Набор реагентов для идентификации возбудителей пневмонии и их генетической устойчивости к антибиотикам в картридже и пробирках с крышками и наконечником (The Unyvero P50 Pneumonia Cartridge Set) — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 ---
« У Т В Е Р Ж Д А Ю »
Набор реагентов для идентификации возбудителей ииев 1ионии и их генетической
устойчивости к антибиотикам в картридже и пробирках с крышками и
наконечником (The Unyvero Р50 Pneumonia Cartridge Set),
производства Куретис АГ, Германия, Curetis AG
« С О Г Л А С О В А Н О »
Зав. кафедрой клинической лабораторной
диагностики Г Б О У Д П О Р М А П О Минздравсоцразвития России,
2012
--- стр. 2 ---
^ c u r e t i s
Н А Б О Р Р Е А Г Е Н Т О В Д Л Я
И Д Е Н Т И Ф И К А Ц И И
В О З Б У Д И Т Е Л Е Й П Н Е В М О Н И И И
ИХ Г Е Н Е Т И Ч Е С К О Й
У С Т О Й Ч И В О С Т И К ^
А Н Т И Б И О Т И К А М В К А Р Т Р И Д Ж Е ^
И П Р О Б И Р К А Х С К Р Ы Ш К А М И И ч
Н А К О Н Е Ч Н И К О М (T H E U N Y V E R & *
Р 5 0 P N E U M O N IA C A R T R ID G E
S E T )
UNYVERO™ РУКОВОДСТВО
ПОЛЬЗОВАТЕЛЯ
Art. No. 00118 V2.0
--- стр. 3 ---
Содержимое данного руководства или его части не могут быть скопированы, воспроизведены
или использованы в каком-либо виде и какими-либо способами, включая перевод на ино
странный язык, без предварительного согласования и письменного разрешения компании Си-
retis AG.
Curetis AG
Макс-Эйт-Штрассе, 42
71088 Хольцгерлинген
Германия
Тел. +49 7031 4919 510
Факс +49 7031 4919 519
П ечать новы х изданий руководства пользователя
Новые издания данного руководства являются полностью пересмотренными и исправленны
ми редакциями, отражающими изменения функциональных возможностей оборудования. В
период между выпусками новых изданий могут быть произведены корректировки и обновле
ния текущего издания. Номер версии издания отображен на титульном листе и в нижних ко
лонтитулах, изменяясь при обновлении и издании новой версии руководства. Для получения
информации о текущей версии или покупки новой версии руководства обращайтесь к дист
рибьютору Curetis AG в вашем регионе или обратитесь в раздел загрузок на официальном
сайте Curetis.
Unyvero™ является торговой маркой компании Curetis AG.
I
© CURETIS AG. 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero ™ 00118 V2.0
I Руководство пользователя
--- стр. 4 ---
С О Д ЕРЖ А Н И Е
ПРЕДИСЛОВИЕ
1.1 Использованные символы и
обозначения 5
1.2 Условные обозначения 6
1.3 Ограничения ответственности
7
1.4 Обслуживание и техническая
поддерж ка 8
БЕЗОПАСНОСТЬ
2.1 Использование по назначению 10
2.2 Ответственность пользователя
1 1
2.3 Хранение и использование 12
2.4 Риск биологической опасности
1 2
2.5 Риск химической опасности 13
ОСНОВНОЙ ПРИНЦИП МЕТОДА
3.1 Компоненты Unyvero™ 16
3.2 Картридж для диагностики
пневмонии 18
3.3 Порядок работы 19
3.4 Операционная система Unyvero™
20
3.5 Ф акты о пневмонии 23
3.6 Панель Unyvero™ Pneumonia Panel
23
3.7 Принцип исследования 28
ВЫПОЛНЕНИЕ АНАЛИЗА
4.1 Подготовка 30
4.2 Хранение образцов 33
4.3 Транспортировка образцов 33
4.4 Начало теста 37
4.5 Размораживание Пробирки Мастер
М икс 38
4.6 Лизирование 38
4.7 Ход лизирования40
4.8 Извлечение образцов 41
4.9 Сборка картриджа 42
4.10 Измерение 45
4.11 Ход анализа 46
4.12 Извлечение картридж а 47
РЕЗУЛЬТАТЫ АНАЛИЗА
5.7 Доступ к результатам49
5.2 Считывание результатов 50
5.3 Неверные измерения 55
СООТВЕТСТВИЕ ЕВРОПЕЙСКИМ
СТАНДАРТАМ
6.1 Пределы обнаружения Ошибка!
Закладка не определена.
6.2 Перекрестная реактивность 57
6.3 Интерферирующие вещества 57
6.4 Воспроизводимость 58
6.5 Чувствительность и
Специфичность 59
l© C U R E T IS AG, 2 0 1 2 Картридж для диагностики пневмонии Р 50 Unyvero
Руководство пользователя
0 0 1 1 8 V 2 .0
--- стр. 5 ---
ПРЕДИСЛОВИЕ
'CURETIS AG, 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero
Руководство по применению
00118 V2.0
--- стр. 6 ---
Данное руководство предназначено для работников сферы здравоохранения, работающих с
Набор реагентов для идентификации возбудителей пневмонии и их генетической
устойчивости к антибиотикам в картридже и пробирках с крышками и наконечником
(The Unyvero Р50 Pneumonia Cartridge Set), производства Curetis AG, и работников, осуще
ствляющих сервис Системы Unyvero™.
1.1 Использованные символы и обозначения
Безопасность
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ Символ Предупреждение отмечает информацию о действиях или про
цессах, которые могут повлечь за собой травму или потерю ж изни в случае неправильного
использования. Не переходите к следующему этапу действий до тех пор, пока не удосто
верились в оценке рисков и возможности безопасно действовать далее.
ПРЕДОСТОРОЖНОСТЬ Символ Предосторожность отмечает информацию о действиях или
процессах, которые могут повлечь за собой порчу оборудования или расходных материалов
или привести к получению недостоверных результатов анализа в случае неправильного ис
пользования. Не переходите к следующему этапу действий, пока не удостоверились в оценке
рисков и возможности действовать далее без нанесения ущерба.
ПРИМЕЧАНИЕ Символ Примечание отмечает информацию о действиях или процессах, кото
рые могут помочь повысить эффективность и результативность ваших действий при работе с
данной продукцией.______________________________________________________________
' CURETIS AG, 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero ™ 00118 V2.0
Руководство пользователя
--- стр. 7 ---
1.2 Условные обозначения
Зарегистрированные и сокращенные названия
Таблица 1 Компоненты системы Unyvero™
Proprietary names Common names
Анализатор А50 Unyvero™ Анализатор Unyvero™
Модуль для лизирования образца L4 Unyvero™ Модуль для лизирования образца Unyvero™
Управляющая рабочая станция С8 Unyvero™ Управляющая рабочая станция Unyvero™
Пробирка Мастер Микс М 1 Unyvero™ Мастер Микс Unyvero™
Операционная система Unyvero™ ОС Unyvero™
Картридж для диагностики пневмонии Р50
Unyvero™
Картридж для диагностики пневмонии Unyve
ro™
Программный модуль Р50 для диагностики пневмо
нии Unyvero™ 1
Программный модуль для диагностики пнев
монии Unyvero™
j
Штатив-держатель пробирок для образца Unyvero™ Штатив-держатель пробирок для образца Un
yvero™
Наконечник для переноса образца Т1 Unyvero™ Наконечник для переноса образца Unyvero™
Пробирка для образца Т1 Unyvero™ Пробирка для образца Unyvero™
Крышка к пробирке для образца Т1 Unyvero™ Крышка к пробирке для образца Unyvero™
Транспортная крышка Т1 Unyvero™ Транспортная крышка Unyvero™
'CURETIS AG, 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero
Руководство пользователя
00118 V2.0
Ж .
--- стр. 8 ---
h
Система Unyvero™ состоит из Анализатора Unyvero™ (№ по каталогу 1629785), Модуля для
лизирования образца Unyvero™ (№ по каталогу 1600142), Управляющей рабочей станции Un
yvero™ (№ по каталогу 1668968), оснащенной Операционной системой Unyvero™, и Штатива-
держателя пробирок для образца Unyvero™ (№ по каталогу 60010).
Приложение Unyvero™ Pneumonia Application включает в себя следующие компоненты: Набор
реагентов для диагностики пневмонии Unyvero™ Р50 (№ по каталогу 10010) (включает Кар
тридж для диагностики пневмонии Unyvero™ (№ по каталогу 10001), Пробирку для образца
Unyvero™(№ по каталогу 10012), Крышку к пробирке для образца Unyvero™ (№ по каталогу
10013), Наконечник для переноса образца Unyvero™ (№ по каталогу 10014)), Пробирку Мас
тер Микс Unyvero™ (№ по каталогу 10011) и Программный модуль для диагностики пневмонии
Unyvero™. Кроме того. Наконечник для переноса образца Unyvero™ также может использо
ваться для переноса вязких образцов при работе с другими Приложениями Unyvero™
Application.
Экранные клавиши управления выделены жирным курсивом.
Ограничения ответственности
Вся информация и данные, отображенные в данном руководстве, представлены в соответст
вии с действующими Европейскими стандартами и нормами.
Производитель не несет ответственности за ущерб в результате:
» Невыполнения инструкций, предоставляемых вместе с оборудованием и расходными ма
териалами
» Использования оборудования и расходных материалов в целях, отличных от предназначения
и целей, заявленных в данном руководстве
» Использования оборудования и расходных материалов персоналом без предварительной
подготовки
» Неавторизованного внесения изменений в изделия.
Информация в данном руководстве может быть изменена без предварительного уведомле
ния.
CURETIS AG. 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero 00118 V2.0
Руководство пользователя
--- стр. 9 ---
Компания Curetis AG не несет ответственности ни за какие формы презентации и распростра
нения данного материала, включая, но не ограничиваясь косвенной гарантией товарного ка
чества и соответствия товара конкретному намерению покупки или использования.
