Набор моноклональных и поликлональных антител для определения Т-лимфоцитов, B-лимфоцитов, Т-хелперов, Т-киллеров/супрессоров и NK-лимфоцитов человека методом иммунофлуоресценции (Статус) по ТУ 9398-331-13180653-02 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 --- К О Н Ш И нструкция по прим енению набора м оноклональны х и поликлональны х антител для определения Т -лим ф оцитов, В -лим ф оцитов, Т-хелперов, Т -киллеров/супрессоров и N K -лим ф оцитов человека методом иммунофлуоресценции. (“Статус”) Рекомендована к утверждению экспертной комиссией по наборам реагентов для иммуноферментного (неинфекционные ), радиоиммунологического и других видов иммунохимического анализа Комитета по новой медицинской технике Минздрава Российской Федерации (протокол No 1 0 от 1 6 декабря 1996 г.) 1 . Назначение 1.1. Набор реагентов “Статус” предназначен для определения процентных долей основных субпопуляций лимфоцитов человека (Т- лимфоцитов, B-лимфоцитов, Т-хелперов, Т-киллеров/супрессоров и NK-лимфоцитов) от общего количества лимфоцитов. Набор предназначен для применения только in vitro. 1.2. Набор реагентов “Статус” может быть использован при диагностики нарушений клеточного состава лимфоцитов крови человека при заболеваниях иммунологического, онкологического и гематологического профиля. 1.3. Время проведения анализа после приготовления растворов составляет не более 3 ч. 1.4. Набор расчитан на проведение анализа 100 неизвестных образцов. Составлен зам. директора ТОО “Сорбент” д.б.н. А.В.Филатовым --- стр. 2 --- 2 2. ПРИНЦИП МЕТОДА Метод основан на специфической реактивности испол| моноклональных антител с определенными субпопуляциями лимфоцитов. Процедура определения состоит из двух стадий. Первая с т^ реакция моноклональных антител с антигенами лимфоцитов. Вторая стадия - проявление реакции окрашиванием связавшихся антител Р(аЬ)2~фрагментами поликлональных антител к иммуноглобулину мыши, меченных изотиоцианатом флуоресцеина. Регистрацию результатов производят визуально под флуо ресцентным микроскопом или полуавтоматически с помощью проточного цитометра. 3 . АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА Специфичность анализа. Определение Т-лимфоцитов осуществляется по экспрессии антигена CD3, Т-хелперов - по антигену CD4, Т-киллеров/супрессоров - по антигену CD8, натуральных киллеров - по антигену CD 16, В-лим- фоцитов - по антигена CD72. 4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ 4.1. Все компоненты набора в используемых концентрациях являются нетоксичными. 4.2. Меры предосторожности - соблюдение “Правил устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения СССР”, Москва, 1981 г. 4.3. При работе с набором следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, так как образцы проб содержат производные крови человека, которые являются потенциально инфицированным материалом, способным длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вирус гепатита В или другой возбудитель вирусных инфекций. Кроме того, азид натрия влияет на слизистые оболочки. 5. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА 5.1. Состав набора. раствор моноклонального антитела к антигену CD3; раствор моноклонального антитела к антигену CD4; раствор моноклонального антитела к антигену CD8; раствор моноклонального антитела к антигену CD16; --- стр. 3 --- раствор моноклонального антитела к антигену С07 раствор Р(аЬ)2-фрагментов поликлональных баран антител к иммуноглобулину мыши, меченных изотиоцианатом флуоресцеина. 6. МАТЕРИАЛЫ И ОБОРУДОВАНИЕ - Яипетки полуавтоматические одноканальные со сменными наконечниками с переменным или фиксированным объемом, позволяюшие отбирать объемы жидкости 5, 50, 500 мкл; - центрифуга лабораторная, развивающая ускорение 300g; - встряхиватель планшетов; - микроскоп флуоресцентный или проточный цитометр; - холодильник бытовой; - 96-луночные круглодонные планшеты; - раствор Хенкса; - раствор Фиколл-Гипак с плотностью 1,077 г/см3; - физиологический раствор, забуференный фосфатами; - 10 % раствор желатина; - азид натрия; - параформальдегид; - колба коническая вместимостью 50 мл; - пробирки центрифужные вместимостью 10 мл ; - перчатки резиновые хирургические. 7 . ПОДГОТОВКА АНАЛИЗИРУЕМЫХ ОБРАЗЦОВ К ПРОВЕДЕНИЮ ОПРЕДЕЛЕНИЯ СУБПОПУЛЯЦИЙ ЛИМФОЦИТОВ ЧЕЛОВЕКА Соблюдение последовательности операций является обязательным. 7.1. Выделение лимфоцитов из периферической крови. 7.1.1. В центрифужную пробирку вместимостью 1 0 мл внести 5 мл гепаринизированной крови, 5 мл раствора Хенкса и перемешать пипетированием. - 7.1.2. В центрифужную пробирку вместимостью 1 0 мл внести 3 мл раствора Фиколл-Гипак, наслоить 7 мл разведенной крови. 7.1.3. Центрифугировать в течение 30 мин при 300 g при комнатной температуре (+18-25°С). 7.1.4. Собрать с интерфазы лимфоциты и 2 раза отмыть в растворе Хенкса, центрифугируя при 200 % при комнатной температуре. 7.2. Приготовление раствора проявляющих антител. 7.2.1. В колбу вместимостью 50 мл внести 47,5 мл физиологического раствора, забуференного фосфатами, 2,5 мл 10% раствора желатина, 50 мг азида натрия и тщательно перемешать. 7.2.2. В смесь (см. п. 7.2.1.) добавить 500 мкл Р(аЬ)2 -фрагментов поликлональных бараньих антител к иммуноглобулину мыши, меченных изотиоцианатом флуоресцеина, и тщательно перемешать.