мг/дл.
При исследовании образцов пациентов с аутоиммунными заболеваниями и заболеваниями печени, не являющихся следствием
инфекции HCV или HBV, перекрестная реактивность и влияние посторонних веществ на результат анализа не наблюдалось.
Было исследовано большое число образцов пациентов со следующими аутоимунными состояниями: ревматоидный фактор,
антинуклеарные антитела, красная системная волчанка и множественная миелома. Кроме того, исследовались образцы от
лиц, вакцинированных от гриппа, от пациентов с повышенным уровнем 1дМ, IgG, ALT, а также от пациентов с алкогольным
циррозом печени.
При исследовании плазмы, контаминированной бактериями, а также плазмы пациентов, инфицированных другими кровяными
агентами, спучаи перекрестной реактивности и влияния посторонних веществ на результат анализа не наблюдались. Было
исследовано большое число образцов пациентов со следующими вирусными инфекциями: простой герпес 1 и 2 типа, ЦМВ,
вирус Эпштейна-Барра, вирус гепатита А, HTLV-I, HTLV-II, вирус гепатита G, краснухи и парвовирус В-19.
35 500690RU Ред. В
--- стр. 40 ---
О Б Щ А Я И Н Ф О Р М А Ц И Я
Таблица 4. PROCLEIX® System • определение RNA HCV в те сто в ы х образцах
сероконверсии HCV с помощью теста PROCLEIX® ULTRIO® и избирательного теста на
HCV
Идентификатор панели
Разница в сроке детекции в сравнении с реакцией на антитела к
HCV, дни
ULTRIO dHCV
Неразве-
денный
образец 1:8 1:16 Неразведенный образец
ВСР6211 44 44 44 44
ВСР6213 27 27 27 30
ВСР6216 0 0 0 0
ВСР 6222 23 23 23 23
ВСР 6225 33 33 33 39
ВСР 6227 52 34 34 52
ВСР 6228* 31 31 31 31
ВСР 9041 38 38 38 38
ВСР 9045* 46 46 46 46
ВСР 9047* 29 29 29 29
Медиана 32 32 32 34,5
‘ Получение положительной реакции при исследовании первого образца панели
сероконверсии с помощью теста ULTRIO в сравнении с Ortho HCV 3.0.
При исследовании неразведенных образцов с помощью теста ULTRIO удавалось обнаружить HBV-инфекцию в среднем на 18,5
дня раньше, чем с помощью тестов на HBsAg (Таблица 5). При исследовании образцов в разведении 1:8 и 1:16 с помощью
теста ULTRIO удавалось обнаружить инфекцию в среднем на 11,5 и 6,5 дня раньше, соответственно. При исследовании
неразведенных образцов с помощью теста dHBV удавалось обнаружить HBV-инфекцию в среднем на 17 дней раньше, чем с
помощью тестов на HBsAg. Сокращение окна сероконверсии при исследовании с помощью тест-наборов ULTRIO и dHBV, в
сравнении с тестом на антитела к HBV, было зафиксировано для 10 из 10 панелей.
Таблица 5. PROCLEIX'’’ System - определение DNA HBV в панелях сероконверсии
HBV с помощью теста PROCLEIX® ULTRIO'^ и избирательного теста на HBV
Идентификатор панели
Разница в сроке детекции в сравнении с реакцией на HBsAg,
дни
ULTRIO dHBV
Неразве
денный
образец 1:8 1:16 Неразведенный образец
ВСР 6283 17 3 3 17
ВСР 6284 1 1 7 7 1 1
ВСР 6285* 10 3 3 12
ВСР 6291* 19 19 19 17
ВСР 6292* 23 1 1 0 23
ВСР 11006* 21 21 21 23
ВСР 11008* 22 12 8 19
ВСР 11014 18 16 0 16
ВСР 11015 29 29 27 29
ВСР 11017 15 6 6 15
Медиана 18,5 11.5 6,5 17
’ Получение положительной реакции при исследовании первого образца панели
сероконверсии с помощью теста ULTRIO в сравнении с Abbott Prism HBsAg.
39 500690RU Ред. В
--- стр. 41 ---
О Б Щ А Я И Н Ф О Р М А Ц И Я
АНАЛИТИЧЕСКАЯ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ
В качестве панелей для определения аналитической чувствительности теста использовали серийные разведения вируса HIV-1
типа В, и стандартов ВОЗ вирусов HIV-1 (97/656), HCV (96/790) и HBV (97/746). Панели вируса HIV-1 типа В приготовили путем
серийного разведения супернатанта тканевой культуры HIV-1 типа В, полученного от компании BBI Biotech Research
laboratories, Inc. (Гейтерсберг, Мэриленд). Для количественной оценки штамма вируса, использованного для приготовления
панели, использовали собственный количественный тест на HIV-1, откалиброванный по стандарту VQA Standard, Virology
Quality Assurance Laboratory, медицинский центр Rush-Presbyterian St. Luke's Medical Center, Rush University, Чикаго, Иллинойс.
