Наборы реагентов для лабораторной диагностики in vitro — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 3 --- 5. Старайтесь расположить штатив с исследуемыми образцами таким образом, чтобы при заборе образцов исключит: возможность их случайного попадания в рабочий планшет или растворы реагентов. 6. Обратите внимание на процесс пипетирования при внесении образцов и других реагентов. Избегайте прикосновение наконечника к стенкам или дну лунки. 7. Следите за точностью Вашего пипетирования. Возможные вариации от ячейки к ячейке при раскапывании не должны превышал 2%. Дозаторы должны быть аттестованы на сходимость результатов пипетирования (рекомендуется проводить не реже 1 раза в месяц) особенно в тех случаях, когда объем анализируемой пробы (или другого реагента) не превышает 50 мкл. Лучше работать влажнь» наконечником, так как при первом заборе образца сухим наконечником, некоторые белковые компоненты могут в н ед адсорбироваться. Чтобы свести к минимуму возможные вариации из-за разного времени инкубации, вносите реагенты с одной и то! же скоростью, например, если Вы добавили субстрат за 30 секунд, то и останавливающий реакцию раствор надо внести за такое ж < время. При коротком времени инкубации с сыворотками (30 минут) и при высокой температуре в помещении на конечном результат! реакции может сказаться время внесения образцов; при этом контрольные образцы, внесенные до исследуемых, могут давап завышенные результаты. 3 . Оптимизируйте промывание и режим работы с микропланшетом. Слишком сильный вакуум может подсушить белково! покрытие в ячейке, инактивировав его, а слишком слабый приведет к тому, что останутся капельки жидкости. Поэтому н а д < отрегулировать Ваше промывочное устройство. Не оставляйте ячейки сухими между стадиями добавления реагентов. Даж минимальное высушивание ведет к потерям ферментативной активности. Если в ходе работы возникли непредвиденные задержки ¡аполните ячейки промывающим раствором. ). Рекомендуется, чтобы все сыворотки анализировались в дублях. Разброс между результатами для одного клинического образц; юлее 5% не допускается. С целью снижения стоимости одного исследования в лаборатории с устойчивыми показателями контрол; сачества допускается проведение анализа стандартов без дублей и расчет результатов по ранее построенной стандартной кривой ) ечение двух недель при обязательной постановке контролей. 1 0. Не используйте в качестве инкубатора системы с конвективным нагревом. Планшет должен прогреваться равномерно по всей площади 1. Одной из причин получения неудовлетворительных результатов при использовании твердофазных наборов являете! [спользование шейкеров-инкубаторов, которые не обеспечивают необходимую интенсивность встряхивания. При этом покрыта нтителами поверхность лунки не полностью омывается инкубационной смесью и поэтому не принимает участия I ммунохимической реакции. Следствием этого является снижение связывания и ухудшение качества аналитической системы. 2. Температурный режим инкубации также является фактором, оказывающим влияние на протекание иммунохимической реакции 1 робирке. Низкая температура в лаборатории (менее 18 °С) приводит к тому же результату, что и плохое встряхивание. 3. Инкубируйте планшеты с субстратом в темноте. Таким образом Вы сможете избежать краевых эффектов на планшете. 4. Регулярно проверяйте точность работы Вашего оборудования. У Вас не будет хороших результатов без качественной борудования: от микропипеток и наконечников до микропланшетного ридера. 5 . Результаты анализа должны иметь должную точность и воспроизводимость, независимо от того, кто из лаборантов выполняе ■ ализ. Рекомендуется, чтобы лаборант работал одновременно не более чем с двумя планшетами. Необходимо наличие постояшв гйствующей внутрилабораторной системы контроля качества анализов и участие лаборатории в какой-либо системе внешней >нтроля качества анализов. Постановка контрольных материалов бязательным условием проведения И Ф А является постановка контрольных материалов и калибраторов. Контрольны < атериалы ставятся в ка ж д о й серии опытов. энтроль качества в медицинской лаборатории - это статистический процесс, используемый для наблюдения и оценю ¡зультатов исследования проб пациентов. Статистический процесс требует: 1) регулярного исследования контрольных материалов вместе с пробами пациентов; 2) сравнения результатов измерения контрольных материалов с рассчитанными статистическими пределами, энтрольный материал (КМ) - это максимально приближенный к человеческому образец, в идеале изготовленный из крови, моч! ш спинномозговой жидкости человека. Он может быть жидким или лиофилизированным и содержать один или более аналитов I вестной концентрации, КМ должны анализироваться так же, как пробы пациентов. Контрольный материал обычно содержи- --- стр. 4 --- множество различных аналитов. КМ нормального уровня содержит нормальные концентрации определяемого аналита. К \ патологического уровня содержит повышенное или сниженное по сравнению с нормальными пределами количество этоп аналита. Обычно для контроля аналитического процесса необходимо по крайней мере ежедневное проведение анализа КМ нормального I патологического уровня для каждого аналита. В случае если получены результаты, сильно отличающиеся от паспортных, следуе- проверить еще раз правильность постановки ИФА и, исключив возможность ошибки в проведении анализа и интерпретацш полученных результатов, обратиться к производителю тест-систем. А Л Г О Р И Т М В Ы П О Л Н Е Н И Я А Н А Л И З А П о д го то вка к анализу ^ 1. Перед анализом каждый образец должен быть выдержан при комнатной температуре, и тщательно перемешан. 