--- стр. 1 ---
'»
директор
ква»
М. Петрович
ИНСТРУКЦИЯ
по применению изделия медицинского назначения: Гамма-
глютамилтрансФеоаза. вер, 2 (g-Glutamiltransferase ver 2 cobas с system
(GGJiy) __________________________________________________
--- стр. 2 ---
y-Glutamiltransferase v,2 .
cobas с systems
у-Глутамилтрансфераза
Метод стандартизован по IFCC/Szasz
Информация о реагентах
Cobas с 111 4x100 тестов Номер по каталогу 04657519190
GGTS2: ACN480, GGTI2:ACN 220
Калибратор CFAS. 12x3 мл Номер по каталогу 10759350190 Код 401
Контроль норма PNU. 20x5 мл Номер по каталогу 10171743122 Код 300
Контроль патология PPU 20x5 мл Номер по каталогу 10171778122 Код 301
Предписание для использования
Набор реагентов** у-Глутамилтрансфераза (GGTS2/ GGTI2)” содержит
диагностическую систему реагентов in vitro, предназначенную для
использования на установках cobas с 111 с целью количественного определения
каталитической активности ГГТ (у-глутамил пептид: аминокислотная у-
глутамилтрансфераза КФ 2.3.2.2) в сыворотке и плазме ( тест GGTS2-
стандартизация по Szasz, GGTI2 - по IFCC).
Теоретическое обоснование
у-Глутамилтрансфераза (ГГТ) - пептидаза, гидролитически отщепляющая
глутаминовую кислоту, присоединенную к концевой аминогр)шпе белков или
пептидов, через у-карбоксильную группу глутаминовой кислоты и переносящая
ее на подходящий акцептор (пептиды, воду, L-аминокислоты). ГГТ важна в
обмене глутатиона.
М аксимальная концентрация ГГТ обнаружена в лю минальной мембране
проксимальных канальцев почек. Другие источники - поджелудочная железа,
простата и печень. Клиническое значение повышения уровня активности ГГТ в
сыворотке связано исключительно с гепатобилпарными заболеваниями. Этот
параметр в диагностике печеночной дисфункции обладает гораздо большей
чувствительностью по сравнению с активностью других ферментов печени,
поскольку увеличение его активности происходит раньше и длится дольше.
Наибольшее увеличение активности фермента найдено при внутрипеченочной
или постпеченочной обструкции желчных путей, когда уровень активности
может увеличиваться в 5-30 раз по сравнению с нормальным уровнем.
Умеренное повышение активности ГГТ наблюдается при гепатитах, циррозах,
ожирениях печени, метастатических печеночных неоплазиях, а также острых и
хронических панкреатитах.
Высокий уровень активности ГГТ наблюдается у пациентов длительно
принимающих фенобарбитал и фенитоин.
Метод
Определение основано на кинетической процедуре, описанной Szasz-Persijn, с
использованием карбоксилированной формы субстрата L-у-глутамил-З-
карбокси-4-нитроанилид.
27
--- стр. 3 ---
в данном наборе реагентов Ь-у-глутамил-3-карбокси-4-нитроанилид
используется как субстрат-донор и глицилглицин как субстрат-акцептор.
Нижеприведенная реакция катализируется в присутствии ГГТ с использованием
двух субстратов:
Ь-у-глутамил-3-карбокси-4-нитроанилид + глицилглицин
L-у-глутамил- глицилглицин + 5-амино-2-нитробензоат;
Скорость образования желтого окрашенного продукта - 5-амино-2-
нитробензоата прямо пропорциональна каталитической активности ГГТ и
количественно определяется по увеличению поглощения при 405 нм.
Реагенты
Готовы к использованию
R1 TRIS-буфер 492 ммол/л, pH 8,25, глицин 492 ммол/л,
консерванты
R2=SR Ь-у-Глутамил-3-карбокси-4-нитроанилид 22,5 ммол/л,
ацетат 10 ммол/л, рН4,5, стабилизаторы, консерванты.
Меры предосторожности и предупреждения
Только для in vitro диагностики
Обращайте внимание на все предостережения и предупреждения,
перечисленные в главе 1 , введении.
Хранение и стабильность реагентов
На полке при 2-8°С Смотри срок годности на упаковке
В приборе при использовании (10-12°С) 3 недели;
Сбор и подготовка образцов
Сыворотка, плазма без гемолиза.
Единственный приемлемый антикоагулянт - гепарин ( литиевый, калиевый
или ЭДТА-гепарин).
7 дней при 20-25 °С
Стабильность: 7 дней при 4-8 °С
1 год при -20 “С
Факторы, влияющие на результаты
Сыворотка, плазма
Гемолиз Не влияет при уровне гемоглобина до 0,31
ммоль/л (5 г/л).
Ж елтуха Нет значимого влияния.
Липидемия Образцы с высоким содержанием липидов
могут сильно занижать уровень поглощения.
Используйте разведенный образец для
повторного автоматического определения.
Анти коагулянты ЭДТА, цитрат и флуорид ингибируют
ферментативную реакцию. Используйте
только указанные выше соли гепарина
28
--- стр. 14 ---
«ут | ерж да
^ еш
М . Петрович
ИНСТРУКЦИЯ
по применению изделия медицинского назначения: Липаза {Lipase cobas
с system (LIP)>_____________________________________________
--- стр. 15 ---
LLIPASE (LIPC) ■ ^
Информация о реагентах
Cobas с 111 200 тестов Номер по каталогу 04995767190 ACN 413
Калибратор CFAS. 12x3 мл Номер по каталогу 10759350190 Код 401
Контроль норма PNU. 20x5 мл Номер по каталогу 10171743122 Код 300
Контроль патология PPU 20x5 мл Номер по каталогу 10171778122 Код 30
Предписание для использования
Набор реагентов “ Липаза (колориметрический тест) ” содержит
диагностическую систему реагентов in vitro, предназначенную для
использования на анализаторах cobas с 111 с целью количественного
определения каталитической активности липазы
(триацилглицеролацилгидролаза КФ 3.1.1.3) в сыворотке и плазме
Теоретическое обоснование
Липазы - гликопротеины с молекулярным весом 47 О О О Д. Они определяются
как гидролазы триглицеридов, которые катализируют расщепление
триглицеридов до диглицеридов с последующим образованием моноглицеридов
и жирных кислот. Наряду с а-амилазой определение активности липаз
поджелудочной железы в течение многих лет неоспоримо считается наиболее
важным параметром клинической химии для дифференциального диагноза
заболеваний поджелудочной железы. Определение активности липазы находит
все большее международное признание в силу своей специфичности и
быстроты ответа. После острых панкреатитов активность липазы увеличивается
в течение 4-8 часов и достигает максимума к 24 часам, а снижается через 8 - 1 4
дней. Однако не существует корреляций между активностью липазы сыворотки
и степенью повреждения поджелудочной железы. Существует много методов
для определения активности липазы, в которых ее оценивают либо по убыли
субстрата турбидиметрически или нефелометрически, либо по продуктам
реакции.
Этот метод основан на расщеплении липазой специфического хромогенного
субстрата - эфира 1,2-0-дилаурил-рак-глицеро-З глутаровой кислоты - ( 6-метил-
резоруфин), эмульгированного желчными кислотами. Активность фермента
поджелудочной железы определяется только в комбинации с желчными
кислотами и колипазой.
Метод
Колориметрическое определение ферментативной активности с
использованием в качестве субстрата эфира 1,2-0-дилаурил-рак-глицеро-З
глутаровой кислоты - ( 6-метил-резоруфина).
Принцип метода
В результате каталитического действия липазы в щелочной среде
хромогенный субстрат липазы - эфир 1 ,2 -О-дилаурил-рак-глицеро-З глутаровой
кислоты - ( 6-метил-резоруфин) расщепляется с образованием 1,2-О-дилаурил-
рак-глицероля и нестабильного интермедиата, эфира глутаровой кислоты - ( 6-
метил-резоруфина). Последнее соединение спонтанно распадается в щелочной
среде с образованием глутаровой кислоты и метилрезоруфина. Добавление
детергента и колипазы увеличивает специфичность определения липазы
Л ипаза (Колориметрический метод) •;
34
--- стр. 16 ---
поджелудочной железы. Фактически, в отсутствии колипазы активность липазы
не определяется. Колипаза активирует только липазу поджелудочной железы, и
не действует на другие ферменты сыворотки. Высокое количество холатов
лишает все другие эстеразы сыворотки возможности реагировать с
хромогенным субстратом вследствие формирования отрицательного
поверхностного заряда.
Эфир 1 ,2-0-дилаурил-рак-глицеро-З глутаровой кислоты - ( 6-метил-резоруфин)
1 ,2-0 -дилаурил-рак-глицероля + эфира глутаровой кислоты - ( 6-метил-
резоруфина) — > глутаровая кислота + метил-резоруфин
Интенсивность красного окрашивания прямо пропорциональна
каталитической активности липазы. Она определяется по увеличению
поглощения при 583 нм.
Реагенты
R1 Буфер, колипаза и холат в виале А ( жидкость) .
R2=SR Хромогенный субстрат в виале С (жидкость).
Активные инградиенты:
Компоненты
BICIN
Колипаза ( из поджелудочной
железы свиньи)
Хлорид кальция
Тартратовый буфер
Дезоксихолат натрия
Эфир 1,2-0-дилаурил-рак-
глицеро-3 глутаровой кислоты
- (6-метил-резоруфин)
Т ауро дезоксихолат
Концентрации
R1 SR
50
> 1
10
1,6
10
0,27
Тест
27 ммоль/ л;
>0,53 ммоль/л;
5,3 ммоль/л;
3,2 ммоль/л;
0,85 ммоль/л;
0,09 ммоль/л;
2,8 ммоль/л;
pH 8,0 4,0 7,9
Реагент SR содержит нереакционноспособный детергент и стабилизаторы.
Пожалуйста, смотрите на маркировку емкостей с реагентами.
Меры предосторожности и предупреждения
Только для in vitro диагностики
Обращайте внимание на все предостережения и предупреждения на упаковке
Хранение и стабильность реагентов
На полке при 2-8*^С Смотри срок годности упаковке
В приборе при использовании (10-15^^0) 4 недели;
Сбор и подготовка образцов
Сыворотка, плазма.
Единственным приемлемым антикоагулянтом является Li-гепарин.
Са-связывающие антикоагулянты такие, как ЭДТА, цитрат и флуорид влияют на
определение и не должны использоваться.
Сбор и подготовка образцов
Сыворотка, плазма без гемолиза.
Единственный приемлемый антикоагулянт > гепарин.
35
--- стр. 17 ---
Следует избегать использования антикоахулянтов флюорида и иодоацетата
вследствие присущей им гемолитической активности. Цитрат натрия и ЭДТА
подавляют активность фермента и тоже не могут быть использованы.
С табильность:
1 неделя при 15-25 ® С
1 неделя при 2-8 °С
1 год при -20 °С
Факторы, влияющие на результаты
Сыворотка, плазма
Г емолиз
Желтуха
Липидемия
Антикоагулянты
Нет значимого влияния
Нет значимого влияния.
Нет значимого влияния.
ЭДТА, цитрат и флуорид
должны бьггь исключены.
Определение калибраторов
Калибратор
Интервал калибровки
Определение контролей
Ряд сравнения
Пределы для патологии
Интервал для контроля
Последовательность контроля
Контроль после калибратора
калибратор ф.а.с.
Используйте деионизованную воду как
нулевой калибратор ( автоматичесая функция
анализатора).
Каждый лот
Точное значение нормы Ед. плюс или точное
значение нормы Ед.
Точное значение при патологии Ед, плюс
или точное значение при патологии Ед.
Рекомендован 24 часа
Определяется пользователем
Рекомендован
Ожидаемые уровни (норма)
Взрослые 13 - 60 Ед./л (0,22 - 1,00 мккат/ л);
Чтобы сравнить полученные данные со стандартным рядом сравнения для
липазы, активность которой измерена турбидиметрическим методом,
умножьте полученные результаты (в Ед./л, или в мккат/ л) на фактор 3,2, чтобы
получить приближенные значения. Рекомендуется каждой лаборатории
установить и ориентироваться на свои собственные стандартные ряды.
Уровни активности, указанные здесь, должны быть использованы как
ориентировочные.
В диагностических целях значения, полученные при тестировании, всегда
должны быть оценены в связи с историей болезни пациента, клиническими
обследованиями и другими анализами.
36
--- стр. 27 ---
а-А м илаза ЭПС (AMYL2)
Информация о реагентах
cobas с 111 4x100 тестов Номер по каталогу 04657381190 ACN 570
Калибратор CFAS. 12x3 мл Номер по каталогу 10759350190 Код 401
Контроль норма PNU. 20x5 мл Номер по каталогу 10171743122 Код 300
Контроль патология PPU 20x5 мл Номер по каталогу 10171778122 Код 301
Предписание для использования
Набор реагентов “а-А милаза ЭПС (AM YL2)” содержит диагностическую
систему реагентов in vitro, предназначенную для in vitro использования на
анализаторах cobas с 111 с целью количественного определения
каталитической активности а-амилазы (1 ,4 -а -0 “Глюкан: глюканогидролаза; КФ
3.2.1.1) в сыворотке, плазме и моче.
Теоретическое обоснование
а-А милаза катализирует гидролиз а-1,4-глю канов таких, как крахмал и
родственные ему полисахариды , превращая их в мальтозу и другие
олигосахариды. Ф ермент вырабатывается поджелудочной и слюнными
железами ( Р и S типы, соответственно) Тип Р имеет высокую органную
специфичность в отличие от S. Его активность кроме сдюны также
определяется в слезной жидкости, поте, женском молоке, амниотической
жидкости и др.
в норме уровень активности а-амилазы в сыворотке и моче низкий.
Определение уровня активности а-ам илазы важно при диагностике
панкреатитов и других заболеваний поджелудочной железы, в результате
которых растет уровень активности фермента в сыворотке и моче.
Метод
Колориметрический метод определения активности амилазы с
использованием в качестве субстрата 4,6-этилиден-п-нитроф енил-а,0-
мальтогептаосайд ( этилиден- Г 7-ПНФ) согласно рекомендациям
М еждународной Федерации клинической химии (МФКХ, но оптимизирован для
сохранения стабшьности).
Принцип метода
Реагент КОБАС ИНТЕГРА для определения активности 1 использует
«заблокированный» субстрат 4,6-этилиден-п-нитрофенил-а,В-
мальтогептаосайд ( этилиден- Г 7>ПНФ). 4,6 -этилиденовая группа в
терминальном положении глюкозы Г? защ ищ ает субстрат от гидролиза
экзоглюкозидаз. Амилаза гидролизует субстрат мальтогептаосайд на различные
фрагменты. В присутствии а - глюкозидазы Г г-П Н Ф , Гз -П Н Ф , Г4-П Н Ф
фрагменты гидролизуются до п-нитрофеноксида (ПНФ) и глюкозы.
Упрощенная схема реакции:
Этилиден- Г 7-ПНФ этилиден- Гз,4 ,5 + Г 2,3 ,4 -ПНФ;
Г 2,3 ,4 "ПНФ п-нитрофеноксид + глюкоза.
10
--- стр. 28 ---
Скорость образования п- нитрофеноксида прямо пропорциональна
каталитической активности ct-амилазы. Она определяется по увеличению
поглощения при 405 нм.
Реагенты
Готовы к использованию
R1
R2=SR
Активные инградиенты:
Компоненты Концентрации
HEPES
а-Г люкозидаза
(микробиологическая)
Mg++
Хлорид натрия
Этилиден- Г 7-ПНФ
pH
R1
52,4
>66,8
12,6
87
22
7,1
SR
52,4
7,1
Тест
50 моль/ л;
>88 мккат/л;
(>5,2 кЕд/л);
10 ммоль/л;
70 ммоль/л;
3,5 ммоль/л;
7,1.
Оба реагента содержат нереакционноспособные детергент и стабилизаторы.
Пожалуйста, смотрите на маркировку емкостей с реагентами.
Меры предосторожности и предупреждения
Только для In vitro диагности
Обращайте внимание на все предостережения и предупреждения,
перечисленные в главе 1 , введении. Соблюдайте все правила работы с
химическими реагентами.
Хранение и стабильность реагентов
На полке при 2-8°С См срок годности на упаковке
при использовании (10-12°С) 4 недели
Сбор и подготовка образцов
Сыворотка, плазма ( без гемолиза) и моча.
Приемлемыми антикоагулянтами являются только гепарин и ЭДТА.
Все другие антикоагулянты, за исключением гепарина и ЭДТА, ингибируют
активность а-амилазы . Значения активности а-Амилазы в плазме на 5-10%
ниже, чем в сыворотке.
Образцы мочи не замораживать.
Стабильность в сыворотке 7 дней при 15-25‘ ^С
1 месяц при 2-8°С
Стабильность в моче 2 дня при 15-25®С
10 дней при 2-8“С
Факторы, влияющие на результаты
И
--- стр. 29 ---
Не пипетируйте реагенты ртом и избегайте всех контактов с реагентами,
посудой для реагентов, образцами. Слюна и пот содержат амилазу, и контакты
вызовут снижение точности результатов.
Сыворотка, плазма
Г емолиз
Желтуха
Липидемия
Антикоагулянты
Определение калибраторов
Калибратор
Модель рассчета
Интервал калибровки
Определение контролей
Контроль качества
сыворотки и плазмы
Контроль качества мочи
Интервал для контроля
Последовательность контроля
Контроль после калибратора
Не влияет при уровне гемоглобина до 0,13
ммоль/л (2 г/л).
Нет значимого влияния на уровне
билирубина до 20мг/дл ( 342 мкмоля/л).
Нет значимого влияния
Цитрат и флуорид ингибируют реакцию
CFAS
Деионизованная воду из анализатора
автоматически используется как нулевой
калибратор.
Линейная регрессия
Каждый лот и в соответствии с требованиями
к контролю качества
Precinorm U, Precipath U
БИО-РАД Liquichek™ химические контроли
мочи, рекомендованные для определения
контроля качества
Рекомендован 24 часа
Определяется пользователем
Рекомендован.
Ожидаемые уровни (норма)
Сыворотка, плазма
Моча ( спонтанно взятая)
2 8 - 100 Ед./л
до 460 Ед./л
( 0,47 - 1,70 мккат/ л);
(< 7,7 мккат/ л);
Каждая лаборатория должна учитывать возможное несоответствие
ожидаемых значений и значений, измеренных в популяции обследованных
пациентов, и, если необходимо, устанавливать свои собственные пределы
В диагностических целях значения, полученные при тестировании, всегда
должны быть оценены в связи с историей болезни пациента, клиническими
обследованиями и другими анализами.
Диапозон измерения.
