Набор реагентов. Диагностикум эритроцитарный кокцидиоидомикозный и гистоплазмозный иммуноглобулиновый сухой по ТУ 9388-011-01898084-2013 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 ---
УТВЕРЖДЕНА
Приказом Росздравнадзора
от _____20 г.
№
«УТВЕРЖДАЮ»
ректор ФКУЗ Волгоградский
Роспотребнадзора
Топорков А.В.
ит л 20/3 г.
ИНСТРУКЦИЯ
по ПРИМЕНЕНИЮ НАБОРА РЕАГЕНТОВ. ДИАГНОСТИКУМ
ЭРИТРОЦИТАРНЫЙ КОКЦИДИОИДОМИКОЗНЫЙ и ГИСТОПЛАЗМОЗНЫЙ
ИММУНОГЛОБУЛИНОВЫЙ СУХОЙ
1. НАЗНАЧЕНИЕ
Медицинское изделие «Набор реагентов. Диагностикум эритроцитарный
КОКЦИДИОИДОМИКОЗНЫЙ и гистоплазмозный иммуноглобулиновый сухой» предназначено
для идентификации возбудителей кокцидиоидомикоза и гистоплазмоза в\^вьщеленных
культурах микромицетов, клиническом и биологическом материале методом реакции
непрямой гемагглютинации (РИГА).
2. ОБЛАСТБ ПРИМЕНЕНИЯ |
Область применения набора - клиническая лабораторная диагности!^,
эпидемиологический мониторинг. Набор реагентов может быть использован в
учреждениях, имеющих Лицензию на деятельность в области использования возбудителей
инфекционных заболеваний человека и животных 1-1У групп патогенности,
стационарных и мобильных лабораториях, имеющих санитарно-эпидемиологическое
заключение на проведение работ с микроорганизмами 1-1У групп патогенности.
3. ТРЕБОВАНИЯ К ПЕРСОНАЛУ, УЧАСТВУЮЩЕМУ В ВЫПОЛНЕНИИ
ИССЛЕДОВАНИЙ
Исследования могут выполнять специалисты не моложе 18 лет с высшим и средним
медицинским, биологическим или иным образованием, окончившие соответствующие
курсы специальной подготовки с освоением методов безопасной работы с патогенными
биологическими агентами (ПБА) 1-П групп патогенности
4. ПРИНЦИП МЕТОДА
Идентификации возбудителей кокцидиоидомикоза и гистоплазмоза в выделенных
культурах микромицетов и биологическом материале осуществляется методом РИГА.
Находящие в исследуемой пробе антигены возбудителей кокцидиоидомикоза и
гистоплазмоза связываются со специфичными к ним антителами, иммобилизованными на
поверхности эритроцитов. В результате такого взаимодействия эритроциты выпадают на
дно лунки равномерным слоем в виде зонтика (положительный ответ).
При отсутствии в пробе антигенов возбудителей кокцидиоидомикоза и гистоплазмоза
связывания с эритроцитами не происходит и они оседают на дно лунки в виде «пуговки»
или колечка с ровным краем (отрицательный ответ).
--- стр. 2 ---
5. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА
В состав медицинского изделия «Набор реагентов. Диагностикум эритроцитарный
кокцидиоидомикозный и гистоплазмозный иммуноглобулиновый сухой» входит 5
реагентов:
NN
п/п
Реактив Описание Объе
м
(мл)
Кол-
во
ампул
1 Диагностикум
эритроцитарный
кокцидиоидомикозный и
гистоплазмозный
иммуноглобулиновый сухой
10%
Аморфная масса в виде таблетки
коричнево-красного цвета. После
растворения - гомогенная взвесь
коричнево-красного цвета. При
отстаивании образуется 2 слоя:
прозрачная бесцветная надосадочная
жидкость и осадок коричнево
красного цвета, разбивающийся при
встряхивании
1,0 5
Ч
2 Взвесь инактивированной
культуры возбудителя
кокцидиоидомикоза 1 • 10^
кл/мл
Прозрачная бесцветная или
беловатого цвета жидкость с осадком
на дне, при встряхивании
гомогенная взвесь белого цвета
>
1,0 Г-1—
(
3 Эритроциты барана
формалинизированные 50 %
Г омогенная взвесь темно-
коричневого цвета. При отстаивании
образуется 2 слоя - осадок темно-
коричневого цвета, разбивающийся
при встряхивании, и бесцветная
прозрачная надосадочная жидкость
1,0 2
4 Сыворотка
кокцидиоидомикозная
агглютинирующая козья
сухая 1:10
Сухой препарат - аморфная масса
белого цвета, может иметь
желтоватый оттенок, при
растворении - прозрачная
опалесцирующая бесцветная или с
желтоватым оттенком жидкость
1,0 1
5 Сыворотка нормальная
кроличья сухая
Сухой препарат - аморфная масса в
виде таблетки кремового цвета, при
растворении - опалесцирзлощая
прозрачная бесцветная или с
желтоватым оттенком жидкость
1,0 1 •
М м е __________
Набор рассчитан на проведение исследований 165 проб в микроварианте или 30 проб
в макроварианте при постановке РИГА в полном ряду.
