Реагенты для диагностики in vitro методом иммунофлуоресценции — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 4 --- повреждения является изменение ожидаемой реактивности с хламидийными антителами. Предостережение: избегайте давления на поверхность упаковки. 3. Иммерсионная среда для анализа результатов Каждый флакон содержит 2,75 мл раствора глицерола с Трис-буфером, отбеливающим реагентом и консервантами. Признаками возможного разрушения этого раствора является неадекватный результат взаимодействия с положительным или отрицательным контролями или интенсивное зеленое окрашивание контрольных слайдов. Иммерсионная среда специально разработана для системы Pathfinder. И для получения оптимальных результатов эта среда должна всегда использоваться при проведении анализов с помощью этой системы. Замечание; Для получения правильных результатов не производите замену компонентов набора реагентами из других аналогичных наборов для РИФ, а также не используйте просроченные реактивы. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ Реагенты, содержащие азид натрия. Раствор антител и иммерсионная среда содержат 0,1% азид натрия. Это вещество, взаимодействуя со свинцом или медью, образует взрьгооопасные соединения -азиды. В случае проливания этих растворов обильно промойте поверхность большим количеством воды для предотвращения образования азидов. Для получения дополнительной информации по этому вопросу см. Manual Guidege вьшускаемый Center for Disease Control. Контрольные слайды Продемонстрировано, что хламидии, нанесенные на контрольные слайды, не обладают инфекционностью в клеточной культуре. Однако, использовать и хранить эти слайды следует как ^ 1тенциально инфекционный материал. Образцы При заборе и исследовании образцов, полученных от пациентов, следуйте мерам предосторожности, применяемым при работе с инфекционным материалом. ЗАБОР И ПОДГОТОВКА ОБРАЗЦОВ Правильный забор материала является критическим моментом при проведении тестов на выявление Clilamydia trachomatis. Персонал, выполняющий эту процедуру должен быть обучен, что снижает число некорректно взятых проб. Замечание: Следуйте обычным правилам безопасности при получении и исследовании образцов. Рассматривайте все образцы и контактирующие с ними материалы как потенциально инфицированные, и обращайтесь с ними соответствующим образом. Избегать попадания в ротовую полость и --- стр. 5 --- Забор образцов. Материалы, необходимые для проведения теста, но не поставляемые с набором. 1. Тампоны для удаления избытка слизи и эксудата. 2. Для получения уретральных, цервикальных, конъюнктивальных, назофарингеальных и ректальных мазков необходимо: • Наборы для забора образцов (см. каталог Санофи Диагностике Пастер), содержащие стерильные приспособления: 1 большой дакроновый тампон на пластиковом стержне, 1 малый дакроновый тампон на стальном стержне, 1 нейлоновая цитологическая щеточка (для цервикальных мазков только небеременных женщин), стеклянный слайд и фиксатор (метанол) для непосредственного приготовления образца. или • Следующие эквивалентные материалы: - Стерильные приспособления для забора 1 . Малый дакроновый тампон на стальном стержне. 2. Большой дакроновый тампон на пластиковом стержне. 3. Нейлоновая цитологическая щеточка (для цервикальных мазков только небеременных женщин). Замечание: Тампоны с альгинатом кальция не могут исаользоваться для забора материала при проведении данного исследовання. - Стеклянные слайды для микроскопирования. С помощью гравировочного карандаша добавить лунку диаметром 7-10 мм. - Безацетоновый метанол ACS. Хранить в стеклянном контейнере. - Контейнер для транспортировки образцов в лабораторию. - Стандартная коробка для хранения слайдов. 3. Для забора назофарингеального аспирата: - Тонкие катетеры. - Дренажная трубка, соединенная с аппаратом для аспирации. - Контейнер для образцов. - Стерильный фосфатный буфер (PBS). - Слайды для образцов. -Метанол ACS. - Контейнер для транспортировки образцов в лабораторию. - Стандартная коробка для хранения слайдов. * ' разбрызгивания этих материалов. --- стр. 6 --- Процедура забора материала для исследования Замечание; Хламидии поражают преимущественно клетки цилиндрического эпителия. Для диагностических целей образец должен содержать эпителиальные клетки из очага инфекции. Эксудат является неудовлетворительным материалом для проведения лабораторной диагностики. 