Для каждого уровня концентрации вируса четырьмя операторами было проведено по 20 дублирующих тестов (в общей
сложности по 80 тестов) с использованием двух партий реагентов PROCLEIX® System. Аналогичные наборы панелей были
исследованы с помощью TIGRIS® System. Для каждого уровня концентрации вируса на четырех аппаратах было проведено по
30 дублирующих тестов (в общей сложности по 120 тестов) с использованием трех партий реагентов PROCLEIX® System.
Доверительные интервалы 95% для частоты получения положительной реакции были получены на основании точного
биноминального распределения. Приводится выполненный с помощью модели Probit расчет концентрации вируса, при которой
вероятность детекции составляет 50% и 95%.
PROCLEIX® System - детекция вируса HIV-1 типа В
Вирус HIV-1 типа В определялся при помощи тестов LILTRIO и dHIV-1 в 100% случаев при уровне 300 копий/мл и 100 копий/мл,
а также в > 97% случаев при уровне 30 копий/мл для обоих тестов. Частота получения положительной реакции при уровне 10
копий/мл составила 70% и 69% для тест-наборов ULTRIO и dHIV-1, соответственно. Частота детекции положительной реакции
при уровне 3 копии/мл составила 30% и 20% для тест-наборов LILTRIO и dHIV-1, соответственно. Между тестами имелись
расхождения, которые, однако, были статистически незначительными, на что указывают перекрывающиеся доверительные
интервалы (95%) (Таблица 6а).
Таблица 6а. PROCLEIX® System - детекция вируса HIV-1 типа В в панелях для исследования аналитической
чувствительности
ULTRIO dHIV-1
Число Число
прореаги прореаги
ровавших Доверительные ровавших Доверительные
HIV-1 в проб/ % интервал 95% Среднее проб/ % интервал 95% Среднее
копий/мл Исследова Положи Нижний Верхний S/CO %CV Исследова Положи Нижний Верхний S/CO %CV
но'' тельные но'' тельные
300 80/80 100 95 100 16,22 12 80/80 100 95 100 27,43 13
100 80/80 100 95 100 13,76 1 1 80/80 100 95 100 22,01 18
30 77/79* 97 91 100 10,40 33 79/80 99 93 100 16,29 37
10 55/79-' 70 58 79 7,81 40 55/80 69 57 79 12,84 50
3 24/80 30 20 41 5,99 57 16/79* 20 12 31 12,47 60
0 0/79* 0 0 4 0,12 65 0/80 0 0 4 0,13 80
^Недействительные результаты не включены.
40 500690RU Ред. В
--- стр. 42 ---
О Б Щ А Я И Н Ф О Р М А Ц И Я
Вирус HIV-1 типа В определялся при помощи тестов ULTRIO и dHIV-1 в 100% случаев при уровне 300 копий/мл и 100 копий/мл.
Частота получения положительной реакции при уровне 30 копий/мл составила 92% и 88% для тест-наборов ULTRIO и dHIV-1,
соответственно. Частота получения положительной реакции при уровне 10 копий/мл составила 60% и 57% для тест-наборов
ULTRIO и dHIV-1, соответственно. Частота детекции положительной реакции при уровне 3 копии/мл составила 18% и 26% для
тест-наборов ULTRIO и dHIV-1, соответственно. Между тестами имелись расхождения, которые, однако, были статистически
незначительными, на что указывают перекрывающиеся доверительные интервалы (95%) (Таблица 6Ь).
PRO CLEIX ® T IG R IS® System - детекция вируса H IV -1 типа В
Таблица 6Ь. PROCLEIX® TIGRIS® System - детекция вируса HIV-1 типа В в панелях для исследования аналитической
чувствительности
ULTRIO dHIV-1
Число Число
прореаги прореаги
ровавших Доверительные ровавших Доверительные
HIV-1 в проб/ % интервал 95% Среднее проб/ % интервал 95% Среднее
копий/мл Исследовано* Положи- Нижний Верхний S/CO %CV Исследовано* Положи- Нижний Верхний S/CO %CV
тельные тельные
300 119/119* 100 97 100 14,98 9 118/118* 100 97 100 22,77 5
100 118/118'' 100 97 100 12,52 15 120/120 100 97 100 19,00 18
30 108/118'' 92 85 96 8,42 44 104/118* 88 81 93 12,28 49
10 71/119* 60 50 69 6,82 54 68/120 57 47 66 9,62 58
3 21/120 18 1 1 26 4,11 79 31/118* 26 19 35 9,81 58
0 0/120 0 0 3 0,05 109 0/120 0 0 3 0,03 142
''Недействительные результаты не включены.
PROCLEIX® System - детекция стандарта ВОЗ вируса HIV-1 (97/656)"
Частота детекции HIV-1 стандарта ВОЗ с помощью тест-набора dHIV-1 составила 100% при уровнях 600, 200 и 60 МЕ/мл. При
уровне 20 МЕ/мл и 6 МЕ/мл частота детекции вируса составила 91% и 58%, соответственно (Таблица 7а).
Таблица 7а. PROCLEIX® System - детекция стандарта ВОЗ вируса HIV-1 в панелях для исследования
аналитической чувствительности
dHIV-1
HIV-1 ВОЗ (97/656)
Число
прореагировавших
проб/ % Доверительные интервал 95% Среднее
МЕ/мл Исследовано* Положи
тельные
Нижний Верхний S/CO %CV
600 80/80 100 95 100 29,44 18
200 80/80 100 95 100 24,13 17
60 79/79* 100 95 100 21,94 22
20 73/80 91 83 96 16,82 38
6 46/80 58 46 68 12,08 59
0 0/77* 0 0 4 0,11 92
''Недействительные результаты не включены.
