Плотная питательная среда для культивирования и выделения холерного вибриона, готовая к применению после переплавки. Холерная дрожжевая среда агаризованная (ХДС-агар) по ТУ 9385-001-01898316-2015 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 --- ФЕДЕРАЛЬНОЕ КАЗЁННОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОСТОВСКИЙ - НА- ДОНУ ОРДЕНА ТРУДОВОГО КРАСНОГО ЗНАМЕНИ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ПРОТИВОЧУМНЫЙ ИНСТИТУТ ФЕДЕРАЛЬНОЙ СЛУЖБЫ ПО НАДЗОРУ В СФЕРЕ ЗАЩИТЫ ПРАВ ПОТРЕБИТЕЛЕЙ И БЛАГОПОЛУЧИЯ ЧЕЛОВЕКА УТВЕРЖДАЮ Директор ФКУЗ-«Ростовский-на-Дону i©.B. Титова ИНСТРУКЦИЯ по применению на изделие медицинское для диагностики in vitro Питательная среда Плотная питательная среда для культивирования и выделения холерного вибриона, готовая к использованию после переплавки, Холерная дрожжевая среда агаризованная (ХДС - агар) 1. НАЗНАЧЕНИЕ 1Л. Полное наименование изделия: «Плотная питательная среда для культивирования и выделения холерного вибриона, готовая к использованию после переплавки, Холерная дрожжевая среда агаризованная (ХДС - агар)». 1.2 Питательная среда относится к изделиям медицинского назначения для использования in vitro и применяется в клинической лабораторной диагностике (микробиологическая диагностика). 1.3. Питательная среда предназначена для выделения холерных вибрионов 01 и не 01 серогрупп от человека и из объектов окружающей --- стр. 2 --- среды бактериологическим методом и культивирования штаммов холерного вибриона различных биоваров и серогрупп. 1.4. Питательная среда может применяться как в стационарных, так и в мобильных лабораториях в полевых условиях и даёт возможность получать оперативную информацию при проведении мониторинга объектов окружающей среды на наличие холерного вибриона и исследовании материала от людей. 2. ХАРАКТЕРИСТИКА ПИТАТЕЛЬНОЙ СРЕДЫ 2.1. Состав Питательной среды (из расчёта ни 1 литр): - панкреатический перевар пекарских дрожжей (Ш111Д) (Протокол заседания Ученого Совета Ростовского-на-Дону противочумного института № 11 от 12.11.2004 г., дата утверждения директором института - 12.11.2004 г.; Пат. 2375441 Российская Федерация, МПК 8 С 12 N 1\16. Способ получения белкового гидролизата.) - 0,05 % (по аминному азоту); - натрий хлористый «ЧДА» (ТУ 4233-77) - 4,0 г; - натрий фосфорнокислый двузамещённый 12-ти водный «ЧДА» (ГОСТ 4172-76)-6,0 г; - агар микробиологический (ГОСТ 17206-96) - 13,0 г; - вода очищенная (ФС 42-2619-97) - до 1,0 л; pH готовой среды - 7,7±0,1 К Питательной среде прилагается «Инструкция по применению» и «Паспорт» на поставляемую серию питательной среды. 2.2. Описание Питательной среды. Питательная среда представляет собой приготовленную способом варки, отфильтрованную и стерилизованную методом паровой стерилизации под давлением смесь питательной основы - панкреатического перевара --- стр. 3 --- пекарских дрожжей (ПППД), солей, воды очищенной, агара микробиологического. Внешний вид Питательной среды: Питательная среда представляет собой студнеобразную массу жёлтого или светло-коричневого цвета. 2.3. Функциональные характеристики Питательной среды. Один литр Питательной среды рассчитан на выделение штаммов холерного вибриона 01 и не 01 серогрупп в 20 исследуемых пробах или культивирование до 10 штаммов холерного вибриона (из расчета- по три чашки Петри диаметром 90 мм со средой на один штамм). Расход Питательной среды на одно исследование при выделении штаммов холерного вибриона составляет 0,05 л; на культивирование одного штамма холерного вибриона 0,09-0,1 л. Общее время проведения анализа одной пробы с целью выделения штаммов холерного вибриона с использованием Питательной среды - 12-18 часов. Общее время культивирования штаммов холерного вибриона на Питательной среде в зависимости от задач исследования - от 3 до 48 часов. 