Набор реагентов для выявления ДНК Chlamydia trachomatis в клиническом материале методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени "Хламидия трахоматис" по ТУ 9398-009-01058639-2015 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 --- ООО «Альфалаб» «УТВЕРЖДАЮ» Директор ООО «Альфалаб» .А.Суворова 2016г. ИНСТРУКЦИЯ по применению набора реагентов для выявления ДНК Chlamydia trachomatis в клиническом материале методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с флуоресцентной детекцией в режиме реального времени «Хламидия трахоматис» ВНИМАНИЕ! Изучите инструкцию перед началом работы --- стр. 2 --- ОГЛАВЛЕНИЕ ( 1. НАЗНАЧЕНИЕ.................................................................................................................................3 2. ХАРАКТЕРИСТИКА ИЗДЕЛИЯ..................................................................................................3 2.1. ПРИНЦИП МЕТОДА..................................................................................................................3 2.2. ФОРМЫ ВЫПУСКА НАБОРА РЕАГЕНТОВ........................................................................4 2.3. СОСТАВ НАБОРА РЕАГЕНТОВ...............................................................................................4 2.4. АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ............................................................................. 5 3. МЕРБ1 ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ..................................................................................................6 4. ОБОРУДОВАНИЕ, РЕАГЕНТЫ И МАТЕРИАЛЕ!...................................................................6 5. ВЗЯТИЕ, ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ И ХРАНЕНИЕ ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛА...................................................................................................8 6. ПРОВЕДЕНИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ...............................................................................................8 6.1. ЭКСТРАКЦИЯ ДНК ИЗ КЛИНИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА................................................8 6.2. ПЦР-АМПЛИФИКАЦИЯ.............................................................................................................8 6.3. РЕГИСТРАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ................................................................................. 9 6.4. АНАЛИЗ И ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ.................................................................. 9 7. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ И ХРАНЕНИЯ НАБОРА ........................................11 СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ................................................................................................................12 СИМВОЛЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В ПЕЧАТНОЙ ПРОДУКЦИИ..............................................12 --- стр. 3 --- 1. НАЗНАЧЕНИЕ Набор реагентов «Хламидия трахоматис» предназначен для качественного обнаружения ДНК Chlamydia trachomatis в образцах биоматериала человека методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с флуоресцентной детекцией результатов амплификации в режиме реального времени. Набор предназначен для выявления ДНК Chlamydia trachomatis - возбудителя урогенитальной хламидийной инфекции. Chlamydia trachomatis - грамотрицательный облигатный внутриклеточный микроорганизм сферической формы, поражающий в основном мочеполовую систему. Материалом для исследования являются мазки из урогенитального тракта человека. Область применения набора - клиническая лабораторная диагностика, научные исследования. Только для исследований in vitro. 2. ХАРАКТЕРИСТИКА ИЗДЕЛИЯ 2.1. ПРИНЦИП МЕТОДА Анализ образцов включает следующие этапы: 1. Пробоподготовка (вьщеление ДНК из образцов клинического материала); 2. Амплификация специфических фрагментов ДНК в ходе ПЦР-реакции; 3. Детекция продуктов амплификации в режиме реального времени. В процессе реакции происходит амплификация фрагмента ДНК Chlamydia trachomatis (при условии наличия указанного микроорганизма в исходном клиническом материале) и амплификация фрагмента гена В-глобина человека (что служит в качестве контроля взятия биологического материала). Для амплификации специфического участка ДНК используются олигонуклеотиды и флуоресцентно меченные олигонуклеотидные зонды Taqman. В присутствии фермента Taq-полимеразы происходит гибридизация олигонуклеотидов и зонда с комплементарным участком ДНК-мишени. Образование специфического продукта амплификации сопровождается отщеплением флуоресцентной метки (благодаря наличию у Taq-полимеразы 5’- экзонуклеазной активности) и появлением детектируемого флуоресцентного сигнала, регистрация которого проводится в режиме реального времени. Олигонуклеотидные зонды, используемые для детекции ДНК Chlamydia trachomatis и детекции фрагмента ДНК человека (внутренний контроль) имеют флуоресцентные метки с разными спектрами поглощения и испускания, что позволяет проводить одновременную 3 --- стр. 4 --- регистрацию флуоресценции по двум каналам (FAM и HEX). Интенсивность флуоресценции прямо пропорциональна количеству продуктов амплификации и, следовательно, нарастает с каждым последующим циклом. Набор предназначен для использования на амплификаторах детектирующих для постановки полимеразной цепной реакции в режиме реального времени (MiniOpticon, BioRad; ДТ-96, ДНК-технология или другие амплификаторы с аналогичными техническими характеристиками). 