В связи с вероятной перекрестной реактувностью данного стандарта с HBV,^® испытывали только тест-набор dHIV-1.
За более подробной информацией обращайтесь в Национальный институт биологических стандартов и контрольных
образцов (National Institute for Biological Standards and Control, NIBSC), Blanche Plane, South Mimms, Potters Bar,
Hertfordshire EN6 3QG, U.K (Великобритания). Enquiries@nibsc.ac.uk или http://www.nibsc.ac.uk. Телефон: 44 (0) 1707
641000. Факс: 44 (0) 1707 646854.
41 500690RU Ред. В
--- стр. 52 ---
О Б Щ А Я И Н Ф О Р М А Ц И Я
Для количественного определения DNA HBV в образцах с HBV генотипов А, В, С, D. Е, F и G была использована
коммерческая система количественного определения DNA HBV. Образцы разводили отрицательной человеческой плазмой до
концентрации вируса 300, 100 и 30 копий/мл. Разведенные образцы подвергали исследованию с помощью тестов ULTRIO и
dHBV, Всего было исследовано 57 уникальных образцов, анализ проводили с помощью PROCLEIX® TIGRIS® System с
применением реагентов из трех партий. При исследовании с помощью тестов ULTRIO и dHBV с реагентами всех трех партий
для образцов всех генотипов вируса HBV с концентрацией 300 копий/мл получена положительная реакция. При концентрации
вирусов 100 копий/мл получена положительная реакция для 55 из 57 образцов с регентами CL1, 52 из 57 и 57 из 57 с
реактивами CL2 и 56 из 57 с реактивами CL3 в обоих тестах. При концентрации вирусов 30 копий/мл получена положительная
реакция для 42 из 57 образцов в тесте ULTRIO и для 43 из 57 образцов в тесте dHBV с реагентами CL1, 41 из 57 в тесте
ULTRIO и 50 из 57 в тесте dHBV с реагентами CL2, и 51 из 57 в тестах ULTRIO и dHBV с реагентами CL3 (Таблица 13Ь).
PRO CLEIX® TIG RIS® System - детекция генетических вариантов HBV с помощью теста PROCLEIX® U L T R IO ® и
избирательного
теста на H BV
Таблица 13Ь. PROCLEIX® TIGRIS® System
ULTRIO® и избирательного теста на HBV
- детекция генетических вариантов HBV с помощью теста PROCLEIX*
CL1 CL2 CL3
Генетический
вариант
Конц.
колий/мл ULTRIO dHBV ULTRIO dHBV ULTRIO dHBV
300 12/12 12/12 12/12 12/12 12/12 12/12
HBV 100 11/12 12/12 11/12 12/12 12/12 12/12
Генотип А 30 9/12 9/12 9/12 10/12 11/12 11/12
300 10/10 10/10 10/10 10/10 10/10 10/10
HBV 100 10/10 10/10 9/10 10/10 10/10 10/10
Генотип В 30 6/10 8/10 4/10 10/10 8/10 9/10
300 10/10 10/10 10/10 10/10 10/10 10/10
HBV 100 10/10 10/10 9/10 10/10 10/10 9/10
Генотип С 30 8/10 7/10 7/10 8/10 8/10 8/10
300 8/8 8/8 8/8 8/8 8/8 8/8
HBV 100 7/8 8/8 7/8 8/8 8/8 8/8
Генотип D 30 7/8 5/8 5/8 7/8 7/8 7/8
300 8/8 8/8 8/8 8/8 8/8 8/8
HBV 100 8/8 7/8 7/8 8/8 8/8 8/8
Генотип Е 30 5/8 5/8 4/8 6/8 8/8 7/8
300 8/8 8/8 8/8 8/8 8/8 8/8
HBV 100 8/8 7/8 8/8 8/8 7/8 8/8
Генотип F 30 6/8 8/8 7/8 8/8 8/8 8/8
300 1/1 1/1 1/1 1/1 1/1 1/1
HBV 100 1/1 1/1 1/1 1/1 1/1 1/1
Генотип G 30 1/1 1/1 1/1 1/1 1/1 1/1
300 57/57 57/57 57/57 57/57 57/57 57/57
Сумма вариантов
HBV
100 55/57 55/57 52/57 57/57 56/57 56/57
30 42/57 43/57 41/57 50/57 51/57 51/57
51 500690RU Ред. В
--- стр. 53 ---
О Б Щ А Я И Н Ф О Р М А Ц И Я
РАБОЧИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ PROCLEIX® ULTRIO® A SSAY ПРИ ИССЛЕДОВАНИИ ОБРАЗЦОВ ТРУПНОЙ
КРОВИ, в з я т о й ОТ ДОНОРОВ ТКАНЕЙ
Примечание. Все исследования рабочих характеристик тест-набора проводили на неразведенной трупной сыворотке, если не
указано другого.
