Набор реагентов для иммуноферментного определения концентрации VEGF (фактор роста эндотелия сосудов) в сыворотке крови (VEGF-ИФА-БЕСТ) по ТУ 9398-518-23548172-2016 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 --- «УТВЕРЖДАЮ» Г енеральный директор АО «Вектор-Бест» М.Д. Хусаинов ИНСТРУКЦИЯ по применению набора реагентов для иммуноферментного определения концентрации VEGF (фактор роста эндотелия сосудов) в сыворотке крови (VEGF-ИФА-БЕСТ) 1. НАЗНАЧЕНИЕ 1Л. Набор реагентов для иммуноферментного определения концентрации VEGF (фактор роста эндотелия сосудов) в сыворотке крови «VEGF-ИФА-БЕСТ» (далее по тексту - набор) предназначен для определения концентрации VEGF в сыворотке крови человека методом твер дофазного иммуноферментного анализа. 1.2. VEGF (Vascular endothelial growth factor) - фактор роста эндотелия сосудов, представ ляет собой группу димеризованных гликопротеидов молекулярной массы 34-42 кДа. VEGF явля ется ведущим фактором ангиогенеза и блокирует апоптоз эндотелиальных клеток кровеносных сосудов, индуцирует протеиназы, ремоделирующие межклеточное вещество, усиливает прони цаемость сосудов и вазодилатацию, ингибирует антиген-презентирующие дендритные клетки. 1.3. Количественное определение содержания VEGF в сыворотке крови может быть использовано для диагностики и мониторинга терапии ряда заболеваний, в том числе таких заболеваний как рак молочной железы и политравма 1.4. Набор рассчитан на проведение анализа в дублях 41 неизвестного, 6 калибровочных образцов, 1 контрольного образца, всего 96 определений при использовании всех стрипов план шета. 2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА 2.1. Принцип метода Метод определения основан на трехстадийном «сэндвич»- варианте твердофазного имму ноферментного анализа с применением моно- и поликлональных антител к VEGF человека. На первой стадии анализа исследуемые и контрольные образцы инкубируют в лунках с им- Инструкция составлена сотрудниками АО «Вектор-Бест»: Директором НИИ СД М.Ю. Рукавишниковым, нач. лаборатории стабилизации НА. Вараксиным. --- стр. 2 --- г мобилизованными моноклональными антителами. Имеющийся в образцах VEGF связывается с иммобилизованными антителами. Связавшийся VEGF на второй стадии взаимодействует при ин кубации с конъюгатом № 1 (поликлональные антитела к VEGF человека с биотином). На третьей стадии связавшийся конъюгат № 1 взаимодействует при инкубации с конъюгатом № 2 (стрептави- дин с пероксидазой хрена). Количество связавшегося конъюгата № 2 определяют цветной реакцией с использованием субстрата пероксидазы хрена - перекиси водорода и хромогена - тетраметилбензидина. Интенсивность желтого окрашивания пропорциональна концентрации содержащегося в образце VEGF. 2.2. Состав набора В состав набора входят: - планшет разборный (12 восьмилуночных стрипов) с иммобилизованными на внутренней поверхности моноклональными антителами к VEGF, готовый для использования - 1 шт.; - калибровочные образцы, содержащие известные количества VEGF - 0; 51,2; 128; 320; 800 и 2000 мЕ/мл, аттестованные относительно WHO Reference Reagent VASCULAR ENDOTHELI AL GROWTH FACTOR 165 NIBSC code 02/286; концентрации VEGF в калибровочных образцах могут несколько отличаться от указанных величин, точные величины указаны на этикетках фла конов, лиофилизированные - 6 флаконов; - контрольный образец на основе инактивированной сыворотки крови человека с извест ным содержанием VEGF, аттестованный относительно WHO Reference Reagent VASCULAR ENDOTHELIAL GROWTH FACTOR 165 NIBSC code 02/286; лиофилизированный - 1 флакон; - конъюгат № I (биотинилированные поликлональные антитела к VEGF), готовый для ис пользования - 1 флакон (13 мл); - конъюгат № 2 (стрептавидин-пероксидаза хрена), готовый для использования - 1 флакон (13 мл); - раствор для восстановления калибровочных и