Набор реагентов для определения ДНК Mycoplasma hominis и Gardnerella vaginalis методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) для диагностики in vitro "АмплиПрайм® MH/GV" по ТУ 9398-014-09286667-2014 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 --- ПРИЛОЖЕНИЕ 3 «УТВЕРЖДАЮ» Главный технолог Общества с ограниченной отр'Р'€Тй!енностью «НекстБио» М.Ю. Сорокина ’ 2015 г. ИНСТРУКЦИЯ по применению набора реагентов для определения ДНК Mycoplasma hominis и Gardnerella vaginalis методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) для диагностики in vitro «АмплиПрайм® МН/GV» АмплиПрайм ® iJ ООО «НекстБио», Российская Федерация, 111394, город Москва, улица Полимерная, дом 8, стр. 2 IVD Акт № 127/2015-02 от 27.08.2015г. Лист 53 Всего листов 79 --- стр. 2 --- СПИСОК СОКРАЩ ЕНИЙ.............................................................................................................................55 НАЗНАЧЕНИЕ.................................................................................................................................................... 55 ПРИННИП М ЕТО ДА........................................................................................................................................56 ФОРМЫ ВЫ ПУСКА НАБОРА РЕАГЕНТОВ..........................................................................................57 АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ..............................................................................................57 ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ........................................................................................58 МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ..................................................................................................................59 ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ МАТЕРИАЛЫ И ОБОРУДОВАНИЕ.............................................................61 ВЗЯТИЕ. ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ И ХРАНЕНИЕ ИССЛЕДУЕМОГО М АТЕРИАЛА .......64 ПОДГОТОВКА ИССЛЕДУЕМОГО М АТЕРИАЛА К ЭКСТРАКЦИИ Д Н К ...............................64 ИНТЕРФЕРИРУЮ Щ ИЕ ВЕЩ ЕСТВА И ОГРАНИЧЕНИЯ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ ПРОБ ИССЛЕДУЕМОГО М АТЕРИАЛА............................................................................................................... 64 ПРОВЕДЕНИЕ ПНР-ИССЛЕДОВАНИЯ...................................................................................................65 ЭКСТРАКЦИЯ ДН К ИЗ ИССЛЕДУЕМЫ Х ОБРАЗЦОВ.....................................................................65 ФОРМЫ КО М ПЛЕКТАЦИИ 1 и 2 («ПЦР-комплект» вариант FEP-100-0.2 или FEP-100-0.5) ...................................................................................................................................................................................66 СОСТАВ..........................................................................................................................................................66 АМ ПЛИФ ИКАЦИЯ С ДЕТЕКЦИЕЙ ПО «КОНЕЧНОЙ ТО Ч КЕ» ...........................................66 A. Подготовка пробирок для амплификации...............................................................................66 Б. Проведение амплификации...........................................................................................................67 B. Флуоресцентная летекпия продуктов амплификации по «конечной точке»...............68 Г. Интерпретация результатов..........................................................................................................69 ФОРМА КО М ПЛЕКТАЦИИ 3 (комплекты реагентов «АмплиПрайм® МАГНО-сорб-УРО» и «ПЦР-комплект» вариант