СПЕЦИФИЧНОСТЬ
Специфичность теста PROCLEIX® ULTRIO® Assay и избирательных тестов при исследовании трупной крови с
помощью систем PROCLEIX® System и PROCLEIX® TIGRIS® System
Для определения специфичности тест-наборов PROCLEIX® ULTRIO® Assay и dHIV-1, dHCV и dHBV исследовали
серонегативные по HIV-1, HCV и HBV образцы трупной крови. Около 50 образцов трупной крови и 50 образцов нормальной
донорской крови исследовали с помощью PROCLEIX® System и PROCLEIX® TIGRIS® System с применением трех партий
реагентов. Специфичность теста PROCLEIX ULTRIO теста и тестов dHlV-l и dHBV, проводимых в системах PROCLEIX System
и PROCLEIX TIGRIS System при исследовании трупных образцов крови составила 100% (доверительный интервал 95%: 94%-
100%). Специфичность теста dHCV при исследовании трупных образцов составила 98% (доверительный интервал 95%: 89%-
100%) (Таблицы 14а и 14Ь.)
Таблица 14а. PROCLEIX* System - специф ичность теста PROCLEIX® ULTRIO®
Assay и избирательных тестов при исследовании образцов трупной крови
Контрольные
образцы
Трупные
образцы
PROCLEIX® ULTRIO®
Assay
Среднее S/CO 1 C 1,94 1,89
Среднее S/CO
определяемой
последовательности
0,05 0,09
Специфичность (%) 100 100
95% Cl специфичности 94-100 94-100
N 50 47*
dHIV-1
Среднее S/CO 1 C 2,00 1,99
Среднее S/CO
определяемой
последовательности
0,14 0,11
Специфичность (%) 100 100
95% С 1 специфичности 94-100 94-100
N 50 50
dHCV
Среднее S/CO 1 C 2,07 1,98
Среднее S/CO
определяемой
последовательности
0,14 0,21
Специфичность (%) 100 98**
95% С 1 специфичности 94-100 89-100
N 50 49
dHBV
Среднее S/CO 1 C 2,01 2,02
Среднее S/CO
определяемой
последовательности
0,11 0,10
Специфичность (%) 100 100
95% С 1 специфичности 94-100 94-100
N 50 49***
*2 из 47 проб исследовали в разведении 1:4
**1 проба первоначально дала положительную реакцию, однако вследствие
недостаточного количества материала разрешить вопрос окончательно не удалось
***4 из 49 проб исследовали в разведении 1:4
N = число проб
С 1 = доверительный интервал
52 500690RU Ред. В
--- стр. 54 ---
О Б Щ А Я И Н Ф О Р М А Ц И Я
Таблица 14Ь. PROCLEIX® TIGRIS® System - специфичность теста PROCLEIX®
ULTRIO Assay и избирательных тестов при исследовании образцов трупной
крови
PROCLEIX® ULTRIO®
Assay
dHIV-1
dHCV
dHBV
Среднее S/CO 1 C
Среднее S/CO
определяемой
последовательности
Специфичность (%)
95% Cl специфичности
N
Среднее S/CO 1 C
Среднее S/CO
определяемой
последовательности
Специфичность (%)
95% С 1 специфичности
N
Среднее S/CO 1 C
Среднее S/CO
определяемой
последовательности
Специфичность (%)
95% С! специфичности
N
Среднее S/CO 1 C
Среднее S/CO
определяемой
последовательности
Специфичность (%)
95% С! специфичности
N
Контрольные
образцы
2,05
0.05
100
94-100
50
2,04
0,03
100
94-100
50
2,02
0,03
100
94-100
50
2,02
0,03
100
94-100
50
Трупные
образцы
2,07
0,07
100
94-100
48
2,04
0,03
100
94-100
49*
2,03
0,10
98“
89-100
49
2,02
0,02
100
94-100
50
*2 из 49 проб исследовали в разведении 1:4
**1 проба первоначально дала положительную реакцию, однако вследствие
недостаточного количества материала разрешить вопрос окончательно не удалось
N = число проб
С! = доверительный интервал
ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ
Чувствительность детекции HIV-1 в системах PROCLEIX® System и PROCLEIX® TIGRIS® System
Для определения чувствительности тест-наборов PROCLEIX® ULTRIO® Assay и dHIV-1 исследовали серонегативные по HIV-1,
HCV и HBV образцы трупной крови, в которые были добавлены низкие количества вируса HIV-1. Около 50 образцов трупной
крови и 50 образцов нормальной донорской крови, в которые предварительно добавили приблизительно 200 копий/мл вируса
HIV-1, исследовали с помощью PROCLEIX® System и PROCLEIX® TIGRIS® System с применением трех партий реагентов.
Частота положительных реакций тестов PROCLEIX ULTRIO теста и dHIV-1, проводимых в системах PROCLEIX System и
PROCLEIX TIGRIS System при исследовании трупных образцов крови составила 100% (доверительный интервал 95%: 94%-
100%) (Таблицы 15а и 15Ь).