2.4 Принцип метода, положенный в основу работы Питательной среды. В основу работы Питательной среды положена способность штаммов холерного вибриона обеспечивать свои питательные потребности за счет основных ее ингредиентов - питательной основы ПППД и солей в условиях слабощелочного pH, а за счет содержания в Питательной среде агара - вырастать в виде типичных для данных условий культивирования гладких, прозрачных или полупрозрачных, голубоватых в проходящем свете колоний, отличающихся от колоний других микроорганизмов. 3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ Чувствительность Питательной среды в отношении тест-штаммов холерного вибриона Vibrio cholera classical P-1 (145), V.cholerae El Tor M-878, --- стр. 4 --- ( V.cholerae non 01/non 0139 P-9741 составляет 10 микробных клеток. Проведенные исследования показали, что аналогичная чувствительность была зарегистрирована в отношении 25 других штаммов холерного вибриона (в том числе, группы из трех штаммов V.cholera classical, группы из 10 штаммов V.cholerae El Tor, группы из восьми штаммов V.cholerae 0139 и группы из четырех штаммов V.cholerae non Ol/non 0139). Результаты воспроизводимы. Коэффициент вариации 3,24%. Показатель прорастания Питательной среды в отношении тест- ^ штаммов холерного вибриона Vibrio cholera classical P-1 (145), V.cholerae El Tor M-878, V.cholerae non Ol/non 0139 P-9741 составляет 36,3±3,4 микробных клеток. Проведенные исследования показали, что значения показателя прорастания, не выходящие за границы данного диапазона, были зарегистрирована в отношении 25 других штаммов холерного вибриона (в том числе, группы из трех штаммов V.cholera classical, группы из 10 штаммов V.cholerae El Tor, группы из восьми штаммов V.cholerae 0139 и группы из четырех штаммов V.cholerae non Ol/non 0139). Результаты воспроизводимы. Коэффицент вариации 8,18 %. Диаметр колоний тест-штаммов холерного вибриона Vibrio cholera classical P-1 (145), V.cholerae El Tor M-878, V.cholerae non Ol/non 0139 P- 9741 через 12 часов культивирования на Питательной среде при 37 °С составляет 2,4±0,3 мм. Проведенные исследования показали, что значения показателя диаметра колоний, не выходящие за границы данного диапазона, были зарегистрирована в отношении 25 других штаммов холерного вибриона (в том числе, группы из трех штаммов V.cholera classical, группы из 10 штаммов V.cholerae El Tor, группы из восьми штаммов V.cholerae 0139 и группы из четырех штаммов V.cholerae non Ol/non 0139). Результаты воспроизводимы. Коэффициент вариации 6,22%. I --- стр. 5 --- Морфология колоний тест-штаммов холерного вибриона Vibrio cholera classical P-1 (145), V.cholerae El Tor M-878, V.cholerae non Ol/non 0139 P- 9741 через 12 часов культивирования на Питательной среде при 37 °С типичная для холерного вибриона - колонии гладкие, прозрачные или полупрозрачные, голубоватые в проходящем свете. Проведенные исследования показали, что аналогичная морфология колоний была зарегистрирована в отношении 25 других штаммов холерного вибриона (в том числе, группы из трех штаммов V.cholera classical, группы из 10 штаммов V.cholerae El Tor, группы из восьми штаммов V.cholerae 0139 и группы из четырех штаммов V.cholerae non Ol/non 0139). Результаты воспроизводимы. Стабильность основных свойств тест-штаммов холерного вибриона Vibrio cholera classical P-1 (145), V.cholerae El Tor M-878, V.cholerae non Ol/non 0139 P-9741- не более двух атипичных по морфологии, биохимическим, серологическим, фаголизабельным свойствам колоний на каждой чашке с посевной дозой 1x10 м.