Иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие к вирусу Западного Нила "Вектор ПКАТ-ФИТЦ анти-ЗН в ПИФ" по ТУ 9389-039-05664012-2016 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 2 ---
1. НАЗНАЧЕНИЕ
1.1. Полное название набора
Иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие к вирусу Западного Нила
«Вектор ПКАТ-ФИТЦ анти-ЗН в ПИФ» по ТУ 9389-039-05664012-2016, далее -
иммуноглобулины флуоресцирующие.
Иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие к вирусу Западного Нила
«Вектор ПКАТ-ФИТЦ анти-ЗН в ПИФ» представляют собой очищенный гель-
фильтрацией раствор поликлональных иммуноглобулинов (ПКАТ) класса G кролика,
специфично связывающихся с вирусом Западного Нила, меченных ФИТЦ методом
конъюгирования, с консервантом Proclin 300 в конечной концентрации 0,25 %.
1.2. Предназначение набора и его диагностическая роль
Иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие к вирусу Западного Нила
«Вектор ПКАТ-ФИТЦ анти-ЗН в ПИФ» предназначены выявления прямым
иммунофлуоресцентным методом (ПИФ) антигенов вируса Западного Нила в мазках-
отпечатках секционного материала, а также в препаратах, приготовленных из культур
клеток или мозговой ткани мышей после пассажа инфекционного материала; при
проведении клинической лабораторной диагностики лихорадки Западного Нила,
специфической индикации патогенных биологических агентов, эпидемиологическом
мониторинге.
Данный метод диагностики основан на реакции антиген-антитело. Суть метода
заключается в специфической индикации вирусных антигенов непосредственно в
клиническом материале, содержащем вирус Западного Нила с помощью специфических
антител, меченных флуоресцеин изотиоцианатом (ФИТЦ). Образующийся при этом
комплекс антиген-антитело обнаруживается по характерной ярко-зеленой флуоресценции
в сине-фиолетовых лучах люминесцентного микроскопа.
1.3. Область применения набора
Область применения иммуноглобулинов флуоресцирующих - клиническая
лабораторная диагностика лихорадки Западного Нила.
Иммуноглобулины флуоресцирующие могут быть использованы в лабораториях
специализированных противоэпидемических бригад Роспотребнадзора (без накопления
возбудителя вирусологическими методами), а также в изолированных лабораториях
--- стр. 3 ---
специализированных учреждении других министерств и ведомств, в том числе
министерства обороны.
2. ХАРАКТЕРИСТИКА МЕДИЦИНСКОГО ИЗДЕЛИЯ ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ
ИИ ВИТРО
2Л. Внешний вид - желто-зеленая опалесцирующая жидкость без осадка.
2.2. Состав иммуноглобулинов диагностических флуоресцирующих к вирусу Западного
Нила «Вектор ПКАТ-ФИТЦ анти-ЗН в ПИФ»: очищенный гель-фильтрацией раствор
поликлональных иммуноглобулинов (ПКАТ) класса G кролика, специфично
связывающихся с вирусом Западного Нила, меченных ФИТЦ методом
конъюгирования, с консервантом Proclin 300 в конечной концентрации 0,25 %.
Иммуноглобулины флуоресцирующие расфасованы по 1 мл во флаконы с
навинчивающейся крышкой из пластмассы, по 1 флакону в коробке картонной, с
инструкцией по применению.
Титр рабочего разведения серии иммуноглобулинов флуоресцирующих указан на
этикетке флакона и в паспорте серии.
2.3 Количество анализируемых проб
1 флакон (1 мл) с иммуноглобулинами диагностическими флуоресцирующими к
вирусу Западного Нила «Вектор ПКАТ-ФИТЦ анти-ЗН в ПИФ» рассчитан на проведение
не менее 50 исследований.
3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
3.1. Нижний порог обнаружения. Результат анализа любого инфицированного
вирусом Западного Нила клеточного материала в ПИФ с применением иммуноглобулинов
флуоресцирующих (при их рабочем для серии разведении) должен быть положительным
(наличие в препарате 3 целых клеток с характерным свечением, для оценки препарата
достаточно иметь во всем мазке 30 клеток).
3.2. Специфичность. Результат анализа любого не инфицированного вирусом
Западного Нила (при возможном инфицировании другими флавивирусами или
возбудителями инфекционных заболеваний лихорадочной этиологии) клеточного
материала в ПИФ с применением иммуноглобулинов флуоресцирующих (при их рабочем
для серии разведении) должен быть отрицательным.
4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ ПРИ РАБОТЕ С НАБОРОМ
--- стр. 4 ---
Работу с материалом, зараженным или подозрительным на зараженность вирусом
Западного Нила, проводят в соответствии с требованиями санитарно-эпидемиологических
правил по безопасности работы с микроорганизмами I-II групп патогенности (опасности)
(СП 1.3.3118-13), санитарных правил «Профилактика лихорадки Западного Нила» (СП
3.1.7.3107-13) и методических указаний «Порядок организации и проведения
лабораторной диагностики лихорадки Западного Нила в лабораториях территориального,
регионального и федерального уровней.
Потенциальный риск применения набора класса 26 (Приказ Министерства
Здравоохранения РФ № 4н от 06.06.2012).
4.1 Необходимость обучения персонала
Исследования материала, зараженного или подозрительного на заражение вирусом
Западного Нила, могут выполнять специалисты не моложе 18 лет с высшим и средним
профессиональным образованием, окончившие соответствующие курсы
профессиональной переподготовки по специальности "Вирусология" и/или
"Бактериология" с основами безопасной работы с патогенными биологическими агентами
(ПБА) 1-П групп, не имеющие противопоказаний к лечению специфическими препаратами
и имеющие допуск к работе с ПБА II-IV групп на основании приказа руководителя
учреждения. Специалисты, проводящие исследования, должны иметь необходимые
профессиональные навыки работы с биохимическими реактивами и современным
лабораторным оборудованием.
4.2 Меры безопасности, позволяющие предохранять оператора
Иммуноглобулины флуоресцирующие содержат в своем составе в качестве
консерванта РгоСНп 300, который может абсорбироваться через кожу и является
сенсибилизирующим агентом. При попадании на кожу или в глаза, необходимо
немедленно промыть водой эти участки тела.
Для проведения исследования используется монтировочно-иммерсионная
жидкость (в состав набора не входит), содержащая азид натрия в концентрации 0,01 %
(CAS № 26628-22-8). В используемой концентрации данный реагент не является опасным.
Однако при работе с ним следует соблюдать осторожность и не допускать попадания на
кожу и слизистые; при попадании немедленно промыть пораженное место большим
количеством проточной воды. При проглатывании следует выпить 0,5 л теплой воды. В
случае недомогания обратиться к врачу и вызвать рвоту. Азид натрия может реагировать с
лабораторными водопроводными системами с образованием азидов свинца и меди.
Данные соединения взрывоопасны. Для предотвращения реакции образования азидов
--- стр. 8 ---
7.4.4. Препарат на стекле выдержать 15 мин во влажной камере, а препарат в лунке
планшета вьщержать в термошейкере при перемешивании при температуре от 2 °С до 8
°С.
7.4.5. Препарат на стекле ополоснуть водой очищенной и промыть раствором ФСБ при
встряхивании (желательно покачивание на аппарате для встряхивания жидкостей),
препарат в лунке планшета осушить аспирацией жидкости.
7.4.6. Повторить процедуры 7.2.4. и 7.2.5. еще 2 раза по 10 - 15 мин при температуре 37
°С со сменой раствора ФСБ).
7.4.7. Стёкла ополоснуть дистиллированной водой и высушить. Планшет с 250 мкл
раствора ФСБ в лунке готов к микроскопическому анализу.
7.4.8. На высушенные препараты на стекле нанести по капле монтировочно
иммерсионной жидкости, покровные стёкла и просмотреть их с помощью не
инвертированного люминесцентного микроскопа.
8. РЕГИСТРАЦИЯ И УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ
Антигены вируса Западного Нила обнаруживаются в виде яркого зеленого
диффузного (или зернистого) свечения всей цитоплазмы или её отдельных участков на
бледном фоне окружающих клеток, не поражённых вирусом. На поздних стадиях
возможно гранулярное зеленое свечение, преимущественно в краевой зоне цитоплазмы.
Положительным результатом считать наличие в препарате 3 целых клеток с
характерным свечением. Для оценки препарата достаточно иметь во всем мазке 30 клеток.
Наличие в таком препарате менее 3 светящихся клеток считать отрицательным
результатом.
9. УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ
Срок годности иммуноглобулинов флуоресцирующих 12 месяцев. Хранение
иммуноглобулинов флуоресцирующих в упаковке производителя должно осуществляться
при температуре от 2 °С до 8 °С. Серии иммуноглобулинов флуоресцирующих с
истекшим сроком годности применению не подлежат. Срок годности вскрытого набора -
в течение срока годности при температуре от 2 °С до 8 °С, разведенных
иммуноглобулинов флуоресцирующих не более 72 часов до использования при
температуре от 2 °С до 8 °С.
Транспортировать иммуноглобулины флуоресцирующие следует крытым
транспортом (автомобильным, железнодорожным либо воздушным) в соответствии с ТУ
9398-066-05664012-2016 при температуре от 2 °С до 8 °С в термоконтейнере. Допускается
транспортирование при температуре до 27 °С не более 10 суток. Не допускать
замораживания.
8
--- стр. 9 ---
10. ИНФОРМАЦИЯ ПО БЕЗОПАСНОЙ УТИЛИЗАЦИИ
Использованные флаконы, наконечники, перчатки, ветошь для обработки
поверхностей еобирают в пластиковые закрывающиеся емкости, выносят с целью
последующей инактивации соглаено требованиям СанПиН 2.1.7.2790-10 и СП 1.3.3118-13.
Иммуноглобулины флуореецирующие е иетекшим сроком годности, вскрытые, но не
иепользованные наборы, а также наборы с поврежденной упаковкой, утилизируют по
классу Б, как эпидемиологически опасные отходы СанПиН 2.1.7.2790-10 и СП 1.3.3118-13.
11. ГАРАНТИЙНЫЕ ОБЯЗАТЕЛЬСТВА ПРОИЗВОДИТЕЛЯ
Предприятие-производитель гарантирует соответетвие функциональных
характеристик иммуноглобулинов флуоресцирующих требованиям, указанным в
технической и эксплуатационной документации, в течение установленного срока годности
(12 месяцев) при еоблюдении всех условий транспортирования, хранения и применения.
Рекламации на качеетво иммуноглобулинов флуоресцирующих «Вектор МАТ-
ФИТЦ анти-КГЛ в ПИФ» направлять на предприятие-изготовитель Федеральное
бюджетное учреждение «Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии
«Вектор» Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и
благополучия человека (ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» Роепотребнадзора), 630559, Роееия,
Новосибирская область, рабочий поселок Кольцово, тел. (383) 336-60-10, факе (383) 336-
74-09.
При выявлении побочных действий, не указанных в инетрукции по применению
иммуноглобулинов флуоресцирующих, нежелательных реакций при его использовании,
фактов и обстоятельств, создающих угрозу жизни и здоровью граждан и медицинских
работников при применении иммуноглобулинов флуоресцирующих, рекомендуется
направить сообщение на предприятие-изготовитель ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор»
Роспотребнадзора по адрееу, указанному выше, и в уполномоченную гоеударственную
регулирующую организацию в еоответствии с дейетвующим законодательетвом.
«Только для диагностики ин витро».
Зав ОБТК
ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» Роепотребнадзора
- у '
I Зав лабораторией
к производства средств иммунодиагностики
■ ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» Роспотребнадзора
■ За
I ^
I
С.А. Пьянков
М.П. Богрянцева
СОГЛАСОВАНО
Генеральный директор
ООО «ВБ1МПЕЛ-МЕДЦЕНТР>/ .К. Варнавичус
,р 1 ДЕК 2017201 г.