Компания Curetis AG не несет ответственности за ошибки, содержащиеся в данном докумен
те, за случайный ущерб или ущерб, являющийся следствием предоставления, презентации
или использования данного материала.
1.4 Обслуживание и техническая поддержка
Заявки по осуществлению технической поддержки принимает компания Curetis AG по телефо
ну или электронной почте. Перед обращением, пожалуйста, удостоверьтесь, что вы имеете
информацию о серийном номере оборудования и номере лота расходных материалов.
Телефон: +49 7031 49195 55 или e-mail: support@curetis.com
Официальный эксклюзивный дистрибьютор продукции Curetis AG на территории России -
ООО «БиоЛайн»
Адрес: 197101, Санкт-Петербург, Петроградская набережная, д. 36, лит. А.
Телефон (812) 320-49-49, факс (812) 320-49-40.
e-mail: main@bioline.ru
' CURETIS AG, 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero ™ 00118 V2.0
Руководство пользователя
--- стр. 10 ---
БЕЗОПАСНОСТЬ
|©CURETIS AG, 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero ™
Руководство пользователя
00118 V2.О
--- стр. 11 ---
в данной главе описаны меры предосторожности, которые следует соблюдать, и условия, о
которых нужно помнить для безопасного использования Картриджа для диагностики пневмо
нии Unyvero™,
2.1 Использование по назначению
Приложение Unyvero™ Pneumonia Application для диагностики пневмонии предназначено для
определения патогенов, вызывающих пневмонии, и генов их устойчивости к антибиотикам, с
использованием Системы Unyvero™.
Приложение Unyvero™ Pneumonia Application для диагностики пневмонии является полуко-
личественным тестом на присутствие нуклеиновых кислот, основанного на восьми параллель
но поставленных мультиплексных ПЦР-реакциях. Приложение протестировано в отношении
одновременного обнаружения и распознавания ряда последовательностей нуклеиновых ки
слот, выделенных из патогенных микроорганизмов, в мокроте, аспирационном материале из
дыхательных путей и бронхоальвеолярном лаваже пациентов, с подозрением на пневмонию,
для получения информации о том, какие виды патогенов присутствуют в клиническом образ
це, а также о генах их устойчивости к антибиотикам. Выявление и идентификация специфич
ных последовательностей ДНК невирусного происхождения, выделенных из клинических об
разцов, полученных от пациентов с признаками и симптомами пневмонии, помогает в диагно
стике респираторной бактериальной или грибковой инфекции, если используется в сочетании
с другими клиническими и лабораторными данными. Сопутствующее культивирование необ
ходимо для получения культуры искомых организмов для дальнейшего тестирования чувстви
тельности к антибиотикам.
Рекомендуется проверять микробиологическим культивированием образцы, дающие при ис
следовании с помощью Приложения Unyvero™ Pneumonia Application отрицательный резуль
тат на наличие патогенных микроорганизмов и генов их устойчивости к антибиотикам. В част
ности, отрицательный ответ, касающийся устойчивости, не исключает отсутствия этой устой
чивости, в связи с тем, что устойчивый фенотип может быть обусловлен другими молекуляр
ными механизмами, не тестируемыми Приложением Unyvero ™ Pneumonia Application. Поло
жительные результаты не исключают грибковые или вирусные ко-инфекции, или ко-инфекции
с другими бактериями, не представленными в рамках Панели Unyvero™ Pneumonia. Поэтому,
' CURETIS AG, 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero ™ 00118 V2.0
Руководство пользователя
--- стр. 12 ---
обнаруженный микроорганизм может и не являться определяющим возбудителем заоолёва
ния.
Результаты, полученные с помощью Системы Unyvero™, не следует использовать как един
ственный способ диагностики при принятии решений по лечению или другим вопросам.
2.2 Ответственность пользователя
ПРЕДОСТЕРЕЖЕНИЕ Приложение Unyvero™ Pneumonia Application должно быть использо
вано только в соответствии с его предназначением. Любые претензии, связанные с использо
ванием Приложения Unyvero™ Pneumonia Application не по назначению, не будут рассматри
ваться компанией Curetis AG.
Не используйте составляющие набора после истечения срока годности. Не используйте рас
ходные материалы, если они покажутся вам влажными, или, если заметите какие-либо повре
ждения упаковки. Вскрывайте герметичную упаковку только непосредственно перед использо
ванием.
Картридж для диагностики пневмонии Unyvero™, Пробирка для образца Unyvero™, Крышка к
пробирке для образца Unyvero™, Наконечник для переноса образца Unyvero™ и Пробирка
Мастер Микс Unyvero™ предназначены для исследования образца только одного пациента.
После применения компоненты подлежат утилизации. Повторное использование запрещено.
Перед началом работы с Приложением Unyvero™ Pneumonia Application, пользователь дол
жен быть проинструктирован о правилах эксплуатации данного оборудования. Такой инструк
таж может быть проведен представителями компании Curetis AG, либо представителями, ав
торизованными компанией Curetis AG.
Вместе с тем, пользователю следует ознакомиться с соответствующим приложению руково
дством и паспортами безопасности (MSDS) (для следующих расходных материалов: Картрид
жа Unyvero™, Пробирке для образца Unyvero™, Крышке к пробирке для образца Unyvero™,
Пробирке Мастер Микс Unyvero™).
)© CURETIS AG, 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero ™ 00118 V2.0
Руководство пользователя
--- стр. 13 ---
2.3 Хранение и использование
ПРЕДОСТЕРЕЖЕНИЕ Картридж Unyvero™, Пробирку для образца Unyvero™ и Крышку к
пробирке для образца Unyvero™ следует хранить при температуре от 15°С до 25°С. Не под
вергайте расходные материалы Unyvero™ воздействию прямого солнечного света.
В течение длительного срока (более 7 дней) Пробирку Мастер Микс Unyvero™ следует хра
нить при температуре -20°С, кратковременное хранение (менее 7 дней) осуществляется при
+4°С. Размораживайте Пробирку Мастер Микс Unyvero™ на протяжении 30 минут перед ис
пользованием при комнатной температуре.
Вскройте упаковку картриджа не ранее, чем за 30 минут до начала использования.__________
2.4 Риск биологической опасности
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ При работе с образцами биологического происхождения вы подвер
гаетесь риску заражения. Обращайтесь с образцами биологического происхождения, в том
числе с пробирками, содержащими такие образцы, как с потенциально инфекционным ма
териалом. Следуйте рекомендациям по обращению с биологическим материалом, уста
новленным вашим учреждением. Утилизируйте одноразовые расходные материалы в со
ответствии с СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп
патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней», М У 1.3.2569-09
«Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых
кислот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности».
Удалять неиспользованные реактивы необходимо в соответствии с требованиями
СанПиН 2.1.7.2790-10.- Санитарно-эпидемиологические требования к обращению с
медицинскими отходами.
Настоятельно рекомендуется надевать одноразовые перчатки, защитные очки и халаты
при работе с клиническими образцами и расходными материалами Прилож ения Unyvero™
Pneumonia Application. /Настоятельно рекомендуется тщательно мыть руки после работы
с клиническими образцами и расходными материалами. Утилизируйте одноразовые рас-
© CURETIS AG, 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero ™ 00118 V2.0
Руководство пользователя
Л .
--- стр. 14 ---
ходные материалы в соответствии с рекомендациями, установленными вашим учрежд^
нием или местными властями.
2.5 Риск химической опасности
ПРЕДОСТЕРЕЖЕНИЕ Для сведения к минимуму рисков при работе с опасными химическими
веществами:
» Избегайте прямого контакта с химическими веществами;
» Используйте средства индивидуальной защиты (очки, перчатки и одежду) в течение всей
работы с химическими веществами.
» Регулярно проверяйте утечки и разливы химических веществ.
В случае если произошла утечка, следуйте рекомендациям по процедуре очистки, отображен
ным в паспортах безопасности (MSDS).
Следуйте государственным/местным или федеральным законам и рекомендациям по хране
нию, утилизации и обращению с химическими реагентами. Утилизируйте использованные рас
ходные материалы в соответствии с федеральными или ведомственными рекомендациями.
ПРИМЕЧАНИЕ Паспорта безопасности (MSDS) к Картриджу Unyvero™, Пробирке для образца
Unyvero™, Пробирке Мастер Микс Unyvero™ и Крышке к пробирке для образца Unyvero™,
предоставляются по запросу компанией Curetis AG.
I© CURETIS AG, 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero ™ 00118V2.0
Руководство пользователя
Ж
--- стр. 15 ---
Использованные обозначения
А
IVD
С€
Внимание, обратитесь к
сопроводительной доку
ментации
Медицинское устройство
для лабораторной диаг
ностики
Европейский стандарт
Ж
Не подвергайте воздействию пря
мого солнечного света
Не используйте, если упаковка по
вреждена
Обратитесь к инструкции перед
использованием
Однократное использо
вание
Использовать до указан
ной даты (Срок годности)
Ограничения по температуре
Содержимого достаточно для про
ведения < п> исследований
LOT Номер лота (партии) Производитель
REF Номер по каталогу
©CURETIS AG, 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero ™
Руководство пользователя
00118 V2.0
--- стр. 16 ---
о с н о в н о й ПРИНЦИП МЕТОДА
I© CURETIS AG, 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero ™
Руководство пользователя
00118 V2.0
Л ,
--- стр. 17 ---
3.1 Компоненты Unyvero™
Приложение Unyvero™ Pneumonia Application состоит из следующих частей:
» 1 \ / 1 о д у л ь для лизирования образца Unyvero™
» Управляющая рабочая станция Unyvero™
» Анализатор Unyvero™
» Операционная система Unyvero™ и Unyvero™ Р50 Программный модуль
» Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero™
» Пробирка для образца Unyvero™
» Крышка к пробирке для образца Unyvero™
» Пробирка IVlacTep Микс Unyvero™
» Наконечник для переноса образца Unyvero™
» Штатив-держатель пробирок для образца Unyvero™
Оборудование и программное обеспечение
Рисунок 1. Система Unyvero™
© CURETIS AG, 2012
Модуль для лизирования образца
Unyvero™ (1) выполняет разрушение (ли-
зирование) кпинического материала, по
лученного от пациента. Благодаря по
следним технологическим достижениям,
Модуль для лизирования образца спосо
бен обрабатывать нативные клинические
образцы различного происхождения, ис
пользуя один и тот же протокол работы.