53 500690RU Ред. В
--- стр. 57 ---
О Б Щ А Я И Н Ф О Р М А Ц И Я
Чувствительность детекции HBV в системах PROCLEIX® System и PROCLEIX® TIGRIS® System
Для определения чувствительности тест-наборов PROCLEIX® ULTRIO® Assay и dHBV исследовали серонегативные по HIV-1,
HCV и HBV образцы трупной крови, в которые были добавлены низкие количества вируса HBV. 50 образцов трупной крови и
50 образцов нормальной донорской крови, в которые предварительно добавили приблизительно 30 МЕ/мл вируса HBV,
исследовали с помощью PROCLEIX® System и PROCLEIX® TIGRIS® System с применением трех партий реагентов. Частота
положительных реакций при исследовании трупных образцов крови с помощью тест-набора PROCLEIX ULTRIO Assay
составила 100% (доверительный интервал 95%: 94%-100%) в системе PROCLEIX System и 98% (доверительный интервал
95%: 90%-100%) в системе PROCLEIX TIGRIS System. Частота положительных реакций при исследовании с помощью тест-
набора dHBV составила 100% (доверительный интервал 95%: 94%-100%) в системе PROCLEIX System и 94% (доверительный
интервал 95%: 83%-99%) в системе PROCLEIX TIGRIS System (Таблицы 17а и 17Ь).
Таблица 17а. PROCLEIX® System - результаты теста PROCLEIX® ULTRIO® Assay и
избирательного теста на HBV при исследовании образцов трупной крови с
внесенным вирусом HBV
Контрольные
образцы
Трупные
образцы
PROCLEIX® ULTRIO® Assay
Среднее S/CO 1 C 1,71 1,49
Среднее S/CO
определяемой
последовательности
13,08 12,93
% Пол. 100 100
95% 01 (% пол.) 94-100 94-100
N 50 50*
dHBV
Среднее S/CO 1 C 1,86 1,57
Среднее S/CO
определяемой
последовательности
20,76 20,07
% Пол. 100 100**
95% С 1 (% пол.) 94-100 94-100
N 50 50
*1 из 50 проб исследовали в разведении 1:4
‘ •Показана частота положительных реакций при повторном тестировании
N = число проб
С 1 = доверительный интервал
Таблица 17Ь. PROCLEIX® TIGRIS® System - результаты теста PROCLEIX® ULTRIO®
Assay и избирательного теста на HBV при исследовании образцов трупной крови с
внесенным вирусом HBV
Контрольные
образцы
Трупные
образцы
PROCLEIX® ULTRIO® Assay
Среднее S/CO 1 C 1,97 1,97
Среднее S/CO
определяемой
последовательности
14,77 14,45
% Пол. 94 98*
95% Cl (% пол.) 83-99 90-100
N 50 50**
dHBV
Среднее S/CO 1 C 2,04 2,17
Среднее S/CO
определяемой
последовательности
22,85 23,52
% Пол. 98* 94
95% С 1 (% пол.) 90-100 83-99
N 50 50
’ Показана частота положительных реакций при повторном тестировании
**1 из 50 проб исследовали в разведении 1:4
N = число проб
С 1 = доверительный интервал
56 500690RU Ред. В
--- стр. 58 ---
О Б Щ А Я И Н Ф О Р М А Ц И Я
ВОСПРОИЗВОДИМОСТЬ
PROCLEIX® System - воспроизводимость
Тест-наборы ULTRIO, dHIV-1, dHCV и dHBV оценивали с системой PROCLEIX® System по следующим пяти факторам
отклонений: две разные лаборатории (в одном и том же учреждении), разные операторы, разные люминометры, разные серии
анализа, а также в пределах серии анализа. С помощью тест-наборов ULTRIO, dHIV-1, dHCV и dHBV исследовали панели, не
содержащие вирус, а также содержащие HIV-1 В в концентрации 100 копий/мл, HCV 1а в концентрации 100 копий/мл и HBV А
в концентрации 20 МЕ/мл. Анализ воспроизводимости результатов включал оценку отношений сигнал/порог (Signal/Cutoff, S/
СО) и стандартного отклонения (standard deviation, SD) отношений S/CO по каждому из пяти факторов отклонений. Для
положительных панелей анализировали среднее отношение S/CO определяемой последовательности, а для отрицательных
панелей - S/CO внутреннего контроля (Internal Control, 1C). Был определена доля каждого из пяти факторов в общем
отклонении результатов в процентах.
Общая воспроизводимость результатов тестов ULTRIO, dHIV-1, dHCV и dHBV составила 99,0%-100% для положительных проб
и 99,5%-100% для отрицательных проб. В наибольшей мере дисперсия результатов тестов ULTRIO, dHIV-1, dHCV и dHBV
обусловлена отклонениями результатов в разных сериях и в одной серии (случайные ошибки). Следует отметить, что хотя в
основном дисперсия результатов исследования являлась следствием этих факторов, %CV каждого из них не превышал 18%
для любой положительной мишени или 23% для отрицательных проб в каждом тесте. Таким образом, данные тесты
характеризуются устойчивой воспроизводимостью результатов, и наблюдаемые отклонения могут быть полностью отнесены на
счет случайных ошибок. Другие факторы отклонений, в частности, разные лаборатории, операторы и люминометры не имеют,
либо имеют минимальное влияние на рабочие характеристики тест-наборов (Таблица 18).
