Реагенты in vitro для типирования сальмонелл и серологической диагностики сальмонеллеза в реакции агглютинации (РДС Sifin) — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 4 --- 1 2 3 Анти-Salmonella О 67 TR 1371 1 Анти-Salmonella Vi TR 1316 I Анти-Salmonella Н а TR 1401 1 Анти-Salmonella Н Ь TR 1402 1 Анти-Salmonella Н с TR 1403 1 Анти-Salmonella Н d TR 1404 1 Анти-Salmonella Н е TR 1405 1 TR 5405 Анти-Salmonella Н f TR 1407 1 Анти-Salmonella Н g TR 1406 1 TR 5406 Анти-Salmonella Н g,m TR 1408 1 TR 5408 Анти-Salmonella Н h TR 1409 1 Анти-Salmonella Н i TR 1410 1 TR5410 Анти-Salmonella Н к(!) TS 1411 1 Анти-Salmonella HL TR 1412 1 TR5412 Анти-Salmonella Н m TS 1413 1 Анти-Salmonella М п TR 1438 1 Анти-Salmonella Н р TS 1414 1 Анти-Salmonella Н q TS 1415 1 Анти-Salmonella Н г TR 1416 1 Анти-Salmonella Н s TS 1417 1 Анти-Salmonella Н t TS 1418 1 Анти-Salmonella Н и TS 1419 1 Анти-Salmonella Н v TS 1420 1 Анти-Salmonella Н w TS 1421 1 Анти-Salmonella Н х TS 1422 1 Анти-Salmonella Н у TR 1423 1 Анти-Salmonella Н z (1,11,1И ) TR 1424 1 Анти-Salmonella Н Z4, TS 1425 1 Анти-Salmonella Н Z ( s TS 1426 1 Анти-Salmonella Н Z io TS 1427 1 Анти-Salmonella Н zp TR 1439 1 Анти-Salmonella Н Z) 5 TS 1428 1 Анти-Salmonella Н Z2 3 TR 1440 1 Анти-Salmonella Н Z2 4 TS 1429 1 Анти-Salmonella Н z ^ » TS 1449 1 Анти-Salmonella Н Z ic , TS 1430 1 Анти-Salmonella Н TS 1431 1 Анти-Salmonella Н z^s TR 1445 1 Анти-Salmonella Н z ^ g TR 1447 1 Анти-Salmonella И Z4 1 TR 1448 ^ 1 Анти-Salmonella Н 1 TR 1437 1 TR 5437 Анти-Salmonella Н 2 TS 1433 1 TS 5433 Анти-Salmonella Н 5 TS 1434 1 Анти-Salmonella Н 6 TS 1435 1 Анти-Salmonella Н 7 TS 1436 1 --- стр. 5 --- 1 2 3 Антигены сальмонелл Salmonella Paratyphi А-0 TS 1606 10 Salmonella Paratyphi В-0 TS 1601 10 Salmonella Paratyphi С-0 TS 1607 10 Salmonella Typhi-O TS 1602 10 Salmonella Paratyphi A-OH TS 1613 10 Salmonella Paratyphi B-OH TS 1614 10 Salmonella Paratyphi C-OH TS 1615 10 Salmonella Typhi-OH TS 1616 10 Salmonella Typhimurium-OH TS 1611 10 Salmonella Enteritidis-OH TS 1612 10 Salmonella Ha TS 1631 10 Salmonella Hb TS 1632 10 Salmonella He TS 1633 10 Salmonella Hd TS 1603 10 Позитивные контроли к антигенам сальмонелл Анти-Salmonella Paratyphi А TS 1626 1 Анти-Salmonella Paratyphi В TS 1604 1 Анти-Salmonella Paratyphi С TS 1627 1 Анти-Salmonella Typhi TS 1605 1 Анти-Salmonella Typhimurium TS 1624 1 Анти-Salmonella Enteritidis TS 1625 1 Анти-Salmonella На TS 1641 1 Анти-Salmonella Hb TS 1642 1 Анти-Salmonella He TS 1643 1 AHTH-Salmonella Hd TS 1644 1 ' Тримечание; *Для лиофилизированных реагентов приведен объем дистиллированной воды, который необходим для растворения реагента. 4. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ 4.1. Сальмонеллы типируют в реакции агглютинации на предметных стеклах посредством эмульгирования 1-2 колоний чистой культуры тестируемых бактерий в капле необходимого реагента до получения мутной «молочной» суспензии. Энтероклоны и поликлональные антитела проявляют высокую специфичность, реагируя только с гомологичными им антигенами сальмонелл. Результаты теста учитывают визуально на темном фоне после смешивания реагентов с тестируемым изолятом сальмонелл: при отрицательной реакции смесь остается мутной («молочной»), при положительной реакции она просветляется, становится прозрачной и в ней появляются светлые агглютинаты. 4.2. Антигены сальмонелл S. Paratyphi А, В, С, S. Typhi, S. Typhimurium и S. Enteritidis позволяют выявлять антитела к соответствующим сероварам сальмонелл, что дает основание для постановки предварительного диагноза. Окончательный диагноз ставят на основании установления повышения титра этих антител (сероконверсии). 