Анализатор А50 Unyvero™ (2) способен
одновременно обрабатывать до 2х кар
триджей с возможностью произвольной
загрузки, полностью автоматически вы
полняя процедуры выделения ДНК, спе-
Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero ™
Руководство пользователя
00118 V2.0
--- стр. 18 ---
цифичную амплификацию и детекцию.
Управляющая рабочая станция Unyvero™ (3) с сенсорным терминалом и встроенным скане
ром для считывания штрих кодов соединяется с Анализатором Unyvero™ и Модулем для ли-
зирования образца Unyvero™ в единую систему. Операционная система Unyvero™ с про
граммным обеспечением и Программный модуль Unyvero™, соответствующий типу картрид
жа, предоставляют пользовательский интерфейс, направляющий пользователя шаг за шагом
через всю процедуру анализа, и автоматически отображающий результаты анализа.
Расходны е материалы и принадлежности
‘ 4
7
Картридж Unyvero™ содержит реагенты выделения и очистки ДНК, прай
меры, гибридизационные буферы, отмывающие буферы и зонды для де
текции.
Пробирка для образца Т1 Unyvero™ используется для пробоподготовки
образца, полученного от пациента. Содержит стеклянные гранулы и буфе
ры для лизирования бактерий и разжижения образца.
Крышка к пробирке для образца Т1 Unyvero™ плотно закрывает Пробирку
для образца Unyvero™ и содержит протеиназу К и синтетическую последо
вательность ДНК для контролирования процессов.
Наконечник для переноса образца Т1 Unyvero™ является вспомогатель
ным устройством для использования со шприцом на 1 мл с разъемом Лу-
ер-Лок (шприц не входит в комплект поставки). Наконечник помогает пере
нести образец из емкости с клиническим материалом в Пробирку для об
разца Unyvero™.
Пробирка Мастер Микс Т1 Unyvero™ содержит реагенты для амплифика
ции ДНК, такие как термостабильная ДНК-полимераза, буфер для ПЦР и
дезоксирибонукпеотиды.
;У 4 Штатив-держатель пробирок для образца Unyvero™ предназначен для за-
крепления Пробирок для образца Unyvero™ в процессе переноса образца,
полученного от пациента, в обозначенную пробирку (штатив-держатель
■ • ' З Г с *
© CURETIS AG. 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 U n y v e r o 0 0 1 1 8 V2.0
Руководство пользователя
--- стр. 19 ---
является принадлежностью, поставляемой совместно с Системой
Unyvero™.
ПРИМЕЧАНИЕ Приборы описаны более подробно в руководстве к Системе Unyvero
3.2 Картридж для диагностики пневмонии
Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero™ (Рисунок 2) осуществляет все этапы ис
следования проб для выполнения полного анализа диагностики пневмонии:
выделение ДНК,
мультиплексная ПЦР с детекцией по «конечной точке», и
детекция ампликонов (продуктов ПЦР) с помощью гибридиза
ции на мембране методом ДНК-микрочип
Картридж Unyvero™ содержит встроенные емкости для реагентов, колонку для очистки ДНК,
восемь независимых камер для ПЦР и соответствующее количество мембран с чипами (зон
дами). В Картридже уже содержатся буферы для выделения ДНК, реагенты и флюоресцент-
но-меченные праймеры для амплификации методом ПЦР, а также зонды для гибридизации
методом ДНК-микрочип.
После лизирования образца, пользователь собирает Картридж, вставляя в Картридж Пробир
ку для образца Unyvero™ с лизированным образцом и размороженную Пробирку Мастер Микс
Unyvero™, После сборки Картридж представляет собой физически закрытую систему, что
сводит к минимуму риски контаминации.
Внутренний контроль (синтетический ген, не имеющий значимой гомологии с известными по
следовательностями, встречающимися в природе) претерпевает все процессы, происходящие
в Картридже, для проверки корректного прохождения этапов выделения ДНК, ПЦР и гибриди-
'CURETIS AG, 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero
Руководство пользователя
00118 V2.0
/Q
--- стр. 20 ---
зации. Данный ген амплифицируется в каждой из 8 камер ПЦР и гибридизуется на каждой из
мембран.
В
0
M u ltip le x pen « v i t h n r r u y d e to d io n
3.3 Порядок работы
Приложение Unyvero™ Pneumonia
Application легко в использовании, и работа с
ним займет только 5 минут. На первом этапе
образец разрушают (лизируют) при помощи
1 \ / 1 о д у л я для лизирования образца (Рисунок
3). Затем, в Картридж вставляют Пробирку с
образцом и Пробирку Мастер Микс для
последующего анализа при помощи
Анализатора Unyvero ™.
Рисунок 2. Картридж для диагностики
пневмонии Unyvero™
'CURETIS AG, 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero ™
Руководство пользователя
00118 V2.0
--- стр. 21 ---
Рисунок 3. Порядок работы
3.4 Операционная система Un-
yvero™
На рисунке 4 представлено изображение экрана
Операционной системы Unyvero™ в состоянии Active
Tests (Активные тесты). Каждая строка обозна
чает активный анализ. Цвет строки отражает текущий
статус исследования.
При нажатии на статусную строку анализа, она рас
крывается и показывает дополнительную информа
цию об этом тесте (Рисунок 5). Тип отображаемой
информации зависит от текущего статуса выбранного
теста.
Серые строки указывают на протекающий или окон
чившийся этап лизирования образца. Фиолетовые -
на протекающий этап анализа. Оконченные тесты
обозначаются синим. При нажатии на синюю строку,
результаты анализа отображаются на экране.
'CURETIS AG, 2012
Рисунок 4. Вид экрана Активные тесты
программного обеспечения Операцион
ной системы Unyvero^“
Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero ™ 00118 V2.0
Руководство пользователя
Ж .
--- стр. 22 ---
ки, иллюстрирующие неоконченные тесты, прерванные пользователем, или незавершенные
из-за технических проблем, окрашиваются в
оранжевый цвет.
Рисунок 5. Информация, вы водим ая на
экран, открытием статусной строки, со о т
ветствующ ей тесту
Рисунок 6. Экранные сен сор н ы е клавиши управления
Экранные сенсорны е клавиши управления
Login/Logout
Active Tests
New Test
Saved Tests
Позволяет пользователю войти или выйти из системы.
Отображает список всех активных тестов.
Начать новый тест.
Отображает список и результаты предыдущих тестов.
Advanced Functions Позволяет регистрировать пользователей и устройства, пре
доставляет доступ к отчетам о состоянии подключенных моду
лей системы.
A V Клавиши прокрутки. Позволяют перемещаться по спискам, вы
ходящим за рамки доступного пространства на экране.
'CURETIS AG. 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero ™
Руководство пользователя
00118 V2.0
--- стр. 23 ---
Пользовательский интерф ейс и обозначения
При открытии строки текущего теста (нажатием на нее), отображаются следующие символы.
Каждый символ иллюстрирует определенный процесс и представляет собой определенный
этап анализа. Если процесс активен в данный момент, то соответствующий символ обознача
ется зеленым цветом. Галочка в соответствующем окне обозначает завершение этапа. Если
этап был выполнен некорректно, окно загорается оранжевым цветом и отмечается крестом.
Таблица 2 Символы, отображ аю щ ие этапы анализа
Данный символ обозначает этап рабочего процесса, в течение которого Про
бирка для образца Unyvero™ должна быть отсканирована и вставлена в
Модуль для лизирования Unyvero ™.
Данный символ обозначает этап рабочего процесса, в течение которого про
исходит разрушение (лизирование) образца при помощи Модуля для лизиро
вания образца Unyvero™.
Данный символ выделяется цветом, когда от пользователя требуется собрать
Картридж, отсканировать его, и вставить Картридж в разъем Анализатора.
Данный символ обозначает этап выделения ДНК в Картридже Unyvero™.
Данный символ обозначает этап течения мультиплексной ПЦР в Картридже
Unyvero™.
Данный символ обозначает этап детекции ампликонов (продуктов ПЦР) мето
дом ДНК-микрочип в Картридже Unyvero™ .
©CURETIS AG, 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero ™
Руководство пользователя
00118 V2.0
Ж .
--- стр. 24 ---
3.5 Факты о пневмонии
Пневмония является острой инфекцией с высоким уровнем заболеваемости, чаще всего
вызываемой бактериями. У 5% поступивших в больницу пациентов развивалось это быстро
прогрессирующее заболевание. Уровень смертности превышает 30%\а среднее время
пребывания в стационаре от 1 1 до 14 дней\
Действующим на данный момент стандартом для диагностики пневмонии является культу
ральная диагностика для выявления бактерий и устойчивости к антибиотикам. Тем не менее,
обычно этот процесс занимает как минимум 2-5 дней. Без этих диагностических сведений
большинство методов лечения пневмонии опирается только на эмпирические решения, кото
рые приводят к высокому уровню (~ 40% )^ изначально недостаточного лечения антибиотиками.
Исследования показали, что раннее, соответствующее и правильное лечение может
значительно сократить и смертность и продолжительность пребывания в стационаре^.
Для улучшения диагностики пневмонии Приложение Unyvero™ Pneumonia Application:
» Позволяет проводить анализ мокроты, аспирата из трахей, бронхоальвеолярного лаважа
и образцов материала, забранного защищенной щеткой-катетером.
» Проведение всех аналитических стадий происходит в закрытой системе, тем самым сни
жая количество совершаемых вручную действий до нескольких простых шагов;
» Одновременно выявляет и идентифицирует из образца от пациента различные микроор
ганизмы и гены их устойчивости к антибиотикам примерно за 4 часа.
