Набор реагентов для определения концентрации иммуноглобулина М (IgM) в сыворотке крови иммунотурбидиметрическим методом (Иммуноглобулин М-ВИТАЛ) по ТУ 9398-011-94568735-2010 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 ---
УТВЕРЖ Д ЕН А
Приказом Росздравнадзора
от 2010 г. №
/Д ^1%нера^
..ООО «Вит^ЙЬевелопмент
^ U ;'r\ \r % \ ■ -о^гИ^Ш ётг/
'« ■ ■ - .'..л .»
Корпорэйшн»
Е.Н.Схолль-Энгбертс
2010 г.
€
ИНСТРУКЦИЯ
по применению набора реагентов для определения концентрации
иммуноглобулина М (IgM) в сыворотке крови
иммунотурбидиметрическим методом
(И М М У Н О ГЛ О Б У Л И Н М -ВИ ТАЛ)
Ф
1. Н А ЗН А Ч ЕН И Е
Набор реагентов ИМ М УНО ГЛОБУЛИН М-ВИТАЛ предназначен для количественного
определения концентрации общего иммуноглобулина класса М (IgM ) в сыворотке крови человека
иммунотурбидиметрическим методом в клинико-диагностических и биохимических лабораториях
и научно-исследовательской практике.
IgM в крови циркулируют в виде пентамера с молекулярной массой около 970 кДа. IgM
играют важную роль в гуморальной защите организма, осуществляя ранний ответ организма на
инфекцию. Они являются наиболее «ранними» из всех классов иммуноглобулинов, составляя 5 -
10% от общего содержания иммуноглобулинов сыворотки крови. IgM агглютинируют бактерии,
нейтрализуют вирусы, активируют комплемент. Они играют важную роль в элиминации
возбудителя из кровеносного русла, в активации фагоцитов.
Количественное определение содержания IgM в сыворотке крови имеет важное значение
для диагностики инфекционных заболеваний, особенно в остром периоде, а также для
диагностики типов иммунодефицитов и миелом. Повышенное содержание IgM в сыворотке крови
может свидетельствовать о наличии острого воспалительного или инфекционного заболевания.
Повышенное содержание IgM в сыворотке пуповинной крови у новорожденных может означать
наличие врожденной инфекции.
Набор рассчитан для проведения 200 или 400 определений при расходе 0,45 мл реагента 1
и 0,04 мл реагента 2 на один анализ.
2. Х А Р А К Т Е Р И С Т И К А Н А БО РА
2.1. Принцип метода
Для определения концентрации иммуноглобулина М использован метод
иммунотурбидиметрического анализа. Исследуемые и контрольные образцы смешивают с
буфером и антисывороткой. IgM формируют иммунные комплексы с антителами, входящими в
состав антисыворотки, образуя мутную суспензию, оптическую плотность которой измеряют
фотометрически при длине волны 340 нм. Концентрация IgM прямо пропорциональна величине
оптической плотност!^ исследуемых образцов и определяется по калибровочному графику.
О с о
--- стр. 2 ---
ф
- реагент 1: буфер {фосфатно-солевой буферный раствор [натрия фосфат двузамещенный,
калия дигидрофосфат; 100 ммоль/л; натрия хлорид, 154 ммоль/л] pH 7,43; полиэтиленгликоль,
40 г/л; натрия азид, 0,95 г/л}, готов к использованию - 1 флакон (90 мл) или I флакон (180 мл);
- реагент 2: антисыворотка (фосфатно-солевой буферный раствор [натрия фосфат
двузамещенный, калия дигидрофосфат; 100 ммоль/л; натрия хлорид, 154 ммоль/л] pH 7,43; козьи
поликлональные антитела к иммуноглобулину М; натрия азид, 0,95 г/л}, готов к использованию -
2 флакона (по 4,0 мл) или 1 флакон (16 мл);
- калибровочные пробы на основе сыворотки крови человека с использованием препарата
IgM человека, содержащие известные количества IgM: 0; 0,2; 0,4; 1,0; 2,0; и 5,0 мг/мл;
концентрации IgM в калибровочных пробах могут несколько отличаться от указанных величин,
точные величины указаны на этикетках флаконов - 6 флаконов (по 0,5 мл);
- контрольная сыворотка на основе сыворотки крови человека с известным содержанием
IgM - 1 флакон (0,5 мл).
3. А Н А Л И Т И Ч ЕС К И Е И Д И А ГН О С Т И Ч ЕС К И Е Х А Р А К Т ЕР И С Т И К И
Линейная область определения концентрации IgM - в диапазоне от 0,2 до 5,0 мг/мл,
отклонение от «линейности» - не более 8 %.
Чувствительность определения - не более 0,1 мг/мл.
Коэффициент вариации результатов определений - не более 8 % .
Качество набора может проверяться по отечественным или зарубежным контрольным
сывороткам, аттестованным данным методом.
Нормапьные величины концентрации IgM в сыворотке крови составляют: для мужчин -
0,34 - 2,14 мг/мл, для женщин - 0,4 - 2,5 мг/мл.