к. Проведенные исследования показали, что показатель стабильности свойств был аналогичным и в отношении 25 других штаммов холерного вибриона (в том числе, группы из трех штаммов V.cholera classical, группы из 10 штаммов V.cholerae El Tor, группы из восьми штаммов V.cholerae 0139 и группы из четырех штаммов V.cholerae non Ol/non 0139). Результаты воспроизводимы. Коэффициент вариации 6,00%. Стерильность Питательной среды. Проведенные исследования 5% каждой серии Питательной среды показали отсутствие роста колоний посторонней микрофлоры на всех чашках Петри с Питательной средой после инкубации в условиях 37 °С в течение 5 суток. Результаты воспроизводимы. Коэффициент вариации менее 2%. --- стр. 6 --- i ^ « 4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ 4.1. Потенциальный риск применения Питательной среды - класс 3 (ГОСТ Р 51088-2013). 4.2. Питательная среда при использовании ее по целевому назначению безопасна и не обладает токсическим воздействием. 4.3. При работе с Питательной средой по выделению или культивированию штаммов холерного вибриона следует соблюдать Санитарные Правила СП 1.3.3118- 13 «Безопасность работы с микроорганизмами I - II групп патогенности (опасности)». 4.4. Выделение и культивирование штаммов холерного вибриона с использованием Питательной среды проводить только в лабораториях, соответствующих уровню биологической безопасности УББ-3. 4.5. При выделении и культивировании штаммов холерного вибриона с использованием Питательной среды обязательно применение средств индивидуальной защиты (СИЗ). 4.6. При работе с Питательной средой следует соблюдать «Правила устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения СССР» (Москва, 1981 г) и ГОСТ Р 53079.2-2008. Национальный стандарт Российской Федерации. Технологии лабораторные клинические. Обеспечение качества клинических лабораторных исследований. 4.7. Питательная среда предназначена только для лабораторной диагностики холеры in vitro и культивирования штаммов холерного вибриона. 5. КОНТРОЛБ КАЧЕСТВА --- стр. 7 --- 5.1. Контроль качества Питательной среды проводят согласно ГОСТ Р 53133.3-2008 «Технологии лабораторные клинические. Контроль качества клинических лабораторных исследований. Часть 3. Описание материалов для контроля качества клинических лабораторных исследований», МУ 3.3.2.2124-06 «Контроль диагностических питательных сред по биологическим показателям для возбудителей чумы, холеры, сибирской язвы, туляремии, бруцеллёза, легионеллёза»; МУК 4.2.2316-08 «Методы контроля бактериологических питательных сред» и МУК 4.2.2218-07 "Лабораторная диагностика холеры". 5.2. Достоверность результатов исследования зависит от соблюдения стандартности выполнения всех лабораторных процедур. 5.3. Процедура внутреннего контроля качества исследования включает контроль Питательной среды по физико-химическим показателям (внешний вид, прозрачность и цветность, концентрация водородных ионов - pH, аминный азот, общий азот, содержание хлорида натрия, углеводы, прочность агарового студня по Валенту) и биологическим показателям в отношении тест - штаммов холерного вибриона (чувствительности, показателю прорастания, диаметру колоний, морфологии колоний, стабильности основных биологических свойств тест-штаммов, стерильности). Физико-химические показатели Питательной среды должны быть следующими: - Внешний вид - студнеобразная масса жёлтого или светло- коричневого цвета; - Прозрачность и цветность - Питательная среда должна быть слегка опалесцирующей, жёлтого или светло-коричневого цвета; - Концентрация водородных ионов (pH) - 7,8±0,2; - Аминный азот - 0,05 ±0,005 %; - Общий азот - 0,16±0,02 %; - Содержание хлорида натрия - 0,86±0,04 %; --- стр. 8 --- ] - Углеводы - 0,007 ± 0,0005 %; - Прочность агарового студня (по Валенту) - 375±25 г. Тест - штаммы: V.cholerae classical P-1 (145), V. cholerae El Tor M-878 и V. cholerae non 01/ non 0139 P-9741 находятся в коллекциях ФКУЗ РосНИПЧИ «Микроб» Роспотребнадзора, ФКУЗ Ростовский-на-Дону противочумный институт Роспотребнадзора, ФБУН ГНЦ ПМБ Роспотребнадзора. Подготовку тест-штаммов и контроль Питательной среды по биологическим показателям проводят в соответствии с МУ 3.3.2.2124-06 «Контроль диагностических питательных сред по биологическим показателям для возбудителей чумы, холеры, сибирской язвы, туляремии, бруцеллёза, легионеллёза». По своим биологическим показателям Питательная среда должна соответствовать следующим требованиям в отношении тест-штаммов холерного вибриона: - Чувствительность - не ниже 10 м.