3.6 Панель Unyvero™ Pneumonia Panel
Панель обнаружения микроорганизмов и генов устойчивости разработана на основе анализа
данных, опубликованных в литературе, и следующих принципах:
» CDC: Профилактика Healthcare-Associated Pneumonia''
» American Thoracic Society: HAP, VAP, HCAP Guideline®
Kollef et al, Chest, Vol 115 (1999)
^Kollef et al, Chest, Vol 128 (2005)
■ ’Rello et al, Am J ResprCrIt Care Med, Vol 176 (1997)
4Talan et al, MMWR Recomm Rep. Vol 53 (2004)
5 Siegel et al, Am J Infect Control, Vol 35 (2007)
>© CURETIS AG. 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero ™
Руководство пользователя
00118 V2.0
--- стр. 25 ---
» CAP Guideline, Paul-Ehrlich-Gesellschaft (Germany)
» European Respiratory Society: Lower Respiratory Tract Infections
» British Society of Antimicrobial Chemotherapy: HAP Guideline
» Canadian Guideline Committee: VAP Diagnosis and Treatment.
Картридж Unyvero™ Pneumonia Cartridge выявляет следующие микроорганизмы: Acinetobac-
terbaumannii, Chlamydophilapneumoniae, Enterobacter sp,, Escherichia coli, Haemophilusinfluen-
zae, Klebsieliapneumoniae, Klebsiellaoxytoca, Legionella pneumophila, Moraxella catarrhalis, M or-
ganellamorganii, Pneumocystis jirovecii, Proteus sp., Pseudomonas aeruginosa, Serratiamarces-
cens, Staphylococcusaureus, Stenotrophomonasmaltophilia и Streptococcus pneumoniae. Одно
временно с этим, в том же картридже определяются и следующие гены, связанные с устойчи
востью к антибиотикам: ctx-M , dha, ebc, ermA, егтВ, ermC, дугАВЗ, дугА87, int1, крс, тесА, те-
fA /E , тзгА, оха51-подобные, рагС, shv, suH, и tem. Маркеры устойчивости на Панели и воз
можные результаты устойчивости к антибиотикам представлены в таблице 3 :
Таблица 3 Маркер устойчивости Панели Unyvero™ Pneumonia Panel
Маркер Потенциальная устойчи
вость Источник сведений
ctx-M Цефалоспорины Зго по
коления, Пенициллины
Bonnet et al, Antimicrob Agents
Chemother, Vol. 45(8) (2001)
dha Цефалоспорины Зго по
коления, Пенициллины
P6rez-P6rez et al, J ClinMicrobiol,
Vol. 40(6) (2002)
ebc Цефалоспорины Зго по
коления, Пенициллины
P6rez-P6rez et al, J ClinMicrobiol,
Vol. 40(6) (2002)
ermA Макролиды / Линкозами-
ды
Roberts et al, FEMS MicrobiolLett,
Vol 282(2) (2008)
егтВ Макролиды / Линкозами-
Ды
Roberts et al, FEMS MicrobiolLett,
Vol 282(2) (2008)
ermC Макролиды / Линкозами-
Д ы
Roberts et al, FEMS Microbiol Lett,
Vol 282(2) (2008)
iCURETIS AG, 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero ™
Руководство пользователя
00118 V2.0
--- стр. 26 ---
gyrA83ofE. coli- 1 маркер,
P . aeruginosa - 2 независи-
МЫХ маркера
Фторхинолоны
Kugelberg et al, J Antimicrob Che-
mother, Vol.55(1) (2005), Yu et al, J
ClinMlcrobiol, Vol.42(9) (2004)
iCURETIS AG. 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero ™
Руководство пользователя
00118 V2.0
Ж
--- стр. 27 ---
Маркер Потенциальная ус
тойчивость Источник сведений
дугА87 Е . соН 1 маркер,
Р . aeruginosa 2 независимых
маркера
Фторхинолоны
Kugelberg et al, J Antimicrob Che-
mother, Vol.55(1) (2005), Yu et al, J
ClinMicrobiol, Vol.42(9) (2004)
in t1
Множественная ле
карственная устой
чивость
Fluit et al, Clin Microbiol Infect, Vol
10(4)(2004)
крс Карбапенем Queenan et al, Clin Microbiol Rev,
Vol. 20(3) (2007)
тесА Оксациллин Carvalho, Braz J Infect Dis, Vol. 14(1)
(2010)
mefA/E Макролиды Jenkins et al, Emerg Infect Dis, Vol.
15(8) (2009)
msrA Макролиды Leclercq et al, Antimicrob Agents
Chemoth, Vol.35(7)(1991)
0X851 like Карбапенем Walther-Rasmussen et al, J Antimi-
crobChemother, Vol.57(3) (2006)
parC Фторхинолоны Kugelberg et al, J AntimicrobChe-
mother, Vol.55(1)(2005)
shv
Пенициллины, Це-
фалоспорины Зго
поколения
Gupta et al, Indian J Med Res, Vol.
126(5) (2007)
suH МЛУ / Сульфона-
миды
Bennett et al, Br J Pharmacol, Vol.
153 SuppI 1 (2008)
tern
Пенициллины, Це-
фалоспорины Зго
поколения
Gupta et al, Indian J Med Res, Vol.
126(5) (2007)
© C U R ETISA G .2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero
Руководство пользователя
00118 V2.0
--- стр. 28 ---
Мультиплексные реакции ПЦР для выявления микроорганиз
мов и их маркеров устойчивости проходят в восьми несооб-
щающихся ПЦР-емкостях (Рисунок 7). Расположение аналитов
в емкостях приведено в таблице 4.
Таблица 4 Генетические маркеры по ПЦР-емкостям Рисунок 7 ПЦР-емкости 1-8
Емкость 1 Емкость 2 Емкость 5 Емкость 6
дугА (£. с о / У ) gyrA (£. co li) envC shv
S. marcescens S . m altophilia P . jirovecii gyrA (P . aeruginosa)
крс
. . . .. .
A . baum anii gyrA (P . aeruginosa) M . m organa
ctx-M erm B E . coli oxa51-\\ke
L . pneum ophila dha H . influenzae
Емкость 3 Емкость 4 Емкость 7 Емкость 8
Proteus sp. M . catarrhalis m ecA P . aeruginosa
S. aureus suH K . pneum oniae K . oxytoca
дугА (P . aeruginosa) S . pneumoniae m efA erm A
in t1 gyrA (P . aeruginosa)parC T em 1
C . pneum oniae Enterobacter sp. ebc m srA
>©CURETIS AG. 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero
Руководство пользователя
00118 V2.0
-9'Р
--- стр. 29 ---
3.7 Принцип исследования
Приложение Unyvero™ Pneumonia Application подвергает автоматической обработке и прово
дит в одноразовом картридже восемь параллельных мультиплексных ПЦР с детекцией «по
конечной точке», подсчитывает количество искомых ампликонов после гибридизации на зон
де.
» Образец пациента переносится в Пробирку для образца Unyvero™ с помощью Наконечни
ка для переноса образца Unyvero™, закрывается Крышкой к пробирке для образца Unyve
ro™, и лизируется в Модуле для лизирования Unyvero™ Lysator.
» Следом за этим, Пробирка для образца Unyvero™ и Пробирка 1 \ / 1 а с т е р Микс Unyvero™
вставляются в Картридж Unyvero™ Pneumonia Cartridge.
» Картридж Unyvero™ Pneumonia Cartridge вставляют в Анализатор Unyvero™, который его
автоматически обрабатывает.
Прилагаемая операционная система направляет пользователя в течение всей работы.
Считыватель штрих-кода позволяет вводить данные пациента, проверяет срок годности
расходных материалов и запоминает номера их лотов.
© CURETIS AG, 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero ™ 00118 V2.0
Руководство пользователя
М .
--- стр. 30 ---
ВЫПОЛНЕНИЕ АНАЛИЗА
I© CURETIS AG, 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero ™
Руководство пользователя
0 0 1 1 8 V 2.0
0 ^ -^ *
--- стр. 31 ---
в данной главе описывается, как проводить анализ с использованием Приложения Unyvero™
Pneumonia Application.
4.1 Подготовка
ПРЕДОСТЕРЕЖЕНИЕ Никогда не используйте компоненты после истечения срока годности.
Не используйте расходные материалы, если почувствовали, что они владные или заметили,
что упаковка повреждена. Вскройте герметичную упаковку только непосредственно перед ис
пользованием.
Картридж Unyvero™ Pneumonia Cartridge, Пробирка для образца Unyvero™, Крышка к пробир
ке для образца Unyvero™, Пробирка 1 \ / 1 а с т е р Микс Unyvero™ и Наконечника для переноса об
разца Unyvero™ предназначены для проведения однократного исследования только одного
пациента. Повторно не использовать!
ПРИ1\/1ЕЧАНИЕ Если у какого-то из компонентов истек срок годности, то исследование Прило-
жения Unyvero™ Pneumonia Application не может быть запущено.
Материалы Unyvero™
До начала анализа убедитесь, что у Вас есть следующие расходные материалы и аксессуары,
которые являются составными частями Приложения Unyvero™ Pneumonia Application:
» Картридж Unyvero™ Pneumonia Cartridge - 1 шт.
» Пробирка для образца Unyvero™ - 1шт.
» Крышка к пробирке для образца Unyvero™ -1 шт.
» Пробирка Мастер Микс Unyvero™ -1 шт.
» Наконечник для переноса образца Unyvero™ -1 шт.
ПРИМЕЧАНИЕ Паспорта безопасности (MSDS) к Картриджу Unyvero™ Cartridge, Пробирке
для образца Unyvero™, Пробирке Мастер Микс Unyvero™ и Крышке к пробирке для образца
Unyvero™ предоставляются по запросу к компании Curetis AG.