Таблица 18. PROCLEIX® System - воспроизводимость результатов тестов PROCLEIX® ULTRIO® Assay и избирательных
тестов HIV-1, HCV и HBV
PROCLEIX ULTRIO Assay Фактор отклонения
Панель Уровень п
% положительных Среднее
результатов S/CO*
Разные Разные
лаборатории операторы
Разные
люминометры Разные серии Одна серия
SD %CV SD %CV SD %CV SD %CV SD %CV
HIV-1 В 100 копий/мл 180 100 15,38 0,18 1,17 0 0 0,32 2,09 0,70 4,54 0,72 4,65
HCV1a 100 копий/мл 180 100 8,40 0 0 0,17 2,06 0,20 2,41 0,17 2,07 0,31 3,66
HBV А 20 МЕ/мл 175 100 16,15 0 0 0,38 2,34 0,09 0,53 1,35 8,35 2,28 14,08
Отрица
тельный 0 176 0,56 2,01 0 0 0 0 0 0 0,05 2,71 0,08 4,05
Избирательный анализ на HIV-1 Фактор отклонения
% положительных Среднее Разные Разные Разные
Панель Уровень п результатов S/CO* лаборатории операторы люминометры Разные серии Одна серия
SD %CV SD %CV SD %CV SD %CV SD %CV
HIV-1 В 100 копий/мл 179 100 26,09 0 0 0 0 0 0 3,57 13,67 4,68 17,93
Отрица
тельный 0 178 0 2,02 0 0 0 0 0 0 0,15 7,22 0,36 17,20
€ Избирательный анализ на HCV Фактор отклонения
% положительных Среднее Разные Разные Разные
Панель Уровень п результатов S/CO* лаборатории операторы люминометры Разные серии Одна серия
SD %CV SD %CV SD %CV SD %CV SD %CV
HCV1a 100 копий/мл 174 100 23,02 0 0 0 0 3,41 14,81 3,35 14,55 2,94 12,75
Отрица
тельный 0 176 0,56 2,10 0,16 7,57 0 0 0 0 0,30 14,37 0,48 22,60
Избирательный тест на HBV Фактор отклонения
% положительных Среднее Разные Разные Разные
Панель Уровень п результатов S/CO* лаборатории операторы люминометры Разные серии Одна серия
SD %CV SD %CV SD %CV SD %CV SD %CV
HBVA 20 МЕ/мл 178 99 22,54 0 0 1,11 4,92 1,34 5,95 2,07 9,19 2,74 12,17
Отрица
тельный 0 178 0 2,10 0,07 3,10 0,08 3,72 0,05 2,12 0,23 10,42 0,43 19,69
'Среднее S/CO определяемой последовательности для положительной панели и среднее S/CO 1 C для отрицательной панели.
57 500690RU Ред. В
--- стр. 59 ---
О Б Щ А Я И Н Ф О Р М А Ц И Я
1. Barre-Sinoussi, F., J. С. Chermann, F. Rey, М. Т. Nugeyre, S.
Chamaret, J. Gruest, С. Dauguet, С. Axlor-Blin, F . Vezinet-Brun, C.
Rouzluuz, W. Rozenbaum, and L. Montagnier. 1983. Isolation of a T-
lymphotropic retrovirus from a patient at risk for Acquired Immune
Deficiency Syndrome (AIDS). Science. 220:868-871.
2. PopovIc, М., M. G. Samgadharan, E. Read, and R. C. Gallo. 1984.
Detection, isolation, and continuous production of cytopathic
retroviruses (HTLV-III) from patients witti AIDS and pre-AIDS. Science.
224:497-500.
3. Gallo R. C., S. Z. Salahuddin, M. PopovIc, G. M. Strearer, M. Kaplan,
D. F . Haynas, T. J. Palker, R. Redfield, J. Oleske, B. Safai, G. White,
P . Foster, and P . D. Markham. 1984. Frequent detection and isolation
of cytopathic retrovimses (HTLV III) from patients with AIDS and at risk
for AIDS. Science. 224:500-503.
4 Plot P, F . A. Plummer, F . S. Mhalu, J -L Lamboray, J. Chin, and J. M.
Mann. 1988. AIDS: An international perspective. Science. 239:573-
579.
5. Samgadharan, J. G., M. PopovIc, L. Broch, J. Scupbach, and R. C.
Gallo. 1984. Antibodies reactive with human T-lymphotropic
retroviruses (HTLV-III) in the serum of patients v^h AIDS. Science.
224:506-508.
, 6. Gallo, D., J. S. KImpton, and P . J. Dailey. 1987. Comparative studies
' on use of fresh and frozen peripheral blood lymphocyte specimens for
isolation of human immunodeficiency virus and effects of cell lysis on
isolation efficiency. J Clin Microbiol. 25:1291-1294.
7. Clavel, F., D. Guetard, F . Brun-Vezinet, S. Chamaret, M. Rey, M. O.
Santos-Ferraira, A. G. I^urent, C. Dauguet, C. Katiama, C.
Rouzioux, D. Klatzmann, J. L. Champaiimaud, and L. Montagnier.
1986. Isolation of a new human retrovirus from West African patients
with AIDS. Science. 233:343-346.
