Иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие к вирусу Крым-Конго геморрагической лихорадки "Вектор МАТ-ФИТЦ анти-КГЛ в ПИФ" по ТУ 21.10.60-038-05664012-2016 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 --- I Федеральное бюджетное учреждение науки «Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека «УТВЕРЖДАЮ» Г енеральный директор ФБУНтрИЦ ВБ «Вектор» *.А. Максютов IQIf'T. ИНСТРУКЦИЯ по применению иммуноглобулинов диагностических флуоресцирующих к вирусу Крым-Конго геморрагической лихорадки (КГЛ) «Вектор МАТ-ФИТЦ анти-КГЛ в ПИФ» --- стр. 2 --- 1. НАЗНАЧЕНИЕ 1.1. Полное название набора Иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие к вирусу Крым-Конго геморрагической лихорадки (КГЛ) «Вектор МАТ-ФИТЦ анти-КГЛ в ПИФ» по ТУ 21Л 0.60-038-05664012-2016, далее - иммуноглобулины флуоресцирующие. Иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие к вирусу Крым-Конго геморрагической лихорадки «Вектор МАТ-ФИТЦ анти-КГЛ в ПИФ» представляют собой очищенный гель-фильтрацией водный раствор моноклональных антител (МАТ) класса G мыши, специфично связывающихся с вирусом КГЛ, меченных ФИТЦ методом конъюгирования, с консервантом РгосИп 300 в конечной концентрации 0,25%. 1.2. Предназначение набора и его диагностическая роль Данный метод диагностики основан на реакции антиген-антитело. Суть метода заключается в специфической индикации вирусных антигенов непосредственно в клиническом материале, содержащем вирус КГЛ с помощью специфических антител, меченных флуоресцеин изотиоцианатом (ФИТЦ). Образующийся при этом комплекс антиген-антитело обнаруживается по характерной ярко-зеленой флуоресценции в сине фиолетовых лучах люминесцентного микроскопа. 1.3. Область применения набора Область применения иммуноглобулинов диагностических флуоресцирующих к вирусу Крым-Конго геморрагической лихорадки «Вектор МАТ-ФИТЦ анти-КГЛ в ПИФ» - клиническая лабораторная диагностика. Иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие могут быть использованы в лабораториях специализированных противоэпидемических бригад Роспотребнадзора (без накопления возбудителя вирусологическими методами), а также в изолированных лабораториях специализированных учреждений других миниетерств и ведомств, в том числе министерства обороны. Только для профессионального использования. 2. ХАРАКТЕРИСТИКА МЕДИЦИНСКОГО ИЗДЕЛИЯ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ ИИ ВИТРО 2.1. Внешний вид - желто-зеленая опалеецирующая жидкость без осадка. Состав иммуноглобулинов диагностических флуоресцирующих к вирусу Крым-Конго геморрагической лихорадки «Вектор МАТ-ФИТЦ анти-КГЛ в ПИФ» 1 флакон (1 мл) содержит: очищенный гель-фильтрацией водный раствор моноклональных антител (МАТ) мыши, специфично связывающихся с вирусом КГЛ, --- стр. 3 --- меченных ФИТЦ в молярном соотношении ФИТЦ/белок от 5,0 до 14,0 методом конъюгирования, с консервантом ProClin 300 в конечной концентрации 0,25 %. 2.2. Иммуноглобулины флуоресцирующие расфасованы по 1 мл во флаконы с навинчивающейся крышкой из пластмассы, по 1 флакону в коробке картонной, с инструкцией по применению. Титр рабочего разведения серии иммуноглобулинов флуоресцирующих указгш на этикетке флакона и в паспорте серии. 2.3 Количество анализируемых проб 1 флакон (1 мл) с иммуноглобулинами диагностическими флуоресцирующими к вирусу Крым-Конго геморрагической лихорадки «Вектор МАТ-ФИТЦ анти-КГЛ в ПИФ» рассчитан на проведение не менее 50 исследований. 3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ 3.1. Нижний порог обнаружения. Результат анализа любого инфицированного вирусом КГЛ клеточного материала в ПИФ с применением иммуноглобулинов флуоресцирующих флуоресцирующих (при их рабочем для серии разведении) должен быть положительным (наличие в препарате 3 целых клеток с характерным свечением, для оценки препарата достаточно иметь во всем мазке 30 клеток). 3.2. Специфичность. Результат анализа любого не инфицированного вирусом КГЛ (при возможном инфицировании другими буньявирусами или возбудителями инфекционных заболеваний лихорадочной этиологии) клеточного материала в ПИФ с применением иммуноглобулинов флуоресцирующих (при их рабочем для серии разведении) должен быть отрицательным. 4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ ПРИ РАБОТЕ С НАБОРОМ Работу с материалом, зараженным или подозрительным на зараженность вирусом КГЛ, проводят в соответствии с требованиями санитарно-эпидемиологических правил по безопасности работы с микроорганизмами I-II групп патогенности (опасности) (СП 1.3.3118-13), санитарных правил «Профилактика Крымской геморрагической лихорадки» (СП 3.1.7.3148-13) и методических указаний «Порядок организации и проведения лабораторной диагностики Крымской геморрагической лихорадки для лабораторий территориального, регионального и федерального уровней» (МУК 4.2.3007-12). Потенциальный риск применения набора класса 26 (Приказ Министерства Здравоохранения РФ № 4н от 06.06.2012). Организации, осуществляющие лабораторные исследования на КГЛ, должны соответствовать требованиям действующих нормативных документов и иметь санитарно- эпидемиологическое заключение о возможности проведения работ с микроорганизмами 3 --- стр. 4 --- II-IV групп патогенности (опасности) в соответствии с действующими Санитарными правилами о порядке выдачи санитарно-эпидемиологического заключения о возможности проведения работ с возбудителями инфекционных болезней человека I-IV групп патогенности (опасности), генно-инженерно-модифицированными микроорганизмами, ядами биологического происхождения и гельминтами. 4.1 Необходимость обучения персонала Исследования материала, зараженного или подозрительного на заражение вирусом КГЛ, могут выполнять специалисты не моложе 18 лет с высшим и средним профессиональным образованием, окончившие соответствующие курсы профессиональной переподготовки по специальности "Вирусология" и/или "Бактериология" с основами безопасной работы с патогенными биологическими агентами (ПБА) I-II групп, не имеющие противопоказаний к лечению специфическими препаратами и имеющие допуск к работе с ПБА II-IV групп на основании приказа руководителя учреждения. Специалисты, осуществляющие деятельность, связанную с использованием возбудителей инфекционных болезней, должны повышать квалификацию не реже одного раза в пять лет. Специалисты, проводящие исследования, должны иметь необходимые профессиональные навыки работы с биохимическими реактивами и современным лабораторным оборудованием. 4.2 Меры безопасности, позволяющие предохранять оператора Иммуноглобулины флуоресцирующие содержат в своем составе в качестве консерванта РгоСИп 300, который может абсорбироваться через кожу и является сенсибилизирующим агентом. При попадании на кожу или в глаза, необходимо немедленно промыть водой эти участки тела. Для проведения исследования используется монтировочно-иммерсионная жидкость (в состав набора не входит), содержащая азид натрия в концентрации 0,01 % (CAS № 26628-22-8). В используемой концентрации данный реагент не является опасным. Однако при работе с ним следует соблюдать осторожность и не допускать попадания на кожу и слизистые; при попадании немедленно промыть пораженное место большим количеством проточной воды. При проглатывании следует выпить 0,5 л теплой воды. В случае недомогания обратиться к врачу и вызвать рвоту. Азид натрия может реагировать с лабораторными водопроводными системами с образованием азидов свинца и меди. Данные соединения взрывоопасны. Для предотвращения реакции образования азидов после выливания инактивированных растворов, содержащих азид, ополосните сливные трубы большим количеством воды. --- стр. 8 --- < 7.2.5. Препарат на стекле ополоснуть водой очищенной и промыть раствором ФСБ при встряхивании (желательно покачивание на аппарате для встряхивания жидкостей), препарат в лунке планшета осушить аспирацией жидкости. 7.2.6. Повторить процедуры 7.2.4. и 7.2.5. еще 2 раза по 10 - 15 мин при температуре 37 °С со сменой раствора ФСБ). 7.2.7. Стёкла ополоснуть дистиллированной водой и высушить. Планшет с 250 мкл раствора ФСБ в лунке готов к микроскопическому анализу. 7.2.8. На высушенные препараты на стекле нанести по капле монтировочно иммерсионной жидкости, покровные стёкла и просмотреть их с помощью не инвертированного люминесцентного микроскопа. 8. РЕГИСТРАЦИЯ И УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ Антигены вируса КГЛ обнаруживаются в виде яркого зеленого диффузного (или зернистого) свечения всей цитоплазмы или её отдельных участков на бледном фоне окружающих клеток, не поражённых вирусом. На поздних стадиях возможно гранулярное зеленое свечение, преимущественно в краевой зоне цитоплазмы. Положительным результатом считать наличие в препарате 3 целых клеток с характерным свечением. Для оценки препарата достаточно иметь во всем мазке 30 клеток. Наличие в таком препарате менее 3 светящихся клеток считать отрицательным результатом. 9. УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ Срок годности иммуноглобулинов диагностических флуоресцирующих к вирусу Крым-Конго геморрагической лихорадки «Вектор МАТ-ФИТЦ анти-КГЛ в ПИФ» - 12 месяцев. Хранение иммуноглобулинов диагностических флуоресцирующих в упаковке производителя должно осуществляться при температуре от 2 °С до 8 °С. Серии иммуноглобулинов флуоресцирующих с истекшим сроком годности применению не подлежат. Срок годности вскрытых флаконов - в течение срока годности при температуре от 2 °С до 8 °С, разведенных иммуноглобулинов флуоресцирующих - не более 72 часов до использования при температуре от 2 °С до 8 °С Транспортировать иммуноглобулины флуоресцирующие следует крытым транспортом (автомобильным, железнодорожным либо воздушным) в соответствии с ТУ 21.10.60-038-05664012-2016 при температуре от 2 °С до 8 °С в термоконтейнере. Допускается транспортирование при температуре до 27 °С не более 10 суток. Не допускать замораживания. --- стр. 9 --- 10. ИНФОРМАЦИЯ ПО БЕЗОПАСНОЙ УТИЛИЗАЦИИ Использованные флаконы, наконечники, перчатки, ветошь для обработки поверхностей собирают в пластиковые закрывающиеся емкости, выносят с целью последующей инактивации согласно требованиям СанПиН 2.1.7.2790-10 и СП 1.3.3118-13. Иммуноглобулины флуореецирующие с истекшим ероком годноети, вскрытые, но не использованные наборы, а также наборы с поврежденной упаковкой, утилизируют по классу Б, как эпидемиологически опасные отходы СанПиН 2.1.7.2790-10 и СП 1.3.3118-13. i У 11. ГАРАНТИЙНЫЕ ОБЯЗАТЕЛЬСТВА ПРОИЗВОДИТЕЛЯ Предприятие-производитель гарантирует еоответствие функциональных характеристик иммуноглобулинов флуоресцирующих требованиям, указанным в технической и эксплуатационной документации, в течение установленного срока годности (12 месяцев) при соблюдении всех условий транспортирования, хранения и применения. Рекламации на качество иммуноглобулинов флуоресцирующих направлять на предприятие-изготовитель Федеральное бюджетное учреждение «Г осударственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» Роепотребнадзора), 630559, Россия, Новосибирская область, рабочий поселок Кольцово, тел. (383) 336-60-10, факс (383) 336-74-09. При выявлении побочных дейетвий, не указанных в инструкции по применению иммуноглобулинов флуоресцирующих, нежелательных реакций при его использовании, фактов и обстоятельств, создающих угрозу жизни и здоровью граждан и медицинских работников при применении иммуноглобулинов флуоресцирующих, рекомендуется направить сообщение на предприятие-изготовитель ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» Роспотребнадзора по адресу, указанному выше, и в уполномоченную государственную регулирующую организацию в еоответствии с действующим законодательством. «Только для диагностики ин витро». Зав лабораторией производства средств иммунодиагностики ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» Роспотребнадзора Зав ОБТК ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» Роспотребнадзора СОГЛАСОВАНО Г енеральный директор ООО «ВБШПЕЛ-МЕДЦЕНТ: С.А. Пьянков • — М . П . Богрянцева П.К. Варнавичус 18 ДЕК 2017201 г. 9 --- стр. 10 --- Приложение РЕЗУЛЬТАТЫ КЛИНИЧЕСКОЙ АПРОБАЦИИ МИ Иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие к вирусу Крым-Конго геморрагической лихорадки (КГЛ) «Вектор МАТ-ФИТЦ анти-КГЛ в ПИФ» по ТУ 21Л0.60-038-05664012-2016 В ходе клинических испытаний с использованием 288 положительных проб, содержащих суспензии клеток инфицированные вирусом Крым-Конго геморрагической лихорадки (каждая на 2-х сериях набора), и на отрицательных пробах, не содержащих суспензии клеток инфицированные вирусом Западного Нила (96 проб на двух сериях МИ, содержащих суспензии клеток инфицированные гетерологичным вирусом Западного Нила штамм Eg-101; 96 проб на двух сериях МИ, содержащих суспензии клеток инфицированные гетерологичным вирусом Западного Нила штамм А-72; 96 проб на двух сериях МИ, содержащих суспензии клеток инфицированные гетерологичным вирусом Западного Нила штамм ВЛГ27924) - суммарно на 288 пробах (каждая на 2-х сериях набора), доказана диагностическая эффективность МИ «Вектор МАТ-ФИТЦ анти-КГЛ в ПИФ»: - при исследовании 576 положительных проб (288 проб, содержащих вирус Крым- Конго геморрагической лихорадки, на 2-х сериях набора) положительный результат получен в 576 случаях. Диагностическая чувствительность - не менее 99 % с доверительной вероятностью 90 %; - при исследовании 576 отрицательных проб не содержащих суспензии клеток инфицированные вирусом Крым-Конго геморрагической лихорадки (96 проб на двух сериях МИ, содержащих суспензии клеток инфицированные гетерологичным вирусом Западного Нила штамм Eg-101; 96 проб на двух сериях МИ, содержащих суспензии клеток инфицированные гетерологичным вирусом Западного Нила штамм А-72; 96 проб на двух сериях МИ, содержащих суспензии клеток инфицированные гетерологичным вирусом Западного Нила штамм ВЛГ27924) - суммарно на 288 пробах (каждая на 2-х сериях набора) отрицательный результат получен в 576 случаях. Диагностическая специфичность - не менее 99 % е доверительной вероятностью 90 %. « и 10 --- стр. 13 --- 1 НАЗНАЧЕНИЕ 1.1 Полное название набора «Набор реагентов для выявления и идентификации НК вируса Крымской-Конго геморрагической лихорадки и возбудителя лихорадки Ку методом полимеразной цепной реакции в реальном времени (ОМ-Скрин-ККГ Л/Ку-РВ)». 1.2 Предназначение набора и его диагностическая роль Набор реагентов «ОМ-Скрин-ККГЛ/Ку-РВ» предназначен для качественного определения (скрининг, мониторинг) РНК вируса Крымской- Конго геморрагической лихорадки (ККГЛ) и ДНК возбудителя лихорадки Ку (бактерия Coxiella burnetii) в препаратах НК, выделенных из проб: объектов окружающей среды, насекомых, клинических образцов, вируссодержащей суспензии, биопсийного и аутопсийного материала. Диагностическая роль набора реагентов заключается в возможности его использования в поддержке диагностики специфических патологий (Крымской- Конго геморрагической лихорадки и лихорадки Ку) при исследовании материала от больного (подозрительного на заболевание) и индикации патогенных биологических агентов (ПБА), в объектах окружающей среды; как ускоренного предварительного теста при выполнении культурального и биологического методов исследования и идентификации подозрительных культур; для эпидемиологического мониторинга. 1.3 Область применения набора Область применения набора - клиническая лабораторная диагностика Крымской-Конго геморрагической лихорадки и лихорадки Ку, специфическая индикация патогенных биологических агентов, эпидемиологический монито ринг, научные исследования. Набор может быть использован в учреждениях медицины и здравоохранения, лабораториях Центров гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора, в эпидемиологических службах для расщифровки вспыщек экзотических инфекций, а также в стационарных и мобильных лабораториях --- стр. 14 --- специализированных учреждений других министерств и ведомств, в том числе Министерства Обороны. 2 ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА Компоненты набора являются одноразовыми. Набор реагентов «ОМ-Скрин-ККГЛ/Ку-РВ» не требует технического обслуживания и калибровки. 2.1 Состав набора Набор реагентов состоит из 5 реагентов. № Состав комплекта Описание Объем Кол-во 1. Реакционная смесь в стрипованных микропробирках, РС-ККГЛ/Ку сухое вещество белого цвета 1 мг 6 Стрипов по 8 микропробирок 2. Разбавитель, РБ прозрачная бесцветная жидкость 0,8 мл 1 пробирка 3. Положительный контрольный образец, ПКО-ККГЛ/Ку сухое вещество белого цвета 2 мг 3 пробирки 4. Раствор для разбавления ПКО, ОКО прозрачная бесцветная жидкость 1 мл 1 пробирка 5. Внутренний положительный контроль выделения, ВПК-В-РНК сухое вещество белого цвета 2 мг 1 пробирка Реакционная смесь в стрипованных микропробирках, РС-ККГЛ/Ку, расфасована в микропробирки в стрипах (по 8 штук в каждом) объемом 0,2 мл, упакованные в непрозрачный полиэтиленовый пакет Zip-Lock размером 9x12 см, состав: эквимолярная смесь дезоксинуклеозидтрифосфатов, десять олигонуклеотидных праймеров, пять флуоресцентных зондов, фермент Taq ДНК-полимераза; фермент MMLV-ревертаза; синтетическая РНК ВПК, трегалоза. Разбавитель, РБ, расфасован в пробирку из полипропилена объемом 1,5 мл с завинчиваюш;ейся крышкой, упакованную в полиэтиленовый пакет Zip-Lock размером 4х? см, состав: ПЦР-буфер; хлорид магния; глицерол; вода для HTTP --- стр. 15 --- Раствор для разбавления ПКО, ОКО, расфасован в пробирку из полипро пилена объемом 1,5 мл с завинчивающейся крышкой, упакованную в полиэти леновый пакет Zip-Lock размером 4х? см, состав: ТЕ буфер. Положительный контрольный образец, ПКО-ККГЛ/Ку, расфасован в пробирку из полипропилена объемом 0,5 мл с завинчивающейся крышкой, упа кованную в полиэтиленовый пакет Zip-Lock размером 6х? см, состав: смесь синтетической РНК, полученной с помощью in vitro транскрипции с рекомби нантной плазмиды pGem-T с встроенным специфическим фрагментом НК L- сегмента генома вируса ККГЛ и ДНК рекомбинантной плазмиды pGem-T с встроенным специфическим фрагментом гена супероксиддисмутазы бактерии С. burnetii. Внутренний положительный контроль, ВПК-В-РНК, расфасован в про бирку из полипропилена объемом 0,5 мл с завинчивающейся крышкой, упако ванную в полиэтиленовый пакет Zip-Lock размером 4х? см, состав: синтетиче ская РЖ, полученная с помощью in vitro транскрипции с рекомбинантной плазмиды pGem-T со встроенным специфическим фрагментом ДЖ. Примечание. Ингредиентами, которые могут влиять на измерения, явля ются праймеры и флуоресцентные зонды, основной характеристикой которых для конечного пользователя является температура отжига Та, составляющая 60 С. Данная характеристика реализуется с помощью температурно временного режима амплификации, следовательно, его соблюдение является строго обязательным. 