Набор реагентов для определения ДНК Chlamydia trachomatis и Mycoplasma genitalium методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) для диагностики in vitro "АмплиПрайм® CT/MG" по ТУ 9398-012-09286667-2014 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 --- «УТВЕРЖДАЮ» Генеральный директор Общества с ограниченной ответ ственностью «НекстБио» В. М. Трухан 2015 г. ИЗВЕЩЕНИЕ ОБ ИЗМЕНЕНИИ № 2/012-2015 Инструкции по применению набора реагентов для определения ДНК Chlamydia trachomatis и Mycoplasma genitalium методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) для диагностики in vitro «АмплиПрайм® СТ/M G» --- стр. 2 --- ООО «НекстБио» 09286667 2/012-2015 Инструкции по применению набора реагентов для определения ДНК C hlam ydia trachom atis и M ycoplasm a genitalium методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) для диагностики in vitro «АмплиПрайм® СТ/M G » Дата выпуска 21.08.2015 Лист 2 Листов 7 в разделе Принцип метода уточнена фраза об инактивации УДГ L-C л Т Т П V VnriT » ■ » ^ ■ в ^ ж г ^ ж ~ ж ж л ж ш ж . . ^ ~ -ш ж. . . . . . . . ^ ____ _ _ _ _ _ _ _________- ПРИЧИНА 1. 2. В разделе Аналитические характеристики изменены значения аналитиче ской чувствительности для микроорганизма М. Genitalium в образцах от- деляемого конъюнктивы. 3. В разделе Диагностические характеристики изменены значения диагно стических характеристик (специфичности и чувствительности) на значе ния, полученные в результате клинико-лабораторных испытаний, с дове- рительной вероятности 9 5 % ________________________________________ 4. В разделе Меры предосторожности формулировки «всегда следует» и «следует рассматривать» заменены на «необходимо всегда» и «рассматри вать» 5. В разделе Меры предосторожности дополнены сведения об описание утилизации или уничтожения упаковки, биологического материала, включая материалы, инструменты и предметы, загрязненные биологиче- ским материалом с отдельным описанием правил 6. В разделе Дополнительные материалы и оборудование уточнено, что комплект расходных материалов для автоматической станции для экс- тракции НК должен соответствовать инструкции Производителя 7. В разделе Взятие, транспортировка и хранение исследуемого материала добавлено описание действий в случае невозможности обломить рабочую часть зонда 8. В разделе Взятие, транспортировка и хранение исследуемого материала исправлены стилистические ошибки 9. В разделе Подготовка исследуемого материала к экстракции ДНК формули- ровка «12 об/мин» заменена на «12 тыс об/мин»_________________________ 10. В разделе Формы комплектации 1. 2.3 «Амплификация с детекцией по «ко нечной точке» добавлено описание постановки отрицательного контроля в случае, если экстракция проводилась с помощью «АмплиПрайм ЭДЭМ» 11. В разделе Формы комплектации 1. 2. 3 «Амплификация с детекцией по «ко нечной точке» в таблицах 7 и 11 формулировка «Выше или ниже порогово- го значения» заменена на «Не учитывается» ___________________________ 12. В разделе Формы комплектации 1. 2. 3 «Возможные ошибки» добавлено описание действий в случае, если для ОК отсутствует сигнал по каналу для флуорофора ROX.__________________________________________________ 13. В разделе Формы комплектации 1. 2. 3 «Возможные ошибки» исправлены стилистические ошибки Код 3 Код 5 Код 5 Код 7 Код 3 Код 3 Код 3 Код 7 Код 7 Код 3 КодЗ Код 3 Код 7 --- стр. 3 --- b o o «НекстБио» 09286667 2/012-2015 Инструкции по применению набора реагентов для определения ДНК C hlam ydia trachom atis и M ycoplasm a genitalium методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) для диагностики in vitro «АмплиПрайм® СТ/M G » Дата выпуска 21.08.2015 Лист 3 Листов 7 изм. СОДЕРЖАНИЕ ИЗМЕНЕНИЯ Раздел «Принцип метода» Стр. 4 Фермент УДЕ термолабилен и инактивируется при нагревании выше 50 °С. УДЕ полностью инактивируется на первом шаге термоцтслнровання во время прогрева при температуре 95 °С и-поэтому но разрушает ампликоны мишени, нарабатываемые о процессе ПЦР. и поэтому не разрушает ампликоны мишени, нарабатываемые в процессе ПЦР. Изменение ввести заменой стр. 4 инструкции по применению Раздел «Аналитические характеристики» В ид исследуе- ашд Т р а н ш о р т н а и среда К о м п л ж т д л я Э К Е С - т р а к ц и и Д Н К М и к р о о р га - „ н ш м А н а л и т и ч е с к а я ч у в с т