к.; - Показатель прорастания - не менее 30 % от расчётной посевной дозы 1x10 м.к. при наличии единичных колоний на всех трёх чашках Петри с посевной дозой 10 м.к. (расчёт ведётся по среднему числу колоний на трёх чашках с одной посевной дозой); - Диаметр колоний - на всех чашках не менее 1,0 мм; - Морфология колоний - колонии гладкие, прозрачные (для V. cholerae nonOl / non 0139 P-9741 - полупрозрачные), голубоватые в проходящем свете; - Стабильность основных биологических свойств тест-штаммов - не более двух атипичных по морфологии, биохимическим, серологическим, фаголизабельным свойствам колоний на каждой чашке с посевной дозой 1x10^ м.к; - Стерильность - отсутствие на каждой чашке Петри с Питательной средой колоний посторонней микрофлоры в количестве более 2 после инкубации при 37 °С в течение пяти суток. L --- стр. 9 --- 6. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРР1АЛЫ, НЕОБХОДИМЫЕ ПРИ РАБОТЕ С ПИТАТЕЛЬНОЙ СРЕДОЙ спирт этиловый ректификованный 96°; пробирки биологические стеклянные; предметные стёкла; чашки Петри пластмассовые однократного применения 0 90 мм; вата гигроскопичная; марля медицинская; петли бактериологические; горелка спиртовая; пипетки стеклянные градуированные на 1, 2, 5, 10 мл; стандартный образец мутности ОСО 42-28-86П; 0,9 % раствор натрия хлорида, забуференный 1/150 М фосфатным буфером pH 7,2±0,1; агар Мартена pH 7,7±0,1; среда Хью - Лейфсона; среда Гисса с арабинозой; среда Гисса с маннозой; среда Гисса с сахарозой; 1 % пептонная вода pH 7,8; щелочной агар pH 7,7-8,2; --- стр. 14 --- 1 4 lA. Отбор проб из объектов окружающей среды Воду (питьевую, из поверхностных водоемов и др.) для исследования берут в количестве 1 л на одну пробу в двух объемах по 500 мл в стерильную посуду с непромокаемой пробкой. Из водопроводных кранов пробы воды берут после предварительного обжигания их спиртовым факелом и спуска воды в течение 10 мин при полном открытии крана. Хозяйственно-бытовые сточные воды отбирают для исследования двумя способами: в объеме 1 л в двух емкостях по 500 мл или тампонами, приготовленными из марлевых салфеток размером 10710 см, сложенных в 10 - 15 слоев. Последние закрепляют у места забора воды, через сутки помещают в стерилъную банку и доставляют в лабораторию. Гидробионтов (рыб, лягушек и др.) отлавливают из водоемов любым способом и в закрытых банках, ведрах и других сосудах доставляют в лабораторию. Ил и фитопланктон (водоросли) также помещают в стерилъные банки и транспортируют в лабораторию. iy,' ^ й ■ ,..,■ - ь :',v; . . ' ■ Исследовать зоопланктон (дафнии, циклопы и др.) можно групповым методом, объединяя в один посев 10-30 образцов, отловленных на одном участке водоема. В этом случае они могут бытъ доставлены в одном сосуде. При исследовании рыб берут содержимое желудка и жабры. Смывы с различных объектов окружающей среды берут ватным или марлевым тампоном, смоченным 0,9 %-м раствором натрия хлорида, с м, ' ' : i о . '•■ у* --- стр. 15 --- поверхности площадью 10710 см. Тампон опускают во флакон или пробирку с 1 %-й пептонной водой. Для сбора мух расставляют мухоловки, в которые наливают 1 %-ю пептонную воду с 1 % сахара. Остатки пищи в очаге и по показаниям пищевые продукты отбирают по 200 г плотных и 0,5 л жидких, помещают в стеклянную посуду и закрывают. При необходимости в жидкие продукты добавляют основной пептон до 1 %- й концентрации. 