2.2 Количество анализируемых проб Набор реагентов рассчитан на 48 определений, включая контрольные образцы. 2.3 Метод исследования Обнаружение фрагментов нуклеиновых кислот возбудителей опасных инфекций основано на использовании метода мультиплексной одностадийной реакции обратной транскрипции, совмещенной с полимеразной цепной реакцией в реальном времени (ОТ-ПЦР-РВ) в одной микропробирке. --- стр. 16 --- При амплификации с помощью ОТ-ПЦР-РВ используют четыре олигонуклеотидных праймера, фланкирующих фрагмент нуклеиновых кислот (НК) L-сегмента генома вируеа Крымской-Конго геморрагической лихорадки, два олигонуклеотидных праймера, фланкирующих фрагмент гена супероксиддисмутазы бактерии С. burnetii, два олигонуклеотидных праймера, фланкирующих НК внутреннего положительного контроля ОТ-ПЦР-РВ, два олигонуклеотидных праймера, фланкирующих НК внутреннего положительного контроля выделения, а также пять флуоресцентных зондов. Процесс амплификации специфичных фрагментов заключается в повторяющихся циклах температурной денатурации ДНК, отжига праймеров с комплементарными последовательностями и последующей достройке полинуклеотидных цепей с этих праймеров ДНК-полимеразой с детекцией результатов в режиме реального времени. Постановка ОТ-ПЦР-РВ осуществляется на специальных приборах, например, «АНК-32 (32М, 48)» (ИАП РАН, г. Санкт-Петербург), CFX-96 (BioRad, США), или эквивалентных П О характеристикам (см. п. 5.1 настоящей инструкции). Набор реагентов «ОМ-Скрин-ККГЛЖу-РВ» реализует преимущества мультиплексной ОТ-ПЦР-РВ в части одновременного выявления в одной пробе РНК вируса ККГЛ и ДНК бактерии С burnetii, а также двух контролей анализа: ОТ-ПЦР-РВ и выделения РНК, по разным каналам детекции флуоресценции. Сигналы флуоресценции регистрируютея независимо друг от друга по следую щим каналам: ТАМ - внутренний положительный контроль выделения РНК; R6G - вирус Крымской-Конго геморрагической лихорадки; КОХ - возбудитель лихорадки Ку; Су5 - внутренний положительный контроль ОТ-ПЦР-РВ. Положительный результат теста означает, что исследуемый материал со держит РНК вируса Крымской-Конго геморрагической лихорадки и/или ДНК бактерии С. burnetii. Отрицательный результат теста означает, что исследуемый материал не содержит РНК вируса Крымской-Конго геморрагической лихорад ки и ДНК бактерии С. burnetii. --- стр. 17 --- 2.3 Ограничения метода в инфицированном материале НК микроорганизмов может быть не обна ружена по причине ингибирования ОТ-ПЦР-РВ и/или недостаточной эффек тивности выделения нуклеиновых кислот. Для достижения показателей анали- тической чувствительности используемый набор для выделения должен обес печивать эффективность выделения НК на уровне не менее 20 %. Причиной получения ложноположительного результата является конта минация на этапе выделения НК либо проведения реакции ОТ-ПЦР-РВ. Лож ноположительный результат выявляется с помощью отрицательных контроль ных образцов выделения и ОТ-ПЦР-РВ (п. S.3 настоящей инструкции). Причиной получения ложноотрицательного результата является ингиби рование ОТ-ПЦР-РВ и/или недостаточная эффективность выделения НК. Лож ноотрицательный результат выявляется с помощью внутренних положительных контрольных образцов выделения РНК (ВПК-В-РНК) и ОТ-ПЦР-РВ (ВПК) (п. 8.3 настоящей инструкции). И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ3 АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ 3.1 АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ Исследования аналитических характеристик набора проведены на базах ФГБУ «48 ЦНИИ» Минобороны России (г. Сергиев Посад Московской области) и ООО Синтол (г. Москва) в рамках исследования эффективности набора и проведения технических испытаний. 3.1.1 Чувствительность Чувствительность - не более 1,0-10= копий НК в I миллилитре пробы (копий мл-'). Данный показатель достигается при условии объема аликвоты ИСХОДНОГО материала (пробы) не менее 100 мкл. 3.1.2 Специфичность Специфичность - ложноположительные и ложноотрицательные результаты при анализе образцов РНК вируса Крымской-Конго геморрагической лихорадки и ДНК лихорадки Ку (4 заведомо положительных --- стр. 18 --- образцов), а также НК вирусов Марбург, Эбола, Ласса, Мачупо, Хунин, ВЭЛ, Западного Нила, денге, желтой лихорадки, лихорадки долины Рифт, клещевого’ и японского энцефалитов, ККГЛ, ТОРС; бактериях Bacillus amhracis. Yersinia р stis, Coxiella burnetii, ДНК человека и грызунов, культур клеток Vero, GMK и ВНК, а также РКЭ (27 заведомо отрицательных образцов) отсутствовали. При проведении исследований наблюдалась полная внутрипостановочная, межпостановочная и межсерийная воспроизводимость ДЛЯ всех положительных образцов. 3.2 ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ Клинические исследования набора проведены на базе и ФБУН ГНЦ ВБ Вектор (р.п. Кольцово, Новосибирской области). 3.2.1 Диагностическая чувствительность Диагностическая чувствительность МИ «Набор реагентов для выявления и идентификации НК вируса Крымской-Конго геморрашческой лихорадки и возбудителя лихорадки Ку методом полимеразной цепной реакции в реальном времени (ОМ-Скрин-ККГЛЖу-РВ» при исследовании 400 положительных проб (160 проб содержащих вирус ККГЛ с концентрацией 1x10^ копий/мл и 160 проб содержащих возбудитель лихорадки Ку с концентрацией 1x10^ копий/мл, а также а также 80 мультиплексных проб, содержащих вирус ККГЛ и возбуди тель лихорадки Ку с концентрацией 1 х 10^ копий/мл) положительный результат получен в 400 случаях. 3.2.2 Диагностическая специфичность Диагностическая специфичность - при исследовании 64 отрицательных образцов, содержащих гетерологичные микроорганизмы (вирусы клещевого энцефалита, японского энцефалита, желтой лихорадки, денге. Западного Нила, лихорадки долины Рифт, венесуэльского энцефаломиелита лощадей) в концен трации не менее 1,0 - Ю’ копий/мл, отрицательный ответ в ПЦР получен во всех 64 случаях. 7 --- стр. 19 --- При проведении исследований наблюдалась полная внутрипостановочная, межпостановочная и межсерийная воспроизводимость ДЛЯ всех положительных образцов. Диагаостические характеристики применительно к каждому из аналитов, а также каждому из типов образцов материала отдельно приведены в Приложе- НИИ. 4 МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ ПРИ РАБОТЕ С НАБОРОМ Работу с материалом, зараженным или подозрительным на зараженность возбудителями Крымской-Конго геморрагической лихорадки и лихорадки Ку проводят в соответствии с требованиями санитарно-эпидемиологических правил по безопасности работы с микроорганизмами I-II групп патогенности (опасности) (СП 1.3.3118-13), методических указаний «Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности» (МУ 1.3.2569-09), методических указаний «Организация и проведение профилактических и противоэпидемических мероприятий против Крымской геморрагической лихорадки» (МУ 3.1.3.2488-09) и санитарно- эпидемиологических правил "Профилактика коксиеллеза (лихорадка Ку)" (СП 3.1.7.2811-10). Необходимо одновременно обеспечить и соблюдать персоналом правила биологической безопасности и требования к организации и проведению данных работ с целью предотвращения контаминации нуклеиновыми кислотами и (или) ампликонами исследуемых проб помещений и оборудования. Потенциальный риск применения набора - класс 3 (п. 9 приложения № 2 К приказу Минздрава России от 06.06.2012 № 4н). 4.1 Необходимость обучения персонала Для выполнения анализа с помощью данного набора реагентов необхо димо участие специалиста с высшим медицинским образованием, нрощедшего обучение на лицензированных курсах специализации по работе с ПБА I- II групп патогенности и по ПЦР-днагностике, а также лаборанта со средним --- стр. 20 --- специальным медицинским образованием. Персонал должен иметь навыки ра боты с биохимическими реактивами и современным лабораторным оборудова- нием. 4.2 Меры безопасности, позволяющие предохранять оператора При работе с набором соблюдать требования ГОСТ Р 52905-2007 «Лабо ратории медицинские. Требования безопасности». Все компоненты набора в используемых концентрациях являются нетоксичными, вредного влияния на организм оператора не оказывают. При работе с набором следует соблюдать обычные меры предосторожности для лабораторий: - пользоваться лабораторными перчатками и надевать лабораторные ха- латы; - не принимать пищу, пить или курить в лабораторных помещениях; - после работы с пробами и реактивами следует тщательно вымыть руки ВОДОЙ с мылом. Избегать контакта с кожей, глазами и слизистыми оболочками, при попа дании на них компонентов набора промыть большим количеством воды. При приеме внутрь компонентов набора реагентов за медицинской помощью следу ет обратиться немедленно. 4.3 Необходимые меры предосторожности в отношении влияния фи зических факторов При использовании набора реагентов нет необходимости принимать ме ры предосторожности в отношении влияния магнитных полей, внешних элек трических воздействий, электростатических разрядов, давления или перепадов давления, перегрузки, источников термического воспламенения. 