--- стр. 10 ---
I Приложение
РЕЗУЛЬТАТЫ КЛИНИЧЕСКОЙ АПРОБАЦИИ МИ
«Иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие
к вирусу Западного Нила «Вектор ПКАТ-ФИТЦ анти-ЗН в ПИФ»
по ТУ 9389-039-05664012-2016
В ходе клинических испытаний с использованием 288 положительных проб,
содержащих суспензии клеток Vero, инфицированные вирусом Западного Нила (каждая на
2-х сериях набора), и на отрицательных пробах, содержащих суспензии клеток Vero, не
инфицированные вирусом Западного Нила (96 проб на двух сериях МИ, содержащих
суспензии клеток Vero, инфицированные гетерологичным вирусом КГЛ штамм
«Волгоград-Ростов» ROS/TI28017; 96 проб на двух сериях МИ, содержащих суспензии
клеток Vero, инфицированные гетерологичным вирусом КГЛ штамм «Волгоград-Ростов»
ROS/TI28044; 96 проб на двух сериях МИ, содержащих суспензии клеток Vero,
инфицированные гетерологичным вирусом КГЛ штамм «Астрахань-Ставрополь»
STV/HU29223) - суммарно на 288 пробах (каждая на 2-х сериях набора), доказана
диагностическая эффективность МИ «Вектор ПКАТ-ФИТЦ анти-ЗН в ПИФ»:
- при исследовании 576 положительных проб (288 проб, содержащих вирус
Западного Нила, на 2-х сериях набора) положительный результат получен в 576 случаях.
Диагностическая чувствительность - не менее 99 % с доверительной вероятностью 90 %;
- при исследовании 576 отрицательных проб, содержащих суспензии клеток Vero,
не инфицированные вирусом Западного Нила (96 проб на двух сериях МИ, содержащих
суспензии клеток Vero, инфицированные гетерологичным вирусом КГЛ штамм
«Волгоград-Ростов» ROS/TI28017; 96 проб на двух сериях МИ, содержащих суспензии
клеток Vero, инфицированные гетерологичным вирусом КГЛ штамм «Волгоград-Ростов»
ROS/TI28044; 96 проб на двух сериях МИ, содержащих суспензии клеток Vero,
инфицированные гетерологичным вирусом КГЛ штамм «Астрахань-Ставрополь»
STV/HU29223) - суммарно на 288 пробах (каждая на 2-х сериях набора) отрицательный
результат получен в 576 случаях. Диагностическая специфичность - не менее 99 % с
доверительной вероятностью 90 %.
--- стр. 11 ---
в данном
прошнуровано,
пронумеровано и скреплено
печатью листов
ДОЛЖНОСТЬ, подпись
--- стр. 12 ---
ФБУН ГНЦ ВБ "Вектор"
Отдел разработки, производства и
применения средств иммунодиагностики
вирусных и риккетсиозных заболеваний
(отд. 03.13.00)
630559 Кольцово Новосибирской
Телефон ОБТК: 8(383)-336-73-16
П А С П О Р Т № 121 от 16.12.2016
Иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие к вирусу Западного Нила
«Вектор ПКАТ-ФИТЦ анти-ЗН в ПИФ»
по ТУ 9389-039-05664012-2016
Номер серии: 02.12.2016
Количество в серии 20
Дата выпуска продукции 16.12.2016
Контрольный номер ОБТК № 121
Дата изготовления 07.12.2016
Анализ выполнен по проекту ТУ 9389-039-05664012-2016
Наименование показателя Требования НД Результаты анализа
1 Внешний вид Желто-зеленая опалесцирующая
жидкость без осадка
При переворачивании флаконов не
должно наблюдаться протечек веществ
Желто-зеленая опалесцирующая
жидкость без осадка.
При переворачивании флаконов
протечек веществ не
наблюдалось.
2 Технические характеристики
Нижний порог
обнаружения
Результат анализа инфицированного
вирусом Западного Нила клеточного
материала в реакции прямой
иммунофлуоресценции с применением
иммуноглобулинов флуоресцирующих в
рабочем разведении должен быть
положительным
Соответствует, протокол
испытания № 1 ЗН-ПИФ от
10.12.2016
Специфичность Результат анализа не инфицированного
вирусом Западного Нила клеточного
материала в реакции прямой
иммунофлуоресценции с применением
иммуноглобулинов флуоресцирующих в
рабочем разведении должен быть
отрицательным
Соответствует, протокол
испытания № 1 ЗН-ПИФ от
10.12.2016
Комплектность Согласно требованиям ТУ п. 1.3. соответствует
Упаковка Согласно требованиям ТУ п. 1.4. соответствует
Маркировка Согласно требованиям ТУ п. 1.5 соответствует
Транспортировать при температуре от 2 “С до 8 “С в термоконтейнере. Допускается транспортирование
при температуре до 27 ° С не более 10-ти суток. Не допускать замораживания.
Хранение в упаковке производителя должно осуществляться при температуре от 2 °С до 8 °С. Серии с
истекшим сроком годности применению не подлежат. Срок годности вскрытых флаконов - в течение
срока годности при температуре от 2 °С до 8 °С, разведенных иммуноглобулинов флуоресцирующих
не более 72 часов до использования при температуре от
Срок годности - 12 месяцев.
Заключение: соответствует проекту ТУ 9.
Зав. ОБТК ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» М.П. Богрянцева
--- стр. 13 ---
ФБУН ГНЦ ВБ "Вектор"
Отдел разработки, производства и
применения средств иммунодиагностики
вирусных и риккетсиозных заболеваний
(отд. 03.13.00)
630559 Кольцово Новосибирской
Телефон ОБТК; 8(383)-336-73-16
П А С П О Р Т № 120 от 16.12.2016
Иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие к вирусу Западного Нила
«Вектор ПКАТ-ФИТЦ анти-ЗН в ПИФ»
по ТУ 9389-039-05664012-2016
Номер серии: 01.12.2016
Количество в серии 20
Дата выпуска продукции 16.12.2016
Контрольный номер ОБТК № 120
Дата изготовления 05.12.2016
Анализ выполнен по проекту ТУ 9389-039-05664012-2016
, Наименование показателя Требования НД Результаты анализа
1 1 Внешний вид Желто-зеленая опалесцирующая
жидкость без осадка
При переворачивании флаконов не
должно наблюдаться протечек веществ
Желто-зеленая опалесцирующая
жидкость без осадка.
При переворачивании флаконов
протечек веществ не
наблюдалось.
2 Технические характеристики
Нижний порог
обнаружения
Результат анализа инфицированного
вирусом Западного Нила клеточного
материала в реакции прямой
иммунофлуоресценции с применением
иммуноглобулинов флуоресцирующих в
рабочем разведении должен быть
положительным
Соответствует, протокол
испытания № 1 ЗН-ПИФ от
10.12.2016
Специфичность Результат анализа не инфицированного
вирусом Западного Нила клеточного
материала в реакции прямой
иммунофлуоресценции с применением
иммуноглобулинов флуоресцирующих в
рабочем разведении должен быть
отрицательным
Соответствует, протокол
испытания № 1 ЗН-ПИФ от
10.12.2016
Комплектность Согласно требованиям ТУ п. 1.3. соответствует
Упаковка Согласно требованиям ТУ п. 1.4. соответствует
Маркировка Согласно требованиям ТУ п. 1.5 соответствует
Транспортировать при температуре от 2 “С до 8 “С в термоконтейнере. Допускается транспортирование
при температуре до 27 “С не более 10-ти суток. Не допускать замораживания.
Хранение в упаковке производителя должно осуществляться при температуре от 2 °С до 8 °С. Серии с
истекшим сроком годности применению не подлежат. Срок годности вскрытых флаконов — в течение
срока годности при температуре от 2 °С до 8 °С, разведенных иммуноглобулинов флуоресцирующих -
не более 72 часов до использования при температуре от 2 °С до 8 °С
Срок годности - 12 месяцев.
Заключение: соответствует проекту ТУ
Зав. ОБТК ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор»
-2016.
М.П. Богрянцева
--- стр. 14 ---
ПРОТОКОЛ № 1 ЗН - ПИФ от 10.12.2016
лабораторного испытания
медицинского изделия
«Иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие к вирусу Западного Нила
«Вектор ПКАТ-ФИТЦ анти-ЗН в ПИФ»
по ТУ 9389-039-05664012-2016
т
серия 01.12.2016 дата изготовления 05.12.2016
серия 02.12.2016 дата изготовления 07.12.2016
1. Анализируемые образцы
Лабораторные испытания проведены в соответствии с проектом ТУ 9389-039-
05664012-2016.
При проведении испытания использованы инактивированные и фиксированные
охлажденным ацетоном цитологические препараты:
зараженная культура клеток Vero, гомогенаты комариных пулов, изготовленных из
комаров эндемичных регионов. Каждый препарат был протестирован и подтвержден на
наличие РНК возбудителя ВЗН методом ОТ-ПЦР-РВ.
В комплект поставки медицинского изделия - Иммуноглобулины диагностические
флуоресцирующие к вирусу Западного Нила «Вектор ПКАТ-ФИТЦ анти-ЗН в ПИФ»
входит 1 флакон с иммуноглобулинами флуоресцирующими, инструкция по применению
и.паспорт на серию.
Во флаконе находится желто-зеленая опалесцирующая жидкость без осадка. Состав -
очищенный гель-фильтрацией раствор поликлональных антител (ПКАТ) мыши (ФБУН
ГНЦ ВБ «Вектор»), специфично связывающихся с вирусом Западного Нила, меченных
ФИТЦ («Sigma-Aldrich», США, кат. № F1628) в молярном соотношении ФИТЦ/белок от
5,0 до 14,0 методом конъюгирования, с консервантом РгоСИп 300 («Sigma-Aldrich», США,
кат. №48915-U) в конечной концентрации 0,25 %, воду очишенную (ФС.2.2.0020.15).
2. Методы контроля
2.1 Внешний вид набора
Серия Норма Фактически
серия 01.12.2016 дата
изготовления 05.12.2016
Желто-зеленая опалесцирующая жидкость без
осадка
При переворачивании флаконов не должно
наблюдаться протечек веществ
Соответствует
серия 02.12.2016 дата
изготовления 07.12.2016
Желто-зеленая опалесцирующая жидкость без
осадка
При переворачивании флаконов не должно
наблюдаться протечек веществ
Соответствует
2.2 Комплектность медицинского изделия
В комплект поставки Иммуноглобулинов диагностических флуоресцирующих к вирусу
Западного Нила «Вектор ПКАТ-ФИТЦ анти-ЗН в ПИФ» входит 1 флакон с
иммуноглобулинами флуоресцирующими, инструкция по применению и паспорт на
серию.
2.3 Маркировка на флаконе и коробке соответствует проекту ТУ
--- стр. 15 ---
Подготовку Иммуноглобулинов диагностических флуоресцирующих к вирусу
Западного Нила «Вектор ПКАТ-ФИТЦ анти-ЗН в ПИФ» к проведению иееледования
проводили согласно проекту Инструкции по применению.
Планшет с фиксированными препаратами: зараженная культура Vero, гомогенаты
комариных пулов, изготовленных из комаров эндемичных регионов, готовы к
использованию в течение одного месяца при условии хранения в плотно укупоренной
посуде при температуре от 2 до 8 °С в сухом тёмном месте.
3. Объем лабораторного испытания «Вектор ПКАТ-ФИТЦ анти-ЗН в ПИФ»
Определен требованиями ТУ 9389-039-05664012-2016.