FEP-100-0.2)......................................................................................................71 СОСТАВ..........................................................................................................................................................71 АМ ПЛИФ ИКАЦИЯ С ДЕТЕКЦИЕЙ ПО «КОНЕЧНОЙ ТО ЧКЕ» ...........................................72 A. Подготовка пробирок для амплификации...............................................................................72 Б. Проведение амплификации...........................................................................................................73 B. Флуоресцентная детекция продуктов амплификации по «конечной точке» ..............73 Г. Интерпретация результатов..........................................................................................................74 СРОК ГОДНОСТИ. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ И ХРАНЕНИЯ................................76 ГАРАНТИЙНБ1Е ОБЯЗАТЕЛЬСТВА ПРОИЗВОДИТЕЛЯ................................................................76 СИМВОЛЫ . ИСПОЛЬЗУЕМЫ Е В ПЕЧАТНОЙ ПРО ДУКЦИ И ......................................................77 ПРИЛОЖЕНИЕ 1................................................................................................................................................78 ОГЛАВЛЕНИЕ Акт № 127/2015-02 от 27.08.2015г. Лист 54 Всего листов 79 --- стр. 3 --- список СОКРАЩЕНИЙ В настоящей инструкции применяются следующие сокращения и обозначения: BKO-FL - экзогенный внутренний контрольный образец ГЭ - геномные эквиваленты ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота дНТФ - дезоксирибонуклеотидтрифосфат иппп - инфекции, передаваемые половым путем к+ - положительный контроль ПЦР к- - отрицательный контроль ПЦР НК - нуклеиновые кислоты ок - отрицательный контроль экстракции око - отрицательный контрольный образец ПЦР - полимеразная цепная реакция РУ - регистрационное удостоверение ______________________ - урацил-ДНК-гликозилаза FEP - флуоресцентная детекция по «конечной точке» НАЗНАЧЕНИЕ Набор реагентов «АмплиПрайм® MH/GV» предназначен для качественного определения ДН К Mycoplasma hominis и Gardnerella vaginalis в биологическом материале (отделяемое слизистой оболочки влагалища) методом ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекци ей продуктов амплификации. Набор реагентов используется в клинической лабораторной диагностике для исследования биологического материала, полученного от пациенток с подо зрением на наличие вульвовагинальной инфекции. Материалом для проведения ПЦР служат пробы ДНК, экстрагированные из исследуемого материала с помощью комплектов реагентов, рекомендованных Производителем. ВНИМАНИЕ! В соответствии с федеральным законом от 21.11.2011 № 323-ФЗ «Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации» ПЦР-исследование является одним из методов всестороннего обследования пациента, на основании которых лечащий врач уста навливает диагноз и выбирает мероприятия по лечению пациента. Акт № 127/2015-02 от 27.08.2015г. Лист 55 Всего листов 79 --- стр. 4 --- « ПРИНЦИП МЕТОДА Принцип тестирования основывается на экстракции ДН К из образцов исследуемого ма териала совместно с внутренним контрольным образцом (BKO-FL *) и одновременной ам плификации участков ДН К вьывляемых микроорганизмов и ДН К BKO-FL с гибридизацион- но-флуоресцентной детекцией по «конечной точке». BKO-FL позволяет контролировать все этапы ПЦР-исследования для каждого образца и оценивать влияние ингибиторов на резуль таты ПЦР-исследования. С полученными на этапе экстракции пробами ДН К проводится реакция амплификации участка ДН К при помощи специфичных к этому участку праймеров и фермента Taq- полимеразы. В составе реакционной смеси присутствуют флуоресцентно-меченые олигонук леотиды, которые