4.4 Необходимые меры предосторожности против специальных рис- КОВ При использовании набора реагентов нет необходимости принимать ме ры предосторожности против любых специальных рисков при использовании или реализации, поскольку в состав изделия не входят вещества человеческого --- стр. 21 --- или животного происховдения с учетом их потенциальной инфекционной роды. при- 5 ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ, НЕОБХОДИМЫЕ ПРИ РАБОТЕ С НАБОРОМ 5.1 Рекомендуемое измерительное оборудование Прибор да, ПЦР.РВ - зарегистрированный в РФ как медицинское изделие и имеющий каналы детекции, соответствующие красителям РАМ R6G ROX, Су5 (либо их спектральным аналогам) со следующими характеристиками’ (№1 - 490НМ/520НМ, №2 - 525нм/550нм, № 3 - 550нм/580нм, №4 - 630нм/665нм), например, «АНК-32 (32М, 48)», CFX-96. 5.2 Указания о необходимости использования специального оборудования Работу с набором следует проводить в настольном боксе с акгерицидной лампой (например, БАВ-ПЦР-«Ламинар-С», ООО «Ламинарные системы», г. Миасс, Россия), установленном в рабочей зоне 3 (МУ 1.3.2569-09). 5.3 Дозирующие устройства Набор автоматических пипеток переменного объема на 0,5-10 мкл, 2-20 мкл, 10-100 мкл и на 20-200 мкл. Другое используемое оборудование Микроцентрифуга-вортекс (например, «Циклотемп- 901»); микроцентрифуга для стрипов (например, «Циклотемп-903»); ш татив типа «IsoFreeze»; штативы для наконечников, микропробирок на 0,5 и 1,5 мл; штатив для работы со стрипами (кат. номер СТ-15, ООО сй нто л ); ХОЛОДИЛЬНИК на 2-8 °С. 5.5 Лабораторная посуда Емкости для сброса наконечников и микропробирок. 5.6 Материалы и реагенты, нс входящие в состав набора Одноразовые наконечники для пипеток переменного объема с аэрозольным барьером до 10 мкл; 10 --- стр. 22 --- у одноразовые наконечники для пипеток переменного объема с аэрозольным барьером до 20 мкл; одноразовые наконечники для пипеток переменного объема с аэрозольным барьером до 200 мкл; набор реагентов для выделения ДНК/РРЖ; ТЕ-буфер (кат. номер В-014, ООО «Синтол»); отдельный халат и одноразовые медицинские перчатки; комплект средств для обработки рабочего места. 6 АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ПРОБЫ Получение и обработка биологического материала, зараженного или подозрительного на зараженность возбудителями Крымекой-Конго геморрагической лихорадки и лихорадки Ку, не являются частью процедуры анализа с использованием набора реагентов «ОМ-Скрин-ККГЛ/Ку-РВ». 6.1 Тип исследуемых образцов Материалом для исследований служат препараты нуклеиновых кислот, выделенные из проб: объектов окружающей среды, насекомых, клинических образцов, вируссодержащей суспензии, биопсийного и аутопсийного материала. 6.2 Процедура получения биологического материала Для проведения ОТ-ПЦР-РВ забор проб крови проводят в ранние сроки болезни (в период вирусемии). Для предотвращения свертывания кровь отбирают с ЭДТА либо цитратом натрия, использовать гепарин запрещается. Отбор проб насекомых осуществляют в соответствии с МУ 3.1.1027-01 «Сбор, учет и подготовка к лабораторному исследованию кровососущих членистоногих-переносчиков возбудителей природно-очаговых инфекций». 6.3 Ограничения по использованию анализируемого материала Для выделения НК используют зарегистрированные наборы реагентов сообразно происхождению проб. Для достижения показателей аналитической чувствительности объем аликвоты исходного материала (пробы) должен составлять не менее 100 мкл. Полученный препарат НК используется для проведения анализа с помощью набора реагентов «ОМ-Скрин-ККГЛЖу-РВ». 11 --- стр. 24 --- у Клинический материал утилизирует по классу В, как чрезвь,чайно эпидемиологически опасные отходы в соответствии с Саиитарио- эпидемиолотическими требованиями к обраитение е медицинскими отходами (СанПиН 2.1.7.2790-10). 7 ПОДГОТОВКА РЕАГЕНТОВ ДЛЯ АНАЛИЗА 7Л Процедура приготовления контрольных образцов 200 ^ содержимым ПКО-ККГЛЖу добавляют 200МКЛОКО, перемешивают на вортексе до полного растворения центрифугируют 5 секунд при 3000 об-минЛ Храиеиие разведен„ы>: препаратов ПКО-ККГЛ/Ку допускается при температуре „е выше минус 20 »С. 7.2 Разведение препарата ДНК/РНК (при необходимости) Для выявления и идентификации РНК вируса ККГЛ ^ бат^рии С. ЬигпеШ необходимо внести в реакцию 20 мкл препарата ДНКЗРНК. в случае необходимости, раствор препапатя нк ™ препарата НК разводят с помощью 1Ь-буфера (кат. номер В-014, ООО «Синтол»), 8 ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА Анализ проводят в рабочей зоне 3, не подразумевающей контакта с био- материалом (МУ 1.3.2569-09). 8.1 Расход каждого реагента (минимальный) На одно определение расходуются: - одна микропробирка с РС-ККГЛ/Ку; - 15 мкл РБ. На каждый анализ расходуются: - 20 мкл ПКО-ККГЛ/Ку; - 20 мкл ОКО. 8.2 Последовательность проведения этапов анализа Анализ с помощью набора реагентов проводится в один этап: - включают прибор, запускают программу в соответствии с инструкцией П О эксплуатации; 13 ,1 --- стр. 25 --- 1 - вводят параметры температурно-временного режима амплификации гласно таблице 1 и вводят красители FAM, R6G, ROX и Су5; со- Таблица 1 - Температурно-временной режим амплификации № п/п 1 емпературно-временной режим Число циклов 1 50 °С - 900 секунд 1 2 95 °С - 300 секунд 1 3 60 °С — 40 секунд Считывание сигнала флуооеспенгтии 504 95 °С-15 секунд вводят сведения об образцах по всем красителям и активируют прибор в соответствии с руководством по эксплуатации; При работе с РНК необходимо использовать только одноразовые пластиковые расходные материалы, имеющие специальную маркировку «RNase-free», «DNase-free». - набор реагентов извлекают из холодильника, РБ и ОКО перемешивают на вортексе и центрифугируют в течение 5 секунд при 3000 об-мин''; - помещают микропробирки в стрипах (РС-ККГЛ/Ку) в штатив для стри- пов типа «IsoFreeze»** и маркируют в соответствии с протоколом исследования на боковой стенке пробирки; открывают крышки микропробирок и вносят в них по 15 мкл РБ; - используя наконечники с аэрозольным барьером, последовательно вно сят в микропробирки соответственно порядку исследования образцов по 20 мкл ОКО, ОКО-В и далее по 20 мкл растворов исследуемых образцов в необходи мой повторности***, закрывают крышки данных микропробирок; - вносят в микропробирки соответственно маркировке по 20 мкл ПКО- ККГЛ/Ку, закрывают крышки данных микропробирок; **Примечание: До начала работы штатив рекомендуется охладить в бы товом холодильнике до температуры 2-8 °С повторах^^^^^"^^”^^' образец рекомендуется анализировать в двух 14 --- стр. 26 --- ft» 1 - перемешивают содержимое микропробирок на вортексе и центрифуги- руют 5 секунд при 3000 об-мин'. ВНИМАНИЕ! После смешивания РС-ККГЛ/Ку, разбавителя и пре парата РНК, микроиробирки сразу установить в амплификатор и запу- стить ОТ-ПЦР-РВ. ^ лов " Т Т ” ' “ соответствии с протоколом иссле дования (таблица 2) и прикатывают крышки микропробирок; М ячейки О б п п ч р ч 1 ПКП-ККТЧ/Ю'2 ПКО-ККГПДГз'3 4 ____________око ~ ----------------■ Пэко ^5 око-в6 око-в7 исследуемый^об^азен 18 исследуемый образец 1 9 ИССЛеЛУемкгй nfrnQoeiT о 10 11 — 1 Г запускают реакцию ОТ-ПЦР-РВ и фикси руют в рабочем журнале название файла с результатом работы прибора, рас- четное время анализа составляет в среднем 2 часа. 8.3 Процедура измерения и оценки результатов анализа Оценку результатов проводят с помощью приборов для ПЦР-РВ напри- мер, «АНК-32 Г32М TFv о а ’ ^( , ) , CFX-96 или эквивалентные им (см. п. 5.1 настоящей инструкции). ^ шетическая кривая роста сигнала флуоресценции (регистрация роста сигнала) означает любую величину порогового циюта С, менее 50. Отсутствие регистрации роста сигншга прибором описывается программой прибора аиример, как величина порогового цикла (Ct >=50 в приборах АНК), либо как 15 --- стр. 30 --- 10 УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ, ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ И ЭКСПЛУ АТАЦИИ НАБОРА 10.1 Условия хранения набора в соответствии с ТУ 9398-008-46395995-2013 - в сухом, защищенном от света месте, при температуре от плюс 2 до плюс 8 »С. Суммарный срок хране ния при температуре от плюс 9 до плюс 20 °С не должен превышать 14 суток в течение срока годности набора реагентов. 10.2 Условия транспортирования набора Транспортирование набора реагентов «ОМ-Скрин-ККГЛ/Ку-РВ» должно производиться в соответствии с ТУ 9398-008-46395995-2013 крытым транспор том (автомобильным, железнодорожным либо воздушным) при температуре от плюс 2 до плюс 8 °С. Допускается транспортирование до 14 суток при темпера туре до плюс 20 °С. 10.3 Срок годности набора Срок годности набора реагентов составляет 12 месяцев с даты выпуска предприятием-изготовителем. Серии наборов реагентов с истекшим сроком годности применению не подлежат. Срок годности вскрытых реагентов соот ветствует сроку годности, указанному на этикетках для невскрытых реагентов, если в инструкции не указано иное. Срок годности разведенных препаратов ПКО-ККГЛ/Ку и ВПК-В-РНК не более месяца при температуре хранения не выше минус 20 °С. 10.4 Информация по безопасной утилизации Использование набора происходит в рабочей зоне 3, не подразумевающей контакта с биоматериалом (МУ 1.3.2569-09). Использованные наборы после анализа препаратов РНК собирают в пластиковые закрывающиеся емкости и выносят в рабочую зону 4-1 либо специально предназначенное вспомогатель ное помещение (МУ 1.3.2569-09) с целью последующей утилизации по классу Б (СанПиН 2.1.7.2790-10). Наборы с истекшим сроком годности, а также в случае повреждения упа ковки, утилизируют по классу А (СанПиН 2.1.7.2790-10). 