- не менее трех положительных образцов для установления чувствительности;
- не менее трех образцов для установления специфичности.
В данном испытании использованы образцы, в которых наличие или отеутствие РНК
вируса ЗН подтверждено методом ОТ-ПЦР-РВ:
- 6 препаратов содержали РНК вируса ЗН по данным ПЦР-анализа;
- 6 препаратов не содержали РНК вируса ЗН, а содержали РНК вируса Крым-Конго
геморрагической лихорадки.
4. Проведение лабораторного испытания прямым иммунофлуоресцентным
методом (ПИФ)
Лабораторное испытание Иммуноглобулинов диагностичееких флуоресцирующих к
вирусу Западного Нила «Вектор ПКАТ-ФИТЦ анти-ЛЗН в ПИФ» проведено методом
ПИФ в соответствии с проектом инструкции по применению и проектом ТУ.
5. Результаты лабораторного испытания
№ п/п Результаты в ПИФ Данные метода ПЦР
серия 01.12.2016 дата
изготовления 05.12.2016
серия 02.12.2016 дата
изготовления 07.12.2016
1
||||||||^|положительный ||||1|||||т1оложительный
Положительный
2
|^^|положительный |^^^|полож ительны й
Положительный
3
^^Шзоложительный ^^^|положительный
Положительный
4
^^111оложительный ^^^^^Толожительный
Положительный
5
^^^Кзоложительный !|||||^11оложительный
Положительный
6
m z ! M 1И|^К1оложительный
Положительный
--- стр. 16 ---
7
^^^|отрицательный тИ этрицательны й
Отрицательный
8
Ш^^Отрицательный ^^^|отрицательный
Отрицательный
9
Ш ^Кэтрицательный ^^^|отрицательный
Отрицательный
10
||!!!^|отрицательный ^^^|отрицательный
Отрицательный
11
||!!|отри цательн ы й ||!!!^^|отрицательный
Отрицательный
12
^^^1^3трицательный ||!1!|Ц])трицательный
Отрицательный
6. Интерпретация результатов лабораторного испытания
Интерпретация результатов проведена согласно раздела «технические требования»
Наименование
показателя
Характеристика и нормы Соответствие
Чувствительность Результат анализа инфицированного
вирусом ЗН клеточного материала в
реакции прямой иммунофлуоресценции с
применением иммуноглобулинов
флуоресцирующих в рабочем разведении
должен быть положительным
Соответствует п.
5.3.2.6 ТУ 9389-039-
05664012-2016
Специфичность Результат анализа не инфицированного
вирусом ЗН клеточного материала в
реакции прямой иммунофлуоресценции с
применением иммуноглобулинов
флуоресцирующих в рабочем разведении
должен быть отрицательным
Соответствует п.
5.3.2.7 ТУ 9389-039-
05664012-2016
7. Выводы
Иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие к вирусу Западного Нила «Вектор
ПКАТ-ФИТЦ анти-ЗН в ПИФ» серии 01.12.2016 дата изготовления 05.12.2016 и серии
02.12.2016 дата изготовления 05.12.2016 соответствуют требованиям проекта ТУ 9389-
039-05664012-2016.
Зав. лабораторией
производства средств иммунодиагностики
ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» Роспотребнадзора
Зав. лабораторией ОБТК
ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» Роспотребнадзор!
C.A. Пьянков
С.В. Усова
--- стр. 17 ---
--- стр. 18 ---
копия
г. Москва, ул. Тимирязевская, д.42, к . 352
Твл/факс: (495) 977-7455 Тел.; (495) 984-69-93
e-mail: syntol@lab.ac.ru w w w .syn to l.ru
ПАСПОРТ КАЧЕСТВА
З А О « С И Н Т О Л »
«ОМ-Скрин-ЛЗН/ЛДР-РВ»
«НАБОР РЕАГЕНТОВ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ И ВДЕНТИФИКАЦИИ РНК ВИРУСОВ
ЛИХОРАДОК ЗАПАДНОГО НИЛА И ДОЖНЫ РИФТ МЕТОДОМ ПОЛИМЕРАЗНОЙ
ЦЕПНОЙ РЕАКЦИИ В РЕАЛЬНОМ ВРЕМЕНИ (ОМ-СКРИН-ЛЗН/ЛДР-РВ)
ПО ТУ 9398-001-46395995-2013»
Серия Наборов в серии / О шт. Дата изготовления*^ /9^
Пункт
ТУ Наименование показателя Требования 9398-001-46395995-2013 Результаты
контроля
1.3 Комплектность
Комплект включает 6 стрипов по 8 микропробирок
объемом 0,2 мл, две пробирки объемом 1,5 мл,
четыре пробирки объемом 0,5 мл
Соответствует
1.5 Упаковка и маркировка Пакеты типа Zip-lock, этикетки из бумаги Соответствует
Реакционная смесь в
стрипованных микропробир
ках. РС-ЛЗН/ЛДР*
Сухое вещество белого цвета Соответствует
Разбавитель, РБ^^ Прозрачная бесцветная жидкость, pH 8,8 Соответствует
1.2,
табл. 1,
п. 1,2
Внутренний положительный
контроль выделения, ВПК-
В-РНК
Сухое вещество белого цвета Соответствует
Положительный контроль
ный образец, ПКО-ЛЗН/ЛДР Сухое вещество белого цвета Соответствует
Раствор для разбавления
ПКО, ОКО Прозрачная бесцветная жидкость, pH 8,0 Соответствует
Положительный результат
ПЦР-РВ.
Регистрация сигнала в пробирках с ПКО-
ЛЗН/ЛДР по каналам FAM, R6G, ROX и Су5 Соответствует
1.2,
табл. 1,
п. 3
Отрицательный результат
ПЦР-РВ
Регистрация сигнала в пробирках с ОКО
по каналам FAM и Су5;
Отсутствие регистрации сигнала в пробирках с
ОКО по каналам R6G и ROX
Соответствует
Аналитическая
чувствительность
Регистрация сигнала в пробирках с:
СКО-ЛЗН по каналам FAM, ROX и Су5
СКО-ЛДР по каналам FAM, R6G и Су5
Соответствует
'Применания:
♦Содержит дезоксинуклеозидтрифосфаты, специфические праймеры, флуоресцентные зонды, Taq-
полимеразу, MMLV-ревертазу, РНК внутреннего положительного контроля, трегалозу для
проведения ОТ-ПЦР-РВ.
♦ ♦ Содержит ПЦР буфер (КС1, ТрисНС! (pH 8,8), MgCh, глицерол).
Заключение ОБТК: «Набор реагентов для выявления и идентификации РНК вирусов лихорадок
Западного Нила и долины Рифт методом полимеразной цепной реаюши в реальном времени
(ОМ-Скрин-ЛЗН/ЛДР-РВ) по ТУ 9398-001-46395995-2013» серии по своим показателям
соответствует требованиям технических условий.
Хранить в сухом, защищенном от света месте при температуре от плюс 2 до плюс 8 “С. Суммарный
срок хранения при температуре от плюс 9 до плюс 20 °С не должен превыщать 14 суток в течение
срока годности набора реагентов.
Транспортировать крытым транспортом (автомобильным, железнодорожным либо воздушным) при
температуре от плюс 2 до плюс 8 °С. Допускается транспортирование до 14 суток при температуре до
20 °С. ->..■
Годен до:
Начальник отдела ОБТК
КОПИЯ НА
Ф В У Н ГН Ц ВБ «В»тор. Р осп огрсбн А дзора
Зтш . О Б Т К
Н.А. Парыгина
Паспорт №
______201^г.
--- стр. 19 ---
'V
/Г
ч,
X.
>®м1
ФЬ;Д.ЕГАЛЫ-1ЛЯ СЛУЖБА п о ПАЛЗОРУ в СФЕРЕ ЗДРЛВООХРЛПВ:! II1Я
{РОСЗЛ1’АВПАЛЗОР)
РЕГИСТРАЦИОННОЕ УДОСТОВЕРЕНИЕ
НА МЕДИЦИНСКОЕ ИЗДЕЛИЕ
от 24 иоибри 2015 года № P 3I1 2015/3358
На медицинское Шделие
Набор реагентов для выявления н ндентифнкаинн PHIC вирусов лихорадок
Западного Инла и долины Рнф| мегодом нолн 1мерал 10й Heiiiioii реикцин в
реальном времени (ОМ-Скрнн-ЛЗИ/ЛД1»-1»В) но ТУ 939816-001-46395995-2013
Настоящее регистрационное удостонеренме выдано
Закрытое акционерное общество "Сннтол" (ЗЛО "Сннтол"), 1 N )cciib ,
127550, Москва, ул. Тнмирятевская, д. 42
Нрошводитсль
Закрытое акционерное общест во "Снн гол" (ЗЛО "Сннтол"), России,
127550, Москва, ул. Тнмнритевекая, д. 42
Место производства медицинского изделия
127550, Москва, ул. Тимирязевская, д. 42
Номер регистрационного досье № РД-3314/5751 от 07.03.2014
Вид медицинского изделия -
Класс иотсицишиишго риска iipiiMciieiimi медицинского изделия 3
Код Общероссийского классификатора продукции для мсдицииско 10 изделия 93 9816
Настоящее регистрационное удостоверение имеет прштожепис на 1 листе
К:- л л 'У - ч
‘ч_ ,;
. * i
7-,V
IX1
■ , .r i
Sy; -■"M
ч. ,V - > < ■ , 1
■ 'С''ЛН:
•N
У ;< 1 !
КОПИ%ВЕРНА
/г Зш ш . О Б Т К«ВУ Н ГН Ц ВБ «Вектор. ,^гРослот^бнвдзора
/э^#/ О тд ел S || б и о л о ги ч еск о го Чв! и техн о л о ги ч еск о го IS S
приKU30M Роездравиадзора o r 24 иоя1?ря 5 ,г о д0 а
допущено к ооращению на терри тории Россниекои ФеЛераи1^д
Руководтель «Федеральной c.'iyi^bi ’ "
щ
Ч.'
/
но надзору в сфере здравоохранерия • У: > v* J / к . . М.Л. Мурашко
У .-Л 0014873
S i
J й,-1т .■■■'/■■II
U ' ;
н ■
7 i S / ;
J
- — ' « * * . • . . • 7 1
/У
--- стр. 22 ---
Инструкция по применению набора сравнения -
«Набор реагентов для выявления и идентификации РНК вирусов лихорадок Западного
Нила и долины Рифт методом полимеразной цепной реакции в реальном времени (ОМ-
Скрин-ЛЗН/ЛДР-РВ) по ТУ 939816-001-46395995-2013»
УТВ П Р Ж Д иИ А
Прикгюм Рос iopa
«гг 24.11,2015 H i К652
У Т т .Р Ж Д А Н )
I ехсралкный лмре 1т>|)
(M X ) « < и н 1 0 '1 »
Л И KviyO*'*
И Н С Т Р У К Ц И Я
по ирмчемению мНябора р ш с н т м л. 1я вмян.№мия и нлеитифмкаини РН К
вирусвй лихорадок Западного И к. 1а м делимы Рнфг методом нолимерато*
иеиной реакции а реа. 1ьноч аргме-ии (О М -С крин-.13И/ЛД Р -Р В)
по Г У 9.19}М»ОМ6Л95995.2013>*
I i lA lH A ’ I R I I t i:
1.1 Полное нагнанме набора
■<М.«0ор |>eaicinoB т а рмяяюниа и и. 1ски|ф|1кцинн РНК иирм-ii.
