--- стр. 1 ---
«УТВЕРЖДАЮ»
ектор
ства
Смирнов А.В.
апреля 2015 г.
ИНСТРУКЦИЯ
по применению набора реагентов для определения концентрации холестерина липопроте
инов низкой плотности прямым селективным методом в сыворотке и плазме крови
(ХОЛЕСТЕРИН ЛИНИ (прямой селективный) ДиаС)
НАЗНАЧЕНИЕ
Набор предназначен для количественного определения концентрации холестерина липопроте
инов низкой плотности (ЛПНП) в сыворотке и плазме крови человека прямым селективным методом
в клинико-диагностических лабораториях.
Набор реагентов (ХОЛЕСТЕРИН ЛПНП (прямой селективный) ДиаС) должен использоваться
квалифицированным персоналом в области клинической лабораторной диагностики.
Набор выпускается в трех видах фасовки и рассчитан на проведение 357, 485 и 1457 опреде
лений при расходе 280 мкл Реагента 1 на один анализ.
По согласованию с заказчиком, набор может быть расфасован в системные флаконы для био
химических анализаторов объемом 20, 50, 70, 100 и 250 мл.
ПРИНЦИП МЕТОДА
В основе определения холестерина ЛПНП лежит гомогенный метод прямого измерения
ЛПНП холестерина без осаждения. На первом этапе липопротеины, не относящиеся к ЛПНП, подвер
гаются воздействию ферментов, в то время как ЛПНП селективно защищены. На втором этапе ЛПНП
освобождаются и селективно определяются с помощью цветной ферментативной реакции. Изменение
поглощения при 600/700 нм пропорционально концентрации холестерина ЛПНП в пробе.
СОСТАВ НАБОРА
Реагент 1: буферно-ферментный раствор (pH 6,8), содержащий буфер Гуда, 20 ммоль/л; Н-
DAOS [Н-(2-гидрокси-3-сульфопропил)-3,5-диметоксианилин], 0,5 ммоль/л; холестеринэстеразу,
>2,5 кЕ/л; холестериноксидазу, >2,5 кЕ/л; каталазу, >500 кЕ/л; азид натрия, 0,95 г/л - 5 флаконов (по
20 мл), 2 флакона (по 68 мл) или 6 флаконов (по 68 мл).
Реагент 2: буферно-ферментный раствор (pH 7,0), содержащий буфер Гуда, 25 ммоль/л; 4-
аминоантипирин, 3,4 ммоль/л; пероксидазу, >15 кЕ/л; азид натрия, 0,95 г/л - 1 флакон (25 мл), 2
флакона (по 17 мл) или 6 флаконов (по 17 мл).
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Набор обеспечивает линейную область определения концентрации холестерина ЛПНП в
диапазоне от ~0,03 до ~10,3 ммоль/л; чувствительность — не более ~0,03 ммоль/л, коэффициент
вариации результатов определений (КВ) — не более 5%.
--- стр. 2 ---
Для внутреннего контроля качеетва рекомендуется проводить измерения контрольных сывороток
TruLab L Lev 1, фирма DiaSys (Германия), кат. № 5 9020 99 10 065. TruLab L Lev 2, фирма DiaSys
(Германия), кат. № 5 9030 99 10 065. Возможно использование других отечественных и зарубежных кон
трольных сывороток, аттестованных данным методом.
Содержание ЛПНП-ХС в сыворотке в норме:
Концентрация ЛПНП-ХС
Возраст, (годы) мг/дл ммоль/л
мужчины женщины мужчины женщины
0-19 60-140 60-150 1,55-3,63 1,55-3,89
20-29 60-175 60-160 1,55-4,53 1,55-4,14
29-39 80-190 70-170 2,07-4,92 1,81-4,40
40-49 90-205 80-190 2,33-5,31 2,07-4,92
0-59 90-205 90-220 2,33-5,31 2,33-5,70
60-69 90-215 100-235 2,33-5,57 2,59-6,09
>70 90-190 90-215 2,33-4,92 2,46-5,57
Каждая лаборатория должна проверить применим ли контрольный диапазон величин к местному
населению, и определить, при необходимости, свой собственный диапазон нормальных величин.
ОБРАЗЦЫ
Негемолизированная сыворотка крови. Гепаринизированная плазма. Срок хранения образцов;
24 часа при температуре 15-25°С, 7 суток при температуре 2-8°С и 1 месяц при -20°С. Загрязненные
образцы хранению не подлежат.
МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Потенциальный риск применения набора - класс 2а (Приказ Минздрава РФ от 06.06.2012 № 4н).
Реагенты 1 и 2 содержат азид натрия в качестве консерванта. При работе с ними следует со
блюдать осторожность и не допускать их попадания внутрь, а также на кожу и слизистые оболочки.
При попадании немедленно промыть пораженное место большим количеством проточной воды. При
проглатывании следует выпить 0,5 л теплой воды и вызвать рвоту.
Меры предосторожности - соблюдение “Правил устройства, техники безопасности, произ
водственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лаборато
риях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства
здравоохранения” (Москва, 1981 г.).
При работе с набором следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки,
т.к. образцы крови человека следует рассматривать как потенциально инфицированные, способные
длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вирус гепатита или любой другой возбудитель ви
русной инфекции.
ОБОРУДОВАНИЕ И РЕАГЕНТЫ:
- автоматический биохимический анализатор, поддерживающий длину волны 600/700 нм, кюветы
термостатированные при температуре 37°С с длиной оптического пути 10 мм;
- спектрофотометр, поддерживающий длину волны 600/700 нм, с длиной оптического пути 10 мм;
- термостат, поддерживающий температуру 37±1°С;
- пипетки, позволяющие отбирать объемы жидкости от 10 до 500 мкл;
- перчат ки р е з и н о в ы е и л и пласт иковы е;
- дополнительно необходимо приобрести комплект калибраторов ТшСа! HDL/LDL фирма DiaSys
(Германия), кат. № 1 3520 99 10 065;