контрольного образцов (РВО) - 1 флакон (7,0 мл); - раствор для разведения образцов (РРО) - 1 флакон (13 мл); - концентрат фосфатно-солевого буферного раствора с твином (ФСБ-Тх25) - 2 флакона (по 28 мл); - раствор тетраметилбензидина плюс (раствор ТМБ плюс), готовый для использования - 1 флакон (13 1йл); - стоп-реагент, готовый для использования - 1 флакон (12 мл). Принадлежности: - пленка для заклеивания планщета - 3 щт.; - трафарет для построения калибровочного графика - 1 шт.; - ванночка для реагента - 4 шт.; - наконечники для дозатора на 2-200 мкл - 32 шт. --- стр. 3 --- 3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ 3.1. Специфичность. Не обнаружено перекрестной реакции моноклональных антител к ИЛ- 4, ИЛ-6, ИЛ-8, ИЛ-2, ИЛ-18, ИНФ-гамма, ИЛ-10, ФНО-альфа, ИНФ-альфа, ИЛ-1бета. 3.2. * Воспроизводимость. Коэффициент вариации результатов определения концентрации VEGF в лунках, содержащих контрольный образец, не превышает 8%. 3.3. * Линейность. Данный аналитический параметр проверяется тестом на «линейность» - отклонение от расчётной величины концентрации VEGF при разведении калибровочных образ цов, содержащих 2000; 800; 320 и 128 мЕ/мл VEGF, в 2,5 раза. Процент «линейности» составляет 90-110%. 3.4. * Точность. Данный аналитический параметр проверяется тестом на «открытие» - со ответствие измеренной концентрации VEGF предписанной в образце, полученной путём смеши вания равных объёмов контрольного образца и калибровочного образца 128 мЕ/мл. Процент «от крытия» составляет 90-110%. 3.5. * Чувствительность. Минимально определяемая концентрация VEGF, рассчитанная на основании среднего арифметического значения из десяти измерений оптической плотности ка либровочного образца Во плюс 2о (а - среднее квадратичное отклонение от среднего арифмети ческого значения), не превышает 10 мЕ/мл. 3.6. Клиническая проверка. Концентрация VEGF, измеренная в сыворотке крови, взятой с 9 до 11 ч у 375 условно здоровых мужчин и женщин в возрасте 20-50 лет, не превьппала 691 мЕ/мл. 3.7. Рекомендуется в каждой лаборатории при использовании набора уточнить значения концентрации VEGF, соответствующие нормальным у обследуемого контингента людей. *по ГОСТ Р 51352-2013. 4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ 4.1. Потенциальный риск применения набора - класс 26 (приказ М3 РФ от 06.06.2012 № 4н). 4.2. Все компоненты набора являются нетоксичными. Стоп-реагент обладает раздражаю щим действием. Избегать разбрызгивания и попадания на кожу и слизистые. В случае попадания стоп-реагента на кожу и слизистые необходимо промыть поражённый участок большим количе ством проточной воды. 4.3. При работе с исследуемыми образцами следует соблюдать меры предосторожности, принятые при работе с потенциально инфекционным материалом. Основные правила работы из ложены в «Инструкции по мерам профилактики распространения инфекционных заболеваний при работе в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений», утвержденной Минздравом СССР 17 января 1991 г. и в методических указаниях МУ 287-113 «Методические указания по дезинфекции, предстерилизационной очистке и стерилизации изде лий медицинского назначения», утв. департаментом госсанэпиднадзора Минздрава РФ от 30.12.1998. 4.4. При работе с набором следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые пер чатки, так как образцы сыворотки крови человека следует рассматривать как потенциально ин- 3 --- стр. 4 --- L фицированные, способные длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вируеы гепатита или возбудителей других инфекций. 4.5. Химическая посуда и оборудование, которые используются в работе с набором, долж ны быть соответствующим образом промаркированы и храниться отдельно. 4.6. Запрещается приём пищи, использование косметических средств и курение в помеще ниях, предназначенных для работы е наборами. 