В сыворотке/плазме 3 - 1500 Ед/л (0,05 -25 мккат/л)
Рекомендованный фактор разведения - 5
Аналитическая чувствительность ( нижний предел определения)
3.0 Ед./л (0,05 мккат/л)
12
--- стр. 36 ---
Креатинкиназа
Creatine Kinase с system (C KL)
Информация о реагентах
Cobas с 111 400 тестов Номер по каталогу 04657420190 ACN 057
Калибратор CFAS. 12x3 мл Номер по каталогу 10759350190 Код 401
Контроль норма PNU. 20x5 мл Номер по каталогу 10171743122 Код 300
Контроль патология PPU 20x5 мл Номер по каталогу 10171778122 Код 301
Предписание для использования
Набор реагентов «Креатинкиназа» ( C K L) содержит диагностическую систему
реагентов in vitro, предназначенную для использования на анализаторах cobas с
111 с целью количественного определения каталитической активности К К
(аденозин трифосфат: креатин N- фосфотрансфераза; К Ф 2.73.2) в сыворотке и
плазме.
Теоретическое обоснование
Фермент креатинкиназа - димер, состоящий из субединиц, имеющих либо
мышечное (М ), либо мозговое (В) происхождение. Идентифицируется 3
изозимные формы фермента: М М , M B или ВВ. В сыворотке в норме
преобладает изозим креатинкиназы М М .
Повышенный уровень сьгеороточной креатинкиназы определяется при
заболеваниях скелетных мьшщ, в частности, мышечной дистрофии. Форма
креатинкиназы М Б изначально обнаружена в ткани миокарда, и ее присутствие
обьршо определяется в течение 48 часов после инфаркта миокарда. Оценка
уровней общей креатинкиназной активности и активности формы M B для
диагностики инфаркта миокарда - наиболее важное применение измерений
активности креатинкиназы в клинической химии.
Активность сывороточной креатинкиназы также повышается после
церебральной ишемии, острых цереброваскулярных расстройствах и травмах
головы.
Метод
Стандартизованный метод с использованием реверсивной реакции и Н А К
активации. Соответствует рекомендациям Международной Федерации
клинической химии (IFCC) 1989 г. и Немецкого Общества по Клинической
Химии (DGKC), 1977 г.
Принцип метода
Креатинкиназа активируется N -ацетилцистеином (НАЦ). В начальной реакции
активированная креатинкиназа катализирует дефосфорилирование
креатинфосфата. В совместно идущей реакции, катализируемой гексокиназой,
(ГК ) глюкоза фосфорилируется А ТФ , выделившимся в первой реакции, с
образованием D -глюкозы-б-фосфата (Г 6 Ф). В конечной реакции глюкозо- 6 -
фосфатдегидрогеназа (Г 6 Ф Д Г) катализирует окисление Г 6 Ф окисленным
Н АДФ ^ с образованием Д -6 >фосфоглюконата и Н АДФ Н .
Креатинфосфат + А Д Ф креатин + А Т Ф ;
17
--- стр. 37 ---
АТФ + D-глюкоза ^ д д ф + рбф;
Г 6 Ф + — » D - 6 -фосфоглюконат + Н А Д Ф Н + Н*
Скорость образования Н А Д Ф Н прямо пропорциональна каталитической
активности креатинкиназы. Она определяется по увеличению поглощения при
340 нм.
Реагенты
R1 Имидазоловый буфер 58,0 ммол/л, pH 6,0. N -ацетил цистеин 40,0ммол/л,
Э ДТА 3,0 ммол/л, А М Ф 10,0 ммол/л, диаденозин пентафосфат 24 мкмол/л,
Н А Д Ф 9,5 ммол/л, Mg+2 20 ммол/л, D -глюкоза 40,0 ммол/л. Стабилизаторы,
консерванты.
R2 = R1 Э Д ТА 3,0 ммол/л, рн 9,1. гексокиназа от 600 мккат.л, Глюкоза- 6 -
фосфат-дегидрогеназа от 600 мккат/л А Д Ф 12,0 ммол/л, Креатинфосфат 180
ммол/л. N -метилдиэтаноламин 69,0 ммол/л. Консерванты,стабилизаторы,
детергенты.
Активные инградиенты;
Компоненты Концентрации
R1 SR Тест
Имидазол 58 29 ммоль/ л;
N - Ацетилцистеин 40 2 0 ммоль/л;
ЭДТА 3 3 2 ммоль/л;
А М Ф 1 0 5 ммоль/л;
Диаденозинпентафосфат 24 1 2 ммоль/л;
Н А Д Ф 9,5 4,8 ммоль/л;
M g"" 2 0 1 0 ммоль/л;
D -глюкоза 40 2 0 ммоль/л;
Креатинфосфат 180 30 ммоль/л;
Г К (из дрожжей) >600 98 мккат/л (> 6
Г 6 Ф Д Г (микробиологическая) >600 98 мккат/л ( > 6
N -Мети л диэтано л амин 69 1 1 ммоль/л;
А Д Ф 1 2 2 ммоль/л;
Азид натрия 0,09 0 ,0 1 ммоль/л;
pH 6 ,0 9,1
Оба реагента содержат нереакционноспособные стабилизаторы.
Реагент SR содержит нереакционноспособный детергент.
Пожалуйста, смотрите на маркировку емкостей с реагентами.
Меры предосторожности и предупреждения
Только для in vitro диагностики
Обращайте внимание на все предостережения и предупреждения,
перечисленные в главе 1 , введении, частично, пункт 6 (азид натрия).
Хранение и стабильность реагентов
На полке при 2-8°С Смотри срок годности на упаковке
В приборе при использовании (10-15°С) 4 недели;
18
--- стр. 38 ---
Сбор и подготовка образцов
С ы воротка, плазм а без гемолиза. В лияние гем олиза на результат сказы вается
при сравнении данны х, олученны х в сы воротке и плазме.
Е динственны й прием лем ы й антикоагулянт - Л итий-гепарин.
2 дня при 20-25 °С
Стабильность: 7 дней при 4 -8 ""С
4 недели при -2 0 °С
Факторы, влияющие на результаты
Сыворотка, плазма
Г емолиз
Желтуха
Липидемия
Лекарственные препараты
Калибровка
Калибратор
Модель
Интервал калибровки
Не влияет при уровне гемоглобина до 0,06
ммоль/л (1 г/л). Влияние может изменяться в
зависимости от содержания эритроцитов.
Нет значимого влияния при уровне
билирубина до 15 мг/дл (255 мкмоля/л).
Образцы с высоким содержанием липидов
могут сильно занижать уровень поглощения.
Выберите разведенный образец для
повторного автоматического определения.
In vitro влияние терапевтических препаратов
на определение активности К К
тестировалось согласно рекомендациям
симпозиума “ Воздействия лекарств на
методы клинической химии” (1996).
Добезилат кальция вызывал значительное
занижение уровня К К при тестируемом
уровне лекарства.
Ссылка на главу 1, введение с перечнем
протестированных лекарств и их
концентраций.
CFAS
Используйте деионизованную воду как
нулевой калибратор.
Линейная регрессия
Каждый лот и по требованию
Контроль качества.
Используйте рекомендованные контрольные материалы, или любые
дополнительные
Интервал для контроля Рекомендован 24 часа
Последовательность контроля Определяется пользователем
Контроль после калибровки Рекомендован
Ожидаемые уровни Нормы
Стандартный метод (37°С) по Klein et al
М ужчины 39-308 Ед/л
Женщины 26 -192 Ед./л
(0,65-5,14 м ккат/л);
(0,43 2,34 мккат/ л);
19
--- стр. 42 ---
Креатинкиназа-MB
Creatine Kinase-MB, cobas с systems
Информация о реагентах
Cobas с 111 4х 100 тестов Номер по каталогу 0465743 8190 A C N 060
Калибратор CFAS С К-М В . 3x1 мл Номер по каталогу 11447394216
Контроль Precinorm M B. 4хЗмл Номер по каталогу 11447378122
Руководство для использования
Набор реагентов “ C K -M B L ” содержит диагностическую систему реагентов in
vitro, предназначенную для использования на установках cobas c l 11 с целью
количественного определения каталитической активности С К- M B (аденозин
трифосфат: креатин N- фосфотрансфераза; К Ф 2.7.3.2) в сыворотке и плазме .
Теоретическое обоснование
Фермент креатинкиназа - димер, состоящий из субединиц, имеющих либо
мышечное (М ), либо мозговое (В) происхождение. Идентифицируются 3
изозимные формы фермента: М М , M B или ВВ. В сыворотке в норме
преобладает изофермент креатинкиназы М М .
Многие ткани содержат общую К Ф К , но изоферментный спектр в различных
тканях разный.
Скелетные мышцы содержат преимущественно изофермент М М , а ткань
мозга, стенки желудка, мочевого пузыря и легких - ВВ. Повыщенный уровень
сывороточной креатинкиназы определяется при заболеваниях скелетных мышц,
в частности, мышечной дистрофии и целого ряда других заболеваний, что
ограничивает ее диагностическую ценность, но своеобразие изоферментного
состава различных тканей, делает ее одним из основных ферментов, активность
которого используется при диагностике инфаркта миокарда. Форма
креатинкиназы M B обнаружена в ткани миокарда, ее активность в этой ткани
составляет 15-20% от общей активности К Ф К и ее присутствие обычно
определяется в течение 48 часов после инфаркта миокарда. Серийная оценка
уровней общей креатинкиназной активности и активности формы M B для
диагностики инфаркта миокарда - наиболее важное и часто проводимое
исследование в клинической химии.
Метод
После предварительного ингибирования М-субединиц антителами к ним,
определяют активность В-субъединиц, оставшихся в пробе. Полученное
значение умножается на 2. Т.к. ВВ активность в сыворотке очень
незначительная, то всю измеренную активность можно отнести за счет MB,
Используется метод определения общей активности К Ф К , стандартизованный в
соответствии с рекомендациями Международной Федерации клинической
химии (М Ф К Х ) 1977 и 2002 гг.. Французского общества клинической биологии
(ФОКБ), Комитета по энзимам Скандинавского общества клинической химии и
клинической физиологии (СКЭ) и Немецкого Общества по Клинической Химии
(Н У КХ ).
22
--- стр. 43 ---
Принцип метода
Креатинкиназа активируется N -ацетилцистеином (КА Ц ). В начальной реакции
активированная креатинкиназа катализирует дефосфорилирование
креатинфосфата. В совместно идущей реакции, катализируемой гексокиназой,
(ГК ) глюкоза фосфорилируется А ТФ , выделившимся в первой реакции, с
образованием D -глюкозы-б-фосфата (Г6Ф ). В конечной реакции глюкозо-6-
фосфатдегидрогеназа (Г6Ф Д Г) катализирует окисление Г6Ф окисленным
Н АДФ ^ с образованием Д-6-фосфоглюконата и НАДФ Н,
Креатинфосфат + А Д Ф ^ креатин + АТФ ;
А Т Ф + D -глюкоза А Д Ф + Г6Ф ;
Г6Ф + Н А Д Ф ^ -^ ^ ^ '^ — > D -6-фосфоглюконат + Н А Д Ф Н + Н^
Скорость образования Н А Д Ф Н прямо пропорциональна каталитической
активности креатинкиназы. Она определяется по увеличению поглощения при
340 нм.
Реагенты.
Готовы к использованию
R1 Имидазоловый буфер 58,0 ммол/л, pH 6,0. N -ацетил цистеин 40,0ммол/л,
ЭДТА 3,0 ммол/л, А М Ф 10,0 ммол/л, диаденозин пентафосфат 24 мкмол/л,
Н А Д Ф 9,5 ммол/л, Mg+2 20 ммол/л, D -глюкоза 40,0 ммол/л. Стабилизаторы,
консерванты.
R2= (SR) Э Д ТА 3,0 ммол/л, рн 9,1, гексокиназа от 600 мккат.л, Глюкоза-6-
фосфат-дегидрогеназа от 600 мккат/л /^Д Ф 12,0 ммол/л, Креатинфосфат 180
ммол/л. N -метилди этанол амин 69,0 ммол/л. Моноклональные антитела к
субединицам К Ф К -М (человеческим) Активность ингибирования от 2000 Ед/л
К Ф К -М . Консерванты,стабилизаторы, детергенты
Оба реагента содержат нереакционноспособные стабилизаторы.
Реагент SR содержит нереакционноспособный детергент.
Пожалуйста, смотрите на маркировку емкостей с реагентами.
Меры предосторожности и предупреждения
Т о л ь к о д л я i n v i t r o д и а г н о с т и к и
Обращайте внимание на все предостережения и предупреждения,
перечисленные в главе 1, введении, частично, пункт 6 (азид натрия).
Хранение и стабильность реагентов
На полке при 2-8‘^С Смотри срок годности на упаковке
В приборе при использовании (10-15°С) 4 недели;
Сбор и подготовка образцов
Сыворотка, плазма без гемолиза.
Единственный приемлемый антикоагулянт - гепарин-Li.
8 часов при 15-20 °С
Стабильность в сыворотке: 8 дней при 2-8 °С
4 недели при -2 0 °С
23
--- стр. 44 ---
Стабильность в плазме:
8 часов при 15-20
5 дней при 2-8
8 дней при -2 0 °С
Факторы, влияющие на результаты
К а ж д ы й р а з п е р е д о п р е д е л е н и е м К Ф К M B о п р е д е л я й т е о б щ у ю а к т и в н о с т ь
К Ф К
Количество антител к М-субъединицам достаточно для ингибировании
активности 2000 Ед/л К Ф К М М . Если общая активность К Ф К превьппает эту
цифру, образец нужно развести.
Методика измерения К Ф К M B подразумевает измерение активности также и
К Ф К ВВ, митохондриальной К Ф К и К Ф К - ВВ. связанного с IGG. Для
выявления атипичных форм используют электрофорез.
Сыворотка, плазма
Г емолиз
Желтуха
Липидемия
Лекарственные препараты
Режим калибровки
Метод обсчета
Частота калибровки
Контроль качества
Интервал для контроля
Последовательность контроля
Контроль после калибровки
Избегайте гемолиза. Гемоглобин оказывает
существенное влияния на показатель
актиавности КФК-М В
Нет значимого влияния при уровне
билирубина до 20 мг/дл (340 мкмоля/л).
Образцы с высоким содержанием липидов
могут сильно занижать уровень поглощения.
Выберите разведенный образец для
повторного автоматического определения.
In vitro влияние терапевтических препаратов
на определение активности К К
тестировалось согласно рекомендациям
симпозиума “ Воздействия лекарств на
методы клинической химии” (1996).
Добезилат кальция вызывал значительное
занижение уровня К К при тестируемом
уровне лекарства.
Ссьшка на главу 1, введение с перечнем
протестированных лекарств и их
концентраций
Используйте деионизованную воду как
нулевой калибратор (автоматизированная
функция анализатора).
Линейная регрессия
Каждый лот и в соответствии с требованиями
контроля качества
Precinorm MB
Рекомендован 24 часа
Определяется пользователем
Рекомендован
24
--- стр. 49 ---
0“ Крезолфталеин комплексен 0,5 ммоль/л; 8-гидроксихинолин 30
ммоль/л; pH 1,3; стабилизатор.
Меры предосторожности и предупреждения
Т о л ь к о д л я i n v i t r o д и а г н о с т и к и
Соблюдайте обычные меры предосторожности необходимые для работы со всеми
лабораторными реагентами.
Этот комплект реагентов содержит компоненты, классифицированные согласно
Европейской директиве 88/379/ЕЕС, следующим образом.
S X i Раздражающее вещество (R1 содержит гидроокись натрия). R 36/38; S 26-45.
Раздражает глаза и кожа. В случае контакта с глазами, немедленно промьггь большим
количеством воды и обратитесь за медицинской помощью.
R1 содержит реагент в избыточном количестве для уменьшения эффекта поглощения
СОг. Любой остаток реагента должен быть удалён после рекомендуемого срока
использования его на борту анализатора (см. ниже).
Утилизация использованных материалов должна проводиться в соответствии с
местными правилами ликвидации отходов.
Хранение и стабильность реагентов
Хранение при 15-25°С Смотрите срок годности на упаковке
В приборе при использовании холодильника 4 недели
анализатора
Сбор и подготовка образцов
Для сбора и подготовки используйте только подходящие пробирки. После
тестирования были признаны подходящими указанные ниже виды материала для
исследования. Отделите сыворотку или плазму от сгустка или клеток как можно
быстрее, поскольку длительный контакт может привести к получению ложно
заниженных результатов.
Сыворотка Свежая, собранная предпочтительно натощак
Плазма. L i-гепариновая. Плазма, собранная у пациентов, получающих ЭДТА
(лечение гиперкальцемии) или применение Э ДТА в качестве
антикоагулянта не должны использоваться для анализа, потому что
образование сложного хелатного комплекса делает кальций
недоступным для реакции с реагентом. Сообщается о соосаждении
кальция с фибрином (т. е. гепаринизированная плазма), липидами или
денатурированным белком при хранении или замораживании.
Используя образцы проб в первичных пробирках, следуйте инструкциям изготовителя.
Центрифугируйте образцы до вьшолнения исследования. Замороженные образцы
сыворотки должны быть хорошо перемешаны перед проведением исследования.
Стабильность
Сыворотка/плазма 7 дней при 15 > 20°С
3 недели при 2 - 8°С
8 месяцев при -20‘^С
Протокол измерения
Для оптимального проведения исследования следуйте указаниям данного документа.
Ознакомьтесь с инструкцией оператора для анализатора, указанного в инструкции.
Использование протокола измерения, не подтвержденного Roche, не гарантирует
корректного результата и должно определяться потребителем.
Протокол измерения для сыворотки, плазмы и мочи cobas с 111 system
Режим измерения Адсорбция
--- стр. 50 ---
Режим расчёта
Направление реакции
Длины волн А /В
Точки измерения: первая/последняя
Единицы измерения
Последовательность дозирования
Параметры дозирования
Сывортка/плазма/моча
R1
Образец
SR
Общий объём
Калибровка
Калибратор
Конечная точка
Возрастание
552/659 нм
16/18
ммоль/л
R1-S-SR
20 мкл
3 мкл
20 мкл
223 мкл
Дилюент (НгО)
95 мкл
35 мкл
50 мкл
Режим калибровки
Интервал калибровки
CFAS
В качестве нулевого калибратора используйте
деионизированную воду
Линейная регрессия
Каждый лот, каждые 3 дня, по результатам контроля качества.
Стандартизация: метод стандартизован по отношению к атомно-адсорбционной
снектрофотометрии.
Контроль качества
Сыворотка/плазма
Для контроля качества могут быть использованы как контрольные материалы,
указанные в разделе "Информация о реагентах", так и другие пригодные контрольные
материалы. Контрольные интервалы должны бьггь приемлемыми для каждой
лаборатории, а полученные величины должны находиться в определенных пределах.
Каждая лаборатория должна установить поправочные коэффициенты, если
лабораторные величины находятся за пределами интервалов.
