Набор реагентов для определения активности антитромбина III оптическим методом (РЕАХРОМ-АТ III) по ТУ 9398-016-05595541-2008 в составе: - тромбин человека, лиофильно высушенный - 2 фл.; - плазма-калибратор, лиофильно высушенная - 1 фл.; - буфер с гепарином концентрированный - 2 фл. (по 5,0 мл); - хромогенный субстрат, лиофильно высушенный - 2 фл. — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 --- УТВЕРЖДЕНА приказом Росздравнадзора от « ___» ____________2008 г. № «УТВЕРЖ ДАЮ » Директор НПО «РЕ Н АМ » ^<Общество болы А.Козлов 2008 г. ИНСТРУКЦИЯ по применению Набора реагентов для определения активности антитромбина И1 оптическим методом (Реахром-АТ HI) 1. НАЗНАЧЕНИЕ Набор реагентов Реахром-АТ III предназначен для определения активности антитромбина III (далее - А Т III) - основного ингибитора тромбина, с целью ди агностики наследственного и приобретенного дефицита этого физиологического антикоагулянта, приводящего к развитию диссеминированного внутрисосудисто- го свертывания и острых тромбозов. 2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА 2,1. Принцип метода Метод определения активности А Т III основан на его способности нейтра лизовать тромбин в присутствии гепарина. Активность АТ III определяют в плаз ме крови, добавляя к ней избыток тромбина; при этом происходит ингибирование тромбина комплексом АТ 111-гепарин пропорционально количеству АТ III в плаз ме. Оставшееся количество тромбина катализирует отщепление пара нитроанилина (pNA) от синтетического хромогенного субстрата. Абсорбция сво бодного pNA, определяемая при длине волны 405 нм, обратно пропорциональна активности АТ III в анализируемой пробе. Реакция идет по следующей схеме: А Т III + гепарин (избыток) =:> А Т 111-гепарин. А Т 111-гепарин + тромбин (избыток) =>АТ Ш-гепарин-тромбин + тромбин (остаток). Субстрат-pNA - 1 - тромбин (остаток) => Пептид + pNA (желтое окрашивание). --- стр. 2 --- В состав набора входят следующие компоненты: - буфер с гепарином концентрированный - 2 флакона (по 5,0 мл); - тромбин человека, лиофильно высушенный - 2 флакона; - плазм а-калибратор, лиофильно высушенная - 1 флакон; - хромогенный субстрат, лиофильно высушенный - 2 флакона. 3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ В плазме крови здоровых лиц активность А Т III составляет 80-120%. Коэффициент вариации не превышает 5%. Отклонение от линейности в диапазоне от 10 до 100% не превышает 5%. Допустимый разброс результатов при исследовании активности АТ III разными наборами одной серии не превышает 5%. Допустимое отклонение активности А Т III в плазме-калибраторе от аттесто ванного значения не превышает 5%. Чувствительность метода - не более 8%. Антитромбин III (А Т III), или кофактор гепарина - основной антагонист тромбина при образовании этого фермента в крови. В отсутствии гепарина АТ III медленно и необратимо ингибирует тромбин и другие факторы свертьшания и фибринолиза. В присутствии гепарина А Т III становится быстрым ингибитором этих ферментов. Наследственный и приобретенный дефицит АТ III в крови при водит к развитию диссеминированного внутрисосудистого свертывания и в неко торых случаях к развитию острых тромбозов. Сниженная концентрация АТ III на блюдается у больных с заболеваниями печени (при циррозе), с нефротическим синдромом в результате экскреции ингибитора с мочой. Концентрацию АТ III снижают оральные контрацептивы и инъекции гепарина. 4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖ НОСТИ 4.1. Потенциальный риск применения набора ~ класс 2а. 4.2. При работе с набором следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, т.к. образцы крови человека следует рассматривать как потенциально инфицированные, способные длительное время сохранять и пере давать ВИЧ, вирус гепатита или любой другой возбудитель вирусной инфекции. 