в и т е л ь н о с т ь , Г Э /м л .... ... .... .... отделяемое конъюнктивы «АмплиПрайм ТС» или «АмплиПрайм тем» или «Транспортная сре да ТС-ЭДЭМ»^ «АмплиПрайм ДНК- сорб-АМ», «Ам- плиПрайм* МАТНО- сорб-УРО» с. tr a c h o m a tis 5x10^ М. g e n ita liu m 2x20^ Не применяется** «Транспортная среда ТС-ЭДЭМ»^ «АмплиПрайм ЭДЭМ» С. tr a c h o m a tis 5x10^ М, g e n ita liu m 4*40^ Не применяется"* Добавлена ссылка 4: 4. Выявление данного микроорганизма в указанном виде биоматериала не имеет клинического значения. Изменение ввести заменой стр. 6 инструкции по применению Раздел «Диагностические характеристики» Стр. 7 и 8 Значения диагностических характеристик (специфичности и чувствительности), с доверитель ной вероятности 95% в таблицах 3 и 4, а так же в тексте инструкции изменены на значения, полученные в результате клинико-лабораторных испытаний Изменение внести заменой стр. 7 и 8 инструкции по применению Раздел «Меры предосторожности» Стр. 8 При работе всегда следу ет выполнять следующие требовшшя: При работе необходимо всегда выполнять следующие требования Изменение внести заменой стр. 8 инструкции по применению Раздел «Меры предосторожности» Стр. 9 Неиспользованные реагенты, реагенты с истекшим сроком годности, а таюке попользованные реагенты, реагенты, реагенты с истекшим сроком годности, а также использованные реагенты, упаковку, биологический материал, включая материалы, инструменты и предметы, загрязненные биологическим материалом, следует удалять в соответствии с требованиями СанПиН 2.1.7.2790-10 «Санитарно- эпидемиологические требования к обращению с медицинскими отходами». __________________ --- стр. 4 --- ООО «НекстБио» 09286667 2/012-2015 Инструкции по применению набора реагентов для определения ДНК Chlam ydia trachom atis и M ycoplasm a genitalium методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) для диагностики in vitro «АмплиПрайм® СТ/M G » Дата выпуска 21.08.2015 Лист 4 Листов 7 Изменение ввести заменой стр. 9 инструкции по применению Раздел «Дополнительные материалы и оборудование» Стр. И 19.Комплект расходных материалов для автоматической станции для экстракции НК. 19.Комплект расходных материалов для автоматической станции для экстракции НК согласно инструкции Производителя. Изменение ввести заменой стр. 11 и 12 инструкции по применению Раздел «Взятие, транспортировка и хранение исследуемого материала» Сто. 13-16 В подразделы «Мазки со слизистой оболочки влагалища», «Соскобы эпителия со слизистой оболочки уретры». «Мазки с конъюнктивы» добавлено: В случае невозможности обломить рабочую часть зонда, следует максимально полно смыть биоматериал с рабочей части в пробирку с транспортной средой, прижав ее к внутренней сто роне пробирки и вращая по 5— 10 раз по часовой и против часовой стрелки. Недопустимо ис пользование ножниц для обрезания рабочей части зонда! Изменение ввести заменой стр. 13-16 инструкции по применению Раздел «Взятие, транспортировка и хранение исследуемого материала» Сто. 13 Подраздел «Мазки со слизистой оболочки влагалища» Рабочую часть зонда тампона зонда, содержащую исследуемый материал, обломить и оставить в пробирке с транспортной средой. Стр. 15 Подраздел «Моча» У женщин для анализа отбирают первую порцию утренней мочи в количестве 15-25 мл в спе циальный сухой стерильный флакон или контейнер на объемом 50-60 мл. У мужчин при температуре минус 20 °С— в течение 1 недели; при температуре минус от минус 24 до минус 16 °С - в течение 1 недели; Изменение ввести заменой стр. 13-16 инструкции по применению Раздел «Подготовка исследуемого материала к экстракции ДНК» Сто. 17 Центрифугировать 5 минут при 10 тыс g (например, 12 об/мин для мнкроцеитрифугн MiniSpin, Eppendorf Manufacturing Corporation). Центрифугируют 5 минут при 10 тыс g (например, 12 тыс об/мин для микроцентрифуги MiniSpin, Eppendorf Manufacturing Corporation). Изменение ввести заменой стр. 17 инструкции по применению --- стр. 9 --- «УТВЕРЖДАЮ» Генеральный директор Общества с ограниченной ютью «НекстБио» В.М. Трухан 2015 г. ИНСТРУКЦИЯ по применению набора реагентов для определения ДНК Chlamydia trachomatis и Mycoplasma genitalium методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) для диагностики in vitro «АмплиПрайм® СТ/MG» АмплиПрайм® ш Л ООО «НекстБио», Российская Федерация, 111394, город Москва, улица Полимерная, дом 8, стр. 2 IVD --- стр. 10 --- ОГЛАВЛЕНИЕ СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ ....................................................................................................................................