Набор реагентов для иммуноферментного определения IgG антител к дезаминированным пептидам глиадина (ДПГ) в сыворотке (плазме) крови «антиДПГ-IgG-ИФА» по ТУ 9398-182-18619450-2012 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 ---
1
г енераль
«УТВЕРЖДАЮ»
|Гд^ёкт&р. ООО «ХЕМА»
Лебедин
2016 г.
ИНСТРУКЦИЯ
по применению Набора реагентов для иммуноферментног 6Д)щед^еН 11я
IgG антител к дезаминированным пептидам глиадина (ДПГ) в сыворотке (плазме) крови
«антиДПГ-IgG-И ФА»
1. НАЗНАЧЕНИЕ.
1.1. Набор реагентов «антиДПГ-1§0-ИФА» предназначен для количественного
определения содержания IgG антител к дезаминированным пептидам глиадина (ДПГ) в
сыворотке (плазме) крови человека методом твердофазного иммуноферментного анализа.
1.2. Целиакия или глютен-чувствительная энтеропатия - хроническое заболевание, при
котором нарушается кишечное всасывание в результате поражения слизистой тонкого
кишечника. Точная этиология целиакии неизвестна, но установлено, что глиадин -
спирторастворимая фракция глютена злаков - при данном заболевании является токсическим
веществом. У подавляющего большинства нелеченых больных целиакией выявляются высокие
концентрации IgG и IgA антител к дезаминированным пептидам глиадина в сыворотке (плазме)
крови, слюне и кишечном соке. После исключения глютена из рациона уровень этих антител
постепенно нормализуется. Для окончательного подтверждения диагноза целиакии
используется биопсия слизистой в области перехода двенадцатиперстной кишки в тонкую. В
этом месте характерные поражения («плоская» слизистая) выявляются и при тяжелой, и при
умеренно выраженной целиакии.
Определение IgG и IgA антител к дезаминированным пептидам глиадина позволяет
быстро и экономично определить показания для проведения кишечной биопсии.
Определение антител к дезаминированным пептидам глиадина может быть маркером
дополнительной специфичности, используемых вместе с определением антител к глиадину.
Патогенез целиакии сопровождается дезаминированнием глиадина, поступившего с пищей,
под действием тканевой трасглютаминазы. Дезамированные пептиды глиадина (ДПГ)
связываются с HLA молекулами на поверхности антиген презентирующих клеток и
распознаются Т-хэлперами, что приводит к появлению в сыворотке антител к ДПГ. Таким
образом, определение аутоантител к ДПГ может служить вспомогательным диагностическим
маркером, используемым вместе с определением аутоантител к общему глиадину.
1.3. Диагностическая значимость определения.
Серийное определение IgG антител к дезаминированным пептидам глиадина является
методом выбора для слежения за соблюдением и эффективностью безглиадиновой
(безглютеновой) диеты у больных с доказанной целиакией, выявляемых методом
--- стр. 2 ---
иммуноферментного анализа.
1.4. Область применения - клиническая лабораторная диагностика.
2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА.
2.1. Принцип работы Набора. Определение концентрации IgG антител к
дезаминированным пептидам глиадина основано на использовании «сэндвич«-варианта
твердофазного иммуноферментного анализа. На внутренней поверхности лунок иммобилизован
высокоочищенный антиген - дезаминированные пептиды глиадина. Антитела из образца
связываются с антигеном на поверхности лунки. Образовавшийся комплекс выявляют с
помощью конъюгата мышиных моноклональных антител к IgG человека с пероксидазой хрена.
В результате образуется связанный с пластиком «сэндвич», содержащий пероксидазу.
Во время инкубации с раствором тетраметилбензидина происходит окрашивание растворов в
лунках. Интенсивность окраски прямо пропорциональна концентрации IgG антител к
дезаминированным пептидам глиадина в анализируемом образце.
Концентрацию IgG антител к дезаминированным пептидам глиадина в анализируемых
образцах определяют по калибровочному графику зависимости оптической плотности от
содержания IgG антител к дезаминированным пептидам глиадина в калибровочных пробах.
2.2. Состав Набора:
- планшет 96-луночный полистироловый стрипированный, с иммобилизированным
на внутренней поверхности лунок ДПГ - 1 шт.;
- калибровочные пробы на основе фосфатного буфера, содержащие известные
количества IgG антител к дезаминированным пептидам глиадина - 0; 5; 10; 25; 50 и 100 Ед/мл;
концентрации IgG антител к дезаминированным пептидам глиадина в калибровочных пробах
могут несколько отличаться от указанных величин, точные величины указаны на этикетках
флаконов, готовы к использованию - 6 пробирок (по 1,5 мл каждая);
- конъюгат, готов к использованию - 1 флакон (11 мл);
- ИФА-Буфер (pH 7,0 - 7,2), готов к использованию - 1 флакон (50 мл);
- раствор субстрата тетраметилбензидина (ТМБ), готов к использованию - 1 флакон
(11 мл);
- контрольная сыворотка на основе сыворотки крови человека с известным
содержанием IgG антител к дезаминированным пептидам глиадина, готова к использованию - 1
пробирка (1,5 мл);
- концентрат отмывочного раствора 21-кратный концентрат - 1 флакон (22 мл);
- стоп-реагент; готов к использованию - 1 флакон (11 мл);
- липкая лента с бумажной подложкой для заклеивания планшета; готова к
использованию - 2 шт.;
- аналитический паспорт;
- Инструкция по применению Набора.