19 --- стр. 31 --- 10.5 Гарантийные обязательства производителя Предприятие-производитель гарантирует соответствие функциональных характеристик набора реагентов требованиям, указанным в технической и экс плуатационной документации, в течение установленного срока годности (12 месяцев) при соблюдении всех условий транспортирования, хранения и применения. Рекламации на качество набора реагентов «ОМ-Скрин-ККГЛ/Ку-РВ» направлять на предприятие-изготовитель ООО «Синтол» (127550, г. Москва, ул. Тимирязевская, 42, тел. (495) 984-69-93, факс. (499) 977-74-55 E.mail: syntol@syntol.ru). При выявлении побочных действий, не указанных в инструкции по при менению набора реагентов, нежелательных реакций при его использовании, фактов и обстоятельств, создающих угрозу жизни и здоровью граждан и меди цинских работников при применении набора реагентов, рекомендуется напра вить сообщение на предприятие-изготовитель ООО «Синтол» по адресу, ука занному выще, и в уполномоченную государственную регулирующую органи зацию в соответствии с действующим законодательством. Научный директор ООО «Синтол» Я.И. Алексеев СОГЛАСОВАНО: И.о. генерального директора ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор», К.М.Н., доцент В.Н. Михеев 20 --- стр. 32 --- РЕЗУЛЬТАТЫ КЛИНИЧЕСКОМ АПРОБАЦИИ НАБОРА РЕАГЕНТОВ «Набор реагентов для выявления и идентификации НК вируса Крымской-Конго геморрагической лихорадки и возбу- ® времени(ОМ-С крин-ККГЛ/Ку-РВ)» на базе ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор») ККГЛ «'‘^ледовано 80 проб, содержащих вирус KKI л (STV и Ни-100) и 80 проб, содержащих 2 полевых изолята С. burnetii (№ i и No 2V а одновременно вирус ККГЛ и С. burnetii. Результаты приведены в Образец Положительные образцы* Таблица 1 Подтверждённые положительные образцы серия 030914 серия 100914 Данные по моделированию нагрузки проб вирусом ККГ Л Клеточные культуры (вируссодержащая жидкость), содержащие вирус ККГЛ 16 16 16 Кровь, содержащая вирус ККГЛ 16 16 16 Мозговая суспензия мышей, содержащая вирус ККГЛ 16 16 16 Пул клещей, содержащих вирус ККГЛ 16 16 16 Пробы окружающей среды, содержащие вирус ККГЛ 16 16 16 Итого проб, содержащих вирус ККГЛ 80 80 1 80 Данные по моделированию нагрузки проб возбудителем лихорадки Ку (С. burnetii) Клеточные культуры (вируссодержащая жидкость), содержащие С. burnetii 16 16 16 Кровь, содержащая С burnetii 16 16 16 Мозговая суспензия мышей, содержащая С burnetii 16 16 16 Пул клещей, содержащих С. burnetii 16 16 16 Пробы окружающей среды, содержащие С. burnetii 16 16 16 Итого проб, содержащих С. burnetii 80 80 80 Данные по моделированию нагрузки проб одновременно вирусом ККГЛ и С burnetii Клеточные культуры (вируссодержащая жидкость), содержа щие вирус ККГЛ и С. burnetii 16 8 из 8 8 из 8 Кровь, содержащая вирус ККГЛ и С. burnetii 16 8 из 8 8 из 8 *Согласно интерпретации результатов инструкции по применению 21 --- стр. 34 --- --- стр. 35 --- т а г. Москва, ул. Тимирязевская, д.42, к. 352 Тел/факс: (495) 977-7455 Тел.; (495) 984-69-93 e-mail: syntot@iab,ao.ru www.syntol.ru ЗАО «СИНТОЛ» ПАСПОРТ КАЧЕСТВА Г Е м Ж г Й ^ К О й Ж рЖ К Р Ы М С К О Й -К О Н Г О Серия /Т~ Пункт ТУ 1,3 1.5, 1.6 Наборов в серии ^ Оигг. Наименование показателя Комплектность, состав 1.2, табл. 1, п. 1,2 Упаковка и маркировка Дата изготовления ^ Требования ТУ 9398-008-46395995-2013 Комплект вклгочает набор реагентов инструкцию по применению и паспорт Состав: 6 стрипов по 8 микропробирок обьемом 0.2 мл, две пробирки объемом 1,5 мл, четыре пробирки объемом 0.5 мл Реакционная смесь в стрипоааиньк микропробирках, .РС-ККГЛ/Ку* 1.2, табл. 1, п. 3 Разбавитель, РБ** Внутренний ~ ~ положительный контроль выделения. ВПК-В-РНК Полипропиленовые пробирки 0,2 мл (в стрипах), 0,5 и 1,5 мл (с резьбовой крышкой), пакеты типа Zip-lock, этикегки из к.лсящсй бумаги РезультатьГкотроля (соответствует/не соотве'гствует/значение .полученной величины (по пргшенимостиВ Соответствует Комплект включает набор реагентов инетрукцию по гфименению и паспорт Сосгав: 6 стрипов по 8 микропробирок объемом 0,2 .мл, две пробирки объемом 1.5 мл, четыре пробирки объемом 0.5 мл Сухое вещество белого цвета Положительный контрольный образец, ПКО-ККГШКу Про.зрачнзя бесцветная жидкость, pH 8,8 Сухое вещество белого цвета Раствор для разбавления ПКО. ОКО Положительный результат от-пцр.рв. Отрицательный результат ОТ-ПЦР-РВ Аналитическая чувствительность Сухое вещество белого цвета Соответствует Полипропиленовые пробирки 0,2 мл (в стрипах), 0,5 и 1,5 мл (с резьбовой крышкой), пакеты типа Zip-lock, — б у м а г и Соответствует Сухое вещество белого цвета Соответствует Прозрачная бесцветная жидкость. pH Соответствует Сухое вещество белого цвета Про:зрачная бесцветная жидкость, pH 8,0 Регистрация роста сигнала с любой величиной порогового цикла Ct в пробирках с ПКО-ККГЛ/Ку по каналам R6G и ROX. Регистрация роста сигнала с Q менее 37 Q в пробирках с ПКО-ККГЛЖу по каиала.м FAM и ----------------^_____Q;!________________ Рсгистрацн* роста сипгала с Ct менее 37 0 в п^бирках с ОКО по каналам FAM и Су5. Осутствие регистрации роста сигнала в пробирках с ОКО по каналам R6G и ROX Соответствует Сухое вещество белого цвета Соответствует Прозрачная бесцветная жидкость, pH Соответствует Зарегистрирован рост CHCHajia в пробирка-х с ПКО-ККГЛ/Ку по каналам R6G и ROX. рост сигнала в пробирках с ИКО-ККГЛ/Ку по каналам FAM и Су5 с Ct менее 37,0 Регистрация роста сигнала с любой величиной порогового цикла Ct в пробирках е СКО-Ку по каналу ROX; СКО-КК1Л по каналу R6G Регистрация роста сигнала с Ct меиее 37,0 во всех пробирках по каналам FAM и Су5 Соответствует Зарсгисфироваи роет сигнала в пробирках с ОКО по каналам FAM и СуЗ с С1 менее 37,0, Не зарегострирован рост сигнала в пробирках е ________ОКО по каналам R6G и ROX Соответствует Зарегистрирован рост сигаала в пробирках с СКО*Ку по каналу ROX; СКО-ККГЛ по каналу R60, Зарегистрирован рост сигнала во всех пробирках по каналам FAM II Су5 с Ct менее 37.0 Примечания: температуре от плюс 9 до плюс 20 %: не должен г ревьшаЙТ/! сст^^ Суммарный срок хранения при Транспортовать крытым транспортом (автомобильньш f одности набора реагентов. 2 до плюс 8 С. Допускается транспортирование до до температуре от плюс Г одеи до: _________ Начальник отдела ОБТК i i. % Минакова ^ , / Паспорт ljj( / ? &1 '/■ 201 г. --- стр. 36 --- ФЕДЕРАЛЬНОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ НАУКИ Г ОСУДАРСТВЕННЫЙ НАУЧНЫЙ ЦЕНТР ВИРУСОЛОГИИ И БИОТЕХНОЛОГИИ «ВЕКТОР» РОСПОТРЕБНАДЗОРА ПАСПОРТ штамма вируса I lO M Cp ^ Дата поступления 1 Вид (российская и английская транскрипция) вирус Крымской-Конго геморрагической лихорадки (ККГЛ) Crimean-Congo hemorrhagic fever virus (CCI II’V) 2 Род,семейство Nairovirus, Bunyaviridae 3 Наименование штамма ROS/TI28017 4 Особое обозначение Субтип Европа 1 (или Europe/furkey) 5 Выделен (дата) 2000 6 Объект выделения и способ выделения Штамм выделен из клеща Н.marginatum 7 Место выделения (место взятия бионробы) Ростовекая область 8 Способ получения штамма (организация, дата, способ, авторы) ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор», Новосибирск, р.н. Кольцово Штамм выделен е иенользованисм кульгуры клеток линии SWI3 в 2012 году Плясунов и.в., 11ьянков О.В., Зайковская Л.В. 9 Способ идентификации штамма (организация, дата, способ, авторы) ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор», Новосибирск, р.н. Кольцово, 2012 1 0д Анализ генома вируса показал, что нуклеотидная последовательность S-сегмента еовпадае г с последовательностями данного участка генома штамма STV/HU29223 вируса ККГЛ, зарегистрированного в банке данных GenBank: AF481802. Яшина Л. Н., Шиков А.Н., Нетесова НА. 10 Пассажная история штамма 2 пассажа на культуре клеток линии SW-13. 11 Литературиая(ыс) ссылка(и) на работы, в которых опубликованы данные по выделению и идентификации штамма нет 12 Характеристика штамма 12.1 Культурально— морфологические особенноети штамма Культивирование на монослойной культуре клегок SW-13 или Vero. Не обладает цитонатическим действием. Репликация вируса определяется: непрямым ИФА с помощь моно- или ноликлонал 1.ных сывороток через 24-48 часов после заражения; количественным реал-тайм НЦР но нараетанию конийности на 5-7 сутки после заражения. 