.lMXi>pa.iuK liiMJUHoro Пила и долины Рифт меп'лом полимера itioii пашни
реакции и реальном н{жнеин (ОМ-Скрнн-ЛЗП ЛДР-РШ но T V yV>S-(Hi|
4()3').SV95-20!3>'.
f.2 Ирелназначенне набора н ею . 1на1носгичеекая роль
Набор pcaiCHii» <ЮМ-Скр||и-.ТЛ1 ЛДР-Р1Т. п|хглна|нача| « .н
качественного onpcwicima (скринюн, мониторинг) РНК вирусов .шчораюк
1ат1адного Hiua (Л1Н1 и долины Рнф т(Л Д Р ) в iipcimpaiax НК, ймлелеиных ш
нр«)б обьектов окружающей срслы, ио 1луха. насекомых. н |н > «'» к.шни'кчкнч
обраиюв, вируссол<фжандей суспензии. Онопсийном» н ауло|чинно 1.<
матери a.ia
Лиагностческаа набора рсагснп.в иключгмпса в aoiMiranovni а .,
иснольювания в поддержке .пиагноегмкм «пгнифимех-ких нвпнююО ( лмхорвлн.
Занадногчт Нилл и лолниы Рнфг) нрн исследовании ма|х‘рналн «н б«»лын<и>
(«юдозригслыгого на забо.' 1свание) и инлнкаини нято 1екных биопо 1мчсских
aicttroB (U S A ), в обьектах окружающей среды; как )\-кч>рсинои 1
предаарнтсльног«> lecra при выполненим ку. 1ыурл.1ьж >гз* н биолшичхчкою
MCHUOB нсслслованиа и илснтн<|н«кииии по.ниритспьных ку.тыур. ,i i«
ЗПН.ТСМНОЛОГНЧвСКОГО монишрингл
1.3 О бласть нрнх|снеиня набора
Облаегь прнмсненив набора клиническая ло«м*раич'иая лни 1 ш к-тка hi
жтржнж Западною Ин ш н л«злины Рифт, спсннфичсская инликлииа iiaioicHiiux
б т1Л01 ических агс(ггов. зпндемнолотическнй мещиторит. научные нхччклои;»
нив. Набор может быи. иашдьювак в учрсждсння.х ме.шцнии и злрнв(¥>хранс-
ння, внрусстлогичсских лпборлторнах Цежров 1нгиены н тпижлто.инни 1 ‘(чно
тробмадм'ра. в inrucMMO.ioiiiMecKHX службах для расшифровкн вспышек арСч.
вирусных инфекций, а также в стационарных н моби.тышх лабораториях сне-
цналишровпиных учреждений друтх мниисгерсгв н »ед«>мх1в. м том чис,-»с
Министср«1ва Обороны.
2 Ч АРА К ГК РИ С 1 И К Л IIA M IP A
Компоненты набора являются олнпрн юными.
Il.ifwp рсагапоя «О М (■крик-Л1Н/ЛЛ1'-РВ.. .к- ipcfiycr ..............
оТк-лужийиния н калибровки
2.1 Состав набора
Набор pcarcHioB соепчп н» 5 pcaiсигов.
- N r С о п а в набора
Роакцжжнм см есь в стрнповшгшх
мих^июр|>бнрмх^ К'- Д1Н.'ЛДГ
I 'a i f w M n e .i b . Р Ь
I 11илоя«мгс<(и1МЙ коктрпльныВ
, o6pa-№iL ПК<КИН/.Цр
Опнганис
сухое ясиксгво
белми иаегя
п р «> (рачм ая бататам
аяцжость
сухое книста»
бсяоюцвпаi -— ^ чеши о ивах
\ 4 I Рястаор.паразбаа-тснияГТКО, ! пгю 1рвчимввсцав1нм‘
' К ”'» i сухое м1легтао
_6елрго цвета
Объем Ка.|-М1
Ь с1 р я т «
( пробирка
1 пробирка
I пробиркаI 5 I внутренний М (ин>ж )гте.-1ъный~ [
!___! кон пить ам дслсина. ППК-В-Р11К__[_
Рсахциинная смесь в стршюванны.ч микропробирках. РГ-ДЗН/.1ДР.
расфасована в микронробнркн а арнпах объемом 0.2 ил. уцгитванныс в
менротрачный т и н м н .1сновый пакет Zip-I.ock размером 9>«12 см. состав.
>квнм«.лярнаи смесь лсхжсинуклсш 1игрнфосфашв, десять олигоиуктотгидных
праймерон. чс 1ырс флуоресцентных мжда. фермент Toq ЛНК-т>;жмсрам.
фермент MML\'-pcBcprau; синтмичссквя РНК внутреннею положнте.|ьиого
конгр«,>ля. ВП К . трегалоза.
Рв|бавн1с;1ь. РЬ. расфасован н пробирку из потипротщена о6т.емом 1.5 мл
с ывинчиваннцейся куиликой. упакованную в полизтнленовый пакет Ztp-Lock
paj.xiepoM 4>7см. с«х:1ан: ГЩР-буфер; хлорид магния: глинсрол; BibWima ПЦР,
Раствор Л.1Я разбавления ПКО, О К О . расфясоаан в пробирку иг нояипро-
ки.тена обтчгмом 1.5 мл с завинчивлюшейся крышкой, упакованную в нолизти-
.зеновын пакет Zip-Lock рнгмером 4-•» см. состав: ГЕ буфер.
--- стр. 23 ---
Иоложигсчьный кон1|111ЛЫ1ЫЙ обрапси. ПК(К11Н/ЛДР. расфасоплм н
про(>ирку иэ по1И1>ропм itfiu oi'ibcuuM 0,5 мл с «виичинаюшейся крышкой, yiu
кованную в 110лияи.1ст>вый пакет Zip-Lock ратмер»1м 6*7 см. состав: cmcci.
сн1ггстическ}|х РНК, ikj.i)4Chiiwx с помощью in и>о транскрипини с рекомби-
ианжмх 11ла1мил ptiem-T с встроенными спенифичесюши ^чкимснгами 5’ tic-
1ронслируемой области ( 5‘UTR> вируса ЛЗИ и S-сегмснга генома «нруся ЛЛР.
Внутренний положительный контртгль вылсления. ВПК-11-РНК, расфасо
ван в пробирку нт полипропилена «объемом 0,5 мл с 1авт1чивак>и1снся крыш
кой. унаковаикую в потнтгн.теновый пакет Ztp-Lock рлмером 4*7 см. состтш.
сиигегичсскаа РНК, полученная с помощью in vr/r-o транскртшин с рекомш»-
наигной nnaiMiuw р< iem- Г со встроенным специфическим фрагментом ДИК
Примечание: Ин1релнснтами. которые м<иут влиять на итмерсиия. янля
ются Т1раймеры и флуоресцентные toium . ткновной хараггеристикий кои>|>ы>.
хтя конечною п*);1Ьтоаатсля является температура отжига Та. стгетаалающая
60 ■’С. Данная хараггсристика рсвлнтус1са с помотьвг teuiwpatypiH)-
времемною режима вмн;й|фикании. слсловятсльно. сю соблюдение являемся
стрщ о обязательным,
2.2 Ко.1ичсс1я« виалитнруемы* проб
Набор реагентов рассчитан на 4Я оирс.тслсний, включая конттчшьныс
образцы
2.3 Мсго.1 нсслелпвания
ОГжаружеиие ф1»гменшв нуклеиновых кислот вирусов лихора.юь
Чана;1ного Нила н долины Рифт исиовано на иснолыоваиии мстодн
мультиплексной олжнма.жйной реакции о(^тной гранскрипции, coBMememruii
с полимерачиой ценной реакцией в реальном времени (ОТ-ПЦР-РВ) в олжпЧ
микр«')11ро6нркс.
При амплификации с помощью ОТ-ПЦР-РВ истюлыуют четыре
олигоиуклеотилных праймера, флаикируюшн.ч фрагмент 5‘ негранслируемой
области генома вируса лихорадки Западного Нила, ляа олиюиуклсотидных
праймера, ф.танкируютих фраг меит генома вируса лихорадки долины Рифт.
ши ояжоиуклсотилиы» прайиср. 1. ф.|аш™рук1Ших пукле,нюни, К 1«:л1,ги (MKI
.нутрпппсм. положигельного коитролл OT-IIHP-PB, ЛЛЛ „ЛИ 10НУЛЛ«ТПШ1 1 4Х
npanuqu, фллнкируюших НК лнутренпего ,юл..лппллкнот кпифолл
вылл laiKX. • глюке четыре флу, 1рееиентаих тоилл Пртшеее амплифлелпил
спеш„|,нч 1|ЫХ фрагмептол 1лклк>ч.етех в |юлпфчошпхс. циклах
гсмпе|>атур„ой яснатура 1ши ЛИК, .ттжнга праймеров с Х 11мплеме1плр«ым„
[ки.юловательпоствми и посяслуиипел яостройке полинуклсотялиых iKneft с
них праймеров ДНКиолимервтой с летекпией ретулилтол в режиме реллкпмх,
■ ремсии Ностонолхл ОТ- 1ЩР-РВ оеушес.вялстел ив спеииалышх приГчфах.
папрпмер, „AHK.J 2 ( 3JM. 4Й|. (ИЛИ РАН. г Санкт-Пстербур, 1, CFX '*,
(HitiRad, США), или тквиаалентных по характеристикам (ем. и. 5.1 плетоЯ|Цсй
инструкиин),
ПаГюр peaixHTOB .Н)М-Скрин-Л'И1/ЛЛР-РВ« рсмитует прсимушсствд
мультиплексиой ОТ-ПЦР-РВ в члети олполременною лылвтепил л одной пр<Л:
РНК двух вирухов, а также двух когпрапей анализа по рашым каналам детек
ции флуоресценции- Сигналы флуирссценшш регистрируются независимо атруг
01 яруга по спелующим каналам. FAM внутренний гюложитслыгый коггтроль
11Ы ЛСГКШ1Я РНК; R6G - вирус лихорадки долины Рифт; ROX - вирус ;iHxopa;iMi
3aiia.vnoio Нил*. Гу5 - внутрсиний положительный ко1Прт>ль ОТ-ПЦР-Р»
Положительный результат теста означает, что исследуемый материал со
держит РНК вирусов янхттрадок Запа;шого Ни,за н нли лоликы Рифт. Отрнца-
гельный ре гультат теста означает, что исследуемый материал не содержи! РНК
вирусов лихорадок Западного Нина и-'гтлн долины Рифт
2.4 От раннчеиия метолв
В инфи 1Шроважк 1М материале РНК внрусоп может быть не обнаруженв
по причине ингибирования ОТ-ПЦР-РВ шили исдостаточтж зффскгивгичпи
вылелеггня нуклситювых кислот Для достижения показателей аналитической
чурствигсльггости исгтлыуемый набор для вг^лсления должен обеспечивать
уффективггость выделения 1 1К на уроанс не мвисс 20 %.
Причиной получения ложноположительною рстультага является коига-
мннация на зтапс вылелегжя НК либо проведения реакции ОТ-ПЦР-РВ, Пож-
нощгюжительный рсзу.тьтаг выявяяегся с помощью отрицательных котро-гь-
иых обр.ицов выделения и ОТ-1ЩР-РВ (гг. 8 3 магтпяшсй ниструкинн).