^ НАЗНАЧЕНИЕ............................................................................................................................................................^ ПРИНЦИП МЕТОДА...............................................................................................................................................^ ФОРМЫ ВЫПУСКА НАБОРА РЕАГЕНТОВ...............................................................................................5 АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ....................................................................................................5 ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ..............................................................................................7 МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ........................................................................................................................8 ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ МАТЕРИАЛЫ И ОБОРУДОВАНИЕ...............................................................Ю ВЗЯТИЕ, ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ И ХРАНЕНИЕ ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛА .......13 ПОДГОТОВКА ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛА К ЭКСТРАКЦИИ ДНК ................................17 ИНТЕРФЕРИРУЮЩИЕ ВЕЩЕСТВА И ОГРАНИЧЕНИЯ ПО ИСПОЛЬЗОВАНИЮ ПРОБ ИССЛЕДУЕМОГО МАТЕРИАЛА....................................................................................................................18 ПРОВЕДЕНИЕ ПЦР-ИССЛЕДОВАНИЯ......................................................................................................18 ЭКСТРАКЦИЯ ДНК ИЗ ИССЛЕДУЕМЫХ ОБРАЗЦОВ .......................................................................18 ФОРМЫ КОМПЛЕКТАЦИИ 1 и 2 («ПЦР-комплект» вариант FEP-100-0,2 или ЕЕР-100-0,5) .........................................................................................................................................................................................20 СОСТАВ......................................................................................................................................................................20 АМПЛИФИКАЦИЯ С ДЕТЕКЦИЕЙ ПО «КОНЕЧНОЙ ТОЧКЕ»....................................................20 A. Подготовка пробирок для амплификации.........................................................................................20 Б. Проведение амплификации.......................................................................................................................22 B. Флуоресцентная детекция продуктов амплификации по «конечной точке» ......................22 Г. Интерпретация результатов......................................................................................................................23 Возможные ошибки................................................................................................. 24 ФОРМА КОМПЛЕКТАЦИИ 3 (комплекты реагентов «АмплиПрайм® МАГНО-сорб-УРО» и «ПЦР-комплект» вариант ЕЕР-100-0,2)..........................................................................................................26 СОСТАВ.....................................................................................................................................................................26 АМПЛИФИКАЦИЯ С ДЕТЕКЦИЕЙ ПО «КОНЕЧНОЙ ТОЧКЕ» ....................................................27 A. Подготовка пробирок для амплификации.........................................................................................27 Б. Проведение амплификации.......................................................................................................................28 B. Флуоресцентная детекция продуктов амплификации по «конечной точке» ......................28 Г. Интерпретация результатов......................................................................................................................29 Возможные ошибки................................................................................................................................................20 СРОК ГОДНОСТИ. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ И ХРАНЕНИЯ .................................32 ГАРАНТИЙНЫЕ ОБЯЗАТЕЛЬСТВА ПРОИЗВОДИТЕЛЯ...................................................................32 СИМВОЛЫ, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В ПЕЧАТНОЙ ПРОДУКЦИИ........................................................33 ПРИЛОЖЕНИЕ 1.....................................................................................................................................................24 стр. 2 из 36 --- стр. 11 --- список СОКРАЩЕНИЙ В настоящей инструкции применяются следующие сокращения и обозначения: BKO-FL - экзогенный внутренний контрольный образец ГЭ - геномные эквиваленты ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота дНТФ - дезоксирибонуклеотидтрифосфат ИППП - инсЬекции, передаваемые половым путем К+ - положительный контроль ПЦР К- - отрицательный контроль ПЦР НК - нуклеиновые кислоты ОК - отрицательный контроль экстракции_______________________ ОКО - отрицательный контрольный образец ПЦР - полимеразная цепная реакция РУ - регистрационное удостоверение УДГ - урацил-ДНК-гликозилаза_________________________________ FEP - сЬлуоресцентная детекция по «конечной точке» НАЗНАЧЕНИЕ Набор реагентов «АмплиПрайм® CT/MG» предназначен для качественного определения ДНК Chlamydia trachomatis и Mycoplasma genitalium в биологическом материале (отделяемое слизистых оболочек влагалища, цервикального канала, уретры, конъюнктивы; моча, секрет предстательной железы) методом ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией продуктов амплификации. Набор реагентов используется в клинической лабораторной диагностике для исследования биологического материала, полученного от лиц с подозрением на хламидийную инфекцию нижних отделов мочеполового тракта, хламидийный конъюнктивит, цервицит, уретрит и вагинит вызванные М. genitalium. Материалом для проведения ПЦР служат пробы ДНК, экстрагированные из исследуемого материала с помощью комплектов реагентов, рекомендованных Производителем. ВНИМАНИЕ! В соответствии с федеральным законом от 21.11.2011 № 323-ФЗ «Об основах охраны здоровья граждан в Российской Федерации» ПЦР-исследование является одним из методов всестороннего обследования пациента, на основании которых лечащий врач устанавливает диагноз и выбирает мероприятия по лечению пациента. стр. 3 из 36 --- стр. 12 --- ПРИНЦИП МЕТОДА Принцип тестирования основывается на экстракции ДНК из образцов исследуемого материала совместно с внутренним контрольным образцом (BKO-FL ) и одновременной амплификации участков ДНК выявляемых микроорганизмов и ДНК BKO-FL с гибридизационно-флуоресцентной детекцией по «конечной точке». BKO-FL позволяет контролировать все этапы ПЦР-исследования для каждого образца и оценивать влияние ингибиторов на результаты ПЦР-исследования. С полученными на этапе экстракции пробами ДНК проводится реакция амплификации участка ДНК при помощи специфичных к этому участку праймеров и фермента Taq-полимеразы. В составе реакционной смеси присутствуют флуоресцентно-меченые олигонуклеотиды, которые гибридизуются с комплементарным участком амплифицируемой ДНК-мишени, в результате чего происходит нарастание интенсивности флуоресценции. Это позволяет регистрировать накопление специфического продукта амплификации путем измерения интенсивности флуоресцентного сигнала. Детекция флуоресцентного сигнала осуществляется после окончания ПЦР с помощью флуоресцентного ПЦР- детектора. Н1абор реагентов содержит систему защиты от контаминации ампликонами за счет применения фермента урацил-ДН1К-гликозилазы (УДГ) и трифосфата дезоксиуридина. Фермент УДГ распознает и катализирует разрушение цепей ДНК, содержащих дезоксиуридин, но не ДНК, содержащей дезокситимидин, Дезоксиуридин отсутствует в природной ДНК, но всегда присутствует в ампликонах, поскольку трифосфат дезоксиуридина входит в состав смеси дНТФ в реагентах для амплификации. Дезоксиуридин делает контаминирующие ампликоны восприимчивыми к разрушению ферментом УДГ до начала амплификации ДНК- мишени, и, следовательно, они не могут быть в дальнейшем амплифицированы. Фермент УДГ термолабилен и инактивируется