© CURETIS AG, 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero 00118 V2.0
Руководство пользователя
--- стр. 32 ---
Необходимые, но не поставляемые материалы
Для выполнения анализа Вам необходимы;
» образец (собранный в специальный стерильный контейнер)
» 1 мл шприц Луер-Лок
» Личные средства защиты (одноразовые перчатки, лабораторный халат, защитные очки) и
оборудование для работы с инфекционными материалами как указано в рекомендациях,
установленных в вашем учреждении.
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ Пока образец не перенесен в Пробирку для образца Unyvero™, и не за
крыт Крыш кой, существует опасность взаимодействия с инфекционными материалами.
Обработка таких биологических образцов, как мокрота, аспират трахеи и бронхиальный
лаваж , мож ет привести к риску заражения.
Ручная обработка всех биологических образцов, включая внешнюю поверхность Пробирок
для образцов, следует считать потенциально инфекционными. Следуйте инструкциям
вашего учреждения для обработки биологических образцов. Т акж е следуйте местным ин
струкциям по работе с потенциально инфекционным материалом. При работе с образца
м и и реагентами необходимо носить заш,итные одноразовые перчатки, лабораторный ха-
лат и защитные очки. Тщательно мойте руки после завершения работы.
_______________
Система Unyvero™
в этом разделе описаны основные шаги для запуска оборудования и операционной системы
Приложения Unyvero™ Pneumonia Application.
Если оборудование еще не запущено, включите его следующим образом:
1 . Анализатор Unyvero™ Analyzer, используя переключатель в нижнем правом углу
на передней панели прибора.
2. Модуль для лизирования Unyvero™ Lysator, используя переключатель в нижнем
левом углу на задней панели прибора,
3. Управляющая рабочая станция Unyvero™ Cockpit, используя переключатель в
нижнем правом углу на задней панели прибора.
Для получения дополнительной информации о работе с приборами, обратитесь к Руководству
Пользователя Unyvero ™ Guide.
© CURETIS AG. 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero ™ 00118 V2.0
Руководство пользователя
М .
--- стр. 33 ---
ПРИМЕЧАНИЕ Перед началом исследования, убедитесь, что на компьютер установлен соот-
ветствующий программный модуль (например Пневмония).________________________
Рисунок 8 Запуск теста
Для запуска теста, пожалуйста, выполните следующие действия:
а с На стартовом экране нажмите “Вход в систему” (Рисунок 8)
Q На следующем экране введите Ваше имя пользователя и пароль с помощью интегрированной
экранной клавиатуры. Затем нажмите ОК. После этого. Вы получаете доступ к экрану для ввода
тестовых данных (Рисунок 9).
unyvero tScuretis
ПРИМЕЧАНИЕ Перед началом лизирования, убедитесь,
что Вы взяли Пробирку Мастер Микс Unyvero™ из холо
дильника. Обратите внимание на раздел “Подготовка
Пробирки Мастер Микс Unyvero™ ” на стр.37.
Figure 9 Test inputscreen
©CURETIS AG, 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero
Руководство пользователя
00118 V2.0
М .
--- стр. 34 ---
4.2 Хранение образцов
ПРЕДОСТЕРЕЖЕНИЕ По возможности храните образцы при
температуре 2°- 8°С, в том числе и при транспортировке в
бораторию. Независимо от условий хранения, использовать
образцы, взятые более 12 часов назад, не рекомендуется. Ана
лизируйте за один раз образцов не больше, чем есть свободных
гнезд в Анализаторе Unyvero™ Analyzer.____________________
Рисунок 10 Первичные кон
тейнеры для образцов
4.3 Транспортировка образцов
Вы можете перенести образец в Пробирку для образца Unyvero ™ с использованием или без
Наконечника для переноса образца Unyvero™. Будьте внимательны, чтобы не произошла кон-
таминация образца с внешними микроорганизмами.___________________________________
ПРЕДОСТЕРЕЖЕНИЕ Не вынимайте Наконечник для переноса образца Unyvero™ из упаков-
ки преждевременно.
'CURETIS AG, 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero
Руководство пользователя
00118 V2.0
Ж 1.
--- стр. 35 ---
в Штативе-держателе пробирок для образца Unyvero™ распо
ложены четыре ячейки для Пробирок для образцов Unyvero™
(1) (Рисунок 11). За каждой из этих ячеек расположены отвер
стия, куда вставляются первичные контейнеры с образцами
пациентов. (2).
Рисунок 11 Установка Проби
рок для образцов Unyvero™
D Достаньте Пробирку для образца Unyvero™ из упаковки.
ё
Щелкните по верхней части Пробирки для образца Unyvero™, чтобы убедиться в отсутствии
жидкости в Крышке к пробирке для образца Unyvero™.
ПРЕДОСТЕРЕЖ ЕНИЕ Не встряхивайте на вортексе и не центрифугируйте Пробирку для об-
разца Unyvero™ с Крышкой к пробирке для образца Unyvero™.
__________________________
D Поместите Пробирку для образца Unyvero™ в Штатив-держатель Unyvero™ , вставив пробирку
в пустую ячейку (Рисунок 11).
D Установите первичный контейнер с образцом пациента в Штатив-держатель Unyvero™ в наи
более подходящее место в его верхней части.
О Снимите Крышку с Пробирки для образца Unyvero™ и отправьте на утилизацию.
ПРЕДОСТЕРЕЖЕНИЕ Не прикасайтесь к Наконечнику для переноса образца Unyvero™ при
его извлечении из упаковки. Убедитесь, что Наконечник для переноса образца Unyvero™ не
контаменирован, чтобы не внести инородный генетический материал в анализируемые образ-
цы. Обратите внимание на правила работы в стерильныхусловиях.
'CURETIS AG, 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero
Руководство пользователя
00118 V2.0
М .
--- стр. 36 ---
□ Откройте упаковку Наконечника для переноса образца Unyvero™ Sample Transfer Tool,
стараясь как можно меньше ее повредить, и плотно соедините Наконечник Unyvero™ с 1 мл
шприцем с разъемом Луэр-Лок.
ПРИМЕЧАНИЕ Если Наконечник для переноса образца Unyvero™ прилегает недостаточно
плотно, набрать воздух или образец будет невозможно.________________________________
Переместите образец в Пробирку для образца Unyvero™ с помощью Наконечника для пере
носа образца Unyvero™ следующим образом:
Сначала наберите 50 мкл воздуха в шприц. □
Вставьте Наконечник Unyvero™ в образец и набеоите оовно 180 мкл образца в шприи (Ри- D
сунок 12).
ПРЕДОСТЕРЕЖЕНИЕ Не используйте более 200 мкл образца, так как пробирка может пере
полниться.
ПРИМЕЧАНИЕ Для вязких образцов используйте Наконечник Unyvero™ со скошенным кон-
цом, чтобы сдвинуть лишнее на стенки контейнера.____________________________________
Осторожно вставьте Наконечник Unyvero™ в Пробирку для образца Unyvero™, до упора. D
Медленно вставьте образец в Пробирку для образца Unyvero™ (Рисунок 13). □
Утилизируйте шприц с Наконечником Unyvero™ в соответствии с рекомендациями, установ- О
ленными вашим учреждением или местными властями.
' C U R E Tl '' ц I 7 П - Г - .» -п-%4тг11лгГтв--т|тт«-м-|лар^пГ'Т1Лн'1л 00118 V2.0
Рисунок 12 Drawing а specimen
В(
Рисунок 13 Transfering а specimen
--- стр. 37 ---
Достаньте Пробирку для образца Unyvero™ из упаковки.
ПРИМЕЧАНИЕ В нижней части Крышки к пробирке для образца Unyvero™
(1) (Рисунок 14) расположены 2 маленьких отверстия. Кроме этого, в
верхней части Пробирки для образца Unyvero™ есть два «носика» (2).
Убедитесь, что «носики» герметично закрыты.
Рисунок 14 Пробирка для образца
Unyvero
□ Закройте Крышку к пробирке для образца Unyvero™ до щелчка (Рисунок 15).
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ Любой контакт с образцом является потенциально инфекционным.
Перед продолжением удостоверьтесь, что Пробирка для образца Unyvero™ снаружи не
контаминирована.
Также ознакомьтесь с паспортом безопасности (MSDS) Образца Unyvero™. Когда из Про
бирки для образца Unyvero™ уже извлечена Транспортная крышка Unyvero™, реагенты,
рискующие т вылиться, могут вызвать раздражение или повредить кожу. При попадании
химических веществ из Крышки к пробирке для образца Unyvero™ на кожу или в глаза, не
замедлительно промойте их большим количеством воды.
ПРЕДОСТЕРЕЖЕНИЕ Убедитесь, что Крышка к пробир
ке для образца Unyvero™ плотно закрыта. Неплотно за
крытая Крышка Unyvero™ создает риск контаминации и
может вызвать повреждения одуля для лизирования.
ПРИМЕЧАНИЕ Не пытайтесь повторно открывать Unyve
ro™ Sample Tube.
Рисунок 15 Фиксация Пробирки для
образца Unyvero™ зидж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero
Руководство пользователя
00118 V2.0
--- стр. 38 ---
4 . 4 Н а ч а л о т е с т а
На сенсорном экране монитора, внизу экрана, нажмите Новый Тест. (Рисунок 16)
Проведите сканирование первичного образца пациента.
Рисунок 16 Начало нового теста
Рисунок 17 Сканирование пробирок с
образцами
ПРИМЕЧАНИЕ Если Вы не проводите сканирование ID
образца, Вы можете внести его вручную в поле «ID об
разца» с помощью экранной клавиатуры. Также, Вы мо-
жете добавлять примечания в поле «Комментарий».
Алгоритм:
Когда всплывет напоминание, поднесите штрих-код Про
бирки для образца Unyvero™ к считывателю штрих-кодов
(Рисунок 17).
Справа от окна «Тип Теста» нажмите, например, кнопку
Пневмония.
Справа от окна «Тип образца», нажмите на кнопку, соот
ветствующую вашему типу образца, например. Мокрота
После введения всей информации, нажмите Пуск.