гибридизуются с комплементарным участком амплифицируемой ДНК- мишени, в результате чего происходит нарастание интенсивности флуоресценции. Это поз воляет регистрировать накопление специфического продукта амплификации путем измере ния интенсивности флуоресцентного сигнала. Детекция флуоресцентного сигнала осуществ ляется после окончания ПЦР с помощью флуоресцентного ПЦР-детектора. Набор реагентов содержит систему защиты от контаминации ампликонами за счет при менения фермента урацил-ДНК-гликозилазы (УД Г) и трифосфата дезоксиуридина. Фермент УД Г распознает и катализирует разрушение цепей ДНК, содержащих дезоксиуридин, но не ДНК, содержащей дезокситимидин. Дезоксиуридин отсутствует в природной ДНК, но всегда присутствует в ампликонах, поскольку трифосфат дезоксиуридина входит в состав смеси дНТФ в реагентах для амплификации. Дезоксиуридин делает контаминирующие ампликоны восприимчивыми к разрушению ферментом УД Г до начала амплификации ДНК-мишени, и, следовательно, они не могут быть в дальнейшем амплифицированы. Фермент УД Г термолабилен и инактивируется при нагревании выше 50 °С и поэтому не разрушает ампликоны мишени, нарабатываемые в процессе ПЦР. На этапе амплификации одновременно в одной пробирке проводятся 3 реакции - ампли фикация участков ДН К М hominis и G. vaginalis, а также амплификация последовательности BKO-FL. Результаты амплификации ДН К М hominis и G. vaginalis, а также ДН К BKO-FL регистрируются по 3 различным каналам флуоресцентной детекции: 9 BKO-FL входит в состав комплекта реагентов, рекомендованного Производителем для экстракции ДНК из каждого исследуемого материала. Акт № 127/2015-02 от 27.08.2015г. Лист 56 Всего листов 79 --- стр. 5 --- Таблица 1 Канал для флуоро- фора FAM JOE ROX ДНК-мишень ДНК М. hominis ДНК G. vaginalis ДНК BKO-FL Область амплифика ции 16S рРНК 16S рРНК искусственно синте зированная последо вательность ФОРМЫ ВЫ ПУСКА НАБОРА РЕАГЕНТОВ Набор реагентов выпускается в 3 формах комплектации: Форма 1 включает комплект реагентов «ПЦР-комплект» вариант FEP-100-0,2 (пробирки 0,2 мл). Форма 2 включает комплект реагентов «ПЦР-комплект» вариант FEP-100-0,5 (пробирки 0,5 мл). Форма 3 включает комплекты реагентов «АмплиПрайм® МАГНО-сорб-УРО» и «ПЦР- комплект» вариант FEP-100-0,2 (пробирки 0,2 мл). Формы комплектации 1, 2 предназначены для проведения амплификации ДН К с гибриди- зационно-флуоресцентной детекцией по «конечной точке» и позволяют выявлять ДН К в ка чественном формате. Для проведения полного ПЦР-исследования необходимо использовать комплекты реагентов для экстракции ДНК, рекомендованные Производителем. Форма комплектации 3 предназначена для проведения полного ПЦР-исследования, включающего экстракцию ДН К из биологического материала и амплификацию ДНК с ги- бридизационно-флуоресцентной детекцией по «конечной точке», и позволяет выявлять ДН К в качественном формате. АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ Для данного набора реагентов применимы следующие характеристики: Аналитическая чувствительность Таблица 2 Вид исследуемо го материала Транспортная среда Комплект для экстракции ДНК Микроорганизм Аналитическая чув ствительность, ГЭ/мл’ отделяемое сли зистой оболочки влагалища «АмплиПрайм ТС» или «Ам плиПрайм т е м » или «Транспорт ная среда ТС- эдэм»*® «АмплиПрайм ДНК-сорб-АМ», «АмплиПрайм® МАГНО-сорб- УРО» М hominis 1x10^ G. vaginalis 1x10® Количество геномных эквивалентов микроорганизма (ГЭ): - в биологическом материале (отделяемое слизистой оболочки влагалища), помещенном в указанную транс портную среду, в пересчете на 1 мл. Форма комплектации 3 или 4 комплекта реагентов «АмплиПрайм ЭДЭМ». Акт № 127/2015-02 от 27.08.2015г. Лист 57 Всего листов 79 --- стр. 6 --- «Транспортная среда ТС- ЭДЭМ»^ «АмплиПрайм ЭДЭМ» М hominis 1x10^ G. vaginalis 1x10^ Данная