--- стр. 3 ---
/
3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТНПСИ.
3.1. Специфичность Использование в Наборе высокоочищенного препарата
дезаминированные пептиды глиадина для иммобилизации в лунках планшета позволяет
достичь высокой специфичности определения.
3.2. Чувствительность Минимальная достоверно определяемая Набором «антиДПГ-
IgG-ИФА» концентрация IgG антител к дезаминированным пептидам глиадина не превышает
5,0 Ед/мл.
3.3. Воспроизводимость. Коэффициент вариации результатов определения содержания
IgG антител к дезаминированным пептидам глиадина в одном и том же образце сыворотки
(плазмы) крови с использованием Набора «aнтиДПГ-IgG-ИФA» не превышает 8,0%.
3.4. Точность. Данный аналитический параметр проверяется тестом на «открытие» IgG
антител к дезаминированным пептидам глиадина - соответствие измеренной концентрации IgG
антител к дезаминированным пептидам глиадина предписанной, полученной путем
смешивания равных объемов контрольной сыворотки и калибровочной пробы 10 Ед/мл.
Процент «открытия» составляет 90-110%.
3.5. Линейность. Зависимость концентрации IgG антител к дезаминированным
пептидам глиадина в образцах сыворотки (плазмы) крови при разведении их сывороткой
(плазмой) крови, не содержашей IgG антител к дезаминированным пептидам глиадина, имеет
линейный характер в диапазоне концентраций 5-100 Ед/мл и составляет - 10%.
3.6. Клиническая проверка. Нормальные значения.
Концентрация IgG антител к дезаминированным пептидам глиадина в сыворотке
(плазме) здоровых у людей не превышает 10 Ед/мл.
В соответствии с требованиями GLP {Good Laboratory Practice, Хорошая Лабораторная
Практика) рекомендуется в каждой клинико-диагностической лаборатории при использовании
Набора реагентов уточнить значения концентрации IgG антител к дезаминированным пептидам
глиадина, соответствующие нормальным у обследуемого контингента.
3.7. Интерференция. Изучение образцов плазмы с различными антикоагулянтами
показало, что такие антикоагулянты как ЭДТА, гепарин и цитрат натрия не приводят к
матричному эффекту.
4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ.
4.1. Потенциальный риск применения Набора по ГОСТ 31508-2012 «Изделия
медицинские. Классификация в зависимости от потенциального риска применения.
Общие требования» и Номенклатурной классификации медицинских изделий, утв.
Приказом Минздрава Российской Федерации от № 4н от 6 июня 2012 года (в ред.
Приказа Минздрава России от 25.09.2014 N 557н) - класс 2а.
4.2. Все компоненты Набора в используемых концентрациях являются
нетоксичными.
--- стр. 4 ---
4.3. При работе с Набором следует надевать одноразовые резиновые или
пластиковые перчатки, так как иееледуемые образцы сыворотки (плазмы) крови человека
следует рассматривать как потенциально инфицированный материал, способный
длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вирус гепатита или любой другой
возбудитель вируеных инфекций.
4.4. Запрещается прием пищи, использование косметических средств и курение в
помещениях, предназначенных для работы с Набором.
4.5. Меры предосторожности-соблюдение «Правил устройства, техники
безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной
гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-
эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения СССР»
(Москва, 1981 г).
4.6. Медицинские отходы класса Б. Утилизацию или уничтожение,
дезинфекцию наборов реагентов следует проводить в соответетвии с СанПиН 2.1.7.2790-
1 о «Санитарно-эпидемиологические требования к обращению с медицинскими
отходами» и МУ-287-113 «Методические указания по дезинфекции,
пред стерилизационной очистке и стерилизации изделий медицинского назначения».
Медицинское изделие при необходимости утилизируется в соответствие с
санитарными правилами и нормами СанПиН 2.1.7.2790 по классу Б
эпидемиологически опасные отходы.
4.7. Утилизация проводитея специализированными организациями, которые
имеют лицензию на право утилизации медицинских отходов.
5. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ, НЕОБХОДИМЫЕ ПРИ РАБОТЕ С НАБОРОМ:
- фотометр вертикального сканирования, позволяющий измерять оптическую
плотность раствора в лунках при длине волны 450 нм;
- термостат, поддерживающий температуру + 37 ± 0,1®С;
- дозаторы со сменными наконечниками, позволяющие отбирать объемы жидкости в
диапазоне 0,5-250 мкл;
- цилиндр мерный вместимостью 500 мл;
- вода дистиллированная;
- перчатки резиновые или пластиковые;
- бумага фильтровальная.
6. АНАЛИЗИРУЕМБ1Е ОБРАЗЦЫ.
ПОДГОТОВКА РЕАГЕНТОВ ДЛЯ АНАЛИЗА.
6.1. Перед проведением анализа компоненты Набора и исследуемые образцы сыворотки