Пересчёт
Анализатор cobas с 111 автоматически вычисляет концентрацию аналита в каждом
образце.
Факторы пересчёта: ммоль/л х 4,01 = мг/дл
Факторы, влияющие на результаты
Критерий: Восстановление в пределах ±10% от начального значения кальция 2,2
ммоль/л (8,82 мг/дл) в сыворотке.
Сыворот ка/т азма
Иктеричность
Г смол из
Липемия
Антикоагулянты
Не оказывает значимого влияния до значения 60 индекса I для
конъюгированного и неконъюгированного билирубина
(приблизительное значение конъюгированного и
неконъюгированного билирубина 1026 мкмоль/л (60 м г/д л )).
Не оказывает значимого влияния до значения индекса И 1 О О О
(приблизительная концентрация гемоглобина 621 мкмоль/л (1000
мг/дл).
Не оказывает значимого влияния до значения 2000 индекса L.
Имеется низкая корреляция между индексом L (характеризующим
мутность) и концентрацией триглицеридов.
Использование цитрата, оксалата и Э ДТА в качестве
антикоагулянтов не допускается.
--- стр. 51 ---
Внутривенно введённый контраст для магнитно-резонансного
исследования, содержит хелатирующий комплекс, который может
создавать помехи для определения кальция. Острое снижение в
концентрации кальция наблюдается при введении gadodiamide
(G dD TPA-BM A). Следуйте указаниям инструкциями изготовителя
в отношении времени полувыведения контрастного вещества.
Лекарства, содержащие соли стронция, могут провести к
значительному повышению результатов определения кальция.
Сообщение HIG H A C T (“ high activity” - высокая активность)
указьгеает на потенциально повышенные результаты из-за
образования градиента в образце. Такие образцы должны быть
исследованы повторно после переноса во вторичную пробирку.
В очень редких случаях моноклональная гаммопатия может
провести к неправильным результатам.
Дополнительная промывка
Не известно никаких влияний, требующих дополнительной промывки.
Измеряемый интервал
Сыворотка/плазма 0,1 -5 ммоль/л (0,4-20 мг/дл)
Расширенный диапазон измерения (расчетный)
Фактор разведения нет
0,1-5 ммоль/л (0,4-20 мг/дл)
Нижний предел обнаружения 0,1 ммоль/л (0,4 мг/дл)
Предел обнаружения представляет самый низкий измеренный уровень аналита,
который отличается от нуля. Вычисляется как величина, лежащая в трёх стандартных
отклонениях выше нулевого образца.
Ожидаемые значения
Сыворотка/плазма 2 ,1 5 -2 ,5 5 ммоль/л
Новорождённые (недоношенные) 1,9-2,5 ммоль/л (7,6 - 10 мг/дл)
2-12 мес. 2,1-2,7 ммоль/л (8 ,4 - 10,8 мг/дл)
1 -4 года 2,1 -2,6 ммоль/л (7,6 - 10,8 мг/дл)
1 -4 года 2,1 -2,6 ммоль/л (7,6 - 10,8 мг/дл)
5-20 лет 2,3-2,75 ммоль/л (9,2 - 11,0 мг/дл)
21-50 лет 2,2-2,55 ммоль/л (8,8 - 10,2 мг/дл)
>50 лет 2,1-2,42 ммоль/л (8,4 - 9,7 мг/дл)
Каждая лаборатория должна исследовать приемлемость ожидаемых значений для
популяции своего региона, и если необходимо определить свои значения. Результаты,
полученные в разных лабораториях, могут отличаться. В диагностических целях
значения, полученные при тестировании, всегда должны оцениваться в учётом
истории болезни пациента, клиническими обследованиями и другими анализами.
Точность
Воспроизводимость определялась, используя пробы людей и контроли по
внутреннему протоколу (внутри серии п = 21; общее п = 33). Были получены
следующие результаты:
Сыворотка/плазма
Внутри серии Среднее ммоль/я (мг/дл) SD ммолъ/л (мг/дл) C V %
Precinorm U 2,32 (9,3) 0,011 (0,044) 0,47
Precipath U 3,51(14,1) 0,021 (0,085) 0,60
Сыворотка 1 1,73 (6,94) 0,010(0,041) 0,58
Сыворотка 2 3,46(13,9) 0,046 (0,183) 1,32
--- стр. 53 ---
1.глюкоза 2.гликозилн^ова№аый
Глюкоза (GLUC2)
Кобас с системы
Информация о реагентах
Г люкоза Н К
cobas с 111
Калибратор CFAS
Контроль норма PNU
Контроль патология PPU
4x100 тестов
12x3 мл
20x5 мл
20x5 мл
cobas с systems
cobas с 1 1 1
Номер по каталогу 04657527 190
GLU2: AC N 767
Номер по каталогу 10759350190
Код 401
Номер по каталогу 10171743122
Код 300
Номер по каталогу 10171778122
Код 301
Предписание для использования
Набор реагентов для количественного определения in vitro концентрации глюкозы в
сыворотке и плазме на установках cobas с 111.
Теоретическое обоснование
Г люкоза является главным углеводом, представленным в периферической крови.
Окисление глюкозы является основным источником клеточной энергии в организме.
Глюкоза, получаемая с пищей, преобразуется до гликогена при депонировании в
печени или до жирных кислот при депонировании в жировой ткани. Концентрация
глюкозы в крови контролируется в узком пределе посредством многих гормонов,
наиболее важный из которых продуцируется поджелудочной железой.
Наиболее частая причина гипергликемии - сахарный диабет, который возникает при
недостаточной секреции или активности инсулина.
Множество вторичных факторов также содействуют возрастанию концентрации
глюкозы в крови: панкреатит, нарушение функции щитовидной железы, почечная
недостаточность и заболевания печени.
Гипогликемия наблюдается менее часто. Ряд состояний может приводить к низкому
содержанию глюкозы в крови, как, например, инсулинома, гипопитуитарзм или
инсулин индуцированная гипогликемия.
Принцип метода
У Ф метод.
Энзиматический референтный модод с гекс о киназой.
Гексокиназа (НК) катализирует фосфор ил ирование глюкозы до глю козо-6-фосфата с участием АТФ.
Г люкоза + А Т Ф Гексокиназа Гл-6-Ф + А Д Ф
---------------------->
Глюкозо-6-фосфат дегидрогеназа (Гл-6-Ф ДН) окисляет глюкозо-6-фосфат в
присутствии Н А Д Ф до глюконат-6-фосфата. Никакие другие углеводы в данной
реакции не окисляются. Степень образования Н А Д Ф Н в ходе реакции прямо
пропорциональна концентрации глюкозы и измеряется фотометрически.
Гл-6-Ф + НАДф - Г л-6-Ф ДН Глюконат-6-Ф + Н А Д Ф Н + Н*
->
Реагенты
Готовы к использованию.
R1 ТРИС буфер 100 ммоль/л, pH 7,8; Mg2+ 4 ммоль/л; А Т Ф >1,7
ммоль/л; Н А Д Ф >1,0 ммоль/л; консервант.
--- стр. 54 ---
HEPES буфер 30 ммоль/л, pH 7,0; Mg2+ 4 ммоль/л; Н К > 130
мккат/л; Гя^б-ФДГ >250 мккат/л; консервант.
Меры предосторожности и предупреждения
Только для in vitro диагностики
Соблюдайте обычные меры предосторожности необходимые для работы со всеми
лабораторными реагентами. Утилизация использованных материалов должна
проводиться в соответствии с местными правилами ликвидации отходов.
Хранение и стабильность реагентов
Хранение при 2-8‘^С Смотрите срок годности на упаковке
В приборе при использовании холодильника 4 недели
анализатора
Сбор и подготовка образцов
Для сбора и подготовки используйте только подходящие пробирки. После
тестирования были признаны подходящими указанные ниже виды материала для
исследования. Отделите сыворотку или плазму от сгустка или клеток как можно
быстрее, поскольку длительный контакт может привести к получению ложно
заниженных результатов.
Сыворотка
Плазма. L i-гепарин, Кг-, Кз-Э ДТА или фторид. Собирайте кровь после ночного
голодания. Стабильность глюкозы в образцах зависит от температуры
хранения, бактериального заражения и гликолиза. Плазма и образцы
сыворотки без консерванта должны быть отделены от клеток или сгустка
в пределах получаса после взятия материала. Если не
центрифугированный образец находится при комнатной температуре, то
снижение глюкозы в сыворотке происходит приблизительно на 7% через
1 час (0,28 до 0,58 ммоль/л или 5 до 10 мг/дл). Это снижение является
следствием гликолиза. Гликолиз может быть приостановлен сбором
материала в пробирки с фторидом.
Используя образцы проб в первичных пробирках, следуйте инструкциям изготовителя.
Центрифугируйте образцы до выполнения исследования.
Стабильность
Сыворотка/плазма (без гемолиза) 8 часов при 20 - 20°С
72 часа при 4 - 8°С
Плазма с фторидом 24 часа при 20-25°С
Протокол измерения
Для оптимального проведения исследования следуйте указаниям данного документа.
Ознакомьтесь с инструкцией оператора для анализатора, указанного в инструкции.
Использование протокола измерения, не подтвержденного Roche, не гарантирует
корректного результата и должно определяться потребителем.
Протокол измерения для сыворотки и плазмы cobas с 111 system
Режим измерения Адсорбция
Режим расчёта Конечная точка
Направление реакции Возрастание
Длины волн А /В 340/409 нм
Точки измерения: первая/последняя 16/37
Единицы измерения ммоль/л
Последовательность дозирования R1-S-SR
Параметры дозирования
Сывортка/плазма Дилюент (Н 2О)
--- стр. 55 ---
R1
Образец
SR
Общий объём
Калибровка
Калибратор
150 мкл
2 мкл
30 мкл
202 мкл
20 мкл
Режим калибровки
Интервал калибровки
CFAS
В качестве нулевого калибратора используйте
деионизированную воду
Линейная регрессия
Каждый лот, по результатам контроля качества.
Стандартизация: метод стандартизован относительно ID/MS.
Контроль качества
Сыворотка/плазма
Для контроля качества могут быть использованы как контрольные материалы,
указанные в разделе "Информация о реагентах", так и другие пригодные контрольные
материалы. Контрольные интервалы должны быть приемлемыми для каждой
лаборатории, а полученные величины должны находиться в определенных пределах.
Каждая лаборатория должна установить поправочные коэффициенты, если
лабораторные величины находятся за пределами интервалов.
Пересчёт
Анализатор cobas с 111 автоматически вычисляет концентрацию аналита в каждом
образце.
Факторы пересчёта: ммоль/л х 18,02 мг/дл
ммоль/л X 0,1802 = г/л
мг/дл X 0,0555 = ммоль/л
Факторы, влияющие на результаты
Критерий: Восстановление в пределах ±10% от начального значения глюкозы 6,38
ммоль/л (115 мг/дл) в сыворотке.
Сыворотка/плазма
Иктеричность Не оказывает значимого влияния до значения 67 индекса I для
конъюгированного и неконъюгированного билирубина
(приблизительное значение конъюгированного и
неконъюгированного билирубина 1149 мкмоль/л (67 м г/д л )).
Не оказывает значимого влияния до значения индекса Н 1046
(приблизительная концентрация гемоглобина 650 мкмоль/л (1046
мг/дл)).
Не оказывает значимого влияния до значения 2126 индекса L.
Имеется низкая корреляция между индексом L (характеризующим
мутность) и концентрацией триглицеридов.
Никакого значимого влияния при тестировании стандартной
панели.
В очень редких случаях моноклональная гаммопатия может
провести к неправильным результатам.
Значение глюкозы, полученное при использовании глюкозо-
оксидазного электрода в некоторых тестируемых материалах,
демонстрирует приблизительно 3% положительное смещение от
среднего числа.
Дополнительная промывка
Неизвестно никаких влияний, требующих дополнительной промывки.
Г емолиз
Липемия
Лекарственные
вещества
Внимание
--- стр. 59 ---
Кобас с систей^
Информация о peaY^Tiix
Фосфор вер.2 '
Cobas с 111
Калибратор CFAS
Контроль норма PNU
Контроль патология PPU
Ф о с ф о р (PHOS2)U
cobas с system s
cobas с 1 1 1
4x100 тестов
12x3 мл
20x5 мл
20x5 мл
Номер по каталогу 04718984190
PHOS2 ACN: 714
Номер по каталогу 10759350190
Код 401
Номер по каталогу 10 171743122
Код 300
Номер по каталогу 10171778122
Код 301
Предписание для использования
Набор реагентов для количественного определения in vitro концентрации фосфора в
сыворотке и плазме на установках cobas с 111.
Теоретическое обоснование
88% фосфора, содержащегося в теле человека, локализуются в костях в форме такого
фосфата кальция как апатит Са2+[СаЗ(Р04)2]3. Остальной фосфор включён в
метаболизм углеводов и состав физиологически важных соединений таких как,
например, фосфолипиды, нуклеиновые кислоты и АТФ . Фосфор содержится в крови в
форме неорганического фосфата и в виде органически связанной фосфорной кислоты.
Небольшое количество внеклеточного органического фосфора обнаруживается в
форме фосфолипидов. Соотношение фосфор/кальций в крови - приблизительно 6:10.
Увеличение содержания фосфора вызывает уменьшение концентрации кальция. Этот
механизм регулируется взаимодействием паратгормона и витамина D.
Гипопаратиреоидизм, интоксикация витамином D и почечная недостаточность со
снижением гломерулярной фильтрации фосфора приводят к гиперфосфатемии.
Гипофосфатемия возникает при рахите, гиперпаратиреоидизме и синдроме Фанкони,
Наиболее предпочтительный метод определения неорганического фосфора основан на
образовании фосфомолибдата аммония с последующим восстановлением до
молибденового синего. При использовании этого метода часто возникают проблемы,
связанные со стабильностью реагента.
Метод представленный здесь основан на реакции фосфата с молибдатом аммония и
образованием фосфомолибдата аммония без восстановления. Добавление акселератора
вызывает более быстрое прохождение реакции, а использование бланка к пробе дает
более точный результат.
Принцип метода
Метод по конечной точке с использованием бланка к каждой пробе
Неорганический фосфор формирует фосфомолибдат аммония, имеющий формулу
(N H 4)3[P04(M o03)12] с молибдатом аммония в присутствии серной кислоты,
фосфат + молибдат аммония H 2SO 4 аммоний-фосфомолибдат
------------------->
Концентрация фосфомолибдата прямо пропорционально концентрации
неорганического фосфора и измеряется фотометрически.
Реагенты
Готовы к использованию.
R1 Серная кислота 0,36 моль/л; детергент.
--- стр. 60 ---
R2=SR Молибдат аммония 3,5 ммоль/л; серная кислота 0,36 моль/л;
хлорид натрия 150 ммоль/л.
Меры предосторожности и предупреждения
Только для in vitro диагностики
Соблюдайте обьпные меры предосторожности необходимые для работы со всеми
лабораторными реагентами. Утилизация использованных материалов должна
проводиться в соответствии с местными правилами ликвидации отходов.
Хранение и стабильность реагентов
Хранение при 2-8'^С Смотрите срок годности на упаковке
В приборе при использовании холодильника 4 недели
анализатора
Сбор и подготовка образцов
Для сбора и подготовки используйте только подходящие пробирки. После
тестирования были признаны подходящими указанные ниже виды материала для
исследования.
Сыворотка.
Плазма. Гепаринизированная (Li, Na-, NH4+-) или ЭДТА (К2-, КЗ-).
Материалы, используемые для производства первичных пробирок, могут содержать
вещества, которые могут влиять на результаты теста, поэтому, используя образцы
проб в первичных пробирках, следуйте инструкциям изготовителя пробирок.
Центрифугируйте образцы до выполнения исследования.
Стабильность
Сыворотка/плазма 24 часа при 15-25^С
4 дня при 2'8°С
1 год при (-15)-(-25)“С
Протокол измерения
Для оптимального проведения исследования следуйте указаниям данного документа.
Ознакомьтесь с инструкцией оператора для анализатора, указанного в инструкции.
Использование протокола измерения, не подтвержденного Roche, не гарантирует
корректного результата и должно определяться потребителем.
Протокол измерения для сыворотки и плазмы cobas с 111 system
Режим измерения
Режим расчёта
Направление реакции
Длины волн А/В
Точки измерения: первая/последняя
Единицы измерения
Последовательность дозирования
Параметры дозирования
R1
Образец
SR
Общий объём
Калибровка
Калибратор
Адсорбция
Кинетика
Возрастание
340/659 нм
16/34
ммоль/л
R1-S-SR
90 мкл
2,5 мкл
38 мкл
158 мкл
Дилюент (Н 2О)
27,5 мкл
Режим калибровки
CFAS
В качестве нулевого калибратора используйте
деионизированную воду
Линейная регрессия
--- стр. 61 ---
Интервал калибровки Каждый лот, каждые 14 дней, по данным контроля качества
Стандартизация: Метод стандартизирован относительно первичного референсного
материала (NERL).
Контроль качества
Для контроля качества могут быть использованы как контрольные материалы,
указанные в разделе "Информация о реагентах", так и другие пригодные контрольные
материалы. Контрольные интервалы должны быть приемлемыми для каждой
лаборатории, а полученные величины должны находиться в определенных пределах.
Каждая лаборатория должна установить поправочные коэффициенты, если
лабораторные величины находятся за пределами интервалов.
Пересчёт
Анализатор cobas с 111 автоматически вычисляет концентрацию аналита в каждом
образце.
Фактор пересчёта ммоль/л х 3,01 = мг/дл
Факторы, влияющие на результаты
Критерий: Восстановление в пределах ±10% от начальной концентрации фосфора 1,45
ммоль/л (4,50 мг/дл).
Иктеричность Не оказывает значимого влияния до значения 60 индекса I для
конъюгированного билирубина (приблизительное значение
конъюгированного билирубина 1026 мкмоль/л (60 мг/дл) и до
значения 40 для неконъюгированного билирубина (приблизительное
значение неконъюгированного билирубина 684 мкмоль/л (40 мг/дл).
Гемолиз Не оказывает значимого влияния до значения индекса Н 300
(приблизительная концентрация гемоглобина 186 мкмоль/л (300
мг/дл). Это влияние является следствием образования
неорганических фосфатов под действием фосфатаз из органических
фосфатов, высвобождаемых из эритроцитов при гемолизе.
Липемия Не оказывает значимого влияния до значения 1 О О О индекса L.
Имеется низкая корреляция между индексом L (характеризующим
мутность) и концентрацией триглицеридов.
Лекарственные Никакого влияния лекарственных препаратов не было обнаружено
препараты при использовании общей лекарственной панели.
Другое В редких случаях гаммапатий, конкретно при IgM типе
(Вальденстрёма, макрогробулинемия) результаты могут искажаться.
Для диагностических целей, результаты должны всегда оцениваться в комплексе с
историей болезни, клиническим обследованием и другими данными пациента.
Дополнительная нромывка
Не известно никаких влияний, требующих дополнительной промывки.
Измеряемый интервал 0,10-6,46 ммоль/л (0,31-20,0 мг/дл)
Образцы с более высокой концентрацией исследуются повторно при использовании
функции rerun. Разведение образцов при перезапуске - 1:10. Результаты, полученные в
пробах после разведения, автоматически умножаются на фактор 10.
Нижний предел обнаружения 0,1 ммоль/л (0,31 мг/дл).
Предел обнаружения представляет самый низкий измеренный уровень аналита,
который отличается от нуля. Вычисляется как величина, лежащая в трёх стандартных
отклонениях выше нулевого образца.
Ожидаемые значения
Взрослые 0,87-1,45 ммоль/л (2,7 — 4,5 мг/дл)
--- стр. 67 ---
Гомогенный энзиматический колориметрический метод.
В присутствии сульфата магния и декстран сульфата избирательно формируются
водорастворимые комплексы с ЛПНП, ЛП О Н П и хиломикронами, которые
резистентны к П Э Г модифицируемым ферментам. Концентрация холестерина в
липопротеидах высокой плотности определяется энзиматически с участием
холестерин эстеразы и холестерин оксидазы, связанных с П Э Г аминогруппами (ок.
40%). Эфиры холестерина расщепляются количественно с образованием холестерина
и жирных кислот под действием холестерин эстеразы.
эфиры холестерина ЛП ВП + Н 2О ПЭГ-холестерин холестерин Л П В П +RCOOH
эстераза
------------------->
В присутствии кислорода холестерин окисляется холестерин оксидазой до А '‘-
холестенола и перекиси водорода.
холестерин ЛП ВП + О 2 ПЭГ-холестерин Л "*-холестенол + Н 2О2
оксидаза
В присутствии пероксидазы (ПО Д) образовавшаяся перекись водорода реагирует с 4-
амино-антипирином и HSDA с формированием пурпурно-синей окраски.
Интенсивность формирования окрашенного комплекса прямо пропорциональна
концентрации холестерина ЛП В П и определяется фотометрически.
2 Н 2О2 +4-аминоантипирин + H S D A + Н + П О Д пурпурно-синий комплекс +
Н 2О -------> 5 Н 2О2
^D A = S o d ii^ T i ^И 2 -h yd ^xж y-3 ^lfo p ra p y^)^3 .5 ^iгп e tflo « ya п й ln e
Реагенты
Готовы к использованию. Розовый цвет реагента не создает помех при выполнении
теста. Неточное дозирование реагента, ведущего к потенциально ошибочным
результатам, может быть вызвано чрезмерным взбалтыванием этого реагента.
Убедитесь, что пена удалена с поверхности до установки реагента в анализатор.
R1 HEPES буфер 10,07 ммоль/л, CHES 96,95 ммоль/л, pH 7,4;
декстран сульфат 1,5 г/л; магния нитрата гексагидрат >11,7
ммоль/л; HSDA: 0,96 ммоль/л; аскорбат оксидаза >50 мккат/л;
ПОД >16,7 мккат/л; консерванты
SR HEPES буфер 10,07 ммоль/л, pH 7,0; ПЭГ-холестерин эстераза
>3,33 мккат/л; ПЭГ-холестерин оксидаза >127 мккат/л; ПОД >333
мккат/л; 4-амино-антипирин 2,46 ммоль/л; консерванты
Меры предосторожности и предупреждения
Только для in vitro диагност ики
Соблюдайте обычные меры предосторожности необходимые для работы со всеми
лабораторными реагентами. Утилизация использованных материалов должна
проводиться в соответствии с местными правилами ликвидации отходов.
Хранение и стабильность реагентов
Хранение при 2-8°С Смотрите срок годности на упаковке
В приборе при использовании холодильника 3 недели
анализатора
Сбор и подготовка образцов
Для сбора и подготовки используйте только подходящие пробирки. После
тестирования были признаны подходящими указанные ниже виды материала для
исследования.
Сыворотка.
--- стр. 68 ---
Плазма. L i-гепариновая или Кз-Э ДТА плазма. Использование ЭДТА в
качестве антикоагулянта может привести к занижению
результата.
Используя образцы проб в первичных пробирках, следуйте инструкциям изготовителя.
М огут анализироваться образцы, полученные как натощак, так и после приёма пищи.
Предпочтительно исследовать образцы в день получения крови. Центрифугируйте
образцы до выполнения исследования.
Стабильность
Сыворотка/плазма 7 дней при 2-8°С
3 месяца при -70°С
Протокол измерения
Для оптимального проведения исследования следуйте указаниям данного документа.
Ознакомьтесь с инструкцией оператора для анализатора, указанного в инструкции.
Использование протокола измерения, не подтвержденного Roche, не гарантирует
корректного результата и должно определяться потребителем.
Протокол измерения для сыворотки и плазмы cobas с 111 system
Режим измерения
Режим расчёта
Направление реакции
Длины волн А /В
Точки измерения: первая/последняя
Единицы измерения
Последовательность дозирования
Параметры дозирования
R1
Образец
SR
Общий объём
Калибровка
Калибратор
Адсорбция
Конечная точка
Возрастание
583/659 нм
16/37
ммоль/л
R1-S-SR
150 мкл
2.5 мкл
50 мкл
209.5 мкл
Дилюент (Н 2О)
7 мкл
Режим калибровки
Интервал калибровки
CFAS Lipids
В качестве нулевого калибратора используйте
деионизированную воду
Линейная регрессия
Каждый лот, по данным контроля качества
Стандартизация: метод стандартизован по отношению к референтному методу CDC.
Стандартизация удовлетворяет требованиям “ H D L Cholesterol Method Evaluation
Protocol for Manufacturers” Американской национальной референтной системы по
холестерину (US National Reference System for Cholesterol), CRM LN (Cholesterol
Reference Method Laboratory Network), ноябрь 1994.
Контроль качества
Для контроля качества могут быть использованы как контрольные материалы,
указанные в разделе "Информация о реагентах", так и другие пригодные контрольные
материалы. Контрольные интервалы должны быть приемлемыми для каждой
лаборатории, а полученные величины должны находиться в определенных пределах.
Каждая лаборатория должна установить поправочные коэффициенты, если
лабораторные величины находятся за пределами интервалов.
--- стр. 69 ---
Контрольные материалы предназначены для использования только для оценки
точности и правильности. Лабораторная панель стандартизации (LSP) Национальной
Образовательной Холестериновой Программы (National Cholesterol Education Program
- NCEP) рекомендует использовать контрольные материалы двух уровней, один -
нормальном диапазоне (0,9-1,7 ммоль/л или 35-65 мг/дл) и один в концентрации,
близкой к «зоне принятия решения» (<0,9 ммоль/л или <35 мг/дл).
Пересчёт
Анализатор cobas с 111 автоматически вычисляет концентрацию аналита в каждом
образце.
Факторы пересчёта: ммоль/л х 38,66 = мг/дл
ммоль/л X 0,3866 = г/л
мг/дл X 0,0259 = ммоль/л
Факторы, влияющие на результаты
Критерий: Восстановление в пределах ±10% от начального значения ХС ЛП В П в
концентрации 1,6 ммоль/л (61,8 мг/дл).
Иктеричность
Г емолиз
Липемия
Аскорбиновая
кислота
Лекарственные
препараты
Другое
Не оказывает значимого влияния до значения 28 индекса I для
конъюгированного и 60 для неконъюгированного билирубина
(приблизительное значение конъюгированного билирубина 478
мкмоль/л (28 мг/дл) и неконъюгированного билирубина 1026
мкмоль/л (60 мг/дл).
Не оказывает значимого влияния до значения индекса И 1 О О О
(приблизительная концентрация гемоглобина 621 мкмоль/л (1000
мг/дл).
Не оказывает значимого влияния до значения 1 О О О индекса L и
содержанием нативных триглицеридов до 11,4 ммоль/л (1000 мг/дл).
Имеется низкая корреляция между индексом L (характеризующим
мутность) и концентрацией триглицеридов.
Требование оценке влияния липемии основано на модели Glick,
которая использует липиды как искусственный субстрат. До
настоящего времени, нет доступной модели, которая могла бы
имитировать интерференцию триглицеридов, так как в образцах
пациентов они ведут себя непредсказуемо, в зависимости от природы
эстерифицированных жирных кислот в образцах. Образцы с
повышенным уровнем триглицеридов очень часто являются
липемичными. Следовательно, сотрудники лаборатории не могут
проверить влияние триглицеридов в пробах пациентов.
Не оказывает значимого влияния до 2,84 ммоль/л (50 мг/дл).
Никакого влияния лекарственных препаратов не было обнаружено
при использовании общей лекарственной панели.
Повышенная концентрация свободных жирных кислот и
денатурированных белков может вызвать ложно завышенные
результаты холестерина ЛПВП.
В редких случаях гаммапатий, конкретно при IgM типе
(Вальденстрёма, макрогробулинемия) результаты могут искажаться.
В редких случаях высокие концентрации иммуноглобулина может
провести к ложно заниженным результатам.
--- стр. 70 ---
Нарушение функции печени сопровождается изменением
метаболизма липидов; следовательно, результаты ХС ЛПВП и ХС
Л П Н П имеют ограниченную диагностическую ценность. У
некоторых пациентов с заболеваниями печени результаты ХС ЛП ВП
могут значительно отличаться от данных, полученных
референтными методами как, например, ультрацентрифугирование
или DCM.
Для диагностических целей, результаты должны всегда оцениваться в комплексе с
историей болезни, клиническим обследованием и другими данными пациента.
Дополнительная промывка
Не известно никаких влияний, требующих дополнительной промывки.
Измеряемый интервал 0,08-3,12 ммоль/л (3-120 мг/дл)
Расширенный диапазон измерения (расчетный)
Фактор разведения 4 (использование разведения <4 не рекомендуется)
0,08-12,5 ммоль/л (3-480 мг/дл)
Нижний предел обнаружения 0,08 ммоль/л (3 мг/дл)
Предел обнаружения представляет самый низкий измеренный уровень аналита,
который отличается от нуля. Вычисляется как величина, лежащая в трёх стандартных
отклонениях выше нулевого образца.
Ожидаемые значения
Отсутствие риска Умеренный риск Высокий риск
Женщины >1,68 ммоль/л 1,15-1,68 ммоль/л <1,15 ммоль/л
(>65 мг/дл) (45-65 мг/дл) (<45 мг/дл)
М ужчины >1,45 ммоль/л 0,90-1,45 ммоль/л <0,90 ммоль/л
(>55 мг/дл) (35-55 мг/дл) (<35 мг/дл)
Целевые значения NCEP
<40 мг/дл низкий ХС Л П В П (высокий риск развития сердечно-сосудистых
заболеваний)
>60 мг/дл высокий ХС Л П В П («отрицательный» риск развития сердечно-сосудистых
заболеваний)
Концентрация ХС Л П В П подвержена влиянию множества факторов, например,
курение, физическая нагрузка, гормоны, пол и возраст.
Каждая лаборатория должна исследовать приемлемость ожидаемых значений для
популяции своего региона, и если необходимо определить свои значения.
Целевые значения NCEP базируются на сывороточных величинах, и при оценке
результатов должны использоваться результаты в сыворотке или значения,
эквивалентные сывороточным. Поэтому NCEP рекомендует показатель 1,03 для
преобразования значения, полученные в Э ДТА плазме в сьгоороточные величины. Тем
не менее, наши собственные исследования показали, что для реагента HDLC3 должен
быть применён показатель 1,06. Чтобы соответствовать целевым значениям смещения
<5% NCEP 1998, мы рекомендуем каждой лаборатории протестировать и подтвердить
этот конверсионный фактор и ввести его в параметры теста для HDLC.
Точность
Воспроизводимость определялась, используя пробы людей и контроли по
внутреннему протоколу (внутри серии п = 21; всего п = 30). Были получены
следующие результаты:
Внутри серии Среднее ммоль/л (мг/дл) SD ммоль/л (мг/дл) CV %
Precinorm L 1,2(46,4) 0,0080(0,3093) 0,67
PrecipathHDL/LDL-C 0,92(35,6) 0,0094(0,3634) 1,03
--- стр. 71 ---
Сыворотка! 0,85(32,9) 0,0130(0,5026) 1,53
Сыворотка 2 2,46(95,1) 0,0210(0,8119) 0,85
Всего Среднее ммоль/л (мг/дл) SD ммоль/л (мг/дл) СУ%
PrecinomiL 1,23(47,6) 0,0150(0,5799) 1,21
Precipath HDL/LDL-C 0,71 (27,4) 0,0109(0,4214) 1,54
Сыворотка! 0,51 (19,7) 0,0127(0.4910) 2,47
Сыворотка 2 2,09(80,8) 0,0159(0,6147) 0,76
Сравнение методов
Значения ХС Л П В П в сыворотке и плазме людей, полученные на анализаторе cobas с
111 (у), сравнивались с подобной методикой, используемой на анализаторе СОВ AS
INTEGRA 400 (х).
Сыворотка/плазма (п= 101)
Passing/Bablok Линейная регрессия
у = 0,970х + 0,015 ммоль/л у = 0,970х + 0,019 ммоль/л
т = 0,977 г = 0,999
Концентрация проб: 0,16 - 3,05 мммоль/л (6,2 - 118 мг/дл).
Ссылки
1. Dominiczak М , McNamara J. The system o f Cardiovascular prevention. 103-125; Nauk
M , Wiebe D, W am ick G. Measurement o f High-Density-Lipoprotein Cholesterol. 221-244.
In: Handbook o f Lipoprotein Testing (eds. Rifai, W amick and Dominiczak), 2nd edition.
2. Linsel-Nitschke P et al. H D L as a target in the treatment o f atherosclerotic cardiovascular
disease. Nature Reviews 2005;4:193-205.
3. Ng DS. Treating low H D L - From bench to bedside. Clinical Biochemistry 2004;37:649-
659.
4. Sugiuchi H, U ji Y, Okabe H, Irie T et al. Direct Measurement o f High-Density Lipoprotein
Cholesterol in Serum w ith Polyethylene G lycol-M odified Enzymes and Sulfated a-
Cyclodextrin. C lin Chem 1995;41:717-723.
5. Matsuzaki Y , Kawaguchi E, M orita Y et a l Evaluation o f Two Kinds o f Reagents for
Direct Determination o f HDL-Cholesterol. J Anal Bio-Sc 1996;19:419-427.
6. Nauck M , Marz W, Jarausch J et al. Multicenter evaluation o f a homogeneous assay for
HDL-cholesterol without sample pretreatment. C lin Chem 1997;43:1622-1629.
7. Zawta B, K liiber J. Brochure “ Wissenswertes zu Apolipoproteinen” . Fragen/Antworten
(Boehringer Mannheim 1991).
8. AVP Fettstoffwechselstonmgen, Therapieempfehlungen 1,1st ed. 1996:2-16.
9. Hatch FT, Lees RS. Practical methods for plasma lipoprotein analysis. A dv Lipid Res
1968;6:1-68.
10. Narayan K A , Kummerow FA. Disk electrophoresis o f human serum lipoprotein. Nature
1965;205:246-248.
--- стр. 72 ---
11. Okazaki М , Shiraishi К , Ohno Y et al. Heterogeneity o f human high density lipoproteins
on high performance liquid chromatography. J Biochem 1982;92:517-524.
12. Burstein M , Scholnick HR, M o rfix R. Rapid method for the isolation o f lipoproteins
from human serum by precipitation w ith polyanions. J Lipid Res 1970;11:583-595.
13. Musto J, Law lor JF, HDL-cholesterol: online separation and analysis utilizing an
automated chemistry analyzer [Abstract], C lin Chem 1993;39:1125,
14. Kakuyama T, Kim ura S, Hashiguchi Y. Fully automated determination o f HDL-
cholesterol from human serum w ith Hitachi 911 [Abstract], C lin Chem 1994;40:1104.
15. Harris N, Galpchian V, Rifai N. Three routine methods for measuring high-density
lipoprotein cholesterol compared w ith the Reference method. C lin Chem 1996;42: 738-743,
16. Sugiuchi H. History o f development and technical details o f the homogeneous assay for
H D L and LD L cholesterol. The Fats o f Life 2005 ;IX No. 1: 4 - ll.
17. Cohn JS, McNamara JR, Schaefer EJ. Lipoprotein Cholesterol Concentrations in the
Plasma o f Human Subjects as Measured in the Fed and Fasted States. C lin Chem
1988;34:2456-2459.
18. Pisani T, Gebski CP, Leary ET, et al. Accurate Direct Determination o f Low-Density
Lipopotein Cholesterol Using an Immunoseparation Reagent and Enzymatic Cholesterol
Assay. Arch Pathol Lab Med 1995;119:1127.
19. Data on file at Roche Diagnostics.
20. Kim berly M , Leary E, Cole T, Waymack P. Selection, Validation, Standardization and
Performance o f a Designated Comparison Method for HDL-Cholesterol for Use in the
Cholesterol Reference Method Laboratory Network. C lin Chem 1999;45:1803-1812.
21. Tietz . Textbook o f Clinical Chemistry, 3rd Edition 1999;842-843.
22. National Cholesterol Education Program Recommendations for Measurement o f H igh-
Density Lipoprotein Cholesterol: Executive Summary. C lin Chem. 1995;41:1427-1433
23. C lick M R, Ryder KW , Jackson SA. Graphical Comparisons o f Interferences in Clinical
Chemistry Instrumentation. C lin Chem 1986;32:470-474.
24. Kadri N, D ouville P, Lachance P. Letter to editor. C lin Chem 2002;48:964.
25. Report on the Symposium “ Drug effects in clinical chemistry Methods” ,
Breuer J, Eur.J C lin Chem C lin Biocem 1996;34:385-386.
26. Thomas L, ed. Labor und Diagnose, 4th ed. Marburg: Die Medizinische
Verlagsgesellschaft, 1992:208.
27. Assmann G. A t what levels o f total low - or high-density lipoprotein cholesterol should
diet/drug therapy be initiated? European guidelines. Amer J Cardiol 1990;65:1 IF.
28. Assmann G, Schriewer H, Schmitz G et al. Quantification o f high-density lipoprotein
cholesterol by precipitation w ith phosphotungstic acid/MgC12. C lin Chem 1983;29:2026-
2030.
29. Third Report o f the National Cholesterol Education Program(NCEP) Expert Panel on
Detection, Evaluation, and Treatment o f High Blood Cholesterol in Adults (Adult Treatment
Panel III). N IH Publication No. 01-3670; M ay 2001.
30. Bablok W et al. A General Regression Procedure for Method Transformation. J Clin
Chem Clin Biochem 1988;26:783-790.
