Набор реагентов для определения резистентности ф. V к протеину С (РеаЛейден-тест) по ТУ 9398-034-05595541-2011 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 --- УТВЕРЖДЕНА Приказом Росздравнадзора от «___» _________2011 г. № « У Т В Е Р Ж Д А Ю » М БО О И «О бщ ество > ольн ёж ^йм оЛ и ли ей » Ю .А .Ж улёв 2011г. И Н С Т Р У К Ц И Я по применению Набора реагентов для определения резистентности ф, V к протеину С (РеаЛейдеи-тест) 1. Н А З Н А Ч Е Н И Е Н абор реагентов РеаЛ ейден-тест предназначен для установления рези стентности активированного ф . V плазм ы крови пациента к действию ф изио логического антикоагулянта протеина С , что повы ш ает риск возникновения тром бозов периф ерических вен , инф арктов м иокарда, тром боэм болии легоч н о й артерии, тром бозов вен сетчатки гл аза. Н абор предназначен для проведения 2 0 м акро или 4 0 м икро определе н и й п р и расходе по 0 ,1 или п о 0 ,0 5 м л каж дого реагента на один анализ, со ответственно. 2. Х А Р А К Т Е Р И С Т И К А Н А Б О Р А 2.1. П р и н ц и п действия И нкубация плазм ы крови с активатором протеина С вы зы вает удлине н и е врем ени сверты вания в тесте активированного частичного тром бопла- стинового врем ени (А Ч Т В ). Б ез добавления активатора А Ч Т В этой ж е плаз м ы н е и зм енено. В плазм е пациентов с деф ицитом систем ы протеина С и ли п ри н али чи и м утантного ф актора V (Л ейден) удлинение А Ч Т В при добавлении активатора м ен ее вы раж ено, чем в н орм е. 2.2. Состав набора В состав набора входят следую щ ие ком поненты : _ А Ч Т В - реагент лиоф ильно вы суш енны й - 1 ф лакон ; - А Ч Т В -реагент с активатором протеина С лиоф ильно вы суш енны й - 1 ф лакон ; - П лазм а-калибратор лиоф ильно вы суш енная - 1 ф лакон; - П лазм а субстрат деф ицитная п о ф актору V - 4 ф лакона; - 0 ,025 М раствор кальция хлористого - 1 ф лакон (5,0 м л ). --- стр. 2 --- 3. А Н А Л И Т И Ч Е С К И Е И Д И А Г Н О С Т И Ч Е С К И Е Х А Р А К Т Е Р И С Т И К И П ротивосверты ваю щ ая систем а протеина С (протеин С , протеин S , тром бом одулин, тром бин, ингибитор протеина С ) осущ ествляет ф ункцию ре гуляции сверты ваю щ ей активности плазм ы крови путем ингибирования ак тивности ф акторов Villa и V a и ингибитора активатора плазм иногена (P A I- 1 ) .Н аследственны е и приобретенны е наруш ения в систем е протеина С препятствую т сниж ению сверты ваю щ его потенциала плазм ы крови и вы зы ваю т тром бозы различной локализации. П ри наследственной тром боф илии, в основе которой леж ит наличие у пациентов м утантного ф актора V (Л ейден), им еет м есто резистентность к действию активированного протеина С , ч то приводит к повы ш ению сверты вания крови п о внутреннем у и внеш нем у м е ханизм ам и вы зы вает тром бозы периф ерических вен , инф аркты м иокарда, тром боэм болию легочной артерии, тром бозы вен сетчатки глаза и д р . П ри проведении анализа с пом ощ ью набора РеаЛ ейден-тест исследуе м ую п лазм у пациента разводят в 4 раза субстратной плазм ой, деф ицитной п о ф . V , с целью сниж ения действия ф акторов плазм ы пациента и повы ш ения зависим ости результатов анализа от активности ф . V . Е сли в п лазм е пациента содерж ится м утантны й ф . V Л ейден, то процесс