--- стр. 3 ---
6. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ*
Наименование Основные характеристики или обозначения
документации, производитель
Ламинарный бокс биологической
безопасности класс ПВ
Ламинарный бокс биологической безопасности
класс II БАВп-«Ламинар-С-1,2», «Ламинарные
системы», Россия
Термостат электрический
суховоздушный
ТС-80 М-2, СПУ ОАО «Смоленское СКТБ СПУ» г.
Смоленск
рН-метр-милливольтметр рН-211, Hanna instruments, Румыния
Центрифуга настольная Центрифуга на 18000 об/мин, "Sigma 3-18К", Сигма,
США
Пипетки стеклянные мерные Объемом до 1 мл, 5 мл. ГОСТ 29228-91
Дозатор одноканальный 20-200 мкл ILS (САРР), Дания
Дозатор восьмиканальный 20-200
мкл
ILS (САРР), Дания
Штатив-подставка для дозаторов Штатив-подставка для дозаторов универсальная на
5 дозаторов, «Хеликон», Россия
Наконечники универсальные для
дозаторов переменного объемом с
аэрозольным барьером до 200 мкл
ФСЗ 2012/11892 «Axygen», США j
i
Холодильник бытовой от 2 до 8 С с
морозильной камерой не выше
минус 18 °С для хранения реактивов
ОАО «Айсберг», г. Смоленск
Планшеты для иммунологических
реакций
V-образные лунки для постановки реакции в
микроварианте (объем 0,2 мл); сферические лунки—
для макроварианта (объем 1 мл) ТУ 64-2-278-79
Одежда одноразовая медицинская
из нетканого и полимерного
материалов
РЗН 2013/668
Перчатки медицинские
диагностические одноразовые.
Часть 1. Спецификация на перчатки
из ка)шукового латекса или
раствора
ГОСТ Р 52239-2004
•
Натрий хлористый ГОСТ 4233-77
Вода дистиллированная ГОСТ 6709-72
Формалин технический ГОСТ 1625-89
Отраслевой стандартный образец
мутности ФГБУ «НЦЭСМП»
Минздрава России
ОСО 42-28-85, ЮМЕ
* Примечание: допускается применение оборудования другого типа, по своим
характеристикам не уступающего рекомендуемому.
--- стр. 4 ---
7. УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА
Условия хранения при температуре от плюс 2 до плюс 8 °С. Срок годности - 2 года.
Транспортирование в соответствии с СП 3.3.2.2329-08 "Условия транспортирования и
хранения медицинских иммунобиологических препаратов" Изменения и дополнения N 1 к
СП 3.3.2.1248-03 при температуре от плюс 2 до плюс 8 °С. Допускается
транспортирование при температуре не выше плюс 25 °С не более 5 суток.
8. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ
Изделие с истекшим сроком годности использованию не подлежит.
Работу проводят в соответствии с СП 1.3.3118-13 “Безопасность работы с
микроорганизмами 1-11 групп патогенности (опасности)”.
Уничтожение серий наборов реагентов с истекшим сроком годности, а также их
компонентов, оставшихся после использования, осуществляют в соответствии с СанПиН
2.1.7.2790-10.
9. АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ
Материалом для исследования служат; суспензии культур возбудителей
кокцидиоидомикоза и гистоплазмоза или подозрительных изолятов; сыворотка крови,
мокрота, промывные воды бронхов, суспензии органов экспериментальньк животных.