Причиной получения ложггоогрниагслыгого результата является ингибн
|юванис ОТ-ПЦР-РВ и. или недостаточная зф||к:кгианость выде-гення НК Л<«ж-
ноотрИ1Г8гел1.ный рсту.зьтат выявляется с ггомощью внутренних положительных
контрольных гя>р.ззцоп вылсления РНК (ВПК-В-РНК) и ОТ-ПЦР-РИ (ВПК)
(п K.J настоящей инструкции)
днлгжк 1ич1:( K H F3 Л }| А .1 Н Т И Ч К ( к и к и
Х А Р А К Т К Р И С Г И К И
3.1 ЛН А.1И ТНЧ ЕСКИ К X A F A k 'lE P IK TH K H
Исследования ана.гнтических харагперистик иаСхзргг проведены на базах
Ф 1'ЬУ 4 * 4 8 ЦНИИ» Минобороны России (г. CepiHcri Посяд Мсжковскгзй
области) и (К)<) Сннюл (г Москва) в рамках исслсдоваиня «ффскгигииктн
наб»1ра и нр 4>ве;1еиия технических гкпьгтаний,
3.1.1 Ч ув с 1 йн гельнос! ь
Чувствктельносп. нс более 1.0 10' копггй РНК в I милли.тгрс прг>бы
(коггий М.1'). Данный показатель достигается при условии обьсма аликгюгы
исхо.тного материала (пробга) не мснсс I (W мкл
3.1.2 Спеинфичноси.
(■|гсинфичгюсть - ;|ожнопо. 1ожителг.1гыс и .зожноагрниагелыгыс
резульгагы при анализе обраиюв НК вирусов ди хс^о к Запалггого Нила и
долины Рифт (4 заведомо положительных обраига). а также НК вирусов
М.зрбург, Эбо.за, Дассв. .Vlanymi, Хуини. ВЭЛ, клещевого н нгшнского
»пиефалнп>в. ленгс. желтой лихорадки, ККГЛ. ТОРС; бактерии ПмШт
amhracis. }'ег$<лш /зех//Ч. СпйеЧа ЬитпеШ. Д){К человека и грызунов, кулыур
гсгсюк Vem, ( jM K и ВНК. а также PK'J (27 мпеломо огрниательных образцов)
отсутствовали.
При провслении исс.зсдоваиий наблюдалась гголиля
виутрнностиогючная, межпгччановочная и мсжссрнйния воспроизводишчть
для всех гисюжитсльных образгкж.
-U а1ИЛ1 Н(КТНЧКСКИК ХАРАКТЕРИПИКН
Клинические исследования набора ггроведсны на базе ФБУН I НЦ В 1 > flex-
тор (р.н. Кольцово. Новосибирской облвеги).
3,2.1 Днв 1нос1ическвв ч>ветви 1сл1.нпсть
Лиа1ш»,гическн чуктымикность при псслсдомиип М „рой «лгточ-
пых кул|.тур (.ируссол,рж.ще(| «илхосгн), 1 28 „рой йпшо, ичссхого магериют
и Щ пр<Л Ч.-К,-ППС10И<,ГИХ (2S8 1юж.жмтп.пмх прой|, сожфжаищх .прусы ли-
ХОРАЛХИ Ьпжхного Ц|Ш,« и ЛИХОРШ 1.Н доливы Рифт с КОП 1(енгр«ПиеЙ
l■IO'xolml^,мл, положтслы|ый рэтулкшт получен ■ 288 случ*«х. Ди.гпскчв
чеехм чукпввеелкпосп. - не менее W % с до.ер 1ггел1„,й кр„„п,хгп,ш 90 %.
.(.2.2 ;|нш | ноетнчеек.я епсинфичноет,.
; 1па|посгпчееюн1 епепифнчноаь - при псслеломпии 48 огри 1итслхнмх
(йраню., солержаиих пхесролоеичные м„|гроорг.пи1мы (.прусм алеп(ехого
пшефалига, желгоВ лихорвлхп. хпонехого тцефалита. .lenn. аенесучлхевото
пшефплпмиелта лошадей) в хоппеитрации не м енее 1.010’ вопик'мл, о,рина-
■ ечьяый ,„.ег в ПНР получен во всех 4S случшп. Лн.|-ноетачссхав спенифнч-
ность - не менег 95 % с доверительной вероятностью 90 %.
При „рожгдении исс. 1ело«и 1ин найлюлаис, полна.
»nyrpnnoi-iano»i4BM, мсжпостлнпвочнаа и нежсерийная воспроинюлнжж.х
ДЛЯ ritcx гюагожитеяьмых образцов.
4 М КРЫ Ц Р К Д О С Т 0 1 Ч )Ж Ж К -Г Н ПРИ Р А Б О Т Е С Н А Б О Р О М
Работу с маг^)наяом, зараженным или подозрительным на зараженность
вирусами лихорадок Западного Нила и датины Рифт пргиюдят в соответствии с
требованиями саиитарно-знилемнологичсских правил по безопасжкгти работы
е микроорганнчмамн 1-Л групп патогениости (опастхтги) (СП 1,3.3118-13).
методических yшv^ицЦ чОргани-мшия работы лаборагорий, использующих
--- стр. 24 ---
метолы ами/тфикиммп хукленномх к | 4СЛ01 п()>( ра5и<е с материалом,
содержащим MHKpoopiaHHJMu [-IV ipynn 1штогеннос1и »> [M V 1.5.2569-091.
МУ3.1.Ш 27-01 «Сбор, учег и подпггоака к лаборатрипму исслс.юнянни)
KpoBocix:yfUHx ч.'юннсшипгнч - nq»;H( 4'4iiKOB возбуди гелей 11р и р с> .'1Ж >-омягоп|>1х
инфекций» и меп>лнчсских указаний «MeponpHimifl по борьбе с зихпрадкой
^аналного Нила н атсррнп)(нт Российской Фелерапин» <МУ 3.1.5 2б<Ю-им.
Необходимо одноярцмс 1И10 обеспечить и соблюдать исрсона.юм праои.тп
бнологи'кх'кой бсзопасткти и требования к opraitHtaumi и прове.и'нню даиных
работ с целью предогвращення комтаминаиин нужленновымн кислогамн н (или)
амп.тконами носледусмыч про(> ломешений и оборудования
Потенциальный риск 1гримспе1|ия наб^^ ~ класс 3 {и 9 прн.и>жст 1я S r 2
к приказу Мингтрвва России от ()6.0й.2012 -N * 4н).
4.1 Необкодинос-ть обучении персоижта
Д||я выполнения анализа с помошью . >1анного набора реагентов не<хЗчп-
лнмо участие епеииалнста с высшим медицинским пбраюввмнем. npoiiitMiiicru
обучемнг на лицензированных курсах спсциа.зншиии по рабо|с с ПВЛ I-
П фугш iiaTOfCHHOCiH и по ПЦГ-диа 1 нистике. а также .забората со срсдинм
смецнальимм медицинским обрвюваинем. Персопа .1 лолжен иметь навыки ра
боты с биохимическими реактивами м совреиенным табораториым оборулова-
мнем
4.2 М еры безопасиоети. кптолямнцие пре.тохрвмнгь операюра
При рвбогс с 11.з6ор(ш соблюдать грсбовини» П К .Т Р 52905-2007 «ЛабО'
рлторин мелмцннскцс. Зребоваияя безопасности». Псе kvimiiohcmiu набора в
используемых коицет^тациях яя.зяются нетоксичными, вредного алкаиня на
организм оператора не оказывают. При работе с набором следует соблюдать
обычные меры прелослоръуясцости оля лаб^трвтормй
• пользоваться .забораторнымн перчатками и надевать лвбирагорныс хи-
.заты;
- КС принимать пищу, пигь или курить в лабораторных помешениях;
- после работы с пробами и реактивами следует пцяте.зьно вымыть руки
водой с мылом.
Избегать кинтакта с кожей, глазами и с.зизнстымн оболочками, при тн ш -
лапин на них компонентов паГюра промыть бо.тьшны митчеством воды. При
приеме внутрь компонентов набора реазентов за ме.тнцннской помощью слелу-
ег обратиться немед-зенно.
4.3 Необходимые меры нрсдоеторожностя в 01нтненни влнинлн фн-
тических факторов
Прн использовании н.тбора реагентов нет нсобхолим(к: 1и принимать ме
ры прсдостгзрожноьтн я отношении в.тияння матигных [юлей. внстннх >лек-
|рнческ11Х аоз.зействий. злсктрисгатичсских разрядов, .(явления и.зк перепалон
.тая.|ення, перегрузки, неточникоя термическою воспламежния.
4.4 Иеобкодимыс меры нрмоггорожногзн п р о т в сиеина.зьиых рис
ков
При нспо.тьзованцн набора pcareinuB н о hcx^ xOjIhmocth принимать ме
ры предосторожности против любых спитальных рисков при нспо.зьзовлнми
или |>еализаинн. поскольку в состав ихделия не входят вещества человеческого
или животного происхождения с учетом их потеицнальной иифек 11нои1К)Й при-
рЗ'ЛЫ .
5 О К О Р У Л О В А Н И 1 И М Л Т Р Р Н Л Л Ы . Н К О БЧ О Д М М М Р ПРИ
Р Л К О Т Е С Н А БО Р О М
5.1 Рек«1менлусмое измсритс. 1ьное обортдоаание
Прибор .'щя ПН Р-PH зарегмстрнровямный в РФ как мелииннское
ит.тс.1ие н ичеюшпй каналы детекции, соответствумщис красителям FAM. R6G,
КО Х . Су5 (;1нбо их слсктралышм аналогам) со следукнцимн характернстиками
- (№1 - 4Ч0нм'520нм. - 525нм.‘550нм. 2fc3 550 hm/5R0iim.
,% f4 6.50|Ш'665ни). например. «АИК-32 (32М. 48)». CFX-96.
5.2 Указания о необходимости испи. 1ьм>ннння специального
оборудованнн
1 ’лботу с зыбо^юм слелусз npoetuiHTb я итзешлызом боксе с
бактсрнцнлноГ| .naMiu4i о<знример. ЬАН-ПиГ-мЛаминор-С». (КХ> мЛамиипрныс
системы», г. Миасс. России, усгановлениом а рябочей зоне 3 (М У I 3.2569-09),
5..1 Дозируиицис усзрпмсгва
Нвбо|> автимцтцчсскнх пипеток переменного обьсма нм 0..5-10 мк.т.
2-20 мкл. 10-100 мкд и на 20-200 мкл
5.4 Друтос испо.1Ь'зусмое обору.шнание
Мньри11СИтрифуга-вор 1екс (например. ><IIhiu)oicmii -9 ())»).
микроиент(>ифу1а .шя сгршюв (наирнмер, «Циклотсмп-903»),
штатив гнив «ixoFrccTC».
штатив для ^заботы стт сфннамн (каг. номер С'!'*(.5. (Х Х К 'н н го л):
штатиам .хзя нак1>не*{нкков. мнь|чн1ро6пр«Н( на 0.5 и 1 .5 м.т:
хо.’ю л и тли к ил 2-8 *0 .
5.5 .Забораторнаи посуда
IvMKOCiH для сброса наконечинков и члткринрибирок.
5.6 Материа.зы н реазенгм. не акодитие в епетая набора
Одноразовые наконечники хзя инпеток иерсменноги «збьема с
а трокмышм барьс^том до 10 мкл.
о.тноразовые наконечники хзя пипеток псремсино(г> обьсма с
а зро'ю.зьиым барьером до 20 мк.п
одноразовые наконечинкн для пипеток переменного обьсма с
азрозольпым бярьерхтм до 200 мкл;
набор реагентов .зля нм;1е.зеиня ДИ КФ И К;
)‘Е-бу(|>ер (кат. номер В-014. fX X ) яСнмтол»);
отдельный ха.зат и олнораюные мс.зицннскнс перчатки;
комплект средств .зля обработки рабочего места.