12.2 Способ, условия и состав сред для размножения Заражение монослоя культур клеток SW-13 или Vero, питательная среда ДМЭМ е 2 % эмбриональной С1>1воротки коров и а/б. 5-7 сут. культивирования при температуре 37“с, относительной влажности 85 % и 5 % концентрации С02 --- стр. 37 --- 12.3 Активность (продуктивность) штамма (с указанием условий культивирования) 12.4 Биохимическая активность 12.5 Серологические свойства Штамм находится в близком аитигенном родстве со штаммом Дроздов 12.6 Генетические характеристики штамма [установленные нуклеотидные последовательности генома штамма (указать длину и позиции генома, литературные ссылки на публикацию установленных нуклеотидных последователыюетей (номер в GeneBank, статья и нр.)] Нуклеотидные последовательное™ фрагмента S-сегмента генома (позиции 1209-1395) депонированы в базе данных GenBank //AF401648 12.7 Вирулентность (патогенность) 12.7.1 Группа патогенности для человека но российской классификации 12.7.2 Патогенность для животных Не изучена 12.7.3 Патогенность для растений Нет 12.8 Способ, условия и состав сред для длительного хранения штамма Вируссодержащая культуральная жидкость температура хранения минус 70“С. Среда DMEM с 2% сыворотки плодов Kpyiшшч рога того скота 12.9 Дата и результат последней проверки жизнеспособности культуры (указать результат, метод и биосистему титрования) 12.10 Дата предполагаемого пересева (указать необходимые для этого метод, биосистему и условия культивирования) 2015 год. Размножение. Заражение монослоя культур клезок SW-13 или Vero, питательная среда ДМЭМ с 2 % эмбриональной сыворотки коров и а/б. 5-7 сут. культивирования при температуре 37 °С, относительной влажности 85% и 5% концстрации С02 13 Вид депонирования: хранение, 1'арантийное хранение, патентное депонирование Патентное депонирование 14 Автор просит информировать о запросах на пл амм (да, нет): Да. Выдача штамма из коллекции возможна только с письменного согласия О.В Пьянкова 15 Информация о нггамме включается в каталог коллекции до получения патента (да, нет): Да 16 Автор информирован о том, что штамм будет исследован и включен в общую коллекцию, образцы культуры будут распространяться в соответствии с правилами, регламентируемыми Будапештским договором за плату, покрывающую расходы коллекции. Авторы обязаны восстановить штамм в коллекции в случае утраты им жизнеспособности. Автор письменно информирует о получении натета до истечения 3 лет со дня депонирования (да, нет): Да --- стр. 38 --- 17 Данные депозитора 17.1 Организация, адрее, факс, тслс'гайи, телефон депозитора, автор или авторский коллектив ФБУН ГНЦ ВБ ’’Вектор”, 630559, р.п. Кольцово, Новосибирского р-на. Новосибирской обл., тел./факс. (383)336-60-10/(383)363-48-00 Плясунов И.В., Ньянков О.В., Шиков А.Н., Зайковская А.В. Яшина Л.Н., 11етесова Н.А. 18. Патент 18.1 Номер и дата поданной заявки 18.2 Номер и дата выдачи патента 18.3 11атснтодержатель 19 Особые отме тки Авторы ипамма Подпись Дата Шиков Андрей Николаевич 11ьяиков Олег Викторович Плясунов Игорь Владимирович -У Нетесова Нина Александровна .' ■у ^ r /v Яшина Людмила Николаевна Ok <r. - Зайковская Анна Владимировна o k k o /r --- стр. 39 --- ФЕДЕРАЛЬНОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ПАУКИ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НАУЧНЫЙ ЦЕНТР ВИРУСОЛОГИИ И БИОТЕХНОЛОГИИ «ВЕКТОР» РОСПОТРЕБНАДЗОРА ПАСПОРТ штамма вируса Номер 5, I/- С Ь С 1 Вид (российская и английская транскрипция) вирус Крымской-Конго геморрагической лихорадки (ККГЛ) Crimean-Congo hemorrhagic fever virus (CCHFV) 2 Род, семейство Nairovirus, Bunyaviridae 3 Наименование штамма ROS/TI28044 4 Особое обозначение Субтип Европа 1 (или Europe/Turkey) 5 Выделен (дата) 2000 6 Объект выделения и способ выделения Штамм выделен из клеща Н.marginatum 7 Место выделения (место взятия биопробы) Ростовская область 8 Способ получения штамма (организация, дата, способ, авторы) ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор», Новосибирск, р.п. Кольцово Штамм выделен с использованием культуры клеток линии SW13 в 2012 году Пьянков О.В., Зайковская А.В. 9 Способ идентификации штамма (организация, дата, способ, авторы) ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор», Новосибирск, р.п. Кольцово, 2012 год Анализ генома вируса показал, что нуклеотидная последовательность S-сегмента совпадает с последовательностями данного участка генома штамма STV/HU29223 вируса ККГЛ, зарегистрированного в банке данных GenBank; AF481802. Яшина Л. Н., Шиков А.Н. 10 Пассажная история штамма 2 пассажа на культуре клеток линии SW-13. 11 Литературная(ые) ссылка(и) на работы, в которых опубликованы данные по выделению и идентификации штамма нет 12 Характеристика штамма 12.1 Культурально— морфологические особенности штамма Культивирование на монослойной культуре клеток SW-13 или Vero. Не обладает цитопатическим действием. Репликация вируса определяется; непрямым ИФА с помощь моно- или поликлональных сывороток через 24-48 часов после заражения; количественным реал-тайм ПЦР по нарастанию копийности на 5-7 сутки после заражения. 12.2 Способ, условия и состав сред для размножения Заражение монослоя культур клеток SW-13 или Vero, питательная среда ДМЭМ с 2 % эмбриональной сыворотки коров и а/б. 5-7 сут. культивирования при температуре 37°с, относительной влажности 85 % и 5 % концентрации С02 --- стр. 40 --- [ f 12.3 Активность (продуктивность) штамма (с указанием условий культивирования) 12.4 Биохимическая активность 12.5 Серологические свойства Штамм находится в близком антигенном родстве со штаммом Дроздов 12.6 Генетические характеристики штамма [установленные нуклеотидные последовательности генома штамма (указать длину и позиции генома, литературные ссылки на публикацию установленных нуклеотидных последовательностей (номер в GeneBank, статья и пр.)] Нуклеотидные последовательности фрагмента S-сегмента генома (позиции 1209-1395) депонированы в базе данных GenBank #AF401651 12.7 Вирулентность (патогенность) 12.7.1 Группа патогенности для человека по российской классификации 12.7.2 Патогенность для животных Не изучена 12.7.3 Патогенность для растений Нет 12.8 Способ, условия и состав сред для длительного храпения штамма Вируссодержащая культуральная жидкость температура хранения минус 70”С. Среда DMEM с 2% сыворотки плодов крупного рогатого скота 12.9 Дата и результат последней проверки жизнеспособности культуры (указать результат, метод и биосистему титрования) 12.10 Дата предполагаемого пересева (указать необходимые для этого метод, биосистему и условия культивирования) 2015 год. Размножение. Заражение монослоя культур клеток SW-13 или Vero, питательная среда ДМЭМ с 2 % эмбриональной сыворотки коров и а/б. 5-7 сут. культивирования при температуре 37 °С, относительной влажности 85% и 5% концентрации СОг 13 Вид депонирования: хранение, гарантийное хранение, патентное депонирование Патентное депонирование 14 Автор просит информировать о запросах на штамм (да, нет): Да. Выдача штамма из коллекции возможна только с письменного согласия О.В Пьянкова 15 Информация О штамме включается в каталог коллекции до получения патента (да, нет): Да 16 Автор информирован о том, что штамм будет исследован и включён в общую коллекцию, образцы культуры будут распространяться в соответствии с правилами, регламентируемыми Будапештским договором за плату, покрывающую расходы коллекции. Авторы обязаны восстановить штамм в коллекции в случае утраты им жизнеспособности. Автор письменно информирует О получении патента до истечения 3 лет со дня депонирования (да, нет): Да --- стр. 41 --- 17 Данные депозитора 17.1 Организация, адрес, факс, телетайп, телефон депозитора, автор или авторский коллектив ФБУН ГНЦ ВБ ’’Вектор”, 630559, р.п. Кольцово, Новосибирского р-на, Новосибирской обл., тел./факс. (383)336-60-10/(383)363-48-00 Плясунов И.В., Пьянков О.В., Шиков А.Н., Зайковская А.В. Яшина Л.Н., Нетесова Н.А. 18. Патент 18.1 Номер и дата поданной заявки 18.2 Номер и дата выдачи патента 18.3 Патентодержатель 19 Особые отметки Авторы штамма Подпись Дата Шиков Андрей Николаевич Пьянков Олег Викторович Яшина Людмила Николаевна Зайковская Анна Владимировна --- стр. 42 --- ФЕДЕРАЛЬНОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ НАУКИ ГОСУДАРСТИЕННЫЙ НАУЧНЫЙ ЦЕНТР ВИРУСОЛОГИИ И Г.ИОТЕХ1ЮЛОП1И «ВЕКТОР» ПАСПОРТ ш гамма вируса С ь уНомер __Г Дата поступления / У) i О Ь, f I А/ 1 Вид (российская и английская транскрипция) вирус Крымской-Конго геморрагической лихорадки (ККГ'Л) Crimean-Congo hemorrhagic fever virus (CCIIFV) 2 Род, семейство Nairovinis, Buuvci virk/ae J Наименование штамма STV/HUIGO ^ 4 Особое обозначение Субтип Европа 1 (или Europe/Turkev) 5 Выделен (дата) Октябрь 2012 6 Объект выделения и способ выделения Н.Ргамм выделен из плазмы крови больншо ККГЛ 7 Место выделения (место взятия биопробы) Июнь 201 1 г,, Ипатовский район Ставропольского края 8 Способ получения ш тамма (организация, дата, способ, авторы) ФБУП J НЦ ВБ «Вектор», Новосибирск, р.н. Кольцово Штамм выделен с использованием культуры клеток линии SW 13 в 2012 году Плясунов И.В., Пьянков О.В., Зайковская Л.В 9 Способ идентификации штамма, (организация, дата, способ, авторы) ФБУП ГНЦ ВБ «Вектор». Новосибирск, р.н. Кольцово. 201 год Анализ генома вируса показал. что нуклеозидна носледоваз’ельность S-сегмента совпадает последовательностями данного участка генома штамм SIV/HU29223 вируса ККГД, зарс 1 истрироваиного в банк данных СепВапк: AF481802. Яшина Л. Н., Шиков А.Н., Нетесова Н.А, К) Пассажная история штамма 2 насезша на культуру клеток линии SW-13 1 1 Дитературная(ые) ссылка(и) на работы, в которых опубликованы данные по выделению и иде нтиф и ка ци и ш та м ма нет 12 Характеристика штамма 12.1 Кул ы’у рал ь н о-м О р(|)о л О ги ч ее к и е особенности [изамма Культивирование на монослойнон культуре кезезок SW-13 или Уето. Fie обладаез ци тонгзтическим действием. Репликация вир)са определяется: - непрямым ИФА с по.мошь моно- или поликлональных сывороток через 24-48 часов после заражения; - количественным реал-тайм НЦР по нарастанию конийности на 5-7 суз ки после заражения. 