Образцы для исследования забирают в стерильные емкости с г1^рметично
завинчивающимися крышками в соответствии с требованиями СП 1.3.3118 - 13
«Безопасность работы с микроорганизмами 1-П групп патогенности», МУ 4.2.2039-05
«Техника сбора и транспортирования биоматериалов в микробиологические
лаборатории». ' '
Транспортирование материала в лабораторию проводят при температуре от плюс
2 до плюс 8 °С в соответствии с СП 1.2.036 - 95 «Порядок учета, хранения, передачи и
транспортирования микроорганизмов 1-1У групп патогенности».
9.1 Чистые культуры микроорганизмов
Подлежащие идентификации микроорганизмы и материал от больных засевают в
пробирки или матрацы на агар Сабуро, содержащий левомицетин в концентрации 50
мг/л среды, и культивируют при температуре (28±1) °С в течение 30 - 45 сут. Из культур
микромицетов или подозрительных изолятов готовят суспензии в 2 мл 0,15 М раствора
натрия хлористого по отраслевому стандартному образцу мутности 10 единиц ФГБУ
«НЦЭСМП» (ОСО 42-28-85-П (ЮМЕ). Приготовленную взвесь разводят 1:10 до
концентрации 110*кл/мл (0,1 мл исходной взвеси и 0,9 мл 0,15 М раствора хлорида
натрия) и исследуют в РИГА.
I
9.2 Пробы сыворотки крови
Сыворотку крови после образования сгустка отбирают пастеровской пипеткой в
отдельную пробирку, консервируют добавлением мертиолата натрия в конечной
концентрации 1:10000 (10 мкл 1%-ного раствора мертиолата натрия на 1 мл сыворотки) и
прогревают на водяной бане при 56 °С в течение 30 мин. Проведение исследований
осуществляют с соблюдением требований биологической безопасности, обусловленных
видовыми особенностями ПБА, в соответствии с п. 2.6.19 СП 1.3.3118-13 «Безопасность
работы с микроорганизмами 1-П групп патогенности (опасности)».
Пробы сывороток адсорбируют добавлением 50%-ной взвеси
формалинизированных эритроцитов барана (0,1 мл взвеси эритроцитов на 1 мл сыворотки
крови) с инкубацией в течение 30 мин при температуре (37±1) °С или в течение 24 ч при
комнатной температуре. Эритроциты осаждают центрифугированием в режиме 2500-3000
об/мин в течение 5 мин. Полученную инактивированную и адсорбированную сыворотку
разводят 1:5 с помощью 0,15 М раствора хлорида натрия (к 1,0 мл сыворотки добавляют 4
мл 0,15 М раствора хлорида натрия), после чего исследуют в РИГА.
--- стр. 6 ---
жидком виде препарат сохраняет активность в течение 3 суток хранения при температуре
(6±2)“ с.
Перед проведением реакции жидкий диагностикум тщательно встряхивают до
образования равномерной взвеси. При наличии неразбивающихся частиц диагностикум
непригоден для работы.
10.2.2 Для проведения РИГА прилагаемую инактивированную взвесь возбудителя
кокцидиоидомикоза (положительный контроль) разводят 1:10, получая
о
концентрацию! 10 кл/мл.
10.2.3 Кокцидиоидомикозную сыворотку, высушенную в разведении 1:10, растворяют
в 1 мл дистиллированной воды. После полного растворения ее дополнительно разводят
0,15 М раствором натрия хлорида pH (7,2±0,2) до 1:50, после чего используют в РТНГА.
10.2.4 Приготовление разводящей жидкости (сыворотка нормальная кроличья).
Нормальную кроличью сыворотку сухую (НКС) растворяют в 1 мл дистиллированной
воды, после полного растворения доводят до 10 мл 0,15 М раствором натрия хлорида pH
(7,2±0,2), а затем инактивируют нагреванием на водяной бане при температуре (56 ±1) °С
в течение (30±2) мин. Для получения 1 % раствора НКС ее разводят еще в 10 раз (до 100
мл) 0,15 М раствором натрия хлорида pH (7,2±0,2) и добавляют формалиш^/го конечной
концентрации 1 %.
10.2.5 Ингредиенты в рабочих разведениях пригодны к применению в течение 1
недели при хранении их при температуре (6±2) °С. |
'1 1
10.3 Проведение серологических реакций: ' ’
Для исследования одной пробы используется 1 ряд лунок планщеты для
иммунологических реакций. В каждой планщете необходима постановка положительного
контроля (1 ряд) с инактивированной взвесью возбудителя кокцидиоидомикоза
МО^кл/мл. Для подтверждения специфичности положительного результата РИГА
проводят реакцию ее торможения (РТНГА). Целесообразно проводить РИГА и РТНГА
одновременно.
