Набор реагентов для выявления РНК вирусов пандемического гриппа А (H1N1) подобных штамму А/California/04/2009 ("свиной грипп") методом обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции (Пан H1N1) по ТУ 9398-026-46482062-2009 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 6 --- 4.7 Выделение РНК и приготовление реакционной смеси следует проводить в ламинарных шкафах с выключенным ламинарным потоком или ПЦР- боксах. 4.8 Для предотвращения контаминации этапы выделения РНК и ПЦР следует проводить в раздельных помещениях или тщательно изолированных зонах, снабженных комплектами полуавтоматических пипеток, халатами, стеклянной посудой и прочими принадлежностями. 4.9 Все лабораторное оборудование, в том числе пипетки, штативы, лабораторная посуда, халаты, головные уборы и пр., а также растворы реагентов должны быть строго стационарными. Запрещается их перемещение из одного помещения в другое. 4.10 Поверхности рабочих столов, а также рабочих помещений, следует обрабатывать бактерицидными облучателями до и после проведения работ в течение 1 часа. 4.11 Химическая посуда и оборудование, которые используются при работе с набором, должны быть соответствующим образом маркированы и храниться отдельно. 4.12 Использованные одноразовые принадлежности (пробирки, наконечники) должны сбрасываться в специальный контейнер, содержащий дезинфицирующий раствор. 5 О Б О Р У Д О В А Н И Е И М А Т Е Р И А Л Ы Организация работы ПЦР-лаборатории, оборудование и материалы должны соответствовать Методическим указаниям МУ 1.3.1888-04. --- стр. 7 --- при работе с набором реагентов «Пан H1N1» требуются следующие оборудование и материалы: - детектирующий амплификатор, например ДТ-322 или ДТ-96 (ООО «НПО ДНК- Технология»); - центрифуга со скоростью вращения ротора 3000 - 13000 об/мин; - термостат твердотельный на 50-95 °С; - микроцентрифуга/вортекс; - холодильник бытовой с морозильной камерой; - пробирки пластиковые объемом 1,5 мл; - пробирки пластиковые объемом 0,6 мл; - пипетки полуавтоматические одноканальные с переменным объёмом, позволяющие отбирать объёмы жидкости 0,5-20 мкл, 20-200 мкл, 200-1000 мкл; - одноразовые наконечники с фильтром для полуавтоматических пипеток с маркировкой “RNAase-free, DNAase-free” объемом 1-20 мкл; 1-200 мкл; 100- 1000 мкл; - одноразовые перчатки медицинские; - контейнер с дезинфицирующим раствором. 6. А Н А Л И З И Р У Е М Ы Е О Б Р А З Ц Ы 6Л ОБРАЗЦЫ БИОЛОГИЧЕСКО МАТЕРИАЛА ЧЕЛОВЕКА (МАЗКИ И СМЫВЫ и з п о л о с т и НОСА и РОТОГЛОТКИ). 6.1.1 Мазки из полости носа: мазки берут сухим стерильным зондом, для чего зонд вводят легким движением по наружной стенке носа на глубину 2-3 см до нижней раковины. Затем зонд слегка опускают книзу, вводят в нижний носовой --- стр. 8 --- ход под нижнюю носовую раковину, делают вращательное движение и удаляют вдоль наружной стенки носа. Зонд погружают в пластиковую пробирку объемом 1,5 мл, в которую предварительно внесено 300 мкл физиологического раствора стерильного, вращают зонд в течении 10-15 секунд, избегая разбрызгивания раствора. Вынимают зонд из раствора, прижимая его к стенке пробирки и, отжав избыток жидкости, удаляют зонд и закрывают пробирку. 6.1.2 Мазки из ротоглотки: мазки берут сухим стерильным зондом вращательным движением с поверхности миндалин, небных дужек и задней стенки глотки. Зонд помещают в пластиковую пробирку объемом 1,5 мл, в которую Ф предварительно внесено 300 мкл физиологического раствора стерильного, вращают зонд в течении 10-15 секунд, избегая разбрызгивания раствора. Вынимают зонд из раствора, прижимая его к стенке пробирки и, отжав избыток жидкости, удаляют зонд и закрывают пробирку. 6.1.3 Смывы из ротоглотки: Перед взятием смывов из ротоглотки проводят предварительное полоскание полости рта водой. После этого проводят тщательное полоскание ротоглотки (в течение 10-15 секунд) 8,0-10 мл физиологического раствора стерильного. Жидкость собирают через воронку в стерильную пробирку. Не допускается повторное использование воронки без предварительного автоклавирования. Смывы из ротоглотки (300 мкл) переносят в пластиковые пробирки объемом 1,5 мл и закрывают крышкой. 6.1.4 Смывы из полости носа: Взятие материала производят в положении больного сидя с отклоненной назад головой. Для получения смыва из полости носа в оба носовых хода поочередно с помощью зонда или одноразового шприца вводят по 3,0-5,0 мл теплого физиологического раствора стерильного. Промывную --- стр. 9 --- жидкость из обоих Н О С О В Ы Х ходов собирают через воронку в одну стерильную пробирку. Не допускается повторное использование воронки без предварительного автоклавирования. Смывы (300 мкл) переносят в пластиковые пробирки объемом 1,5 мл и закрывают крышкой. Транспортировать и хранить образцы до начала исследования следует при температуре 2-8°С. 7. П Р О В Е Д Е Н И Е А Н А Л И З А 7.1 ВЫДЕЛЕНИЕ РНК ИЗ БИОЛОГИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА Внимание! Одновременно с выделением РНК из биологического материала необходимо провести пробоподготовку отрицательного контрольного образца (выделение РНК в пробирке «К-», не содержащей анализируемого материала). Внимание! На этапе выделения РНК используйте только наконечники с маркировкой «RNAase-free, DNAase-free». Необходимо учесть, что для выделения РНК из каждого образца (включая «К-») потребуется две пластиковые пробирки объемом 1,5 мл. Примечание: в случае выпадения осадка в лизирующем растворе, флакон прогреть при температуре 65°С до полного растворения осадка. 7.1.1. Пробирки, содержащие биологический материал, подготовленный по п.6.1 центрифугировать при 13000 об/мин в течение 10 мин., после чего удалить надосадочную жидкость, оставив в пробирке примерно 100 мкл (осадок + жидкая фракция). --- стр. 10 --- 7.1.2. Промаркировать необходимое количество чистых пластиковых пробирок объемом 1,5 мл с учетом пробирок для отрицательного контрольного образца - «К-». 7.1.3 Внести в каждую пробирку по 300 мкл лизирующего раствора, не касаясь края пробирки. 7.1.4 Добавить в каждую пробирку, кроме пробирки «К-», по 100 мкл образца, подготовленного по п.7.1.1. В пробирку, промаркированную «К-», добавить 100 мкл физиологического раствора стерильного. 7.1.5 Плотно закрыв крышки пробирок, встряхнуть на вортексе 3-5 с. 7.1.6 Термостатировать пробирки при 6 5 °С в течение 15 мин, осадить конденсат центрифугированием при 13000 об/мин в течение 30 с. 7.1.7 Добавить в каждую пробирку по 400 мкл реагента для преципитации и встряхнуть пробирки на вортексе в течение 3-5 с. 7.1.8 Центрифугировать пробирки при 13000 об/мин в течение 15 мин. 7.1.9 Не задевая осадок, полностью удалить надосадочную жидкость (отдельным наконечником для каждой пробирки). 7.1.10 Добавить к осадку по 500 мкл промывочного раствора №1, закрыть крышки пробирок и перемешать, аккуратно перевернув пробирки 3-5 раз. 7.1.11 Центрифугировать пробирки при 13000 об/мин в течение 5 мин. 7.1.12 Не задевая осадок, полностью удалить надосадочную жидкость (отдельным наконечником для каждой пробирки). 7.1.13 Добавить к осадку по 300 мкл промывочного раствора №2, закрыть крышки пробирок и перемешать, аккуратно перевернув пробирки 3-5 раз, 7.1.14 Центрифугировать пробирки при 13000 об/мин в течение 5 мин. 10