4.3. Меры предосторожности при работе с набором - соблюдение «Правил устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпиде мического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, от делах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здра воохранения СССР» (Москва, 1981 г.). 2.2. Состав набора --- стр. 3 --- 5. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ: - спектрофотометр, длина волны 405 нм, кювета с длиной оптического пути 10 мм; - баня водяная, поддерживающая температуру 37± 1 °С; - рН-метр; - лабораторная центрифуга, позволяющая проводить центрифугирование со ско ростью 1000-3000 об/мин; - секундомер; - колба мерная стеклянная вместимостью 50 мл: - пипетки полуавтоматические одноканальные переменного объема, позволяю щие отбирать объемы жидкости 0,1, 1,0 и 5,0 мл; - пробирки центрифужные пластиковые или стеклянные силиконированные вместимостью 10 мл; - натрий цитрат, 3,8%; - уксусная кислота, 50%; - вода дистиллированная; - перчатки резиновые или пластиковые; - масштабно-координатная бумага Н 1 . 6. АНАЛИЗИРУЕМ Ы Е ОБРАЗЦЫ Венозную кровь смешать в пластиковой или в стеклянной силиконирован- ной пробирке с 3,8% (0,11 М ) раствором цитрата натрия в соотношении 9:1. Сра зу же провести центрифугирование цитратной крови в течение 7 мин при ком натной температуре (+18-25°С) и при скорости вращения 1000 об/мин (240 g). Плазму перенести в другую пробирку и повторно центрифугировать в течение 1 5 мин при 3000 об/мин (1200 g). Немедленно после центрифугирования перенести плазму в другую пробирку. Хранить плазму до анализа можно не более 2 ч в при комнатной температу ре и не более 8 ч при температуре +2-8°С. Допускается однократное заморажива ние плазмы и хранение при температуре минус 20'^С не более 2 мес. 7. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА 7,1. Приготовление и стабильность реагентов Ь Рабочий буферный раствор Буфер с гепарином концентрированный (5,0 мл) развести дистиллированной водой в 10 раз (1:9). Рабочий буферный раствор должен иметь рН=8,40 ± 0,05. Го тов к проведению анализа через 20 мин после разведения. Хранить при темпера туре 2-8^С не более 10 сут. 2. Раствор тромбина Во флакон с лиофильно высушенным тромбином внести 2,0 мл дистиллиро ванной воды и растворить содержимое при комнатной температуре и осторожном покачивании. Готов к проведению анализа через 20 мин после приготовления. 3 --- стр. 4 --- 3. Раствор плазмы-калибратора Внести во флакон с лиофильно высушенной плазмой-калибратором 1,0 мл дистиллированной воды, растворить при комнатной температуре (+18-25°С) и ос торожном покачивании. Готов к проведению анализа через 20 мин после приго товления. 4, Раствор хромогенного субстрата Во флакон с хромогенным субстратом внести 2,0 мл дистиллированной во ды, оставить без перемешивания при комнатной температуре на 20 мин, затем со держимое флакона тщательно перемешать. Стабильность реагентов Реагенты 2-8°С 18-25^С минус 18- 20°С Раствор тромбина 5 сут 2 сут 2 мес Раствор хромогенного субстрата 14 сут 5 сут 2 мес Раствор плазмы-калибратора 8 ч 8ч 2 мес 7.2. Ход исследования 7.2,1. Построение калибровочного графика Для построения калибровочного графика плазму-калибратор с известной активностью АТ III развести буферным раствором по схеме: Пробирка № 1 2 3 4 Активность АТ III, % 1,0 А 0,5 А 0,25 А 0,125 А Рабочий буферный раствор, мл 2,9 1,0 1,0 1,0 Плазма-калибратор, мл Перемешать и перенести в пробир ку, мл 0,1 1,0 1,0 ▲ 1,0 t ▲ А - активность А Т III в плазме-калибраторе указана в паспорте. Во всех разведенных растворах плазмы-калибратора провести определение активности А Т III по методу, описанному ниже. На вертикальной оси (У ) по ли нейной шкале отложить величины оптической плотности (ед. опт. плотн.), по го ризонтальной оси (X ) по линейной шкале - активность А Т III (%). Калибровоч ный график должен представлять собой прямую линию, линеен в интервале ак тивностей от 10 до 100%.