2007 Roche Diagnostics
--- стр. 73 ---
Холестерин липопротеидов низкой плотности плюс вер,2 (LDL С)
Кобас с системы
Информация о реагентах
L D L-холестерин плюс вер.2
Cobas с 111 4x50 тестов
Калибратор липидов CFAS Lipids 3 х 1мл
Контроль норма Precinorm L 4x3 мл
Контроль патология Precipath 4x3 мл
H D L/LD L-C
Клинер
cobas с systems
cobas с 1 1 1
Номер по каталогу 04657578190
AC N 059
Номер по каталогу 12172623122
Код 424
Номер по каталогу 10781827 122
Код 304
Номер по каталогу 11778552 122
Код 319
Номер по каталогу 04774248 190
Код 947
NaCl 9%
Предписание для использования
Набор реагентов для количественного определения in vitro концентрации холестерина
липопротеидов низкой плотности в сыворотке и плазме на установках cobas с 111.
Теоретическое обоснование
Липопротеиды низкой плотности (LD L) играют ключевую роль в возникновении и
распространении атеросклероза, и, конкретно, при коронарном атеросклерозе. Л П Н П
образуются от V L D L (липопротеидов очень низкой плотности с богатым содержанием
триглицеридов) под действием различных липолитических ферментов и
синтезируются печенью.
Элиминация Л П Н П из плазмы происходит главным образом паренхимальными
клетками печени и через специфические рецепторы ЛПНП. Повышенная
концентрация Л П Н П в крови и увеличение времени их существования связывается с
увеличением их биологической модификации при деструкции эндотелиальной
функции и более высоким захватом холестерина Л П Н П моноцит/макрофагальной
системой, также как и гладкомышечньгми клетками сосудистой стенки. Основной
холестерин, откладываемый в атеросклеротических бляшках, происходит из ЛП Н П .
Концентрация холестерина Л П Н П является наиболее сильным клиническим
предиктором среди всех одиночных параметров, используемых при оценке
коронарного атеросклероза. Следовательно, терапия, направленная на снижение
концентрации липидов, первоначально нацелена на снижение холестерина ЛП Н П .
Эффективная терапия вьфажается в улучшении функции эндотелия, профилактике
атеросклероза и уменьшении его прогрессирования, а также профилактике разрыва
бляшки.
Для определения холестерина Л П Н П доступны различные методы, такие как
ультрацентрифугирование - референтный метод, электрофоретическое разделение
липопротеидов и методы преципитации. При использовании преципитации осаждают
аполипопротеиды В, содержащие холестерин ЛП Н П , например, с использованием
поливинил сульфата, декстран сульфата или полицикличных анионов. Концентрация
Л П Н П обычно вычисляется как разность между общим холестерином и холестерином
ЛП О Н П и холестерином Л П В П в супернатанте после осаждения с поливинил
сульфатом и декстран сульфатом.
--- стр. 74 ---
Научно-исследовательские клиники по изучению липидов рекомендуют комбинацию
ультрацентрифугирования и методов преципитации, использующих полианионы в
присутствие двухвалентньк катионов.
Тем не менее, методы осаждения, трудоемкие, не подлежат автоматизации и
подверженные влиянию гиперлипидемической сыворотки, особенно при высокой
концентрации свободных жирных кислот. Более современный метод основан на
определении холестерина Л П Н П после иммуноадсорбции и центрифугирования.
Вычисление концентрации холестерина Л П Н П обычно производят согласно формуле
Фридевальд. Формула основана на 2-х определениях холестерина, 1-ом определении
триглицеридов, а также этапа осаждения при определении Л П В П и базируется на том,
что существует прямая зависимость между холестерином Л П О Н П и триглицеридами в
образцах крови, полученных после ночного голодания. Даже в присутствии
небольших количеств хиломикронов или патологических липопротеидов, формула
приводит к получению ложно заниженных концентраций Л П Н П . По этой причине
существует необходимость простого и надежного метода для определения
холестерина Л П Н П без любых подготовительных шагов или вычислений.
Этот автоматизированный метод для прямого определения холестерина ЛП Н П имеет
преимущество селективным мицелярным растворением холестерина ЛП Н П с
помощью неионного детергента и взаимодействием сахарозного компонента и
липопротеидов (ЛПОН П и хиломикронов). Когда детергент включается в
ферментативный метод для определения холестерина (холестерин эстеразная,
холестерин оксидазная фазы реакции), относительная реактивность холестерина
увеличивается по липопротеидам в следующем порядке: Л П В П < хиломикроны <
ЛПОНП < ЛПНП. В присутствии Mg++ сахарозный компонент значительно снижает
ферментативную реакцию определения холестерина в Л П О Н П и хиломикронах.
Комбинация сахарозного состава с детергеном обуславливает выборочное
определение холестерина Л П Н П в сыворотке. Результаты в пробах, полученных не
натощак немного ниже, чем результаты после голодания.
Принцип метода
Гомогенный энзиматический колориметрический метод.
эфиры холестерина Л П Н П + Н2О холестерин холестерин + свободные
эстераза жирные кислоты
>
детергент
Эфиры холестерина ЛП Н П расщепляются количественно холестеринэстеразой до
холестерина и свободных жирных кислот.
холестерин ЛП Н П + О2 холестерин А "^-холестенол + Н 2О2
оксидаза
>
В присутствии кислорода, холестерин окисляется холестериноксидазой до Д "^-
холестенона и перекиси водорода.
2 Н 2О2 +4-аминоантипирин + HSDA + Н + П О Д 5 Н 2О2 + пурпурно-синий
Н 2О -------> комплекс (мах.абс.585 нм)
= Sodium N-^-hydroxy-S-sulfopfopyO-3,5^mcthoxyaniline
В присутствии пероксидазы (ПОД) образовавшаяся перекись водорода реагирует с 4-
амино-антипирином и HSDA с формированием пурпурно-с иней окраски.
Интенсивность формирования окрашенного комплекса прямо пропорциональна
концентрации холестерина и определяется фотометрически.
10
--- стр. 75 ---
Реагенты
Готовы к использованию.
MOPS буффер 20,1 ммоль/л, pH 6,5; HSDA 0,96 ммоль/л; аскорбат
оксидаза>50 мккат/л; пероксидаза > 167 мккат/л; консерванты
SR MOPS буфер: 20,1 ммоль/л, pH 6,8; M gS04-7H20: 8, И ммоль/л;
4-аминоантипирин: 2,46 ммоль/л; холестеринэстераза: >50
мккат/л; холестериноксидаза: >33,3 мккат/л; пероксидаза: >334
мккат/л; детергент; консерванты.
Меры предосторожности и предупреждения
Только для in vitro диагностики
Соблюдайте обычные меры предосторожности необходимые для работы со всеми
лабораторными реагентами. Утилизация использованных материалов должна
проводиться в соответствии с местными правилами ликвидации отходов.
Хранение и стабильность реагентов
Хранение при 2-8°С Смотрите срок годности на упаковке
В приборе при использовании холодильника 3 недели
анализатора
Сбор и подготовка образцов
Для сбора и подготовки используйте только подходящие пробирки. После
тестирования были признаны подходящими указанные ниже виды материала для
исследования.
Сыворотка.
Плазма. L i-гепариновая плазма. Использование ЭДТА в качестве
антикоагулянта может привести к занижению результата.
Используя образцы проб в первичных пробирках, следуйте инструкциям изготовителя.
М огут анализироваться образцы, полученные как натощак, так и после приёма пищи.
Центрифугируйте образцы до выполнения исследования.
Стабильность
Сыворотка/плазма 7 дней при 2-8°С
3 месяца при -70“С
Не используйте образцы, которые хранились при -20“С. Замораживание
рекомендуется только при -70°С.
Протокол измерения
Для оптимального проведения исследования следуйте указаниям данного документа.
Ознакомьтесь с инструкцией оператора для анализатора, указанного в инструкции.
Использование протокола измерения, не подтвержденного Roche, не гарантирует
корректного результата и должно определяться потребителем.
Протокол измерения для сыворотки и плазмы cobas с И 1 system
Режим измерения
Режим расчёта
Направление реакции
Длины волн А /В
Точки измерения: первая/последняя
Единицы измерения
Последовательность дозирования
Параметры дозирования
R1
Образец
Адсорбция
Конечная точка
Возрастание
583/659 нм
16/37
ммоль/л
R1-S-SR
150 мкл
2 мкл
Дилюент (Н 2О)
7 мкл
11
--- стр. 76 ---
SR
Общий объём
Калибровка
Калибратор
50 мкл
209 мкл
Режим калибровки
Интервал калибровки
CFAS Lipids
В качестве нулевого калибратора используйте
деионизированную воду
Линейная регрессия
Каждый лот, по данным контроля качества
Стандартизация: метод стандартизирован по методу бета квантификации по
рекомендации Cholesterol Method Certification Protocol LD L для производителей.
Контроль качества
Для контроля качества могут быть использованы как контрольные материалы,
указанные в разделе "Информация о реагентах", так и другие пригодные контрольные
материалы. Контрольные интервалы должны бьггь приемлемыми для каждой
лаборатории, а полученные величины должны находиться в определенных пределах.
Каждая лаборатория должна установить поправочные коэффициенты, если
лабораторные величины находятся за пределами интервалов.
Контрольные материалы предназначены для использования только для оценки
точности и правильности. Лабораторная панель стандартизации (LSP) Национальной
Образовательной Холестериновой Программы (National Cholesterol Education Program
- NCEP) рекомендует использовать контрольные материалы двух уровней, один -
нормальном диапазоне (0,9-1,7 ммоль/л или 35-65 мг/дл) и один в концентрации,
близкой к <ооне принятия решения» (<0,9 ммоль/л или <35 мг/дл).
Пересчёт
Анализатор cobas с 111 автоматически вычисляет концентрацию аналита в каждом
образце.
Факторы пересчёта: ммоль/л х 38,66 = мг/дл
ммоль/л X 0,3866 = г/л
мг/дл X 0,0259 = ммоль/л
Факторы, влияющие на результаты
Критерий: Восстановление в пределах ±10% от начального значения ХС ЛП Н П в
концентрации 4,0 ммоль/л (154 мг/дл).
Иктеричность Не оказывает значимого влияния до значения 40 индекса I для
конъюгированного и 60 для неконъюгированного билирубина
(приблизительное значение конъюгированного билирубина 684
мкмоль/л (40 мг/дл) и неконъюгированного билирубина 1026
мкмоль/л (60 мг/дл).
Не оказывает значимого влияния до значения индекса Н 980
(приблизительная концентрация гемоглобина 608 мкмоль/л (980
мг/дл).
Не оказывает значимого влияния до значения 300 индекса L.
Имеется низкая корреляция между индексом L (характеризующим
мутность) и концентрацией триглицеридов.
Никакого влияния лекарственных препаратов не было обнаружено
при использовании общей лекарственной панели.
В редких случаях гаммапатий, конкретно при IgM типе
(Вальденстрёма, макрогробулинемия) результаты могут искажаться.
Г емолиз
Липемия
Лекарственные
препараты
Другое
12
--- стр. 80 ---
Эфиры холестерина расщепляются под действием холестерин эстеразы (ХЭ), с
образованием свободного холестерина и жирных кислот. Затем холестерин оксидаза
(ХО Д) катализирует окисление холестерина до холест-4-ен-З-один и перекиси
водорода. В присутствии пероксидазы (ПОД), перекись водорода воздействует на
оксидативную связь фенола и 4-аминоантипирина (4-А А П ) с формированием
продукта красного цвета.
эфиры холестерина + Н 2О Х Э холестерин + RCOOH
------------------->
холестерин + О 2 Х О Д холест-4-ен-З-один + Н 2О2
------------------->
2 Н 2О 2 +4-ААП + фенол П О Д 4 Н 2О 2 + красный комплекс
--------------->
Интенсивность формирования окрашенного комплекса прямо пропорциональна
концентрации холестерина и определяется степенью увеличения оптической
плотности.
Реагенты
Готовы к использованию. Неточное дозирование реагента, ведущего к потенциально
ошибочным результатам, может быть вызвано чрезмерным взбалтыванием этого
реагента. Убедитесь, что пена удалена с поверхности до установки реагента в
анализатор.
R1 PIPES буфер 225 ммоль/л, pH 6,8; Mg2+ 10 ммоль/л; холат натрия
0,6 ммоль/л; 4-аминоантипирин >0,45 ммоль/л; фенол >12,6
ммоль/л; свободный алкогольный полигликолевый эфир 3%; ХЭ
>25 мккат/л (>1,5 Е/мл); ХО Д >7,5 мккат/л (>0,45 Е/мл); ПОД
>12,5 мккат/л (>0,75 Е/мл); стабилизаторы, консерванты
Меры предосторожности и предупреждения
Только для in vitro диагностики
Соблюдайте обычные меры предосторожности необходимые для работы со всеми
лабораторными реагентами. Утилизация использованных материалов должна
проводиться в соответствии с местными правилами ликвидации отходов.
Хранение и стабильность реагентов
Хранение при 2-8®С Смотрите срок годности на упаковке
В приборе при использовании холодильника 4 недели
анализатора
Сбор и подготовка образцов
Для сбора и подготовки используйте только подходящие пробирки. После
тестирования были признаны подходящими указанные ниже виды материала для
исследования.
Сыворотка.
Плазма. L i-гепариновая, КЗ-Э Д ТА плазма. Использование Э ДТА в
качестве антикоагулянта может привести к занижению
результата. Не используйте цитрат, оксалат и фторид.
Используя образцы проб в первичных пробирках, следуйте инструкциям изготовителя.
М огут анализироваться образцы, полученные как натощак, так и после приёма пищи.
Центрифугируйте образцы до выполнения исследования.
Стабильность
Энзиматический колориметрический метод.
16
--- стр. 81 ---
Сыворотка/плазма 7 дней при 15-20°С
7 дней при 2-8°С
3 месяца при (-15) - (-20)°С
Протокол измерения
Для оптимального проведения исследования следуйте указаниям данного документа.
Ознакомьтесь с инструкцией оператора для анализатора, указанного в инструкции.
Использование протокола измерения, не подтвержденного Roche, не гарантирует
корректного результата и должно определяться потребителем.
Протокол измерения для сыворотки и плазмы cobas с 111 system
Режим измерения
Режим расчёта
Направление реакции
Длины волн А /в
Точки измерения: первая/последняя
Единицы измерения
Последовательность дозирования
Параметры дозирования
R1
Образец
Общий объём
Калибровка
Калибратор
Адсорбция
Конечная точка
Возрастание
512/659 нм
6/37
ммоль/л
R1-S
47 мкл
2 мкл
142 мкл
Дилюент (Н 2О)
70 мкл
23 мкл
Режим калибровки
Интервал калибровки
CFAS
В качестве нулевого калибратора используйте
деионизированную воду
Линейная регрессия
Каждый лот, по данным контроля качества
Стандартизация: метод стандартизирован по методов Abell/Kendall и isotope dilution /
mass spectrometry и соответствует требованиям Национального Института Здоровья
(NIH).
Контроль качества
Для контроля качества могут быть использованы как контрольные материалы,
указанные в разделе "Информация о реагентах", так и другие пригодные контрольные
материалы. Контрольные интервалы должны быть приемлемыми для каждой
лаборатории, а полученные величины должны находиться в определенных пределах.
Каждая лаборатория должна установить поправочные коэффициенты, если
лабораторные величины находятся за пределами интервалов.
Пересчёт
Анализатор cobas с 1И автоматически вычисляет концентрацию аналита в каждом
образце.
Факторы пересчёта: ммоль/л х 38,66 — мг/дл
ммоль/л X 0,3866 = г/л
мг/дл X 0,0259 = ммоль/л
Факторы, влияющие на результаты
Критерий: Восстановление в пределах ±10% от начального значения холестерина в
концентрации < 5 ,2 ммоль/л (<200 мг/дл).
17
--- стр. 82 ---
Иктеричность Не оказывает значимого влияния до значения 14 индекса I для
конъюгированного билирубина (приблизительное значение
конъюгированного билирубина 239 мкмоль/л (14 мг/дл) и до
значения 7 для неконъюгированного билирубина (приблизительное
значение неконъюгированного билирубина 120 мкмоль/л (7 мг/дл).
Гемолиз Не оказывает значимого влияния до значения индекса Н 350
(приблизительная концентрация гемоглобина 217 мкмоль/л (350
мг/дл).
Липемия Не оказывает значимого влияния до значения 1 О О О индекса L.
Имеется низкая корреляция между индексом L (характеризующим
мутность) и концентрацией триглицеридов.
Лекарственные Никакого влияния лекарственных препаратов не было обнаружено
препараты при использовании общей лекарственной панели.
Другое В редких случаях гаммапатий, конкретно при IgM типе
(Вальденстрёма, макрогробулинемия) результаты могут искажаться.
Для диагностических целей, результаты должны всегда оцениваться в комплексе с
историей болезни, клиническим обследованием и другими данными пациента.
Д о п о л н и т е л ь н а я п р о м ы в к а
Не известно никаких влияний, требующих дополнительной промывки.
Измеряемый интервал 0,25-20,7 ммоль/л (9,7-800 мг/дл)
Расширенный диапазон измерения (расчетный)
Фактор разведения 10, анализатор проводит постразведение автоматически с
фиксированным показателем 10, выполняя функцию Rerun.
0,25-207 ммоль/л (9,7-8000 мг/дл)
Нижний предел обнаружения 0,25 ммоль/л (9,7 мг/дл)
Предел обнаружения представляет самый низкий измеренный уровень аналита,
который отличается от нуля. Вычисляется как величина, лежащая в трёх стандартных
отклонениях выше нулевого образца.
Ожидаемые значения
Клиническая интерпретация в соответствии с рекомендациями Европейского
Атеросклеротического Общества (European Atherosclerosis Society).
Нарушение липидного обмена
Холестерин <5,2 ммоль/л (<200 мг/дл) Нет
Триглицериды <2,3 ммоль/л (<200 мг/дл)
Холестерин 5,2-7,8 ммоль/л (200-300 мг/дл) Есть, если ХС ЛП В П <0,9
ммоль/л (<35 мг/дл)
Холестерин >7,8 ммоль/л (>300 мг/дл) Есть
Триглицериды >2,3 ммоль/л (>200 мг/дл)
Интерпретация в соответствии с рекомендациями NCEP АТР (NCEP Adult Treatment Panel).
Желательный уровень холестерина <5,2 ммоль/л (<200 мг/дл)
Погранично высокий холестерин 5,2-6,2 ммоль/л (200-240 мг/дл)
Высокий холестерин >6,2 ммоль/л (>240 мг/дл)
Каждая лаборатория должна исследовать приемлемость ожидаемых значений для
популяции своего региона, и если необходимо определить свои значения. Данные,
полученные в разных лабораториях могут различаться.