при нагревании выше 50 °С и поэтому не разрушает ампликоны мишени, нарабатываемые в процессе ПЦР. На этапе амплификации одновременно в одной пробирке проводятся 3 реакции — амплификация участков ДНК С. trschomstis и М. genitdliuni, а также амплификация последовательности BKO-FL. Результаты амплификации ДНК С. trachomatis и М. genitalium, а также ДНК BKO-FL регистрируются по 3 различным каналам флуоресцентной детекции: ’ BKO-FL входит в состав комплекта реагентов, рекомендованного Производителем для экстракции ДНК из каждого исследуемого материала. стр. 4 из 36 --- стр. 13 --- Таблица 1 Канал для флуорофора FAM JOE ROX ДНК-мишень ДНК с. trachomatis ДНК М . genitalium ДНК BKO-FL Область амплификации cryptic plasmid дугВ gene искусственно синтезированная последовательность ФОРМЫ ВЫПУСКА НАБОРА РЕАГЕНТОВ Набор реагентов выпускается в 3 формах комплектации: Форма 1 включает комплект реагентов «ПЦР-комплект» вариант FEP-100-0,2 (пробирки 0,2 мл). Форма 2 включает комплект реагентов «ПЦР-комллект» вариант FEP-100-0,5 (пробирки 0,5 мл). Форма 3 включает комплекты реагентов «АмплиПрайм® МАГНО-сорб-УРО» и «ПЦР- комплект» вариант FEP-100-0,2 (пробирки 0,2 мл). Формы комплектации 1, 2 предназначены для проведения амплификации ДНК с гибридизационно-флуоресцентной детекцией по «конечной точке» и позволяют выявлять ДНК в качественном формате. Для лроведения полного ПЦР- исследования необходимо ислользовать комплекты реагентов для экстракции ДНК, рекомендованные Производителем. Форма комплектации 3 предназначена для проведения полного ПЦР- исследования, включающего экстракцию ДНК из биологического материала и амплификацию ДНК с гибридизационно-флуоресцентной детекцией по «конечной точке», и позволяет выявлять ДНК в качественном формате. АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ Для данного набора реагентов применимы следующие характеристики; Аналитическая чувствительность Таблица 2 Вид исследуемого материала Транспортная среда Комплект для экстракции ДНК Микроорганизм Аналитическая чувствительность, ГЭ/мл* отделяемое слизистых оболочек «АмплиПрайм тс» или «АмплиПрайм «АмплиПрайм ДНК-сорб-АМ», «АмплиПрайм® С. trachomatis 5x10^ ^ Количество геномных эквивалентов микроорганизма (ГЭ): — в биологическом материале (отделяемое слизистых оболочек влагалища, цервикального канала, уретры, конъюнктивы), помещенном в указанную транспортную среду, в пересчете на 1 мл; - в пересчете на 1 мл образца мочи или секрета предстательной железы. стр 5 из 36 --- стр. 14 --- влагалища, цервикального канала,уретры тем» или «Транспортная среда ТС- ЭДЭМ»^ МАГНО-сорб- УРО» М. genitalium 1x10^ «Транспортная среда ТС- ЭДЭМ»^ «АмплиПрайм ЭДЭМ» С. trachom atis 5x10^ М. genitalium 1x10^ отделяемое конъюнктивы «АмплиПрайм тс» или «АмплиПрайм тем» или «Транспортная среда ТС- ЭДЭМ»^ «АмплиПрайм ДНК-сорб-АМ»^, «АмплиПрайм® МАГНО-сорб- УРО» С. trachom atis 5x10^ М. genitalium Не применяется'' «Транспортная среда ТС- ЭДЭМ»^ «АмплиПрайм ЭДЭМ» С. trachom atis 5x10" М. genitalium Не применяется'* моча «АмплиПрайм ТС» или «АмплиПрайм тем» или «Транспортная среда ТС- ЭДЭМ»® «АмплиПрайм ДНК-сорб-АМ», «АмплиПрайм® МАГНО-сорб- УРО» С. trachom atis 1x10^ М. genitalium 2x1 «Т ранспортная среда ТС- ЭДЭМ»® «АмплиПрайм ЭДЭМ» С. trachom atis 1x10® М. genitalium 2x10® секрет предстательной железы - «АмплиПрайм ДНК-сорб-АМ», «АмплиПрайм® МАГНО-сорб- УРО» С. trachom atis 5x10" М. genitalium 1x10® Данная чувствительность достигается при соблюдении правил, указанных в разделах «Взятие, транспортирование и хранение исследуемого материала» и «Подготовка исследуемого материала к экстракции ДНК». Аналитическая чувствительность в отношении каждого из микроорганизмов сохраняется и в присутствии высокой концентрации ДНК второго анализируемого микроорганизма - до 10^ ГЭ/мл. Аналитическая специфичность Набор реагентов обнаруживает фрагменты ДНК заявленных микроорганизмов. Аналитическая специфичность набора реагентов доказана при исследовании ДНК следующих микроорганизмов; Gardnerelld vaginalis; Lactobacillus spp.; Escherichia coli, Staphylococcus aureus; Streptococcus pyogenes; Streptococcus agalactiae; Candida albicans; Candida glabrata; Candida krusei; Mycoplasma hominis; Ureaplasma urealyticum; Ureaplasma parvum; Neisseria flava; Neisseria subfiava; Neisseria sicca; Neisseria gonorrhoeae; Neisseria mucosa; Trichomonas vaginalis; Treponema pallidum; Toxoplasma gondii; HSV1 и 2 типа; CMV; HPV, a также геномной ДНК человека. ^ Форма комплектации 3 или 4 комплекта реагентов «АмплиПрайм ЭДЭМ». Выявление данного микроорганизма в указанном виде биоматериала не имеет клинического значения. стр. 6 из 36 --- стр. 15 --- При тестировании образцов ДНК вышеперечисленных организмов и ДНК человека неспецифических реакций выявлено не было. ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ Таблица 3 Результаты тестирования набора реагентов «АмплиПрайм® CT/MG» в сравнении с референтным методом Тип образцов Результаты применения набора реагентов «АмплиПрайм® CT/MG» Результаты применения референтного мeт<шa^ С. trachomatis М. genitalium положи тельных отрица тельных положи тельных отрица тельных Отделяемое слизистой оболочки влагалища Всего исследовано 500 образцов положи тельных 200 0 210 0 отрица тельных 0 300 0 290 Отделяемое слизистой оболочки цервикального канала Всего исследовано 545 образцов положи тельных 215 0 200 0 отрица тельных 0 330 0 345 Отделяемое слизистой оболочки уретры Всего исследовано 505 образцов положи тельных 212 0 203 0 отрица тельных 0 293 0 302 Отделяемое конъюнктивы Всего исследовано 340 образцов положи тельных 130 0 0 0 отрица тельных 0 210 0 340 Моча Всего исследовано 530 образцов положи тельных 200 0 220 0 отрица тельных 0 330 0 310 Секрет предстательной железы Всего исследовано 420 образцов положи тельных 201 0 205 0 отрица тельных 0 219 0 215 Были использованы 500 образцов отделяемого слизистых оболочек влагалища, 545 образцов отделяемого слизистых оболочек цервикального канала и 505 образцов отделяемого слизистых оболочек уретры, полученных от пациентов, обратившихся к врачу с симптомами урогенитальной инфекции; 340 образцов отделяемого конъюнктивы, полученных от пациентов с ее острым или хроническим воспалением; 530 образца мочи, полученных от мужчин с уретритом; 420 образцов секрета предстательной железы, полученных от пациентов с симптомами урогенитальной инфекции. ^ В качестве референтного метода использовались наборы реагентов «АмллиСенс Chlamydia trachomatis-FL» (РУ № ФСР 2009/06555) и «АмплиСенс® Mycoplasma genitalium-FL» (РУ № ФСР 2007/00580). стр. 7 из 36 --- стр. 16 --- Таблица 4 Диагностические характеристики набора реагентов «АмплиПрайм® CT/MG» * Тип образцов Диагностическая чувствительность® * (с доверительной вероятностью 95 %), не менее % Диагностическая специфичность’’ (с доверительной вероятностью 95 %), не менее % С. trachomatis М. genitalium С. trachomatis М. genitalium отделяемое слизистой оболочки влагалища 98,5 98,6 99,0 99,0 отделяемое слизистой оболочки цервикального канала 98,6 98,5 99,1 99,1 отделяемое слизистой оболочки уретры 98,6 98,6 99,0 99,0 отделяемое конъюнктивы 97,7 - 98,6 99,1 моча 98,5 98,6 99,1 99,0 секрет предстательной железы 98,5 98,5 98,6 98,6 МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ Работа должна проводиться в лаборатории, выполняющей молекулярно биологические (ПЦР) исследования биологического материала на наличие возбудителей инфекционных болезней, с соблюдением санитарно- эпидемиологических правил СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами 1II-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней», СанПиН 2.1.7.2790-10 «Санитарно-эпидемиологические требования к обращению с медицинскими отходами» и методических указаний МУ 1.3.2569-09 «Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности». При работе необходимо всегда выполнять следующие требования; - Рассматривать исследуемые образцы как инфекционно-опасные, организовывать работу и хранение в соответствии с СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами 1II-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней». - Убирать и дезинфицировать разлитые образцы или реагенты, используя дезинфицирующие средства в соответствии с СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами III-1V групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней». ® Относительная чувствительность в сравнении с использованным референтным методом. ^Относительная специфичность в сравнении с использованным референтным методом. стр. 8 из 36 --- стр. 17 --- Лабораторный процесс должен быть однонаправленным. Анализ проводится в отдельных помещениях (зонах). Работу следует начинать в Зоне Экстракции, продолжать в Зоне Амплификации и Детекции. Не возвращать образцы, оборудование и реагенты в зону, в которой была проведена предыдущая стадия процесса. - Неиспользованные реагенты, реагенты с истекшим сроком годности, а также использованные реагенты, упаковку, биологический материал, включая материалы, инструменты и предметы, загрязненные биологическим материалом следует удалять в соответствии с требованиями СанПиН 2.1.7.2790-10 «Санитарно-эпидемиологические требования к обращению с медицинскими отходами». ВНИМАНИЕ! При удалении отходов после амплификации (пробирок, содержащих продукты ПЦР) недопустимо открывание пробирок и разбрызгивание содержимого, поскольку это может привести к контаминации продуктами ПЦР лабораторной зоны, оборудования и реагентов. - Использовать и менять при каждой операции одноразовые наконечники для автоматических дозаторов с фильтром®. Одноразовую пластиковую посуду (пробирки, наконечники) необходимо сбрасывать в специальный контейнер, содержащий дезинфицирующее средство, которое может быть использовано для обеззараживания медицинских отходов. Поверхности столов, а также помещения, в которых проводится постановка ПЦР, до начала и после завершения работ необходимо подвергать ультрафиолетовому облучению в течение 30 мин. - Набор реагентов предназначен для одноразового применения для проведения ПЦР-исследования указанного количества проб (см. раздел «Состав»). - Набор реагентов готов к применению согласно данной инструкции. Применять набор реагентов строго по назначению. - К работе с набором реагентов допускается только персонал, обученный методам молекулярной диагностики и правилам работы в клинико-диагностической лаборатории в установленном порядке (СП 1.3.2322-08 «Безопасность работы с микроорганизмами II1-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней»). Не использовать набор реагентов, если нарушена внутренняя упаковка или внешний вид реагента не соответствует описанию. - Не использовать набор реагентов, если не соблюдались условия ® Для удаления надосадочной жидкости в лроцессе экстракции ислользуются одноразовые наконечники без фильтра. стр. 9 из 36 --- стр. 39 --- ЛоРМА КОМПЛЕКТАЦИИ 3. КАЧЕСТВЕННЫЙ ФОРМАТ флуорофоров РАМ и/или JOE выше порогового значения положительного результата. Вероятна контаминация лаборатории продуктами амплификации или контаминация реагентов, исследуемых образцов на каком-либо этапе ПЦР- исследования. Необходимо предпринять меры по выявлению и ликвидации источника контаминации и повторить амплификацию и детекцию для всех образцов, в которых обнаружена ДНК анализируемых микроорганизмов и/или ВКО. стр. 31 из 36 --- стр. 40 --- СРОК годности. УСЛОВИЯ ТРАНСПОРТИРОВАНИЯ и ХРАНЕНИЯ Срок годности. 12 мес. Набор реагентов с истекшим сроком годности применению не подлежит. Срок годности вскрытых реагентов соответствует сроку годности, указанному на этикетках для невскрытых реагентов, если в инструкции не указано иное. Транспортирование. Набор реагентов транспортировать при температуре от 2 до 8 °С не более 5 сут. Допускается транспортирование при температуре от 2 до 25 °С не более 3 сут. Комплект реагентов «АмплиПрайм® МАГНО-сорб-УРО», «ПЦР- комплект» вариант FEP-100-0,2 и вариант FEP-100-0,5 при получении разукомплектовать в соответствии с указанными температурами хранения. Хранение. Комплект реагентов «АмплиПрайм® МАГНО-сорб-УРО» хранить при температуре от 2 до 25 °С, кроме BKO-FL. BKO-FL хранить при температуре от 2 до 8 °С. Комплекты реагентов «ПЦР-комплект» вариант FEP-100-0,2 и «ПЦР-комплект» вариант FEP-100-0,5 хранить при температуре от 2 до 8 °С, кроме ПЦР-буфера-К. ПЦР-буфер-К хранить при температуре от минус 24 до минус 16 °С. ПЦР-смесь-FL С. trachomatis / М. genitalium хранить в защищенном от света месте. ГАРАНТИЙНЫЕ ОБЯЗАТЕЛЬСТВА ПРОИЗВОДИТЕЛЯ Производитель гарантирует соответствие основных параметров и характеристик набора реагентов, требованиям, указанным в технической и эксплуатационной документации, в течение указанного срока годности при соблюдении всех условий транспортирования, хранения и применения. Рекламации на качество набора реагентов «АмплиПрайм® CT/MG» направлять в адрес предприятия-производителя ООО «НекстБио» (111394 г. Москва, ул. Полимерная, 