4.3. При проведении исследований расход энтероклонов и поликлональных антител составляет 1 мл/40 анализов, антигенов в рабочем разведении (1:10) — 1 мл/400 анализов (при проведении реакции агглютинации в пробирках) или 1 мл/2000 анализов (при постановке теста в микротитрационных планшетах). 5. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ 5.1, Потенциальный риск применения реагентов класс 2а. 5.2. Реагенты в используемых концентрациях являются нетоксичными. 5.3. Реагенты не содержат живых микроорганизмов и их генетического материала, а также клеточных элементов гибридом, и поэтому не требуют соблюдения особых мер предосторожности при работе с ними. 5 --- стр. 6 --- 5.4. Меры предосторожности — соблюдение «Правил устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно- эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения СССР» (Москва, 1981 г.). 5.5. При работе с РДС Sifin следует пользоваться одноразовыми резиновыми или пластиковыми перчатками для защиты от исследуемых материалов (культур сальмонелл и сыворотки крови пациентов), которые являются потенциально инфицированными. 6. О Б О Р У Д О В А Н И Е И М А Т Е Р И А Л Ы , Н Е О Б Х О Д И М Ы Е П Р И РА БО ТЕ С Р Е А Г Е Н Т А М И : Для проведения типирования caJ^ыvloнeлл в реакции агглютинации на cretoie требуются; - стекла предметные микроскопические (можно с лункой); - петли пластиковые бактериологические стерильные; - пластиковые пастеровские пипетки; - палочки стеклянные; - стерильная дистиллированная вода (для растворения лиофилизированных реагентов) - емкость для сбора отходов. - перчатки резиновые или пластиковые. Для выявления специфических агглютинирующих антител в тесте Видаля требуются: - пробирки агглютинационные; - микротитрационные планшеты; - петли пластиковые бактериологические стерильные; - пластиковые пастеровские пипетки; - пипетки полуавтоматические одноканальные на 50-500 мкл со сменными наконечниками; - физиологический раствор (0,9 % NaCl); - лупа с 6-кратным увеличением. 7. А Н А Л И З И Р У Е М Ы Е ПРО Б Ы С помощью РДС Sifin можно типировать чистые культуры сальмонелл, выделенных из различных источников (от людей, животных, из пищевых продуктов, с объектов окружающей среды), Для серологической диагностики сальмонеллеза исследуют сь[воротку крови, взятую у пациентов однократно (для предварительной постановки диагноза) или с интервалом в 4-10 дней (для окончательной постановки диагноза). 8. П Р О В Е Д Е Н И Е А Н А Л И ЗО В И У Ч Е Т И Х Р Е З У Л Ь ТА Т О В 8.1. Типирование сальмонелл Реакцию агглютинации проводят на предметном стекле в следующей последовательности: - с омнивалентным энтероклоном Анти-Salmonella (А ~ 67). Все референтные штаммы сальмонелл должны дать положительную реакцию; - с поливалентным энтероклоном Анти-SaliTionella I (А - Е). Сальмонеллы, относящиеся к серогруппам А - Е, должны дать положительную реакцию, а сальмонеллы редко встречающейся серогруппы F — отрицательную реакцию; - при получении отрицательной реакции с энтероклоном Анти-Salmonella I (А - Е) культуру исследуют поливалентным энтероклоном Анти-Salmonella II (F). Сальмонеллы, относящиеся к серогруппе F должны дать положительную реакцию; - культуры, отнесенные к серогруппам А— Е, тестируют группоспецифическими энтероклонами до получения положительного результага в следующей последовательности: Анти-SaImoneIla групп D, В, С, Е и А; - тестируют культуру моноспецифическими энтероклонами и поликлональными антителами к антигенам Н сальмонелл. --- стр. 7 --- Подробная информация по проведению типирования сальмонелл приведена ниже (пп. 8.1.1— 8.1.5; таблицы 2— 5). 