Набор реагентов для иммуноферментного определения С-реактивного белка в сыворотке (плазме) крови "СРБ-ИФА" по ТУ 9398-250-18619450-2010 — инструкция и характеристики
Открытые закупки, где изделие проходит ТЗ
Сейчас открытых закупок, где изделие полностью проходит ТЗ, нет; список обновляется каждый день.
Построчная сверка ТЗ с характеристиками этого изделия и все закупки под ваши товары — в кабинете, 7 дней бесплатно.
Попробовать бесплатно
Текст инструкции: технические характеристики
--- стр. 1 --- № УТВЕРЖДЕНА Приказом Росздравнадзора от 200 г. «УТВЕРЖДАЮ» ¡тор ООО «ХЕМА» _ Ю. С. Лебедин 10 января 2010 г. ИНСТРУКЦИЯ по применению Набора реагентов для иммуноферментного определения С-реактивного белка в сыворотке (плазме) крови «СРБ-ИФА» 1. НАЗНАЧЕНИЕ. 1.1. Набор реагентов «СРБ-ИФА» предназначен для количественного определения концентрации С-реактивного белка в сыворотке (плазме) крови человека методом твердофазного иммуноферментного анализа. 1.2. С-реактивный белок (СРБ) - пентамерный белок (пентраксин) с молекулярной массой около 100 кДа. СРБ обладает высоким сродством ко многим внутренним антигенам - фосфоэтаноламину, фосфорилхолину, гистонам, фибронектину, ламинину и поликатионовым соединениям. СРБ способен связывать полисахариды клеточных стенок стрептококков и стафилококков, принимает участие в очистке плазмы от остатков апоптотически и некротически погибших клеток, усиливая их фагоцитоз. СРБ способен активировать классический каскад комплемента и стимулировать фагоцитарную активность макрофагов. Резкое (до 1000 раз) увеличение концентрации СРБ в циркуляции является высокочувствительным, но не специфическим маркером острого воспалительного процесса, индуцированного интерлейкином 6. В последние годы выяснилось, что длительно повышенный плазменный уровень СРБ (3,0-10,0 мкг/мл) сопряжен с риском развития ишемической болезни сердца. Повышенный базальный уровень СРБ плазмы крови регистрируется у женщин в менопаузе, находящихся на заместительной гормональной терапии, а также у курильщиков. 1.3. Диагностическая значимость определения. Определение СРБ в сыворотке (плазме) крови в клинической практике используется обычно для клинической лабораторной диагностики патологий воспалительных процессов в организме. 1.4. Область применения - клиническая лабораторная диагностика. 2.1. Принцип работы Набора. Определение СРБ основано на использовании «сэндвич» - варианта твердофазного иммуноферментного анализа. На внутренней поверхности лунок иммобилизованы мышиные моноклональные антитела к СРБ человека. В лунках планшета, при добавлении исследуемого образца, во время инкубации одновременно происходит связывание 2. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА. --- стр. 2 --- СРБ, содержащегося в исследуемом образце, с антителами на твердой фазе. Образовавшийся комплекс выявляется с помощью конъюгата мышиных моноклональных антител к СРБ с пероксидазой хрена. В результате образуется связанный с пластиком «сэндвич», содержащий пероксидазу. Во время инкубации с раствором субстрата тетраметилбензидина (ТМБ) происходит окрашивание содержимого лунок. Интенсивность окраски прямо пропорциональна концентрации СРБ в исследуемом образце. Концентрацию СРБ в исследуемых образцах определяют по калибровочному графику зависимости оптической плотности (ОП4 5 0 ) от содержания СРБ в калибровочных пробах. 2.2. Состав Набора: планшет 96-луночный стрипированный с иммобилизированными на внутренней поверхности лунок мышиными моноклональными антителами к СРБ человека; готов к использованию - 1 шт.; калибровочные пробы на основе трис-буфера, содержащие известные количества СРБ - 0; 0,25; 1; 2,5; 10 и 25 мг/л; концентрации СРБ в калибровочных пробах могут несколько отличаться от указанных величин, точные величины указаны на этикетках пробирок (флаконов); готовы к использованию - 6 пробирок или флаконов (по 0,5 мл каждая); конъюгат; готов к использованию - 1 флакон (11 мл); ИФА-Буфер красный, готов к использованию (11 мл) ИФА-Буфер синий, готов к использованию (50 мл) контрольная сыворотка на основе сыворотки крови человека с известным содержинием С- реактивного белка, готова к использованию (1 1мл) раствор субстрата тетраметилбензидина (ТМБ); готов к использованию - 1 флакон (11 мл); концентрат отмывочного раствора 21 -кратный концентрат - 1 флакон (22 мл); стоп-реагент; готов к использованию - 1 флакон (11 мл); липкая лента с бумажной подложкой для заклеивания планшета; готова к использованию - 2 шт.; аналитический паспорт; Инструкция по применению Набора. 3. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ. 3.1. Специфичность. Использование мышиных моноклональных антител к СРБ человека позволяет достичь высокой специфичности анализа. 