чувствительность достигается при соблюдении правил, указанных в разделах «Взятие, транспортирование и хранение исследуемого материала» и «Подготовка исследуе мого материала к экстракции ДНК». Аналитическая чувствительность в отношении каждого из микроорганизмов сохраняется и в присутствии высокой концентрации ДН К второго анализируемого микроорганизма до 10^ ГЭ/мл. Аналитическая специфичность Набор реагентов обнаруживает фрагменты ДН К заявленных микроорганизмов. Аналити ческая специфичность набора реагентов доказана при исследовании ДН К следующих мик роорганизмов: Chlamydia trachomatis; Lactobacillus spp.; Escherichia coli; Staphylococcus aureus; Streptococcus pyogenes; Streptococcus agalactiae; Candida albicans; Candida glabrata; Candida krusei; Ureaplasma urealyticum; Ureaplasma parvum; Mycoplasma genitalium; Neisseria flava; Neisseria subflava; Neisseria sicca; Neisseria gonorrhoeae; Neisseria mucosa; Trichomonas vaginalis; Treponema pallidum; Toxoplasma gondii; HSV 1 и 2 типа; CMV; HPV, a также геномной ДН К человека. При тестировании образцов ДН К вышеперечисленных организмов и ДН К человека не специфических реакций выявлено не бьшо. ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ Таблица 3 Результаты тестирования набора реагентов «АмплиПрайм® MH/GV» в сравнении с референтным методом Тип образ цов Результаты применения набора реагентов «АмплиПрайм® M H /G V » Результаты применения референтного метода'* М . hom inis G . vaginaiis положи тельных отрица тельных положи тельных отрица тельных отделяемое слизистой оболочки влагалища Всего исследо- вано 526 образ цов положительных 101 2 270 1 отрицательных 1 422 1 254 Бьши использованы образцы отделяемого слизиетой оболочки влагалища полученных от 526 женщин репродуктивного возраста, обратившихся к акушеру-гинекологу с жалобами на дискомфорт и вьщеления из половых путей. 11 В качестве референтного метода использовались наборы реагентов «АмплиСенс® Mycoplasma hominis-¥hy> (РУ № ФСР 2009/06559) и «АмплиСенс® Gardnerella vagmalis-FLy> (РУ № ФСР 2010/07829). Акт № 127/2015-02 от 27.08.2015г. Лист 58 Всего листов 79 --- стр. 7 --- Таблица 4 Диагностические характеристики набора реагентов «АмплиПрайм® MH/GV» Тип образцов Диагностическая чувстви тельность*^ (с доверительной вероятно стью 95 %), не менее % Диагностическая специфич ность*^, (с доверительной вероятно стью 95 %), не менее % М. hominis G . vaginalis М. hominis G . vaginalis отделяемое слизистой оболоч ки влагалища 97,5 97,7 98,3 98,2 МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ Работа должна проводиться в лаборатории, выполняющей молекулярно-биологические (ПЦР) исследования биологического материала на наличие возбудителей инфекционных бо лезней, с соблюдением санитарно-эпидемиологических правил СП 1.3.2322-08 «Безопас ность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней», СанПиН 2.1.7.2790-10 «Санитарно-эпидемиологические требова ния к обращению с медицинскими отходами» и методических указаний М У 1.3.2569-09 «Ор ганизация работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности». При работе необходимо всегда вьшолнять следующие требования: - Рассматривать исследуемые образцы как инфекционно-опасные, организовывать работу и хранение в соответствии с СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами 1 II-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней». - Убирать и дезинфицировать разлитые образцы или реагенты, используя дезинфицирую щие средства в соответствии с СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизма ми II1-1V групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней». - Лабораторный процесс должен быть однонаправленным. Анализ проводится в отдельных помещениях (зонах). Работу следует начинать в Зоне Экстракции, продолжать в Зоне Ам плификации и Детекции. Не возвращать образцы, оборудование и реагенты в зону, в которой была проведена предыдущая стадия процесса. - Неиспользованные реагенты, реагенты с истекшим сроком годности, а также использо ванные реагенты, упаковку, биологический материал, включая материалы, инструменты и предметы, загрязненные биологическим материалом, следует удалять в соответствии с требованиями СанПиН 2.1.7.2790-10 «Санитарно-эпидемиологические требования к об ращению с медицинскими отходами». 