6 лнл.1Н 1И РУГ.мм1: П Р О Б Ы
Получение и обрабт'тка биологического мцтериа.за. зараженного и.ти
||одо1рнтслы1(ни на заражснжкть мззбудителямн лихзфолок Западною Нила и
ЛП.1ИИМ Р>«фт. не Я1ЫЯЮ ТСЯ частью проие.1уры ана;т ш с ис 1Юльзованием набора
реат енто* «ОМ -С крмн-ЛЗН/ЛДР-РВ»,
6.1 Ти н Hcc.ie.'t.veMMi (rflpaiiioB
Материалом для исс.зслований служат npenaparu нуялсииовых кнс.ют.
ямлелеиные из проб оГзьектпв окружаюшеН среды, воздуха, насекомых, проб
к.1нннчсских образцов (цельной крови, сыворотки жили хзазмы крови,
.тейижитаркой фракции крови. СМЖ ). вируссолержашей суспензни. а также
проб биипснйнпю и аутопснйною материала.
6.2 Процедура лгьзучемив Биологичегкою мвзериала
Д;|н провсленкя О Т-П Ц Р-РВ забор проб крови н спинномозговой
жнлкчзсти проводя) в ранние сроки бапезми (в период вирусемни). Для
ттре.зопччицемия свертывания кровь отбирают с Э Д ТЛ .либо цитразом нятрня.
нспо.зьзовать гепарин зялрсщаезся.
Отбор проб насекомых осуществляют в соотвстсгвнн с M V .5.11627-01
«('fi«ip. учет и подготовка к ла(>ораториому исследованию кровососушнх
Ч.ЗСНИСТОН01НХ - псрсн1кчиков возбудителей цркродно-очаюяых нщ)>скиий».
Пробы воздуха ( 6но.тогичес1пи'о азрозоля) отбирают с п«>чишыо
спсина.11.ных приборов, снаряженных сорбирующей жилкос'тьк^ или
фнл1.грами. Обз>см исследуемого зюздуха должен составлять не менее 2 м'.
6..5 ()|ракичеиия по иепп.чыоввник> анвлнзируемою MBTepHBjia
.'Хля яылезения [{К используют зарегнегрнроваиные наб<>ры реагетаоя
сообразно пронсюпк.земию проб. Для достижения показателей аналитической
чувств|псльн(зстз1 объем аликвоты исходного магериаза (пробы) должен
составлять не менее 100 мкл. Пояучекный препарат Н К используется хзя
проведения анализа с нокюии>ю набора реатсктов кОМ-СЕрмц-Л31{‘ '.'1ДР-ГВч.
В каждую партию выделения наряду с исследуемым материалом
исобхолимо включать огрицатсльный котгтроль выделения (О К О -В ), который
11
--- стр. 25 ---
потом о6тзгелын1 aiiamutipycTui в ОГ-IIUP-PB. !>то по10оляег контролировать
вптмтпкнуто кпнтпминвиню «а ттапс вылслсния НК
Для контроля вшелсння нук.|еи1ювых кислит нспольтуки пр1>Г|ирк) с
1111К-В>РНК и,1 ангтава н4бо|)а peai«Hicm «ОМ-(’крин-ЛЗН/ЛЛР-РВ». Cynrw
солсржнмос ВПК-В-РНК ротподяг 500 мкя тлюснтя ш состава наЛ<>р<№
реагентоя для вылслсиня и 10 мкп получсниото раствс'ра добавляют в пробирку
с пробой испосрслствснно перед внесением сорбента. PcitierpauHM pixrra
сигнала по каналу FAM CBiutnenbciByrr i>6 yertenmoM пылсленин РНК
6.4 Условия 1раис11»р1нранянни и ялтмпжного хрвнеинм
ана.1Н1нруеммя обратнов
Пробы о6ы!кгив окружающей срелы. ibiaiMy и сыворшк> крови хранит
при температуре от нлкк 2 до плюс 8 'С! нс более 2 суток, при гсмпсратурс от
минус 16 ло минус 20 "Г нс более олмоа) месяиа, чрн темнершуре минус 70 "Г
И.Ш ■ жидком амттс в тпснис I гшя. не лопускав сто ттанпяния .до прттлелеиня
пселсловвния. Обрпзиы тканей хранят при температуре минус 70 Ч' или н жал
ком аюте в течение I шла.
При таморажпванин клинитесюго материала его транспоргироика тнкже
.толжиа т|р0(и1литься в тамортгженном с<тстоянни Допускается толт.м''
олнократиое чамораживаиис-оттаиванис обратное.
6.5 Меры прелоеторожностн к чв1ерна.|у нсследоааиня
Учет, хранение, передача и транспортирование биологическою мзгерна-
.та. пол01рн1сды1О1о па наличие BUj6y;tHien<Hi лихорадок ’Западного Ншш н до
лины 1‘ифт. должны скушссталяться в c o o t b c t v t b h h с лсЛствуюшими саинтар-
11о-тпилемнологн'1ескнми прав1иамн но бехжас1кк.’ги рщклы с микр<хтртннит-
мами I-II групп iiaroieHHocTK (опасности) (СП 1.3.3118-13) к лейстпующихти
слнитприыхш праппл.тми о порядке учета, хранения, передачи и транстюртнро-
вяния микроортиитмов I'iV групп патогенности.
Клинический материал утнлнпфутот по классу Н. как чретвычайно лш-
.темиологически опасные 01Ходы в соответствии с Ганнтдрно-
тилемио.тогическнми т^>ебоваиням11 к о6р.тщсиню с мелиштскими отхо^ьтмп
(СаиПиН 2,1.7.2790-10).
7 П О Д Ю Г О В К Л РЕЛ1 К И ТО В Л.1Я ЛНЛ.1ИЗЛ
7.) Процедура прИ 1отон.1ення кон 1ро.1ЬНЫх обрашов
В пробирку с сухим со.дсржимым П1СО-Л1Н/.%1Р добавляют
200 мкл О К О . неремешнваил на вортексс ло iio;ihuic> растворения,
центрифугнрукгт 5 секунд при .3WX) об-мин’’. Хренснис р.гткденных
препаратов !1КО-Л1Н/ЛЛР яопускается при TeMnqjarype не аыше минус
20
7.2 Ратве.теннс препарата РМК (при необкпднности)
Дня яыяв.тения и илентнфнкации Р](К вирусов
лихоралог Западного Нилл и долины Рифт необходимо вмести в реакцию
20 М К.Т препарата РПК, И слуте необходимое^, раствор лреип(Ш 1а РНК
ралтоля! с помощью ТЬ-буфера (квт. номер В-014.00(3«<.'иитоли).
8 тЧЗВКДЕНИК АНАЛИМ
K.I Расход каждого реагента (минима. 1ьнмй)
На одно щтрслеленме расходуются:
- одна мнкронрибнрка с Р( '-.13Н/ЛДР:
• 15 MK.I РЬ
Па каж.тмй аналит расходуются:
20 мкл fIK<W I 1Н/ЛДР;
• 20 M K T О К О
8.2 Лосл«. 1овв1е.1 ьиос1ь проведения ттяпов аналнта
Лналнт с помощью набора рсагсятов проволнтся к олии ттал:
- включают прибор, тапускают иршрамму в соответствии с ннструкиней
по тксплувтвинн:
- вволат параметры темперагурно-времеинош режима ам11;1ификаинн со-
I .таено Tit6.iHue I н 8Но;1ЯТ красители I- ЗМ, К6С>, КОХ и Губ;
1 2
Таблица I - Температурно-временной режим амплификации
>»; | 1 Л | Тсмпфатурно-врсмеиной режим Число ЦНК.1ЛВ
50‘ С -9 0 0 секунд I
95 Т - 300 секунд I
3 60 X ' ■ ■ 40 секунд
( 'читываннс сигнала ф.туоресценинн 50
4 95 * С - 15 секунд
- вводят снелення об образцах по всем красителям н активируют прнГюр в
coiTTBCTcuiHH с рукоиолс 1»>м по жеплуатации;
При работе с РН К непОходимп HcniuiKioiiari. только оаиоратовме
iinaviHKOHMt* расходные материалы, hmcwihhc сисииальнунт к|аркиронк>
«RNaie-free», «DNase-Ггсс».
- паСч>р реагентов ювлекают »п хололлтьника, РВ и О К О перемешивают
на вортексс и центрифугируют в течение 5 секунд при ЗОСЮ об-мии ';
помешают микропробирки в стрипах (К '-Л 311/ЛД Р ) в штатив для
сгрнпов типа «1«к>Ргее7с*>* и маркирутот и анттветствии с протоколом иселедо-
вания М В боковой стенке пробирки: открывают крышки мнкрхщрсюнрок и вно
сят в них по 15 MK.I РБ:
- испольчуя наконечники с ачриюлытым барьером, послсловательмо вно
сят в мнкропробиркп соответственно порядку исследования обрачцов по 20 мкл
О К О . О К О -Н II далее по 20 мкл раствсфов исслсдуемы.х обратиои в необхоли-
мой повторности**, закрывают крышки данных мнкропробирок;
• вносят N мнкропробиркп соответственно маркировке по 20 мкт П К О -
,ТЗН /ЛЛР. закрывают крышки данных мнкропробирок;
• перемешивают содержимое микропробнрок на вортексс н центрифуги-
руки 5 секунд при 3000 об мин ';
•Примечание: Д о нйчатл работы платив рекомендуется о х ла лть в быто
вом холодильнике до температуры 2-S ® С
••Примечание: каждый обр.-пси рекомендуется вналнзи 1нжа1ь н авух по
вторах.
В Н И М А Н И Е ! Ппсы сч 1'П1нпвния РО.ГЗН/.1ЛР. рв)бвви 1е.1И и нре-
мяря1й РНК, микропробнркн ервту установить в амплификагор и tiny*
п и т ь О Т -П Ц Р -Р В .
Помешают микропробмрки в прибор в соответствии с протоко.юм иссле-
лояаиия (таблши 1 2) и прикатывают крышки микроироби(нж.
Таб.тнпа 2 - Рекомендуемый порядок нсслелования обрашов
i Лшч^Лкш Ойваэт
I ПКО-ЛЗН/ЛДР
‘ 2 ПКО-ЛЗН/ЛДР
. 3 ОКО
4 ежо
5 (ЖО-В
I 6 (ЖО-В
■ 7 исследуемый ойрктец (кмбв) I
а м ссясАУемы й авваясп (тюба) I
9 исследуемый обоязм (проба) 2
[ иссхедуемый овпаэеи (проба) 2
; п
- 1акрывннп крышку прнборв. запусквктг ревкнию О Т-П Ц Р -Р В и фикси
руют в рабочем журнале нвзнанне файла с результатом работы прибора, рас-
ч е тт к (фсмя BTuuiina составляет в cfieaneM 2 часа.
8..3 Проие.турв измерения и «шенкн резулы яш в анв. 1н|в
Опенку речуяьтаюв проводят с помшцьн) приГюров для П1№-РВ. напри
мер. «Л Н К 0 2 (32М. 48)». CFX-96 или зквнввлентные нм (см. и. 5.1 ииспмагей
пнетрукими).
Кикегическая кривая роста сигнала флуоресиен 1ши (регистрация роста
сигнале) означает любую величину порогового цикла О меисе 50. Отсутсзвис
рс1ис1|кш1ш рчюга снтна. 1н приб(зром опнсыввется программой прибора,
например, как величина порогового цикла (C t >»50 в прнбирах Л Н К ), либо как
ее отхугствис (N/A в приборах фирмы HioRad) и т.п. Подробная информация
прнвелеиа в руководстве по эксплуатации конкрстиою прибора.
