--- стр. 1 ---
УТВЕРЖДЕНА
Приказом Роздравнадзора
от 20 г. №
ИНСТРУКЦИЯ
по применению набора реагентов для определения содержания мочевины
в сыворотке крови и моче
(Мочевина КТ ПАРМА)
1. Назначение.
Набор предназначен для количественного определения мочевины в сыворотке крови
и моче человека в клинико-диагностических и биохимических лабораториях и в научно-
исследовательской практике.
Набор рассчитан на проведение 100 определений при конечном расходе реагентов 2
мл на один анализ.
2. Характеристика набора.
2.1. Принцип действия.
Гидролиз мочевины уреазой приводит к образованию карбоната аммония и диоксида
углерода. Ионы аммония в присутствии нитропруссида натрия реагируют с салицилатом и
гипохлоритом с образованием индофенола, который окрашивает раствор в зеленый цвет.
Интенсивность окраски пропорциональна содержанию мочевины в пробе и определяется
фотометрически при длине волны 578 нм (560-580 нм.)
2.2. Состав набора:
Реагент 1. Салицилатный реактив: фосфатный буфер, 120 ммоль/л, pH 7,0; салицилат
натрия, 60 ммоль/л; нитропруссид натрия, 5 ммоль/л; ЭДТА, 1 ммоль/л; азид натрия.
0,095% - 1 флакон (100 мл).
Реагент 2. Гипохлоритный реактив: гидроксид натрия, 300 ммоль/л; гипохлорит на
трия, 10 ммоль/л - 1 флакон (100 мл).
Реагент 3. Уреаза, 1000 ед/л - 1 флакон (1мл).
Калибратор: Раствор мочевины, 8,33 ммоль/л - 1 флакон (3 мл).
3. Аналитические и диагностические характеристики набора.
Чувствительность - не более 1 ммоль/л.
Линейность. Набор обеспечивает линейность при определении содержания мочеви
ны в диапазоне от 1,5 до 67 ммоль/л с отклонением от линейности не более 5%.
Коэффициент вариации - не более 5%.
Качество набора может проверяться по отечественным или зарубежным контроль
ным сывороткам, аттестованным данным методом.
Инструкция составлена исполнительным директором ООО «Мед.Гарант»
П.С.Смирновым
--- стр. 2 ---
2
Содержание мочевины в норме составляет: в сыворотке крови - 2,5-8,3 ммоль/л; в
моче - 330-580 ммоль/сут).
4. Меры предосторожности при работе с набором.
Меры предосторожности при работе с набором - соблюдение «Правил устройства,
техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и
личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно- эпидемиоло
гических учреждений системы Министерства здравоохранения СССР»(Москва, 1981 г.).
При работе с набором следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые
перчатки, так как образцы крови человека следует рассматривать как потенциально инфи
цированные, способные длительное время сохранять и передавать ВИЧ, вирус гепатита
или любой другой возбудитель вирусной инфекции.
5. Оборудование, материалы и реагенты:
- спектрофотометр, длина волны 578 нм, или фотоэлектроколориметр, длина волны
560-580 нм, или биохимический анализатор открытого типа, кювета с длиной оптического
пути 10 мм;
- пипетки, позволяющие отбирать объемы жидкостей 0,01 и 1,0 мл;
- секундомер;
- пробирки вместимостью 5-10 мл;
- колбы мерные вместимостью 500 мл и 1000 мл;
- вода дистиллированная;
- перчатки резиновые или пластиковые.
6. Анализируемые пробы.
Негемолизированная сыворотка крови, моча.
Мочу перед анализом развести в 100 раз, результат умножить на 100.
7. Проведение анализа.
7.1. Приготовление рабочего реагента.
Во флакон с реагентом 1 количественно перенести содержимое флакона с реагентом
3 и тщательно перемешать, избегая пенообразования. Готовый рабочий реагент стабилен в
течение не менее двух недель при температуре 2-8°С в плотно укупоренном флаконе в
темноте.
7.2. Определение содержания мочевины в сыворотке крови и моче.
Внести в пробирки по 1,0 мл рабочего реагента, добавить в пробирки для опытных
проб по 0,01 мл анализируемых образцов сыворотки крови или мочи (мочу перед анали
зом развести в 100 раз, результат умножить на 100 ), в пробирку для калибровочной пробы
- 0,01 мл калибратора, в пробирку для контрольной (холостой) пробы - 0,01 мл дистилли
рованной воды. Пробы тщательно перемешать, инкубировать в течение 5 минут при тем
пературе 37°С или в течение 10 минут при комнатной температуре (18-25°С) и добавить
во все пробы по 1 мл реагента 2. Пробы тщательно перемешать, инкубировать в течение 5
минут при температуре 37°С или в течение 10 минут при комнатной температуре (18-
25°С).
8. Регистрация результатов.
После инкубации измерить оптическую плотность опытной пробы (Ео м ) и калибро
вочной пробы (Ек а л ) относительно контрольной (холостой) пробы при длине волны 578
(560-580) нм в кювете с длиной оптического пути 10 мм.
--- стр. 3 ---
9. Учет результатов реакции.
Концентрацию мочевины в анализируемом образце рассчитать по формуле:
с = — х8,33
Е кал
где: Е0„- оптическая плотность опытной пробы, ед. опт. плотн.;
Екал - оптическая плотность калибровочной пробы, ед. опт. плотн.;
8,33 - концентрация мочевины в калибраторе, ммоль/л.
10. Условия хранения и эксплуатации набора.
Хранение набора можно производить при температуре 2-8° С в упаковке предпри
ятия-изготовителя в течение всего срока годности (12 месяцев). Допускается хранение на
бора при температуре 25° С не более 10 дней.
Рабочий реагент можно хранить при температуре 2-8°С в плотно укупоренном фла
коне из темного стекла, не более 3 месяцев.
Калибратор после вскрытия флакона можно хранить при температуре 2-8° С в тем
ном месте не более 1 месяца.
Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение инструкции
по применению набора.
По вопросам, касающимся качества набора Мочевина-Парма следует обращаться в:
ООО «Мед.Гарант» по адресу 614000, г. Пермь, ул. Сибирская, д. 9, оф. 420.
Исполнительный директор / П.С.Смирнов
ООО Мед.Гарант»
В.В.
$ 4 ? * / ' ■России»« N t
гКйи^-'медкцкисш академия,
последипломного /
З Д р а Д О » « Оедерал^и
g агентства по
: £ % \ здравоогранен««)
р.?-., < ъ \ и социальному А
«СОГЛАСОВАНО»
зав. кафедрой клин и чес
лабораторной диагнос
ГОУ ДНО «PMAI10 Pioe
Подпись
д.м.н., профессор Долгов
С С & Х Я 20 10 г.
удостоверяю: специалист по
кадровой работе Г О У ДПО
Р М А П О /о сзд р а ва
ПОДПИСЬ,