8 Alter, H. J., R. H. Purcell, J. W. Shih, J. C. Melpoider, M. Houghton,
Q-L Choc, and G. Kuo. 1989. Detection of antibody to hepatitis С
virus in prospectively followed transfusion recipients wnth acute and
chronic non-A, non-B hepatitis. N Engl J Med. 321:1494-1500.
9. Esteban, J. I., A. Gonzalez, J. M. Hernandez, et al. 1990. Evaluation
of antibodies to hepatitis С virus in a study of transfusion-associated
hepatitis. N Engl J Med. 323:1107-1120.
10. Van der Poel, C. L., H. W. Reesink, P N. Leiie, A. Leentvaar-
Kuypers, Q-L. Choc, G. Kuo, and M. Houghton. 1989. Anti-hepatitis
С antibodies and non-A, non-B post-transfusion hepatitis in the
Netherlands. Lancet. 2:297-298.
11. Choo, Q-L., G. Kuo, A. J. Weiner, et ai. 1989. Isolation of a cDNA
clone derived from a blood-bome non-A, non-B viral hepatitis genome.
Science. 244:362-364.
>,12. Alter, H. J., P . V Holland, Ag. Morrow, et ai. 1975. Clinical and
f serological analysis of transfusion associated hepatitis. Lancet. 2:83&-
841.
13. Kuo, G., Q-L. Choo, H. J. Alter, et ai. 1989. An assay for circulating
antibodies to a major etiologic virus of human non-A, non-B hepatitis.
Science. 244:1494-1500.
14. Mimms, L. T, J. W. Mosley, F.B. Hoiiinger, et al. 1993. Effect of
concurrent acute infection with hepatitis С vims on acute hepatitis В
virus infection. Brit Med J. 307:1095-1097.
15. Kuhns, M. C., A. L. McNamara, B. Peterson, et aL 1998. Detection of
hepatitis В seroconversion by highly sensitive assays for surface
antigen and HBV DNA. [Abstract S-342] Transfusion. 38 (10-Suppi):
91s.
16. Ulrich, P . P., R. A. Bhat, B. Seto, et ai. 1989. Enzymatic amplification
of hepatitis В vims DNA in semm compared with infectivity testing in
chimpanzees. J Infect Dis. 160:37-43.
17. Peddada, L., C. Heidebrant, R. Smith, et ai. 2000. HBV viremia
preceding HBsAg positivity: implications for minipool (MR) and
individual donation (ID) HBV nucleic ackJ testing (NAT). Abstract
100608 (submitted). American Assn of Blood Banks, 53"* Annual
Meeting, Washington DC.
БИБЛИОГРАФИЯ 18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29.
30.
31.
32.
33.
34.
35.
36.
Rawai, B. D., S. H. Klelnman, M. C. Kuhns, M. P Busch. 1998
Infectious HBV window period and its projected reduction by genome
amplification testing. (Abstract S-343). Transfusion. 38 (10-Suppi): 91s.
Busch, M. P., S. L. Stramer, and S. H. Klelnman. 1997. Evolving
applications of nucleic acid amplification assays for prevention of vims
transmission by blood components and derivatives. In: Garrity G (ed):
Applications of Molecular Biology to Blood Transfusion Medicine.
AABB. Bethesda, MD. 123-176.
Busch, M. P, L. L. L. Lee, G. A. Satten, 0. R. Henrard, H.
Farzadegan, K. E. Nelson, S. Read, R. Y. Dodd, and L. R. Petersen.
1995. Time course of detection of viral and serologic mariners preceding
human immunodeficiency virus type 1 seroconversion: implications for
screening of blood and tissue donors. Transfusion. 35:91-97.
Schreiber, G. B., M. P Busch, S. H. Kieinman, and J. J. Koreiitz.
1996. For the Retrovims Epidemiology Study: The risk of transfusion-
transmitted viral infections. N Engl J Med. 334:1685-1690.
McDonough, S., C. Giachetti, Y. Yang, D. Koik, B. Blliyard, and L.
Mimms. 1998. High throughput assay for the simultaneous or separate
detection of human immunodeficiency vims (HIV-1) and hepatitis С
vims (HCV). Infusion Therapy and Transfusion Medicine. 25:164-169.
Kacian, D. L. and T. J. Fultz. 1995. Nucleic acid sequence
amplification methods. U. S. Patent 5, 399, 491.
Arnold, L. J., P W. Hammond, W. A. Wiese, and N. C. Nelson. 1989.
Assay formats involving acridinium-ester-labeled DNA probes. Clin
Chem. 35:1588-1594.
Nelson, N. C., A. BenCheikh, E. Matsuda, and M. Becker. 1996.
Simultaneous detection of multiple nucleic add targets in a
homogeneous fomiat. Biochem. 35:8429-8438.
Centers for Disease Control. 1987. Recommendations for prevention
of HIV transmission in health care settings. In United States Morbid, and
Mortal. Weekly Rep. 36, Supplement No. 2S.
National Committee for Clinical Laboratory Standards. 1986.
Clinical laboratory hazardous waste; proposed guidelines. NCCLS
Document GP5-P. Vlllanova, PA.
U.S. Environmental Protection Agency. EPA guide for infectious
waste management. Washington, DC: U.S. Environmental Protection
Agency, Publication No. EPA/530-SW-86-014,1986.