Если срок годности Пробирки для образца Unyvero™
истек. Операционная система Unyvero™ регистрирует
эту информацию, после чего начните исследование за
ново с новой Пробиркой для образцов Unyvero™.
а
а
POCURETIS AG. 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero
Руководство пользователя
00118 V2.0
Ж
--- стр. 39 ---
4 . 5 Р а з м о р а ж и в а н и е П р о б и р к и М а с т е р М и к с
ПРИМЕЧАНИЕ Пробирку Мастер Микс Unyvero™ необходимо хранить при температуре -20°С
в случае долгосрочного хранения (> 7 дней) и 4°С в случае коротких сроков (< 7 дней). _______
О Перед началом лизирования, достаньте одну из Пробирок Мастер Микс Unyvero™ из моро
зильника.
О Предварительно дайте Пробирке Мастер Микс Unyvero™ оттаять 30 минут при комнатной
температуре - за время лизирования образца.
4 . 6 Л и з и р о в а н и е
ПРИМЕЧАНИЕ Прежде чем установить Пробирку для образцов Unyvero™ в Модуль для ли
зирования Unyvero™ проверьте наличие грязи и протечек. Если отверстие для пробирки в
Модуле для лизирования Unyvero™ Lysator загрязнено, протрите его ватным тампоном, смо
ченным в 70% этиловым спиртом. Перед продолжением теста, убедитесь, что этанол испа
рился.
К процессу лизирования следует преступать только тогда, когда в Анализаторе Unyvero™
Analyzer есть свободное отверстие. Начав проводить лизирование на Модуле для лизирова-
ния Unyvero™ Lysator, следующее возможно начать не ранее, чем через 30 мин.______________
После сканирования пробирки с образцом, крышка Модуля для лизирования Unyvero™ авто
матически открывается, позволяя загрузить следующую пробирку.
Появляется диалоговое окно 'Перенесите Пробирку для образца в Модуль для
лизирования' (Рисунок 18), предлагая вставить Пробирку для образца Unyvero™.
©CURETISAG , 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero ™ 00118 V2.0
Руководство пользователя
М .
--- стр. 40 ---
Отведите защитную заслонку и вставьте Пробирку для образца Unyvero™ в Модуль для ли-
зирования Unyvero™ Lysator до упора.
Верните защитную заслонку назад и убедитесь, что она находится в своей первоначальной
позиции и закрывает Пробирку для образца Unyvero™ полностью.
Закройте крышку Модуля для лизирования Unyvero™.
При наличии свободного отверстия как в Модуле для лизирования Unyvero™Lysator, так и в
Анализаторе Unyvero™ Analyzer, операционная система показывает всплывающие окна,
предлагая лизировать следующий образец.
D
О
О
unyvero* ^CLiretis ПРИМЕЧАНИЕ При открытой крышке Модуля для лизи-
рования Unyvero™Lysator, анализ присотановится.
Рисунок 18 Требования к постановке
Пробирок для образцов Unyvero^" в
Модуль для лизирования Unyvero
Lysator
Рисунок19 Установка Пробирок для образ
цов Unyvero™B Модуль для лизирования
Unyvero™
CURETIS AG. 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero ™
Руководство пользователя
00118 V2.0
--- стр. 41 ---
о Если Вы собираетесь вставить следующую Пробирку для образца Unyvero™, нажмите Да, и по
вторите ранее описанные действия
О Если не собираетесь лизировать дополнительный образец, нажмите Нет.
С После установки всех Пробирок для образцов Unyvero™ для текущего лизирования, закройте
крышку Модуля для лизирования Unyvero™ Lysator. Лизис образцов начнется автоматически.
4 . 7 Х о д л и з и р о в а н и я
0 0 : 5 7
Figure20 Дисплей Моду
ля для лизирования
Unyvero™ display
Весь процесс лизирования занимает примерно 30 минут. Текущее
состояние лизирования образцов пациентов отображается статус
ными строками серого цвета на экране (Рисунок 4).
Оставшееся время и условия течения процесса, показаны на ма
леньком экране Модуля для лизирования Unyvero™ Lysator (Рису
нок 2 0 ).
©CURETIS AG. 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero ™
Руководство пользователя
00118 V2.0
--- стр. 42 ---
4 . 8 И з в л е ч е н и е о б р а з ц о в
После завершения лизирования серая строка состояния Управляющей рабочей станции Un-
yvero™ закрывается. При нажатии на нее, крышка Модуля для лизирования Unyvero™ Lysator
автоматически открывается и его экран, как и дисплей Управляющей рабочей станции
Unyvero™ (Рисунок 21) предлагает извлечь Пробирку для образца Unyvero™.
Нажмите на серую строку состояния, соответствующую образцу, который хотите проанали
зировать и крышка Модуля для лизирования Unyvero™Lysator откроется. О
unyvero ^curetis
Рисунок 21 Требования к извлечению
Пробирок для образцов Unyvero™ в Мо
дуль для лизирования Unyvero^*' Lysator
Рисунок 22 Дисплей Моду
ля для лизирования
Unyvero
k©CURETIS AG, 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero ™
Руководство пользователя
00118 V2.0
--- стр. 43 ---
Q Оттяните защитную заслонку крышки и достаньте Пробирку для образца Unyvero™ . Верните за
слонку в первоначальное положение.
О Закройте крышку Модуля для лизирования Unyvero™Lysator.
Если Вы установили больше Пробирок для образцов Unyvero™, сначала соберите картридж
для исследования образца, который вы только что вынули из Модуля для лизирования. После
установки этого картриджа в Анализатор Unyvero™ Analyzer, можно приступать к исследова
нию следующей Пробирки для образца Unyvero™.
Повторите действия со следующим образцом. Нажмите на статусную строку состояния лизи
рования и Модуль для лизирования Unyvero™ Lysator откроется, предоставляя отверстие,
следующей Пробирки для образца Unyvero™.
ПРЕДОСТЕРЕЖЕНИЕ Храните лизированные образцы при комнатной температуре и соби
райте Картридж Unyvero™ Pneumonia Cartridge не ранее, чем за 60 минут до начала исследо
вания.
4 . 9 С б о р к а к а р т р и д ж а
ПРЕДУПРЕЖДЕНИЕ Картридж Unyvero™ Pneumonia Cartridge содержит химические веще
ства, которые могут вызвать раздражение или поранить кожу в случае повреждения кар
триджа. При попадании химических веществ на кожу или в глаза, тщательно промойте их
большим количеством воды. Не используйте поврежденный Картридж Unyvero™ Pneumonia
Cartridge. Не используйте Картридж Unyvero™ Pneumonia Cartridge, если при извлечении из
упаковки он влажный или целостность упаковки нарушена. Не открывайте Картридж Un
yvero™ Pneumonia Cartridge.
ПРЕДОСТЕРЕЖЕНИЕ Проверьте срок годности на этикетках и упаковке Картриджа Unyvero™
Pneumonia Cartridge, Пробирки для образцов Unyvero™ и Пробирки Мастер Микс Unyvero™.
Анализ с помощью Приложения Unyvero™ Pneumonia Application заканчивается, если у любо-
го из компонентов истёк срок годности.
_____________________________________________________
© CURETIS AG, 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero ™ 00118 V2.0
Руководство пользователя
--- стр. 44 ---
Не вскрывайте упаковку Unyvero™ Pneumonia Cartridge и Unyvero™ Master Mix Tube до полной
готовности начать анализ.
ПРИМЕЧАНИЕ Также ознакомьтесь с паспортом безопасности (MSDS) Картриджа Unyvero™
Откройте Картридж Unyvero™ Pneumonia Cartridge. Q
Если вы этого до сих пор не сделали, достаньте оттаявшую Пробирку Мастер Микс Unyvero™ Q
из упаковки.
Щелкните по верхней части Пробирки Мастер Микс Unyvero™, чтобы удостовериться, что пу- Ц
зырьки воздуха отсутствуют и все жидкости остаются на дне пробирки.
unyvero' *^cur©tis
1ч»: т / т - щ я и ш•
ПРЕДОСТЕРЕЖЕНИЕ Не встряхивайте на вортексе и
не центрифугируйте Пробирку Местре Микс
Unyvero™.
ПРИМЕЧАНИЕ Расходные материалы возможно про
верить, используя кнопку «Проверив расходных
материалов», расположенную снизу тестовой пане
ли. Если после сборки Картриджа Unyvero™ Pneumo
nia Cartridge вы обнаружили, что срок его годности
или срок годности Пробирки Мастер Микс Unyvero™
истек, тест придется начать заново с новой Пробир
кой для образцов Unyvero™, новым Картриджем Un
yvero™ Pneumonia Cartridge, и новой Пробиркой Мас-
тер Микс Unyvero™. ________________________________
После извлечения Пробирок для образцов Unyvero™
из Модуля для лизирования Unyvero™ Lysator и за
хлопывания его крышки, появляется экран, предпи
сывающий собрать картридж (Рисунок 23).
Рисунок 23 Требования к сборке картрид
жа
CURETIS AG, 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero ™
Руководство пользователя
00118 V2.0
--- стр. 45 ---
о Вставьте Пробирку с образцом Unyvero™ в отверстие на позицию 1 картриджа (Рисунок 24).
D Вставьте Пробирку Мастер Микс Unyvero™ в отверстие на позицию 2 картриджа (Рисунок 24).
О Поднесите штрих-коды Картриджа Unyvero™ Pneumonia Cartridge к верхней части Управляющей
рабочей станции и задержите перед считывателем штрих-кодов как показано на рисунке 25.
Рисунок 24 Отверстия картриджа
1 - Отверстие для Пробирки с образцом
2 - Отверстие для Пробирки Мастер Микс.
ПРЕДОСТЕРЕЖЕНИЕ Убедитесь, что собираетесь
использовать нужный образец, который только что
извлекли из Модуля для лизирования.