сверты вания н е будет сни ж ен п од влиянием активированного протеина С . А ктивацию эндогенного протеина С проводят с пом ощ ью природного активатора протеина С . С целью м иним изации влияния коагулом етров принято результаты представлять в виде норм ализованного отнош ения (Н О ), и результаты свер ты вания плазм ы крови пациента в см еси с субстратной плазм ой п о тесту А Ч Т В сравнивать с результатам и аналогичного анализа плазм ы -калибратора с установленны м Н О - Н О к. П ри проведении анализа определяю т 4 показателя: 1 . А Ч Т В см еш анной плазм ы -калибратора без активатора; 2 . А Ч Т В см еш анной плазм ы -калибратора с активатором ; 3 . А Ч Т В см еш анной плазм ы пациента без активатора; 4 . А Ч Т В см еш анной плазм ы пациента с активатором . П олученны е результаты вносят в ф орм улу расчета Н О (см п . 8 ). А налитические парам етры набора РеаЛ ейден-тест следую щ ие: - Н О к плазм ы -калибратора - 0,8-1,4; - коэф ф ициент вариации результатов определения НОк- н е более 1 0 % ; - допустим ое отклонение Н О к в плазм е-калибраторе от аттестованного значения - н е более 1 0 % . --- стр. 3 --- 4Л . П отенциальны й риск прим енения набора - класс 1 . 4 .2 . П ри работе с набором следует надевать одноразовы е резиновы е и ли пластиковы е перчатки, т.к. образцы плазм ы крови человека следует рас см атривать как потенциально инф ицированны е, способны е длительное врем я сохранять и передавать В И Ч , вирус гепатита и ли лю бой другой возбудитель вирусной инф екции. 4 .3 . М еры предосторож ности при работе с набором ~ соблю дение «П равил устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидем ического реж им а и личной гигиены при работе в лаборатори ях (отделениях, отделах) санитарно-эпидем иологических учреж дений систе м ы М инистерства здравоохранения С С С Р » (М осква, 1 9 8 1 г.). 5. О Б О Р У Д О В А Н И Е И М А Т Е Р И А Л Ы - коагулом етр лю бого типа с набором пластиковы х кю вет; - центриф уга лабораторная, развиваю щ ая ускорение 2000 g (3000 об/м ин); - полуавтом атические пипетки, позволяю щ ие отбирать объем ы ж идко сти 0 ,025; 0,05; 0 ,1 , 1 ,0 и 2,0 м л ; - пробирки центриф уж ны е пластиковы е или стеклянны е силикониро- ванны е вм естим остью 1 0 м л ; - раствор цитрата натрия 0 ,1 1 М (3,8% ); - вода дистиллированная; - перчатки пластиковы е или резиновы е. 6. А Н А Л И З И Р У Е М Ы Е О Б Р А З Ц Ы В енозную кровь отобрать в силиконированную стеклянную и ли пла стиковую пробирку с 3,8% (0 ,1 1 М ) цитратом натрия (9:1). Ц ентриф угиро вать п ри ком натной тем пературе (18-25°С ) в течение 7 м ин при 1 0 0 0 об/м и н (240 g ). П лазм у перенести в другую пробирку и повторно центриф угировать 1 5 м ин при 3000 об/м ин (1200 g ). Ц ентриф угирование следует проводить как м ож но скорее после взятия кр о ви . Н ем едленно после повторного центриф угирования перенести п лазм у в другую пластиковую п робирку. В рем я хранения исследуем ой плазм ы до анализа - н е более 2 ч п р и ком натной тем пературе, н е более 8 ч при тем пературе 2-8°С . Д опускается однократное зам ораж ивание плазм ы при тем пературе м инус 1 8 -2 0 ^ С и хра н ение п ри этой тем пературе н е более 2 м ес. О бразцы плазм ы с повы ш енны м содерж анием гепарина долж ны бы ть исклю чены и з исследования. 