Рекомендуется в каждой лаборатории уточнить диапазон нормальных величин
концентраций IgM для обследуемого контингента людей.
4. М Е Р Ы П РЕД О С Т О РО Ж Н О С Т И
Потенциальный риск применения набора - класс 2а.
Все компоненты набора в используемых концентрациях являются нетоксичными.
Меры предосторожности - соблюдение «Правил устройства, техники безопасности,
производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в
лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы
Министерства здравоохранения СССР» (Москва, 1981 г).
При работе с набором необходимо надевать одноразовые резиновые или пластиковые
перчатки, т.к. сыворотка крови человека является потенциально инфицированным материалом,
способным длительное время сохранять и передавать ВИ Ч, вирусы гепатита или любой другой
возбудитель вирусной инфекции.
5. О БО РУ Д О ВА Н И Е И М А Т ЕР И А Л Ы ,
Н ЕО Б Х О Д И М Ы Е П РИ Р А Б О Т Е С Н А БО РО М :
- Автоматический (полуавтоматический) биохимический анализатор или
спектрофотометр, длина волны 340 нм, кювета с длиной оптического пути 10 мм;
- секундомер;
- пипетки полуавтоматические одноканальные, позволяющие отмерять объемы жидкости
25 мкл, 40 мкл, 100 мкл, 450 мкл и 900 мкл;
npoi';ipKii с'геклянпыс пмсс'гимостыо 3,0-.^.о мл;
1;^ ■ ' 'i 1 1:i:r::
- (' .... . . .. ...... .П
2.2. Состав набора:
--- стр. 3 ---
ф
- перчатки резиновые или пластиковые;
- масштабно-координатная бумага.
6. А Н А Л И З И Р У Е М Ы Е О БРА ЗЦ Ы
Свежая не гемолиз про ванная сыворотка крови человека.
Образцы сыворотки крови можно хранить при температуре 2-8°С не более 2 сут; при
необходимости более длительного хранения (до 3 мес) - при температуре минус 20°С и ниже.
Повторное замораживание образцов не допускается.
1. П О Д ГО Т О ВКА К А Н А Л И ЗУ
Компоненты набора и исследуемые образцы сыворотки крови выдержать при комнатной
температуре (18-25°С) в течение времени не менее 30 мин.
Реагент 1 и реагент 2 готовы к использованию.
Приготовление калибровочных проб, контрольной сыворотки и
анализируемых проб сыворотки крови.
Перед использованием развести каждую калибровочную пробу, каждую анализируемую
пробу сыворотки крови пациента и контрольную сыворотку физиологическим раствором в 10 раз
(0,1 мл калибровочной пробы, анализируемой пробы сыворотки крови пациента или контрольной
сыворотки + 0,9 мл физиологического раствора, перемешать),
8. П Р О В Е Д Е Н И Е А Н А Л И ЗА
Приготовить и промаркировать соответствующим образом по 2 пробирки вместимостью 3,0
мл для контрольной сыворотки и для каждой калибровочной пробы, по 1 пробирке для
контрольной (холостой) пробы и для каждого образца анализируемой сыворотки крови.
Внести в соответствующие пробирки по 25 мкл калибровочных проб и контрольной
сыворотки; в пробирки для анализируемых проб внести по 25 мкл исследуемых образцов
сыворотки крови. Добавить во все пробирки, кроме пробирки с контрольной (холостой) пробой,
по 450 мкл реагента 1 (буфер); в пробирку с контрольной (холостой) пробой внести 475 мкл
дистиллированной воды. Тщательно перемешать содержимое всех пробирок и измерить величину
оптической плотности (ОП) калибровочных проб, контрольной сыворотки и анализируемых проб
сыворотки крови (С П ]) против контрольной (холостой) пробы при длине волны 340 нм в кювете с
длиной оптического пути 10 мм.
Добавить во все пробирки по 40 мкл реагента 2 (антисыворотка), тщательно перемешать
пробы и инкубировать все пробирки при комнатной температуре в течение 5 мин (точно!), после
чего измерить величину ОП калибровочных проб, контрольной сыворотки и анализируемых проб
сыворотки крови (ОП2) против контрольной (холостой) пробы при длине волны 340 нм в кювете с
длиной оптического пути 10 мм.
9. Р Е ГИ С Т Р А Ц И Я Р Е ЗУ Л Ь Т А Т О В
Измерить оптическую плотность калибровочных проб (ОП1 и ОП 2) против контрольной
(холостой) пробы при длине волны 340 нм в кювете с длиной оптического пути 10 мм.
Рассчитать величину изменения оптической плотности калибровочных проб (АОП) по
формуле;
А0П=0П2 - ОП,
Построить на масштабно-координатной бумаге калибровочный график в
полулогарифмических координатах, откладывая на оси абсцисс (логарифмическая) значения
концентрации IgM в калибровочных пробах, а на оси ординат (линейная) - значения
соответствующих величин АОП калибровочных проб.