8 стр.2) в отдел по работе с рекламациями (тел. (495) 620-08-73, е- mail: info@nextbio.ru). При выявлении побочных действий, не указанных в инструкции по применению набора реагентов, нежелательных реакций при его использовании, фактов и обстоятельств, создающих угрозу жизни и здоровью граждан и медицинских работников при применении и эксплуатации набора реагентов, рекомендуется направить сообщение в отдел по работе с рекламациями по адресу, указанному выше, и в уполномоченную государственную регулирующую организацию (в РФ - Федеральная служба по надзору в сфере здравоохранения) в соответствии с действующим законодательством. Согласовано; Научный руководитель испытательной лаборатории ООО «ВЫМПЕЛ-МЕДЦЕНТР» Д.М.Н., профессор --- стр. 41 --- символы, ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ В ПЕЧАТНОЙ ПРОДУКЦИИ REF LOT IVD VER I У i 1 Номер в каталоге V Максимальное число тестов Код партии Использовать до Изделие для in vitro диагностики Обратитесь к руководству по эксплуатации Дата изменения Не допускать попадания солнечного света Ограничение температуры Дата изготовления Производитель f Беречь от влаги Хрупкое. Осторожно ft Верх стр. 33 из 36 --- стр. 43 --- 11. Добавить в пробирки по 200 мкл раствора для отмывки 7, плотно закрыть крышки. 12. Смыть магнетизированную силику перемешиванием на вортексе, затем осадить капли на вортексе. 13. Переставить пробирки в обычный штатив, открыть крышки и переставить в магнитный штатив на 1 мин. 14.Отобрать надосадочную жидкость, аналогично п. 10. Перенести пробирки в обычный штатив. 15. Высушить магнетизированную силику, оставив пробирки с открытыми крышками на магнитном штативе в течение 10 мин. 16. Добавить в пробирки по 100 мкл буфера для элюции В, перемешать на вортексе. 17. Поместить пробирки в термостат с температурой 60 °С на 5 мин. 18. Осадить капли на вортексе и переставить пробирки в магнитный штатив на 2 мин. Надосадочная жидкость содержит очищенную ДНК. Пробы готовы к постановке ПЦР. ВНИМАНИЕ! Отбор очищенных ДНК для проведения ПЦР осуществляется ^ снятия пробирок с магнитного штатива. Очищенная ДНК может храниться при температуре от 2 до 8 °С в течение недели, при температуре от минус 24 до минус 16 °С в течение 6 мес и при температуре не выше минус 68 °С в течение года. Для этого необходимо, не захватывая магнетизированную силику, перенести надосадочную жидкость в стерильную пробирку. стр. 35 из 36 --- стр. 44 --- Лист вносимых изменении Место внесения изменений Суть вносимых изменений По тексту Исправлены опечатки _______________________________ Принцип метода Уточнена фраза об инактивации УДГ Меры предосторожности Формулировки «всегда следует» и «следует рассматривать» заменены на «необходимо всегда» и «рассматривать» Дополнены сведения об описание утилизации или уничтожения упаковки, биологического материала, включая материалы, инструменты и предметы, загрязненные биологическим материалом с отдельным описанием правил Дополнительные материалы и оборудование Уточнено, что комплект расходных материалов для автоматической станции для экстракции НК должен соответствовать инструкции Производителя Взятие, транспортировка и хранение исследуемого материала Добавлено описание действий в случае невозможности обломить рабочую часть зонда. Исправлены стилистические ошибки Подготовка исследуемого материала к экстракции ДНК Формулировка «12 об/мин» заменена на «12 тыс об/мин» Формы комплектации 1, 2, 3 «Амплификация с детекцией по «конечной точке» Добавлено описание постановки отрицательного контроля в случае, если экстракция проводилась с помощью «АмплиПрайм ЭДЭМ» R тя6пм1 |ях 7 и 11 формулировка «Выше или ниже порогового значения» заменена на «Не учитывается» Формы комплектации 1, 2, 3 «Возможные ошибки» Добавлено описание действий в случае, если для ОК отсутствует сигнал по каналу для флуорофора ROX. Исправлены стилистические ошибки Диагностические характеристики Изменены значения диагностических характеристик (специфичности и чувствительности) на значения, полученные в результате клинико-лабораторных испытаний, с доверительной вероятности 95% Аналитические характеристики Изменены значения аналитической чувствительности для микроорганизма М. Genitalium в образцах отделяемого конъюнктивы. Редакция 21.08.2015 стр. 36 из 36 --- стр. 45 ---