Набор реагентов для иммуноферментного определения аллерген-специфического IgE в сыворотке (плазме) крови "СПЕЦ-IgE-ИФА" по ТУ 9398-2001-18619450-2010 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 ---
УТВЕРЖДЕНА
Приказом Росздравнадзора
от_
№
200
'"^х«УТВЕРЖДАЮ»
ООО « Х Е М А »
Ю. с. Лебедин
10 января 2 0 1 0 г .
ИНСТРУКЦИЯ
по применению Набора реагентов для иммуноферментного определения
аллерген-специфического IgE в сыворотке (плазме) крови
«CHE4-IgE-H0A»
1. НАЗНАЧЕНИЕ.
1.1. Набор реагентов «CПEЦ-IgE-ИФA» предназначен для количественного
определения концентрации аллерген-специфического IgE в сыворотке (плазме) крови человека
методом твердофазного иммуноферментного анализа.
1.2. Специфические иммуноглобулины класса Е (slgE) участвуют в развитии аллергии 1
(немедленного) типа, симптомы которой (сенной насморк, конъюктивит, крапивница, астма,
анафилактический шок), проявляются, как правило, в течении 30 минут. Обнаружение аллерген-
специфического IgE в сыворотке (плазме) крови служит для диагностики аллергии I типа.
1.3. Диагностическая значимость определения.
Определение аллерген-специфического IgE в сыворотке (плазме) крови в клинической
практике используется обычно для клинической лабораторной диагностики аллергии I типа.
1.4. Область применения - клиническая лабораторная диагностика.
2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА.
2.1. Принцип работы Набора. Определение аллерген-специфического IgE основано на
использовании «сэндвич» - варианта твердофазного иммуноферментного анализа. Н а
внутренней поверхности лунок иммобилизованы мышиные моноклональные антитела к IgE
человека. В лунках планшета, при добавлении исследуемого образца, во время инкубации
одновременно происходит связывание IgE, содержащегося в исследуемом образце, с антителами
на твердой фазе. Образовавшийся комплекс выявляется с помощью биотинилированного
аллергена и конъюгата стрептавидина с пероксидазой хрена.
В результате образуется связанный с пластиком «сэндвич», содержащий пероксидазу. Во
время инкубации с раствором субстрата тетраметилбензидина (ТМБ) происходит окрашивание
содержимого лунок. Интенсивность окраски прямо пропорциональна концентрации аллерген-
специфического IgE в исследуемом образце. Концент]^йю ^ IgE в
Е0)^ц6)1 1(у ф ^икух^ЗАВИ СИ М О С ТИ оптическойисследуемых оор
плотности ОТВЕТСГВЕННОСНЮ ‘ Ц / . . ,
(О П 4 5 0) о т с о д е р ^51А ^ ^ л е р г е н - с п е ц и ф и ч1р с ^ г о к а л и б 1^ о ^ р ч н ы х п р о б а х .
