Набор реагентов для определения активности аспартатаминотрансферазы динитрофенилгидразиновым методом по конечной точке в сыворотке крови (АСТ КТ ДДС) _x000D_ по ТУ 9398-009-48813770-2016 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 --- «УТВЕРЖДАЮ» Генеральный директор [ионерного общества Смирнов А.В. 2016 г. ИНСТРУКЦИЯ применению Набора реагентов для определения активности аспартатаминотрансферазы динитрофенилгидразиновым методом по конечной точке в сыворотке крови (ACT КТ ДДС) РУ№ ФСР 2011/10444 НАЗНАЧЕНИЕ Набор предназначен для количественного определения активности аспартатаминотрансферазы Г) в сыворотке крови по конечной точке в клинико-диагностических и биохимических лаборато- и научно-исследовательской практике. Набор реагентов (ACT КТ ДДС) должен использоваться квалифицированным персоналом в сти клинической лабораторной диагностики. Количество определений зависит от объема фасовки и используемого биохимического анали- >а. МЕТОД Метод Райтмана-Френкеля по конечной точке. ПРИНЦИП МЕТОДА В основе определения активности ACT с динитрофенилгидразином лежит метод Райтмана- [келя. Аспартатаминотрансфераза в присутствии а-кетоглутарата катализирует реакцию пере- ирования L-аспартата с образованием оксалоацетата, который декарбоксилируется до пирувата. самопроизвольное ACT декарбоксилирование а-кетоглутарат + L-аспартат -> L-глутамат + оксалоацетат -> пируват Пируват с 2,4-динитрофенилгидразином в щелочной среде образует динитрофенилгидразон, ясивность окраски которого прямо пропорциональна активности ACT и измеряется фотометри- 1 при длине волны 505 (500-560) нм. СОСТАВ НАБОРА Реагент 1: буферно-субстратный раствор, pH 7,4, содержащий L-аспарагиновую кислоту, О ммоль/л; а-кетоглутаровая кислота, 2,0 ммоль/л; азид натрия, 0,095% - 1 флакон (100 мл), 2 L K O H a (по 100 мл), 2 флакона (по 90 мл) или 1 флакон (1000 мл). Реагент 2: раствор, содержащий 2,4-динитрофенилгидразин, 0,9 ммоль/л; соляную кислоту, моль/л - 1 флакон (100 мл), 2 флакона (по 100 мл), 2 флакона (по 90 мл) или 1 флакон (1000 мл). Реагент 3: концентрированный раствор гидроокиси натрия, 4,0 моль/л - 1 флакон (100 мл), 2 --- стр. 2 --- она (по 100 мл), 2 флакона (по 90 мл) или 1 флакон (1000 мл). Калибратор: калибровочный раствор пирувата натрия, 1,0 ммоль/л; азид натрия, 0,095% -1 он (3,0 мл), 2 флакона (по 3,0 мл), 10 флаконов (по 3,0 мл), 3 флакона (по 10 мл). АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ Линейность в диапазоне от 4,0 до 70 Е/л. Отклонение от линейности не превышает 7%, Чувствительность - не более 3,0 Е/л. Коэффициент вариации - не более 7%. При активности аспартатаминотрансферазы в сыворотке крови выше 70 Е/л анализируемую ' следует развести физиологическим раствором (0,9% NaCl) в 4 раза, повторить анализ и полу- ш результат умножить на 4. КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА Для внутреннего контроля качества с каждой серией образцов проводите измерения контроль- ъхвороток, аттестованных данным методом. Калибровку рекомендуется проводить в следующих случаях: при нестабильности результатов юля качества, в случае выхода значений контроля качества за пределы установленных диапазо- дя используемого лота контрольного материала, при использовании нового набора. НОРМАЛЬНЫЕ ЗНАЧЕНИЯ В сыворотке крови (B.C. Камышников, 2014): до 1 мес. до 38 Е/л 1-12 мес. до 27 Е/л 1-16 лет до 22 Е/л »слые: Мужчины до 18 Е/л Женщины до 15 Е/л Рекомендуется в каждой лаборатории уточнить диапазон значений нормальных величин для едуемого контингента людей. ОБРАЗЦЫ Негемолизированная сыворотка крови человека. Сыворотку крови следует отделить от фор- 1Ы Х элементов крови не позднее, чем через 1 час после забора крови. обильность: 4 дня при 15-25°С 7 дней при 2-8 °С 3 месяца дней при -20°С язненные образцы хранению не подлежат. )раживать образцы можно не более одного раза! МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ Потенциальный риск применения набора - класс 2а (Приказ Минздрава РФ от 06.06.2012 № 4н). --- стр. 3 --- реагенте 1 и калибраторе содержится токсичный компонент - азид натрия, реагент 2 содер- (ляную кислоту, реагент 3 - гидроокись натрия. При работе с ними следует соблюдать осторож- и не допускать попадания на кожу и слизистые; при попадании немедленно промыть пораженное большим количеством проточной воды. При проглатывании следует вьшить 0,5 л теплой воды и гь рвоту. Меры предосторожности - соблюдение «Правил устройства, техники безопасности, производст- й санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отде- X , отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохране- Москва, 1981 г.). При работе с набором следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, т.к. цы крови человека следует рассматривать как потенциально инфицированные, способные дли- ое время сохранять и передавать ВИЧ, вирус гепатита или любой другой возбудитель вирусной сции. ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ Реагенты 1, 2 и Калибратор готовы к использованию. Приготовление щелочного раствора, В мерную колбу вместимостью 1000 мл внести 100 мл реагента 3, довести объем до метки дис- рованной водой и перемешать. Щелочной раствор можно хранить при температуре 2-25°С в течение всего срока годности на- 1ри условии достаточной герметичности флакона. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА Компоненты реакционной смеси отбирать в количествах, указанных в таблице 1. Таблица 1 Отмерить, мл Контрольная (холостая) проба Контрольная проба на сыворотку Опытная проба ент 1 0,25 0,25 0,25 у^ировать при температуре 37*^0 в течение 5 минут, добавить оротка крови — — 0,05 i дистиллированная 0,05 — — вмешать и инкубировать при температуре 37°С точно 30 минут, добайить ент 2 0,25 0,25 0,25 оротка крови — 0,05 — вмешать и вьщержать при комнатной температуре (15-25°С) в течение 20 минут, добавить [О ЧН О Й раствор 2,5 2,5 2,5 Пробы тщательно перемешать и вьщержать при комнатной температуре в течение 5 минут, рить оптические плотности опытной пробы (А О и контрольной пробы на сыворотку (Аг) против юльной (холостой) пробы в кювете с длиной оптического пути 10 мм при длине волны 505 (500- нм. Окраска растворов стабильна в течение 30 минут. Для определения активности ACT использовать разность оптических плотностей (А) опытной ы и контрольной пробы на сыворотку: А = Ai - Аг. Примечание. Количество реагентов и анализируемых образцов в зависимости от объема ньзуемой кюветы может быть пропорционально изменено (соотношение реагент 1: реагент 2; сы- гка крови: щелочной раствор составляет 5:1:5:50). РАСЧЕТЫ Расчет активности аспартатаминотрансферазы в сыворотке крови произвести по эровочному графику. Компоненты реакционной смеси для построения калибровочного графика рать в количествах, указанных в таблице 2.