ПРИМЕЧАНИЕ Поместите картридж на выступ
Управляющей рабочей станции для обеспечения
сканирования без каких-либо сложностей (Рисунок
2 ^^______________________________________________
Все штрих-коды (Картриджа Unyvero™ Pneumonia
Cartridge, Пробирки Мастер Микс Unyvero™n Про
бирки для образца Unyvero™) считываются Опера
ционной системой Unyvero™ и автоматически син
хронизируются и сохраняются с ID образца.
Рисунок 25 Сканирование картриджа
©CURETIS AG, 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero
Руководство пользователя
00118 V2.0
Ж .
--- стр. 46 ---
4 . 1 0 И з м е р е н и е
Теперь ОС подскажет отверстие в Анализаторе Unyvero™ Analyzer (Рисунок 26), куда вста
вить картридж. На маленьком дисплее Анализатора Unyvero™ Analyzer отображается номер.
Зеленая стрелочка горит до тех пор, пока Картридж Unyvero™ Pneunnonia Cartridge не будет
установлен (Рисунок 27).
unyvero" i^curetis
о м , •
В в Ш Щ ]
Вставьте Картридж Unyvero™ Pneunnonia Cartridge в
отверстие, указанное на маленьком дисплее Анализа
тора Unyvero™ Analyzer (Рисунок 27), до упора.
□
Рисунок 26 Требования к загрузке кар
триджа в Анализатор Unyvero” '’ Analyzer
Рисунок 27 Дисплей Ана
лизатора
CURETIS AG, 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero ™
Руководство пользователя
00118 V2.G
--- стр. 47 ---
Рисунок 28 Установка Картриджа в Анализа
тор Unyvero^'*' Analyzer
4 . 1 1 Х о д а н а л и з а
0 0:0 0 :1 1
Полный цикл работы Картриджа Unyvero™ занимает чуть меньше
четырех часов. Оставшееся время для каждого отверстия показы
вается на маленьком дисплее Анализатора Unyvero™ Analyzer
(Рисунок 29). Кроме того, пока в Анализаторе Unyvero™ Analyzer
ведется обработка Картриджа Unyvero™, ход исследования изо
бражается сиреневой полоской на дисплее.
Рисунок 29 Дисплей Ана
лизатора
iCURETIS AG, 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero
Руководство пользователя
00118 V2.0
--- стр. 48 ---
4 . 1 2 И з в л е ч е н и е к а р т р и д ж а
После завершения анализа, в управляющую рабочую станцию, как
и на дисплей Анализатора Unyvero™ Analyzer, выводится запрос
об удалении картриджа.
На маленьком дисплее Анализатора Unyvero™ Analyzer окошко,
соответствующее отверстию, отмечается голубым и стрелочка
указывает, что можно извлечь Картридж Unyvero™Pneumonia Car
tridge (Рисунок 30).
Рисунок 30 Дисплей анали
затора
Извлеките Картридж Unyvero™ Pneumonia Cartridge. □
ПРЕДОСТЕРЕЖЕНИЕ Картридж Unyvero™ Pneumonia Cartridge предназначен для одноразо
вого использования, для обработки только одного образца! Не используйте Картридж Unyve-
го™ Pneumonia Cartridge повторно. __________________________________________________
Утилизируйте Картридж Unyvero™ Pneumonia Cartridges в соответствии с рекомендациями,
установленными вашим учреждением или местными властями.
После завершения анализа и извлечения картриджа, статусная строка состояния на экране
управляющей рабочей станции становится синего цвета.
ПРИМЕЧАНИЕ После того, как вы открыли синюю строку состояния и закрыли ее снова, ис
следование будет сохранено во вкладке Сохраненные Тесты. Нажмите на клавишу Сохра-
ненные Тесты для того, чтобы открыть этот экран. _______________________ _________
□
I© CURETIS AG, 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero
Руководство пользователя
00118 V2.0
i x .
--- стр. 49 ---
Р Е З У Л Ь Т А Т Ы А Н А Л И З А
Ю OUKh I 1 Ь ЛЬ, /0)2 Картридж для диагностики пневмонии
Руководство пользователя
М .
--- стр. 50 ---
5 .1 Д о с т у п к р е з у л ь т а т а м
Полностью проанализированные образцы выделены синими строками состояния на дисплее
{Активные Тесты или Сохраненные Тесты).
Для просмотра результатов нажмите на соответствующую синюю статусную строку состояния
(Рисунок 31). Q
Открывшийся экран показывает следующие кнопки
(Рисунок 32):
» Основная информация
» Микроорганизмы
» Маркеры устойчивости
» Информация.
Рисунок 31 Сохраненный экран анализа
P rtn t
Рисунок 32 Клавиши на экране результатов-
CURETIS AG, 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero ™
Руководство пользователя
00118 V2.0
--- стр. 51 ---
5 . 2 С ч и т ы в а н и е р е з у л ь т а т о в
Краткое изложение результатов
□ Откройте вкладку «Основная информация» .
Этот экран служит для быстрого просмотра всех обна
руженных (=положительная реакция) микроорганизмов
и маркеров устойчивости к антибиотикам.
Верхний экран (Рисунок 33) показывает найденные
микроорагнизмы, в нижней - приведены классы
антибиотиков с положительными маркерами устойчи
вости
Рисунок 33 Экран «Основная Инфор
мация»
'CURET1S AG, 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero
Руководство пользователя
00118 V2.0
--- стр. 52 ---
Получение дополнительной информации по микроорганизмам
Перейдите на вкладку Микроорганизмы, чтобы просмотреть список всех микроорганизмов,
которые Приложение Unyvero™ Pneumonia Application способно анализировать. □
Слева Микроорганизмы сгруппированы следующим
образом (Рисунок 34):
» Грам-положительные микроорганизмы
» неферментирующие микроорганизмы
» Микроорганизмы семейства Enterobacter
» Другие микроорганизмы/Грибы
Наличие или отсутствие микроорганизмов отобра
жается на дисплее следующим образом (Рисунок
34):
О Обнаруженные
1Необнаруженные
Неверное измерение
Рисунок 34 Экран «Микроорганизмы»
Там, где микроорганизмы обнаружены, интенсивность измеряемого сигнала иллюстрируется
тремя окошками справа. Чем больше окошек отмечено зеленым, тем выше интенсивность
сигнала. Кроме того, справа от окон указан номер, отражающий мощность сигнала. Также но
мер отображается в случае, когда сигнал ниже порогового уровня.
CURETIS AG. 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero ™
Руководство пользователя
00118 V2.0
--- стр. 53 ---
Получение дополнительной информации по маркерам устойчивости
О Перейдите на вкладку Маркеры Устойчивости, чтобы получить обзор всех маркеров
устойчивости, которые Приложение Unyvero™ Pneumonia Application может проанализировать.
Маркеры устойчивости сгруппированы следующим образом (Рисунок 35):
1. Гены устойчивости (локализованные на мобильных генетических элементах )
2. Хромосомные мутации (мутации в генах, локализованных в пределах хромосомы)
Наличие или отсутствие микроорганизмов отобража
ется на дисплее следующим образом (Рисунок 35):
О Обнаруженные
Необнаруженные
Неверное измерение
В центре экрана перечислены соответствующие
кпассы антибиотиков, для которых должен быть уч
тен неблагоприятный исход лечения, если они будут
назначены. На экране справа отображаются общие
микробные источники маркеров устойчивости.
Рисунок 35 Экран Маркеров Устойчиво
сти
©CURETIS AG, 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero ™
Руководство пользователя
00118 V2.0
--- стр. 54 ---
Гены устойчивости к антибиотикам, локализованные на мобильных генетиче
ских элементах
Большинство маркеров устойчивости, которые определяются Приложением Unyvero™ Pneu
monia Application, это гены, которые переносятся мобильными генетическими элементами,
такими как плазмиды и интегроны®. Наличие таких генов коррелирует с устойчивостью к част
ным классам антибиотиков^. В таблице 5 перечислены маркеры устойчивости, которые опре
деляются Приложением Unyvero™ Pneumonia Application.
Таблица 5 Маркеры устойчивости на Панели Unyvero™ Pneumonia Panel
Ген Возможная устойчивость Общие микробные источники
t e r n Р-Лактамы Грам-отрицательные бактерии
s h v Р-Лактамы Грам-отрицательные бактерии
c t x - M Р-Лактамы Г рам-отрицательные бактерии
e b c Р-Лактамы Г рам-отрицательные бактерии
d h a Р-Лактамы Г рам-отрицательные бактерии
k p c Карбапенемы Г рам-отрицательные бактерии
o x a 5 1 like Карбапенемы A c i n e t o b a c t e r b a u m a n n i i
m e c A Оксациллин S t a p h y l o c o c c u s
m e f A / m e f E Макролиды S t r e p t o c o c c u s
m s r A Макролиды S t a p h y l o c o c c u s
e r m A l e r m B l e r m C Макролиды/Линкозамиды S t a p h y l o c o c c u s
i n t 1 МЛУ Г рам-отрицательные бактерии
s u H Сульфонамиды Грам-отрицательные бактерии
Roberts, Front Microbiol, Vol. 2 (2011)
' Maiden, MolBiotechnol, Vol. 18 (2001)
iCURETIS AG, 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero ™
Руководство пользователя
00118 V2.0
--- стр. 55 ---
Устойчивость к антибиотикам, основанная на мутациях в генах, локализован
ных в пределах хромосомы
Мутации в генах, кодирующие бактериальную гиразу и топоизомеразу IV, часто являются ме
ханизмами устойчивости к антибиотикам, действующим по принципу ингибирования гиразы
(например, антибиотикам группы фторхинолонов). Такие мутации не влияют на работу самих
ферментов, но наличие таких мутаций препятствует связыванию антибиотиков, действующих
по принципу ингибиторов гиразы (например, фторхинолонов). Таким образом, антибиотики те
ряют эффективность. Такая возможность сохранения функциональной целостности фермента
с одновременным приобретением механизма устойчивости к антибиотикам является следст
вием мутаций в горячей точке. В связи с этим. Приложение Unyvero™ Pneunnonia Application
определяет следующие локусы:
» Субъединица А бактериальной гиразы: дугА, кодоны 83 и 87
» Топоизомераза IV: рагС, кодон 80 .