8.1.1. Тестирование омнивалентным энтероклоном Анти-SaliTionella (А - 67) позволяет определить, относится ли изолят бактерии к роду Salmonella (положительная реакция). Такую проверку проводят при отсутствии возможности оценки его биохимической активности. Отрицательная реакция с этим реагентом свидетельствует о том, что изолят бактерии не относится к роду Salmonella или является S. Ту phi, S. Dublin или S. Paratyphi С, у которых реактивность О-антигенов маскирует антиген Vi, Для инактивации последнего культуру кипятят на водяной бане в течение 30 мин и повторно тестируют энтероклоном Анти- Salmonella (А - 67). Повторное получение отрицательной реакции свидетельствует о том, что изолят не является caльмoнeлJюй, а положительная реакция — о том, что он относится к одному из 3 упомянутых выше сероваров сальмонелл. 8.1.2. С помощью поливалентных энтероклонов Anti-Salmonella I (А - Е) и Anti- Salmonella 1 (F-67) дифференцируют редко встречающуюся серогруппу F от остальных серогрупп сальмонелл (таблица 2), Таблица 2. Подтверждение принадлежности к изолята к роду Salmonella и Энтероклоиы Агглютинация Сальмонелла группы А— Е Сальмонелла группы F Бактерии других родов Омнивалентный Анти-5а1шопе11а (А -67) + + — Поливалентный Anti-Salmonella I (А -Е ) + — н и Поливалентный Anti-Salmonella I I (F-67) — -ь ни Обозначения. + положительная реакция; — отрицательная реакция; ни — не исследуют 8.1.3. Тестирование группоспецифическими энтероклонами (таблица 3) позволяет определить, к какой серогруппе относится изолят, и выбрать оптимальную схему определения его антигенной формулы. Реагенты применяют в следующей последовательности, соответствующей частоте распространения серогрупп сальмонелл: Анти-Salmonella групп D, В, С, Е, А. Таблица 3. Схема определения серогрупповой принадлежности сальмонелл Энтероклоны Агглютинация Группа D г рупиа В группа С Группа Е Группа А Анти-Salmonella группа D + — — — — Анти-Salmonella группа В ни + — —- — Анти-Salmonella группа С ни ни + — — Анти-Salmonella группа Е ни ни ни + — Анти-Salmonella группа А ни ни ни ни + Обозначения: + положительная реакция; — отрицательная реакция; ни — не исследуют 8.1.4. Тестирование моноспецифическими 9HTepoKjioHaMH к антигенам О является одним из основных этапов составления антигенной формулы сальмонелл. Выбор необходимых для этого реагентов определяется результатами предыдущего этапа типирования на основании данных, приведенных в таблице 4. --- стр. 8 --- группа Таблица 4. Схема выбора энтероклонов к соматическим антигенам (О) сальмонелл Антигены О общие для всех сероваров группы* Возможные комбинации специфических антигенов О** i***,2,12; 2,12 Примечание При напичиеО! не определяют 012 В 4, 5, 27 4,12; 1,4,12; 4,5,12; 1,4,5,12; 4.12,27; 1,4,12.27 С1-СЗ 7,8 (С1);8(С2-СЗ) 6,7; 6,7,Vi; 6,7,14; 6,8; 8; 8,20 9,12; 9,12,Vi;L9,12; Очень редко; 9,46, 1,9,12,46,27 Для групп С2-СЗ обязательна проверка на наличие 06| и 020. Если этих антигенов не, то штамм имеет 08 > D1-D3 9 (D), 46 (D2) Выявлению 09 может мешать Vi. Энтероклон к 046 выявляет все штаммы D2, слабо реагирует или не реагирует с D3 и не реагирует с D1. D3 окончательно идентифицируют по 09 и 027. Е4 3(Е1,Е4), 34(Е1), 10 (Е1 неконвертированные фагами el 5, el 5 и е34 штаммы), 15 (Е1 конвертированные фагами 815, el 5 и е34 штаммы), 19 (Е4), 34 (Е1 конвертированные фагами el 5 и б34 штаммы) 3,10:3.15.3,15.34. 1,3,19. Очень редко; 1,3,10,19 и 1,3,15,19 Энтероклон к 010 не реагирует со штаммами Е 1 после конверсии фагами и с частью штаммов Е4. Энтероклон к 015 не реагирует со штаммами Е 1 и частью штаммов Е4. Энтероклон к 034 не реагирует со штаммами Е4 и штаммами, имеющими антигены 3,10 или 3,15; он не реагирует с 0 1 2г и 028, поэтому позволяет дифференцировать штаммы в группе Е1. _____________________ Примечания. * По наличию у сальмонеллы антигенов, перечисленных в данной колонке, устанавливают ее групповую принадлежность; ** Обнаружение антигенов, перечисленных в данной колонке, позволяет составить антигенную формулу. ♦ ♦♦Подчеркнуты обозначения антигенов, появляющихся только после фаговой конверсии. 