Тест-система диагностическая "Десискан ВГС ПЛЮС" (Deciscan HCV PLUS) для идентификации антител против антигенных детерминант вируса гепатита С методом иммуноблота в сыворотке и плазме крови человека — инструкция и характеристики

РУ: ФСЗ 2011/08872 · класс риска 3

Производитель: "БИО-РАД" (Франция)

Автоматически отфильтрованный фрагмент инструкции по применению (страницы, где похоже, что есть таблица технических характеристик) — не полный документ. Карточка РУ на портале Росздравнадзора →

Текст инструкции: технические характеристики

--- стр. 1 ---
Генеральный директор  
ОО О «Био-Рад Лаборатории»
«УТВЕРЖДАЮ»
к Е .В .
N /
«  ^ ^ » 2 0 1 0  г .
Инструкция по применению изделия медицинского
назначения
€
«Тест-система диагностическая 
«Десискан ВГС ПЛЮС» (Deciscan HCV PLUS) для 
идентификации антител против антигенных 
детерминант вируса гепатита С методом иммуноблота в 
сыворотке и плазме крови человека»
2010


--- стр. 2 ---
€
СОДЕРЖАНИЕ
1. КЛИНИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ
2. ПРИНЦИП ТЕСТА
3. СОСТАВ НАБОРА
4. МАТЕРИАЛЫ НЕОБХОДИМЫЕ, НО НЕ ПОСТАВЛЯЕМЫЕ С НАБОРОМ
5. ТЕХНИКА БЕЗОПАСНОСТИ
6. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
7. ОБРАЗЦЫ
8. ПОДГОТОВКА РЕАГЕНТОВ, СРОК ГОДНОСТИ И СТАБИЛЬНОСТЬ
9. МЕТОДИКА ПРОВЕДЕНИЯ АНАЛИЗА
10. СЧИТЫВАНИЕ И ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
11. ХАРАКТЕРИСТИКИ ТЕСТА
12. ОГРАНИЧЕНИЯ ТЕСТА
13. ЛИТЕРАТУРА


--- стр. 3 ---
1  - КЛИНИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ
ДЕСИСКАН® ВГС ПЛЮС - иммуноферментный тест на полосках для 
иммуноблотинга, предназначенный для идентификации антител к вирусу гепатита С 
в сыворотке крови человека. Точная характеристика этих антител необходима для 
лучшего понимания серологии вируса гепатита С (HCV).
2 - ПРИНЦИП ТЕСТА
В наборе ДЕСИСКАН® ВГС ПЛЮСв качестве твердой фазы используется мембрана, 
закрепленная на пластиковом стрипе (полоске). На мембране в нижеуказанной 
последовательности нанесены;
И  Античеловеческий IqG  к о н т р о л ь  
Данный контроль обеспечивает:
- контроль внесения образца;
- контроль реагентов {конъюгата и субстрата);
- считывание результатов, с учетом интенсивности контрольного сигнала.
2) К о н т р о л ь на GST
В процессе синтеза рекомбинантных белков, гены кодирующие белки NS3 и NS4 
встраивают в ген, кодирующий Глутатион трансфераэу S ( GST).
Контроль на GST выявляет присутствие анти - GST антител в образце, которые 
могут привести к ложноположительной реакции.
3 ^  Антигены HCV
- Рекомбинантные белки, полученные из отобранных клонов Е.соН - белки 
неструктурной области: NS3 и NS4.
- Белки, которые были выбраны из-за высокой иммуногенности:
- в структурной области - С1 и 02
- в  неструктурной области -NS4
Контроль 
анти- 
человеч.  
IgG
Контроль 
на G ST
! = Р Р1  С 2  NS3 N N S4 Пластиковая
подложка
Прс^.„_,,... ..нализа включает следующие шаги:
1) Тестируемая сыворотка инкубируется со стриповой полоской. Если в сыворотке 
присутсвуют антитела к HCV, происходит их связывание на твердой фазе.
2) После отмывки добавляются античеловеческие IgG антитела, меченые щелочной 
фосфатазой (конъюгат). Конъюгат взаимодействует с антителами, связавшимися с 
твердой фазой на предыдущем этапе.
3) Несвязавшийся конъюгат отмывается; комплекс антиген/антитело выявляется 
добавлением субстрата.
4) После остановки реакции, производится считывание окрашенных полос и 
интерпретация результатов.
3 - СОСТАВ НАБОРА
Метка Реагент Количество
R1 Стриповая полоска с нанесенными 
рекомбинантными белками и синтетическими 
пептидами из области капсида, NS3 и NS4.
24 стрипа
R2 Промывающий раствор концентрированный (5х) 100 мл
R3 Отрицательная контрольная сыворотка
Человеческая сыворотка, не содержащая анти-HCV 
антител, отрицательная по HBsAg и анти-HIVI, 2 
антителам.
Консервант: 0.1% азид натрия
0.2 мл