12 Относительная чувствительность в сравнении с использованным референтным методом. Относительная специфичность в сравнении с использованным референтным методом. Aicr № 127/2015-02 от 27.08.2015г. Лист 59 Всего листов 79 --- стр. 8 --- В Н И М А Н И Е! При удалении отходов после амплификации (пробирок, содержащих продук ты ПЦР) недопустимо открывание пробирок и разбрызгивание содержимого, поскольку это может привести к контаминации продуктами ПЦР лабораторной зоны, оборудования и реа гентов. - Использовать и менять при каждой операции одноразовые наконечники для автоматиче ских дозаторов с фильтром*'*. Одноразовую пластиковую посуду (пробирки, наконечни ки) необходимо сбрасывать в специальный контейнер, содержащий дезинфицирующее средство, которое может быть использовано для обеззараживания медицинских отходов. - Поверхности столов, а также помещения, в которых проводится постановка ПЦР, до начала и после завершения работ необходимо подвергать ультрафиолетовому облучению в течение 30 мин. - Набор реагентов предназначен для одноразового применения для проведения ПЦР- исследования указанного количества проб (см. раздел «Состав»). - Набор реагентов готов к применению согласно данной инструкции. Применять набор ре агентов строго по назначению. - К работе с набором реагентов допускается только персонал, обученный методам молеку лярной диагностики и правилам работы в клинико-диагностической лаборатории в уста новленном порядке (СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней»). - Не использовать набор реагентов, если нарушена внутренняя упаковка или внешний вид реагента не соответствует описанию. - Не использовать набор реагентов, если не соблюдались условия транспортирования и хранения согласно инструкции. Не использовать набор реагентов по истечении срока годности. - Использовать одноразовые неопудренные перчатки, лабораторные халаты, защищать гла за во время работы с образцами и реагентами. Тщательно вымыть руки по окончании ра боты. Все операции проводятся только в перчатках для исключения контакта с организ мом человека. - Избегать контакта с кожей, глазами и слизистой оболочкой. При контакте немедленно промыть пораженное место водой и обратиться за медицинской помощью. - Листы безопасности реагентов (SDS - Safety data sheet) доступны по запросу. Оценка вероятных событий, в результате наступления которых могут произойти отрица тельные последствия для организма человека (для форм комплектапии. не включающих комплект реагентов «АмплиПрайм® МАГНО-сорб-УРО»1: Для удаления надосадочной жидкости в процессе экстракции используются одноразовые наконечники без филь тра. Акт № 127/2015-02 от 27,08.2015г. Лист 60 Всего листов 79 --- стр. 23 --- ФОРМА КОМПЛЕКТАЦИИ 3. КАЧЕСТВЕННЫЙ ФОРМАТ Возможные ошибки 1. Для положительного контроля ПЦР (К+) сигнал флуоресценции по каналам для флуоро- форов РАМ и/или JOE и/или ROX ниже порогового значения. Необходимо повторить амплификацию и детекцию для всех образцов. 2. Для отрицательного контроля экстракции (ОК): а) сигнал флуоресценции по каналам для флуорофоров РАМ и/или JOE выше порогово го значения. Вероятна контаминация лаборатории продуктами амплификации или контаминация реагентов, исследуемых образцов на каком-либо этапе ПЦР- исследования. Необходимо предпринять меры по выявлению и ликвидации источника контаминации и повторить ПЦР-исследование для всех образцов, в которых обнару жена ДН К анализируемых микроорганизмов, начиная с этапа экстракции ДНК; б) сигнал флуоресценции по каналу для флуорофора ROX отсутствует или ниже порого вого значения. Это означает, что ОК не выполнил функцию контроля контаминации. Требуется повторное ПЦР-исследование для всех образцов, в которых обнаружена ДН К анализируемых микроорганизмов, начиная с этапа экстракции ДНК. 3. Для отрицательного контроля ПЦР (К -) сигнал флуоресценции по каналам для флуоро форов FAM и/или JOE выше порогового значения. Вероятна контаминация лаборатории продуктами амплификации или контаминация реагентов, исследуемых образцов на ка ком-либо этапе ПЦР-исследования. Необходимо предпринять меры по выявлению и лик видации источника контаминации и повторить амплификацию и детекцию для всех об- ' разцов, в которых обнаружена ДН К анализируемых микроорганизмов и/или ВКО. Акт № 127/2015-02 от 27.08.2015г. Лист 75 Всего листов 79 --- стр. 24 --- СРОК годности. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ и ХРАНЕНИЯ Срок годности. 12 мес. Набор реагентов с истекшим сроком годности применению не подле жит. Срок годности вскрытых реагентов соответствует сроку годности, указанному на эти кетках для невскрытых реагентов. Транспортирование. Набор реагентов транспортировать при температуре от 2 до 8 °С не более 5 сут. Допускается транспортирование при температуре от 2 до 25 °С не более 3 сут. Комплект реагентов «АмплиПрайм® МАГНО-сорб-УРО», «ПЦР-комплект» вариант FEP- 100-0,2 и вариант FEP-100-0,5 при получении разукомплектовать в соответствии с указан ными температурами хранения. Хранение. Комплект реагентов «АмплиПрайм® МАГНО-сорб-УРО» хранить при темпера туре от 2 до 25 °С, кроме BKO-FL. BKO-FL хранить при температуре от 2 до 8 °С. Комплек ты реагентов «ПЦР-комплект» вариант FEP-100-0,2 и «ПЦР-комплект» вариант FEP-100-0,5 хранить при температуре от 2 до 8 °С, кроме ПЦР-буфера-К. ПЦР-буфер-К хранить при температуре от минус 24 до минус 16 °С. ПЦР-смесь М. hominis/ G. vaginalis хранить в за щищенном от света месте. ГАРАНТИЙНЫ Е ОБЯЗАТЕЛЬСТВА ПРОИЗВОДИТЕЛЯ Производитель гарантирует соответствие основных параметров и характеристик набора реагентов, требованиям, указанным в технической и эксплуатационной документации, в те чение указанного срока годности при соблюдении всех условий транспортирования, хране ния и применения. ‘ Рекламации на качество набора реагентов «АмплиПрайм® MH/GV» направлять в адрес производителя ООО «НекстБио» (111394 г. Москва, ул. Полимерная, 8 стр. 2) в отдел по ра боте с рекламациями (тел. (495) 620-08-73, e-mail: info@nextbio.ru ). При вьывлении побочных действий, не указанных в инструкции по применению набора реагентов, нежелательных реакций при его использовании, фактов и обстоятельств, создаю щих угрозу жизни и здоровью граждан и медицинских работников при применении и экс плуатации набора реагентов, рекомендуется направить сообщение в отдел по работе с ре кламациями по адресу, указанному выше, и в уполномоченную государственную регулиру ющую организацию (в РФ - Федеральная служба по надзору в сфере здравоохранения) в со ответствии с действующим законодательством. Акт № 127/2015-02 от 27.08.2015г. Лист 76 Всего листов 79 --- стр. 25 --- символы, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В ПЕЧАТНОЙ ПРОДУКЦИИ REF IVD Номер в каталоге I L0T| Код партии Изделие для in vitro диагностики V □3 Максимальное число тестов Использовать до Обратитесь к руководству по эксплуатации VER ^ % I ш1 i 1 Дата изменения Ограничение температуры Производитель Хрупкое. Осторожно -О*'/.- I t Не допускать попа дания солнечного света Дата изготовления Беречь от влаги Верх 9^ Акт № 127/2015-02 от 27.08.2015г. Лист 77 Всего листов 79