10.3.1 РИГА (микрометод). В соответствии с количеством исследуемых образцов в
ряды планшета (во все лунки) вносят по 0,05 мл 1 % раствора НКС. Затем в первые лунки
дозатором вносят по 0,05 мл исследуемого образца или положительного контроля в
концентрации Г10* кл/мл и делают последовательные двукратные разведения переносом
по 0,05 мл из лунки в лунку включительно до 11 лунок, исключая последнюю
(отрицательный контроль диагностикума). Из 11-х лунок лишние 0,05 мл удаляют.^ Затем
во все лунки дозатором добавляют по 0,025 мл 1% диагностикума эритроцитарного
кокцидиоидомикозного и гистоплазмозного иммуноглобулинового, после чего пластины
аккуратно встряхивают и оставляют при температуре (22±4) °С. Учет результатов
проводят предварительно через 2 - 4 ч, окончательно - на следующие сутки.
10.3.2 Постановка РТНГА (микрометод). Для подтверждения специфичности
положительного результата РИГА необходимо провести реакцию ее т(1ртаожения. В
соответствии с количеством исследуемых образцов в ряды планщета (во все лунки) вносят
по 0,05 мл 1 % раствора НКС. Затем в первые лунки дозатором вносят по 0,05 мл
исследуемого образца или положительного контроля в концентрации Г Ю* кл/мл и делают
последовательные двукратные разведения переносом по 0,05 мл из лунки в лунку
включительно до 11 лунок, исключая последнюю - отрицательный контроль
диагностикума. Из 11-х лунок лищние 0,05 мл удаляют. Во все лунки дозатором
добавляют по 0,025 мл сыворотки кокцидиоидомикозной агглютинирующей козьей в
разведении 1:50. Пластины оставляют на 1 ч при температуре (37±0,5) °С или на 1,5 ч при
--- стр. 7 ---
температуре (22±4) °С, затем в каждую лунку добавляют по 0,025 мл 1 % диагностикума,
пластины аккуратно встряхивают и оставляют при температуре (22±4) °С. Учет
результатов РТНГА проводят через (2,5±0,5) ч.
10.3.3 РИГА (макрометод). В соответствии с количеством исследуемых образцов в
ряды планшета (во все лунки) вносят по 0, 5 мл 1 % раствора НКС. Затем в первые лунки
дозатором или мерной пипеткой вносят по 0,5 мл исследуемого образца или
положительного контроля в концентрации 1-10*кл/мл и делают последовательные
двукратные разведения переносом по 0,5 мл из лунки в лунку включительно до 11 лунок,
исключая последнюю - отрицательный контроль диагностикума. Из 11-х лунок лишние
0,5 мл удаляют. Затем во все лунки дозатором или мерной пипеткой добавляют по 0,05 мл
2,5 % диагностикума эритроцитарного кокцидиоидомикозного и гистоплазмозного
иммуноглобулинового, после чего пластины аккуратно встряхивают и оставляют при
температуре (22±4) °С. Учет результатов проводят предварительно через 2 - 4 ч,
окончательно - на следующие сутки.
10.3.4 Постановка РТНГА (макрометод). Для подтверждения специфичности
положительного результата РИГА необходимо провести реакцию ее торможения. В
соответствии с количеством исследуемых образцов в ряды планшета (во все лунки) вносят
по 0,5 мл 1 % раствора НКС. Затем в первые лунки дозатором или мерной пипеткой
вносят по 0,5 мл исследуемого образца или положительного контроля в‘^концентрации
1-10*кл/мл и делают последовательные двукратные разведения переносом по 0,5 мл из
лунки в лунку включительно до 11 лунок, исключая последнюю - отрицательный
контроль диагностикума. Из 11-х лунок лишние 0,5 мл удаляют. Во все лунки дозатором
или мерной пипеткой добавляют по 0,05 мл сыворотки к о к ц и д и о и д ф м и к о з н о й
агглютинирующей козьей в разведении 1:50. Пластины оставляют на 1 ч при температ]^ре
(37±0,5) °С или на 1,5 ч при температуре (22±4) °С, затем в каждую лунку добавляют по
0,05 мл 2,5 % диагностикума, пластины аккуратно встряхивают и оставляют при
температуре (22±4) °С. Учет результатов РТНГА проводят через (2,5±0,5) ч.
11. УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ
Результат РИГА считают положительным, если эритроциты выпадают на дно
лунки равномерным слоем в виде зонтика, занимая не менее 2/3 диаметра сферической
поверхности в лунке (в ряде случаев может быть отмечено фестончатое оползание краев
агглютината).
Результат считают отрицательным, если эритроциты выпадают на дно лунки в
виде “пуговки” или колечка с ровным краем.
В лунке контроля диагностикума результат должен быть отрицательным.
Результаты РИГА учитывают при наличии четких контролей. Титром реакции
считают лунку с максимальным разведением исследуемого материала, в которой
зарегистрирован положительный результат.
РИГА считают специфичной в тех случаях, когда в РТНГА число лунок с
положительной гемагглютинацией сократилось не менее чем на 3 - 4 лунки.
^.АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
12.1 Аналитическая чувствительность
Набор должен выявлять в микроварианте РИГА возбудителей кокцидиоидомикоза
и гистоплазмоза в концентрации 3,1210® кл/мл, в макроварианте РИГА - 1,56-10® кл/мл.
12.2 Аналитическая специфичность
Диагностикум не должен выявлять в РИГА гетерологичные микромицеты в
концентрации 5 10^ кл/мл.
12.3 Диагностическая чувствительность
Диагностическая чувствительность - не менее 99.0 % с доверительной
--- стр. 8 ---
вероятностью 90 % при анализе 264 проб, содержащих суспензии микромицетов
C.immitis, С. posadasii, Н. capsulatum в концентрации 3,12x10^ кл/мл при использовании
микроварианта РИГА и в концентрации 1,56x10^ кл/мл при использовании макроварианта
РНГА12.4 Диагностическая специфичность
Диагностическая специфичность - не менее 98 % с доверительной вероятностью
90%, при исследовании 264 образцов, содержащих С. immitis, С. posadasii, Н. capsulatum и
128 образцов, содержащих гетерологичные микроорганизмы {Candida guillermondii,
Candida parapsilosis, Cryptococcus neoformans, Rhodotorula mucilaginosa, Absidia
(Mycocladus) hyalospora, Aspergillus flavus, Aspergillus fumigatus, Fusarium avenaceum,
Fusarium culmorum, Fusarium sambucinum, Gibberella zeae, Geotrichum candidum,
Malbranchea manginii, Paecilomyces variottii. Pénicillium citreoviridae. Pénicillium citrinum.
Pénicillium chrysogenum, Phialophora verrucosa, Rhizopus microsporus, Scopulariopsis
brevicaulis, Trichophyton crateriforme, Brucella suis, Yersinia pseudotuberculosis. Yersinia
enterocolitica, Burkholderia pseudomallei, Burkholderia mallei).
13. БЕЗОПАСНАЯ УТИЛИЗАЦИЯ
Уничтожение неиспользованных компонентов набора или наборов реагентов с
истекщим сроком годности проводить в соответствии с СанПиН 2.1.7.2790-1-,0.
14. ГАРАНТИИ И ИНФОРМАЦИЯ О ПРОИЗВОДИТЕЛЕ
Производитель гарантирует сохранение качества «Набора реагентов. Диагностикум
эритроцитарный кокцидиоидомикозный и гистоплазмозный иммуноглобулиновый сухой»
в течение срока хранения при условии надлежащего вьщолнения потребителем
требований по транспортированию, хранению и применению медицинского издел| 1я,
установленных техническими условиями и инструкцией по применению.
Федеральное казенное учреждение здравоохранения «Волгоградский научно-
исследовательский противочумный институт Федеральной службы по надзору в сфере
защиты прав потребителей и благополучия человека (ФКУЗ ВолгоградНИПЧИ
Роспотребнадзора) (400131, г. Волгоград, ул. Голубинская, 7, тел. (8442) 37-37-74).
Зав. ЛБТК ФКУЗ Волгоградский
научно-исследовательский противочумный
институт Роспотребнадзора Прохватилова Е.В.
Директор ФКУЗ «Российский
НИПЧИ «Микроб» Роспотребнадзора
академик РАН, д.м.н., профессор