--- стр. 4 ---
с
R4 Положительная контрольная сыворотка 
Человеческая сыворотка, положительная по анти- 
HCV антителам, отрицательная по HBsAg и анти- 
HIV1,  2 антителам и инактивированная 
нагреванием.
Консервант: 0,1% азид натрия
0.2 мл
R5 Раствор для разведения образцов сыворотки
Ths NaCI буфер с молоком с добавлением 
фенолового красного.
Консервант: 0.25% Kathon
90мл
R6 Конъюгат
Trls NaC! буфер с зеленым красителем. Анти­
человеческие ( козьи) IgG антитела, меченые 
щелочной фосфатазой.
Консервант: 0.1% азид натрия
90 мл
R8 Субстрат
БХИФ/НСТ
5-Бромо-4-хлоро-индолил-фосфат (БХИФ) и  
Нитросиний тетразолий (НСТ)
90 мл
R9 Стоп-реагент
бОмМ лимонная кислота 
Консервант: 0.01% Мертиолят
90 мл
Разное Ванночки на 6 образцов 4
4 - МАТЕРИАЛЫ НЕОБХОДИМЫЕ, НО НЕ ПОСТАВЛЯЕМЫЕ С НАБОРОМ
Дистиллированная или деионизованная вода.
Гипохлорит натрия и бикарбонат натрия.
Фильтровальная бумага.
Защитные очки.
Одноразовые перчатки.
Автоматические или полуавтоматические пипетки объемом на 10 мкл. 
Градуированные пипетки на 3 мл.
Мерные цилиндры на 100, 250 и 500 мл.
Шейкер, встряхивающий в двухмерном или трехмерном пространстве.
Контейнер для контаминированных остатков.
Вакуумный насос с безопасной вилкой.
Шейкер-инкубатор-распределитель типа LSI2 или полный автомат для 
проведения блотов (*).
(*) Обращайтесь в местное представительство компании за информацией о 
рекомендуемом оборудовании.
5 - ТЕХНИКА БЕЗОПАСНОСТИ
все реагенты набора предназначены для диагностических целей в системе in 
vitro,
все процедуры методики выполняйте в одноразовых перчатках; 
никогда не пипетируйте ртом;
ни один метод детекции не может гарантировать отсутствие или присутствие 
патогенных агентов (ИIV, HCV, HBV и т.д.) в исследуемых образцах и реагентах 
человеческого происхо>кдения. Следует рассматривать их как потенциально 
контаминированные и работать с соответствующими мерами предосторожности, 
считайте все оборудование, контактирующее с образцами, реагенты 
человеческого происхождения и промывающий раствор контаминированными; 
избегайте разбрызгивания образцов или растворов, содержащих образцы.
В случае разбрызгивания растворов, не содержащих кислоты, обработайте 
поверхности 10% раствором гипохлорида натрия, а затем фильтровальной 
бумагой, которую необходимо выбросить в контейнер для контаминированных 
остатков.