Title 42, Code of Federal Regulations, Part 72,1992.
29 CFR Part 1910.1030. Occupational Exposure to Bloodbome
Pathogens; Final Rule, Federal Register/Vol. 56, No. 235/ December 6,
1991.
Giachetti, C., J. Linnen, D. P Koik, J. Dockter, M. K. iMcCormick, M.
Ho-Slng-Loy, M. Park, K. Giiiotte-Tayior, L. Mimms and S. H.
McDonough. 2002. Highly Sensitive Multiplex Assay for Detection of
HIV-1 and HCV RNA. J. of Clin. Microbio., 40: 2408-2419.
Linnen, J., J. M. Gilker, A. Menez, A. Vaughn, A. Brouiik, J. Dockter,
K. Giiiotte-Tayior, D. P . Koik, L. T. Mimms, and C. Giachetti. 2002.
Sensitive detection of genetic variants of HIV-1 and HCV with an HIV-1/
HCV assay based on Transcription-Mediated Amplification. J. Virol.
Methods, 102:139-155.
Koik, D., J. Dockter, J. Linnen, M. Ho-Sing-Loy, K. Giiiotte-Tayior, S.
H. McDonough, L. Mimms and C. Giachetti. 2002. Significant Closure
of the HIV-1 and HCV Pre-seroconversion Detection Windows with a
TMA-driven HIV-1/HCV Assay J. of Clin. Microbio., 40:1761-1766.
Jackson J. B., Smith, K., Knott, C., Dorpela, A., Simmons, A.,
Piwowar-Manning E., McDonough, S., Mimms, L. and Vargo, J.M.
2002. Sensitivity of the Procleix HIV-1/HCV Assay for detection of HIV-1
and HCV RNA in a High Risk Population. J. of Clin. Microbio., 40:2387-
2391.
Vargo, J.M., Smith, K., Knott, C., Wang, S., Fang, C., McDonough,
S., Giachetti, C., Cagiioti, S., Gammon, R., Gilbert D., Jackson,
J.B., Richards, W., Stramer, S. Mimms, L. 2002. Clinical Specificity
and Sensitivity of a Blood Screening Assay for Detection of HIV-1 and
HCV RNA. Transftjsion, 42:876-885.
V. Shyamaia, J. Cottreli, P . Arcangei, D. Madriaga, J. Linnen, B.
Phelps, and D. Chien. 2004. Detection and Quantitation of HBV DNA
in the WHO Intemational Standard for HIV-1 RNA. 2004. J. Virol.
Methods, 118:69-72.
58 500690RU Ред. В
--- стр. 60 ---
О Б Щ А Я И Н Ф О Р М А Ц И Я
500690RU Ред. В / QCS 901409 Ред. В
2009-05
Производитель:
Gen-Probe Incorporated
10210 Genetic Center Drive
San Diego, CA 92121 США
(858) 410-8000
C €
0197
EC REP
MLT Research Ltd
Attn. Dr. Andrew Rutter
5 Chiltern Close
Cardiff
CF14 5DL
United Kingdom
Служба поддержки покупателей Chiron
Северная Америка
Электронная почта: BTUSCS@chiron.com
Европа, Ближний Восток, Африка, Южная Америка, Азиатско-
Тихоокеанский регион
Электронная почта: BTINTLCS@chiron.com
Служба технической поддержки Chiron
Северная Америка, Южная Америка
Телефон: (800) 452-6877
Факс: (800) 462-3938
Электронная почта: cts@chiron.com
Европа, Ближний Восток, Африка
Телефон: +33 1 55 49 00 36
или: +33 1 55 49 01 65
Факс: +33 1 55 49 01 69
Электронная почта: bthotiineeurope@chiron.com
Азиатско-Тихоокеанский регион
Телефон: +852 2161 3100
Факс: +852 2161 3199
Многоязычная маркировка; Только для экспорта из США
CHiRON, RiBA, PROCLEiX и ULTRiO являются торговыми марками
^компании Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc.; TIGRIS является
торговой маркой компании Gen-Probe Incorporated; PROCLIN
(стилизация) является торговой маркой Rohm and Haas Company;
PPT является торговой маркой Becton, Dicl(inson and Company.
Любые другие торговые марки, упоминающиеся в настоящем
вкладыше, принадлежат соответствующим компаниям.
Данное изделие и его назначение защищены одним или несколькими
следующими патентами:
Патенты США № 5,185,439, 5,283,174, 5,399,491, 5,437,990,
5,480,784, 5,585,481, 5,612,200, 5,639,604, 5,656,207, 5,656,744,
5,658,737. 5,696,251, 5,714,596, 5,756,011, 5,756,709, 5,780,219,
5,827,656, 5,840,873, 5,863,719, 5,888,779, 5,948,899, 5,955,261,
6,004,745, 6,074,816, 6,090,591, 6,110,678, 6,245,519, 6,252,059,
6,280,952, 6,410,276, RE37,891, 6,623,920, 6,649,749, 7,070,925 и
7,097,979; и их иностранными аналогами.
© 2003-2009 Gen-Probe Incorporated,
59 500690RU Ред. В
--- стр. 61 ---