Эти мутации - точечные. Изменяется только одно основание в последовательности ДНК, но
это изменение может быть разнообразно. Приложение Unyvero™ Pneumonia Application опре
деляет последовательность дикого типа, которая кодирует гиразу, чувствительную к ингиби
тору (антибиотику). Таким образом. Приложение Unyvero™ Pneumonia Application определяет
чувствительность к ингибиторам гиразы (например, фторхинолонам), но не устойчивость к
ним.
Последовательности ДНК этих генов различны у разных микроорганизмов, потому что мута
ции располагаются в хромосомных генах. Приложение Unyvero™ Pneumonia Application диаг
ностирует устойчивость только у следующих бактерий: Escherichia coli и Pseudomonas aerugi
nosa.
» В Escherichia coli исследуются кодоны 83 и 87 (дугА83 и дугА87) субъединицы А гиразы
» В Pseudomonas aeruginosa, анализируются кодоны 83 и 87 в двух вариантах {дугА83_2,
дугА83_3 и дугА87_2; дугА87_3) субъединицы А гиразы. Кроме того анализируется кодон
80 топоизомеразы IV (рагС).
Kugelberg et al, J Antimicrob Chem other Vol. 55 (2005)
' CURETIS AG, 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero ™ 00118 V2.0
Руководство пользователя
--- стр. 56 ---
Следовательно, чувствительные к антибиотикам Escherichia coli и Pseudomonas aeruginosa
будут демонстрировать положительный результат ПЦР, при анализе на присутствие генов
дикого типа гиразы, а, в случае, Pseudomonas aeruginosa - присутствие генов дикого типа
топоизомеразы IV. В случае если хотя бы один из этих маркеров не обнаруживается, организм
рассматривается как устойчивый.
Присутствие или отсутствие последовательности дикого типа хромосомных маркеров отобра
жается на экране «Маркеры устойчивости» (Рисунок 35) следующим образом:
О
е
о
Последовательность дикого типа у маркера не опре
делена {= есть устойчивость)
Последовательность дикого типа у маркера опреде
лена (= нет устойчивости)
Неверное измерение
5 . 3 Н е в е р н ы е и з м е р е н и я
Unyvero™ System контролирует качество анализов различными способами. Если не были вы
полнены определенные критерии или Картридж Unyvero™ Pneumonia Cartridge не был обра
ботан должным образом, отдельные аналиты отмечаются как недействительные красным
крестом.
» Если контроль не удался все аналиты данной ячейки, отмечаются как недействитель
ные,
» Если в мембране есть отверстия или трещины, то частицы пыли на матрице мембраны
или сложности, возникающие во время отмывания мембраны и обнаружения, не могут
быть выполнены должным образом.
» Если ряд контрольных механизмов оптической системы в процессе определения
флуоресцентного свечения методом ДНК-микрочип не срабатывает.
I CURETIS AG. 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero ™ 00118 V2.0
Руководство пользователя
--- стр. 57 ---
С О О Т В Е Т С Т В И Е Е В Р О П Е Й С К И М
С Т А Н Д А Р Т А М
'CURETIS AG, 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero
Руководство пользователя
00118 V2.0
I I .
--- стр. 58 ---
щ
фектив-
• *
За период доклинических испытаний и получения СЕ сертификатов, оценивающих эф|
ность иследования, Картриджи Unyvero™ Р50 Pneumonia Cartridges для диагностики пневмо
нии анализировали с различными консервированными и свежими образцами (мокрота, аспи
рат трахеи, бронхоальвеолярный лаваж). В общей сложности, испытания проводились более
чем на 300 Картриджах Unyvero™ Pneumonia Cartridges.
6 . 1 А н а л и т и ч е с к и е х а р а к т е р и с т и к и м е т о д а : п о р о г о в а я
ч у в с т в и т е л ь н о с т ь
Пороговая чувстивительность я для каждого патогена определялись разведением патогена в
буфере. При концентрации 10® патогенов /мл все аналиты обнаруживались Картриджем Un
yvero™ Р50 Pneumonia Cartridge. Большинство аналитов также возможно было обнаружить
при концентрации 10'* патогенов /мл (S. marcescens. S . maltophilia, А. baumannii, L. pneumophi
la, S . aureus, M . morganii, K . pneumoniae, K . oxytoca, P . aeruginosa).
Пороговая чувствительность обнаружения устойчивости аналитов определялись разведением
фрагмента ДНК. При концентрации 10® копий/мл были выявлены все устойчивые к антибиоти
кам аналиты.
6 . 2 П е р е к р е с т н а я р е а к т и в н о с т ь
При отрицательном результате микробиологического исследования мокроты, аспирата трахеи
и бронхоальвеолярного лаважа (N = 30 т.е. 10 для каждого типа образца) никакой патогенной
перекрестной реактивности не наблюдалось. Следовательно, образцы человеческой ткани не
дают ложно-отрицательный результат.
6 . 3 И н т е р ф е р и р у ю щ и е в е щ е с т в а
Интерференты исследовали на модельных образцах с добавлением клинического материала,
лекарств, наиболее часто использующихся для лечения болезней дыхательных путей, либо
каждый из перечисленных компонентов: например, лизирующем буфере, крови, человеческой
CURETIS AG, 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero ™ 00118 V2.0
Руководство пользователя
Ж .
--- стр. 59 ---
ДНК, и общих дыхательных патогенов, которые могут присутствовать в дыхательных образ
цах, был индивидуально протестирован с интерферентами,
В Таблице 6 перечислены предположительно исследованные интерференты. Худшие концен
трации были использованы в соответствие с CSLI руководства “ЕР7-А2 Тестирование интер
ференции в клинической”. Интерференция не наблюдалась.
Таблица 6 Предположительно исследованные интерференты
Дыхательные лекарства и антибиотики Клинические образцы и реагенты лизиро-
вания
Ацетил-цистеин Раствор лактата Рингера (100 %)
Амброксол NaCI (5 %)
Амикацин Лизирующий буфер (80 %)
Ампициллин Образцы
Беклометазон (Ванцерил) Кровь (100% )
Карбоцистеин ДНК из человеческой плаценты (1 мг/мкл)
Цефуроксим Бактериальные штаммы (1 х 10^ мл)
Ципрофлоксацин Streptococcus pneumoniae
Декстрометорфан Staphylococcus aureus
Эритромицин Pseudomonas aeruginosa
Гвайфенезин Haemophilus influenzae
Имипенем
Сальбутамол
Сульфометизол
Теофиллин
Треметоприм
6 . 4 В о с п р о и з в о д и м о с т ь
Воспроизводимость для всех 39 аналитов оценивалась 13-ю репликонами с использованием
разведения фрагмента ДНК (10® копий/мл) в качестве образцов, потом рассчитывался сигнал
'CURETIS AG, 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero
Руководство пользователя
00118 V2.0
ГО
--- стр. 60 ---
стандартных отклонений. Картридж Unyvero™ Р50 Pneumonia Cartridge показал среднее стан
дартное отклонение аналита - 45,1 %.
Чувствительные и устойчивые патогены вносили в 3 различных типах образцов (мокрота, ас
пират и лаваж) при концентрации 10® патогенов/мл. Общее обнаружение патогенов и устойчи
вости аналитов составило > 85 %.
6 . 5 Ч у в с т в и т е л ь н о с т ь и С п е ц и ф и ч н о с т ь
Для 186 замороженных и свежих нативных клинических образцов пациентов результаты ис
следований на Картридже Unyvero Р50™ Pneumonia Cartridge сравнивались со стандартными
микробиологическими культуральными результатам. В 158 случаях патогенны были обнару
жены стандартным микробиологическим культивированием.
Приложение Unyvero™ Pneumonia Application достигает общей чувствительности 75.5 % (чув
ствительность на аналит между 50 и 100%, в зависимости от типа микроорганизма) и общей
специфичности - 95.2% (72.3% -100% , также в зависимости от типа микроорганизма). Для
редких патогенов числа опытов было недостаточно, чтобы установить точные данные по чув
ствительности и специфичности.
В 73 образцах с помощью Картриджа Unyvero™ Pneumonia Cartridge были обнаружены до
полнительные патогены, не отраженные в результатах, полученных микробиологическим ме
тодом. Для этих противоречивых результатов были выполнены дальнейший анализ и/прямое
секвенирование. Из этих 73 - Unyvero ™ положительные, но микробиологически отрицатель
ные образцы, 59 образцов могут быть подтверждены путем секвенирования.
Основываясь на этих данных, общая чувствительность Приложения Unyvero™ Pneumonia Ap
plication достигает 80.9%, а общая специфичность - 99.0%.
Для определенных маркеров устойчивости (mefA, егтА, егтВ, егтС, tern, shv, dha, оха51-
подобные, ctxM, тесА, еЬс, устойчивости к хинолонам в Е.соН и Р. aeruginosa) в 26 случаях из
32 устойчивых к антибиотикам патогенов показана корреляция между результатами, получен
ными с помощью Unyvero Р50™ и анибиограммой.
' CURETIS AG. 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero ™ 00118 V2.0
Руководство пользователя
--- стр. 61 ---
в настоящее время Curetis проводит перспективные европейские клинические испытания в
множестве центров для получения большего количества клинических данных о производи
тельности.
©CURETIS AG, 2012 Картридж для диагностики пневмонии Р50 Unyvero
Руководство пользователя
00118 V2.0
--- стр. 62 ---
c u r e t i s
r
C ontact:
Curetis AG
Max-Eyth-Str. 42
71088 Holzgerlingen
Germany
Phone; +49 (0)7031 /49195-10
E-Mail: contact@curetis.com
www.curetis.com
C€
£ 9
--- стр. 63 ---