18
--- стр. 85 ---
Триглицериды (TRIGL)
Кобас с системы
Информация о реагентах
Триглицериды
cobas с 111 4 X 50 тестов
Калибратор CFAS 12x3 мл
Контроль норма PNU 20x5 мл
Контроль патология PPU 20x5 мл
c o t? a s с sy ste m s
cobas с 1 1 1
Номер по каталогу 04657594190
TRIGL: A C N 781
Номер по каталогу 107593 50190
Код 401
Номер по каталогу 10171743122
Код 300
Номер по каталогу 10171778122
Код 301
Предписание для использования
Набор реагентов для количественного определения in vitro концентрации
триглицеридов в сыворотке и плазме на установках cobas с 111.
Теоретическое обоснование
Триглицериды являются основным липидами, присутствующими в плазме человека;
другие липиды - холестерин, фосфолипиды и неэстерифицированные жирные
кислоты. Триглицериды являются главной формой хранения липидов у человека,
составляя около 95% липидов жировой ткани.
Увеличение концентрации триглицеридов связано с высоким риском тяжелого
атеросклероза. Повышенное содержание триглицеридов и гиперлипидемия могут быть
наследственными или вторичными, которые возникают при таких заболеваниях как
сахарный диабет, нефроз, билиарная обструкция и метаболических нарушениях,
связанных с эндокринным дисбалансом.
Принцип метода
Энзиматический колориметрический метод (ГФО/РАР) с глицерин фосфат оксидазой
и 4-аминофеназоном (4-АФН).
Триглицериды гидролизуются липопротеин липазой (Л П Л ) до глицерина и жирных
кислот. Затем глицерин фосфорилируется А Т Ф при участии глицерокиназы (ГК ) до
глицерин-3-фосфата. Окисление глицерин-3-фосфата до гидроксиацетон фосфата и
перекиси водорода (Н 2О 2) катализируется глицеролфосфатоксидазой (ГФО).
триглицериды + Н 2О Л П Л
__________>
глицерин + жирные кислоты
глицерин + А Т Ф Г К
__________>
глицерин-З-фосфат + А Д Ф
глицерин-З-фосфат +О 2 ГФ О дигидроксиацетон фосфат +
---------------> Н 2О2
2 Н 2О2 +4-А Ф Н + 4-хлорфенол п о д 4 Н 2О + красный комплекс
->
В присутствии пероксидазы (ПОД), перекись водорода окисляет 4-хлорфенол и 4-
аминофеназон с формированием комплекса красного цвета. Интенсивность
формирования окрашенного комплекса прямо пропорциональна концентрации
триглицеридов и определяется степенью увеличения оптической плотности.
21
--- стр. 86 ---
Реагенты
Готовы к использованию. Неточное дозирование реагента, ведущего к потенциально
ошибочным результатам, может быть вызвано чрезмерным взбалтыванием этого
реагента. Убедитесь, что пена удалена с поверхности до установки реагента в
анализатор.
R1 PIPES буфер 50 ммоль/л, pH 6,8; Mg2+ 40 ммоль/л; холат натрия
0,20 ммоль/л; А Т Ф >1,4 ммоль/л; 4-аминофеназон >0,13 ммоль/л;
4-хлорфенол 4,7 ммоль/л; Л П Л >83 мккат/л; Г К >3 мккат/л; ГФО:
>41 мккат/л; ПОД >1,6 мккат/л; консерванты
Меры предосторожности и предупреиадения
Только для in vitro диагностики
Соблюдайте обычные меры предосторожности необходимые для работы со всеми
лабораторными реагентами. Утилизация использованных материалов должна
проводиться в соответствии с местными правилами ликвидации отходов.
Хранение и стабильность реагентов
Хранение при 2-8'^С Смотрите срок годности на упаковке
В приборе при использовании холодильника 2 недели
анализатора
Сбор и подготовка образцов
Для сбора и подготовки используйте только подходящие пробирки. После
тестирования были признаны подходящими указанные ниже виды материала для
исследования.
Сыворотка.
Плазма. L i-гепариновая, КЗ-Э Д ТА плазма.
Используя образцы проб в первичных пробирках, следуйте инструкциям изготовителя.
Заполнение пробирки с Э ДТА менее чем на 1/2 может привести к снижению
результатов. Пробирки для взятия материала должны быть свободны от мыла и
глицерина. Центрифугируйте образцы до выполнения исследования. Пациенты
должны воздерживаться от приёма пищи за 10-14 часов до взятия крови.
Стабильность
Сыворотка/плазма 5-7 дней при 2-8°С
3 месяца при (-15) - (-20)°С
Протокол измерения
Для оптимального проведения исследования следуйте указаниям данного документа.
Ознакомьтесь с инструкцией оператора для анализатора, указанного в инструкции.
Использование протокола измерения, не подтвержденного Roche, не гарантирует
корректного результата и должно определяться потребителем.
Протокол измерения для сыворотки и плазмы cobas с 111 system
Режим измерения
Режим расчёта
Направление реакции
Длины волн А /в
Точки измерения: первая/последняя
Единицы измерения
Последовательность дозирования
Параметры дозирования
R1
Образец
Адсорбция
Конечная точка
Возрастание
512/659 нм
6/21
ммоль/л
R1-S
120 мкл
2 мкл
Дилюент (Н 2О)
28 мкл
22
--- стр. 87 ---
Общий объём 150 мкл
Калибровка
Калибратор CFAS
В качестве нулевого калибратора используйте
деионизированную воду
Режим калибровки Линейная регрессия
Интервал калибровки Каждый лот, по данным контроля качества
Стандартизация: метод стандартизирован по методу ID/MS,
Контроль качества
Для контроля качества м огуг быть использованы как контрольные материалы,
указанные в разделе "Информация о реагентах", так и другие пригодные контрольные
материалы. Контрольные интервалы должны бьпь приемлемыми для каждой
лаборатории, а полученные величины должны находиться в определенных пределах.
Каждая лаборатория должна установить поправочные коэффициенты, если
лабораторные величины находятся за пределами интервалов.
Пересчёт
Анализатор cobas с 111 автоматически вычисляет концентрацию аналита в каждом
образце.
Факторы пересчёта: ммоль/л х 88,5 = мг/дл
мг/дл X 0,0113 = ммоль/л
Факторы, влияющие на результаты
Критерий: Восстановление в пределах ±10% от начального значения холестерина в
концентрации < 2,3 ммоль/л (<200 мг/дл).
Иктеричность Не оказывает значимого влияния до значения 66 индекса I для
конъюгированного билирубина (приблизительное значение
конъюгированного билирубина 746 мкмоль/л (66 мг/дл) и до
значения 16 для неконъюгированного билирубина (приблизительное
значение неконъюгированного билирубина 181 мкмоль/л (16 мг/дл).
Гемолиз Не оказывает значимого влияния до значения индекса Н 200
(приблизительная концентрация гемоглобина 2124 мкмоль/л (200
мг/дл).
Эндогенный неэтерифицированный глиценин может приводить к
ложно завышенным результатам триглицеридов.
Лекарственные Никакого влияния лекарственных препаратов не было обнаружено
препараты при использовании общей лекарственной панели.
Исключение Аскорбиновая кислота и добесилат кальция искусственно занижают
результаты триглицеридов при тестируемых уровнях лекарства;
леводопа, метилдопа и фенилбутазон приводят к получению ложно
заниженных результатов при высоких концентрациях лекарственных
препаратов; липемия может искусственно завышать триглицериды
при высоком уровне лекарств.
Другое В редких случаях гаммапатий, конкретно при IgM типе
(Вальденстрёма, макрогробулинемия) результаты могут искажаться.
Для диагностических целей, результаты должны всегда оцениваться в комплексе с
историей болезни, клиническим обследованием и другими данными пациента.
Дополнительная промывка
Не известно никаких влияний, требующих дополнительной промывки.
Измеряемый интервал 0,1-10 ммоль/л (8,85-885 мг/дл)
Расширенный диапазон измерения (расчетный)
23
--- стр. 90 ---
V
f f
ИНСТРУКЦИЯ
по применению изделия медицинского назначения: Принадлежности,
расходные материалы и реагенты для анализаторов биожимнческиж cobas с
111/cobasclllISE______________________________________________________
1. Креатинин Плюс, энзиматический метод (Creatinine Plus ver 2 cobas с
system (CREAP2))
2. Мочевина (Urea/BUN cobas с system (UR EAL))
3. Общий белок, вер. 2 (Total Protein Gen2 cobas с system (TP2))
4. Альбумин БКЗ (Album in Gen.2 cobas с system (ALB 2))
5. Общий билирубин (специальный реагент) (Total B ilirubin Special cobas с
system (BILTS))
6. Прямой билирубин (B ilirubin Direct cobas с system (B IL-D ))
с
--- стр. 91 ---
1.креатинин / V ;
2.мочевина
З.общий белок t /
4.альбумин ^ ч
З.общий билирубин-
6. прямой билирубин
Креатинин плю с вер.2 (CREP2)
Кобас с системы
Информация о реагентах
Креатинин плюс вер.2
cobas с 111
cobas с systems
cob as с 1 1 1
Калибратор CFAS
Контроль норма PNU
Контроль патология PPU
4x100 тестов
12x3 мл
20x5 мл
20x5 мл
Номер по каталогу 04657489190
CRE2: AC N 652
CRE2U: A C N 653
Номер по каталогу 10759350190
Код 401
Номер по каталогу 10171743122
Код 300
Номер по каталогу 10171778122
Код 301
Предписание для использования
Набор реагентов для количественного определения in vitro концентрации креатинина в
сыворотке, плазме и моче на установках cobas с 111.
Теоретическое обоснование
Креатинин - продукт эндогенного метаболизма креатина и креатинфосфата в
мышечной ткани. При нормальной функции почек выводится из организма за счет
гломерулярной фильтрации. Определение креатинина используется для диагностики,
терапевтического мониторинга острых и хронических заболеваний почек, оценке
эффективности процесса диализа. Концентрация креатинина в моче может
использоваться как референсный параметр для оценки экскреции других веществ
(альбумина, а-амилазы).
Для определения креатинина описаны различные методы, включая метод Яффе с
образованием пикратов в щелочной среде; так же предлагается энзиматический тест, в
котором измеряется аммиак после расщепления креатинина ферментом креатинин
иминогидролазы.
Принцип метода
Энзиматический колориметрический метод.
Энзиматический метод основанный на определении перекиси водорода после
преобразования креатинина с участием креатининазы, креатиназы и сакрозин
оксидазы. Образующаяся перекись водорода реагирует с 4-аминофеназоном и HTIB
(2,4,6-трийодо-З-гидроксибензойная кислота) с формированием хромогена.
Креатинин в щелочной среде вступает в реакцию с пикриновой кислотой с
образованием желто-красных продуктов реакции. Скорость развития окраски прямо
пропорциональна концентрации креатинина.
креатинин + Н 2О креатининаза креатин
------------------>
саркозин + О 2 + Н 2О СО Д глицин + НСНО + Н 2О2
------------------>
Н 2О 2 + 4-аминофеназон + Н Т Ш П О Д куинонимин хромоген + Н 2О
--- стр. 92 ---
-----------------> + HI
п о д куинонимин хромоген + Н 2О
-------------------> + H I
Интенсивность формирования цветности хромогена прямо пропорциональна
концентрации креатинина и измеряется фотометрически.
Реагенты
Готовы к использованию.
R1 TAPS буфер (3-
[[трис(гидроксиметил)метил]амино]пропансульфоновая кислота):
30 ммоль/л, pH 8,1; креатиназа ; 332 мккат/л; саркозин оксидаза:
217 мккат/л; аскорбат оксидаза 16,7 мккат/л; HTIB: 1,2 г/д;
детергенты; консерванты
SR TAPS буфер: 50 ммоль/л, pH 8.0; креатииназа; 1667 мккат/л;
пероксидаза: 83,4 мккат/л; 4-аминофеназон: 0,4 г/л; натрия
гексацианоферрат (II): 60 мг/л; детергенты; консерванты
Меры предосторожности и предупреждения
Т о л ь к о д л я i n v i t r o д и а г н о с т и к и
Соблюдайте обычные меры предосторожности необходимые для работы со всеми
лабораторными реагентами. Утилизация использованных материалов должна
проводиться в соответствии с местными правилами ликвидации отходов.
Хранение и стабильность реагентов
Хранение при 2-8‘^С Смотрите срок годности на упаковке
В приборе при использовании холодильника 4 недели
анализатора
Сбор и подготовка образцов
Для сбора и подготовки используйте только подходящие пробирки. После
тестирования были признаны подходящими указанные ниже виды материала для
исследования.
Сыворотка.
Плазма. L i-гепариновая или К 3-Э Д ТА плазма.
Используя образцы проб в первичных пробирках, следуйте инструкциям изготовителя.
Моча. При сборе мочи не используйте консерванты.
Центрифугируйте образцы до выполнения исследования.
Стабильность
Сыворотка/плазма 7 дней при 15 - 20°С
7 дней при 2 - 8°С
3 месяца при (-15) - (-25)°С
Моча 2 дня при 15 - 25°С
6 дней при 2 - 8°С
6 месяцев при (-15) - (-25)°С
Протокол измерения
Для оптимального проведения исследования следуйте указаниям данного документа.
Ознакомьтесь с инструкцией оператора для анализатора, указанного в инструкции.
Использование протокола измерения, не подтвержденного Roche, не гарантирует
корректного результата и должно определяться потребителем.
Протокол измерения для сыворотки, плазмы и мочи cobas с 111 system
Режим измерения Адсорбция
Режим расчёта Конечная точка
Направление реакции Возрастание
--- стр. 93 ---
Длины волн А/в 552/659 нм
Точки измерения: первая/последняя 17/34
Сывортка/плазма
Единицы измерения мкмоль/л
Последовательность дозирования R1-S-SR
М оча
Единицы измерения ммоль/л
Последовательность дозирования D -R 1-S-SR
Параметры дозирования
Сывортка/плазма/моча
R1 77 мкл
Образец 2 мкл
SR 38 мкл
Общий объём 22 мкл
Дилюент (НгО)
5 мкл
Калибровка
Калибратор CFAS
Режим калибровки
Интервал калибровки
В качестве нулевого калибратора используйте
деионизированную воду
Линейная регрессия
Каждый лот, по данным контроля качества
Стандартизация: метод стандартизован по отношению к ID/MS.
Контроль качества
Сыворотка/плазма
Для контроля качества могут быть использованы как контрольные материалы,
указанные в разделе "Информация о реагентах", так и другие пригодные контрольные
материалы.
М оча
Для контроля качества могут быть использованы как контрольные материалы,
указанные выше Precinorm PUC и Precipath PUC, так и другие пригодные контрольные
материалы. Контрольные интервалы должны быть приемлемыми для каждой
лаборатории, а полученные величины должны находиться в определенных пределах.
Каждая лаборатория должна установить поправочные коэффициенты, если
лабораторные величины находятся за пределами интервалов.
Пересчёт
Анализатор cobas с 111 автоматически вычисляет концентрацию аналита в каждом
образце.
Факторы пересчёта: мкмоль/л х 0,0113 = мг/дл
мкмоль/л X 0,001 ммоль/л
Факторы, влияющие на результаты
Критерий: Восстановление в пределах ±10% от начального значения креатинина 80
мкмоль/л (0,9 мг/дл) в сыворотке.
Сыворотка/плазма
Иктеричность Не оказывает значимого влияния до значения 21 индекса I для
конъюгированного билирубина (приблизительное значение
конъюгированного билирубина 359 мкмоль/л (21 мг/дл) или до
значения 34 индекса I для неконъюгированного билирубина
(приблизительное значение неконъюгированного билирубина 581
мкмоль/л (34 м г/д л ).
--- стр. 94 ---
г емолиз
Липемия
Аскорбиновая
кислота
Лекарственные
препараты
Другое
Моча
Лекарственные
препараты
Другое
Не оказьгоает значимого влияния до значения индекса Н 1021
(приблизительная концентрация гемоглобина 634 мкмоль/л (1021
мг/дл).
Не оказывает значимого влияния до значения 1551 индекса L.
Имеется низкая корреляция между индексом L (характеризующим
мутность) и концентрацией триглицеридов.
Не оказывает значимого влияния до 1700 мкмоль/л или <300 мг/л.
Влияние терапевтических лекарств на результат теста было
протестировано согласно рекомендациям Симпозиума D rug Effects in
Clinical Chemistry M ethods
(1996). Протестированные in vitro levodopa и calcium dobesilate
приводят к искусственном занижению результата креатинина, в то
время как DL-proline в концентрации >1 ммоль/л является
источником ложно завьцленных результаты.
В очень редких случаях моноклональная гаммопатия может провести
к неправильным результатам. Никакого значимого влияния не
обнаружено до концентрации креатинина 1, 53 m m ol/L (20 мг/дл).
Levodopa ложно занижает результат.
Н икакого значимого влияния не обнаружено до концентрации
креатинина 3,05 m m ol/L (40 мг/дл).
Оценка показателя гломерулярной фильтрации (Estimation o f the Glomerular Filtration
Rate-GFR) на основе формулы Schwartz может провести к гипероценке. Для
диагностических целей, результаты должны всегда оцениваться в комплексе с
историей болезни, клиническим обследованием и другими данными пациента.
Дополнительная промывка
Неизвестно никаких влияний, требующих дополнительной промывки.
Измеряемый интервал
Сыворотка/плазма 5-2700 мкмоль/л (0,06-30,5 мг/дл)
Расширенный диапазон измерения (расчетный)
Фактор разведения 10 (рекомендуемый)
5-27000 мкмоль/л (0,06-305 мг/дл)
Нижний предел обнаружения 5 мкмоль/л (0,06 мг/дл)
Предел обнаружения представляет самый низкий измеренный уровень аналита,
который отличается от нуля. Вычисляется как величина, лежащая в трёх стандартных
отклонениях выше нулевого образца.
М оча
Фактор предразведения 20
0,1-40 ммоль/л (1,1-452 мг/дл)
Расширенный диапазон измерения (рассчётный)
Фактор разведения 5 (рекомендуемый)
0,1 -200 ммоль/л (1,1 -2262 мг/дл)
Нижний предел обнаружения 0,1 ммоль/л (1,1 мг/дл)
Предел обнаружения представляет самый низкий измеренный уровень аналита,
который отличается от нуля. Вычисляется как величина, лежащая в трёх стандартных
отклонениях выше нулевого образца.
--- стр. 98 ---
Информация о реагентах
Мочевина
Cobas с 111
Калибратор CFAS
Контроль норма PNU
Контроль патология PPU
4x100 тестов
12x3 мл
20x5 мл
20x5 мл
Номер по каталогу 04657616190
UREL: A C N 418
Номер по каталогу 10759350190
Код 401
Номер по каталогу 10171743122
Код 300
Номер по каталогу 10171778122
Код 301
Предписание для использования
Набор реагентов для количественного определения in vitro концентрации мочевины в
сыворотке и плазме на установках cobas с 111.
Теоретическое обоснование
Мочевина является основным конечным продуктом азотного обмена белков.