4.7. Для дезинфекции посуды и материалов, контактировавших с исследуемыми и кон трольными образцами, рекомендуем использовать дезинфицирующие средства, не оказывающие негативного воздействия на качество ИФА, не еодержащие активный кислород и хлор, например, комбинированные средства на основе ЧАС, спиртов, третичных аминов. Использование дезин фицирующих средетв, содержащих активный кислород и хлор (Н 2О2, деохлор, хлорамин), при водит к серьезному искажению результатов. 4.8. При использовании набора образуются отходы классов А, Б и Г, которые класеифици- руются и уничтожаются (утилизируются) в соответствии с СанПиН 2.1.7.2790-10 «Санитарно- эпидемиологические требования к обращению с медицинскими отходами» и МУ 287-113 «Мето дические указания по дезинфекции, предстерилизационной очистке и стерилизации изделий ме дицинского назначения». 5. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ, НЕОБХОДИМЫЕ ПРИ РАБОТЕ С НАБОРОМ - Спектрофотометр вертикального сканирования, позволяющий проводить измерения оп тической плотности растворов в лунках планшета в двухволновом режиме: при основной длине волны 450 нм и длине волны сравнения в диапазоне 620 нм - 655 нм; допускаетея измерение при длине волны 450 нм; - шейкер термостатируемый орбитального типа, позволяющий производить встряхивание при температуре от 18 до 25 °С и 600-800 об/мин; - промывочное устройство для планшетов; - таймер; - холодильник бытовой; - дозаторы полуавтоматические одноканальные с переменньпи или фиксированным объё мом со сменными наконечниками, позволяющие отбирать объёмы жидкости от 5 до 5000 мкл; - дозатор полуавтоматический многоканальный со сменными наконечниками, позволяю щий отбирать объёмы жидкостей от 5 до 350 мкл; - цилиндр мерный вместимостью 1000 мл; - вода дистиллированная; - перчатки медицинские диагностические одноразовые; - бумага фильтровальная лабораторная; - дезинфицирующий раствор. 6. АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ 6.1. Для проведения анализа использовать сыворотку крови. 6.2. Для проведения анализа не следует использовать гемолизованную, мутную сыворотку 4 --- стр. 8 --- 8.13. Измерить величину оптической плотности растворов в лунках стрипов на спектрофо тометре вертикального сканирования в двухволновом режиме; при основной длине волны 450 нм и длине волны сравнения в диапазоне 620 нм - 655 нм; допускается измерение при длине волны 450 нм. Время между остановкой реакции и измерением оптической плотности не должно превы шать 10 мин. 9. УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ 9.1. Вычислить среднее арифметическое значение оптической плотности для каждой пары лунок, содержащих калибровочные, контрольный и анализируемые образцы. 9.2. Построить в линейных координатах калибровочный график зависимости среднего арифметического значения оптической плотности (ед. опт. плотн.) от концентрации VEGF в ка либровочных образцах (мЕ/мл). 9.3. Определить концентрацию VEGF в контрольном образце и анализируемых образцах по калибровочному графику. 9.4. Если концентрация VEGF в анализируемых образцах превышает 2000 мЕ/мл, образец следует дополнительно развести раствором для разведения образцов в 20 раз (20 мкл исследуе мого образца + 380 мкл раствора для разведения образцов), повторить анализ и полученный ре зультат умножить на 20. 9.5. Результаты анализа исследуемых образцов учитывать, если вычисленное по калибровочно му графику значение концентрации VEGF в контрольном образце соответствует указанному диа пазону концентраций на этикетке флакона. При динамическом наблюдении пациента для получения результатов, адекватно отражаю щих изменение концентрации VEGF в сыворотке крови, необходимо использовать наборы реа гентов одного наименования (одного предприятия-изготовителя). 10. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ, ХРАНЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЯ НАБОРА 10.1. Транспортировать изделия следует транспортом всех видов в крытых транспортных средствах в соответствии с правилами перевозок, действующими на транспорте данного вида, при температуре от 2 до 8 °С. Допускается транспортирование при температуре до 25 °С не бо лее 10 суток. 10.2. Хранение набора в упаковке предприятия-изготовителя должно осуществляться при температуре от 2 до 8 °С в течение всего срока годности в холодильных камерах или холодиль никах, обеспечивающих регламентированный температурный режим с ежедневной регистрацией температуры. 10.3. Срок годности набора - 18 месяцев со дня выпуска. Не допускается применение набо ров по истечении срока их годности. 10.4. Дробное использование набора может быть реализовано в течение всего срока годно сти. В случае дробного использования набора: - неиспользованные стрипы можно хранить в плотно закрытом пакете при температуре от 2 --- стр. 9 --- до 8 °С в течение всего срока годности набора; - конъюгат № 1, конъюгат № 2, концентрат фосфатно-солевого буферного раствора с тай ном, раствор для восстановления калибровочных и контрольного образцов, раствор для разведе ния образцов, раствор ТМБ плюс и стоп-реагент после вскрытия можно хранить в плотно закры тых флаконах при температуре от 2 до 8 °С в течение всего срока годности набора; - приготовленные калибровочные образцы и контрольный образец можно хранить в плотно закрытых флаконах при температуре от 2 до 8 °С не более 1 месяца; при температуре минус 20 °С и ниже - в течение всего срока годности набора. Допускается шестикратное замораживание и оттаивание образцов; - промывочный раствор можно хранить при температуре от 2 до 8 °С не более 5 суток. 10.5. Построение калибровочного графика необходимо проводить для каждого независимо го эксперимента, а также рекомендуется определение концентрации VEGF в контрольном образ це. 10.6. Для представления результатов измерений концентрации VEGF в пг/мл, следует ис пользовать коэффициент пересчета 1000 мЕ/мл = 1000 пг/мл. 10.7. При постановке ИФА нельзя использовать компоненты из наборов разных серий или смешивать их при приготовлении растворов, кроме неспецифических компонентов (раствор ТМБ плюс, ФСБ-Тх25, стоп-реагент), которые взаимозаменяемы во всех наборах АО «Вектор-Бест». 10.8. Для получения надёжных результатов необходимо строгое соблюдение инструкции по применению набора. 11. ГАРАНТИЙНЫЕ ОБЯЗАТЕЛЬСТВА 11.1. Производитель гарантирует соответствие выпускаемых изделий требованиям норма тивной и технической документации. Безопасность и качество изделия гарантируются в течение всего срока годности. 11.2. Производитель отвечает за недостатки изделия, за исключением дефектов, возникших вследствие нарушения правил пользования, условий транспортирования и хранения, либо дей ствия третьих лиц, либо непреодолимой силы. 11.3. Производитель обязуется за свой счет заменить изделие, технические и функциональ ные характеристики (потребительские свойства) которого не соответств)лот нормативной и тех нической документации, если указанные недостатки явились следствием скрытого дефекта мате риалов или некачественного изготовления изделия производителем. По вопросам, касающимся качества набора «VEGF-ИФА-БЕСТ», следует обращаться в АО «Вектор-Бест» по адресу: 630559, Новосибирская область, р.п. Кольцово, а/я 121, тел. (383) 363-20-60, 227-75-43, тел./факс (383) 363-35-55. E-mail: vbobtk(a),vector-best. ru --- стр. 10 --- Нач. лаборатории стабилизации НИИ СД АО «Вектор-Бест» Директор НИИ СД АО «Вектор-Бест» «СОГЛАСОВАНО» Ректор ФГБОУ ВО БГМУ Минздрава России, член-корреспондент РАН, профессор м.п. S /f'-C - LjH^UA /И ) PP H.A. Вараксин М.Ю. Рукавишников •Н. Павлов •> июня 2017 г. йетарь Ф ГБОУ ВО БГМУ *^оссии 10