Набор реагентов для иммуноферментного определения IgG антител к антигенам Cytomegalovirus в сыворотке (плазме) крови "Cytomegalovirus IgG-ИФА" по ТУ 9398-103-18619450-2009 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 ---
УТВЕРЖДЕНА
Приказом Росздравнадзора
от_________________2009 г.
№
§ХТВЕРЖДАЮ»
О «ХЕМА»
. Лебедин
2009 г.
ИНСТРУКЦИЯ
по применению Набора реагентов для иммуноферментного определения
IgG-антител к антигенам Cytomegalovirus в сыворотке и плазме крови
«Cytomegalovirus IgG-ИФА»
1. НАЗНАЧЕНИЕ.
1.1. Набор реагентов «Cytomegalovirus IgG-ИФА» предназначен для определения
специфических IgG-антител к антигенам Cytomegalovirus в сыворотке или плазме крови
человека методом твердофазного иммуноферментного анализа.
1.2. Cytomegalovirus (ЦМВ) относится к семейству герпесвирусов и способен вызвагь
клинически малозначимые острые воспалительные реакции у детей и взрослых. ЦМВ
передается через слюну, мочу, стул, сперму, шеечный секрет и молоко, а также проникать через
плаценту. Высокая зараженность встречается у детей, посещающих детские сады, школы,
Среди населения инфицированность увеличивается с возрастом, в целом от 60 до 90 % всех
индивидов инфицированы ЦМВ и серопозитивны (т.е. имеют специфические IgG-антитела в
сыворотке крови). Данные антитела не защищают от реактивации латентного вируса, но могут
служить косвенным показателем активности ЦМВ в организме человека. Острая
цитомегаловирусная инфекция у серонегативной (не имеющей специфических IgG-антител)
может привести к проникновению ЦМВ через плаценту и тяжелым фетальным дефекпам
(поражения ЦНС и печени). Инфицирование ЦМВ наиболее опасно в первый триместр
беременности. Поэтому ведение беременности у серонегативных женщин требует особых мер
(ограничение контактов) и определение статуса иммунитета к ЦМВ (IgG-антител) выполняемся
для оценки иммунного статуса женщин до и в первые недели беременности. У больных с
иммунодефицитами реактивация ЦМВ, часто сопровождающаяся резким рос'юм тигра
специфических IgG-антител, может привести к тяжелым и иногда смертельным осложнениям,
включающим поражения легких, желудочно-кишечного тракта, ЦНС, почек. Выявление
серонегативных индивидов также важно в трансплантологии, так как пересадка органов от
серопозитивных доноров серонегативным реципиентам не допускается.
2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА.
2.1. Принцип работы Набора. Определение IgG-антител к антигенам Cytomegalovirus
основано на использовании твердофазного варианта иммуноферментного анг
внутренней поверхности лунок иммобилизован высокоочищенный рекомбинанту
Cytomegalovirus. В лунках планшета, при добавлении исследуемого образ
инкубации, происходит специфическое связывание IgG-антител, содержащихся в
--- стр. 2 ---
образце, и антигена на твердой фазе.
Отмывка лунок планшета позволяет удалить избыток непрореагировавших компонентов.
Во время инкубации с конъюгатом происходит образование иммунного комплекса
«антиген Cytomegalovirus твердой фазы - специфические IgG антитела (исследуемый образец) -
мышиные моноклональные анти-IgG антитела, конъюгированные с пероксидазой хрена
(конъюгат)».
Отмывка лунок планшета позволяет удалить избыток непрореагировавших компонентов.
Во время инкубации с раствором субстрата тетраметилбензидина (ТМБ) происходи!
специфическое связывание пероксидазы (конъюгат) с раствором субстрата тетраметилбензидина
(ТМБ), сопровождающееся изменением окраски растворов в лунках. Интенсивность окраски
прямо пропорциональна концентрации специфических IgG антител к антигенам Cytomegalovirus-
в исследуемом образце.
Регистрация результатов реакции производится измерением оптической плотности
содержимого лунок планшета на спектрофотометре при длине волны 450 нм.
Обработка результатов реакции производится с помошью коэффициентного метода.
2.2. Состав Набора:
- планшет 96-луночный стрипированный с сорбированным на вну греннсй поверхности
лунок рекомбинантным антигеном Cytomegalovirus, готов к использованию -1 шт.;
- положительная контрольная сыворотка на основе инактивированного пула
сывороток крови человека с высоким содержанием IgG-антител к антигенам Cytomegalovirus,
готова к использованию - 1 пробирка или флакон (1,0 мл);
- отрицательная контрольная сыворотка на основе инактивированного пула
сывороток крови человека без содержания IgG-антител к антигенам Cytomegalovirus, готова к
использованию - 1 пробирка или флакон (1,0 мл);
- калибровочная проба на основе инактивированного пула сывороток крови человека с
известным содержанием IgG-антител к антигенам Cytomegalovirus, готова к использованию - 1
пробирка или флакон (1,0 мл);
- конъюгат (мышиные моноклональные антитела к IgG человека, конъюгированные с
пероксидазой хрена), готов к использованию - 1 флакон (11 мл);
- ИФА-Буфер (pH 7,0 - 7,2), готов к использованию - 1 флакон (22 мл);
- раствор субстрата тетраметилбензидина (ТМБ), готов к использованию - 1 флакон
(11 мл);
- концентрат отмывочного раствора, 21-кратный концентрат - 1 флако^^;;^^^^£Щ1
- стоп-реагент, готов к использованию - 1 флакон (11 мл);
--- стр. 3 ---
- липкая лента с бумажной подложкой для заклеивания планшета, готова к
использованию - 2 шт.