4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ --- стр. 4 --- 7.1, П риготовление реагентов Раствор А Ч ТВ -реагента В нести во ф лакон с А Ч Т В -реагентом 2,0 м л дистиллированной воды и растворить содерж им ое п ри осторож ном покачивании при ком натной тем пе ратуре (18-25°С ) и вы держ ать в течении 30 м ин при ком натной тем пературе. П олученны й раствор А Ч Т В -реагента м ож но хранить при тем пературе 2-8°С н е более 7 сут или при ком натной тем пературе (18-25°С ) н е более 2 су т. Н е зам ораж ивать. Раствор А Ч ТВ -реагента с активатором В нести во ф лакон с А Ч Т В -реагентом с активатором 2,0 м л дистилли рованной воды , растворить содерж им ое при осторож ном покачивании п р и ком натной тем пературе и вы держ ать в течении 30 м ин при ком натной тем п ературе. П олученны й раствор А Ч Т В -реагента с активатором м ож но хранить п ри тем пературе 2-8°С н е более 7 сут или при ком натной тем пературе н е более 2 су т. Н е зам ораж ивать. Раствор плазмы -калибратора В нести во ф лакон с плазм ой-калибратором 1 ,0 м л дистиллированной вод ы , растворить содерж им ое и вы держ ать перед анализом в течение 2 0-3 0 м и н п р и ком натной тем пературе. П олученны й раствор м ож но хранить при тем пературе 2 -8°С н е более 2 ч и л и п р и ком натной тем пературе н е более 8 ч . Д опускается однократное зам ораж ивание плазм ы -калибратора п р и тем пературе м инус 1 8 -2 0 ^ С и хранение при этой тем пературе н е более 2 м ес. Раствор плазмы субстрат дефицитной по ф. V . В нести во ф лакон с плазм ой субстрат деф ицитной 1 ,0 м л дистиллиро ван н ой воды , растворить содерж им ое и вы держ ать перед анализом в течение 20-30 м ин при ком натной тем пературе. П олученны й раствор м ож но хранить при тем пературе 2-8°С н е более 2 ч и л и п ри ком натной тем пературе н е более 8 ч . Д опускается однократное зам ораж ивание плазм ы -калибратора п р и тем пературе м инус 1 8 -2 0 ^ С и хранение при этой тем пературе н е более 2 м ес. П одготовка раствора кальция хлорида П еред использованием прогреть 0,0 2 5 М раствор кальция хлористого п ри тем пературе 37° С в течение 1 5 м и н . П рогреты й раствор использовать в течение 8 ч . 7,2. Ход исследования 1 . П еред анализом см еш ать исследуем ую плазм у пациента (и ли п лазм у- калибратор) с плазм ой субстрат деф ицитной п о ф актору V в соотнош ении 1 :4 (2 5 м кл исследуем ой плазм ы + 1 0 0 м кл субстрат деф ицитной плазм ы ). 7. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА --- стр. 5 --- ф 2 . П риготовить 2 кю веты (А и Б ), внести в них по 0 ,0 5 м л см еш анной исследуем ой плазм ы пациента. 3 . В нести в кю вету А 0 ,0 5 м л раствора А Ч ТВ -реагента с активатором , в кю вету Б внести 0,05 м л А Ч Т В -реагента без активатора. 4 . И нкубировать обе кю веты в течение 3 м ин при тем пературе 3 7 ° С . 5 . Д обавить в обе кю веты п о 0 ,0 5 м л 0,025 М раствора кальция хлори стого, прогретого при тем пературе 3 7 ° С . 5 . П осле добавления кальция хлористого отм етить по тайм еру прибора врем я образования сгустка. 6 . В кю вете А , куда добавляли активатор, врем я сверты вания определе н о как А Ч Т В а (А Ч Т В активированное), в кю вете Б , без активатора, - к ак А Ч Т В . 