1. Образцы из уретры. В связи с тем, что пассаж мочи способствует удалению поверхностных клеток эпителия уретры, необходимо попросить пациента не мочиться в течение одного часа до забора материала. а. Введите малый тампон на 2 - 4 см в уретру (слегка вращая его). б. Аккуратно вращайте тампон, прикладьгоая при этом достаточное давление для получения образца эпителиальных клеток. в. Оставьте тампон в уретре на 1 - 2 сек, ^ Удалите тампон и немедленно приготовьте слайд как описано в разделе "Приготовление Слайда для исследования» (см. ниже). 2. Образцы из цервикального канала. Цилиндрические эпителиальные клетки слизистой цервикального канала локализуются сразу после зева шейки матки. В некоторых случаях расположение переходной зоны, где многослойный эпителий сменяется цилиндрическим, может быть иным. Выполняя следующие процедуры Вы можете быть уверены в получении образца клеток цилиндрического эпителия. а: Используя стерильный тампон, удалите избыток слизи и эксудата с поверхности шейки матки. Сбросьте этот тампон в контейнер для контаминированных отходов. б. Введите приспособление для забора материала в цервикальный канал. В случае использования большого тампона, введите его на 1 -1 ,5 см вглубь канала. В течение 5 «10 сек аккуратно вращайте его, прикладывая при этом достаточное давление для получения образца эпителиальных клеток. При использовании цитологической щеточки, введите ее немногим более чем на половину длины гребешка. Совершите один медленный поворот щеточки вокруг ее оси. в. Удалите приспособление для забора материала, избегая его контакта с вагинальными стенками и немедленно приготовьте слайд как описано в разделе "Приготовление Слайда для исследования» (см. ниже). 3. Конъюнктивальный материал. При поражении обоих глаз получите материал отдельно из каждого глаза и исследуйте полученные образцы раздельно. а. Оттяните нижнее веко вниз и обнажите конъюнктиву. 6; Тщательно удалите эксудат или гной с помощью стерильного влажного тампона. Сбросьте этот тампон в контейнер для контаминированных отходов. --- стр. 7 --- в. Стерильным, смоченным физиологическим раствором тампоном аккуратно, но тщательно проведите по конъюнктивальной поверхности нижнего века. Следите за тем, чтобы не повредить глазное яблоко. г. Немедленно приготовьте слайд как описано в разделе "Приготовление Слайда для исследования» (см. ниже). 4. Ректальный материал. а. Введите большой тампон на 3 - 5 см за анальный сфинктер. б. Аккуратно вращайте тампон, одновременно перемещая его из стороны в сторону, для получения образца эпителиальных клеток слизистой прямой кишки. Удалите тампон и, в случае его загрязнения фекалиями, уничтожте, а процедуру повторите. в. Немедленно приготовьте слайд как описано в разделе "Приготовление Слайда для исследования» (см. ниже). 5. Назофарингеальный материал. У пациентов с подозрением на хламидийную пневмонию получите аспират, смыв со слизистой или ^ ^ок из носоглотки. а. Назофарингеальный аспират, смыв со слизистой носа. - Получите назофарингеальный аспират путем введения тонкого катетера в носовой ход и аспирации. Осторожно извлеките катетер. Если образца недостаточно, можно получить смыв со слизистой путем введения в каждый носовой ход нескольких мл стерильного PBS. Поместите емкость для сбора образца ниже носа пациента, наклоните его голову и позвольте жидкости стечь в контейнер. Для маленьких детей достаточно катетера и мягкой аспирации. - Поместите образец на лед, и немедленно доставьте в лабораторию. - Доведите общий объем образца до 2-3 мл фосфатным буфером. - Приготовьте слайд как описано в разделе "Приготовление Слайда для исследования» (см. ниже). Если длайд не может быть приготовлен немедленно, храните образец при +2~8°С 24 часа. Для более ^ отельного хранения образец необходимо заморозить при -70°С. 6. Назофарингеальный мазок. - Получите мазок путем введения малого тампона в заднюю часть носового хода. - Вращайте тампон для получения образца клеток. - Оставьте тампон в носовом ходу на 1 > 2 сек, затем удалите его. - Немедленно приготовьте слайд как описано в разделе "Приготовление Слайда для исследования» (см. ниже). Приготовление слайда для исследования. 