Кинетическая кривая роста смптала ф 1туоресиенцни гю каналу R6C; либо
1ЧО\ огносительно отрицательного контроля означает регистрацию роста енг-
1 5
--- стр. 26 ---
Li
нала II свилетельствуст о наличии специфических фрагмемюв НК вирусов Л {Н
или -ХЛР н лаиной микролробнркс
Кинетическая кривая роста ciiiicuia флуоресценции но каналу С>5 в aiy-
чае ( т ‘>тствия положитслиюй динамики по каналам н К О \ означает рс-
nicipaiiHKj р<х;га сигнала и свидетельствует об успешном прохождении реакций
О Т и ПЦР-РВ. и подтверждает отсутствие снецнфических фрагментов МК ви
русов Л1Н н Л Д Р в данной микропробиркс.
Кинетическая кривая pixrra сигнала флуорссисииии по каналу I п
случае отсутствия положительиой динамики но кана.там K h (; и К О Х означает
регнетрашио роста сигнапа и сиидетельствует об успешном вылслеиин РНК из
пробы, н лосш линтелыт полгиерждает отсутсгвие специфических фрагметов
ИК вирусов Л З Н и Л Д Р в данной микропробиркс.
Учет результатов анализа (толкование характера реакций)
Результаты амялиза не иаллежят учв 1л
- в слу’1 3 1 ; регнетршти роем стна-за О К О но каио;|ам Кй<; и-ж КО Х
(ложиоположителышй результат всего эксиернчеита). Велк'гииа пороговою
цикла О при тгом ис имеет значения;
- в случае озеутезиня регистрации росза сн 1нала ПКЧК1'1Н/.1ДР но кана
лам Н6<; или R O X (ложноотрнцательный результат всего зкеперимента).
- в случае отсутствия регистрации роста си 1-нала по кана.чу t (лож-
нтхзтринательный результат в конкретной MHiqx>npo6iipKe).
Результятм яналнта нл,тлежя 1 учету
- в случае отсутствия регистраиии рост» сигналя О К О 1ю каналам К6<. и
К «»Х;
- в случае рсгиспмцнн роста сишаяя но каналу ( у с любой величи
ной порогового цикла Ct;
- в случае регистраиии ptxrra сигнала П К О -Л Ш /ЛДР по кана-там НА»; и
R O X , с любой величиной порогового цикла Ct.
Ре1истраш1я роста сигна.за но каналу КА(; п пробирках с препарапш НК
свндстсльсгиуег о на.зичии в образис специфических фригментов 1 ’НК генома
вируса лихорадки долины Рифт. Величина иорошного никла Ct ири зтом не
имеет шачения.
Рсп1страш1я роста енгидза по каналу R O X п пр.збирках с препаратом НК
свидетельствует о наличии н обрате специфических фрагментов РНК генома
вируса .лихорадки Западного Нила. Величин* порогового цикла U при тгоы не
имеет значения.
Рс1истршшя pixrra сит нала по каналу Су5*** с пороговым никлом О ме
нее .17,0 свилвгсльстауст об успешном прохождении обратной гранскрнпини и
ПЦР-РИ в каждой конкретной ммтфопробнркс. большие значения Cl свидетсль-
ствукп о некотором ингибировании О Т-П Ц Р -Р В
В случае лоСшвлеиия В П к'-В -Р Н К на -ш те выделения НК;
■ pel ис грация pixrra снгна.1я по каналу I ЛМ с пороговым ииклом менее
37.0. свидетельствует об успешном выделении РНК из пробы, большие зиачс-
ния О свилегельствугот о некоторых потерях на тгапс выделения РНК.
Интерпретация результатов анализа «кушествлястся в соответствии с таб
лицей 3.
Примечание; в пробирках, имеющих рспипраиню роста си тала по
кана-зам R6t; или R O X с пороговым иикдом реакции менее 30.0. допускается
отсузствис регистрации роста сигнала либо ннзкия амплитуда книстической
кривой по каналам С уб и Р А М .
••• Примечание; в иробирка.х, имеюших регисграцию ptx-ra сигнала по
каналам RAG или К О Х с поропмтым циклом реакции менее 30,0. допускается
отсутсгвие рстнержими роста сигнала либо низкая амплитуда кинетической
кривой но кана.1вм С>? и ^ ЛМ .
Таблица .3 Интерпрегация ре<ультя 1ов анализа пртб с помощью набора
реагентов <ЮМ Скрин-Л'ЗП-ЛДР-РВ»
Ки1ю тнч1Ч'к.зя кримя росп
KBiiwy J (.Збракн Ии 1врг1рс1пии»
Г Гм к н ; ЛОХ <!!>
Ртзутътягы всего аными н iio4iicMai учету я любом к ■ «..зедуюыях случжп
Пк'О ЛижтхприиатсльныЙ peiy;ii.rai .
ккгибярованнс ОТ -ПИР-РИ
* ОК'О-Н ЛпжнололАжите.зьяый резу.зыа!.
лк>бай комгамннапмя и iipuuctcc вы ле.№ НИ11 НК
зюАий .зюбой «- Л Ю61Л1 Ложнопоппжиттльмый рсзу.тыяг.
1.Ю1М1 О М ) коитвымняиия и ^и.к гкнлатжах ОТ-ПЦР-
PR
Рсчу.т.тяты uucHoa(С (ю.ыежат учету лля коикрстьой пробы
проба
Ложиаотрмиятельный результат,
иягм6ир(ммнис ОТ-ПЦР-РВ
- Лгашоитрииателы1ИЙ резу.тьтат.
1кдостаточ1«вя т*Авкгиен<«сть мыглемиа
*еэультлты лнд.зиза поапсжят учету при по.зучения с.зедующнх резулътатоя
• любой IIKO Набор рся1С'нп1Я етшифнчен я апюшепнк
SiK BwvcoB ЛЗИII ЛДР
- - <>м>-в
Контвытаиня отсутству1.т
о к о
- - - Й пробе не обнаружены НК
В И Р УСО В ЛЗН я ЛДР
ироСя
D пробе присугствумп ИК яируса ЛДР
...л.ь В пробе присутствуют НК вируса Д)Н
- В пробе прясутствузот НК вмрусов
ЛЛР и ЛЗН
'Приисчаннс я случм.'Л1'баш1ст<я НПК-Н-РНК м я iraiie яыас.зення ИК
9 Р Л С Ч Е Г Ы
9.1 Используемые компыо 1ер|1ые iipoi рнмчы
Для проведения О Т -Н Ц Г -Р О и оценки еС резу.зьзазов HviKi.ibjywT сиеииа-
.1Н зированжх: прззграммнос <з6ес11еченне. nociaenflCMix; производителем прибо
ра. например программа AHK^Shell ве|кия 3.3 и выше, поставляемая с ирнбо-
римн Ч А П К -32М ». <<АНК-48» или Bio-Rad C F X Managci 2.0 н выше, ткзавляе-
мая с прибором ('FX -9 A , Работу с программным обеспечением осуществляют
согласно руководству по зксплуагаиин приборе.
п» УС. 10ВНЯ Х 1’л т:н и я. ll•A^иilop^миm лини и ж еилу-
Л Г А Ц И И Н Л Ь О Р А
10.1 Ус.'1ПЯНН хрвнгини н»6о|М
И ахпвсзстнии с З'У 9,ЗУ8-001-«6.)959У5-2013 - в сухим. *вщн 1ИСниом о!
света месте, при TCMiiepuiypc оз плик 2 ш* плюса Ч ( уыыарный срои хринс-
нив при температуре от п.знк 9 до плиж 20 Ч нс лолжен прсвышвзь 14 суток и
течение срока годности набора pcBieinon
10.2 Ус.зпвия ipBiicnupiKponaiiHM набора
Трансноргироваиис набора peaicmoB «О М -Гк р н н -Л И й Д Д Р -Р Н » *)Лжно
прошволигься в соответствии с ГУ 9398-00l-4b.34.t995-20tJ крмгым траиснор-
юм (автомобильным, железнодорожным либо воздушным) при тсмнсратурс от
плюс 2 до плюс Н '■С. Допускается транспортирование до 14 суток ири темнеро-
туре до плюс 20 “С
I 0 J Срок и и н т т и набора
Срок юдностн набора peaieiiioB счктваляег 12 хзссяцсв с лазы выпуска
прслприггием-н-. 1готовнтслем. Серии наборов pearcimre с истекшим сроком
иыности применению не подлежат Срок годности вскрьпых региситов соот
ветствует ерзжу годности, укатанному на зтикегках для ненскрызых рсагонтов.
»5слн в инезрукцин нс указано ижк. Срок годности развелеиных ирснарагов
1Ж и-.1Ш л1Д1* и ВМ К-В-1’11К не более месяца при температуре хрянемия нс
выше минус 20 Ч '
10.4 Информация но безопаской > 1И.1М)внии
Испольюванные пробирки с амплнкон.зип, наконечники, перчатки, ве
тошь ляя обработки поверхностей в ПНР боксе, собирают в пластиковые за
крывающиеся емкости, выносят я рабочую зону 4-1 либо слецияльно предна-
значенжю вспомогвтслыюе |н>мсшеиис (М У 1.3 2.169-09) с не.зью послелуютей
ишзкзивацин согласно зробованням СвнПнН 2.1.7.2790-10.
Наборы с истекшим сроком 1х>дности. а также в случае повреждения упа
ковки. утилизируют по классу Л, как зпндемиологически бечописные (гтходы.
по составу приближенные к ТБ О (СанНнН 2.1.7.2790-10).
--- стр. 28 ---
в данном xi'
прошнур вано,
пронумеровано « скреплено
^ листовпечатью
прописью у J
<Р6ПГ
должность, пг^пигь
п
--- стр. 29 ---
ПАСПОРТ
штамма вируса
Номер_____
ФЕДЕРАЛЬНОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ НАУКИ
ЕОСУДАРСТВЕППЫЙ НАУЧНЫЙ ЦЕНТР ВИРУСОЛОГИИ И БИОТЕХНОЛОГИИ
«ВЕКТОР» РОСПОТРЕБНАДЗОРА
Дата поступления _/ .1
1 Вид
(российская и английская
транскрипция)
Вирус Западного Нила
(West Nile virus)
2 Род, семейство Род Flavivirus
Сем. Flaviviridae
3 Наименование штамма WNV/LEIV-VlgOO-27294
4 Особое обозначение ВЛГ27294
5 Выделен (дата) 2000 г.
6 Объект выделения и способ
выделения
Кровь больного человека
7 Место выделения
(место взятия биопробы)
Г. Волгоград
8 Способ получения штамма
(организация, дата, способ,
авторы)
Неизвеетно.
9 Способ идентификации
штамма (организация, дата,
способ,авторы)
10 Пассажная история штаммаВ ГНЦ ВБ «Вектор» получен из Института вирусоло1ии
им Д.И. Ивановского, РАМН, в 2001 г. В ГНЦ ВБ
«Вектор» 12 наесажей на беепородных белых мышах-
сосунках при интрацеребральном заражении.
11 Литсратурная(ыс)
ссылка(и) на работы, в
которглх опубликованы
данные по выделению и
идентификации штамма
12 Характеристика штамма
12.1 Культурально—морфологические
особенности штамма
Размножаетея на культуре клеток Vero, СНЭВ,
ЦПД па 4-5 еутки. Оптимальный титрЮ'’- 10 ’
ТЦПД50 /мл.
12.2 Способ, условия и состав сред для
размножения
игла МЕМ с 10% сыворотки КРС
12.3 Активность(продуктивность)
штамма (с указанием условий
культивирования)
Оптимальный титр 10^’ - 10^ ТЦНД50 /мл
12.4 Биохимическая активность
--- стр. 30 ---
9
12.5 Серологические свойства Взаимодействует с 15 тинами нейтрализующих
МКА (5F7 минус) к ВЗП из стандартной панели 16
МКА в PH, в ИФА взаимодействует со вее.ми
исследованными нейтрализующими МКА.