Синтезируется в печени в цикле мочевины из аммиака, который обеспечивает
дезаминирование аминокислот. Мочевина выделяется в большей степени почками, но
в небольших количествах также выводится с потом и разлагается в кишечнике под
действием бактерий.
Определение азота мочевины в крови является наиболее широко используемым
скрининговым тестом для оценки функции почек. При определении мочевины
совместно с креатинином сыворотки, возможно проведение дифференциальной
диагностике трех типов азотемии: преренальной, ренальной, и постренальной.
Повышение концентрации азота мочевины наблюдается при неадекватной почечной
перфузии, шоке, уменьшении объема крови (преренальные причины), хроническом
нефрите, нефросклерозе, тубулярном некрозе, гломерулярном нефрите (почечные
причины) и обструкции мочевыводящих путей (постренальные причины).
Транзиторное повышение мочевины может также наблюдаться при употреблении
высокого количества белка.
Непредсказуемые значения могут быть при заболеваниях печени.
Принцип метода
Кинетический тест с уреазой и глутаматдегидрогеназой (ГлДГ). Мочевина
гидролизуется уреазой с образованием аммиака и карбоната.
мочевина + 2 Н 2О Уреаза 2NH4^ + СОз^'
------------------>
Во второй реакции 2-оксиглутарат реагирует с аммиаком в присутствии
глутаматдегидрогеназы (ГлДГ) и коэнзима Н А Д Н с образованием L -глутамата. В этой
реакции два моля Н А Д Н окисляются до Н А Д на каждый моль гидролизируемой
мочевины.
N H4^ + 2-оксиглутарат+ Н А Д Н Г лД Г L-глутамат + Н А Д + Н2О2
Интенсивность уменьшения концентрации Н А Д Н прямо пропорциональна
концентрации мочевины и определяется степенью уменьшения оптической плотности
Реагенты
Готовы к использованию.
R TRIS буфер 220 ммоль/л, pH 8,6 ; 2-оксиглутарат 73 ммоль/л;
Н А Д Н 2,5 ммоль/л; А Д Ф 6,5 ммоль/л; уреаза >300 мккат/л; ГлДГ
>80 мккат/л, консерванты
Меры предосторожности и предупреждения
--- стр. 99 ---
Соблюдайте обычные меры предосторожности необходимые для работы со всеми
лабораторными реагентами. Утилизация использованных материалов должна
проводиться в соответствии с местными правилами ликвидации отходов.
Хранение и стабильность реагентов
Хранение при 2-8°С Смотрите срок годности на упаковке
В приборе при использовании холодильника 4 недели
анализатора
Сбор и подготовка образцов
Для сбора и подготовки используйте только подходящие пробирки. После
тестирования были признаны подходящими указанные ниже виды материала для
исследования.
Сыворотка.
Плазма. L i-гепариновая, КЗ-Э Д ТА плазма. Не используйте аммоний
гепарин.
Используя образцы проб в первичных пробирках, следуйте инструкциям изготовителя.
Центрифугируйте образцы до выполнения исследования.
Стабильность
Сыворотка/плазма 7 дней при 20-25°С
7 дней при 2-8°С
1 год при -20°С
Протокол измерения
Для оптимального проведения исследования следуйте указаниям данного документа.
Ознакомьтесь с инструкцией оператора для анализатора, указанного в инструкции.
Использование протокола измерения, не подтвержденного Roche, не гарантирует
корректного результата и должно определяться потребителем.
Протокол измерения для сыворотки и плазмы cobas с 111 system
Только для in vitro диагностики
Режим измерения
Режим расчёта
Направление реакции
Длины волн А/в
Точки измерения; первая/последняя
Единицы измерения
Последовательность дозирования
Параметры дозирования
R1
Образец
Общий объём
Калибровка
Калибратор
Адсорбция
Кинетика
Уменьшение
340/409 нм
10/13
ммоль/л
R-S
50 мкл
2 мкл
245 мкл
Дилюент (Н 2О)
95 мкл
98 мкл
CFAS
В качестве нулевого калибратора используйте
деионизированную воду
Линейная регрессия
Интервал калибровки Каждый лот, по данным контроля качества
Стандартизация; метод стандартизирован по SRM 909Ь.
Контроль качества
Режим калибровки
--- стр. 100 ---
Для контроля качества могут быть использованы как контрольные материалы,
указанные в разделе "Информация о реагентах", так и другие пригодные контрольные
материалы. Контрольные интервалы должны быть приемлемыми для каждой
лаборатории, а полученные величины должны находиться в определенных пределах.
Каждая лаборатория должна установить поправочные коэффициенты, если
лабораторные величины находятся за пределами интервалов.
Пересчёт
Анализатор cobas с 111 автоматически вычисляет концентрацию аналита в каждом
образце.
Факторы пересчёта ммоль/л х 6,006 = мг/дл
мг/дл X 0,167 = ммоль/л
мг/дл мочевины х 0,467 = мг/дл азота мочевины
ммоль/л мочевины = ммоль/л азота мочевины
мг/дл азота мочевины х 0,357 = ммоль/л мочевины
ммоль/л азота мочевины х 2,801 = мг/дл азота мочевины
Факторы, влияющие на результаты
Критерий: Восстановление в пределах ±10% от начального значения холестерина в
концентрации 8,3 ммоль/л (49,8 мг/дл мочевины, 23,2 мг/дл азота мочевины).
Иктеричность Не оказывает значимого влияния до значения 88 индекса I для
конъюгированного билирубина (приблизительное значение
конъюгированного билирубина 1504 мкмоль/л (88 мг/дл) и до
значения 68 для неконъюгированного билирубина (приблизительное
значение неконъюгированного билирубина 1163 мкмоль/л (68 мг/дл).
Гемолиз Не оказывает значимого влияния до значения индекса Н 1095
(приблизительная концентрация гемоглобина 680 мкмоль/л (1095
мг/дл).
Липемия Не оказывает значимого влияния до значения 2198 индекса L.
Имеется низкая корреляция между индексом L (характеризующим
мутность) и концентрацией триглицеридов.
Лекарственные Никакого влияния лекарственных препаратов не было обнаружено
препараты при использовании общей лекарственной панели.
Эндогенные ионы аммония могут вызывать ложное завышение
результатов.
Другое В редких случаях гаммапатий, конкретно при IgM типе
(Вальденстрёма, макрогробулинемия) результаты могут искажаться.
Для диагностических целей, результаты должны всегда оцениваться в комплексе с
историей болезни, клиническим обследованием и другими данными пациента.
Дополнительная промывка
Не известно никаких влияний, требующих дополнительной промывки.
Измеряемый интервал 0,5-40 ммоль/л (3,0-240 мг/дл мочевины, 1,40-112 мг/дл
азота мочевины)
Расширенный диапазон измерения (расчетный)
Фактор разведения 10 (рекомендуемый)
0,5-400 ммоль/л (3,0-2400 мг/дл мочевины, 1,40-1120 мг/дл азота
мочевины)
Нижний предел обнаружения 0,5 ммоль/л (3,0 мг/дл мочевины, 1,40 мг/дл азота
мочевины)
10
--- стр. 104 ---
Интенсивность формирования окрашенного комплекса прямо пропорциональна
концентрации общего белка и определяется степенью увеличения оптической
плотности.
Реагенты
Готовы к использованию. Установите трубу в R1 и SR перед использованием.
Поглощение атмосферного СО 2 реагентом, находящимся в открьггых бутылках,
снижает стабильность реагента. Следовательно, этот набор предполагает
использование кодированных цветных труб, которые уменьшают захват СО 2
реагентами. Трубы должны устанавливаться соответственно реагентам: белый для R1,
черный для SR. Трубы могут быть использованы повторно флаконов одного набора.
R1 Гидроксид натрия 400 ммоль/л; натрия калия татртат 89 ммоль/л;
pH 13,4.
SR Гидроксид натрия 400 ммоль/л; натрия калия татртат 89 ммоль/л;
йодистый калий 61 ммоль/л; сульфат меди 24,3 ммоль/л; pH 13,2.
Меры предосторожности и предупреждения
Т о л ь к о д л я i n v i t r o д и а г н о с т и к и
Соблюдайте обычные меры предосторожности необходимые для работы со всеми
лабораторными реагентами. Этот набор содержит компоненты классифицированны
согласно Европейской директиве 88/379/ЕЕС следующим образом.
X i-Irritant (разлит по флаконам 1 и 2, содержит гидроокись натрия) R36/38; S2, S26.
Раздражает глаза и кожу. Беречь от детей. При попадании в глаза немедленно промыть
большим количеством воды и обратиться к врачу.
Утилизация использованных материалов должна проводиться в соответствии с
местными правилами ликвидации отходов.
Хранение и стабильность реагентов
Хранение при 2-8°С Смотрите срок годности на упаковке
В приборе при использовании холодильника 4 недели
анализатора
Сбор и подготовка образцов
Для сбора и подготовки используйте только подходящие пробирки. После
тестирования были признаны подходящими указанные ниже виды материала для
исследования.
Сыворотка.
Плазма. L i-гепариновая или Кз-Э ДТА плазма.
Используя образцы проб в первичных пробирках, следуйте инструкциям изготовителя.
Отделите сыворотку или плазму в течение 4 часов от сгустка или клеток.
Концентрация общего белка у лежачих пациентов на 4-8 г/л более низкая, чем у
амбулаторных пациентов. Центрифугируйте образцы до вьшолнения исследования.
Стабильность
Сыворотка/плазма 3 дня при 2-8°С
6 месяцев при (-15) > (-25)®С
Протокол измерения
Для оптимального проведения исследования следуйте указаниям данного документа.
Ознакомьтесь с инструкцией оператора для анализатора, указанного в инструкции.
Использование протокола измерения, не подтвержденного Roche, не гарантирует
корректного результата и должно определяться потребителем.
Протокол измерения для сыворотки и плазмы cobas с 111 system
Режим измерения Адсорбция
Режим расчёта Конечная точка
14
--- стр. 105 ---
Направление реакции Возрастание
Длины волн А /В 552 нм
Точки измерения: первая/последняя 16/33
Единицы измерения г/л
Последовательность дозирования R 1-S-SR
Параметры дозирования
Сы ворт ка/т азма
90 мкл
Образец 2 мкл
SR 32 мкл
Общий объём 152 мкл
Калибровка
Калибратор CFAS
Дилюент (Н 2О)
28 мкл
Режим калибровки
Интервал калибровки
В качестве нулевого калибратора используйте
деионизированную воду
Линейная регрессия
Каждый лот, каждые 7 дней, по данным контроля качества
Стандартизация: метод стандартизован по отношению к SRM 927с.
Контроль качества
Сыворотка/плазма
Для контроля качества могут быть использованы как контрольные материалы,
указанные в разделе "Информация о реагентах", так и другие пригодные контрольные
материалы. Контрольные интервалы должны быть приемлемыми для каждой
лаборатории, а полученные величины должны находиться в определенных пределах.
Каждая лаборатория должна установить поправочные коэффициенты, если
лабораторные величины находятся за пределами интервалов.
Пересчёт
Анализатор cobas с 111 автоматически вычисляет концентрацию аналита в каждом
образце.
Фактор пересчёта; г/л х 0,1 = г/дл
Факторы, влияющие на результаты
Критерий: Восстановление в пределах ±10% от начального значения общего белка 65
г/л (6,5 г/дл) в сыворотке.
С ы воротка/плазма
Иктеричность
Г емолиз
Липемия
Лекарственные
препараты
Другое
Не оказывает значимого влияния до значения 67 индекса I для
конъюгированного билирубина и неконъюгированного билирубина
(приблизительное значение 1146 мкмоль/л (67 м г/д л ).
Не оказывает значимого влияния до значения индекса Н 1005
(приблизительная концентрация гемоглобина 624 мкмоль/л (1005
мг/дл).
Не оказывает значимого влияния до значения 2126 индекса L.
Имеется низкая корреляция между индексом L (характеризующим
мутность) и концентрацией триглицеридов.
Декстран в концентрации до 30 мг/мл не оказывает значимого
влияния.
Никакого влияния лекарственных препаратов не было обнаружено
при использовании общей лекарственной панели.
В редких случаях гаммапатий, конкретно при IgM типе
(Вальденстрёма, макрогробулинемия) результаты могут искажаться.
15
--- стр. 106 ---
Неизвестно никаких влияний, требующих дополнительной промывки.
Измеряемый интервал
Сыворотка/плазма 2,0-120 г/л (0,2-12 г/дл)
Расширенный диапазон измерения (расчетный)
Фактор разведения 5
2,0-600 г/л (0,2-60 мг/дл)
Нижний предел обнаружения 2,0 г/л (0,2 г/дл)
Предел обнаружения представляет самый низкий измеренный уровень аналита,
который отличается от нуля. Вычисляется как величина, лежащая в трёх стандартных
отклонениях выше нулевого образца.
Ожидаемые значения
В соответствии с Josephson
Взрослые 66-87 г/л (6,6-8,7 мг/дл)
Для ознакомления с ожидаемыми значениями для детей, пожалуйста, обратитесь к
брошюре В.Хейль, Р.Коберштейн, Б.Цавта «Референтные пределы у взрослых и детей.
Преаналитические предосторожности (Roche Diagnostics GmbH, 2004)».
В соответствии с Tietz
Дополнительная промывка
Пуповинная кровь
Недоношенные
Новорождённые
1 неделя
7 месяцев-1 год
1 -2 года
>3 лет
Взрослые (амбулаторные)
48-80 г/л (4,8"8,0 г/дл)
36-60 г/л (3,6-6,0 г/дл)
46-70 г/л (4,6-7,0 г/дл)
44-76 г/л (4,4-7,6 г/дл)
51-73 г/л (5,1-7,3 г/дл)
56-75 г/л (5,6 -7,5 г/дл)
60-80 г/л (6,0 -8,0 г/дл)
64-83 г/л (6,4 -8,3 г/дл)
Каждая лаборатория должна исследовать приемлемость ожидаемых значений для
популяции своего региона, и если необходимо определить свои значения. Результаты,
полученные в разных лабораториях, могут отличаться. В диагностических целях
значения, полученные при тестировании, всегда должны оцениваться с учётом
истории болезни пациента, клиническими обследованиями и другими анализами.
Точность
Воспроизводимость определялась, используя пробы людей и контроли по
внутреннему протоколу (внутри серии п = 21; всего п = 30). Были получены
следующие результаты:
Сыворот ка/т азма
Внутри серии Среднее т/л (г/дл) SD т/л (г/дл) C V %
Precinorm U 63,4 (6,34) 0,698 (0,0698) 1,10
Precipath U 47,0(4,70) 0,708 (0,0787) 1,51
Сыворотка 1 26,3 (2,63) 0,353 (0,0353) 1,34
Сыворотка 2 60,3 (6,03) 0,756 (0,0756) 1,25
Сыворотка 3 80,0 (8,03) 0,493 (0,0493) 0,61
Всего Среднее г/л (г/дл) SD т/л (г/дл) C V %
Precinorm U 62,5 (6,25) 1,333 (0,1333) 2,13
Precipath U 46,3 (4,63) 0,828 (0,0828) 1,79
Сыворотка 4 22,4 (2,24) 0, 692 (0,0692) 3,09
Сыворотка 5 62,8 (6,28) 1,545 (0,1545) 2,46
Сыворотка 6 83,4 (8,34) 1,405 (0,1405) 1,68
16
--- стр. 108 ---
Кобас с системы
Информация о реагентах
Альбумин вер.2
cobas с 111
Калибратор CFAS
Контроль норма PNU
Контроль патология PPU
Клинер
А л ь б у м и н в е р .2 (ALB2)
cobas с systems
cobas с 1 1 1
4x100 тестов
12x3 мл
20x5 мл
20x5 мл
Номер по каталогу 04657357190
ALB2: A C N 413
Номер по каталогу 10759350190
Код 401
Номер по каталогу 10171743122
Код 300
Номер по каталогу 10171778122
Код 301
Номер по каталогу 04774248190
Код 947
Предписание для использования
Набор реагентов для количественного определения in vitro концентрации альбумина в
сыворотке и плазме на установках cobas с 111.
Теоретическое обоснование
Альбумин является безуглеводным белком, который составляет 55-65% общего белка
плазмы. Он поддерживает онкотическое давление плазмы, также участвует в
транспорте и хранении широкого ряда лигандов, кроме того, является источником
эндогенных аминокислот. Альбумин связывается и растворяет различные соединения,
например, билирубин, кальций и длинно-цепочечные жирные кислоты. Кроме того,
альбумин способен связывать токсические ионы тяжелых металлов и многочисленных
фармацевтических препаратов, что является причиной более низкой концентрация
альбумина в крови и значимо влияет на фармакокинетику.
Гиперальбуминемия не имеет большого диагностического значения за исключением
случаев обезвоживания. Гипоальбумиемия возникает при многих болезнях и может
быть вызвана несколькими причинами: компромисный синтез при заболеваниях
печени или в результате сокращения поступления белка; при усиленном катаболизме
из-за повреждения тканей (тяжелые ожоги или воспаление); мальабсорбция
аминокислот (болезнь Крона); протеинурия при нефротическом синдроме; потеря
белка при неопластических процессах. При тяжелых случаях гипоальбуминемии
максимальная концентрация альбумина плазмы может составлять 2,5 г/дл (380
мкмоль/л). Из-за низкого осмотического давления плазмы, вода проникает через
кровяные капилляры в ткань с образованием отёка. Определение альбумина проводят
для мониторинга и контроля за терапией пациентов, находящихся на диете, и также
как отличный тест для оценки функции печени.
Принцип метода
Колориметрический метод.
При pH 4,1, альбумин обладает достаточной катионной способностью связывания с
бромкрезоловым зеленым (БКЗ), анионным красителем с образованием сине-зеленого
комплекса.
Альбумин + БКЗ p H 4,1 альбумин-БКЗ комплекс
------------------->
Интенсивность формирования сине-зелёного окрашенного комплекса прямо
пропорциональна концентрации альбумина и определяется степенью увеличения
оптической плотности.
18
--- стр. 109 ---
Концентрация
R I R2 тест
95 95 75
0,66 0,087
4,1 4,1 4,1
Реагенты
Готовы к использованию.
R1 Буфер, консерванты (жидкость)
R2 =SR Субстрат, консерванты (жидкость)
Компонент
Цитрат (ммоль/л)
Бромкрезоловый зелёный (ммоль/л)
PH
Реагенты содержат нереактивные сурфактанты и стабилизаторы.
Меры предосторожности и предупреждения
Только для in vitro диагностики
Соблюдайте обычные меры предосторожности необходимые для работы со всеми
лабораторными реагентами. Утилизация использованных материалов должна
проводиться в соответствии с местными правилами ликвидации отходов.