1. Уретральные, цервикальные, конъюнктивальные и ректальные мазки и материал, полученный с помощью цервикальных щеточек. а. На слайде напишите карандашом инициалы пациента. --- стр. 8 --- б. Для переноса материала на слайд проведите тампоном или цитологической щеточкой по стеклянной поверхности слайда, оставаясь в пределах лунки. в. Исследуйте слайд под микроскопом и, в случае малого количества перенесенных клеток эпителия, повторите этап б. г. Дайте слайду хорошо просохнуть на воздухе (5-10 минут). д. Нанесите на слайд 0,5 мл метанола и дайте ему высохнуть. е. Отправьте слайд в лабораторию. Хранить слайд следует при комнатной температуре не более 7 дней. 2. Назофарингеальный аспират или смыв. а. На слайде напишите карандашом инициалы пациента. б. Гомогенизируйте полученный материал. в. Нанесите примерно 30 мкл материала в лунку слайда и дайте ему хорошо просохнуть. г. Исследуйте слайд под микроскопом и, в случае малого количества перенесенных клеток эпителия, нанесите дополнительное количество материала в лунку слайда и дайте ему хорошо просохнуть. Л Нанесите на слайд 0,5 мл метанола и дайте ему высохнуть. е. Отправьте слайд в лабораторию. Хранить слайд следует при комнатной температуре не более 7 дней. ПРОЦЕДУРА ИССЛЕДОВАНИЯ. Материалы, входящие в набор. 1 . Моноклональные антитела к CMamydia trachomatis. 2. Контрольные слайды. 3. Иммерсионная среда. Материалы не входящие в набор, но необходимые для проведения исследования. 1 . Дистиллированная или деионизированная вода ^ Бокс с высокой влажностью 3. Мензурка или бутьшь для промывочной воды. 4. Покровные стекла 5. Флюоресцентный микроскоп - Для исследования образцов, окрашенных изотиоционатом флюоресцеина, необходимо использовать фильтры, обеспечивающие получение возбуждающего пучка с длиной волны 480 - 490 нм и регистрацию эмиссионных лучей с длиной волны 510 нм или более. Для получения оптимальных результатов рекомендуется использование ртутного источника света мощностью 50 Ватт и объективы с высоким разрешением. На интенсивность флюоресценции могут влиять такие параметры как тип, состояние и длительность использования фильтров, а также длительность работы источника света (кВт- час). --- стр. 9 --- 1 . Извлечь контрольные слайды из холодильника и довести их до комнатной температуры (5-10 мин), не вьюимая из герметичной упаковки. 2. Извлечь исследуемые слайды из контейнера, а контрольные слайды из герметичной упаковки. Поместить их в бокс с высокой влажностью. 3. Добавить 1 каплю (приблизительно 30 мкл) моноклональных антител к Chlamydia trachomatis в каждую лунку исследуемых и контрольных слайдов. Раствор антител должен полностью покрывать лунку. 4. Инкубировать слайды в течение 1 5 минут во влажной среде бокса при комнатной температуре. Не допускать высыхания раствора антител на слайде. 5. Тщательно промыть слайды дистиллированной водой в течение 10-15 сек для удаления избытка реагента. Опустить слайд в мензурку или другую емкость с дистиллированной водой, или использовать "^ъмывающую бутыль и аккуратно промыть слайд, ориентируя струю дистиллированной воды несколько выше области лунки и добиваясь равномерного стекания воды по всей плоскости слайда. Не направлять струю воды непосредственно на лунку. Стряхнуть остатки воды с слайда. 6. Внести в лунку слайда 1 каплю иммерсионной среды и накрыть лунку покровным стеклом, следя за тем, чтобы не образовывались пузырьки. 7. Исследовать слайд в флюоресцентном микроскопе. Просмотреть всю лунку при увеличении х 400 - 500 и подтвердить предварительное заключение при увеличении х 1000. Слайды могут быть исследованы в течение 24 часов после обработки. При этом они должны храниться при температуре +2 ^ 8 С. КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА подтверждения качества проведенного теста и достоверности полученных результатов в каждую постановку включайте контрольные слайды. Если в контроле не удается получить ожидаемой флюоресценции, то результаты теста являются сомнительными. П роцедура Ф лю оресцентного исследования. ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ В начале исследуйте контрольные слайды. Если удается получить ожидаемую флюоресценцию, то переходите к исследованию слайдов с мазками, полученными от пациентов. Повторите тест, если в контроле наблюдается недостаточная флюоресценция. Положительные результаты теста Результат считается положительным, если при увеличении х400-500 удается зафиксировать флюоресценцию внеклеточных элементарных телец, видимых в виде светящихся точек. При