12.2 Способ, условия и состав сред для размножения. Заражсл1ие монослоя культур клеток SW-13 или Уето. питательная среда ДМЭМ с 2 % э.мбрио 1шл1,пой сыворотки коров и а/б. 5-7 сут. кулзл нвирования при з'емнературе 37°С. озззосизелыюй влгшиоети 85% и 5% концентрации COi 12.3 А К 'Т И вность (проду КТИ ВНОС'ТЬ) штамма (с указанием условий культивирования). --- стр. 43 --- 12.6 Биохимическая активность Се рол оги чес к и е с во йст ва 12.7 12.7.1 12.7.2 1 енетические характеристики штамма [у с'га н о в л е н и ы е нуклеотидные последовательности генома штамма (указать длину и позиции генома, литературные ссылки на публикацию уста но вл е н н ы X нукл еотид н ых последовательностей (номер в GeneBank, статья и нр.)] Штамм находится в близком антигенном родст штаммом Дроздов Вирулентность(патогенность) 1у кл еотид н ые носл едо ва гел ы i ости ф ра г .\ i с 1 1 га cei-менга генома (позиции 1209-1395) денопиров в базе данных GenBank # I рунпа патогенности для человека по российской классификации 12.7.: 12.8 12.9 Патогенность для животных 11атогеннос'гь для растений Способ, условия и состав сред для длительного хранения штамма 12.10 /(ага и результат последней проверки жизнеспособности культуры (указать результат, метод и биосистему титрования) ______ 13 14 15 17 17.1 /(аза предполагаемого пересева (указать необходимые для этого метод, биосистему и условия культивирования) Вид депонирования: хранение, гарантийное хранение, патентное депонирование. Автор просит информировать запросах на штамм (да, нет): о Инс|)ормация о штамме включается в каталог коллекции до получения патента(да, нет): 11е изучена Нет Вируссодержащая куль гурал ьная жидкое ть з'смпература хранения минус 70Т. Среда DMEM с 2% сыворотки плодов крупн ро|~атого скота_______ 2015 год. I азмножение. Заражение монослоя кульзур клс SW-13 или Vero, питательная среда ДМЭ.М с 2 эмбриональной сыворотки коров и а/б. 5-7 с культивирования при температуре 37 относительной влажноези 85% и 5% концензра! СО, I (атентное депонирование Да. [Зыдача штамма из коллекции возможна зол 1,к письменного согласия О.В Пьянкова Да Автор информирован о том, что штамм будез исследован и включён^! общую коллекцию, образцы культуры будут распросзраняться в соотвезствии' с правилами, регламентируемыми Будапештским договором за плату, покрывающую расходы коллекции. Авторы обязаны восстановить штамм в кот1лекции в случае утраты им жизнеспособности. Автор письменно информирует о получении патента до иезечения 3 лет со дня депонирования (да, нет):. ^ Да Данные дсчюзи юра 18.1 Организация, адрес, факс, телез'айп, телефон депозитора, автор или авторский коллекз ив Ilaieii г ФБУН ГПЦ ВБ "Вектор", 630559, р.ц. Колыц) Новосибирского р-на. Новосибирской обл leiAIn (383)336-60-10/(383)363-48-00. Плясунов И.В., Ньянков О.В.. Шиков А.Н.. Зайковская .Л.В Яшина Л.Н., Нетесова Н.А. Номер заявки и дата поданной --- стр. 44 --- 18.2 Номер и дата выдачи патента 18.3 1 [атептодержагель Авторы ипамма -11лясунов Игорь Владимиро в и ч 11ьянков Олег Викторович Шиков Андрей Николаевич__ Зайковская Анна Владимировна Яшина Людмила }1иколаевна Нетесова Мина Алекеандровна --- стр. 45 --- в данном прошнуровано, пронумеровано и скреплено платью 'Р листов в г г г е ^ ^ п ^ ^ / С Я ? с п л tiw lir»r*rt. ППППЫГ1-. ^ кДОЛЖНОСТЬ, ПОДПИСЬ --- стр. 46 --- 630559, рабочий поселок Кольцово Новосибирской области Телефон ОБТК; 8(383)-336-73-16 ФБУН ГНЦ ВБ "Вектор" Роспотребнадзора Отдел разработки, производства и применения средств иммунодиагностики вирусных и риккетсиозных заболеваний (отд. 03.13.00) П А С П О Р Т № 126 от 05.12.2017 Иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие к вирусу Крым-Конго геморрагической лихорадки «Вектор МАТ-ФИТЦ анти-КГЛ в ПИФ» по ТУ 21.10.60-038-05664012-2016 Номер серии: 01.12.2017 Контрольный номер ОБТК № 126 Количество в серии 20 Дата изготовления 01.12.2017 Дата выпуска продукции 05.12.2017 Наименование показателя Требования НД Результаты анализа 1 Внешний вид Желто-зеленая опалесцирующая жидкость без осадка При переворачивании флаконов не должно наблюдаться протечек веществ Желто-зеленая опалесцирующая жидкость без осадка. При переворачивании флаконов протечек веществ не наблюдалось. 2 Технические характеристики Нижний порог обнаружения Результат анализа любого инфицированного вирусом КГЛ клеточного материала в ПИФ с применением иммуноглобулинов флуоресцирующих (при их рабочем для серии разведении) должен быть положительным (наличие в препарате 3 целых клеток с характерным свечением, для оценки препарата достаточно иметь во всем мазке 30 клеток). Соответствует, протокол испытания № 3 КГЛ-ПИФ от 05.12.2017 Специфичность Результат анализа любого не инфицированного вирусом КГЛ (при возможном инфицировании другими буньявирусами или возбудителями инфекционных заболеваний лихорадочной этиологии) клеточного материала в ПИФ о применением иммуноглобулинов флуоресцирующих (при их рабочем для серии разведении) должен быть отрицательным. Соответствует, протокол испытания № 3 КГЛ-ПИФ от 05.12.2017 Комплектность Согласно требованиям ТУ п. 1.3. Соответствует Упаковка Согласно требованиям ТУ п. 1.4. Соответствует Маркировка Согласно требованиям ТУ п. 1.5 Соответствует Транспортировать при температуре от 2 С до 8 С в термоконтейнере. Допускается транспортирование при температуре до 27 ° С не более 10-ти суток. Не допускать замораживания. Хранение в упаковке производителя должно осуществляться при температуре от 2 °С до 8 °С. Серии с истекшим сроком годности применению не подлежат. Срок годности вскрытых флаконов - в течение срока годности при температуре от 2 °С до 8 °С, разведенных иммуногло^^^^^^^^ресцирующих не более 72 часов до использования при температуре от 2 °С до 8 °С Срок годности - 12 месяцев. Заключение: соответствует проекту Т У 21.10.б0-038-05664Щ§01б>}^Т^^ Зав. ОБТК ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» Роспотребнадзора ’ )янцева --- стр. 47 --- ПРОТОКОЛ № 3 КГЛ-ПИФ от 05Л2.2017 года лабораторного испытания медицинского изделия Иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие к вирусу Крым-Копго геморрагической лихорадки «Вектор МАТ-ФИТЦ аити-КГЛ в ПИФ» по ТУ 21Л0.60-038-05664012-2016 «Вектор МАТ-ФИТЦ аити-КГЛ в ПИФ» серия 01Л 2.2017 дата изготовления 01.12.2017 1. Анализируемые образцы. Лабораторное испытание иммуноглобулинов флуоресцирующих к вирусу Крым- Конго геморрагической лихорадки (КГЛ) для диагностических целей «Вектор МАТ- ФИТЦ анти-КГЛ в ПИФ» проведено согласно проекта ТУ 21.10.60-038-05664012-2016. При проведении испытания использованы инактивированные и фиксированные охлажденным ацетоном цитологические препараты гомогената клещевых пулов, изготовленных из клещей эндемичных регионов. Каждый пул был протестирован на наличие РНК возбудителя КГЛ методом ОТ-ПЦР-РВ. В комплект поставки иммуноглобулинов флуоресцирующих входит флакон с иммуноглобулинами флуоресцирующими (МАТ-ФИТЦ анти-КГЛ). Во флаконе находится прозрачная желто-зеленая опалесцирующая жидкость без осадка. Состав - очищенный гель-фильтрацией водный раствор моноклональных антител (МАТ) мыши, специфично связывающихся с вирусом КГЛ, меченных ФИТЦ в молярном соотношении ФИТЦ/белок от 5,0 до 14,0 методом коныогироваиия, с консервантом ProClin 300 в конечной концентрации 0,25 % - 1 флакон, 1 мл. 2. Методы контроля 2.1 Внешний вид набора Знешний вид реагентов набора контролируется визуально. Наименование реагента МАТ-ФИТЦ анти-КГЛ Норма Желто-зеленая опалесцирующая жидкость без осадка При переворачивании флаконов не должно наблюдаться протечек веществ Фактически Соответствует 2.2 Комилектност В комплект набора входяз ь набора г набор реагентов и инструкция по применению. Наименование реагента Комплект Фактически МАТ-ФИТЦ анти-КГЛ 1 фл. (1 мл) Соответствует Инструкция по применению 1 щт. Соответствует 2.3 Маркировка на флаконе и коробке соответствует проекту ТУ. Подготовку «Вектор МАТ-ФИТЦ анти-КГЛ в ПИФ» проводить согласно Инструкции по применению. --- стр. 48 --- Стёкла с фиксированными препаратами гомогената клещевых пулов, изготовленных из клещей эндемичных регионов, готовы к использованию в течение одного месяца при условии хранения в плотно укупоренной посуде при температуре от 2 до 8 °С в сухом тёмном месте. 3. Обьем лабораторного испытания «Вектор МАТ-ФИТЦ анти-КГЛ в ПИФ» Определен требованиями ТУ 21.10.60-038-05664012-2016; - не менее трех положительных образцов для установления чувствительности; - не менее трех образцов для установления специфичности. В данном испытании использованы образцы, протестированые на наличие РНК возбудителя КГЛ методом ОТ-ПЦР-РВ: - 6 препаратов содержали РНК вируса КГЛ по данным ПЦР-анализа; - 6 препаратов не содержали РНК вируса КГЛ. 4. Проведение лабораторного испытания прямым иммупофлуорссцептиым методом (ПИФ) Лабораторное испытание «Вектор МАТ-ФИТЦ анти-КГЛ в ПИФ» проведено методом ПИФ согласно требований инструкции по применению набора. 