Г енеральны й директор \ ~ '
/1Е6 Е Д И Н Ю р и й С теп а н о ви ^ ^ ^ Xv:iv\н Л/I
--- стр. 2 ---
2
2.2. Состав Набора:
- планшет 96-луночный стрипированный с иммобилизированными на внутренней поверхности
лунок мышиными моноклональными антителами к IgE человека; готов к использованию - 1 шт.;
- калибровочные пробы на основе фосфатного буфера, содержащие известные количества
аллерген-специфического IgE - 0; 0,35; 0,7; 3,5 и 17,5 МЕ/мл; концентрации аллерген-
специфического IgE в калибровочных пробах могут несколько отличаться от указанных величин,
точные величины указаны на этикетках пробирок (флаконов); готовы к использованию - 5 пробирок
или флаконов (по 0,8 мл каждая);
- конъюгат; готов к использованию - 1 флакон (] 1 мл);
- биотинилированные антитела к IgE, готовы к использованию - 1 флакон (1 1 мл);
- биотинилированные аллергены: D1 - клещ домашней пыли (флакон с синей крышкой), Е1 -
эпидермис кошки (флакон с красной крышкой), Е2 эпидермис собаки (флакон с желтой крышкой),
Gx - смесь пыльцы злаков (тимофеевка, ежа, овсяница, мятлик, лисохвост, пырей, рожь посевная)
(флакон с сиреневой крышкой), W56 смесь пыльцы сорных трав (полынь обыкновенная, полынь
горькая) (флакон с белой крышкой), Тх смесь пыльцы деревьев (береза, ольха, орешник) (флакон с
зеленой крышкой); готовы к использованию - 6 флаконов (по 5,0 мл каждый);
- контрольная сыворотка на основе сыворотки крови человека с известным содержанием
аллерген-специфического IgE, готова к использованию - 1 пробирка или флакон (0,8 мл);
- раствор субстрата тетраметилбензидина (ТМБ); готов к использованию - 1 флакон (1 1 мл);
- концентрат отмывочного раствора 21-кратный концентрат - 1 флакон (22 мл);
- стоп-реагент; готов к использованию - 1 флакон (11 мл);
- липкая лента с бумажной подложкой для заклеивания планшета; готова к использованию - 2
шт.;
- аналитический паспорт;
- Инструкция по применению Набора.
3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ.
3.1. Специфичность. Использование мышиных моноклональных антител к аллерген-
специфическому IgE человека позволяет достичь высокой специфичности анализа.
Аиалит Перекрестная реакция, %
IgG <0,1
IgM <0,1
IgA <0,1
3.2. Чувствительность. Минимальная достоверно определяемая Набором реагентов
«СПЕЦ- IgE -ИФА» концентрация аллерген-специфического IgE в сыворотке (плазме) крови не
превышает 0,1 МЕ/мл.
вариа1йгй^^льтат(^^ содержания
О Т 6 Е Т С Т Я £ I f н О ( , I F V l А \ ’ 'Л /аллерген-специфического в исследуемых ооршцах J Сь«Ррот№ крови с
использованием.
^ Б Е д и н Юр и й С т р п д ь' о в и ц
ie превыийет 8,0^ /о.,'|
XE/V1R / V /
--- стр. 3 ---
3.4. Точность. Данный аналитический параметр проверяется тестом на «открытие» -
соответствие измеренной концентрации аплерген-специфического IgE предписанной,
полученной путем смешивания равных объемов контрольной сыворотки и калибровочной
пробы 0,7 МЕ/мл.
Процент «открытия» составляет 90-110%,
3.5. Линейность. Зависимость концентрации аллерген-специфического IgE в образцах
сыворотки (плазмы) крови при разведении их сывороткой (плазмой) крови, не содержащей
аллерген-специфического IgE, имеет линейный характер в диапазоне концентраций 0 ,3 5 - 1 7 ,5
МЕ/мл и составляет - 10,0%.
3.6. Клиническая проверка. Нормальные значения.
PAST-Класс Нижний предел, МЕ/мл Верхний предел, МЕ/мл
О - неопределяемый <0,35
- низкии 0,35 0,7
2 - средний 0,7 3,5
3 - высокий 3,5 7,5
4 - очень высокий 17,5
В соответствии с требованиями GLP {Good Laboratory Practice, Хорошая Лабораторная
Практика) рекомендуется в каждой клинико-диагностической лаборатории при использовании
Набора реагентов «CnEIJ-IgE-HOA» уточнить значения концентрации аллерген-
специфического IgE, соответствующие нормальным у обследуемого контингента.
4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ.
4.1. Потенциальный риск применения Набора - класс 1 (ГОСТ Р 51609-2000).
4.2. Меры предосторожности-соблюдение «Правил устройства, техники безопасности,
производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в
лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учрелсдений системы
Министерства здравоохранения СССР» {Москт, 1 9 8 1 г.).
5. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ, НЕОБХОДИМЫЕ ПРИ РАБОТЕ С НАБОРОМ:
- фотометр вертикального сканирования, позволяющий измерять оптическую
плотность раствора в лунках при длине волны 4 5 0 нм;
- дозаторы со сменными наконечниками, позволяющие отбирать объемы м<идкости в
диапазоне 5 , 0 - 2 5 0 мкл;
- прибор для встряхивания планшет (шейкер), скорость 6 0 0 - 8 0 0 об/мин;
- цилиндр мерный вместимостью 5 0 0 мл;
- вода дистиллированная;
- перчатки резиновые или пластиковые;
- бумага фильтровальная.
ОБЧЕСГВО f o r n ^ < ^ , t , ,o к
О Т В Н Т С Т В £ Н Н О ( . ] Ь ( Г ;
I Р Н Р Р Л Л Ь Н Ь / Й Д И Р Е Н Т О Р
/1 ^ Б £д и н Ю р и й С т е п д н о в и^
--- стр. 4 ---
6. АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ.
ПОДГОТОВКА РЕАГЕНТОВ ДЛЯ АНАЛИЗА.
6.1. Перед проведением анализа компоненты Набора и исследуемые образцы сыворотки
(плазмы) крови следует выдержать при комнатной температуре (+ 1 8 -2 5 ® С ) не менее 30 мин.
6.2. Образцы сыворотки (плазмы) крови, используемые для анализа, допускается
хранить при температуре +4 не более 7 суток. Замораживание оттаивание образцов
сыворотки (плазмы) крови не допускается.
6.3. Для проведения анализа не следует использовать гемолизированные, мутные
образцы сыворотки (плазмы) крови, а также исследуемые образцы, содержащие азид натрия в
качестве консерванта.
6.4. Исключается использование для анализа образцов сыворотки (плазмы) крови
людей, получавших для диагностики или терапии препараты, в состав которых входят
мышиные антитела.
6.5. При использовании Набора реагентов «CПEЦ-IgE-ИФA» для проведения
нескольких независимых серий анализов следует иметь в виду, что для каждого независимого
определения необходимо построение нового калибровочного графика; кроме этого,
рекомендуется определение концентрации аллерген-специфического IgE в контрольной
сыворотке.
6.6. Приготовление планшета.
Вскрыть пакет с планшетом и установить на рамку необходимое количество стрипов.
Вскрытые стрипы следует использовать в течение 1 ч, длительному хранению не подлежат.
Оставшиеся неиспользованными стрипы, чтобы предотвратить воздействие на них влаги,
необходимо тщательно заклеить липкой лентой для заклеивания планшета и хранить в
упаковке при температуре +2-8 в течение всего срока годности Набора.
6.7. Приготовление отмывочного раствора.
Содержимое флакона с концентратом отмывочного раствора перенести в мерный
цилиндр вместимостью 500 мл, добавить 440 мл дистиллированной воды и тщательно
перемешать.
В случае дробного использования Набора следует отобрать необходимое количество
концентрата отмывочного раствора и развести дистиллированной водой в 21 раз (1 объем
концентрата + 20 объемов дистиллированной воды).
Приготовленный отмывочный раствор допускается хранить при комнатной температуре
(+18-25 ^С ) не более 2 сут. или при температуре +2-8 °С не более 10 сут.
7. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА.
7.1.Внести^ соответствующие лунки в дубликатах'#^^ЖГШ7г^1^кдой калибровочной
й чЕсгео с п г р д а д ,,^ н „ .ibH^^g , В О С гаЛ 'й н ы е лун ^ /«н есш думй)(£
4
пробы и контрольн^^0|р1у1^9|^^|^^,Y' ^сталвные лун^4^нест^?^^ ду^^л^атах по 50 мкл
исследуемых 0 браз1|0 в сывй]]^^?1А (^1лазмы) крови. I " ^ ,/ ] )
Внесение ^ 5 ^ о и ^ 0 ^ ^ теч^ н 1^ ,ё 5-10 мин.