12.6 Г енс гичсские характеристики
штамма | установленные
нуклеотидные
последовательности генома
штамма (указать длину и позиции
генома, литературные ссылки на
публикацию установленных
нуклеотидных
последовательностей (номер в
GencBank, статья и нр.)|
I (уклеотидная последовательность фрагмента гена
белка Е дснонирова в GenBank (/D00246
12.7 Вирулентность (патогенность)
12.7.1 Группа патогенности для человека
но российской классификации
12.7.2 Патогенность для животных Патогенен, мри интрацеребральном заражении белых
б\п 2-3 дневных мышей-сосунков - нарезы, параличи,
гибель на 2-3 сутки.
12.7.3 Патогенность для растений Нет
12.8 Способ, условия и состав сред для
длительного хранения штамма
Температура хранения — (- 70 °С); лучшая
сохранность в интактных и замороженных на
пике заболевания мышах-сосунках.
12.9 Дата и результат последней
проверки жизнсснособности
кулыуры (указать результат,
метод и биосистсму титрования)
05.2015
Титр в ИФА - 1:512
12.10 Дата нрсдиолагасмого пересева
(указать необходимые для этого
метод, биосистему и условия
культивирования)
13 Вид дсноиирования: хранение,
гарантийное хранение, патентное
депонирование
Хранение
14 Данные депозитора
14.1 Организация, адрес, факс,
телетайп, телефон
депозитора,автор или
авторский коллектив
ФБУП ГПЦ ВБ ’’Вектор”, 630559, Новосибирская обл., р.н.
Кольцово, тел. (383) 363-60-10.
Штамм сдан на депонирование сотрдниками: 11однись Дата
Ведущий научный сотрудник отдела молекулярной вирусологии
флавивирусов и вирусных гепатитов ФВУН ГМЦ ВБ ’’Вектор”
Протопопова 1^лсна Викторовна
.1
Научный сотрудник отдела молекулярной вирусологии
1 флавивирусов и вирусных гепатитов ФБУИ ГНЦВБ ’’Вектор”
1 Коновалова Светлана Николаевна
<■ -с г,X . А -
--- стр. 31 ---
ФЕДЕРАЛЬНОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ НАУКИ
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НАУЧНЫЙ ЦЕНТР ВИРУСОЛОГИИ И БИ 0ТЕХН 0Л01 ИИ
«ВЕКТОР» РОСПОТРЕБНАДЗОРА
ПАСПОРТ
штамма вируса
Номер а .
1 2
12.1
12.2
12.3
12.4
/Цта пос тупления
Вид
(российская и английская
грапскрипция)
Род, семейство
Наименование ш тамма
Особое обозначение
Выделен (дата)
Объект выделения и способ
выделения
Место выделения
(место взятия бионробы)
Способ получения штамма
(организация, дата, способ,
авторы)
Способ идентификации
штамма (организация, дата,
способ,авторы)
Пассажная история штамма
Литсратуриая(ыс)
ссылка(и) иа работы, в
которых оиубликоваигд
данные но выделению и
идснз’ификации штамма
Вирус Западного Пила
(West Nile virus)
Род Flavivirus
Сем. Flaviviiidac
LEIV-Az70-72-licks (A - 72 LEIV)
Институт вирусологии им Д.и.Ивановского
Львов Д.К. и соавторы___________________________
1970 г.
Клещи Omitodorus capensis
Остров Глиняный, Каспийское морс
Неизвестно.
В ЕИЦ ВБ «Вектор» получен из Института вирусологии
им Д.И. Ивановского, РАМИ, в 2001 г. В ЕИЦ ВБ
«Вектор» 12 пассажей на беспородных белых мышах-
сосунках при интрацеребральном заражении.
Характеристика штамма
Культурально—морфоло1ичсскис
особсиности штамма
Способ, условия и состав сред для
размножения
Активность(продуктивность)
штамма (с указанием условий
культивирования)
Биохимическая активность
Размножается на кул]луре клеток Vero, Cl
ЦИД на 4-5 сутки. Онтималынлй титрЮ'^’-
ТЦИДзо /мл.
EJB,
10 ^
игла MF.M с 105 сыворотки КРС
Оптимальный титр 10'’ - 10' F1 (1 УДо /мл
--- стр. 32 ---
4
12.5 Ссроло1'ические свойства Взаимодействует с 15 типами нейтрализую! них
МКЛ (5F7 минус) к ВЗИ из стандартной панели 16
МКЛ в РЦ, в ИФЛ взаимодействует со' всеми
исследованными нсйтрализующи.ми МКА.
12.6 Генетические характеристики
нттамма [установлеиные
нуклеотидные последовательности
генома нттамма (указать дли[1у и
позиции генома, литературные
ссылки на публикацию
установленных нуклеотидных
нослсдоватслыюстсй (номер в
GcncBank, статья и нр.)|
Нуклеотидная последовательность фрагмента l eiia
белка Г( денонирова в Gene bank locus AF237564
12.7 BiipyjicuTiiocib (патогенность)
12.7.1 Группа натотснности для человека
но российской классификации
12.7.2 На тотенность для животных Натотсиен, при интрацеребральном заражении
белых б\н 2-3 дневных мышсй-еосунков - нарезы,
параличи, гибель на 2-3 с тки.
12.7.3 1 la roi'CHHOCTb для растений Нет
12.8 Способ, условия и состав сред для
длительного хранения нттамма
Температура хранения — (- 70 °С); лучшая
сохранность в интактных и замороженных на
пике заболевания мышах-сос нках.
12.9 Дата и результат последней
проверки жизисснособности
культуры (указать результат, метод
и б^осис'тсму титрования)
05.2015
Титр в ИФЛ - 1:512
12.10 Дата нрсднотнн асмото нсрсссва
(указать необходимые для d t o i o
метод, биосистсму и условия
культивирования)
13 Вид депонирования; хранение,
гарантийное хранение, иатси тнос
дснонированис
Хранение
14 Данные депозитора
17.1 Организация, адрес, факс,
'телетайп, телефон
депозитора,автор или
авторский коллектив
ФБУП ГНЦ ВБ "Вектор”, 630559, Новосибирская обл., р.н.
Кольцово, тел. (383) 363-60-10.
Штамм слан на депонирование сотрдниками: 11одиись Да-ia
Научный сотрудник отдела молекулярной вирусологии
флавивирусов и вирусных генати гов ФйУИ ГНЦ ВБ "Вектор”
Коновалова Светлана Николаевна
/
Ведущий на\'чн1.1Й сотрудник отдела молекулярной вирусологии
флавивирусов и вирусных тснагитов ФБУН ГНЦ ВБ "Вектор”
Нротоионова Г.лсна Викторовна
Л - ■>
/
и 6
--- стр. 33 ---
ф
ФЕДЕРАЛЬНОЕ БЮДЖЕТНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ НАУКИ
ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НАУЧНЫЙ ЦЕНТР ВИРУСОЛОГИИ И БИОТЕХНОЛОГИИ
«ВЕКТОР» РОСПОТРЕБНАДЗОРА
ПАСПОРТ
штамма вируса
Номер .
Дата поступления ^ S. I-
1 Вид
(российская и английская
транскрипция)
Вирус Западного Нила
( West Nile virus)
2 Род, семейство Род Flavivinis
Сем. Flaviviridcie
3 Наименование штамма Eg-101
4 Особое обозначение Копня паспорта прилагается из институ'га вирусологии им ДИ
Ивановского от июня 2002 г.
5 Выделен (дата) 1951г.
6 Объект выделения и способ
выделения
Кровь больного человека.
7 Место выделения
(место взятия биопробы)
Египет.
8 Способ получения штамма
(организация, дата, способ,
авторы)
Неизвестно.
9 Способ идентификации
штамма
(организация, дата, способ,
авторы)
10 Пассажная история штаммаВ Г'НЦ ВБ «Вектор» получен из Института вирусологии
им Д.И.Ивановского, PAMI I, в 2001г. в виде мозга б\и
мыши- сосунка . В ГНЦ ВБ «Вектор» 6 пассажей на
беспородных белых мышах-сосунках при интрацеребральном
заражении.
11 Литературная(ые)
ссылка(и) на работы, в
которых опубликованы
данные по выделению и
идентификации штамма
12 Xа ра к герIIС111 ка штамма
12.1 Культурально-морфологические
особенности штамма
Размножается на культуре клеток Vero. СПЭВ.
ЦПД на 4-5 сутки. Оптимальный титрЮ^ - 10'
тцн;ио/мл.
12.2 Способ, условия и состав сред для
размножения
Игла МЕМ с 10 % сыворотки К PC
12.3 Активность (п роду кт и в н ость)
штамма (с указанием условий
культивирования)
Оптимальный Tiri'pl0^'- 10^ ТЦПД^о/мл
12.4 Биохимическая активность -
1
--- стр. 34 ---
12,5 Серологические свойства Взаимодействует с 15 типами нейтрализующих
МКА (4D10 минус) к ВЗИ из стандартной
панели 16 МКА в PH, i t ИФА взаимодействует
со всеми исследованными иейтрализующи.ми
МКА.
12.6 Генетические характеристики
штамма [установленные
нуклеотидные последовательности
генома штамма (указать длину и
позиции генома, литературные
ссылки на публикацию
установленных нуклеотидных
последовательностей (помер в
GeneBank, статья и пр.)]
РНК одноцепочечная (+). Нуклеотидная
структура генома депонирована в Gene bank
AF260968
12.7 Вирулентность (натогенност ь)
12.7.1 Группа патогенности для человека по
российской классификации
1 1
12.7.2 Патогенность для животных Патогенен, при интрацеребральном заражении
белых 6\п 2-3 дневных мышей-сосунков - парезы,
параличи,гибель на 2-3 сутки.
12.7.3 Патогенность для растений Нет
12.8 Способ, условия и состав сред для
длительного хранения штамма
Температура хранения - (- 70”С); лучшая
сохранность в интактных и замороженных на
пике заболевания мышах-сосунках.
12.9 Дата и результат последней проверки
жизнеспособности культуры (указать
результат, метод и биосистему
титрования)
05.2015
Титр в ИФА-1:512
12.10 Дата предполагаемо|-о пересева
(указать необходимые для этого
метод, биосис'гему и условия
культивирования)
13 Вид депонирования: хранение,
гарантийное храпение, патентное
депонирование
Хранение
14 Данные денози i ора
17.1 Организация, адрес, факс,
телетайп, телефон
депозитора, автор или
авторский коллектив
ФБУН ГНЦ ВБ "Вектор", 630559, Новосибирская обл., р.и,
Кольцово,тел. (383) 363-60-10.
Штамм сдан па депонирование сотрудниками: ! Подпись /1ата
Научный сотрудник отдела молекулярной вирусологии флавивирусов и '
вирусных гепатитов ФБУН ГНЦ ВБ "Вектор" ^ 1 // '' Г
Коновалова Светлана 11иколаевпа 1
Ведущий научный сотрудник отдела молекулярной вирусологии \
флавивирусов и вирусных гепатитов ФБУН ГНЦ ВБ "Вектор"
Протопопова Елена Викторовна^
и
--- стр. 35 ---
ACUOPTHblF- ДЛПНЫС ШТЛММЛ R-KM
\ I
)VC Запал.нын liiii
Источник выделения ____ кровь иолыв_и о
Модель hiTO и]-)ооы о вл ЫС М ЫI II и -СОСУН к н
Место сппрп маюрлииш ___Бгинеч'
Г о л, в вине л синя 1951
Колине с JBU проведенных пассажей ___пег лднны?<
А вторь] u]тa^•^^^a нет данных
/ / а С>)у / / / ^ 9 ^
'Х .Д - о Т г