8.1.5. Типирование сальмонелл завершается анализом наличия у них жгутиковых (Н) антигенов обеих фаз. Типировать Н-антигены первой фазы можно у колоний, полученных с низкоселективной агаровой среды. Вторую фазу этих антигенов инд^щируют методом ингибирования роения по Гарду в следующей модификации. В центр чашки Петри (диаметром 6 см) с 10 мл полужидкой (0,8-1%) агаровой среды наносят 0,1 мл энтероклона или поликлональных антител, соответствующих выделенной фазе антигена Н (перечень реагентов панели, которыми пользуются для этого, приведен в таблице 5). Энтероклоны Анти-Salmonella Н Е, Н g, Н L и И 1 пригодны для фазовой индукции всех возможных комбинаций антигенов Н. Энтероклон Anti-Salmonella И 1 способен ингибировать антигены Н 1,2; 1,5; 1,6 и 1,7. Выбранный реагент распределяют стерильным шпателем по поверхности среды. В центр чашки Петри после подсыхания реагента вносят культуру исследуемого изолята. Посев инкубируют при температ>'ре 37 С в течение 16-20 ч. Если изолят распространился по поверхности среды, то проводят идентификацию реагентами второй фазы антигена Н. В противном случае считают, что культура сальмонелл имеет только I фазу антигена П. --- стр. 9 --- Таблица 5. Реагенты, применяемые для определения жгутиковых антигенов (Н) сальмонелл Реагенты Выявляемые антигены пригодность для фазовой индукции 1 2 3 Энтероклон Анти-Salmonella Н а На + Энтер0 1< л0н Анти-Salmonella Н Ь НЬ Энтероклон Анти-Salmonella Н с Не + Энтероклон Анти-Salmonella Н d Hd + Энтероклон Анти-Salmonella Н Е И e,h; е,п,х; e,n,Z| 5; e,n,x,Zis + Энтероклон Анти-Salmonella Н f Н f,g; f,g,s; f,g,t -ь Энтероклон Анти-Salmonella Н g Все комбинации антигенов комплекса Н g, за исключением Н m,t + Энтероклон Анти-Salmonella Н g,m Все комбинации антигенов комплекса И g, включая Н m,t - 1 - Энтероклон Анти-Salmonella Н h He,h — Энтероклон Анти-Salmonella Н i Н i Поликлональные антитела Анти-Salmonella Н к(1) Hk(I) + Энтероклон Анти-Salmonella Н L Н l,v; Н l,w; Н l,Zi3; Н 1,Z 28; Н 1 ,Z |3 ,Z 2 8 + Поликлональные антитела Анти-Salmonella Н m Н g,m; g,m,s; g,m,s,t; g,m,q; g,m,p,s; g,m,t; m,p,t,u; m,t — “ Энтероклон Анти-Salmonella Н п H e,n,x; e,n,zi5; e,n,x,zi5 + Поликлональные антитела Анти-Salmonella Н р H g,m,p,s; g,p; g,p,s; g,p,u; m,p,t,u — Поликлональные антитела Анти-Salmonella Н q H g,q; g,m,q — Энтероклон Анти-Salmonella Н г H r Поликлональные антитела Анти-Salmonella Н s H f,g,s; g,m,s; g,m,s,t; g,p,s; g,s,t — Поликлональные антитела Анти-Salmonella Н t H m,t; f,g,t; g,m,t; g,m,s,t; g,t; g,s,t; m,p,t,u -- Поликлональные антитела Анти-Salmonella Н и H g,p,u; m,p,t,u — Поликлональные антитела Анти-Salmonella Н v H l,v — Поликлональные антитела Анти-Salmonella И w H l,w — Поликлональные антитела Анти-Salmonella Н х H e,n,x; e,n,x,zi5 — Энтероклон Анти-Salmonella Н у Ну + Поликлональные антитела Анти-Salmonella Н z (1,11,111) Hz(l,II, I I I ) Поликлональные антитела Анти-Salmonella Н z^, ^ 2 3 H Z 4 ,Z 2 f, Z ^ ,Z 2 4 ', Z 4 ,Z 3 2 i Z 4,Zt3 ,Z 3 2 -- Поликлональные антитела Анти-Salmonella Н Z6 H z6 — Энтероклон И zio H zio + Энтероклон Н z^ H Z| 3 — Поликлональные антитела Анти-Salmonella Н Z |5 H e,n,zi5: e,n,x,zt5 -- Энтероклон Анти-Salmonella Н Z2 3 H Z2 1 — Поликлональные антитела Анти-Salmonella Н Z 2 4 H Z - 4 ,Z 2 4 --- Поликлональные антитела Анти-Salmonella 1 1 Z 2 8 и Z 2 H — Поликлональные антитела Н z ^ y H Z 2 9 — Поликлональные антитела Н Z3 2 H Z 4 ,Z 3 2 — Энтероклон Анти-Salmonella Н z^ 5 HZ3 5 +