3.2. Чувствительность. Минимальная достоверно определяемая Набором реагентов «СРБ-ИФА» концентрация СРБ в сыворотке (плазме) крови не п р е в ь п д д ^ О ^ ,^ л - 3.3. Воспроизводи 1У ^^^^^ф ^и|уиент вариации резульх^Ш^^пр^д^^^^содержания СРБ в исследуемых образцахО^ьВйэ^ОТв^^ЗО^3^ ^ крови с исшд^зовагш^й Набора реагентов 2 «СРБ-ИФА» не превышает 8,0%, с п . п. , - н тГ Н Е Р А Л Ь Ш Д И Р Е К Т О Р // е б е д и н Ю р и й С т е п а н о в и ч --- стр. 3 --- 3.4. Точность. Данный аналитический параметр проверяется тестом на «открытие» СРБ - соответствие измеренной концентрации СРБ предписанной, полученной путем смешивания равных объемов контрольной сыворотки и калибровочной пробы 1 мг/л. Процент «открытия» составляет 90-110%. 3.5. Линейность. Зависимость концентрации СРБ в образцах сыворотки (плазмы) крови при разведении их сывороткой (плазмой) крови, не содержащей СРБ, имеет линейный характер в диапазоне концентраций 0,25-25 мг/л и составляет1 10,0%. 3.6. Клиническая проверка. Нормальные значения. 3 Исследуемая группа Нижний предел, мг/л Верхний предел, мг/л Здоровые доноры - 5,0 В соответствии с требованиями GLP ( Good Laboratory Practice , Хорошая Лабораторная Практика) рекомендуется в каждой клинико-диагностической лаборатории при использовании Набора реагентов «СРБ-ИФА» уточнить значения концентрации СРБ, соответствующие нормальным у обследуемого контингента. 4. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ. 4.1. Потенциальный риск применения Набора - класс 1 (ГОСТ Р 51609-2000). 4.2. Меры предосторожности-соблюдение «Правил устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы Министерства здравоохранения СССР» (Москва, 1981 г.). 5. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ, НЕОБХОДИМЫЕ ПРИ РАБОТЕ С НАБОРОМ: - фотометр вертикального сканирования, позволяющий измерять оптическую плотность раствора в лунках при длине волны 450 нм; - дозаторы со сменными наконечниками, позволяющие отбирать объемы жидкости в диапазоне 5,0-250 мкл; - термостат, поддерживающий температуру +37±0,1 °С; - цилиндр мерный вместимостью 500 мл; - вода дистиллированная; - перчатки резиновые или пластиковые; - бумага фильтровальная. 6. АНАЛИЗИРУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ. ПОДГОТОВКА РЕАГЕНТОВ ДЛЯ АНАЛИЗА. 6.1. Перед проведением анализа компоненты Набора и исследуемые образцы сыворотки (плазмы) крови следует выдержать при комнатной т е м п е р ат у р е^ ^ ^ ^ ^ Ж ^ н е менее 30 мин. / У Ж У '--------- 6.2. Образцы £nfl?3W)|* /Р т акащ ва, допускается хранить при те м п е р ату р е^ ^ -^ °^ й ^ ^ )9 |£ ^ ч или npn/|if^inepa^y}i^ ушнус^ЭД °С не более 2 н е д е л ь . „ Г е н е р а л ь н ы й д и р е к т о р " Е Б Ед и н Ю р и й С т е п а н о в и' --- стр. 4 --- 6.3. Для проведения анализа не следует использовать гемолизированные, мутные образцы сыворотки (плазмы) крови, а также исследуемые образцы, содержащие азид натрия в качестве консерванта. 6.4. Исключается использование для анализа образцов сыворотки (плазмы) крови людей, получавших для диагностики или терапии препараты, в состав которых входят мышиные антитела. 6.5. При использовании Набора реагентов «СРБ-ИФА» для проведения нескольких независимых серий анализов следует иметь в виду, что для каждого независимого определения необходимо построение нового калибровочного графика; кроме этого, рекомендуется определение концентрации СРБ в контрольной сыворотке. 6.6. Приготовление планшета. Вскрыть пакет с планшетом и установить на рамку необходимое количество стрипов. Вскрытые стрипы следует использовать в течение 1 ч, длительному хранению не подлежат. Оставшиеся неиспользованными стрипы, чтобы предотвратить воздействие на них влаги, необходимо тщательно заклеить липкой лентой для заклеивания планшета и хранить в упаковке при температуре +2-8 и С в течение всего срока годности Набора. 6.7. Приготовление отмывочного раствора. Содержимое флакона с концентратом отмывочного раствора перенести в мерный цилиндр вместимостью 500 мл, добавить 440 мл дистиллированной воды и тщательно перемешать. В случае дробного использования Набора следует отобрать необходимое количество концентрата отмывочного раствора и развести дистиллированной водой в 21 раз (1 объем концентрата + 20 объемов дистиллированной воды). Приготовленный отмывочный раствор допускается хранить при комнатной температуре (+18-25 °С) не более 2 сут. или при температуре +2-8 °С не более 10 сут. 7. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА. 7.1. Разбавить образцы сыворотки (плазмы) крови в 101 раз, используя ИФА-Буфер синий. 7.2. Если предполагаемая концентрация СРБ в исследуемом образце превышает 25 мг/л, его следует дополнительно развести, используя ИФА-Буфер синий. 7.3. Внести во все лунки планшета по 100 мкл ИФА-Буфера красного. 7.4. Внести в соответствующие лунки в дубликатах по 25 мкл каждой калибровочной пробы и контрольной сыворотки. В остальные лунки внести в дубликатах по 25 мкл разбавленных исследуемых образцов сыворотки (плазмы) крови. 4 Внесение образцов в лунки планшета необходим^ 7.5. АкШ ^Мй Я (ЬфЭДеВДатрь и р}р^ржимое ■ 0ТВ ЕТСТИ ш е 'горизонтальной поверхносэд^/^ о (в Е тё 6 ё АЛЬ В 6 1 № и б б е д и н Ю р и й С т е п а н о в и ч планшет ли инкубировать е||о^Ь^Ь^1А1Щ)80(К1иД1ИПВДтЩпеР течение 5-10 мин. движениями вания планшета