3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ.
3.1. Специфичность. Использование высокоочищенного рекомбинантного ангигена
Cytomegalovirus на твердой фазе позволяет достичь высокой специфичности анализа.
3.2. Воспроизводимость. Коэффициент вариации результатов определения содержания
lgG-антител к антигенам Cytomegalovirus в одном и том же образце сыворотки (плазмы) крови
с использованием Набора «.Cytomegalovirus IgG-ИФА» не превышает 8,0%.
4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ.
4.1. Потенциальный риск нрименення Набора - класс 26 (ГОСТ Р 51609-2000).
4.2. Меры предосторожности-соблюдение «Правил устройства, техники безопасности,
производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в
лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы
Министерства здравоохранения СССР» (Москва, 1981 г).
5. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ, НЕОБХОДИМЫЕ ПРИ РАБОТЕ С НАБОРОМ:
- фотометр вертикального сканирования, позволяющий измерять оптическую
плотность раствора в лунках при длине волны 450 нм;
- дозаторы со сменными наконечниками, позволяющие отбирать объемы жидкости
в диапазоне 25-250 мкл;
- цилиндр мерный вместимостью 500 мл;
- вода дистиллированная;
- перчатки резиновые или пластиковые;
- бумага фильтровальная.
6. АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ. ПОДГОТОВКА РЕАГЕНТОВ ДЛЯ
АНАЛИЗА.
6.1. Перед проведением анализа компоненты Набора и исследуемые образцы сыворотки
(плазмы) крови следует выдержать при комнатной температуре (+18-25 ^С) не менее 30 мин.
6.2. Образцы сыворотки (плазмы) крови, используемые для анализа, допускается
хранить при температуре +2-8 ^С не более 24 ч или при температуре -20 не более 2 недель.
6.3. Для проведения анализа не следует использовать гемолизированную, мутную
сыворотку (плазму) крови, а также сыворотку (плазму) крови, содержащую азид натрия.
6.4. Приготовление планшета.
Вскрыть пакет с планшетом и установить на рамку необходимое количество стрипов.
Вскрытые стрипы следует использовать в течение 1 ч, длительному хранению не подлежат.
Оставшиеся неиспользованными стрипы, чтобы предотвратить воздействие на
необходимо тщательно заклеить липкой лентой для заклеивания планшета
упаковке при температуре +2-8 ^С в течение всего срока годности Набора.
3
--- стр. 4 ---
6.5, Приготовление отмывочного раствора.
Содержимое флакона с концентратом отмывочного раствора перенести в мерный
цилиндр вместимостью 500 мл, добавить 440 мл дистиллированной воды и тщательно
перемешать.
В случае дробного использования Набора следует отобрать необходимое количество
концентрата отмывочного раствора и развести дистиллированной водой в 20 раз (1 объем
концентрата + 19 объемов дистиллированной воды).
Приготовленный отмывочный раствор допускается хранить при комнатной температуре
(+18-25 ‘ ^С) не более 2 сут. или при температуре +2-8 ”С не более 10 сут.
7. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА.
7.1. Развести исследуемые образцы сыворотки (плазмы) крови в 21 раз ИФА-Буфером
{например, 10,0 мкл сыворотки (плазмы) крови + 200 мкл ИФА-Буфера}.
Тщательно перемешать предразведенный образец, избегая вспенивания,
Предразведенные образцы сывороток (плазм) крови длительному хранению но
подлежат.
7.2. Внести в соответствующие лунки в дубликатах по 100 мкл положигельной
контрольной сыворотки, отрицательной контрольной сыворотки и калибровочной пробы.
В остальные лунки внести в дубликатах по 100 мкл предразведенных (см. п. 7.1.)
исследуемых образцов сыворотки (плазмы) крови.
Внесение образцов в лунки планшета необходимо произвести в течение 5-10 мин.
7.3. Аккуратно перемешать содержимое планшета круговыми движениями по
горизонтальной поверхности, заклеить планшет липкой лентой для заклеивания планшета и
инкубировать его в течение 30 мин при комнатной температуре (+18-25 ).
7.4. По окончании инкубации удалить содержимое лунок аспирацией (например, с
помощью водоструйного насоса) или декантированием и промыть лунки 3 раза. При каждой
промывке добавить во все лунки по 250 мкл отмывочного раствора, перемешать содержимое
планшета круговыми движениями по горизонтальной поверхности с последующей аспирацией
или декантированием. При каждом декантировании необходимо тщательно удалять остагки
жидкости из лунок постукиванием планшета в перевернутом положении по фильтровальной
бумаге.
7.5. Внести во все лунки планшета по 100 мкл конъюгата.
Внесение конъюгата в лунки планшета необходимо произвести в течение 5-10 мин.
7.6. Аккуратно перемешать содержимое планшета круговыми движениями по
горизонтальной поверхности, заклеить планшет липкой лентой для заклеивания планшета и
инкубировать его в течение 30 мин при комнатной температуре (+18-25 ).
7.7. По окончании инкубации удалить содержимое лунок аспирацией (нап^)
помощью водоструйного насоса) или декантированием и промыть лунки 5 раз. П
промывке добавить во все лунки по 250 мкл отмывочного раствора, перемешать