Хранение и стабильность реагентов
Хранение при 2-8‘^С Смотрите срок годности на упаковке
В приборе при использовании холодильника 4 недели
анализатора
Сбор и подготовка образцов
Для сбора и подготовки используйте только подходящие пробирки. После
тестирования были признаны подходящими указанные ниже виды материала для
исследования.
Сыворотка.
Плазма. Гепарин (Li-, Na-, NH4+-) или Э ДТА (К2-, КЗ-) плазма.
Используя образцы проб в первичных пробирках, следуйте инструкциям изготовителя.
Отделите сыворотку или плазму от сгустка или клеток в пределах 1 часа и проведите
исследование немедленно. Центрифугируйте образцы до выполнения исследования.
Стабильность
Сыворотка/плазма 2,5 месяца при 15-25”С
5 месяцев при 2-8“С
4 месяца при (-15) - (-25)°С
Протокол измерения
Для оптимального проведения исследования следуйте указаниям данного документа.
Ознакомьтесь с инструкцией оператора для анализатора, указанного в инструкции.
Использование протокола измерения, не подтвержденного Roche, не гарантирует
корректного результата и должно определяться потребителем.
Протокол измерения для сыворотки и плазмы cobas с 111 system
Режим измерения
Режим расчёта
Направление реакции
Длины волн А /В
Точки измерения: первая/последняя
Единицы измерения
Последовательность дозирования
Параметры дозирования
Сывортка/плазма
R1
Образец
Адсорбция
Конечная точка
Возрастание
583/512 нм
16/18
г/л
R1-S-SR
100 мкл
2 мкл
Дилюент (Н 2О)
20 мкл
19
--- стр. 110 ---
20м кл Ю м кл
Общий объём 152 мкл
Калибровка
Калибратор CFAS
В качестве нулевого калибратора используйте
деионизированную воду
Режим калибровки Линейная регрессия
Интервал калибровки Каждый лот и по данным контроля качества
Стандартизация: метод стандартизован по отношению к IR M M (Institute for Reference
Materials and Measurements) BCR470/CRM470 (RPPHS - Reference Preparation
For Proteins in Human Serum).
Контроль качества
Сыворотка/плазма
Для контроля качества могут бьггь использованы как контрольные материалы,
указанные в разделе "Информация о реагентах", так и другие пригодные контрольные
материалы. Контрольные интервалы должны быть приемлемыми для каждой
лаборатории, а полученные величины должны находиться в определенных пределах.
Каждая лаборатория должна установить поправочные коэффициенты, если
лабораторные величины находятся за пределами интервалов.
Пересчёт
Анализатор cobas с 111 автоматически вычисляет концентрацию аналита в каждом
образце.
Фактор пересчёта: г/л х 0,1 = г/дл
г/дл X 10 = г/л
г/л X 15,2 ” мкмоль/л
Факторы, влияющие на результаты
Критерий: Восстановление в пределах ±10% от начального значения альбумина 35 г/л
(532 мкмоль/л) в сыворотке.
Сыворотка/плазма
Иктеричность Не оказывает значимого влияния до значения 60 индекса I для
конъюгированного билирубина и неконъюгированного билирубина
(приблизительное значение 1026 мкмоль/л (60 м г/д л ).
Гемолиз Не оказывает значимого влияния до значения 420 индекса И
(приблизительная концентрация гемоглобина 261 мкмоль/л (420
мг/дл).
Липемия Не оказывает значимого влияния до значения 900 индекса L.
Имеется низкая корреляция между индексом L (характеризующим
мутность) и концентрацией триглицеридов,
у-глобулин Не оказывает значимого влияния.
Лекарственные Никакого влияния лекарственных препаратов не было обнаружено
препараты при использовании общей лекарственной панели.
Другое В редких случаях гаммапатий, конкретно при IgM типе
(Вальденстрёма, макрогробулинемия) результаты могут искажаться.
Дополнительная промывка
Дополнительный цикл промывки (EW C), рекомендуется после SR для
предотвращения эффекта переноса во всех тестах.
Utilities / Configuration / Extra Wash Setting:
Active On
Action After
2 0
--- стр. 113 ---
О б щ и й б и л и р у б и н с п е ц и а л ь н ы й (BILTS)
Кобас с системы
Инф ормация о реагентах
Общий билирубин спец.
Cobas с 111
Калибратор CFAS
cobas с systems
cobas с 1 1 1
Контроль норма PNU
Контроль патология PPU
4x100 тестов
12x3 мл
20x5 мл
20x5 мл
Номер по каталогу 04774256190
Код A C N 018
Номер по каталогу 10759350190
Код 401
Номер по каталогу 10171743122
Код 300
Номер по каталогу 10171778122
Код 301
Предписание для использования
Набор реагентов для количественного определения in vitro концентрации общего
билирубина в сыворотке и плазме на установках cobas с 111.
Теоретическое обоснование
Билирубин образуется в ретикулоэпдотелиальной системе при распаде старых
эритроцитов. Часть гема из гемоглобина и из других гем-содержащих белков
высвобождается, метаболизируется в билирубин и перемещается в комплексе с
сывороточным альбумином в печень. В печени билирубин конъюгируется с
глюкуроновой кислотой для растворения, транспортируется через желчевыводящие
пути и выводится через пищеварительный тракт.
При заболеваниях или таких состояния как гемолитические процессы, билирубин
продуцируется быстрее, чем печень может его метаболизировать, что вызывает
возрастание содержания неконьюгированного (непрямого) билирубина в плазме.
Заболевания печени, при которых механизм конъюгации билирубина нарушен, что так
же приводит к повышению неконьюгированного билирубина в циркуляции.
Нарушение оттока желчи или повреждение гепатоцита приводит к увеличению
концентрации как конъюгированного (прямого), так и неконьюгированного
(непрямого) билирубина в кровотоке. Билирубин образуется в
ретикулоэндотелиальной системе при распаде старых эритроцитов. Часть гема из
гемоглобина и из других гем-содержащих белков высвобождается, метаболизируется в
билирубин и перемещается в комплексе с сывороточным альбумином в печень. В
печени билирубин конъюгируется с глюкуроновой кислотой для растворения,
транспортируется через желчевыводящие пути и выводится через пищеварительный
тракт.
При заболеваниях или таких состояния как гемолитические процессы, билирубин
продуцируется быстрее, чем печень может его метаболизировать, что вызывает
возрастание содержания неконьюгированного (непрямого) билирубина в плазме.
Заболевания печени, при которых механизм конъюгации билирубина нарушен, что так
же приводит к повышению неконьюгированного билирубина в циркуляции.
Нарушение оттока желчи или повреждение гепатоцита приводит к увеличению
концентрации как конъюгированного (прямого), так и неконъюгированного
(непрямого) билирубина в кровотоке.
Принцип метода
Диазо метод (специальный).
Общий билирубин в присутствии подходящего растворителя связывается с диазоний
ионами в крепком кислотном растворе (pH 1-2).
23
--- стр. 114 ---
Билирубин + диазо кислота азобилирубин
->
Интенсивность формирования окрашенного комплекса азобилирубина прямо
пропорциональна концентрации общего билирубина и может бьггь измерена
фотометрически.
Реагенты
Готовы к использованию. Неточное дозирование реагента, ведущего к потенциально
ошибочным результатам, может быть вызвано чрезмерным взбалтыванием этого
реагента. Убедитесь, что пена удалена с поверхности до установки реагента в
анализатор. Любое обесцвечивание или образование частиц в реагентах, не влияют на
работу реагента.
R1 Сульфаниловая кислота 110 ммоль/л; буфер: ацетат натрия 85
ммоль/л;сурфактант; растворитель
R2 =SR Диазоний 3 ммоль/л; НС1 100 ммоль/л
Меры предосторожности и нредупреиедения
Только для in vitro диагностики
Соблюдайте обычные меры предосторожности необходимые для работы со всеми
лабораторными реагентами. Утилизация использованных материалов должна
проводиться в соответствии с местными правилами ликвидации отходов.
Хранение и стабильность реагентов
Хранение при 2-8‘^С Смотрите срок годности на упаковке
В приборе при использовании холодильника 4 недели
анализатора
Сбор и подготовка образцов
Для сбора и подготовки используйте только подходящие пробирки. После
тестирования были признаны подходящими указанные ниже виды материала для
исследования. Не используйте пуповинную кровь.
Сыворотка.
Плазма. L i-гепарин или ЭДТА (К2-, КЗ-) плазма.
Используя образцы проб в первичных пробирках, следуйте инструкциям изготовителя.
Необходимо защитить образцы от воздействия света и исследовать немедленно..
Протокол измерения
Для оптимального проведения исследования следуйте указаниям данного документа.
Ознакомьтесь с инструкцией оператора для анализатора, указанного в инструкции.
Использование протокола измерения, не подтвержденного Roche, не гарантирует
корректного результата и должно определяться потребителем.
Протокол измерения для сыворотки и плазмы cobas с 111 system
Режим измерения
Режим расчёта
Направление реакции
Длины волн А /В
Точки измерения: первая/последняя
Единицы измерения
Последовательность дозирования
Параметры дозирования
Сыворотка/плазма
R1
Образец
SR
Адсорбция
Конечная точка
Возрастание
552/629 нм
16/26
мкмоль/л
R1-S-SR
120 мкл
4 мкл
32 мкл
Дилюент (Н 2О)
5 мкл
10 мкл
24
--- стр. 115 ---
Общий объём
Калибровка
Калибратор
161 мкл
Режим калибровки
Интервал калибровки
CFAS
В качестве нулевого калибратора используйте
деионизированную воду
Линейная регрессия
2“Точечная
-после 7 дней на борту
-после замены лота
-по данным контроля качества
Стандартизация: метод стандартизован по отношению к методу Doumas.
Контроль качества
Сыворотка/плазма
Для контроля качества м огуг быть использованы как контрольные материалы,
указанные в разделе "Информация о реагентах", так и другие пригодные контрольные
материалы. Контрольные интервалы должны бьггь приемлемыми для каждой
лаборатории, а полученные величины должны находиться в определенных пределах.
Каждая лаборатория должна установить поправочные коэффициенты, если
лабораторные величины находятся за пределами интервалов.
Пересчёт
Анализатор cobas с 111 автоматически вычисляет концентрацию аналита в каждом
образце.
Факторы пересчёта: мкмоль/л х 0,0585 = мг/дл
мг/дл X 10 = мг/л
мг/дл X 17,1 = мкмоль/л
Факторы, влияющие на результаты
Критерий: Восстановление в пределах ±10% от начального значения общего
билирубина 17 мкмоль/л (1,0 мг/дл) в сыворотке.
С ы ворот ка/т азма
Гемолиз Не оказывает значимого влияния до значения 1000 индекса Н
(приблизительная концентрация гемоглобина 621 мкмоль/л (1000
мг/дл).
Липемия Не оказывает значимого влияния до значения 1400 индекса L.
Имеется низкая корреляция между индексом L (характеризующим
мутность) и концентрацией триглицеридов.
Антикоагулянты Использование пробирок с гепарином может проводить повышение
результатов. Проверьте все результаты, полученные у
новорождённых в гепаринизированной плазме, на их соответствие
терапевтическому дипазону.
Лекарственные Никакого влияния лекарственных препаратов не бьшо обнаружено
препараты при использовании общей лекарственной панели.
Индикан Не оказывает значимого влияния до значения 10 мг/дл (100 мг/л).
25
--- стр. 118 ---
cobas с systems
cobas с 1 1 1
Номер по каталогу 04719018190
4х 50 тестов Код BIL-D : AC N 294
12x3 мл Номер по каталогу 10759350190
Код 401
20x5 мл Номер по каталогу 10171743122
Код 300
20x5 мл Номер по каталогу 10171778122
Код 301
Кобас с системы
Информация о реагентах
Прямой билирубин
cobas с 111
Калибратор CFAS
Контроль норма PNU
Контроль патология PPU
П р я м о й б и л и р у б и н (BIL-D)
Предписание для использования
Набор реагентов для количественного определения in vitro концентрации прямого
(конъюгированного) билирубина в сыворотке и плазме на установках cobas с 111.
Теоретическое обоснование
Билирубин образуется в ретикулоэндотелиальной системе при распаде старых
эритроцитов. Часть гема из гемоглобина и из других гем-содержащих белков
высвобождается, метаболизируется в билирубин и перемещается в комплексе с
сывороточным альбумином в печень. В печени билирубин конъюгируется с
глюкуроновой кислотой для растворения, транспортируется через желчевыводящие
пути и выводится через пищеварительный тракт.
При заболеваниях или таких состояния как гемолитические процессы, билирубин
продуцируется быстрее, чем печень может его метаболизировать, что вызывает
возрастание содержания неконъюгированного (непрямого) билирубина в плазме.
Заболевания печени, при которых механизм конъюгации билирубина нарушен, что так
же приводит к повышению неконъюгированного билирубина в циркуляции.
Нарушение оттока желчи или повреждение гепатоцита приводит к увеличению
концентрации как конъюгированного (прямого), так и неконъюгированного
(непрямого) билирубина в кровотоке.
Принцип метода
Диазо метод.
Конъюгированный билирубин и 6 -билирубин (прямой билирубин), реагирует с
диазонированной сульфаниловой кислотой в кислом буфере с формированием
красного азобилирубина.
->
->
диазонированная сульфаниловая кислота
азобилирубин
сульфаниловая кислота + NaN 0 2 -
билирубин + диазонированная -
сульфаниловая кислота
Интенсивность формирования окрашенного комплекса прямо пропорциональна концентрации
прямого билирубина и может быть измерена фотометрически при 552 нм.
Реагенты
Готовы к использованию.
R1 Сульфаниловая кислота 35 ммоль/л; H E D TA 4,0 ммоль/л;
щавелевая кислота 40 ммоль/л, pH 1,2
R2 Нитрит натрия 3,9 ммоль/л; pH 6,0
28
--- стр. 119 ---
Меры предосторожности и предупреждения
Только для in vitro диагностики
Соблюдайте обычные меры предосторожности необходимые для работы со всеми
лабораторными реагентами. Утилизация использованных материалов должна
проводиться в соответствии с местными правилами ликвидации отходов.
Хранение и стабильность реагентов
Хранение при 2-8°С Смотрите срок годности на упаковке
В приборе при использовании холодильника 4 недели
анализатора
Сбор и подготовка образцов
Для сбора и подготовки используйте только подходящие пробирки. После
тестирования были признаны подходящими указанные ниже виды материала для
исследования. Не используйте пуповинную кровь.
Сыворотка. Без гемолиза и липемии, является материалом выбора.
Плазма. L i-гепариновая плазма (без гемолиза и липемии).
Не используйте другие антикоагулянты.
Используя образцы проб в первичных пробирках, следуйте инструкциям изготовителя.
Необходимо защитить образцы от воздействия света и исследовать немедленно.
Стабильность *
Сыворотка/плазма 2 дня при 20-25°С
7 дней при 4-8°С
6 месяцев при -20°С
*- Если образцы не подвергались воздействию света
Протокол измерения
Для оптимального проведения исследования следуйте указаниям данного документа.
Ознакомьтесь с инструкцией оператора для анализатора, указанного в инструкции.
Использование протокола измерения, не подтвержденного Roche, не гарантирует
корректного результата и должно определяться потребителем.
Протокол измерения для сыворотки и плазмы cobas с 111 system
Режим измерения
Режим расчёта
Направление реакции
Длины волн А /В
Точки измерения: первая/последняя
Единицы измерения
Последовательность дозирования
Параметры дозирования
Сыворотка/плазма
R1
Образец
SR
Общий объём
Калибровка
Калибратор
Адсорбция
Конечная точка
Возрастание
552/629 нм
7/11
мкмоль/л
R1-R2-S
54 мкл
18 мкл
9 мкл
140 мкл
Дилюент (Н 2О)
24 мкл
24 мкл
11 мкл
Режим калибровки
Интервал калибровки
CFAS
В качестве нулевого калибратора используйте
деионизированную воду
Линейная регрессия
Кадый лот или по данным контроля качества
29
--- стр. 120 ---
Стандартизация: метод стандартизован по отношению к ручному методу Jendrassic
Grof, в С Ш А по методу Doumas.
Контроль качества
Сыворотка/плазма
Для контроля качества могут быть использованы как контрольные материалы,
указанные в разделе "Информация о реагентах", так и другие пригодные контрольные
материалы. Контрольные интервалы должны быть приемлемыми для каждой
лаборатории, а полученные величины должны находиться в определенных пределах.
Каждая лаборатория должна установить поправочные коэффициенты, если
лабораторные величины находятся за пределами интервалов.
Пересчёт
Анализатор cobas с 111 автоматически вычисляет концентрацию аналита в каждом
образце.
Фактор пересчёта: мкмоль/л х 0,0585 = мг/дл
Факторы, влияющие на результаты
Критерий: Восстановление в пределах ±10% от начального значения прямого
билирубина 5,1 мкмоль/л (0,3 мг/дл) в сыворотке.
Сыворотка/плазма
Гемолиз Не оказывает значимого влияния до значения 9 индекса Н
(приблизительная концентрация гемоглобина 5,6 мкмоль/л (9 мг/дл).
Липемия Не оказывает значимого влияния до значения 270 индекса L.
Имеется низкая корреляция между индексом L (характеризующим
мутность) и концентрацией триглицеридов.
Другое В редких случаях гаммапатий, конкретно при IgM типе
(Вальденстрёма, макрогробулинемия) результаты могут искажаться.
Измеряемый интервал
Сыворотка/плазма 1,7-430 мкмоль/л (0,1-25,2 мг/дл)
При необходимости разведение производится через функцию Rerun в соотношении
1:2 и результат вычисляется автоматически, используя фактор 2.
Нижний предел обнаружения 1,7 мкмоль/л (0,1 мг/дл)
Предел обнаружения представляет самый низкий измеренный уровень аналита,
который отличается от нуля. Вычисляется как величина, лежащая в трёх стандартных
отклонениях вьппе нулевого образца.
Ожидаемые значения сыворотка
Недоношенные дети: 1-5 дней <10 мкмоль/л (<0,6 мг/дл)
Дети > 1 месяца и взрослые 0-3,4 мкмоль/л (0-0,2 мг/дл)
Верхний предел в 10 мкмоль/л (0,6 мг/дл) приводится литературными данными, хотя
не подтверждён внутренними данными. Каждая лаборатория должна исследовать
приемлемость ожидаемых значений для популяции своего региона, и если
необходимо определить свои значения. Результаты, полученные в разных
лабораториях, могут отличаться. В диагностических целях значения, полученные при
тестировании, всегда должны оцениваться с учётом истории болезни пациента,
клиническими обследованиями и другими анализами.
Т очность
Воспроизводимость определялась, используя пробы людей и контроли по
внутреннему протоколу (внутри серии п = 21; всего п = 30). Были получены
следующие результаты:
Сыворотка/плазма
Внутри серии Среднее мкмоль/л (мг/дл) SD мкмоль/л (мг/дл) C V %
30