5. Результаты лабораторного испытания № п/п Шифр исследованного препарата Результаты в ПИФ Данные реферспс- метода (ПЦР) 1 18 Положительный Положительный 2 19 Положительный Положительный 3 27 Положительный Положительный 4 28 Положительный Положительный 5 30 Положительный Положительный 6 33 Положительный Положительный 7 20 Отрицательный Отрицательный 8 21 Отрицательный Отрицательный 9 22 Отрицательный Отрицательный 10 23 Отрицательный Отрицательный 11 24 Отрицательный Отрицательный 12 25 Отрицательный Отрицательный 6. Интерпретация результатов лабораторного испытания Интерпретация результатов проведена согласно раздела «технические требования» ТУ 21.10.60-038-056640 12-2016: Наименование показателя Характеристика и нормы Соответствие 1 2 3 Нижний порог обнаружения Результат анализа любого инфицированного вирусом КГЛ клеточного материала в ПИФ с применением иммуноглобулинов флуоресцирующих (при их рабочем для серии разведении) должен быть положительным (наличие в препарате 3 целых клеток с характерным свечением, для оценки препарата достаточно иметь во всем мазке 30 клеток). Соответствует п. 5.3.2.6 ТУ 21.10.60- 038-05664012-2016 --- стр. 49 --- Результат анализа любого не Соответствует и. инфицированного вирусом КГЛ (при 5.3.2.7 ТУ 21.10.60- 1 Специфичность возможном инфицировании другими буньявирусами или возбудителями инфекционных заболеваний лихорадочной этиологии) клеточного материала в ПИФ с применением иммуноглобулинов флуоресцирующих (при их рабочем для еерии разведении) должен быть 038-05664012-2016 отрицательным. 7. Выводы Иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие к вируеу Крым-Копго геморрагической лихорадки «Вектор МАТ-ФИТЦ анти-КГЛ в ПИФ» серии 01.12.2017 дата изготовления 01.12.2017 соответствуют требованиям проекта ТУ 21.10.60-038- 05664012-2016. Зав. лабораторией производства средств иммунодиагностики ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» Роспотребнадзора Пьянков С.А. Зав.-лабораторией ОБТК ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» Роспотребнадзора С.В. Уеова --- стр. 50 --- 630559, рабочий поселок Кольцово Новосибирской области Телефон ОБТК: 8(383)-336-73-16 ФБУН ГНЦ ВБ "Вектор" Роспотребнадзора Отдел разработки, производства и применения средств иммунодиагностики вирусных и риккетсиозных заболеваний (отд. 03.13.00) ПАСПОРТ № 127 от 05.12.2017 Иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие к вирусу Крым-Конго геморрагической лихорадки «Вектор МАТ-ФИТЦ анти-КГЛ в ПИФ» по ТУ 21.10.60-038-05664012-2016 Номер серии: 02.12.2017 Контрольный номер ОБТК № 127 Количество в серии 20 Дата изготовления 04.12.2017 Дата выпуска продукции 05.12.2017 Наименование показателя Требования НД Результаты анализа 1 Внешний вид Желто-зеленая опалесцирующая жидкость без осадка При переворачивании флаконов не должно наблюдаться протечек веществ Желто-зеленая опалесцирующая жидкость без осадка. При переворачивании флаконов протечек веществ не наблюдалось. 2 Технические характеристики Нижний порог обнаружения Результат анализа любого инфицированного вируеом КГЛ клеточного материала в ПИФ с применением иммуноглобулинов флуоресцирующих (при их рабочем для серии разведении) должен быть положительным (наличие в препарате 3 целых клеток с характерным свечением, для оценки препарата достаточно иметь во всем мазке 30 клеток). Соответствует, протокол испытания № 4 КГЛ-ПИФ от 05.12.2017 Специфичность Результат анализа любого не инфицированного вирусом КГЛ (при возможном инфицировании другими буньявирусами или возбудителями инфекционных заболеваний лихорадочной этиологии) клеточного материала в ПИФ с применением иммуноглобулинов флуоресцирующих (при их рабочем для серии разведении) должен быть отрицательным. Соответствует, протокол испытания № 4 КГЛ-ПИФ от 05.12.2017 Комплектность Согласно требованиям ТУ п. 1.3. Соответствует Упаковка Согласно требованиям ТУ п. 1.4. Соответствует Маркировка Согласно требованиям ТУ п. 1.5 Соответствует Транспортировать при температуре от 2 °С до 8 "С в термоконтейнере. Допускается транспортирование при температуре до 27 "С не более 10-ти суток. Не допускать замораживания. Хранение в упаковке производителя должно осуществляться при температуре от 2 °С до 8 °С. Серии с истекшим сроком годности ддщ^нени 10 не подлежат. Срок годности вскрытых флаконов - в течение срока годности при т ем ^ ^ ^ ^ ^ ^5^ до 8 °С, разведенных иммуноглобулинов флуоресцирующих - не более 72 часов до ;^^^ЙЙ§Ж^^^температуре от 2 °С до 8 °С Срок годности - 1д^^цев. Заключение: ТУ 21.10.60-038-05664012-2016. Зав. ОБТК Роепотребнадз^^К М.П. Богрянцева --- стр. 51 --- ПРОТОКОЛ № 4 КГ Л-ПИФ от 05.12.2017 года лабораторного испытания медицинского изделия Иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие к вирусу Крым-Конго геморрагической лихорадки «Вектор МЛТ-ФИТЦ апти-КГЛ в ПИФ» но ТУ 21.10.60-038-05664012-2016 «Вектор МАТ-ФИТЦ анти-КГЛ в ПИФ» серия 02.12.2017 дата изготовления 04.12.2017 1. Анализируемые образцы. Лабораторное испытание иммуноглобулинов флуоресцирующих к вирусу Крым- Конго геморрагической лихорадки (КГЛ) для диагностических целей «Вектор МАТ- ФИТЦ анти-КГЛ в ПИФ» проведено согласно проекта ТУ 21.10.60-038-05664012-2016. При проведении испытания использованы инактивированные и фиксированшлс охлажденным ацетоном цитологические препараты гомогената клещевых пулов, изготовленных из клещей эндемичных регионов. Каждый пул был протестирован на наличие РНК возбудителя КГЛ методом ОТ-ПЦР-РВ. В комплект поставки иммуноглобулинов флуоресцирующих входит флакон с иммуноглобулинами флуоресцирующими (МАТ-ФИТЦ анти-КГЛ). Во флаконе находится прозрачная желто-зеленая опалесцирующая жидкость без осадка. Состав - очищенный гель-фильтрацией водный раствор моноклональных антител (МАТ) мыши, специфично связывающихся с вирусом КГЛ, меченных ФИТЦ в молярном соотношении ФИТЦ/белок от 5,0 до 14,0 методом конъюгировапия, с консервантом ProClin 300 в конечной концентрации 0,25 % - 1 флакон, 1 мл. 2. Методы контроля 2.1 Внешний вид набора Наименование реагента Норма Фактически МАТ-ФИТЦ анти-КГЛ Желто-зеленая опалесцирующая жидкость без осадка При переворачивании флаконов не должно наблюдаться протечек веществ Соответствует 2.2 Комплектносзъ набора В комплект набора входят набор реагентов и инструкция цо применению. Наименование реагента Комплект Фактически МАТ-ФИТЦ анти-КГЛ 1 фл. (1 мл) Соответствует Инструкция по применению 1 шт. Соответствует 2.3 Маркировка на флаконе и коробке соответствует ТУ Подготовку «Вектор МАТ-ФИТЦ анти-КГЛ в ПИФ» проводить согласно Инструкции по применению. Стёкла с фиксированными препаратами гомогената клещевых пулов, изготовленных из клещей эндемичных регионов, готовы к использованию в течение одного месяца при --- стр. 52 --- условии хранения в плотно укупоренной посуде при температуре от 2 до 8 °С в сухом тёмном месте. 3. Обьсм лабораторного испытания «Вектор МАТ-ФИТЦ апти-КГЛ в ИИФ» Определен требованиями ТУ 21.10.60-038-05664012-2016; - не менее трех положительных образцов для установления чувствительности; - не менее трех образцов для установления специфичности. В данном испытании использованы образцы, протестированые на наличие РЫК возбудителя КГЛ методом ОТ-ПЦР-РВ: - 6 препаратов содержали РНК вируса КГЛ по данным ПЦР-аиализа; - 6 препаратов не содержали РНК вируса КГЛ. 4. Проведение лабораторного испытания iipiiivibiM иммунофлуорссценгпым методом (ПИФ) Лабораторное испытание «Вектор МАТ-ФИТЦ анти-КГЛ в ПИФ» проведено методом ПИФ согласно требований инструкции по применению набора. 5. Результаты лабораторного испытания № п/п Шифр исследованного препарата Результаты в ПИФ Данные референс- метода (ПЦР) 1 18 Положительный Положительный 2 19 Положительный Положительный 3 27 Положительный Положительный 4 28 Положительный Положительный 5 30 Положительный Положительный 6 33 Положительный Положительный 7 20 Отрицательный Отрицательный 8 21 Отрицательный Отрицательный 9 22 Отрицательный Отрицательный 10 23 Отрицательный Отрицательный 11 24 Отрицательный Отрицательный 12 25 Отрицательный Отрицательный 6. Интерпретация результатов лабораторного испытания Интерпретация результатов проведена согласно раздела «технические требования» ТУ 21.10.60-038-056640 12-2016: Наименование показателя Характеристика и нормы Соответствие 1 2 3 Чувствительность Результат анализа любого инфицированного вирусом КГЛ клеточного материала в ПИФ с применением иммуноглобулинов флуоресцирующих (при их рабочем для серии разведении) должен быть положительным (наличие в препарате 3 целых клеток с характерным свечением, для оценки препарата достаточно иметь во всем мазке 30 клеток). Соответствует н. 5.3.2.6 ТУ 21.10.60- 038-05664012-2016 Специфичность Результат анализа любого нс инфицированного вирусом КГЛ (при возможном инфицировании другими Соответствует и. 532.1 ТУ 21.10.60- 038-05664012-2016 --- стр. 53 --- 7 буньявирусами или возбудителями инфекционных заболеваний лихорадочной этиологии) клеточного материала в ПИФ с применением иммуноглобулинов флуоресцирующих (при их рабочем для серии разведении) должен быть отрицательным. 1. Выводы Иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие к вирусу Крым-Коиго геморрагической лихорадки «Вектор МАТ-ФИТЦ анти-КГЛ в ПИФ» серии 02.12.2017 дата изготовления 04.12.2017 соответствуют требованиям проекта ТУ 21.10.60-038- 05664012-2016. Зав. лабораторией производства средств иммунодиагностики ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» Роспотребнадзора Зав. лабораторией ОБТК ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» Роспотребнадзора