2.2. ФОРМЫ ВЫПУСКА НАБОРА РЕАГЕНТОВ Набор реагентов «Хламидия трахоматис» выпускается в четырех различных вариантах комплектации, которые отличаются по количеству определений, на которое рассчитан набор (48/96), и типу пробирок со смесью для амплификации (пробирки/стрипы): 1) комплект на 48 определений, смесь для амплификации в пробирках; 2) комплект на 48 определений, смесь для амплификации в стрипах; 3) комплект на 96 определений, смесь для амплификации в пробирках; 4) комплект на 96 определений, смесь для амплификации в стрипах; 2.3. СОСТАВ НАБОРА РЕАГЕНТОВ На 48 определений: Компонент набора Описание Объем, мкл Количество Смесь для амплификации Прозрачная бесцветная жидкость 10,0 48 пробирок объемом 0,2 мл или 6 стрипов по 8 пробирок объемом 0,2 мл каждая Раствор Taq-полимеразы Прозрачная жидкость 300,0 2 пробирки объемом 0,6 мл Положительный контрольный образец (ПКО) Прозрачная жидкость 75,0 1 пробирка объемом 0,5 мл Отрицательный контрольный образец (ОКО) Прозрачная жидкость 150,0 1 пробирка объемом 0,5 мл Комплект на 48 определений позволяет провести анализ 48-ми образцов, включая положительный и отрицательный контрольные образцы. --- стр. 5 --- На 96 определений: Компонент набора Описание Объем, мкл Количество Смесь для амплификации Прозрачная бесцветная жидкость 10,0 96 пробирок объемом 0,2 мл или 6 стрипов по 8 пробирок объемом 0,2 мл каждая Раствор Taq-полимеразы Прозрачная жидкость 300,0 4 пробирки объемом 0,6 мл Положительный контрольный образец (ПКО) Прозрачная жидкость 75,0 2 пробирки объемом 0,5 мл Отрицательный контрольный образец (ОКО) Прозрачная жидкость 150,0 2 пробирки объемом 0,5 мл Комплект на 96 определений позволяет провести анализ 96-ти образцов, включая положительный и отрицательный контрольные образцы. 2.4. АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ Аналитичеекая чувствительность. Нижний предел аналитической чувствительности набора реагентов - 1000 копий/мл. Для определения аналитической чувствительности используют контрольные образцы предприятия (КОП), представляющие собой полученные методом генной инженерии образцы плазмидной ДНК со встроенным фрагментом, специфичным для ДНК детектируемого микроорганизма. Концентрацию КОП-1 измеряют спектрофотометрически на приборе NanoDrop2000. Аналитическая специфичность. Аналитическая специфичность набора «Хламидия трахоматис» подтверждена отсутствием регистрации экспоненциального роста флуоресцентного сигнала по каналу FAM в отрицательных контрольных образцах. Диагностическая чувствительность набора реагентов составляет не менее 98 % (при расчете по формуле Бернулли) и подтверждается в ходе клинических испытаний на выборке клинических образцов. Диагностическая специфичность. Специфичность анализа при постановке теста с применением набора «Хламидия трахоматис» доказана методом секвенирования продуктов амплификации и подтверждена отсутствием неспецифических перекрестных реакций при тестировании образцов ДНК человека и панели образцов ДНК 5 --- стр. 6 --- микроорганизмов, являющихся представителями нормальной микрофлоры урогенитального тракта, условно-патогенной и патогенной флоры (Laetobacillus spp, Escheriehia coli, Gardnerella vaginalis, Candida albicans. Mycoplasma hominis. Mycoplasma genitalium. Neisseria gonorrhoeae). 3. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ 3.1. Потенциальный риск применения набора - класс 26 (Приказ М3 России от 06.06.2012 №4н). 3.2. Все компоненты набора в используемых концентрациях являются нетоксичными. 3.3. Меры предосторожности - соблюдение правил СП 1.3.2322-08 «Безопасноеть работы с микроорганизмами III - IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней» и методичееких указаний МУ 1.3.2569-09 «Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот, при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности». 3.4. Утилизация отходов производится в соответствии с СанПиН N2.1.7.2790-10 «Санитарно-эпидемиологические требования к обращению с медицинскими отходами», сбор отходов осуществляется в одноразовые пакеты желтого цвета, предназначенные для утилизации медицинских отходов класса Б (ГОСТ Р 50962-96). 4. ОБОРУДОВАНИЕ, РЕАГЕНТЫ И МАТЕРИАЛЫ 1-й этап - выделение ДНК из клинического материала ВНИМАНИЕ! Комплект реагентов для выделения ДНК из биологического материала не входит в состав набора Для вьщеления ДНК из клинических образцов используются комплекты реагентов, рекомендованные для использования в клинической лабораторной диагностике при анализе мазков из урогенитального тракта («ДНК-сорб-АМ», ООО «Некст-Био», Россия), «ЭДЭМ», НТК «Диаэм», Россия) и другие аналогичные комплекты реагентов). Экстракцию ДНК проводят согласно инструкции производителя набора. Необходимое оборудование: ламинарный бокс 2-го класса защиты; - центрифуга для пробирок вместимостью 1,5 мл на 3000 - 12000 об/мин; микроцентрифуга-вортекс на 1500 - 3000 об/мин;