--- стр. 7 ---
Контроль на античеловеческие IgG располагается с противоположного от 
пластиковой подложки конца, далее нанесены соответстэено GST - С1- С2 - NS3 - •  
NS4.
1  I
Контроль 
анти- 
человЁч.  
IgG
Контроль 
на G ST
С 2 NS3 N S 4 Пластиковая
подложка
Перед считыванием результатов стриповая полоска должна быть высушена.
Стрип считается сухим, если общий фон - белый.
Считывание
Интенсивность сигнала каждой полосы антигена определяется для каждого стрипа 
отдельно по сравнению е интенсивностью сигнала на полосе контроля анти­
человеческого IgG.
Интенсивность полосы 
Сигнал сильнее, чем на анти-IgG контроле 
Сигнал, равный сигналу на анти-IgG контроле 
Сигнал слабее, чем на анти-IgG контроле 
Слабый сигнал: полоса выявляется очень слабо 
Сигнал отсутствует
Оценка
3+
2+
1 + 
0.5+
О
Достоверность анализа
Контрольная полоса должна быть четко видна невооруженным глазом. Это 
свидетельствует о том, что в процессе анализа был нанесен образец сыворотки, 
добавлен конъюгат и проявляющий раствор.
Если контрольная полоса не соответствует этим требованиям, интерпретацию 
результатов проводить нельзя.
Отрицательная контрольная сыворотка: Видна только анти-IgG контрольная полоса, 
никакие другие полосы не выявляются.
Положительная контрольная сыворотка: Четко видны анти IgG - контрольная полоса 
и 4 полосы с антигенами HCV. Полоса с GST не должна давать никакого сигнала.
2^ ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ
РЕЗУЛЬТАТ ОТВЕТ
- Ни одна из 4 полос с антигенами HCV не видна ОТРИЦАТЕЛЬНЫЙ
- Видна 1  полоса с антигеном HCV или 
видны 2 полосы, только капсидные (С1 и С2)
НЕОПРЕДЕЛЕННЫЙ *
- Интенсивность 2 полос из различных генных 
участков равна 0.5+
ВОЗМОЖНО ПОЗИТИВНЫЙ *
- Интенсивность по крайней мере 2 полос из 
различных генных участков больше 0.5+
ПОЗИТИВНЫЙ
ПРИМЕЧАНИЕ: В случае, если выявляется полоса с GST, интерпретацию 
результатов можно проводить только по полосам С1и С2 антигенов HCV 
(синтетические пептиды).
* ) Согласно современным представлениям о серологии HCV. через некоторое 
время необходимо провести повторный анализ с другим образцом сыворотки.
С1 С2 NS3 NS4 ИНТЕРПРЕТАЦИЯ
А 1  + 2+ 0 0 Неопределенный
В 0 0.5+ 0.5+ 0 Возможно положительный
с 0 0 0 0 Отрицательный
D 0 2+ 1  + 0.5+ Положительный
Е 0 0 0.5+ 0 Неопределенный
F 0 0.5+ 1  + 0 Возможно положительный


--- стр. 8 ---
с
Интенсивность полосы Оценка
Сигнал сильнее, чем на анти-lgG контроле 3+
Сигнал, равный сигналу на анти-lgG контроле 2*^
Сигнал слабее, чем на анти-lgO контроле 1+
Слабый сигнал: полоса выявляется очень слабо 0.5+
Сигнал отсутствует О
11 - ХАРАКТЕРИСТИКИ ТЕСТА 
Чувствительность
Исследования по чувствительности теста проводились на панели хорошо изученных 
сывороток. В нее входили 39 сероконверсных образцов от 19 пациентов и 88 
образцов от пациентов с хроническим гепатитом С.
Результаты, полученные на наборе DECISCAN HCV PLUS, показали очень хорошее 
совпадение с ожидаемыми результатами.
Специфичность
Из 201 образца, отрицательных на скрининговых тестах, на которых изучалась 
специфичность, в 9 обнаруживалась изолированная реактивность, в некоторых из 
них она также выявлялась и на других коммерческих блот-тестах.
Перекрестная реактивность
Из общего числа сывороток (81), положительных на другие патогенные маркеры, 79 
не показали никакой реактивности. 2 имели реактивность, которая также 
обнаружилась и на другом коммерческом наборе.
Точность
Тестирование внутри одной постановки и повторные постановки в течение 
некоторого времени показали одни и те же результаты. Проводились также 
дополнительные параллельные испытания, которые выполняли 3 разных лаборанта, 
и которые показали идентичные результаты.
12- ОГРАНИЧЕНИЯ ТЕСТА
Тест не является окончательно подтверждающим HCV инфекцию Это 
дополнительный тест, который позволяет охарактеризовать антитела, направленные 
против различных участков вируса.
13-ЛИТЕРАТУРА
См. французскую версию.