1 5 t > 8. ПОДГОТОВКА ПИТАТЕЛЬНОЙ СРЕДЫ К ПРОВЕДЕНИЮ ИССЛЕДОВАНИЯ (АНАЛИЗА). Флаконы с Питательной средой помещают в эмалированную кастрюлю с многослойной марлевой салфеткой и наполненную водой, которую ставят на включённую в сеть электро- или газовую плитку, варочную панель (водяная баня). После того, как содержимое флаконов расплавится и станет однородным (т.е. без комочков), их остужают до 50 - 55°С. Затем флаконы с Питательной средой асептично при помощи ножниц освобождают от алюминиевых колпачков и резиновых пробок, меняя последние на стерильные ватно-марлевые. Далее осуществляют асептично розлив Питательной среды в чашки Петри стеклянные или пластмассовые диаметром 90 мл из расчета 30-50 мл на одну чашку. Чашки Петри с разлитой в них средой подсушивают от конденсата в термостатах, маркируют в зависимости от задач исследования и используют для анализа проб на наличие холерного вибриона или для культивирования штаммов холерного вибриона. --- стр. 16 --- - ' Г - 1 ' - ' : 1 6 # I 9. ПРОВЕДЕНИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ (АНАЛИЗА) С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ПИТАТЕЛЬНОЙ СРЕДЫ 9Л. Исследование проб от больных и вибриононосителей, секционного материала с использованием Питательной среды. 1этап Испражнения, рвотные массы больных, а также содержимое кишечника, желчного пузыря и суспензию кусочков слизистой тонкого кишечника трупа в объёме 0,5 - 1,0 мл засевают пипеткой в 50 - 100 мл накопительной среды, петлей - на Питательную среду и одну из элективных сред (СЭДХ, TCBS). Материал от подозреваемых на вибриононосительство засевают в 50 мл среды накопления при индивидуальных анализах ив 100 мл - при групповых, объединяя в один флакон по 0,5 - 1,0 мл пробы не более чем от 5 человек. К групповым посевам прибегают в редких случаях при проведении массовых обследований на вибриононосительство. Материал, доставленный в 5 мл 1 %-й пептонной воды, полностью используют для посева в 50 мл среды накопления. В случае поступления в лабораторию материала, забранного в 50 мл 1 %-й пептонной воды во флаконе, и доставки его не позже 2-х ч после забора пробы, флакон помещают в термостат на 6 ч для накопления возбудителя. При доставке материала в более поздние сроки 5 мл его засевают в 50 мл 1 %-й пептонной воды. Пэтап (через 6 - 8 ч от начала исследования) С первой среды накопления делают высев на Питательную среду и одну из элективных сред и в 5 - 8 мл второй среды накопления. Пересевы в жидкие и на плотные среды делают с поверхности жидкой среды большой бактериологической петлей диаметром 5 мм. --- стр. 17 --- 1 7 М ) Шэтап (через 12 - 16 ч от начала исследования) Высев со второй среды накопления на Питательную среду. В случае необходимости ускорения хода анализа материала от больного, подозрительного на заболевание холерой, отбор колоний с Питательной среды, засеянной в начале исследования, можно начинать уже на этом этапе, в остальных случаях - на следующем. 1Уэтап (через 18 - 24 ч от начала исследования) Отбор подозрительных на холерный вибрион колоний в посевах на Питательной среде нативного материала, а также в высевах из 1-й и 2-й накопительных сред. 9.2. Исследование объектов окружающей среды Схема анализа объектов окружающей среды отличается от схемы исследования материала от больных только на I этапе. а) Вода поверхностных водоемов и водопроводная В зависимости от времени доставки пробы возможны следующие варианты посевов с целью первичного накопления вибрионов: • к исследуемой воде добавляют раствор основного пептона до 1 %-й концентрации, определяют pH, в случае необходимости подщелачивают 10 %-м раствором едкого натрия до pH 8,4 ±0,1. Время инкубации в 1-й среде накопления - 8 - 10 ч. Объем 2-й среды накопления - 10 мл; время инкубации в среде без теллурита калия - 6 ч, а с теллуритом калия - 18 - 20 ч; • в исследуемую воду добавляют раствор основного пептона до 1 %-й концентрации и теллурит калия из рабочего разведения 1:1000 до концентрации 1:100000 или 1:200000 в соответствии с данными проверки.