7 . К аж дое определение провести 2 раза, рассчитать средню ю ариф м е тическую величину. 8 . А налогичны м образом (см п . 1 -7 ) определить А Ч Т В а и А Ч Т В для см еш анной плазм ы -калибратора. ф 8. Р Е Г И С Т Р А Ц И Я Р Е З У Л Ь Т А Т О В В ы разить результаты анализов в виде норм ализованного отнош ения (Н О , у ел . ед.) по ф орм уле : (А Ч Т В /А Ч ТВ)НО-—____^ ____-^хЯО(А Ч Т В /А ЧТВ ) ^ ^ к ’^ а/ ^ к ал гд е: А Ч Т В а - А Ч Т В см еш анной плазм ы пациента с активатором , сек ; А Ч Т В - А Ч Т В см еш анной п лазм ы пациента без активатора, сек ; (А ЧТВ а/А ЧТВ )п - отнош ение активированного А Ч Т В пациента к А Ч Т В того ж е пациента без активации, уел. ед .; (А Ч ТВ а/А Ч ТВ )кал - отнош ение активированного А Ч Т В см еш ан ной плазм ы -калибратора к А Ч Т В см еш анной плазм ы -калибратора без активации, усл.ед.; Н О к - норм ализованное отнош ение плазм ы -калибратора (указы ва ется в паспорте на н абор). 9. У Ч Е Т Р Е З У Л Ь Т А Т О В Р Е А К Ц И И У здоровы х лиц но составляет 1 ,1 ± 0 ,3 уел. ед . Значение Н О ниж е 0 ,8 свидетельствует о возм ож ном наличии м утант н ого ф актора V (Л ейден), резистентного к действию активированного про теина С . Л ож нополож ительны е результаты м огут бы ть получены при анализе образцов плазм больны х: --- стр. 6 --- - с повы ш енны м содерж анием гепарина; - с наличием систем ной красной волчанки; - при использовании аптикоагулянтов непрям ого действия (М Н О вы ш е 3 ,0 ). О кончательное подтверж дение наличия м утации Л ейдена м ож ет бы ть сделан о Е П Д Р -д и агн о сти к о й . 10. У С Л О В И Я Х Р А Н Е Н И Я И Э К С П Л У А Т А Ц И И Н А Б О Р А Х ранение набора в упаковке предприятия-изготовителя долж но произ водиться при тем пературе 2-8°С в течение всего срока годности (2 4 м ес). Д о пускается хранение набора п ри тем пературе до 2 5 ° С н е более 1 0 су т. Раствор А Ч Т В -реагента и раствор А Ч Т В -реагента с активатором м ож н о использовать при тем пературе 2-8°С н е более 7 сут или при ком натной тем пературе (18-25°С ) н е более 2 су т; перед анализом н е прогревать. Раствор плазм ы -калибратора и раствор плазм ы субстратной м ож но ис пользовать при ком натной тем пературе н е более 2 ч или при тем пературе 2 - 8 * ^ С н е более 8 ч . Раствор кальция хлористого после прогрева м ож но использовать н е бо лее 8 ч . Д л я получения надеж ны х результатов необходим о строгое соблю дение инструкции п о прим енению н абора. П о вопросам , касаю щ им ся качества набора РеаЛ ейден-тест, следует обращ аться в Н П О «РЕ Н А М » М БО О И «О бщ ество больны х гем оф илией» п о ад р есу : 125 1 6 7 , г . М осква, Н овы й Зы ковский проезд, д . 4 , Ф ГБУ ГН Ц М ин - здравсоцразвития России, тел/ф акс (495) 614-90-57, e-m ail: renam @ blood.ru З ав. производства М БО О И «О бщ ество больны х гем оф илией», к.б.н . X А .Л .Берковский З ав . лаб. клинической коагулологии Ф ГБУ Г Ь Щ М инздравсоцразвития России, д . м . н ., п ро ^ С .А .В асильев --- стр. 7 --- --- стр. 8 --- f> Пронумеровапно . и прошнуровано О листов Президент МБООИ «Об больных гемофилией)) Ю.А.Жулёв " О б щ е с т в : б о л ь н ы ) Л г с м о ф и л и и и " /: