Набор реагентов для определения возбудителя туляремии Francisella tularensis в реакции латекс-агглютинации по ТУ 9398-113-78095326-2010 (см. приложение на 1 листе): — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 --- / 3 УТВЕРЖДАЮ ^ФГУН ГНЦ ПМБ [^ ^ ^ ^ Й А ^ я т л о в 2010 г. ИНСТРУКЦИЗ по применению набора реагентов для опре 1т^д1&ния.в<УЮулителя туляремии Francisella tularensis в реакции латекс-агглютинации 1. Назначение. Обнаружение возбудителя туляремии из исследуемых бактериальных культур, биологического материала и объектов внешней среды с помощью реакции латекс- агглютинации (РЛА). 2. Принцип метода. При смешивании латексного реагента с исследуемым образцом, при наличии в последнем клеток возбудителя туляремии, они специфически взаимодействуют с моноклональными антителами (М КА), сорбированными на латексе, что приводит к агглютинации латексных частиц. Область применения - лабораторная диагностика, научные исследования. 3. Характеристика набора. В состав набора входят компоненты, представленные в таблице 1 . Таблица 1 - Состав набора Наименование Количество 1. Планшет стрипованный 96-ти луночный для латекс- агглютинации с U-образным профилем лунок (фирма Пан Эко, Россия, кат. № Оп 96) 1 планшет 2. Латекс туляремийный с иммобилизованными М КА к клеткам F. tularensis, лиофилизированный 5 флаконов 3. Взвесь убитой культуры туляремийного микроба F. tularensis 15/10 лиофилизированная - 1,0 х10^ клеток/мл (положительный контроль) 1 флакон 4. Боратный буфер (сухая навеска) 1 флакон (0,77г) --- стр. 2 --- 4. Аналитические и диагностические характеристики. Чувствительность. РЛА является не только качественным, но и полуколичественным методом. При этом концентрация клеток F. tularensis в исследуемом образце определяется по предельному его разведению, дающему положительную реакцию. Предел выявления клеток F. tularensis методом РЛА составляет 2x10^ клеток/мл и выше. Специфичность. Латексный туляремийный диагностикум в РЛА не выявляет культуры F. novicida, Y.pestis, Y enterocolitica, Y . pseudotuberculosis, S . typhi, S . typhimurium, E. coli в концентрации 2,5x10^ клеток/мл и ниже. Учет результатов проводят визуально по четырех крестовой системе (4+; 3+; 2+; 1+; «-») на темном фоне при хорошем освещении. Положительной считается реакция, оцениваемая не менее чем на «3+». 5. Меры предосторожности. Работу проводят в соответствии с СП 1.3.1285-03 «Безопасность работы с микроорганизмами I-II групп патогенности (опасности)». 6. Оборудование и материалы - холодильник бытовой; - дозаторы автоматические; - дистиллированная вода; - отраслевой стандартный образец мутности ГИСК им. Л. А. Тарасовича 10 единиц (ОСО 42-28-85П, соответствующего года выпуска) - микроскоп У.Проведение анализа. Один «Набор реагентов для определения возбудителя туляремии Francisella tularensis в реакции латекс-агглютинации» рассчитан на 7 определений. При проведении анализа нельзя использовать компоненты из наборов разных серий или смешивать их в процессе приготовления растворов, а также нельзя использовать компоненты по истечении их срока годности! Перед использованием все реагенты набора выдержать 30 мин при температуре от 20 до 24 °С. Для отбора исследуемых проб и компонентов применять автоматические пипетки с погрешностью измерения объемом не более 5 %. 7.1. Приготовление рабочих растворов (для реакции на одном планшете) 7.2. Для получения боратного буфера содержимое 1 флакона растворяют в 100 мл дистиллированной воды. Посуда должна быть химически чистой. Приготовленный буфер хранить не более 5 суток при температуре хранения плюс 4-6 °С. --- стр. 3 --- / г 7.3. Для получения жидкого латекса туляремийного содержимое 1 флакона с латексом лиофилизированным растворяют в 0,5 мл дистиллированной воды. Жидкий латекс туляремийный стабилен в течение 7 суток при температуре хранения плюс 4-6 °С. 7.4. Для получения положительного контроля содержимое флакона с лиофилизированной взвесью убитой культуры туляремийного микроба F. tularensis 15/10 растворяют в 1 мл дистиллированной воды. Срок годности приготовленного положительного контроля 6 месяцев при температуре хранения минус 18-20 °С. 8. Анализируемые образцы. Исследуемые бактериальные культуры с подозрением на содержание возбудителя туляремии, биологический материал и объекты внешней среды. 9. Подготовка к исследованию «чистых» культур. Исследуемые бактериальные культуры высевают в пробирки со скошенной питательной средой для вьщеления и культивирования туляремийного микроба (FT-arap или аналогичные среды) и выращивают в течение (72±2) ч при температуре (37±1) °С. Из выросших культур готовят взвеси в 0,9 % растворе натрия хлорида по отраслевому стандартному образцу мутности ГИСК им. Л. А. Тарасовича 10 единиц (ОСО 42-28-85П, соответствующего года выпуска), что соответствует 5x10^ м.к/мл туляремийного микроба. Исходные взвееи культур разводят в 5 раз до концентрации 1x10^ м.к./мл. Обеззараживание бактериальных культур проводят кипячением в течениеЗО минут. 9.1. Взятие проб из объектов окружающей среды. Взятие материала из объектов окружающей среды, биологический материал, подготовку материала для иееледования следует проводить согласно методическим указаниям М У 3.1.2007-05 «Профилактика инфекционных болезней. Эпидемиологический надзор за туляремией» 10. Проведение реакции латекс-агглютинации. Во все лунки планщета вносят по 25 мкл боратного буфера. В лунки первого вертикального ряда дозатором, кроме лунки А1 и Н1 вносят по 25 мкл исследуемых взвесей или исследуемый материал. Для определения концентрации клеток F. tularensis в исследуемых образцах в лунки А1 вносят 25 мкл взвеси убитой культуры туляремийного микроба F. tularensis 15/10 (положительный контроль). Начиная с первого вертикального ряда делают последовательные двукратные разведения переноеом по 25 мкл из одной лунки в другую. Из последних лунок по 25мкл удаляют. В качеетве отрицательного контроля используют лунки с Н1 по Н12. Затем во все лунки добавляли по 25 мкл латексного туляремийного диагностикума, планшет осторожно встряхивают и оставляют при комнатной температуре на 1,5 - 2,0 чаеа. --- стр. 4 --- 4 L 11. Учет результатов реакции. Учет результатов проводят визуально по четырех крестовой системе на темном фоне при хорошем освещении. «4+» - все частицы латекса агглютинированы, равномерно покрывают дно лунки, образуя «зонтик». «3+» - агглютинированы почти все частицы латекса, что выражается в уменьшении диаметра «зонтика». «2+» - агглютинирована половина латексных частиц. «1+» - большинство частиц не агглютинировано и осело на дно лунки, но диаметр «пуговицы» пока еще отличается от «точки». «-» - признаков агглютинации нет, латексные частицы осели на дно лунки в виде «точки» розового цвета в центре лунки. Положительной считается реакция, оцениваемая не менее чем на «3+». Концентрацию клеток F. tularensis в исследуемых образцах из объектов внешней среды определяют по образованию «зонтиков», как описано выше и путем сравнения их с результатами РЛА с разведениями контрольной взвеси убитой культуры F. tularensis. 12. Транспортирование и хранение. Латексный туляремийный диагностикум транспортируют всеми видами крытого транспорта при соблюдении условий хранения. Допускается транспортирование при температуре от 2 до 25 °С не более 7 суток. Хранят в герметично закрытой упаковке в загцищенном от света месте при температуре от плюс 2 до плюс 8 °С. 13. Срок годности. Срок годности - 6 месяцев. По вопросам, касаюш;имся качества набора реагентов в течение срока годности следует обращаться в адрес предприятия-изготовителя: 142279, Московская обл., Серпуховский р-н, Оболенск, Ф ГУП «Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии», тел: 8(4967) 31- В.В.Долров Зам.директора по научно-производственной «СОГЛАСОВАНО» Зав.кафедрой Щ О «РМАПО» П.Шепелин ипчи алахонов 2010 г. Подпись удостоБ-зрдю: спбциалист по кадровой пзботе ГОУ ДПО Р ГГГМ у^Р с^.зд рава [П О Д ;: --- стр. 5 --- П р о н у м е р о в а н о , пос и н у р о в а н о , скреплено подписью и печатью _____^ f листов. Подпись ... Л у* 9-^