2. Установите необходимое количество стрипов в рамку из расчета постановки стандартов, образцов и контролей в дублях п л ю < эдна лунка для бланка. Оставшиеся стрипы верните в пластиковый пакет с осушителем и герметично закройте. 3 . В лунку Бланк добавьте в соответствующем шаге протокола 100 мкл субстрата и 100 мкл стоп-реагента. Для предотвращения загрязнения субстратного раствора часть раствора, необходимую для анализа, перенесите в чистьн пластиковый сосуд, предварительно вымытый этанолом и затем дистиллированной водой высокой очистки. 5 . Промывочный раствор готовится смешиванием концентрата с 450 мл дистиллированной воды. I. П и п е тко й добавьте 25 м кл стандартов, контролей и проб пациентов в соответствую щие л у н ки пла нш ета. I. Добавьте 200 м кл ко нъ ю гата в каж дую л унку. 5. И н ку б и р у й те в течение 120 м и нут при 37°С не закры вая планш ет. I. И спользуя автом атическую или ручную технику промывки планш ета, удалите содержимое всех л ун о к, промойте ц н ааза промы вочны м буфером. У д ал ите о статки жидкости. Для данной процедуры рекомендуется автом атическая моюща! :истема. 5. Немедленно добавьте 100 м кл раствора субстрата в каждую л ун ку. >. И н ку б и р у й те при ко м н атн о й температуре (20-28°С ) в течение 15 м инут. Замечание: избегайте попадания прямого солнечного света на планш ет во время ин кубаци и. 1. Добавьте 100 м кл сто п -р еаген та в каж дую л унку в той ж е последовательности, что и субстрат. ¡.О сторож но перем еш айте планш ет, избегая разбрызгивания. >. И зм ерьте величины погл ощ ения содержимого ячеек при 450 нм. Измерение м икропл анш ета должно бы ть произведен« > течение 60 м и н ут после добавления останавливающего раствора. _____________________________________________________ Р А С Ч Е Т Рассчитайте среднее значение оптической плотности стандартов и образцов (А). Вычтите Бланк (Ас) из всех значений. Тересчитайте результаты по формуле:В/В0 х 100 ^А-Ас/А^- А с) х 100, •де А о - значение оптической плотности нулевого стандарта. Используйте значение индекса В/В0 х 100 для построения кривой в логарифмических координатах на полулогарифмическо! ¡умаге и расчета концентрации эстрадиола. ’езультаты могут быть рассчитаны автоматически с использованием аппроксимаций - 4-х параметрической, Сплайны, Ьо^рМл^. Если полученная концентрация выше высшего стандарта, разведите образец нулевым стандартом и проанализируйте еп ювторно. Умножьте результат на фактор разведения. Возможные причины возникновения проблем при проведении И Ф А Тпвьивмьйфон I. Недостаточная промывка и/или удаление жидкости из ячеек после промывки. Растворы, содержащие биотин или коньюга' ггрептавидина с пероксидазой хрена могут повышать фон при недостаточной промывке ячеек. I. Контаминация раствора субстрата ионами металлов или окисляющими реагентами, обуславливающими голубую окраску субстрата !. Загрязнение дозатора, резервуара диспенсера или раствора субстрата конъюгатом стрептавидина с пероксидазой хрена. Неправильное разбавление конъюгата стрептавидина с пероксидазой хрена. Конъюгат стрептавидина с пероксидазой хрен; может содержать глицерин, увеличивающий вязкость раствора, что затрудяет его точное дозирование. > . Хромогенный субстрат находился на свету перед использованием, что вызвало его окрашивание. --- стр. 5 --- 6. Неправильное время и/или температура инкубации. 7. Испарение содержимого ячеек во время инкубации. 8. Неправильное количество ферментного конъюгата иди хромогенного субстрата, внесенное в ячейки. П овы ш енны е о п ти ч е с ки е п л о тн о сти образцов/ стандартов 1. Стандарты разбавлены сывороткой, супернатантом культуры или другой неподходящей средой. 2. Неправильное разбавление ферментного конъюгата. 3. Микропланшет был накрыт пленкой во время инкубации с хромогенным субстратом. 1 Превышение времени инкубации. > . Проведение инкубации при 37°С вместо инкубации при комнатной температуре. » . Высокая температура в помещении (более 28°С ). '. Контаминация наконечника, резервуара диспенсера или раствора субстрата ферментным конъюгатом. I. Хромогенный субстрат находился на свету перед использованием. > тсутств и е или слабое р а зв и ти е о кр а с ки . Реагенты не достигли комнатной температуры (25±2°С ) перед началом анализа. Неправильное хранение компонентов набора (например, не при 2-8°С ). * . Проведение инкубации с ферментным конъюгатом при 37°С вместо инкубации при комнатной температуре. . Пропущена одна из инкубаций. . Стандарты разбавлены сывороткой, супернатантом культуры или другой неподходящей средой. . Высыхание ячеек микропланшета в ходе проведения анализа. . Использование неподходящего хромогенного субстрата или стоп-раствора. Низкая температура в помещении (<22°С). Истечение срока годности реагентов. ). Ячейки микропланшета поцарапаны наконечником дозатора или промывающего устройства. I . Использование несоответствующей длины волны считывания. ’ Неправильное разбавление ферментного конъюгата. > . Несоблюдение методики сбора образцов. I. Определение аналита в матриксе, для которого тест-система не была оптимизирована.